Generating iPS Cells from MEFS through Forced Expression of Sox-2, Oct-4, c-Myc, and Klf4

Pluripotency can be induced in differentiated murine by viral transduction of Oct4, Sox2, Klf4, and c-Myc (Takahashi and Yamanaka, 2006;  Wernig, et al., ...

Whitehead Institute for Biomedical Research, Massachusetts Institute of Technology

&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x5370;&#x8FF9; (LOI)&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x662F;&#x6307;&#x901A;&#x5E38;&#x6240;&#x8D4B;&#x4E88;&#x7684;&#x7236;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x7279;&#x5B9A; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7684; monoallelic &#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x798F;&#x6765;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0E;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x77AC;&#x6001;&#x7532;&#x57FA;&#x751F;&#x6210;&#x65E0;&#x5370;&#x8BB0;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x5982;&#x679C; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09; &#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x80DA;&#x80CE;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x5982; MEFs&#xFF09; &#x663E;&#x793A; TGFbeta &#x62B5;&#x6297;&#x6765;&#x81EA;&#x5982;&#x679C;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11; p19 &#x548C; p53 &#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x7A97;&#x4F53; SCID &#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x5982;&#x679C; MEFs &#x5C55;&#x793A;&#x81EA;&#x53D1;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x5E76;&#x914D;&#x5408; H-Ras &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5316;&#x3002;&#x5982;&#x679C;-ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x52A8;&#x7269;&#x53D1;&#x5C55; 12 &#x4E2A;&#x6708;&#x5185;&#x4ECE;&#x6CE8;&#x5165;&#x5982;&#x679C;-ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x798F;&#x6765;&#x4EC5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D1;&#x5C55;&#x6210;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x67E5;&#x660E;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B83;&#x6240;&#x8D4B;&#x4E88;&#x7684;&#x798F;&#x6765;&#x7684;&#x4E0D;&#x673D;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x53D8;&#x6362;&#x7684;&#x9608;&#x503C;&#x3002;

&#x5370;&#x8BB0;&#x7684;&#x5168;&#x7403;&#x635F;&#x5931;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6210;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x666E;&#x904D;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;

Loss of imprinting (LOI), commonly observed in human tumors, refers to loss of monoallelic gene regulation normally conferred by parent-of-origin-specific DNA methylation. To test the function of LOI in tumorigenesis, we developed a model by using transient demethylation to generate imprint-free mouse embryonic stem cells (IF-ES cells). Embryonic fibroblasts derived from IF-ES cells (IF-MEFs) display TGFbeta resistance and reduced p19 and p53 expression and form tumors in SCID mice. IF-MEFs exhibit spontaneous immortalization and cooperate with H-Ras in cellular transformation. Chimeric animals derived from IF-ES cells develop multiple tumors arising from the injected IF-ES cells within 12 months. These data demonstrate that LOI alone can predispose cells to tumorigenesis and identify a pathway through which immortality conferred by LOI lowers the threshold for transformation.

Global loss of imprinting leads to widespread tumorigenesis in adult mice.

Perte de l&#x26;#39;empreinte (LOI), couramment observ&#xE9; dans les tumeurs humaines, se r&#xE9;f&#xE8;re &#xE0; la perte de la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes monoall&#xE9;lique normalement conf&#xE9;r&#xE9; par parent d&#x26;#39;origine sp&#xE9;cifique m&#xE9;thylation de l&#x26;#39;ADN. Pour tester la fonction des lettres d&#x26;#39;intention dans la tumorigen&#xE8;se, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un mod&#xE8;le en utilisant la d&#xE9;m&#xE9;thylation transitoire pour g&#xE9;n&#xE9;rer empreinte sans cellules souches embryonnaires de souris (SI-ES cellules). Fibroblastes embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;es d&#x26;#39;IF-ES cellules (IF-MEF) d&#x26;#39;affichage TGFbeta r&#xE9;sistance et d&#x26;#39;expression r&#xE9;duite p19 et p53 et forment des tumeurs chez la souris SCID. SI-MEF pr&#xE9;sentent l&#x26;#39;immortalisation spontan&#xE9;e et de coop&#xE9;rer avec H-Ras dans la transformation cellulaire. Les animaux chim&#xE9;riques d&#xE9;riv&#xE9;s de SI-ES cellules se d&#xE9;veloppent de multiples tumeurs r&#xE9;sultant de l&#x26;#39;injection SI-ES cellules dans les 12 mois. Ces donn&#xE9;es d&#xE9;montrent que la lettre d&#x26;#39;intention seules peuvent pr&#xE9;disposer les cellules &#xE0; la tumorigen&#xE8;se et de d&#xE9;finir un cheminement &#xE0; travers lequel l&#x26;#39;immortalit&#xE9; conf&#xE9;r&#xE9;e par la lettre d&#x26;#39;intention d&#x26;#39;abaisser le seuil pour la transformation.

Perte globale de l&#x26;#39;empreinte m&#xE8;ne &#xE0; la tumorigen&#xE8;se g&#xE9;n&#xE9;ralis&#xE9;e chez la souris adulte

Verlust der Pr&auml;gung (LOI), allgemein beobachtet in menschlichen Tumoren, bezieht sich auf Verlust der monoallelisches Genregulation normalerweise aus der Eltern-der-Ursprung-spezifische DNA-Methylierung. Um die Funktion des LOI in Tumorentstehung testen, entwickelten wir ein Modell mit transienten Demethylierung Impressum-freie M&auml;useder embryonalen Stammzellen (IF-ES-Zellen) zu generieren. Embryonale Fibroblasten (IF-MEFs) Display TGFbeta Widerstand von IF-ES Zellen abgeleitet und p19 und p53 Ausdruck und Form Tumoren SCID-M&auml;usen reduziert. IF-MEFs weisen spontane Immortalization und kooperieren mit H-Ras in zellul&auml;ren Transformation. Chim&auml;ren Tiere von IF-ES Zellen abgeleitet entwickeln mehrere Tumoren entstehen aus den eingef&uuml;gten IF-ES-Zellen innerhalb von 12 Monaten. Diese Daten zeigen, dass LOI allein kann Zellen zu Tumorentstehung pr&auml;disponieren und identifizieren einen Weg durch den Unsterblichkeit durch LOI gew&auml;hrten die Schwelle f&uuml;r Transformation absenkt.

Globalen Verlust der Pr&auml;gung f&uuml;hrt zu weit verbreiteten Tumorentstehung in Erwachsenen M&auml;usen.

Perdita di imprinting (LOI), comunemente osservati in tumori umani, si riferisce alla perdita della regolazione genica monoallelic normalmente conferiti dalla metilazione del DNA di padre di origine specifica. Per verificare la funzione di LOI nella tumorigenesi, abbiamo sviluppato un modello tramite demetilazione transitori per generare impronta-free mouse cellule staminali embrionali (cellule se-ES). Fibroblasti embrionali derivano da cellule ES IF (IF-MEFs) display TGFbeta resistenza e ridotto p19 e p53 espressione e forma i tumori nei topi SCID. Se-MEFs esibiscono spontanea immortalization e cooperare con H-Ras nella trasformazione cellulare. Chimerici animali derivati da cellule ES se sviluppano tumori multipli derivanti dalle cellule ES se iniettate entro 12 mesi. Questi dati dimostrano che LOI da solo pu&ograve; predisporre le cellule alla tumorigenesi e identificare un percorso attraverso il quale l&#39;immortalit&agrave; conferito dalla LOI abbassa la soglia per la trasformazione.

Perdita globale di imprinting conduce alla tumorigenesi diffusa in topi adulti.

&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x55AA;&#x5931;&#xFF08;LOI&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x89AA;&#x306E;&#x7531;&#x6765;&#x7279;&#x7570;&#x7684;DNA&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x4ED8;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;monoallelic&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x6307;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x816B;&#x760D;&#x3067;LOI&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;IF-ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;&#x8131;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x80DA;&#x6027;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;IF-ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;IF-MEF&#x306E;&#xFF09;&#x8868;&#x793A;TGFbeta&#x62B5;&#x6297;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3057;&#x3001;SCID&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306E;p19&#x304A;&#x3088;&#x3073;p53&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; IF-MEF&#x306F;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x306B;H-Ras&#x3068;&#x5354;&#x529B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; IF-ES&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x3001;12&#x30F6;&#x6708;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;IF-ES&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x63DB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3092;&#x4E0B;&#x3052;LOI&#x304C;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7D20;&#x56E0;&#x3068;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x306E;LOI&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x4ED8;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306B;&#x7D4C;&#x7531;&#x3059;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4E16;&#x754C;&#x7684;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5C0E;&#x304F;

&#xAC01; (&#xB85C;), &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xC704;&#xC758; &#xC6D0;&#xC0B0;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB828; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218; &#xC5EC; &#xD558;&#xB294; monoallelic &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xB9D0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Tumorigenesis&#xC5D0;&#xB85C; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC778;&#xC1C4;&#xBB3C; &#xBB34;&#xB8CC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (IF ES &#xC138;&#xD3EC;) &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xC784;&#xC2DC; demethylation&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; (IF MEFs) &#xB514;&#xC2A4;&#xD50C;&#xB808;&#xC774; TGFbeta &#xC800;&#xD56D; IF ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; p19&#xC640; p53 &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC591;&#xC2DD; &#xC885;&#xC591; SCID &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C;. IF MEFs &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; immortalization &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; h &#xC870;-Ras&#xC640; &#xD611;&#xB825;. IF ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; chimeric &#xB3D9;&#xBB3C; 12 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xC774;&#xB0B4;&#xC5D0; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; &#xACBD;&#xC6B0; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB85C; &#xD63C;&#xC790; &#xC140; tumorigenesis predispose &#xD558; &#xACE0; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBD88;&#xBA78;&#xC73C;&#xB85C;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xC218; &#xC5EC; &#xB0AE;&#xCD94;&#xACE0; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAC01; &#xC778; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC190;&#xC2E4; &#xC131;&#xC778; &#xC950;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; tumorigenesis&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La p&#xE9;rdida de la impronta (LOI), se observa com&#xFA;nmente en los tumores humanos, se refiere a la p&#xE9;rdida de la regulaci&#xF3;n g&#xE9;nica monoal&#xE9;lica normalmente conferido por los padres de origen espec&#xED;ficos de metilaci&#xF3;n del ADN. Para probar la funci&#xF3;n de la carta de intenci&#xF3;n en la tumorig&#xE9;nesis, hemos desarrollado un modelo mediante el uso de desmetilaci&#xF3;n transitoria para generar impronta libre de c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n (SI-ES c&#xE9;lulas). Fibroblastos embrionarios derivados de c&#xE9;lulas madre embrionarias (SI-SI-MEFs) la resistencia a la pantalla TGFbeta y la expresi&#xF3;n de p19 y p53 reducida y forman tumores en los ratones SCID. IF-MEFs muestran la inmortalizaci&#xF3;n espont&#xE1;nea y cooperar con H-Ras en la transformaci&#xF3;n celular. Animales quim&#xE9;ricos derivados de las c&#xE9;lulas-ES SI desarrollar tumores m&#xFA;ltiples que surgen de la inyecci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre embrionarias-SI dentro de los 12 meses. Estos datos demuestran que LOI solo puede predisponer a las c&#xE9;lulas a la tumorig&#xE9;nesis y identificar una v&#xED;a a trav&#xE9;s del cual la inmortalidad conferida por LOI reduce el umbral para la transformaci&#xF3;n.

