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A Practical Approach to Genetic Inducible Fate Mapping: A Visual Guide to Mark and Track Cells <em>In Vivo</em>

Fate maps are generated by marking and tracking cells in vivo to determine how progenitors contribute to specific structures and cell types in developing ...

Brown University

&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x957F;&#x671F;&#x95EE;&#x9898;&#x4E86;&#x89E3;&#x6682;&#x6001;&#x8868;&#x8FBE;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5982;&#x4F55;&#x5BF9;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x89E3;&#x5256;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7ED3;&#x6784;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x66F4;&#x9AD8;&#x5C42;&#x6B21;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x4EA7;&#x751F;&#x65F6;&#x8003;&#x8651;&#x5982;&#x4F55;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x8C31;&#x7CFB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5173;&#x65B0;&#x6210;&#x7ACB;&#x795E;&#x7ECF;&#x7535;&#x8DEF;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E24;&#x8005;&#x7D2F;&#x8BA1;&#x6807;&#x5FD7; Cre/loxp &#x5E8F;&#x5217;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E0E;&#x9057;&#x4F20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x547D;&#x8FD0;&#x6620;&#x5C04; &#xFF08;GIFM&#xFF09;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6C38;&#x4E45;&#x548C; heritably &#x4F7F;&#x7528; CreER/loxp &#x5E8F;&#x5217;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x7CBE;&#x7EC6;&#x65F6;&#x7A7A;&#x63A7;&#x5236;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x540E;&#x88D4;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5C11;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x662F;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x6709;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x9707;&#x64BC;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4F46;&#x7531;&#x4E8E;&#x4E00;&#x4E2A; loxp &#x5E8F;&#x5217;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E24;&#x4FA7;&#x7AD9;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x4E4B;&#x524D;&#x8BB0;&#x8005;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x9759;&#x6B62;&#x3002;&#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x9707;&#x64BC;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F; &#39;&#x6253;&#x5F00;&#39;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x4E00;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8BB0;&#x8005;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x8C31;&#x7CFB;&#x793A;&#x8E2A;&#x5242;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#x6709;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6548;&#x7387;&#x4F7F;&#x7528;&#x6570;&#x7EC4;&#x548C;&#x4E0D;&#x5F7B;&#x5E95;&#x63CF;&#x8FF0;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30;&#x91CD;&#x7EC4;/&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x4EEC;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528; CreER(T) Wnt1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x4E4B;&#x4E0B; &#xFF08;Wnt1-CreER(T))&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7D2F;&#x79EF;&#x3001; &#x975E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B; En1(Cre) &#x6572;&#x5165;&#x7EBF;&#x7ED3;&#x5408;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#xFF1A; R26R &#xFF08;LacZ &#x8BB0;&#x8005;&#xFF09;&#xFF0C;Z EG &#xFF08;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8BB0;&#x8005;&#xFF09; &#x548C; Tau-Lox-STOP-Lox-mGFP-IRES-NLS-LacZ &#xFF08;&#x9488;&#x5BF9;&#x819C;&#x7684; GFP/&#x6838; LacZ &#x8BB0;&#x8005;&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7EAA;&#x5FF5; Wnt1 &#x6CBF;&#x88AD;&#x4F7F;&#x7528;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7684; 3 &#x4F4D;&#x8BB0;&#x8005;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x5929; (E) 8.5 &#x8DDF;&#x5728; E10.0&#xFF0C;E12.5&#xFF0C;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7D2F;&#x8BA1;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5177;&#x6709; En1 &#x8868;&#x8FBE;&#x540C;&#x4E00;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x5386;&#x53F2;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x957F;&#x5904;&#x548C;&#x77ED;&#x5904;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x8BB0;&#x8005;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7531;&#x6574;&#x4E2A;&#x88C5;&#x8F7D;&#x548C;&#x79D1;&#x5206;&#x6790;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8BB0;&#x8005;&#x3002;&#x8BB0;&#x8005;&#x6F84;&#x6E05;&#x4ED6;&#x590D;&#x6742;&#x7684; Wnt1 &#x548C; En1 &#x8840;&#x7EDF;&#x5982;&#x4F55;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x6765;&#x81EA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C31;&#x7CFB;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8F74;&#x7A81;&#x6295;&#x5F71;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6761;&#x4EF6;&#x8BB0;&#x8005;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

A long-standing problem in development is understanding how progenitor cells transiently expressing genes contribute to complex anatomical and functional structures. In the developing nervous system an additional level of complexity arises when considering how cells of distinct lineages relate to newly established neural circuits. To address these problems, we used both cumulative marking with Cre/loxP and Genetic Inducible Fate Mapping (GIFM), which permanently and heritably marks small populations of progenitors and their descendants with fine temporal control using CreER/loxP. A key component used in both approaches is a conditional phenotyping allele that has the potential to be expressed in all cell types, but is quiescent because of a loxP flanked Stop sequence, which precedes a reporter allele. Upon recombination, the resulting phenotyping allele is 'turned on' and then constitutively expressed. Thus, the reporter functions as a high fidelity genetic lineage tracer in vivo. Currently there is an array of reporter alleles that can be used in marking strategies, but their recombination efficiency and applicability to a wide array of tissues has not been thoroughly described. To assess the recombination/marking potential of the reporters, we utilized CreER(T) under the control of a Wnt1 transgene (Wnt1-CreER(T)) as well as a cumulative, non-inducible En1(Cre) knock-in line in combination with three different reporters: R26R (LacZ reporter), Z/EG (EGFP reporter), and Tau-Lox-STOP-Lox-mGFP-IRES-NLS-LacZ (membrane-targeted GFP/nuclear LacZ reporter). We marked the Wnt1 lineage using each of the three reporters at embryonic day (E) 8.5 followed by analysis at E10.0, E12.5, and in the adult. We also compared cumulative marking of cells with a history of En1 expression at the same stages. We evaluated the reporters by whole-mount and section analysis and ascertained the strengths and weaknesses of each of the reporters. Comparative analysis with the reporters elucidated complexities of how the Wnt1 and En1 lineages contribute to developing embryos and to axonal projection patterns of neurons derived from these lineages.

