El objetivo general de este artículo es reportar el protocolo aplicado para inducir periimplantitis en ratones por ligadura y observar su efectividad a través de la evaluación de tejidos y pérdida ósea alrededor de los implantes. Los siguientes procedimientos se realizaron en un quirófano cumpliendo con todas las normas de bioseguridad y protección. Todos los procedimientos se realizaron con un aumento microscópico de 10X y fueron llevados a cabo por operadores capacitados y calibrados.
Todas las cirugías se realizaron bajo anestesia inhalatoria con isoflurano y oxígeno. Se necesitaba un operador asistente para estabilizar al animal y mantener la boca abierta. Para evitar la irritación en los ojos, se utilizó lubricante oftálmico antes de iniciar la extracción.
Para este método, se utilizaron 18 ratones machos C57BL/6J de tres semanas de edad que se sometieron a extracciones dentales, colocación de implantes e inducción de periimplantitis. Extracción dental. Para las extracciones dentales, se introdujo un explorador dental de 5 entre el primer y segundo molar para iniciar la elevación y la luxación.
A continuación, se introdujo el explorador dental en el sitio mesial del primer molar. Después de la elevación, se utilizaron las pinzas de punta y las pinzas de sutura para extraer el primer molar. A continuación, se introdujo el explorador dental entre el segundo y el tercer molar para elevar y luxar el segundo molar.
Después de las extracciones dentales, se logró la hemostasia completa mediante el uso de un aplicador estéril con punta de algodón durante un minuto. Inmediatamente después de la extracción, todos los animales recibieron analgésicos, administrados a través de una inyección subcutánea. Además, durante cuatro semanas después de las extracciones, se sustituyó la alimentación regular por una dieta blanda y se administró antibiótico por vía oral, incorporando el medicamento al agua de bebida.
Colocación de implantes. Utilizando una cuchilla de 15c, se realizó una incisión mesiodistal a través del tejido queratinizado en el área correspondiente a los dientes previamente presentes. Los molares maxilares derechos fueron la referencia espacial.
Los colgajos bucales y palatinos de espesor completo se elevaron utilizando un explorador dental de 5 dientes, asegurando la elevación completa del colgajo. La osteotomía se realizó utilizando un microtaladro manual de carburo de 0,3 milímetros de diámetro unido a un tornillo de banco y se activó mediante rotación en el sentido de las agujas del reloj. Los sitios de osteotomía tenían aproximadamente un milímetro de profundidad en los alvéolos de extracción curados.
Después de eso, los implantes de titanio, uno por animal, se autorroscaron en la región del primer y segundo molar maxilar izquierdo utilizando un movimiento de tornillo en el sentido de las agujas del reloj. Los implantes tuvieron un período de curación de cuatro semanas, tiempo durante el cual los ratones recibieron antibióticos y se alimentaron como se describió anteriormente. Inducción de periimplantitis.
La periimplantitis fue inducida mediante la colocación de una ligadura de seda 6-0 alrededor de cada accesorio, inmediatamente apical a la cabeza del implante. Las ligaduras se mantuvieron durante dos semanas para desarrollar periimplantitis. Las ligaduras se revisaron cada dos días para asegurarse de que todavía estuvieran presentes.
Si faltaba, se colocaba una nueva ligadura. Después de este período, todos los animales fueron sacrificados. Los maxilares fueron cosechados, fotografiados con un microscopio óptico, fijados en formalina al 10% durante 24 horas, luego almacenados en etanol al 70%.
La evaluación clínica se realizó mediante la toma de imágenes inmediatamente después de los sacrificios mediante microscopía óptica. En comparación con el grupo de control, se observó inflamación, formación de bolsas y aumento del edema de tejidos blandos alrededor del implante en el grupo de periimplantitis. No se observaron evidencias de complicaciones fenotípicas clínicas graves.
Dos semanas después de la colocación de la ligadura, al comparar los grupos sin ligadura y con ligadura, se observaron diferencias significativas en la altura ósea observada mediante el análisis lineal y en el volumen de pérdida ósea observado mediante el análisis volumétrico. Para determinar los cambios celulares, las muestras descalcificadas fueron seccionadas y teñidas con hematoxilina y eosina. Como resultado, se observó una mayor migración epitelial apical y pérdida ósea en las muestras de periimplantitis en comparación con el grupo control.
Después de ver este video, debe tener una buena comprensión sobre cómo inducir periimplantitis en un modelo de ratones, así como identificar las diferencias clínicas, microtomográficas e histológicas encontradas. Aunque este método no representa todos los aspectos de la periimplantitis, es indispensable para el establecimiento de una relación de causa y efecto, proporcionando información sobre la cicatrización de los tejidos y apoyando los estudios sobre la pérdida ósea y la enfermedad periimplantaria.