La p&#xE9;rdida global de impresi&#xF3;n de datos lleva a Tumorig&#xE9;nesis generalizada en ratones adultos

&#x751F;&#x6B96;&#x6027;&#x514B;&#x9686;&#x662F;&#x7EDF;&#x4E00;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7531;&#x4E8E;&#x62D2;&#x7EDD;&#x514B;&#x9686;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x5F02;&#x5E38;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x514B;&#x9686;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7578;&#x53D8;&#x4E5F;&#x6709;&#x5173;&#x6CE8;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&quot;&#x5B9A;&#x5236;&quot;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (ES) &#x4ECE;&#x75C5;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6838;&#x79FB;&#x690D; (NT)&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x6F5C;&#x529B;&#x6765;&#x81EA;&#x514B;&#x9686;&#x56CA;&#x80DA; (NT-ES &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09; &#x7B49;&#x540C;&#x4E8E;&#x6765;&#x81EA;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x56CA;&#x80DA;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x8868;&#x5F81; NT-ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3002;&#x8C03;&#x67E5;&#x662F;&#x5426;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x7578;&#x53D8;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5728;&#x514B;&#x9686;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4E5F;&#x53D1;&#x751F;&#x5728; NT-ES &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E86;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56FE;&#x8C31; 10 &#x9F20;&#x6807; NT-&#x548C;&#x65BD;&#x80A5;-&#x6D3E;&#x751F;-ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D6;&#x81EA;&#x514B;&#x9686;&#x548C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x56CA;&#x80DA;&#x533A;&#x5206;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5176;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x5176;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x80CE;&#x513F;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#xFF0C;NT-ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x63A8;&#x5BFC;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E25;&#x683C;&#x9009;&#x4E2D;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4E0D;&#x673D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x62ED;&#x9664;&#x7684;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x6838;&quot;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x8BB0;&#x5FC6;&quot;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6210;&#x4E3A;&#x7B49;&#x540C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6982;&#x5FF5;&#x6E90;&#x81EA;&#x514B;&#x9686;&#x6216;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x7684;&#x56CA;&#x80DA;&#x7684; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x5177;&#x6709;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;

&#x6765;&#x81EA;&#x514B;&#x9686;&#x548C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x7684;&#x56CA;&#x80DA;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x6CA1;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x3002;

Reproductive cloning is uniformly rejected as a valid technology in humans because of the severely abnormal phenotypes seen in cloned animals. Gene expression aberrations observed in tissues of cloned animals have also raised concerns regarding the therapeutic application of "customized" embryonic stem (ES) cells derived by nuclear transplantation (NT) from a patient's somatic cells. Although previous experiments in mice have demonstrated that the developmental potential of ES cells derived from cloned blastocysts (NT-ES cells) is identical to that of ES cells derived from fertilized blastocysts, a systematic molecular characterization of NT-ES cell lines is lacking. To investigate whether transcriptional aberrations, similar to those observed in tissues of cloned mice, also occur in NT-ES cells, we have compared transcriptional profiles of 10 mouse NT- and fertilization-derived-ES cell lines. We report here that the ES cell lines derived from cloned and fertilized mouse blastocysts are indistinguishable based on their transcriptional profiles, consistent with their normal developmental potential. Our results indicate that, in contrast to embryonic and fetal development of clones, the process of NT-ES cell derivation rigorously selects for those immortal cells that have erased the "epigenetic memory" of the donor nucleus and, thus, become functionally equivalent. Our findings support the notion that ES cell lines derived from cloned or fertilized blastocysts have an identical therapeutic potential.

ES cells derived from cloned and fertilized blastocysts are transcriptionally and functionally indistinguishable.

Le clonage reproductif est uniform&#xE9;ment rejet&#xE9; comme une technologie valable chez les humains en raison des ph&#xE9;notypes fortement anormaux observ&#xE9;s dans les animaux clon&#xE9;s. Aberrations d&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes observ&#xE9;es dans les tissus d&#x26;#39;animaux clon&#xE9;s ont &#xE9;galement soulev&#xE9; des pr&#xE9;occupations quant &#xE0; l&#x26;#39;application th&#xE9;rapeutique de &#xAB;sur mesure&#xBB; souches embryonnaires (ES) des cellules d&#xE9;riv&#xE9;es par transplantation nucl&#xE9;aire (NT) &#xE0; partir de cellules somatiques d&#x26;#39;un patient. Bien que les exp&#xE9;riences pr&#xE9;c&#xE9;dentes sur des souris ont d&#xE9;montr&#xE9; que le potentiel de d&#xE9;veloppement des cellules souches embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;es &#xE0; partir de blastocystes clon&#xE9;s (NT-ES cellules) est identique &#xE0; celle des cellules souches embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;es &#xE0; partir de blastocystes f&#xE9;cond&#xE9;s, une caract&#xE9;risation syst&#xE9;matique mol&#xE9;culaire de lign&#xE9;es de cellules NT-ES est absente. Afin de d&#xE9;terminer si des aberrations de transcription, similaires &#xE0; ceux observ&#xE9;s dans les tissus des souris clon&#xE9;es, se produisent &#xE9;galement dans NT-ES cellules, nous avons compar&#xE9; les profils de transcription de 10 souris NT-et lignes de fertilisation-d&#xE9;riv&#xE9;e de cellules ES. Nous rapportons ici que les lign&#xE9;es de cellules ES d&#xE9;riv&#xE9;es de blastocystes de souris clon&#xE9;es et f&#xE9;cond&#xE9;s sont indiscernables en fonction de leurs profils transcriptionnels, compatible avec leur potentiel de d&#xE9;veloppement normal. Nos r&#xE9;sultats indiquent que, contrairement au d&#xE9;veloppement embryonnaire et foetal de clones, le processus de d&#xE9;rivation de cellules NT-ES s&#xE9;lectionne rigoureusement pour les cellules immortelles qui ont effac&#xE9; la &#xAB;m&#xE9;moire &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique&#xBB; du noyau donneur et, par cons&#xE9;quent, deviennent fonctionnellement &#xE9;quivalent. Nos r&#xE9;sultats appuient la notion que les lignes de cellules souches embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;es &#xE0; partir de blastocystes clon&#xE9;s ou f&#xE9;cond&#xE9;s ont un potentiel identique th&#xE9;rapeutique.

Les cellules ES d&#xE9;riv&#xE9;es de blastocystes clon&#xE9;s et fertilis&#xE9;es sont transcriptionnellement et fonctionnellement identique

Reproduktives Klonen ist einheitlich als g&uuml;ltige Technologie beim Menschen wegen der stark abnormalen Ph&auml;notypen, gesehen bei geklonten Tieren abgelehnt. Gen Ausdruck Aberrationen beobachtet in Geweben geklonter Tiere haben auch erh&ouml;hte Bedenken in Bezug auf die therapeutische Anwendung von &quot;ma&szlig;geschneiderten&quot; embryonale Stammzellen (ES) abgeleitet von nuklearen Transplantation (NT) von K&ouml;rperzellen des Patienten. Obwohl fr&uuml;here Experimente an M&auml;usen gezeigt haben, dass geklonte Blastozysten (NT-ES-Zellen) das entwicklungspolitischen Potenzial der ES Zellen abgeleitet ist identisch mit, dass der ES-Zellen aus befruchteten Blastozysten abgeleitet, eine systematische molekulare Charakterisierung von NT-ES-Zelllinien fehlt. Um zu untersuchen, ob transkriptionelle Aberrationen, &auml;hnlich denen in Geweben von geklonten M&auml;usen beobachtet auch auftreten in NT-ES-Zellen verglichen haben wir transkriptionelle Profile von 10 Zelle Maus NT - und Befruchtung-abgeleitet-ES Linien. Wir berichten hier, dass ES-Zelllinien von geklonten und befruchteten Maus abgeleitet, die Blastozysten basierend auf ihre transkriptionelle Profile, konsistente und deren normalen Entwicklungs-Potenzial zu unterscheiden sind. Unsere Ergebnisse zeigen, dass im Gegensatz zu embryonalen und fetalen Entwicklung der Klone, der Prozess der NT-ES Zelle Ableitung rigoros f&uuml;r diese unsterblichen Zellen, die haben gel&ouml;scht &quot;Epigenetische Ged&auml;chtnis&quot; des Spenders Kerns und ausw&auml;hlt, folglich, funktionell gleichwertig. Unsere Erkenntnisse unterst&uuml;tzen die Vorstellung, dass ES-Zelllinien, die aus geklonten oder befruchteten Blastozysten abgeleitet ein identische therapeutisches Potenzial haben.

ES Zellen abgeleitet von geklonten und befruchteten Blastozysten sind transcriptionally und funktionell nicht zu unterscheiden.