Comparative analysis of conditional reporter alleles in the developing embryo and embryonic nervous system.

Un probl&#xE8;me de longue date dans le d&#xE9;veloppement est de comprendre comment les cellules prog&#xE9;nitrices de mani&#xE8;re transitoire des g&#xE8;nes exprimant contribuer &#xE0; des structures anatomiques complexes et fonctionnel. Dans le syst&#xE8;me nerveux en d&#xE9;veloppement un niveau suppl&#xE9;mentaire de complexit&#xE9; se pose lorsque l&#x26;#39;on consid&#xE8;re comment les cellules de lign&#xE9;es distinctes se rapportent &#xE0; nouvellement cr&#xE9;&#xE9;es circuits neuronaux. Pour r&#xE9;soudre ces probl&#xE8;mes, nous avons utilis&#xE9; &#xE0; la fois cumulatif marquage avec Cre / loxP et cartographie g&#xE9;n&#xE9;tique destin inductible (GIFM), qui marque de fa&#xE7;on permanente et heritably de petites populations de prog&#xE9;niteurs et de leurs descendants avec un contr&#xF4;le temporel pr&#xE9;cis avec CREER / loxP. Un &#xE9;l&#xE9;ment cl&#xE9; utilis&#xE9; dans les deux approches est un all&#xE8;le ph&#xE9;notypage conditionnelle qui a le potentiel pour &#xEA;tre exprim&#xE9; dans tous les types de cellules, mais est au repos en raison d&#x26;#39;une s&#xE9;quence loxP flanqu&#xE9;e d&#x26;#39;arr&#xEA;t, qui pr&#xE9;c&#xE8;de un all&#xE8;le journaliste. Sur la recombinaison, l&#x26;#39;all&#xE8;le ph&#xE9;notypage qui en r&#xE9;sulte est &#xAB;allum&#xE9;&#xBB; et ensuite exprim&#xE9; de fa&#xE7;on constitutive. Ainsi, les fonctions journaliste comme un traceur haute fid&#xE9;lit&#xE9; lign&#xE9;e g&#xE9;n&#xE9;tique in vivo. Actuellement, il ya un tableau des all&#xE8;les journaliste qui peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s dans le marquage des strat&#xE9;gies, mais leur efficacit&#xE9; de recombinaison et de l&#x26;#39;applicabilit&#xE9; &#xE0; un large &#xE9;ventail de tissus n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;crites en d&#xE9;tail. Pour &#xE9;valuer la recombinaison / marquage potentiel des journalistes, nous avons utilis&#xE9; CREER (T) sous le contr&#xF4;le d&#x26;#39;un transg&#xE8;ne Wnt1 (Wnt1-CREER (T)) ainsi que d&#x26;#39;un cumul et non inductible En1 (Cre) knock-in en ligne en combinaison avec trois journalistes diff&#xE9;rents: R26R (LacZ journaliste), Z / EG (rapporteur de l&#x26;#39;EGFP), et Tau-Lox-STOP-Lox-mGFP-IRES-NLS-LacZ (membrane-GFP cibl&#xE9;e / nucl&#xE9;aire rapporteur LacZ). Nous avons marqu&#xE9; la lign&#xE9;e Wnt1 en utilisant chacun des trois journalistes &#xE0; jour embryonnaire (E) 8,5 suivie d&#x26;#39;une analyse &#xE0; E10.0, E12.5, et chez l&#x26;#39;adulte. Nous avons &#xE9;galement compar&#xE9; cumulatif marquage des cellules avec une histoire de En1 expression aux m&#xEA;mes &#xE9;tapes. Nous avons &#xE9;valu&#xE9; les journalistes par l&#x26;#39;ensemble du montage et l&#x26;#39;analyse de l&#x26;#39;article et v&#xE9;rifi&#xE9; les points forts et les faiblesses de chacun des journalistes. Analyse comparative avec les journalistes &#xE9;lucid&#xE9; la complexit&#xE9; de la fa&#xE7;on dont les Wnt1 et En1 lign&#xE9;es de contribuer &#xE0; des embryons en d&#xE9;veloppement et aux mod&#xE8;les de projection axonales des neurones issus de ces lign&#xE9;es.

Analyse comparative des all&#xE8;les Reporter conditionnelles dans le d&#xE9;veloppement de l&#x26;#39;embryon et embryonnaire du syst&#xE8;me nerveux

