Una técnica modificada para la constricción aórtica transversa en ratones

Este protocolo proporciona un trauma quirúrgico rápido limitado, sin complicaciones y masas de bajo costo para realizar la cirugía TAC. Este modelo aborda el arco aórtico utilizando un retractor de fabricación propia y no necesita incrustaciones microquirúrgicas o ventilación mecánica, lo que limita significativamente el trauma quirúrgico. Para comenzar, prepare una jeringa de cinco mililitros.

Luego haga que la aguja se vuelva roma pellizcando su punta con un soporte para agujas. Prepare una aguja de calibre 27 embotada con un soporte para agujas y doble su punta a 90 grados. Use un alambre de hierro obtenido comercialmente y enrede alrededor de la aguja.

Forma una pequeña trampa o bucle en la punta roma de la aguja. Esterilice todas las herramientas quirúrgicas antes de la cirugía en autoclave. Confirme la profundidad de la anestesia con un pellizco en el dedo del pie para evitar la sequedad mientras está bajo anestesia.

Aplique ungüento oftálmico en ambos ojos. Luego coloque el mouse en posición supina sobre una almohadilla térmica cubierta con una cortina estéril con su cabeza apuntando hacia el operador. Fija sus extremidades con cinta adhesiva e incisivos con una sutura 4-0.

Ahora, inserte una sonda rectal para controlar la temperatura corporal durante la operación. Usando tijeras oftálmicas esterilizadas, haga un agujero en una cortina estéril desechable nueva. Coloque la cortina estéril sobre el ratón y asegúrese de que el campo de operación sin pelo sea visible a través del orificio.

Después de hacer una incisión separar la piel y la fascia superficial y exponer la tráquea y el esternón proximal. Luego, haga cuidadosamente una incisión longitudinal de tres a cuatro milímetros en la línea media del esternón desde el borde superior hasta el ángulo esternal y levante suavemente el esternón con fórceps. Usando pinzas rectas, disecciona sin rodeos el vaso objetivo y los tejidos a su alrededor.

Ahora, sostenga el retractor previamente hecho por él mismo con una trampa de alambre en la mano derecha. Pase cuidadosamente la trampa del retractor debajo de la aorta entre la arteria carótida común izquierda y el origen de la arteria denominada derecha. Pase el retractor a la mano izquierda.

Sostenga las pinzas microscópicas en la mano derecha y pase una sutura de seda 7-0 a través del lazo de la trampa al final. Saque el retractor. Coloque una aguja de calibre 27 paralela a la aorta y ate la sutura alrededor de la aguja y la aorta.

Luego sostenga la aguja calibre 27 con fórceps oftálmicos y el nudo atado a la aguja de calibre 27 y la aorta con otro fórceps. Tire rápida pero suavemente de la aguja de calibre 27 de la ligadura. Suturar la piel con sutura de monofilamento sintético 4-0 en un patrón de sutura interrumpida.

Coloque el mouse en una almohadilla caliente y espere a que reviva. Generalmente, el ratón revive en unos 60 minutos. Después de cuatro semanas de cirugía.

La fracción de eyección y el acortamiento fraccional se redujeron significativamente en ratones con constricción aórtica transversal en comparación con ratones simulados. Sin embargo, la masa ventricular izquierda y el diámetro interno del ventrículo izquierdo estaban significativamente elevados en los ratones de constricción aórtica transversa. El paso más importante en esta partícula es pasar la sutura debajo del arco aórtico.

Todas las películas deben ser suaves para reducir la tracción innecesaria en la arteria. Después de este procedimiento, los investigadores pueden aplicar tratamiento médico al modelo animal para investigar posibles objetivos terapéuticos para pacientes con hipertrofia cardiovascular o insuficiencia cardíaca.