Clonazione riproduttiva &egrave; uniformemente respinto come una tecnologia valida negli esseri umani a causa dei fenotipi gravemente anormali visti negli animali clonati. Aberrazioni di espressione genica osservate nei tessuti degli animali clonati hanno anche sollevati preoccupazioni per quanto riguarda l&#39;applicazione terapeutica di &quot;personalizzato&quot; embryonic stem cells (ES) derivato da trapianto nucleare (NT) da cellule somatiche del paziente. Sebbene precedenti esperimenti nei topi hanno dimostrato che il potenziale di sviluppo delle cellule di ES derivata dalla blastocisti clonate (NT-ES cells) &egrave; identico alla che manca di cellule ES derivate da blastocisti fertilizzati, una sistematica caratterizzazione molecolare di linee cellulari-NT-ES. Per indagare se transcriptional aberrazioni, simili a quelli osservati nei tessuti di topi clonati, verificarsi anche in celle NT-ES, abbiamo confrontato i profili trascrizionali di 10 mouse NT - e fecondazione-derivato-ES cell lines. Segnaliamo qui che le linee di cellule ES derivavano da topo clonato e fecondato blastocisti sono indistinguibili basato sui loro profili trascrizionali, coerenti con le potenzialit&agrave; dello sviluppo normale. I nostri risultati indicano che, in contrasto con lo sviluppo embrionale e fetale di cloni, il processo di derivazione cellulare NT-ES seleziona rigorosamente per quelle cellule immortali che hanno cancellato la memoria&quot;epigenetica&quot; del nucleo donatore e, cos&igrave;, diventano funzionalmente equivalenti. I nostri risultati supportano la nozione che linee di cellule ES derivate da blastocisti clonate o fecondate hanno un identico potenziale terapeutico.

ES cellule derivate da blastocisti clonate e fecondati sono indistinguibili transcriptionally e funzionalmente.

&#x751F;&#x6B96;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x5747;&#x4E00;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x62D2;&#x5426;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x7570;&#x5E38;&#x306F;&#x3001;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#xFF08;NT&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5C0E;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F; &#x26;quot;&#x30AB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30DE;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x26;quot;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;ES&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x61F8;&#x5FF5;&#x3092;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x80DA;&#xFF08;NT-ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x7531;&#x6765;&#x306E;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80DA;&#x7531;&#x6765;&#x306E;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x4E00;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x304C;&#x3001;NT-ES&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x7279;&#x6027;&#x304C;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x53CE;&#x5DEE;&#x3082;&#x3001;NT-ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;10&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;NT-&#x3068;&#x53D7;&#x7CBE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;-ES&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x53D7;&#x7CBE;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x533A;&#x5225;&#x304C;&#x3064;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x80DA;&#x3068;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;&#x767A;&#x80B2;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;NT-ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5C0E;&#x51FA;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x6838;&#x306E; &#x26;quot;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x8A18;&#x61B6;&#x26;quot;&#x3092;&#x6D88;&#x53BB;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x7B49;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80DA;&#x7531;&#x6765;&#x306E;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x6982;&#x5FF5;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3068;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;

&#xC0DD;&#xC2DD; &#xBCF5;&#xC81C; &#xADE0;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2EC;&#xAC01; &#xD558; &#xAC8C; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xACE0;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC778;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC720;&#xD6A8;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xB85C; &#xAC70;&#xBD80; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xCC29;&#xC624; &#xB610;&#xD55C; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD575; &#xC774;&#xC2DD; (NT)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &quot;&#xC0AC;&#xC6A9;&#xC790; &#xC9C0;&#xC815;&quot; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC81C;&#xAE30; &#xBB38;&#xC81C;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xBCF5;&#xC81C; blastocysts (NT ES &#xC138;&#xD3EC;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xC9C0;&#xB9CC; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; blastocysts&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; NT ES &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC790; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xBD80;&#xC871; &#xB3D9;&#xC77C;. &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; transcriptional &#xCC29;&#xC624;, &#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; &#xC950;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xAC83;&#xACFC; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C;&#xB3C4; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; NT ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 10&#xC758; transcriptional &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xBE44;&#xAD50; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; NT-&#xBC0F; &#xC218;&#xC815;-&#xD30C;&#xC0DD;-ES &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; blastocysts transcriptional &#xD504;&#xB85C;&#xD544;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD074;&#xB860;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xBC0F; &#xD0DC;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;, &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; NT ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB3C4; &#xACFC;&#xC815; &quot;epigenetic &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC;&quot; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xD575;&#xC758; &#xC9C0; &#xC6E0; &#xACE0;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xB420; &#xADF8; &#xBD88;&#xBA78;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; &#xC120;&#xD0DD;, &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC120; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; &#xB610;&#xB294; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; blastocysts&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB3D9;&#xC77C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xC788;&#xB2E4; &#xAC1C;&#xB150;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

ES &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; blastocysts&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; transcriptionally &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La clonaci&#xF3;n reproductiva es rechazada de manera uniforme como una tecnolog&#xED;a v&#xE1;lida en los seres humanos a causa de los fenotipos anormales que se observan graves en los animales clonados. Aberraciones de expresi&#xF3;n de genes observados en los tejidos de animales clonados tambi&#xE9;n han planteado preocupaciones en relaci&#xF3;n con la aplicaci&#xF3;n terap&#xE9;utica de &#x26;quot;a medida&#x26;quot; madre embrionarias (ES) las c&#xE9;lulas obtenidas por transplante nuclear (NT) a partir de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas de un paciente. Aunque los experimentos anteriores en ratones han demostrado que el potencial de desarrollo de c&#xE9;lulas ES derivadas de blastocistos clonados (NT-ES c&#xE9;lulas) es id&#xE9;ntica a la de las c&#xE9;lulas embrionarias derivadas de blastocistos fertilizados, una caracterizaci&#xF3;n sistem&#xE1;tica molecular de l&#xED;neas celulares de NT-ES es insuficiente. Para investigar si las aberraciones de la transcripci&#xF3;n, similares a los observados en los tejidos de los ratones clonados, tambi&#xE9;n se producen en las c&#xE9;lulas madre embrionarias-NT, se han comparado los perfiles de transcripci&#xF3;n de rat&#xF3;n NT-10 y la fertilizaci&#xF3;n, derivado de l&#xED;neas celulares embrionarias. Presentamos aqu&#xED; que las l&#xED;neas de c&#xE9;lulas madre embrionarias derivadas de blastocistos clonados de rat&#xF3;n fertilizado y no se distinguen en funci&#xF3;n de sus perfiles de transcripci&#xF3;n, de acuerdo con su potencial de desarrollo normal. Nuestros resultados indican que, en contraste con el desarrollo embrionario y fetal de los clones, el proceso de derivaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas de NT-ES rigurosamente selecciona para esas c&#xE9;lulas inmortales que han borrado la &#x26;quot;memoria epigen&#xE9;tica&#x26;quot; del n&#xFA;cleo del donante y, por tanto, ser funcionalmente equivalentes. Nuestros hallazgos apoyan la idea de que las l&#xED;neas de c&#xE9;lulas madre embrionarias derivadas de blastocistos clonados o fertilizada tienen un potencial terap&#xE9;utico id&#xE9;ntico.

Las c&#xE9;lulas madre embrionarias derivadas de blastocistos clonados y fertilizados son Transcriptionally e indistinguible de vista funcional

&#x5176;&#x4E2D;&#x80DA;&#x80CE;&#x673A;&#x5236;&#x5E72; (ES) &#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x590D;&#x5F0F;&#x540C;&#x65F6;&#x4FDD;&#x6301;&#x5206;&#x5316;&#x6210;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x6210;&#x4EBA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x592A;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;Polycomb &#x7EC4; (PcG) &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684; repressors&#xFF0C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7EF4;&#x6301;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x540E;&#x751F;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;PcG &#x86CB;&#x767D;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E2D;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5F88;&#x5C11;&#x6709;&#x5176;&#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x5DF2;&#x77E5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; PcG &#x86CB;&#x767D;&#x76F4;&#x63A5;&#x6291;&#x5236;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5426;&#x5219;&#x5C06;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5206;&#x5316;&#x53D1;&#x80B2;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x4E00;&#x5927;&#x7FA4;&#x3002;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Polycomb &#x9547;&#x538B;&#x914D;&#x5408;&#x7269; PRC1 &#x548C; PRC2 co-occupied 512 &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x8BB8;&#x591A;&#x7F16;&#x7801;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E0E;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x5305;&#x542B;&#x7684; co-occupied &#x57FA;&#x56E0;&#x4FEE;&#x6539;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53; (trimethylated &#x5728;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H3 Lys 27&#xFF09;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x56E0;&#x679C;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#xFF0C;&#x76C8;&#x79D1;&#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D; PRC2 &#x7EC4;&#x4EF6;&#x7535;&#x706B;&#x5DE5;&#x54C1;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5E94;&#x4ED8;&#x4E86; de-repressed &#x548C;&#x4F18;&#x5148;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Polycomb &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8DEF;&#x5F84;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x9547;&#x538B;&#x53EF;&#x80FD;&#x9700;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x671F;&#x95F4;&#x7EF4;&#x6301; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#x4E0E;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3002;

Polycomb &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x6291;&#x5236;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;

The mechanisms by which embryonic stem (ES) cells self-renew while maintaining the ability to differentiate into virtually all adult cell types are not well understood. Polycomb group (PcG) proteins are transcriptional repressors that help to maintain cellular identity during metazoan development by epigenetic modification of chromatin structure. PcG proteins have essential roles in early embryonic development and have been implicated in ES cell pluripotency, but few of their target genes are known in mammals. Here we show that PcG proteins directly repress a large cohort of developmental regulators in murine ES cells, the expression of which would otherwise promote differentiation. Using genome-wide location analysis in murine ES cells, we found that the Polycomb repressive complexes PRC1 and PRC2 co-occupied 512 genes, many of which encode transcription factors with important roles in development. All of the co-occupied genes contained modified nucleosomes (trimethylated Lys 27 on histone H3). Consistent with a causal role in gene silencing in ES cells, PcG target genes were de-repressed in cells deficient for the PRC2 component Eed, and were preferentially activated on induction of differentiation. Our results indicate that dynamic repression of developmental pathways by Polycomb complexes may be required for maintaining ES cell pluripotency and plasticity during embryonic development.