Ein anhaltendes Problem in der Entwicklung ist verstehen, wie Vorl&auml;uferzellen, die vor&uuml;bergehend Ausdr&uuml;cken Gene zu komplexen anatomischen und funktionalen Strukturen beitragen. In das sich entwickelnde Nervensystem entsteht ein zus&auml;tzliches Ma&szlig; an Komplexit&auml;t, wenn unter Ber&uuml;cksichtigung der Zellen unterschiedliche Linien neu Beziehung zu neuronale Schaltkreise gegr&uuml;ndet. Um diese Probleme zu beheben, haben wir beide kumulative Kennzeichnung mit Cre/LoxP und genetische Inducible Schicksal Mapping (GIFM), die dauerhaft und heritably kleine Populationen der Vorfahren und ihre Nachkommen mit feinen zeitliche Steuerung mit CreER/LoxP Marken verwendet. Eine Schl&uuml;sselkomponente in beide Ans&auml;tze verwendet ist eine bedingte pathologies-Allel, die das Potenzial hat, alle Zelltypen ausgedr&uuml;ckt werden, aber ruhige aufgrund einer LoxP flankiert Stop-Sequenz, die ein Reporter-Allel vorausgeht. Bei der Rekombination ist die resultierende pathologies Allel &#39;eingeschaltet&#39; und dann konstitutiv ausgedr&uuml;ckt. So funktioniert die Reporter als ein High-Fidelity-genetische Abstammung-Tracer, der in-vivo. Derzeit gibt es eine Reihe von Reporter-Allele, die in der Kennzeichnung, Strategien, sondern deren Rekombination Effizienz verwendet werden kann und Anwendbarkeit auf einer Vielzahl von Geweben nicht ausf&uuml;hrlich beschrieben. Um das Rekombination/Kennzeichnung der Reporter bewerten, haben wir CreER(T) unter der Kontrolle einer Wnt1 Transgene genutzt (Wnt1-CreER(T)) sowie eine kumulative-inducible En1(Cre) Knock-in Linie in Kombination mit drei verschiedenen Reportern: R26R (LacZ Reporter), Z/EG (EGFP Reporter) und Tau-Lox-STOP-Lox-mGFP-IRES-NLS-LacZ (Membran-bezogene GFP/nuklearen LacZ Reporter). Hier markieren wir die Wnt1-Linie, die mit den einzelnen der drei Reporter bei embryonalen Tag (E) 8.5 mit anschlie&szlig;ender Analyse auf E10.0, E12.5, und in den Erwachsenen. Wir verglichen auch kumulative Markierung von Zellen mit einer Geschichte von En1 Ausdruck in den gleichen Phasen. Wir die Reporter von ganz-Mount und Abschnitt Analyse ausgewertet und festgestellt, die St&auml;rken und Schw&auml;chen der einzelnen Reportern. Vergleichende Analyse mit den Reportern verdeutlicht die Komplexit&auml;t wie die Wnt1 und En1 &Uuml;bertragungslinien Embryonen und dem axonale Projektion Muster von Neuronen abgeleitet von diesen Linien beitragen.

Vergleichende Analyse der bedingten Reporter Allele in der entwickelnden Embryo und embryonalen Nervensystems.

Un annoso problema in via di sviluppo &egrave; capire come le cellule progenitrici transitoriamente espressione dei geni contribuiscono a complesse strutture anatomiche e funzionali. Nel sistema nervoso in via di sviluppo un ulteriore livello di complessit&agrave; si pone quando considerando come cellule di distinti lignaggi riguardano appena stabilito circuiti neurali. Per risolvere questi problemi, abbiamo usato sia cumulativo marcatura con Cre/loxP e genetica inducibile destino Mapping (GIFM), che contrassegna permanentemente e heritably piccole popolazioni di progenitori e dei loro discendenti con controllo temporale fine utilizzando CreER/loxP. Un componente chiave utilizzati in entrambi gli approcci &egrave; un allele fenotipi condizionale che ha il potenziale per essere espresso in tutti i tipi di cellule, ma &egrave; tranquillo a causa di una sequenza di Stop loxP affiancato, che precede un allele reporter. Ricombinazione, l&#39;allele di fenotipi risultante &egrave; &#39;acceso&#39; e quindi costitutivamente espresso. Cos&igrave;, il reporter funziona come un tracciante del lignaggio genetico ad alta fedelt&agrave; in vivo. Attualmente c&#39;&egrave; una matrice di alleli reporter che pu&ograve; essere utilizzato in marcatura strategie, ma la loro efficienza di ricombinazione e applicabilit&agrave; di una vasta gamma di tessuti non &egrave; stato accuratamente descritto. Per valutare il potenziale di ricombinazione/marcatura dei reporter, abbiamo utilizzato il CreER(T) sotto il controllo di un transgene Wnt1 (Wnt1-CreER(T)), nonch&eacute; una cumulativa, non-inducibile En1(Cre) knock-in linea in combinazione con tre differenti reporter: R26R (reporter LacZ), Z/EG (reporter EGFP) e Tau-Lox-STOP-Lox-mGFP-IRES-NLS-LacZ (membrana mirati reporter LacZ GFP/nucleare). Abbiamo segnato il lignaggio di Wnt1 con ciascuno dei tre giornalisti a giorno embrionale (E) 8.5 seguita da analisi a E10.0, E12.5 e nell&#39;adulto. Abbiamo confrontato anche cumulativo marcatura delle cellule con una storia di En1 espressione presso le stesse fasi. Abbiamo valutato i reporter dall&#39;intero-monta e sezione analisi e accertata la forza e debolezza di ciascuno dei giornalisti. Analisi comparativa con la complessit&agrave; chiarito ai giornalisti di come i lignaggi Wnt1 ed En1 contribuiscono allo sviluppo di embrioni e di modelli di proiezione assonali dei neuroni derivati da questi lignaggi.

Analisi comparativa degli alleli condizionali reporter nell&#39;embrione in via di sviluppo e del sistema nervoso embrionale.

