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Optimized Protocol for Efficient Transfection of Dendritic Cells without Cell Maturation

Dendritic cells (DCs) can be considered sentinels of the immune system which play a critical role in its initiation and response to infection1. Detection ...

Mount Sinai School of Medicine 

El presente estudio evalu&oacute; el estado de sesgo de memoria congruente de humor en las tareas de la memoria impl&iacute;cita amenaza informaci&oacute;n relacionada. Una revisi&oacute;n de literatura complementado por tres experimentos en alta y baja los participantes de la ansiedad rasgo no encontrados ning&uacute;n sesgo de memoria impl&iacute;cita para informaci&oacute;n relacionada con la amenaza en individuos ansiosos en terminaci&oacute;n de fragmento de palabra o en tareas de identificaci&oacute;n de la palabra taquistosc&oacute;pica. Se discuten las implicaciones te&oacute;ricas de estos resultados.

En el estado de sesgo de memoria impl&iacute;cita en la ansiedad.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5FC3;&#x5883;&#x4E00;&#x81F4;&#x6027;&#x8BB0;&#x5FC6;&#x4E2D;&#x7684;&#x504F;&#x89C1;&#x5A01;&#x80C1;&#x7684;&#x5185;&#x9690;&#x8BB0;&#x5FC6;&#x4EFB;&#x52A1;&#x72B6;&#x6001;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x6587;&#x732E;&#x7EFC;&#x8FF0;&#x8F85;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BF9;&#x9AD8;&#x3001; &#x4F4E;&#x7279;&#x8D28;&#x7126;&#x8651;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8005;&#x53D1;&#x73B0;&#x6CA1;&#x6709;&#x5185;&#x9690;&#x8BB0;&#x5FC6;&#x504F;&#x5DEE;&#x4E3A;&#x5355;&#x8BCD;&#x7247;&#x6BB5;&#x5B8C;&#x6210;&#x6216;&#x6B67;&#x4E49;&#x8BCD; word &#x8BC6;&#x522B;&#x4EFB;&#x52A1;&#x4E0A;&#x7126;&#x8651;&#x4E2A;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x5A01;&#x80C1;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x7406;&#x8BBA;&#x542F;&#x793A;&#x3002;

&#x5173;&#x4E8E;&#x5185;&#x9690;&#x8BB0;&#x5FC6;&#x4E2D;&#x7684;&#x504F;&#x89C1;&#x7126;&#x8651;&#x7684;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;

The present study evaluated the status of mood congruent memory bias in implicit memory tasks for threat related information. A literature review complemented by three experiments on high and low trait anxiety participants found no implicit memory bias for threat-related information in anxious individuals on either word fragment completion or tachistoscopic word identification tasks. The theoretical implications of these results are discussed.

On the status of implicit memory bias in anxiety.

La pr&eacute;sente &eacute;tude a &eacute;valu&eacute; l&#39;&eacute;tat de partialit&eacute; m&eacute;moire congruentes humeur dans des t&acirc;ches de m&eacute;moire implicite pour menace informations connexes. Une revue de la litt&eacute;rature compl&eacute;t&eacute;e par trois exp&eacute;riences sur hautes et basses participants d&#39;anxi&eacute;t&eacute; trait ne trouv&eacute;s aucun biais de m&eacute;moire implicite pour plus d&#39;informations li&eacute;es &agrave; la menace dans les personnes anxieuses sur ach&egrave;vement de fragment de mot ou t&acirc;ches d&#39;identification word Tachistoscopique. Les auteurs discutent les implications th&eacute;oriques de ces r&eacute;sultats.

Sur le statut des biais de m&eacute;moire implicite dans l&#39;anxi&eacute;t&eacute;.