Polycomb complexes repress developmental regulators in murine embryonic stem cells.

Les m&#xE9;canismes par lesquels les souches embryonnaires (ES) cellules s&#x26;#39;auto-renouveler, tout en maintenant la capacit&#xE9; de se diff&#xE9;rencier en pratiquement tous les types de cellules adultes ne sont pas bien comprises. Groupe Polycomb (PcG) sont des prot&#xE9;ines r&#xE9;presseurs de la transcription qui aident &#xE0; maintenir l&#x26;#39;identit&#xE9; cellulaire au cours du d&#xE9;veloppement des m&#xE9;tazoaires par modification &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique de structure de la chromatine. Prot&#xE9;ines PcG ont un r&#xF4;le essentiel dans le d&#xE9;veloppement embryonnaire pr&#xE9;coce et ont &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s dans la pluripotence cellulaire ES, mais quelques-uns de leurs g&#xE8;nes cibles sont connus chez les mammif&#xE8;res. Ici, nous montrons que les prot&#xE9;ines PcG directement r&#xE9;primer une large cohorte de r&#xE9;gulateurs du d&#xE9;veloppement dans les cellules ES murines, l&#x26;#39;expression de ce qui serait contraire favoriser la diff&#xE9;renciation. En utilisant l&#x26;#39;&#xE9;chelle du g&#xE9;nome analyse de la localisation dans les cellules ES murines, nous avons constat&#xE9; que les complexes Polycomb r&#xE9;pressives prc1 et PRC2 co-occup&#xE9;s 512 g&#xE8;nes, dont un grand nombre codent pour des facteurs de transcription avec des r&#xF4;les importants dans le d&#xE9;veloppement. Tous les g&#xE8;nes co-occup&#xE9;s contenues nucl&#xE9;osomes modifi&#xE9;s (trim&#xE9;thyl&#xE9;e Lys 27 sur l&#x26;#39;histone H3). Conform&#xE9;ment &#xE0; un r&#xF4;le causal dans l&#x26;#39;extinction de g&#xE8;nes dans les cellules ES, PcG g&#xE8;nes cibles ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;-r&#xE9;prim&#xE9;s dans les cellules d&#xE9;ficientes pour la composante PRC2 EED, et ont &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;f&#xE9;rentiellement activ&#xE9;e sur l&#x26;#39;induction de la diff&#xE9;renciation. Nos r&#xE9;sultats indiquent que la r&#xE9;pression de la dynamique des voies de d&#xE9;veloppement par des complexes Polycomb peut &#xEA;tre n&#xE9;cessaire pour maintenir la pluripotence des cellules ES et de la plasticit&#xE9; au cours du d&#xE9;veloppement embryonnaire.

Complexes Polycomb R&#xE9;primer r&#xE9;gulateurs du d&#xE9;veloppement dans les cellules souches embryonnaires murines

Die Mechanismen der embryonalen Stammzellen (ES) self-renew und gleichzeitig die M&ouml;glichkeit, in praktisch allen Erwachsenen Zellentypen sind nicht gut verstanden. Polycomb-Gruppe (PcG)-Proteine sind transkriptionelle Repressoren, die helfen, um zellul&auml;re Identit&auml;t w&auml;hrend indem Entwicklung durch epigenetische Ver&auml;nderungen von Chromatin-Struktur zu erhalten. PcG-Proteine haben wesentliche Rollen in der fr&uuml;hen embryonalen Entwicklung und haben in ES Zelle Pluripotenz verwickelt worden, aber nur wenige ihrer Zielgene sind bei S&auml;ugetieren bekannt. Hier zeigen wir, dass die PcG-Proteine direkt eine gro&szlig;e Kohorte der Entwicklungsbiologie Regulierungsbeh&ouml;rden im murinen ES-Zellen, unterdr&uuml;cken der Ausdruck davon ansonsten Differenzierung f&ouml;rdern w&uuml;rde. Mit genomweiten Standortanalyse in murinen ES-Zellen, fanden wir, dass die repressive Polycomb-komplexe PRC1 und PRC2 Gene 512, co-occupied, von die viele &Uuml;bertragungfaktoren mit wichtigen Rollen in der Entwicklung kodieren. Alle die co-occupied Gene enthalten ge&auml;ndert Nucleosomes (Trimethylated Lys 27 auf Histon H3). In &Uuml;bereinstimmung mit eine kausale Rolle bei der Gen-silencing in ES-Zellen, PcG-Zielgene wurden de-repressed in den Zellen f&uuml;r die PRC2-Komponente Eed mangelhaft und wurden bevorzugt auf Induktion der Differenzierung aktiviert. Unsere Ergebnisse zeigen, dass dynamische Unterdr&uuml;ckung der Entwicklungsbiologie Gr&ouml;&szlig;enordung von Polycomb-komplexe f&uuml;r die Aufrechterhaltung der ES Zelle Pluripotenz und Plastizit&auml;t w&auml;hrend der Embryonalentwicklung.

Polycomb-komplexe Entwicklungsst&ouml;rungen Regulatoren in murinen embryonalen Stammzellen zu unterdr&uuml;cken.

I meccanismi con cui embrionali staminali cellule (ES) self-renew pur mantenendo la capacit&agrave; di differenziarsi in quasi tutti i tipi di cellule adulte non sono ben compresi. Le proteine del Polycomb gruppo (PcG) sono repressori trascrizionali che aiutano a mantenere identit&agrave; cellulare durante lo sviluppo di metazoi di modificazione epigenetica della struttura della cromatina. Proteine PcG hanno ruoli essenziali dello sviluppo embrionale precoce e sono state implicate in pluripotenza delle cellule ES, ma pochi di loro geni bersaglio sono noti nei mammiferi. Qui vi mostriamo che le proteine PcG reprimono direttamente una grande coorte dei regolatori dello sviluppo in cellule ES murine, l&#39;espressione di cui altrimenti sarebbe promuovere la differenziazione. Utilizzando l&#39;analisi genome-wide posizione nelle cellule ES murine, abbiamo trovato che i complessi di Polycomb repressivi PRC1 e PRC2 co-occupied 512 geni, molti dei quali codificano i fattori di trascrizione con ruoli importanti nello sviluppo. Tutti i geni co-occupied contenuti modificati nucleosomi (trimetilato Lys 27 su istone H3). Coerente con un ruolo causale nel silenziamento genico in cellule ES, PcG geni bersaglio furono de-repressed in cellule carenti per il componente PRC2 Eed e sono stati attivati preferenzialmente sull&#39;induzione di differenziazione. I nostri risultati indicano che repressione dinamica di sviluppo percorsi di Polycomb complessi pu&ograve; essere necessaria per mantenere la pluripotenza delle cellule ES e plasticit&agrave; durante lo sviluppo embrionale.

Polycomb complessi reprimono regolatori dello sviluppo in cellule staminali embrionali murine.

&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6210;&#x4EBA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;ES&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x7FA4;&#xFF08;PCG&#xFF09;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304C;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PCG&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x30B3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C9;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x6291;&#x5727;&#x7684;&#x306A;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;PRC1&#x3068;PRC2&#x5171;&#x540C;&#x5360;&#x9818;&#x4E0B;512&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x591A;&#x304F;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5171;&#x540C;&#x5360;&#x9818;&#x4E0B;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x304C;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H3&#x306E;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;27&#x30C8;&#x30EA;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#xFF09;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x56E0;&#x679C;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;PRC2&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x8131;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;EED&#x3068;&#x3001;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x767A;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x6291;&#x5727;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x3068;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;

&#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES) &#xC138;&#xD3EC; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC131;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; self-renew. Polycomb &#xADF8;&#xB8F9; (PcG) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; transcriptional repressors metazoan &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; chromatin &#xAD6C;&#xC870; epigenetic &#xAC1C;&#xC870;&#xB098; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. PcG &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC774; ES &#xC138;&#xD3EC; pluripotency&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBA87;&#xBA87; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; PcG &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC9C1;&#xC811; &#xD558;&#xB294; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD64D;&#xBCF4; &#xADF8;&#xB807;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA74; &#xAC83; murine ES &#xC138;&#xD3EC; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xB300;&#xD615; &#xCF54; &#xD638;&#xD2B8; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC8C;&#xB188; &#xB113;&#xC740; &#xC704;&#xCE58; &#xBD84;&#xC11D; murine ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Polycomb &#xC5B5;&#xC555; &#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xC9C0; PRC1 &#xBC0F; PRC2 co-occupied&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xACFC; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; 512 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; co-occupied &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; nucleosomes (trimethylated H3 &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4;&#xC5D0; &#xB9AC;&#xC2A4; 27) &#xC218;&#xC815;. ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35;&#xC5D0; &#xC778;&#xACFC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;, PcG &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xACB0;&#xD54D; Eed, PRC2 &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC140;&#xC5D0; de-repressed &#xD588;&#xB2E4;&#xC640; &#xBD84;&#xD654;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; Polycomb &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC801; &#xC5B5;&#xC555; ES &#xC138;&#xD3EC; pluripotency&#xC640; &#xC18C;&#xC131; &#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Polycomb &#xB2E8;&#xC9C0; &#xCC38;&#xB2E4; murine &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C;.