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&#x26;#39;&#x30AA;&#x30F3;&#x26;#39;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x9AD8;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x6226;&#x7565;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x5E45;&#x5E83;&#x3044;&#x3078;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x6027;&#x3068;&#x9069;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x5FB9;&#x5E95;&#x7684;&#x306B;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A18;&#x8005;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;/&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Wnt1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF08;Wnt1-CreER&#xFF08;T&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;CreER&#xFF08;T&#xFF09;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7D2F;&#x7A4D;&#x3001;&#x975E;&#x8A98;&#x5C0E;EN1&#xFF08;CRE&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A4;&#x30F3;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;R26R&#xFF08;LacZ&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF09;&#x3001;Z / EG&#xFF08;EGFP&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Tau-LOX-STOP-LOX-mGFP-IRES-NLS-LacZ&#x3092;&#xFF08;&#x819C;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x305F;GFP /&#x6838;LacZ&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF09;&#xFF1A;&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;E12.5&#x3001;E10.0&#x3067;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x80DA;&#x65E5;&#xFF08;E&#xFF09;8.5&#x3067;&#x3001;3&#x8A18;&#x8005;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;Wnt1&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x3067;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8;&#x3067;EN1&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x6B74;&#x53F2;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7D2F;&#x7A4D;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x8A18;&#x8005;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BB;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x78BA;&#x8A8D;&#x306E;&#x9577;&#x6240;&#x3068;&#x77ED;&#x6240;&#x3067;&#x8A18;&#x8005;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8A18;&#x8005;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;Wnt1&#x3068;EN1&#x7CFB;&#x7D71;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x80DA;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x6295;&#x5C04;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x767A;&#x751F;&#x4E2D;&#x306E;&#x80DA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x80DA;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x304D;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x89E3;&#x6790;

&#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC624;&#xB79C; &#xBB38;&#xC81C; transiently &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC; &#xC870; &#xC140; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD574;&#xBD80;&#xD559; &#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;. &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD68C;&#xB85C; &#xC124;&#xB9BD; &#xC140; &#xACE0;&#xC720; &#xD608;&#xD1B5;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC0C8;&#xB85C; &#xACE0;&#xB824; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131; &#xCD94;&#xAC00; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xB204;&#xC801; Cre/Loxp&#xC640; &#xC720;&#xC804; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC6B4;&#xBA85; &#xB9E4;&#xD551; (GIFM), &#xC601;&#xAD6C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC0F; heritably &#xD45C;&#xC2DC; &#xD568; CreER/loxP &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAD1C; &#xCC2E; &#xC544; &#xC694; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xACFC; progenitors &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC790;&#xC190;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xC778;&#xAD6C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBAA8;&#xB450; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xD575;&#xC2EC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB420; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xD615;&#xC9C8; allele &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC55E;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC790; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; loxP &#xCE21;&#xBA74; &#xC911;&#xC9C0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBB34;&#xBD80;&#xD558;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;, &#xB530;&#xB77C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300;&#xB9BD; &#xD615;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#39;&#xCF1C;&#39; &#xC774;&#xBA70; constitutively &#xD45C;&#xD604;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAE30;&#xC790; &#xACE0;&#xD654;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xACC4;&#xBCF4; &#xCD94;&#xC801; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569; &#xD6A8;&#xC728; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xC790; &#xB300;&#xB9BD; &#xC774;&#xBA70; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xCCA0;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xC9C0;. &#xAE30;&#xC790; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;/&#xB9C8;&#xD0B9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Wnt1 transgene&#xC758; &#xD1B5;&#xC81C; Creer(t)&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; (&#xB204;&#xC801;, &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBE44; En1(Cre) &#xB178;&#xD06C;&#xC5D0; &#xC904; 3 &#xBA85;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xC790;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; Wnt1-CreER(T)): R26R (LacZ &#xAE30;&#xC790;) Z/EG (EGFP &#xAE30;&#xC790;) &#xBC0F; Tau-Lox-STOP-Lox-mGFP-IRES-NLS-LacZ (GFP/&#xD575; LacZ &#xAE30;&#xC790; &#xB9C9; &#xB300;&#xC0C1;). &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xB0A0; (E) &#xB4A4;&#xC5D0; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xC131;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; E10.0, E12.5, 8.5 &#xC138; &#xAE30;&#xC790; &#xB4E4;&#xC758; &#xAC01;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; Wnt1 &#xD608;&#xD1B5; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; En1 &#xC2DD;&#xC758; &#xC5ED;&#xC0AC;&#xB97C; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC140;&#xC758; &#xB204;&#xC801; &#xB9C8;&#xD0B9; &#xBE44;&#xAD50;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC804;&#xCCB4; &#xC0B0;&#xACFC; &#xC139;&#xC158; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE30;&#xC790; &#xB4E4;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xAE30;&#xC790; &#xB4E4;&#xC758; &#xAC01;&#xAC01;&#xC758; &#xC7A5;&#xB2E8;&#xC810;&#xC744; &#xD655;&#xC778;. &#xAE30;&#xC790; &#xD574;&#xBA85; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131; &#xBC30;&#xC544;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACC4;&#xBCF4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; axonal &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xC158; &#xD328;&#xD134; Wnt1 &#xBC0F; En1 &#xACC4;&#xBCF4; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;.

&#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xAE30;&#xC790; &#xB300;&#xB9BD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC30;&#xC544; &#xBC0F; &#xBC30;&#xC544; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;.

