Determinación de la preferencia de temperatura de los mosquitos y otros ectotermos

Esta configuración de aparatos de dos cámaras se utiliza para estudiar la preferencia de temperatura de los insectos y se puede modificar para estudiar otras situaciones de preferencia de elección binaria, como la luz frente a la oscuridad o la humedad alta frente a la baja. Las principales ventajas de esta técnica son la configuración simple, el área espaciosa que permite a los insectos exhibir su naturaleza voladora al elegir su temperatura preferida y la fácil puntuación sin equipo externo. La parte más difícil del protocolo es eliminar la brecha de acrílico después del experimento.

Esto se debe a que hay una alta probabilidad de que los insectos escapen. Por lo tanto, es crucial para nosotros utilizar el dióxido de carbono para anestesiar a los insectos. Demostrando el procedimiento estarán Kinga Stobierska y Lorna Glenn, ambas estudiantes de maestría de mi laboratorio.

Para comenzar, prepare 2 jaulas para mosquitos vacías con aberturas de manga de 12 centímetros y asegúrese de que no haya agujeros u otros daños. Luego, usando un aspirador mecánico, transfiera 30 insectos a una jaula separada para facilitar el manejo y la eliminación después del experimento. Ajuste las incubadoras a las temperaturas deseadas y permita que se calienten y se estabilicen.

Se tarda aproximadamente 30 minutos en alcanzar una temperatura en el rango de 25 a 30 grados centígrados. Luego coloque una jaula de mosquitos vacía en una incubadora y alimente las mangas de la jaula a través del orificio frontal de la incubadora. Confirme la temperatura del aire interior de la incubadora con una sonda de temperatura.

A continuación, coloque una solapa que se pueda abrir preparada con cinta adhesiva sobre el orificio del tubo de acrílico. Enrolle la manga que sobresale a través del orificio frente a la primera incubadora y asegúrela sobre un extremo del tubo de acrílico con una banda elástica. Luego coloque las incubadoras una frente a la otra e inserte un extremo del tubo de acrílico en el manguito del segundo orificio de la incubadora.

Asegúrese de que el diámetro del tubo de acrílico sea mayor que el orificio en la parte frontal de las incubadoras para que cubra completamente el agujero. Asegúrese de que el tubo de acrílico no esté suelto y colgando entre las incubadoras. Si es así, tire de las mangas de la jaula para eliminar el exceso de material entre la jaula y la banda elástica.

Para poner a los mosquitos dentro, abra la solapa de cinta adhesiva. Coloque un embudo en el orificio del tubo de acrílico y luego vacíe los insectos en el tubo a través del embudo. Después de vaciar los insectos, retire el embudo y cubra el orificio del tubo con una solapa de cinta adhesiva.

Dejar actuar durante 30 minutos para que los insectos seleccionen la cámara preferida. Al final del tiempo de asentamiento, observe visualmente y anote el número de insectos que se ven en el puente del tubo de acrílico. Luego toque o sople todos los insectos en el puente a cualquier lado de la incubadora o liberando dióxido de carbono en el puente.

A continuación, pellizque y cierre las mangas del tubo de acrílico en ambos lados sujetándolas rápidamente con un nudo apretado. Luego retire las jaulas de ambas incubadoras y cuente visualmente los insectos en cada jaula. Asegúrese de que los números de ambas incubadoras y el puente sumen 30.

En el presente estudio, la preferencia de temperatura de los mosquitos y moscas de la fruta se determinó utilizando el modelo de dos cámaras. Los resultados no mostraron diferencias significativas cuando ambas jaulas se mantuvieron a 27 grados centígrados, lo que indica la capacidad de los mosquitos para elegir libremente entre jaulas que exhiben sus comportamientos naturales. Por el contrario, cuando las dos cámaras se colocaron a diferentes temperaturas, los mosquitos seleccionaron consistentemente la temperatura óptima de 27 grados centígrados sobre 30 grados centígrados.

Del mismo modo, cuando se probó la configuración con Drosophila Melanogaster, otro modelo de ectodermo, las moscas de la fruta evitaron la cámara más cálida y prefirieron su temperatura óptima de 25 grados centígrados. Asegúrese de que la configuración esté completamente sellada, sin espacios ocultos y sin malla que interrumpa el área de vuelo para que los insectos puedan elegir libremente entre las 2 cámaras.