Die vorliegende Studie bewertet den Status der Stimmung kongruent Speicher Bias in der impliziten Ged&auml;chtnis-Aufgaben f&uuml;r die Bedrohung Verwandte Informationen. Eine Literatur&uuml;bersicht erg&auml;nzt durch drei Experimente auf hohen und niedrigen Merkmal Angst Teilnehmer fanden keine implizite Ged&auml;chtnis Voreingenommenheit Bedrohung-relevante Informationen in den besorgten Einzelpersonen auf Fragment Wortvervollst&auml;ndigung oder Tachistoskopischer Word-Identifikation-Aufgaben. Die theoretischen Implikationen dieser Ergebnisse werden diskutiert.

&Uuml;ber den Status des impliziten Ged&auml;chtnis Bias in der Angst.

Il presente studio ha valutato lo status di bias di memoria congruenti umore in compiti di memoria implicita per minaccia informazioni correlate. Una revisione della letteratura completata da tre esperimenti su alti e bassi i partecipanti di ansia di tratto non trovati alcun bias di memoria implicita per informazioni relative alla minaccia in individui ansiosi sul completamento della parola frammento o attivit&agrave; di identificazione Tachitoscopico parola. Vengono discusse le implicazioni teoriche di questi risultati.

Sullo status di bias di memoria implicita in ansia.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x8105;&#x5A01;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x8A18;&#x61B6;&#x8AB2;&#x984C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6C17;&#x5206;&#x4E00;&#x81F4;&#x8A18;&#x61B6;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x72B6;&#x614B;&#x8A55;&#x4FA1;&#x95A2;&#x9023;&#x60C5;&#x5831;&#x3002;&#x6587;&#x732E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B; 3 &#x3064;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x9AD8;&#x4F4E;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x8105;&#x5A01;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x5FC3;&#x914D;&#x3057;&#x3001;&#x500B;&#x4EBA;&#x3067;&#x5358;&#x8A9E;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x88DC;&#x5B8C;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8996;&#x77E5;&#x899A;&#x5358;&#x8A9E;&#x540C;&#x5B9A;&#x30BF;&#x30B9;&#x30AF;&#x6F5C;&#x5728;&#x8A18;&#x61B6;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x7279;&#x6027;&#x4E0D;&#x5B89;&#x53C2;&#x52A0;&#x8005;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x7684;&#x542B;&#x610F;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6F5C;&#x5728;&#x8A18;&#x61B6;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x3002;

&#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD3C9;&#xAC00;&#xC758; &#xC704;&#xD611;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC554;&#xC2DC;&#xC801; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xC791;&#xC5C5;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBD84; &#xD569;&#xB3D9; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xBC14;&#xC774;&#xC5B4;&#xC2A4; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xAD00;&#xB828; &#xC815;&#xBCF4;. &#xBB38;&#xD559; &#xAC80;&#xD1A0; &#xBCF4;&#xC644; &#xD558; &#xC5EC; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xB192;&#xACE0; &#xB0AE;&#xC740; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD88;&#xC548; &#xCC38;&#xAC00;&#xC790; &#xB2E8;&#xC5B4; &#xC870;&#xAC01; &#xC644;&#xB8CC; &#xB610;&#xB294; tachistoscopic &#xB2E8;&#xC5B4; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC791;&#xC5C5;&#xC5D0; &#xBD88;&#xC548; &#xAC1C;&#xC778;&#xC758; &#xC704;&#xD611; &#xAD00;&#xB828; &#xC815;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC554;&#xC2DC;&#xC801; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xBC14;&#xC774;&#xC5B4;&#xC2A4; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC774;&#xB860;&#xC801; &#xC758;&#xBBF8; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBD88;&#xC548;&#xC5D0; &#xC554;&#xC2DC;&#xC801; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xBC14;&#xC774;&#xC5B4;&#xC2A4; &#xC0C1;&#xD0DC;.