Un problema de larga data en el desarrollo es entender c&#xF3;mo las c&#xE9;lulas progenitoras de los genes que expresan transitoriamente contribuir a complejas estructuras anat&#xF3;micas y funcionales. En el sistema nervioso en desarrollo de un nivel adicional de complejidad surge cuando se considera c&#xF3;mo las c&#xE9;lulas de diferentes linajes se refieren a los reci&#xE9;n establecidos los circuitos neuronales. Para solucionar estos problemas, hemos utilizado tanto acumulado marcado con el Cre / loxP y mapeo gen&#xE9;tico inducible Destino (GIFM), que marca de forma permanente y heritably peque&#xF1;as poblaciones de progenitores y sus descendientes, con un control preciso temporal usando CREER / loxP. Un componente clave utilizada en ambos enfoques es un alelo fenotipado condicional que tiene el potencial de ser expresado en todos los tipos celulares, pero est&#xE1; en reposo a causa de un loxP flanqueado secuencia de parada, que precede a un alelo reportero. Despu&#xE9;s de la recombinaci&#xF3;n, el alelo fenotipo resultante es &#x26;quot;encendido&#x26;quot; y luego expresa constitutivamente. As&#xED;, las funciones reportero como un trazador linaje de alta fidelidad gen&#xE9;tica in vivo. Actualmente existe una gran variedad de alelos reportero que pueden ser utilizados en el marcado de las estrategias, pero su eficacia recombinaci&#xF3;n y la aplicabilidad a una amplia gama de tejidos no se ha descrito a fondo. Para evaluar la recombinaci&#xF3;n / marcado potencial de los reporteros, hemos utilizado CREER (T) bajo el control de un transg&#xE9;n Wnt1 (Wnt1-CREER (T)), as&#xED; como un acumulativo, no inducible En1 (Cre) en cadena en l&#xED;nea en combinaci&#xF3;n con tres reporteros diferentes: R26R (lacZ reportero), Z / EG (EGFP reportero), y Tau-Lox-STOP-Lox-mGFP-IRES-NLS-LacZ (membrana orientada GFP / nuclear reportero LacZ). Se marc&#xF3; el linaje Wnt1 utilizando cada uno de los tres reporteros en d&#xED;a embrionario (E) 8,5 seguido por an&#xE1;lisis en E10.0, E12.5, y en el adulto. Asimismo, en comparaci&#xF3;n acumulada marcado de las c&#xE9;lulas con una historia de En1 expresi&#xF3;n en las mismas etapas. Se evalu&#xF3; a los periodistas por todo el montaje y el an&#xE1;lisis de la secci&#xF3;n y comprobar las fortalezas y debilidades de cada uno de los periodistas. El an&#xE1;lisis comparativo con los periodistas dilucidado complejidades de c&#xF3;mo los Wnt1 y en1 linajes contribuir a los embriones en desarrollo y los patrones de proyecci&#xF3;n axonal de las neuronas derivadas de estos linajes.

An&#xE1;lisis comparativo de los alelos del reportero de condicionales en el embri&#xF3;n en desarrollo y sistema nervioso embrionario

&#x6761;&#x4EF6;&#x6807;&#x8BB0;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5931;&#x6D3B;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x90FD;&#x662F;&#x5B9D;&#x8D35;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7528;&#x6765;&#x7406;&#x89E3;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x3002;CreER(T) &#x662F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9176;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x6218;&#x7565;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x672C;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x7528;&#x6765;&#x83B7;&#x5F97;&#x653F;&#x5E9C;&#x5F53;&#x5C40;&#x4E09;&#x82EF;&#x6C27;&#x80FA;&#x540E;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x8FD9;&#x4E09;&#x82EF;&#x6C27;&#x80FA;&#x5242;&#x91CF;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6548;&#x7387;&#x7EBF;&#x6027;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;Wnt1-CreER(T) &#x548C;&#x4E09;&#x82EF;&#x6C27;&#x80FA;&#x7BA1;&#x7406;&#x7528;&#x4E8E;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E09;&#x53C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x4F5C;&#x51FA;&#x4E86;&#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6267;&#x884C;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#x53CD;&#x5E94;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x7ECF;&#x5386;&#x4E86;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E09;&#x82EF;&#x6C27;&#x80FA;&#x7BA1;&#x7406;&#x4ECE; 50 &#x5230; 500 &#x6BEB;&#x514B;/&#x516C;&#x65A4;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6570;&#x76EE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x91CF;&#x53D8;&#x5F02;&#x4E3A;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5185;&#x90E8;&#x548C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5242;&#x91CF;&#x7EC4;&#x4E0E;&#x4ED6;&#x83AB;&#x6614;&#x82AC;&#x5242;&#x91CF;&#x548C;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x660E;&#x786E;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x8FD9;&#x5C31;&#x662F;&#x7B2C;&#x4E00;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x77E5;&#x9053;&#x5728;&#x54EA;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FDB;&#x884C;&#x8BA1;&#x6570;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E3A;&#x8303;&#x56F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x4E09;&#x82EF;&#x6C27;&#x80FA;&#x5242;&#x91CF;&#x54CD;&#x5E94;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x8DEF;&#x6BB5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x53EF;&#x9760;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6570;&#x636E;&#x548C;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x91CF;&#x5316;&#x548C;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x6846;&#x67B6;&#x57FA;&#x4E8E; CreER T &#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x548C;&#x9009;&#x62E9;&#x4E09;&#x82EF;&#x6C27;&#x80FA;&#x6295;&#x52A0;&#x8303;&#x5F0F;&#x3002;

&#x4E09;&#x82EF;&#x6C27;&#x80FA;&#x5242;&#x91CF;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x6709;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6807;&#x5FD7;&#xFF1A; &#x6709;&#x63A7;&#x5236;&#x5417;&#xFF1F;

Conditional marking and gene inactivation experiments are valuable approaches used to understand developmental and molecular mechanisms. CreER(T) is a fundamental component in recombinase-based conditional strategies and is used to gain temporal control subsequent to tamoxifen administration. We tested the hypothesis that tamoxifen dose linearly correlates with recombination efficiency in vivo. Wnt1-CreER(T) and tamoxifen administration were used to mark progenitors that contributed to the trigeminal ganglia. We executed a dose response study to determine the number of neurons that had undergone recombination in response to tamoxifen administered at doses ranging from 50 to 500 mg/kg. Our findings show a substantial variability in the amount of recombination within and between dose groups with no clear correlation between tamoxifen dose and the number of marked cells. This is the first study that we are aware of in which cell counts, robust quantitative data, and statistical analyses were performed on sections obtained from embryos marked in response to a wide range of tamoxifen dose in vivo. We provide an important quantitative and statistical framework for designing CreER(T)-based experiments and choosing tamoxifen dosing paradigms.

Tamoxifen dose response and conditional cell marking: is there control?

