En la escuela de posgrado, me interesé mucho en la tolerancia al calor, especialmente en sus componentes conductuales, y desde entonces he estado muy interesado en la termorregulación conductual y los mecanismos que emplean los endotermos para regular su temperatura corporal. La tolerancia al calor se ha estudiado durante décadas con la observación de organismos por parte de los investigadores. Más recientemente, ha habido un advenimiento de métodos automatizados y basados en video para medir aspectos de la tolerancia al calor.
Y creo que será realmente genial ver a dónde nos llevarán estas nuevas tecnologías en términos de explorar algunas de las complejidades del comportamiento y la actividad en relación con la regulación térmica. Uno de los desafíos en este campo es que, aunque ahora tenemos una forma de monitorear y recopilar grandes cantidades de datos de actividad, la interpretación de lo que significan los datos de actividad en términos de su relevancia biológica para aplicaciones de la vida real sigue siendo una pregunta que necesita más investigación. Una de las ventajas de contar con el programa automatizado es que se puede tratar con grandes conjuntos de datos de una forma mucho más accesible.
Anteriormente, uno tenía que revisar manualmente grandes archivos de Excel para analizar e interpretar los resultados. El programa automatizado hace que el análisis de datos sea mucho más fácil. Para comenzar, cargue las moscas en los tubos del monitor DAM2 y cubra ambos extremos de los tubos con algodón.
Aspire moscas individuales de los viales de retención a los tubos del monitor. Inserte los tubos de ensayo en los monitores de actividad y documente cuidadosamente los números de ranura correspondientes a cada grupo. Cargue los monitores en la incubadora de ensayos.
Inicie el software de adquisición y asegúrese de que las preferencias estén establecidas antes de comenzar la adquisición de datos para el experimento. Visualice los datos del monitor y el número de índice en tiempo real a través de la interfaz DAMSystem. Establezca la temperatura nociva en la incubadora después de que haya pasado el número definido de índices, marcando el final del período de aclimatación.
Supervise los recuentos de actividad en tiempo real utilizando la pantalla DAMSystem en el software de adquisición. Como alternativa, puede ser más fácil supervisar los datos de actividad directamente en los archivos DAMSystem. Copie los archivos de texto y abra las copias en lugar de los originales para evitar interferencias con la grabación de datos en vivo.
Después de no observar ningún movimiento en ninguna de las moscas durante varios minutos, detenga el software de adquisición. Una vez que se hayan adquirido los datos, escanee los archivos de texto en busca de errores utilizando el software al que se hace referencia. En función del intervalo de aclimatación implementado antes de la inducción de la temperatura nociva, seleccione puntos de inicio y parada específicos para agrupar los datos de actividad antes de guardar el archivo escaneado.
Ahora, abre la página web de HoTDAM! software de análisis y haga clic en Archivo y cargar datos del monitor para importar los archivos de datos del monitor escaneados. Agregue designaciones de grupo para indicar los grupos de tratamiento correspondientes a cada celda dentro de los monitores DAM2.
Haga clic en Iniciar definición de varios grupos para abrir el cuadro de diálogo para agregar una designación de grupo. A continuación, haga clic en las celdas respectivas para aplicar la designación de grupo y haga clic en Detener designación de varios grupos. Para exportar el TKD de cada mosca como un archivo CSV, haga clic en Archivo, Exportar datos de derribo y Exportar todos los monitores o Exportar monitores seleccionados.
La salida organizará el TKD para cada mosca por designación de grupo. Ahora haga clic en Archivo, Exportar datos de actividad y Exportar todos los monitores o Exportar monitores seleccionados para exportar los datos de actividad de cada mosca como un archivo CSV, conservando solo la marca de tiempo y los datos de recuento para simplificar el archivo de datos y asignando etiquetas de grupo designadas para cada mosca. Las hembras W1118 endurecidas mostraron una probabilidad significativamente menor de derribo durante el estrés por calor en comparación con las hembras de control.
Si bien no se observaron diferencias significativas en los machos, los machos TRPA1 endurecidos exhibieron una probabilidad significativamente mayor de derribo en comparación con los machos de control durante el estrés por calor, mientras que no se encontraron diferencias significativas entre las hembras endurecidas y las de control. La actividad promedio durante la tolerancia al calor varió claramente entre los grupos endurecidos y de control para las poblaciones W1118, mostrando un pico en los recuentos de actividad alrededor de los 30 minutos tanto para machos como para hembras. La actividad de las acciones de TRPA1 mostró un fuerte aumento en la actividad inicial, seguido de un rápido descenso para todos los grupos.