Los mecanismos por los que madre embrionarias (ES) las c&#xE9;lulas auto-renovarse, mientras que el mantenimiento de la capacidad de diferenciarse en pr&#xE1;cticamente todos los tipos de c&#xE9;lulas adultas no son bien entendidos. Grupo Polycomb (PCG) las prote&#xED;nas son represores transcripcionales que ayudan a mantener la identidad celular durante el desarrollo de los metazoos por la modificaci&#xF3;n epigen&#xE9;tica de la estructura de la cromatina. PcG prote&#xED;nas tienen un papel esencial en el desarrollo embrionario temprano y se han implicado en la celda ES pluripotencia, pero pocos de sus genes diana son conocidos en los mam&#xED;feros. Aqu&#xED; nos muestran que las prote&#xED;nas PcG directamente a reprimir una gran cohorte de los reguladores del desarrollo en c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n, la expresi&#xF3;n de que de otra manera promover la diferenciaci&#xF3;n. Uso de todo el genoma an&#xE1;lisis de la ubicaci&#xF3;n en c&#xE9;lulas madre embrionarias murinas, se encontr&#xF3; que los complejos Polycomb represivas PRC1 y PRC2 co-ocupados 512 genes, muchos de los que codifican factores de transcripci&#xF3;n con papeles importantes en el desarrollo. Todos los genes co-ocupados contenida nucleosomas modificados trimetilada Lys 27 en la histona H3). De acuerdo con un papel causal en el silenciamiento de genes en c&#xE9;lulas madre embrionarias, PCG genes diana se de-reprimida en las c&#xE9;lulas deficientes para el componente de PRC2 Eed, y fueron activadas preferentemente en la inducci&#xF3;n de diferenciaci&#xF3;n. Nuestros resultados indican que la represi&#xF3;n din&#xE1;mica de las v&#xED;as de desarrollo de complejos Polycomb pueden ser necesarios para el mantenimiento de c&#xE9;lulas ES pluripotencia y la plasticidad durante el desarrollo embrionario.

Los complejos Polycomb reprimir Reguladores del desarrollo de c&#xE9;lulas madre embrionarias murinas

&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#x56DE;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x91CD;&#x65B0;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x548C;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x521B;&#x5EFA;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x6216;&#x4EA7;&#x751F;&#x80DA;&#x80CE;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6838;&#x514B;&#x9686;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7528;&#x4E8E;&#x63A8;&#x5BFC;&#x7684;&#x5B9A;&#x5236; (ES) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7279;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6280;&#x672F;&#x548C;&#x4F26;&#x7406;&#x7684;&#x8003;&#x8651;&#x59A8;&#x788D;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E94;&#x7528;&#x8FD9;&#x9879;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x5230;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7684;&#x72B6;&#x6001;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5C06;&#x4F53;&#x5916;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Oct4 &#xFF08;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A; Oct3/4 &#x6216; Pou5f1&#xFF09;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7; Sox2&#x3001; Klf4 &#x548C; C-myc&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x72B6;&#x6001;&#x5927;&#x81F4;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6D3E;&#x751F;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5F62;&#x6210;&#x53EF;&#x884C;&#x767D;&#x9CA8;&#x3001; &#x53EF;&#x4EE5;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x80DA;&#x82BD;&#x884C;&#x548C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x751F;&#x6210;&#x6D3B;&#x665A;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x65F6;&#x6CE8;&#x5165;&#x56DB;&#x500D;&#x4F53;&#x56CA;&#x80DA;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x751F;&#x7269;&#x6548;&#x4EF7;&#x548C;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x72B6;&#x6001;&#x533A;&#x5206;&#x90A3;&#x4E9B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x8FDB;&#x5165; es &#x7EC6;&#x80DE;&#x80DA;&#x80CE;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x3002;

Nuclear transplantation can reprogramme a somatic genome back into an embryonic epigenetic state, and the reprogrammed nucleus can create a cloned animal or produce pluripotent embryonic stem cells. One potential use of the nuclear cloning approach is the derivation of 'customized' embryonic stem (ES) cells for patient-specific cell treatment, but technical and ethical considerations impede the therapeutic application of this technology. Reprogramming of fibroblasts to a pluripotent state can be induced in vitro through ectopic expression of the four transcription factors Oct4 (also called Oct3/4 or Pou5f1), Sox2, c-Myc and Klf4. Here we show that DNA methylation, gene expression and chromatin state of such induced reprogrammed stem cells are similar to those of ES cells. Notably, the cells-derived from mouse fibroblasts-can form viable chimaeras, can contribute to the germ line and can generate live late-term embryos when injected into tetraploid blastocysts. Our results show that the biological potency and epigenetic state of in-vitro-reprogrammed induced pluripotent stem cells are indistinguishable from those of ES cells.

In vitro reprogramming of fibroblasts into a pluripotent ES-cell-like state.

Transplantation nucl&#xE9;aire peut reprogrammer un g&#xE9;nome somatique de retour dans un &#xE9;tat embryonnaire &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique, et le noyau reprogramm&#xE9; pouvez cr&#xE9;er un animal clon&#xE9; ou de produire des cellules souches embryonnaires pluripotentes. Une utilisation potentielle de l&#x26;#39;approche de clonage nucl&#xE9;aire est la d&#xE9;rivation de &#xAB;sur mesure&#xBB; souches embryonnaires (ES) cellules pour le traitement de cellules sp&#xE9;cifiques au patient, mais des consid&#xE9;rations techniques et &#xE9;thiques obstacle &#xE0; l&#x26;#39;application th&#xE9;rapeutique de cette technologie. Reprogrammation des fibroblastes &#xE0; un &#xE9;tat pluripotent peut &#xEA;tre induite in vitro par l&#x26;#39;expression ectopique des quatre facteurs de transcription Oct4 (&#xE9;galement appel&#xE9; Oct3 / 4 ou Pou5f1), Sox2, c-Myc et Klf4. Ici, nous montrons que la m&#xE9;thylation d&#x26;#39;ADN, l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes et de l&#x26;#39;&#xE9;tat de chromatine de ces cellules souches induites reprogramm&#xE9;es sont semblables &#xE0; celles des cellules souches embryonnaires. Notamment, les cellules provenant de souris-des fibroblastes-peuvent former des chim&#xE8;res viables, peuvent contribuer &#xE0; la lign&#xE9;e germinale et peut g&#xE9;n&#xE9;rer en direct la fin du terme embryons lorsqu&#x26;#39;il est inject&#xE9; dans des blastocystes t&#xE9;traplo&#xEF;des. Nos r&#xE9;sultats montrent que l&#x26;#39;activit&#xE9; biologique et de l&#x26;#39;&#xE9;tat &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique de in-vitro reprogramm&#xE9;es cellules souches pluripotentes induites sont indiscernables de ceux des cellules souches embryonnaires.

In Vitro reprogrammation de fibroblastes dans un pluripotentes ES-cellulaire, comme l&#x26;#39;&#xC9;tat

Nukleare Transplantation kann eine somatische Genoms wieder in einem embryonalen epigenetische Zustand umzuprogrammieren und umprogrammiert Kern eine geklonte Tier zu erstellen oder zu pluripotenten embryonalen Stammzellen kann. Eine m&ouml;gliche Verwendung des nuklearen Klonen Ansatzes die Ableitung ist &#39;angepasst&#39; embryonale Stammzellen (ES) f&uuml;r die Zellenbehandlung von Patienten-spezifischen, aber technische und ethische &Uuml;berlegungen behindern die therapeutische Anwendung dieser Technologie. Eine Anpassung der Fibroblasten in einen pluripotenten Zustand kann durch ektopische Expression von den vier Transkriptionsfaktoren Oct4 (auch mit Oct3/4 oder Pou5f1 genannt), in-vitro induzierte werden Sox2, c-Myc und Klf4. Hier zeigen wir, dass DNA-Methylierung, Gen Ausdruck und Chromatin Staat solche induzierten umprogrammiert Zellen &auml;hneln denen von ES-Zellen. Insbesondere der Zellen abgeleiteten aus Maus-Fibroblasten-Dose bilden lebensf&auml;hige Chim&auml;ren, kann dazu beitragen, die Keimbahn und Leben sp&auml;t-Begriff-Embryonen, wenn in tetraploide Blastozysten injiziert generieren k&ouml;nnen. Unsere Ergebnisse zeigen, dass die biologische Wirksamkeit und epigenetische Zustand der in-Vitro-umprogrammiert induzierten pluripotenten Stammzellen aus der ES-Zellen zu unterscheiden sind.

In Vitro eine Anpassung der Fibroblasten in einen pluripotenten ES-Zelle-&auml;hnlichen Zustand.

Trapianto nucleare pu&ograve; riprogrammare un genoma somatico torna in uno stato embrionale epigenetico, e il nucleo riprogrammato pu&ograve; creare un animale clonato o produrre cellule staminali embrionali pluripotenti. Un potenziale utilizzo dell&#39;approccio clonazione nucleare &egrave; la derivazione del &#39;su misura&#39; le cellule staminali embrionali (ES) per il trattamento delle cellule specifiche del paziente, ma considerazioni tecniche ed etiche impediscono l&#39;applicazione terapeutica di questa tecnologia. Riprogrammazione dei fibroblasti a uno stato pluripotente pu&ograve; essere indotta in vitro attraverso espressione ectopica i quattro fattori di trascrizione (chiamato anche Oct3/4 o Pou5f1) di Oct4, Sox2, c-Myc e Klf4. Qui vi mostriamo che la metilazione del DNA, gene expression e cromatina stato di tale indotte le cellule staminali riprogrammate sono simili a quelli delle cellule di ES. In particolare, le cellule derivate dai fibroblasti del mouse pu&ograve; formare chimere vitali, pu&ograve; contribuire alla linea germinale e pu&ograve; generare embrioni di fine legislatura live Quando iniettato in blastocisti tetraploidi. I nostri risultati mostrano che la potenza biologica e stato epigenetico delle cellule staminali pluripotenti indotte in-vitro-riprogrammate sono indistinguibili da quelli delle cellule di ES.

In vitro riprogrammazione dei fibroblasti in uno stato di pluripotent ES-cella-like.