&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1&#xFF09; 1 &#x578B;&#x548C;&#x952E;&#x5165; 2 (HSV-2) &#x662F;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x751F;&#x6D3B;&#x548C;&#x91CD;&#x65B0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x75BE;&#x75C5;&#x6216;&#x521D;&#x6B21;&#x611F;&#x67D3;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7684;&#x9644;&#x8FD1;&#x3002;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x75B1;&#x75B9;-1 &#x611F;&#x67D3;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#xFF0C;&#x6709;&#x5BF9;&#x6709;&#x6548;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x6253;&#x5B57;&#x8BCA;&#x65AD;&#x7684;&#x9700;&#x6C42;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CD;&#x65B0;&#x8003;&#x8651;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5236;&#x8BA2;&#x4E09;&#x671F;&#x514D;&#x75AB;&#x6253;&#x5B57;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x548C;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 2 &#x682A;&#x75C5;&#x6BD2; ICP4&#x3001; ICP27 &#x548C; VP22 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7535;&#x6CF3;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7387;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B64;&#x7ACB;&#x548C; immunotyped 5 &#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x682A;&#x6765;&#x81EA;&#x53E3;&#x9762;&#x90E8;&#xFF0C;&#x773C;&#x90E8;&#xFF0C;&#x548C;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x533A;&#x540C;&#x65F6;&#x4ECE;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x533A;&#x57DF; 2 &#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 2 &#x682A;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4F18;&#x70B9;&#x5305;&#x62EC;&#x5176;&#x4E00;&#x822C;&#x6027;&#x6280;&#x672F;&#x7B80;&#x5355;&#x3001; &#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x548C;&#x660E;&#x786E;&#x952E;&#x5165;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x9884;&#x8BA1;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5C06;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x533A;&#x5206;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x83B7;&#x5F97;&#x3002;

&#x4E3A;&#x5206;&#x5316;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x7684;&#x518D;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x3002;

Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) and type 2 (HSV-2) are ubiquitous human pathogens that infect their hosts for life and reactivate to cause disease at or near the initial site of infection. As the incidence of genital HSV-1 infections increase, there is an increased demand for valid viral typing diagnostics. In this report, we reconsidered and developed a triple-phase immune-typing procedure that compares differences in electrophoretic mobilities of viral ICP4, ICP27, and VP22 proteins between HSV-1 and HSV-2 strains. We isolated and immunotyped 5 primary HSV-1 strains derived from orofacial, ocular, and genital areas along with 2 primary HSV-2 strains from the genital area. Advantages of this methodology include its general technical simplicity, sensitivity, and ability to definitively type HSV. It is anticipated that this methodology will be useful in distinguishing viruses obtained in clinical cultures.

Reconsideration of viral protein immunoblotting for differentiation of human herpes simplex viruses.

Le virus de l&#39;herp&egrave;s simplex de type 1 (HSV-1) et de type 2 (HSV-2) sont des pathog&egrave;nes humains omnipr&eacute;sents qui infectent leurs h&ocirc;tes pour la vie et de la r&eacute;activer pour causer des maladies ou &agrave; proximit&eacute; du site initial de l&#39;infection. Comme l&#39;incidence de l&#39;augmentation d&#39;infections g&eacute;nitale HSV-1, il y a une demande accrue pour le diagnostic de typage viral valide. Dans ce rapport, nous avons r&eacute;examin&eacute; et d&eacute;velopp&eacute; une proc&eacute;dure de saisie immunitaire triphas&eacute;s qui compare les diff&eacute;rences dans les mobilit&eacute;s &eacute;lectrophor&eacute;tiques des prot&eacute;ines virales, ICP4, ICP27 et VP22 entre les souches HSV-1 et HSV-2. Nous avons isol&eacute; et immunotyped 5 souches de HSV-1 primaires issu d&#39;oro-faciale, oculaires et g&eacute;nitales domaines ainsi que de 2 souches de HSV-2 primaires de la r&eacute;gion g&eacute;nitale. Avantages de cette m&eacute;thode sont sa simplicit&eacute; technique g&eacute;n&eacute;rale, la sensibilit&eacute; et la capacit&eacute; de dactylographier d&eacute;finitivement HSV. Il est pr&eacute;vu que cette m&eacute;thodologie sera utile pour distinguer les virus obtenus dans les cultures de cliniques.