Condition de marquage et des exp&#xE9;riences d&#x26;#39;inactivation de g&#xE8;nes sont des approches utiles pour comprendre les m&#xE9;canismes utilis&#xE9;s d&#xE9;veloppement et mol&#xE9;culaire. CREER (T) est une composante fondamentale dans la recombinase des strat&#xE9;gies fond&#xE9;es sur conditionnelles et est utilis&#xE9; pour prendre le contr&#xF4;le &#xE0; la suite de l&#x26;#39;administration temporelle du tamoxif&#xE8;ne. Nous avons test&#xE9; l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se selon laquelle la dose de tamoxif&#xE8;ne est corr&#xE9;l&#xE9;e lin&#xE9;airement avec l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de recombinaison in vivo. Wnt1-CREER (T) et le tamoxif&#xE8;ne administration ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour marquer des prog&#xE9;niteurs qui ont contribu&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;ganglions de Gasser. Nous avons ex&#xE9;cut&#xE9; une &#xE9;tude dose-r&#xE9;ponse afin de d&#xE9;terminer le nombre de neurones qui avaient subi une recombinaison en r&#xE9;ponse au tamoxif&#xE8;ne administr&#xE9; &#xE0; des doses allant de 50 &#xE0; 500 mg / kg. Nos r&#xE9;sultats montrent une variabilit&#xE9; importante de la quantit&#xE9; de recombinaison au sein et entre les groupes de dose avec aucune corr&#xE9;lation claire entre la dose de tamoxif&#xE8;ne et le nombre de cellules marqu&#xE9;es. Cette &#xE9;tude est la premi&#xE8;re fois que nous sommes conscients de ce qui dans nombre de cellules, les donn&#xE9;es quantitatives solides et des analyses statistiques ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;es sur des sections &#xE0; partir d&#x26;#39;embryons obtenus marqu&#xE9;s en r&#xE9;ponse &#xE0; un large &#xE9;ventail de la dose de tamoxif&#xE8;ne in vivo. Nous fournissons un cadre important quantitative et statistique pour la conception CREER (T) &#xE0; base des exp&#xE9;riences et en choisissant paradigmes de dosage du tamoxif&#xE8;ne.

Dose-r&#xE9;ponse au tamoxif&#xE8;ne et cellulaire conditionnelle Marquage: Il est de configuration?

Bedingte Kennzeichnung und gen-Inaktivierung-Experimente sind wertvolle Ans&auml;tze, Entwicklungsbiologie und Molekulare Mechanismen zu verstehen. CreER(T) ist eine grundlegende Komponente Recombinase basierende bedingte Strategien und dient zur zeitlichen Kontrolle nach Tamoxifen Verwaltung. Wir testeten die Hypothese, dass Tamoxifen-Dosis korreliert linear mit Rekombination Effizienz in-vivo. Wnt1-CreER(T) und Tamoxifen Verwaltung wurden verwendet, um die Vorl&auml;uferzellen zu markieren, die zu den Trigeminalganglien beigetragen. Wir ausgef&uuml;hrt eine Dosis-Antwort-Studie zum Bestimmen der Anzahl der Neuronen, die Rekombination Reaktion auf Tamoxifen bei Dosen von 50 bis 500 mg/kg verabreicht durchgemacht hatte. Unsere Ergebnisse zeigen eine erhebliche Variabilit&auml;t in H&ouml;he von Rekombination innerhalb und zwischen Dosisgruppen mit keine eindeutige Korrelation zwischen Tamoxifen-Dosis und die Anzahl der markierten Zellen. Dies ist die erste Studie, der wir wissen in welche Zelle z&auml;hlt, robuste quantitative Daten und statistische Analysen wurden unter gewonnenen Embryonen, die in Reaktion auf eine Vielzahl von Tamoxifen-Dosis in-vivo markierten Bereichen durchgef&uuml;hrt. Wir bieten einen wichtigen Rahmen f&uuml;r quantitativen und statistischen f&uuml;r entwerfen CreER T-basierten Experimente und Ausw&auml;hlen von Tamoxifen-Dosierung Paradigmen.

Tamoxifen Dosis-Antwort und bedingte Zelle Kennzeichnung: gibt es Kontrolle?

Esperimenti di inattivazione condizionali marcatura e gene sono importanti approcci utilizzati per comprendere i meccanismi molecolari e di sviluppo. CreER(T) &egrave; un componente fondamentale nelle strategie di condizionale basata su ricombinasi e viene utilizzato per ottenere il controllo temporale dopo somministrazione di tamoxifene. Abbiamo testato l&#39;ipotesi che la dose tamoxifene correla linearmente con l&#39;efficienza di ricombinazione in vivo. Amministrazione Wnt1-CreER(T) e tamoxifene sono stati utilizzati per contrassegnare i progenitori che hanno contribuito ai gangli trigeminali. Abbiamo eseguito uno studio di dose risposta per determinare il numero di neuroni che aveva subito la ricombinazione in risposta al tamoxifene somministrato a dosi che vanno da 50 a 500 mg/kg. I nostri risultati mostrano una notevole variabilit&agrave; nella quantit&agrave; di ricombinazione all&#39;interno e tra i gruppi di dosaggio con alcuna chiara correlazione tra dose di tamoxifene e il numero di cellule contrassegnate. Questo &egrave; il primo studio che sappiamo in quale cella conta, dati quantitativi affidabili e le analisi statistiche sono state effettuate su sezioni ottenute da embrioni contrassegnati in risposta ad una vasta gamma di dose di tamoxifen in vivo. Forniamo un importante quadro quantitativo e statistico per la progettazione di esperimenti basati su CreER T e scegliendo tamoxifen paradigmi di dosaggio.

Tamoxifen dose risposta e marcatura cella condizionali: esiste un controllo?