&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x623B;&#x3059;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3092;reprogramme&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6838;&#x306F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x52D5;&#x7269;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6838;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;1&#x3064;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x60A3;&#x8005;&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; &#x26;quot;&#x30AB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30DE;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x26;quot;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;ES&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6280;&#x8853;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x502B;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x8003;&#x616E;&#x4E8B;&#x9805;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;&#x3002;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;4&#x3064;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;Oct4&#x306E;&#xFF08;&#x307E;&#x305F;&#x3001;Oct3 / 4&#x306E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;Pou5f1&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#xFF09;&#x3001;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;c-Myc&#x304A;&#x3088;&#x3073;KLF4&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;in vitro&#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;DNA&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3084;&#x8A98;&#x5C0E;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x72B6;&#x614B;&#x306F;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x56DB;&#x500D;&#x4F53;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x6B96;&#x7CFB;&#x5217;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x5F8C;&#x671F;&#x80DA;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x52B9;&#x529B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D3;&#x30C8;&#x30ED;&#xB7;&#x66F8;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x72B6;&#x614B;&#x306F;&#x3001;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x533A;&#x5225;&#x304C;&#x3064;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

in vitro&#x3067;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x69D8;&#x72B6;&#x614B;&#x3078;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x200B;&#x200B;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;

&#xD575; &#xC774;&#xC2DD; &#xBC30;&#xC544; epigenetic &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xAC8C;&#xB188; reprogramme &#xC218; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC124;&#xC815;&#xB41C; &#xD575; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xAC70;&#xB098; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xD575; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC758; &#xD30C;&#xC0DD;&#xC740; &#39;&#xB9DE;&#xCDA4;&#xD615;&#39; &#xD658;&#xC790; &#xAD00;&#xB828; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC220;&#xC801;, &#xC724;&#xB9AC;&#xC801; &#xACE0;&#xB824; &#xC0AC;&#xD56D;. 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; Oct4 (Oct3/4 &#xB610;&#xB294; Pou5f1 &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xD568;), &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xCCB4; &#xC678; &#xC720;&#xB3C4; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xAC8C;&#xC7AC;&#xC758; &#xC7AC;&#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; Sox2, klf4&#xC640; c-Myc. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAC19;&#xC740; &#xC720;&#xB3C4; &#xC7AC;&#xC124;&#xC815;&#xB41C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; chromatin &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB294; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC83;&#xACFC; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xC140; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAC8C;&#xC7AC; &#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; chimaeras, &#xC138;&#xADE0; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC591;&#xC2DD;&#xACFC; tetraploid blastocysts&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xB2A6;&#xC740; &#xAE30;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xACFC; &#xB2E4;&#xC2DC;&#xC5D0;-&#xCCB4; &#xC678;-&#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; epigenetic &#xC0C1;&#xD0DC; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00; pluripotent ES &#xC138;&#xD3EC; &#xAC19;&#xC740; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xAC8C;&#xC7AC;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;.

Trasplante nuclear puede reprogramar el genoma som&#xE1;tica de nuevo en un estado epigen&#xE9;tico embrionario, y reprogramar el n&#xFA;cleo puede crear un animal clonado o producir c&#xE9;lulas madre embrionarias pluripotentes. Un uso potencial del enfoque de la clonaci&#xF3;n nuclear es la derivaci&#xF3;n de &#x26;#39;personalizada&#x26;#39; madre embrionarias (ES) las c&#xE9;lulas para el tratamiento celular espec&#xED;fica del paciente, pero las consideraciones t&#xE9;cnicas y &#xE9;ticas impiden la aplicaci&#xF3;n terap&#xE9;utica de esta tecnolog&#xED;a. La reprogramaci&#xF3;n de los fibroblastos a un estado pluripotente puede ser inducida in vitro a trav&#xE9;s de la expresi&#xF3;n ect&#xF3;pica de los cuatro factores de transcripci&#xF3;n Oct4 (tambi&#xE9;n llamado Oct3 / 4 o Pou5f1), Sox2, c-Myc y Klf4. Aqu&#xED; nos muestran que la metilaci&#xF3;n del ADN, la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica y el estado de la cromatina de tales c&#xE9;lulas inducidas madre reprogramadas son similares a los de las c&#xE9;lulas ES. Notablemente, las c&#xE9;lulas derivadas de rat&#xF3;n-fibroblastos-pueden formar quimeras viables, pueden contribuir a la l&#xED;nea germinal y puede generar vivos tard&#xED;os embriones cuando se inyectan en blastocistos tetraploides. Nuestros resultados muestran que la potencia biol&#xF3;gica y el estado epigen&#xE9;tico de la in-vitro reprogramado las c&#xE9;lulas madre pluripotentes inducidas son indistinguibles de los de c&#xE9;lulas madre embrionarias.

In Vitro La reprogramaci&#xF3;n de fibroblastos en un pluripotentes de c&#xE9;lulas TE, como Estado

&#x6700;&#x8FD1;&#x5DF2;&#x5F97;&#x5230;&#x5C55;&#x793A;&#x9F20;&#x6807;&#x548C;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x5230;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x72B6;&#x6001;&#x901A;&#x8FC7;&#x5F15;&#x5165;&#x56DB;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x4ECD;&#x672A;&#x754C;&#x5B9A;&#x7684;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x5E72; (iPS) &#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x4EBA;&#x6027;&#x5316;&#x7684;&#x9570;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D2B;&#x8840;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5C0F;&#x9F20;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6551;&#x51FA;&#x540E;&#x4ECE;&#x81EA;&#x4F53; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x9020;&#x8840;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x83B7;&#x5F97;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x9570;&#x72B6;&#x8840;&#x7EA2;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x6821;&#x6B63;&#x540E;&#x7531;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x5B9E;&#x73B0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E3A;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x91CD;&#x65B0;&#x7ED3;&#x5408;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x6CBB;&#x7597;&#x5C0F;&#x9F20;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BC1;&#x660E;&#x7684;&#x539F;&#x5219;&#x3002;&#x7528;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x548C;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#x9700;&#x8981;&#x89E3;&#x51B3; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89C6;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E4B;&#x524D;&#x3002;

&#x6CBB;&#x7597;&#x9570;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D2B;&#x8840;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x4E0E;&#x81EA;&#x4F53;&#x76AE;&#x80A4;&#x4ECE;&#x751F;&#x6210;&#x7684; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

It has recently been demonstrated that mouse and human fibroblasts can be reprogrammed into an embryonic stem cell-like state by introducing combinations of four transcription factors. However, the therapeutic potential of such induced pluripotent stem (iPS) cells remained undefined. By using a humanized sickle cell anemia mouse model, we show that mice can be rescued after transplantation with hematopoietic progenitors obtained in vitro from autologous iPS cells. This was achieved after correction of the human sickle hemoglobin allele by gene-specific targeting. Our results provide proof of principle for using transcription factor-induced reprogramming combined with gene and cell therapy for disease treatment in mice. The problems associated with using retroviruses and oncogenes for reprogramming need to be resolved before iPS cells can be considered for human therapy.

Treatment of sickle cell anemia mouse model with iPS cells generated from autologous skin.

Il a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; r&#xE9;cemment que les fibroblastes de souris et humaines peuvent &#xEA;tre reprogramm&#xE9;es en cellules souches une forme de l&#x26;#39;&#xE9;tat embryonnaire en introduisant des combinaisons de quatre facteurs de transcription. Cependant, le potentiel th&#xE9;rapeutique des cellules souches pluripotentes induites de ces (iPS) est rest&#xE9; ind&#xE9;fini. En utilisant une cellule humanis&#xE9; faucille souris an&#xE9;mie mod&#xE8;le, nous montrons que les souris peuvent &#xEA;tre sauv&#xE9;es apr&#xE8;s la transplantation avec des prog&#xE9;niteurs h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques obtenus in vitro &#xE0; partir de cellules iPS autologues. Ceci a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9; apr&#xE8;s correction de l&#x26;#39;all&#xE8;le h&#xE9;moglobine faucille humaine par le ciblage sp&#xE9;cifique d&#x26;#39;un g&#xE8;ne. Nos r&#xE9;sultats fournissent la preuve de principe pour l&#x26;#39;utilisation du facteur de transcription induit une reprogrammation combin&#xE9;e avec la th&#xE9;rapie g&#xE9;nique et cellulaire pour le traitement des maladies chez les souris. Les probl&#xE8;mes li&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;utilisation des r&#xE9;trovirus oncog&#xE8;nes et pour la reprogrammation doivent &#xEA;tre r&#xE9;solus avant que les cellules iPS peuvent &#xEA;tre consid&#xE9;r&#xE9;s pour la th&#xE9;rapie humaine.

Traitement du mod&#xE8;le de cellules de souris avec des cellules de faucille An&#xE9;mie IPS produites &#xE0; partir de la peau autologue

&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#x53EF;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D; Oct4&#x3001; Sox2&#x3001; Klf4 &#x548C; C-myc &#x7684;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x5236;&#x8BA2;&#x4E86;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56DB;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x8868;&#x793A;&#x4ECE;&#x591A;&#x897F;&#x73AF;&#x7D20; &#xFF08;&#x6CA1;&#x6709;&#xFF09;-&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x6784;&#x9020;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (iPS) &#x6765;&#x81EA;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE; (MEFs)&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5148;&#x51B3;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x8BC4;&#x9009;&#x6807;&#x8BB0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x9F20;&#x6807; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x63A8;&#x5BFC;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x78B1;&#x6027;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; (AP) &#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8DDF;&#x7279;&#x5B9A;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x6297;&#x539F; 1 (SSEA1)&#x3002;&#x5728;&#x6D41;&#x7A0B;&#x7684;&#x665A;&#x671F;&#x53EA;&#x89C2;&#x5BDF; Nanog &#x4E0E;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; Oct4 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x6807;&#x5FD7;&#x7740;&#x5B8C;&#x5168;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5F0F;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x6269;&#x589E;&#x6240;&#x9700;&#x5C06;&#x81F3;&#x5C11; 12 &#x5929;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x751F;&#x6210; iPS &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x662F;&#x4E00;&#x6B65;&#x4E86;&#x89E3;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5173;&#x4E8E;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

&#x8BC4;&#x9009;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F4;&#x63A5;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x65F6;&#x5E8F;&#x6027;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Pluripotency can be induced in differentiated murine and human cells by retroviral transduction of Oct4, Sox2, Klf4, and c-Myc. We have devised a reprogramming strategy in which these four transcription factors are expressed from doxycycline (dox)-inducible lentiviral vectors. Using these inducible constructs, we derived induced pluripotent stem (iPS) cells from mouse embryonic fibroblasts (MEFs) and found that transgene silencing is a prerequisite for normal cell differentiation. We have analyzed the timing of known pluripotency marker activation during mouse iPS cell derivation and observed that alkaline phosphatase (AP) was activated first, followed by stage-specific embryonic antigen 1 (SSEA1). Expression of Nanog and the endogenous Oct4 gene, marking fully reprogrammed cells, was only observed late in the process. Importantly, the virally transduced cDNAs needed to be expressed for at least 12 days in order to generate iPS cells. Our results are a step toward understanding some of the molecular events governing epigenetic reprogramming.

