Los modelos anuales están emergiendo como una herramienta importante para comprender los mecanismos patológicos subyacentes a la estenosis de la válvula aórtica debido a la falta de acceso a fuentes confiables de válvulas aórticas humanas enfermas. Los modelos tradicionales de estenosis de la válvula aórtica en conejos requieren suplementos dietéticos a largo plazo y manipulación genética para inducir una estenosis significativa en la válvula aórtica, lo que limita su uso en estudios experimentales. Esta técnica describe un nuevo procedimiento para inducir la estenosis de la válvula aórtica en conejos a través de una lesión directa del globo en la válvula aórtica, que puede imitar con precisión la condición de un humano con estenosis aórtica.
Eun-Hye Park, Jin-Moo Kim y Eunmi Lee, especialistas en investigación de mi centro de regulación, demostrarán el procedimiento. Comience a preparar el juego de catéteres con balón de dilatación conectando el dispositivo de desinflado lleno con la mezcla uno a uno de solución salina y medio de contraste disponible comercialmente a la parte Luer lock del catéter con balón. Después de llenar el balón con una solución de inflado, retire el aire del catéter del balón.
Comience el procedimiento quirúrgico insertando un catéter intravenoso o intravenoso de calibre 24 en la vena auricular marginal del conejo anestesiado. Conectar un equipo de infusión con 100 unidades por kilogramo de solución salina heparinizada con heparina. A continuación, conecte al conejo con un monitor veterinario multiparamétrico para controlar continuamente los signos vitales, como la señal de saturación de oxígeno o la temperatura y la presión arterial de SpO2.
Después de colocar al conejo en posición supina sobre una mesa de operaciones equipada con una fluoroscopia de arco en C, retire el pelo de la zona ventral del cuello con un cortapelos de animales. Esterilizar el área de la incisión con yodo y cubrir al conejo con toallas quirúrgicas. Para posicionar el corazón del conejo, encienda el arco en C y seleccione el modo fluoroscópico para las imágenes cardíacas.
Ajusta la posición del conejo para asegurarte de que el corazón esté en el centro del campo de imágenes. Una vez ajustada la posición, haz una incisión longitudinal de aproximadamente tres centímetros en la piel del cuello y utiliza unas tijeras quirúrgicas para cortar la fascia y el tejido graso. Luego, separe cuidadosamente los músculos hasta que queden expuestos aproximadamente de 3 a 3.5 centímetros de la arteria carótida común izquierda.
Ligue el LCCA con una sutura de seda 3-0 en la parte superior y al final del LCCA expuesto para detener el flujo sanguíneo. Inserte un catéter intravenoso de calibre 22 en el LCCA. A continuación, introduzca una guía de 0,016 pulgadas en el ventrículo izquierdo a través del catéter IV, asegurándose de que la punta del catéter esté correctamente colocada en el campo de imágenes del arco en C.
A continuación, retire el catéter intravenoso, dejando el alambre guía antes de colocar una vaina de 4 French sobre el alambre guía en el LCCA para introducir el catéter con balón. Inserte con cuidado el catéter con balón de ocho milímetros sobre el alambre guía en la válvula aórtica bajo guía fluoroscópica del arco en C. Coloque la punta del catéter con balón aproximadamente de uno a dos centímetros distal a la válvula aórtica e infle el balón purgando la solución de inflado con un inflador de presión a seis atmósferas.
A continuación, haga avanzar el balón hacia el ventrículo izquierdo o el ápice del VI y tire de él hacia la salida del VI. Repita este procedimiento cinco veces antes de desinflar el globo. Retire el catéter con balón y el alambre guía, luego retire lentamente la vaina del LCCA e inmediatamente ate el LCCA con la sutura en el camino hacia la válvula aórtica.
Limpie el área de la incisión con solución salina para eliminar los coágulos de sangre. Inspeccione el sitio puncionado en busca de sangrado arterial antes de cerrar el músculo y la piel con una sutura no absorbible 3-0. Una vez hecho esto, esteriliza la herida con yodo.
Después de la cirugía, retire los parches y clips de monitoreo y mantenga al conejo en una incubadora de cuidados intensivos. Después de ocho semanas de la lesión con balón, coloque al conejo anestesiado en una mesa de eco en posición supina. Aplique gel transductor de ultrasonido en el pecho después de afeitar el área del pecho.
Ajuste el transductor para obtener la vista periesternal del eje largo y la vista periesternales del eje corto de la válvula aórtica. Utilice el modo de imágenes para registrar imágenes de la válvula aórtica y guardar las imágenes para su posterior análisis. La evaluación del cambio estructural en la válvula aórtica reveló que ocho semanas después de la lesión de la válvula aórtica, las cúspides se engrosaron y el movimiento se restringió en los conejos lesionados alimentados con la dieta alta en colesterol y vitamina D2 en comparación con los conejos de control o de tipo salvaje, y los conejos alimentados con la dieta alta en colesterol y vitamina D2 sin lesión valvular.
Los conejos fueron sacrificados y los corazones fueron extirpados ocho semanas después de la lesión para el análisis histológico de la válvula aórtica. La válvula aórtica teñida con tricrómico de Masson mostró un aumento del grosor de las cúspides de la válvula aórtica en el grupo lesionado en comparación con el control en los grupos de colesterol alto e inducidos por la dieta con vitamina D2. Se realizó tinción con rojo de alizarina y tinción de Von Kossa para comparar el grado de depósitos valvulares de calcio indicados depósitos de calcio insignificantes en las valvas valvulares en el grupo inducido por colesterol alto y vitamina D2.
Por el contrario, se observaron depósitos calcificados significativos en el grupo lesionado por balón. La técnica exitosa para inducir la estenosis de la válvula ártica, en el modelo de conejo, se demuestra aquí con una explicación paso a paso de una lesión directa con balón en la válvula aórtica. Este modelo simple y reproducible ofrece un enfoque prometedor para estudiar el inicio y la progresión de la estenosis de la válvula aórtica, y proporciona una herramienta valiosa para investigar los mecanismos patológicos subyacentes de la estenosis de la válvula aórtica.