&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x304D;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; CreER&#xFF08;T&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x304D;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30BF;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x6295;&#x4E0E;&#x306B;&#x7D9A;&#x304F;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x306E;&#x6295;&#x4E0E;&#x91CF;&#x306F;&#x76F4;&#x7DDA;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x52B9;&#x7387;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Wnt1-CreER&#xFF08;T&#xFF09;&#x3068;&#x30BF;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x6295;&#x4E0E;&#x306F;&#x4E09;&#x53C9;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;50&#x301C;500 mg / kg&#x4F53;&#x91CD;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x7528;&#x91CF;&#x3067;&#x6295;&#x4E0E;&#x30BF;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7528;&#x91CF;&#x53CD;&#x5FDC;&#x8A66;&#x9A13;&#x3092;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x6295;&#x4E0E;&#x3068;&#x8457;&#x660E;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x306F;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x76F8;&#x95A2;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3068;&#x7528;&#x91CF;&#x7FA4;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9593;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x91CF;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5909;&#x52D5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D71;&#x8A08;&#x89E3;&#x6790;&#x304C;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30BF;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x6295;&#x4E0E;&#x91CF;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x80DA;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8A2D;&#x8A08;CreER&#xFF08;T&#xFF09;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3068;&#x9078;&#x629E;&#x30BF;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x306E;&#x6295;&#x4E0E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#xB7;&#x7D71;&#x8A08;&#x7684;&#x306A;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x7DDA;&#x91CF;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x30BB;&#x30EB;&#xFF1A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304B;&#xFF1F;

&#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC740; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xC811;&#xADFC;. CreER(T) &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xC804;&#xB7B5; recombinase &#xAE30;&#xBC18;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC774;&#xBA70; tamoxifen &#xAD00;&#xB9AC; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC2DC;&#xD5D8; tamoxifen &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xC120;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569; &#xD6A8;&#xC728; in vivo&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Wnt1-CreER(T) &#xBC0F; tamoxifen &#xAD00;&#xB9AC; trigeminal &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; progenitors&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569; tamoxifen &#xBCF5;&#xC6A9; 50&#xC5D0;&#xC11C; 500 mg/kg&#xAE4C;&#xC9C0; &#xD22C;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC740; &#xD588;&#xB2E4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC751;&#xB2F5; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC2E4;&#xD589;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC2DC;&#xAC04;&#xACFC; tamoxifen &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC640; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC140; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBA85;&#xD655;&#xD55C; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xD22C;&#xC5EC; &#xADF8;&#xB8F9; &#xAC04;&#xC758; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;&#xC758; &#xC591;&#xC744; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC140; &#xACC4;&#xC0B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xAC01; &#xD558;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC591;&#xC801; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBC0F; &#xD1B5;&#xACC4; &#xBD84;&#xC11D; vivo&#xC5D0;&#xC11C; tamoxifen &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC758; &#xB113;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xC139;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589; &#xD574;&#xC57C; &#xD588;&#xB358;. &#xC6B0;&#xB9AC; CreER T &#xAE30;&#xBC18; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC124;&#xACC4; &#xD558; &#xACE0; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC744; &#xBA39;&#xC774; &#xC9C0; tamoxifen&#xC744; &#xC120;&#xD0DD; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC591;&#xC801; &#xBC0F; &#xD1B5;&#xACC4; &#xD504;&#xB808;&#xC784; &#xC6CC;&#xD06C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Tamoxifen &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC751;&#xB2F5; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DC;: &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;?

Condicional marcado y los experimentos gen&#xE9;ticos de inactivaci&#xF3;n son valiosos enfoques utilizados para comprender los mecanismos de desarrollo y molecular. Creer (T) es un componente fundamental en las estrategias basadas en la recombinasa condicional y se utiliza para obtener el control temporal, despu&#xE9;s de la administraci&#xF3;n de tamoxifeno. Hemos probado la hip&#xF3;tesis de que dosis de tamoxifeno linealmente correlacionada con la eficiencia de la recombinaci&#xF3;n in vivo. Wnt1-Creer (T) y la administraci&#xF3;n de tamoxifeno se usa para marcar los progenitores que han contribuido a los ganglios del trig&#xE9;mino. Se ejecuta un estudio de respuesta a dosis para determinar el n&#xFA;mero de neuronas que se hab&#xED;an sometido a recombinaci&#xF3;n en respuesta a tamoxifeno administrado en dosis que van desde 50 a 500 mg / kg. Nuestros resultados muestran una gran variabilidad en la cantidad de recombinaci&#xF3;n dentro y entre los grupos de dosis, con una correlaci&#xF3;n clara entre la dosis de tamoxifeno y el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas marcadas. Este es el primer estudio que somos conscientes de que en los recuentos de c&#xE9;lulas y robustos de datos cuantitativos y an&#xE1;lisis estad&#xED;sticos se realizaron en secciones obtenidas de embriones marcados en respuesta a una amplia gama de dosis de tamoxifeno en vivo. Nos ofrecen un importante marco cuantitativo y estad&#xED;stico para el dise&#xF1;o Creer (T)-basados &#x200B;&#x200B;en la experimentaci&#xF3;n y la elecci&#xF3;n de paradigmas tamoxifeno dosis.

Respuesta tamoxifeno dosis y condicional de la c&#xE9;lula Marcado: &#xBF;Hay control?