Sequential expression of pluripotency markers during direct reprogramming of mouse somatic cells.

Pluripotence peut &#xEA;tre induite dans les cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es murines et humaines par transduction r&#xE9;trovirale de Oct4, Sox2, Klf4, et c-Myc. Nous avons &#xE9;labor&#xE9; une strat&#xE9;gie de reprogrammation dans laquelle ces quatre facteurs de transcription sont exprim&#xE9;s &#xE0; partir de la doxycycline (Dox)-inductible vecteurs lentiviraux. L&#x26;#39;utilisation de ces constructions inductibles, nous avons d&#xE9;riv&#xE9; de cellules souches pluripotentes induites (iPS) &#xE0; partir de fibroblastes embryonnaires de souris (MEF) et j&#x26;#39;ai trouv&#xE9; que l&#x26;#39;inhibition de transg&#xE8;ne est une condition pr&#xE9;alable &#xE0; la diff&#xE9;renciation cellulaire normale. Nous avons analys&#xE9; le moment de l&#x26;#39;activation marqueur connu pluripotence cellulaire au cours de la souris d&#xE9;rivation iPS et a observ&#xE9; que la phosphatase alcaline (AP) a &#xE9;t&#xE9; activ&#xE9;e en premier, suivie de l&#x26;#39;&#xE9;tape de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne sp&#xE9;cifique embryonnaire 1 (SSEA1). L&#x26;#39;expression de Nanog et le g&#xE8;ne endog&#xE8;ne Oct4, marquage de cellules enti&#xE8;rement reprogramm&#xE9;, n&#x26;#39;a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e que tardivement dans le processus. Surtout, les ADNc Virally transduites besoin d&#x26;#39;&#xEA;tre exprim&#xE9; pendant au moins 12 jours afin de g&#xE9;n&#xE9;rer des cellules iPS. Nos r&#xE9;sultats sont une &#xE9;tape vers la compr&#xE9;hension de certains des &#xE9;v&#xE9;nements mol&#xE9;culaires qui r&#xE9;gissent la reprogrammation &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique.

Expression s&#xE9;quentielle de marqueurs de pluripotence lors de la reprogrammation directe de cellules somatiques de souris

Pluripotenz kann durch retrovirale Transduktion von Oct4, Sox2, Klf4 und c-Myc in differenzierten murinen und menschlichen Zellen induziert werden. Wir haben geplant, eine Neuprogrammierung Strategie, in der diese vier Transkriptionsfaktoren von Doxycyclin (Dox) ausgedr&uuml;ckt werden-durch Induktion erh&auml;ltlichen Lentiviralen Vektoren. Verwenden diese durch Induktion Konstrukte, wir M&auml;useembryonalen (MEFs) induzierten pluripotenten Stammzellen (iPS) abgeleitet und festgestellt, dass Transgene Unterdr&uuml;ckender Voraussetzung f&uuml;r normale Zelldifferenzierung. Wir haben das Timing der bekannten Pluripotenz Markierung Aktivierung w&auml;hrend Maus IPS-Zelle Ableitung analysiert und beobachtet, dass alkalische Phosphatase (AP) zuerst aktiviert wurde, gefolgt von embryonalen Stadium-spezifische-Antigen 1 (SSEA1). Ausdruck von Nanog und endogenen gen Oct4, Kennzeichnung vollst&auml;ndig umprogrammiert Zellen, wurde nur sp&auml;t im Prozess beobachtet. Wichtig ist, die Viral transduzierten cDNAs musste mindestens 12 Tage ausgedr&uuml;ckt werden, um iPS-Zellen zu generieren. Unsere Ergebnisse sind ein Schritt in Richtung Verst&auml;ndnis einiger der EZB epigenetischen Reprogrammierung molekularen Ereignisse.

Sequenzielle Ausdruck der Pluripotenz Marker w&auml;hrend direkte Neuprogrammierung der Maus somatischen Zellen.

Pluripotenza pu&ograve; essere indotta in cellule differenziate murine ed umane di trasduzione retrovirale di Oct4, Sox2, Klf4 e c-Myc. Noi abbiamo messo a punto una strategia di riprogrammazione in cui sono espressi questi fattori di quattro trascrizione da doxiciclina (dox)-inducible vettori lentivirali. Utilizzando questi costrutti inducibili, abbiamo derivato le cellule formative (iPS) pluripotenti indotte da fibroblasti embrionali (MEFs) e ha trovato che tacere transgene &egrave; un prerequisito per la differenziazione delle cellule normali. Abbiamo analizzato i tempi di attivazione marcatore noto pluripotenza durante la derivazione di cellule iPS mouse e osserva che della fosfatasi alcalina (AP) &egrave; stata attivata prima, seguita dalla fase specifica dell&#39;antigene embrionale 1 (SSEA1). Espressione di Nanog e il gene endogeno di Oct4, marcatura completamente riprogrammate cellule, &egrave; stata osservata solo alla fine del processo. Soprattutto, i cDNAs viralmente trasdotte doveva essere espresso per almeno 12 giorni al fine di generare le cellule iPS. I nostri risultati sono un passo verso la comprensione di alcuni degli eventi molecolari che regolano la riprogrammazione epigenetica.

Espressione sequenza dei marcatori di pluripotenza durante la diretta riprogrammazione di cellule somatiche del mouse.

&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306F;&#x3001;Oct4&#x306E;&#x3001;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;KLF4&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;c-Myc&#x306E;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5F62;&#x8CEA;&#x5C0E;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;4&#x3064;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30C9;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;DOX&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x8003;&#x6848;&#x3057;&#x305F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;MEF&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;iPS&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x524D;&#x63D0;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4E2D;&#x306B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;AP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x80CE;&#x5150;&#x6027;&#x6297;&#x539F;1&#xFF08;SSEA1&#xFF09;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Nanog&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;Oct4&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x307F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x9045;&#x3044;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;iPS&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;12&#x65E5;&#x9593;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;cDNA&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x4E8B;&#x8C61;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B69;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E2D;&#x306B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x5F0F;

Pluripotency &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; murine &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; Oct4, Sox2, Klf4, &#xBC0F; c-Myc&#xC758; retroviral &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; doxycycline (dox)&#xC5D0;&#xC11C; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC774;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xACE0;&#xC548;-&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; lentiviral &#xBCA1;&#xD130;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; (iPS) &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; (MEFs)&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBC0F; transgene &#xC785;&#xC744; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC804;&#xC81C; &#xC870;&#xAC74; &#xC784;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; iPS &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; pluripotency &#xB9C8;&#xCEE4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; (AP) &#xBA3C;&#xC800;, &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xACC4; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC30;&#xC544; &#xD56D; &#xC6D0; 1 (SSEA1) &#xB4A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30;. Nanog&#xC640; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xC7AC;&#xC124;&#xC815;&#xB41C; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC0DD; Oct4 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xACFC;&#xC815; &#xD6C4;&#xBC18;&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, virally transduced cDNAs iPS &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 12 &#xC77C; &#xD45C;&#xD604; &#xB420; &#xD544;&#xC694;&#xAC00; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; epigenetic &#xC7AC;&#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xD1B5;&#xCE58; &#xBD84;&#xC790; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC911; &#xC77C;&#xBD80;&#xB97C; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC21C;&#xCC28; &#xC2DD; pluripotency &#xB9C8;&#xCEE4;&#xC758; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;.

Pluripotencia puede ser inducida en c&#xE9;lulas diferenciadas de murinos y humanos por la transducci&#xF3;n retroviral de Oct4, Sox2, Klf4 y c-Myc. Hemos dise&#xF1;ado una estrategia de reprogramaci&#xF3;n en la que estos cuatro factores de transcripci&#xF3;n se expresan a partir de doxiciclina (DOX)-inducible lentiviral vectores. El uso de estas construcciones inducible, hemos derivado madre pluripotentes inducidas (iPS) a partir de fibroblastos embrionarios de rat&#xF3;n (MEFs) y descubrieron que el silenciamiento del transg&#xE9;n es un requisito previo para la diferenciaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas normales. Hemos analizado la temporizaci&#xF3;n de la activaci&#xF3;n conocido marcador pluripotencia durante derivaci&#xF3;n rat&#xF3;n c&#xE9;lula iPS y observ&#xF3; que la fosfatasa alcalina (AP) se activ&#xF3; primero, seguido por la etapa espec&#xED;fica de ant&#xED;geno embrionario 1 (SSEA1). Expresi&#xF3;n de Nanog y el gen end&#xF3;geno Oct4, marcando c&#xE9;lulas totalmente reprogramadas, s&#xF3;lo se observ&#xF3; tarde en el proceso. Es importante destacar que los cDNAs de manera viral por transducidas necesaria para ser expresado por lo menos durante 12 d&#xED;as con el fin de generar c&#xE9;lulas iPS. Nuestros resultados son un paso hacia la comprensi&#xF3;n de algunos de los eventos moleculares que regulan la reprogramaci&#xF3;n epigen&#xE9;tica.

La expresi&#xF3;n secuencial de los marcadores de pluripotencia durante la reprogramaci&#xF3;n directa de c&#xE9;lulas de rat&#xF3;n som&#xE1;ticos

(Mirna) &#x5C0F;&#x5206;&#x5B50; rna &#x662F;&#x5173;&#x952E; (ES) &#x6B63;&#x5E38;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x7C73;&#x5C14;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4E0D;&#x6210;&#x7ACB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x6B64;&#x5904;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7535;&#x8DEF;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x53EF;&#x7EB3;&#x5165;&#x4E86;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7F16;&#x7801;&#x548C;&#x7C73;&#x5C14;&#x57FA;&#x56E0;&#x57FA;&#x4E8E;&#x82AF;&#x7247; seq &#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x7C73;&#x5C14;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#xFF0C;&#x6709;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5730;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x7684;&#x77ED;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x4E2D;&#x591A;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5173;&#x952E;&#x7684; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684; Mirna &#x4F18;&#x5148;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E00;&#x5957;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7C73;&#x5C14;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;&#x7C73;&#x5C14;&#x57FA;&#x56E0;&#x8FD9;&#x6C89;&#x9ED8;&#x5957; Polycomb &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; co-occupied&#xFF0C;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x4E2D;&#x5206;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5982;&#x4F55;&#x5173;&#x952E; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FC3;&#x8FDB; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x7C73;&#x5C14;&#x8868;&#x8FBE;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06; Mirna &#x7EB3;&#x5165;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7535;&#x8DEF;&#x63A7;&#x5236; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x3002;

&#x8FDE;&#x63A5;&#x5230;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x7535;&#x8DEF;&#x6838;&#x5FC3;&#x7684; microRNA &#x57FA;&#x56E0;&#x3002;

MicroRNAs (miRNAs) are crucial for normal embryonic stem (ES) cell self-renewal and cellular differentiation, but how miRNA gene expression is controlled by the key transcriptional regulators of ES cells has not been established. We describe here the transcriptional regulatory circuitry of ES cells that incorporates protein-coding and miRNA genes based on high-resolution ChIP-seq data, systematic identification of miRNA promoters, and quantitative sequencing of short transcripts in multiple cell types. We find that the key ES cell transcription factors are associated with promoters for miRNAs that are preferentially expressed in ES cells and with promoters for a set of silent miRNA genes. This silent set of miRNA genes is co-occupied by Polycomb group proteins in ES cells and shows tissue-specific expression in differentiated cells. These data reveal how key ES cell transcription factors promote the ES cell miRNA expression program and integrate miRNAs into the regulatory circuitry controlling ES cell identity.

Connecting microRNA genes to the core transcriptional regulatory circuitry of embryonic stem cells.

Les microARN (miARN) sont cruciales pour la normale tige (ES) de cellules embryonnaires d&#x26;#39;auto-renouvellement et la diff&#xE9;renciation cellulaire, mais comment miRNA l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes est contr&#xF4;l&#xE9;e par les r&#xE9;gulateurs cl&#xE9;s de la transcription de cellules souches embryonnaires n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tablie. Nous d&#xE9;crivons ici les circuits de r&#xE9;gulation transcriptionnelle des cellules souches embryonnaires, qui int&#xE8;gre des prot&#xE9;ines et des g&#xE8;nes codant miARN bas&#xE9; sur haute r&#xE9;solution ChIP-seq donn&#xE9;es, l&#x26;#39;identification syst&#xE9;matique des promoteurs miARN et le s&#xE9;quen&#xE7;age des transcrits courts quantitative dans plusieurs types de cellules. Nous constatons que les facteurs cl&#xE9;s de cellules ES de transcription sont associ&#xE9;s avec des promoteurs pour miARN qui sont pr&#xE9;f&#xE9;rentiellement exprim&#xE9;s dans les cellules ES et avec les promoteurs pour un ensemble de g&#xE8;nes silencieux miRNA. Cet ensemble de g&#xE8;nes silencieux miRNA est co-occup&#xE9; par des prot&#xE9;ines Polycomb groupe dans les cellules ES et des spectacles expression tissu-sp&#xE9;cifique dans des cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es. Ces donn&#xE9;es r&#xE9;v&#xE8;lent la fa&#xE7;on dont les principaux facteurs de transcription cellulaires ES promouvoir la cellule ES expression du miARN programme et d&#x26;#39;int&#xE9;grer les miARN dans les circuits de contr&#xF4;le de l&#x26;#39;identit&#xE9; de r&#xE9;glementation des cellules ES.

Connexion g&#xE8;nes microARN pour le circuit de base de la r&#xE9;glementation de la transcription des cellules souches embryonnaires

MicroRNAs (MiRNAs) sind entscheidend f&uuml;r den normalen embryonalen Stammzellen (ES) Zelle Selbsterneuerung und zellul&auml;re Differenzierung, wie MiRNA-Genexpression durch die wichtigsten transkriptionelle Regulatoren der ES-Zellen gesteuert wird ist aber nicht gekl&auml;rt. Wir beschreiben hier die transkriptionelle regulatorische Schaltungen ES Zellen, die Protein-kodierenden enth&auml;lt und MiRNA-Gene auf hochaufl&ouml;senden ChIP-Seq-Daten, systematische Ermittlung von MiRNA Promotoren und quantitative Sequenzierung der kurzen Transkripte in mehrere Zelltypen. Wir finden, dass ES Zelle Transkription Schl&uuml;sselfaktoren Promotoren f&uuml;r MiRNAs, die bevorzugt in ES-Zellen exprimiert werden und Promotoren f&uuml;r eine Reihe von stillen MiRNA Genen zugeordnet. Diese Stille MiRNA Gene ist co-occupied von Polycomb Gruppe Proteine in ES-Zellen und Gewebe-spezifischen Ausdruck in differenzierten Zellen zeigt. Diese Daten zeigen, wie Schl&uuml;ssel ES Zelle Transkriptionsfaktoren f&ouml;rdern das ES Zelle MiRNA-Ausdruck-Programm und MiRNAs in der beh&ouml;rdlichen Schaltungen Steuern ES Zelle Identit&auml;t zu integrieren.

Die Kern transkriptionelle regulatorischen Schaltung von embryonalen Stammzellen MicroRNA Gene herstellen.

MicroRNA (miRNAs) &egrave; fondamentali per la cellula normale staminali embrionali (ES) auto-rinnovamento e differenziazione cellulare, ma come espressione di gene di miRNA &egrave; controllata dal chiavi regolatori trascrizionali di cellule ES non &egrave; stata stabilita. Descriviamo qui la circuiteria normativa trascrizionale di cellule ES che incorpora la codificazione della proteina e geni di miRNA basato su dati ad alta risoluzione di ChIP-seq, identificazione sistematica dei promotori di miRNA e sequenziamento quantitativo delle trascrizioni breve in pi&ugrave; tipi di cellule. Troviamo che i principali fattori di trascrizione delle cellule ES sono associati con promotori per miRNAs preferenzialmente espressi in cellule ES e promotori per un set di geni di miRNA silenzioso. Questo silenzio set di geni di miRNA &egrave; co-occupied da proteine gruppo Polycomb in cellule ES e mostra espressione tessuto-specifica in cellule differenziate. Questi dati rivelano come fattori di trascrizione delle cellule chiave ES promuovere il programma di espressione ES cella miRNA e integrano miRNAs la circuiteria normativa controllo identit&agrave; cella ES.

Geni microRNA collegamento ai circuiti regolatori transcriptional nucleo delle cellule staminali embrionali.

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#xFF08;miRNA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;ES&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;miRNA&#x306E;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306E;ChIP-seq&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3001;miRNA&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x540C;&#x5B9A;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x77ED;&#x3044;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3068;miRNA&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3093;&#x3060;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56DE;&#x8DEF;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x304C;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;miRNA&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;miRNA&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; miRNA&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x767A;&#x73FE;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x7FA4;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x5171;&#x540C;&#x5360;&#x6709;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x304C;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;miRNA&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30FC;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56DE;&#x8DEF;&#x306B;miRNA&#x3092;&#x7D71;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;

&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56DE;&#x8DEF;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B;

MicroRNAs (miRNAs) &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC; &#xC790;&#xCCB4; &#xAC31;&#xC2E0; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; miRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC124;&#xB9BD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCF54;&#xB529;&#xC744; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; transcriptional &#xADDC;&#xC81C; &#xD68C;&#xB85C; &#xC124;&#xBA85; &#xBC0F; miRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xCE69; seq, miRNA &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xC9E7;&#xC740; &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xC758; &#xC591;&#xC801; &#xC5F0;&#xC18D;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD0A4; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB294; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; Mirnas&#xC5D0; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xCE68;&#xBB35; miRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xC774; &#xC790;&#xB3D9; miRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790; Polycomb &#xADF8;&#xB8F9; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; co-occupied &#xC9D1;&#xD569;&#xACFC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD0A4; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; ES &#xC140; &#xBBF8;&#xB974; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xD64D;&#xBCF4; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xACFC; miRNAs ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xADDC;&#xC81C; &#xD68C;&#xB85C;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569;.

MicroRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; transcriptional &#xADDC;&#xC81C; &#xD68C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los microARN (miRNA) son cruciales para el normal madre embrionarias (ES) de c&#xE9;lulas auto-renovaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n celular, pero &#xBF;c&#xF3;mo la expresi&#xF3;n de genes miRNA es controlada por los principales reguladores de la transcripci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre embrionarias no se ha establecido. Se describe aqu&#xED; el circuito de regulaci&#xF3;n transcripcional de c&#xE9;lulas madre embrionarias, que incorpora la codificaci&#xF3;n de prote&#xED;nas y los genes miARN basadas en el chip-ss datos de alta resoluci&#xF3;n, la identificaci&#xF3;n sistem&#xE1;tica de los promotores de miRNA y la secuencia cuantitativa de las transcripciones de corta duraci&#xF3;n en m&#xFA;ltiples tipos de c&#xE9;lulas. Encontramos que los principales factores de transcripci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre embrionarias est&#xE1;n asociados con los promotores de miRNAs que se expresa preferentemente en c&#xE9;lulas madre embrionarias y con los promotores de un conjunto de genes miRNA en silencio. Este conjunto de silencio de los genes miARN es co-ocupado por las prote&#xED;nas del grupo Polycomb en c&#xE9;lulas madre embrionarias y programas de expresi&#xF3;n tejido-espec&#xED;fica en las c&#xE9;lulas diferenciadas. Estos datos revelan que los principales factores de transcripci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre embrionarias promover el programa de c&#xE9;lulas ES miARN expresi&#xF3;n y la integraci&#xF3;n de los miRNAs en los circuitos reguladores que controlan la identidad de la c&#xE9;lula ES.

Tobias Brambrink

Whitehead Institute for Biomedical Research, Massachusetts Institute of Technology

Generating iPS Cells from MEFS through Forced Expression of Sox-2, Oct-4, c-Myc, and Klf4