&#x953B;&#x9020;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x52A8;&#x6001;&#x6539;&#x53D8;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x5176;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x662F;&#x6709;&#x6559;&#x80B2;&#x610F;&#x4E49;&#x7406;&#x89E3;&#x7684;&#x903B;&#x8F91;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x662F;&#x5982;&#x4F55;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x7684;&#x3002;&#x9F20;&#x6807;&#x810A;&#x9AD3;&#x662F;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5728;&#x53D1;&#x80B2;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x548C;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x5C55;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x7406;&#x60F3;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CD;&#x70B9; Gastrulation &#x540C;&#x6E90;&#x76D2; 2 (Gbx2) &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x5728;&#x810A;&#x9AD3;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x63A2;&#x8BA8;&#x4E86;&#x3002;

&#x6CBF;&#x88AD;&#x8D21;&#x732E;&#x548C; Gbx2 &#x5728;&#x810A;&#x9AD3;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Forging a relationship between progenitors with dynamically changing gene expression and their terminal fate is instructive for understanding the logic of how cell-type diversity is established. The mouse spinal cord is an ideal system to study these mechanisms in the context of developmental genetics and nervous system development. Here we focus on the Gastrulation homeobox 2 (Gbx2) transcription factor, which has not been explored in spinal cord development.

The lineage contribution and role of Gbx2 in spinal cord development.

Forger une relation entre prog&#xE9;niteurs avec changement dynamique de l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes et de leur destin terminal est instructif pour comprendre la logique de la fa&#xE7;on dont un type de cellule de la diversit&#xE9; est &#xE9;tabli. La moelle &#xE9;pini&#xE8;re de souris est un syst&#xE8;me id&#xE9;al pour &#xE9;tudier ces m&#xE9;canismes dans le contexte de la g&#xE9;n&#xE9;tique du d&#xE9;veloppement et de d&#xE9;veloppement du syst&#xE8;me nerveux. Ici nous nous concentrons sur l&#x26;#39;hom&#xE9;obo&#xEE;te 2 gastrulation (Gbx2) facteur de transcription, qui n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; explor&#xE9; dans le d&#xE9;veloppement la moelle &#xE9;pini&#xE8;re.

La contribution et le r&#xF4;le de Lineage Gbx2 dans le d&#xE9;veloppement de la moelle &#xE9;pini&#xE8;re

Schmieden eine Beziehung zwischen Vorfahre mit sich dynamisch &auml;ndernden Genexpression und ihr terminal Schicksal ist aufschlussreich f&uuml;r das Verst&auml;ndnis der Logik wie Zelltyp Vielfalt etabliert ist. Das Maus-R&uuml;ckenmark ist ein ideales System, diese Mechanismen im Rahmen der Entwicklungsbiologie Genetik und Nervensystem Entwicklung zu studieren. Hier konzentrieren wir uns auf die Gastrulation Homeobox 2 (Gbx2)-&Uuml;bertragungfaktor, die nicht im R&uuml;ckenmark Entwicklung erforscht wurde.

Die Herkunfts-Beitrag und die Rolle der Gbx2 im R&uuml;ckenmark Entwicklung.

Una relazione tra progenitori con modifica dinamica espressione genica e loro destino terminale di pezzo fucinato &egrave; istruttivo per capire la logica di come viene stabilita la diversit&agrave; del tipo di cellula. Il midollo spinale di topo &egrave; un sistema ideale per studiare questi meccanismi nel contesto di sviluppo sviluppo genetica e sistema nervoso. Qui ci concentriamo sulla gastrulazione homeobox 2 (Gbx2) fattore di trascrizione, che non &egrave; stata esplorata in sviluppo del midollo spinale.

Il contributo di lignaggio e il ruolo di Gbx2 nello sviluppo del midollo spinale.

&#x52D5;&#x7684;&#x306B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7AEF;&#x672B;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x304C;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x8AD6;&#x7406;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6709;&#x76CA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x935B;&#x9020;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x810A;&#x9AC4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x751F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x9AC4;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x539F;&#x8178;&#x5F62;&#x6210;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;2&#xFF08;Gbx2&#xFF09;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x810A;&#x9AC4;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Gbx2&#x306E;&#x7CFB;&#x8B5C;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x3068;&#x5F79;&#x5272;

Progenitors &#xB3D9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBC0F; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xBCC0;&#xD654; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xB2E8;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC140; &#xD0C0;&#xC785; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xC124;&#xC815; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xB17C;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xCC99;&#xC218; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC720;&#xC804;&#xD559; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; 2 (Gbx2) &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;, &#xCC99;&#xC218; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0D0;&#xD5D8; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; Gastrulation homeobox&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;.

&#xB9AC;&#xB2C8;&#xC9C0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xBC0F; &#xCC99;&#xC218; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; gbx2&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

La forja de una relaci&#xF3;n entre los progenitores con el cambio din&#xE1;mico de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica y su destino terminal es instructivo para entender la l&#xF3;gica de c&#xF3;mo la diversidad de tipo de c&#xE9;lulas se ha establecido. La m&#xE9;dula espinal de rat&#xF3;n es un sistema ideal para estudiar estos mecanismos en el contexto de la gen&#xE9;tica del desarrollo y el desarrollo del sistema nervioso. Aqu&#xED; nos centramos en el homeobox Gastrulaci&#xF3;n 2 (Gbx2) factor de transcripci&#xF3;n, que no ha sido explorado en el desarrollo de la m&#xE9;dula espinal.

Debra Ellisor

Department of Molecular Biology,
Cell Biology and Biochemistry,
Division of Biology and Medicine,
Department of Molecular Biology, Cell Biology and Biochemistry, Division of Biology and Medicine

Brown University

A Practical Approach to Genetic Inducible Fate Mapping: A Visual Guide to Mark and Track Cells In Vivo

Debra Ellisor

Department of Molecular Biology,Cell Biology and Biochemistry,Division of Biology and Medicine,Department of Molecular Biology, Cell Biology and Biochemistry, Division of Biology and Medicine

Brown University

A Practical Approach to Genetic Inducible Fate Mapping: A Visual Guide to Mark and Track Cells In Vivo

Department of Molecular Biology,
Cell Biology and Biochemistry,
Division of Biology and Medicine,
Department of Molecular Biology, Cell Biology and Biochemistry, Division of Biology and Medicine