R&eacute;examen de la prot&eacute;ine virale immunoblotting de diff&eacute;renciation des virus de l&#39;herp&egrave;s humain.

Herpes-Simplex-Virus Typ 1 (HSV-1) und Typ 2 (HSV-2) sind allgegenw&auml;rtige menschliche Krankheitserreger, die ihre Hosts f&uuml;r Leben und reaktivieren, um an oder nahe der urspr&uuml;nglichen Ort der Infektion Borreliose infizieren. Als die Inzidenz der genitalen HSV-1 Infektionen erh&ouml;hen gibt es eine verst&auml;rkte Nachfrage nach g&uuml;ltigen virale Diagnostik tippen. In diesem Bericht haben wir neu &uuml;berdacht und ein dreifach-Phase immun-Eingabe Verfahren, die Unterschiede in der elektrophoretischen Mobilit&auml;ten von Virusproteinen ICP4, ICP27 und VP22 Steuern zwischen HSV-1 und HSV-2 St&auml;mme vergleicht entwickelt. Wir isoliert und Immunotyped 5 prim&auml;ren HSV-1-St&auml;mme aus Orofacial, okul&auml;re und genitalen Bereiche zusammen mit 2 prim&auml;ren HSV-2 Sorten im Genitalbereich. Vorteile dieser Methodik sind seine allgemeine technische Einfachheit, die Sensibilit&auml;t und die F&auml;higkeit, HSV endg&uuml;ltig zu geben. Es wird erwartet, dass diese Methodik nutzen bei der Unterscheidung von Viren, die in klinischen Kulturen gewonnen werden.

Erneute Pr&uuml;fung der viral Protein Immunoblotting zur Differenzierung der menschlichen Herpes-Simplex-Viren.

Virus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) e tipo 2 (HSV-2) sono agenti patogeni umani onnipresenti che infettano i loro padroni di casa per la vita e riattivare per causare la malattia o in prossimit&agrave; del sito iniziale di infezione. Come l&#39;incidenza dell&#39;aumento di infezioni genitale HSV-1, c&#39;&egrave; un aumento della domanda per la diagnostica di tipizzazione virale valido. In questa relazione, abbiamo riconsiderato e sviluppato una procedura di tipizzazione immunitaria trifase che confronta le differenze di mobilit&agrave; elettroforetica delle proteine virali ICP4, ICP27 e VP22 tra i ceppi di HSV-1 e HSV-2. Abbiamo isolato e immunotyped 5 primarie HSV-1 ceppi derivano da orofacciale, oculari e genitali aree insieme a 2 primarie HSV-2 ceppi dalla zona genitale. I vantaggi di questa metodologia includono sua generale semplicit&agrave; tecnica, sensibilit&agrave; e capacit&agrave; di tipo definitivamente HSV. Si prevede che questa metodologia sar&agrave; utile nel distinguere virus ottenuti nelle culture cliniche.

Riconsiderazione della proteina virale immunoblotting per differenziazione di human herpes simplex virus.

&#x5358;&#x7D14;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; 1 &#xFF08;HSV-1&#xFF09; &#x3068;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; 2 &#xFF08;HSV-2) &#x539F;&#x56E0;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x3084;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x4EBA;&#x751F;&#x3068;&#x518D;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6027;&#x5668;&#x306E; HSV-1 &#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x7387;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6709;&#x52B9;&#x306A;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x8A3A;&#x65AD;&#x306E;&#x9700;&#x8981;&#x5897;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x518D;&#x8003;&#x3057;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; ICP4&#x3001;ICP27&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; VP22 &#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6; 1 HSV &#x3068; HSV-2 &#x7CFB;&#x7D71;&#x9593;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EB;&#x76F8;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3001;&#x9854;&#x9762;&#x3001;&#x773C;&#x3068;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x9818;&#x57DF;&#x6027;&#x5668;&#x304B;&#x3089; 2 &#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; HSV-2 &#x7CFB;&#x7D71;&#x304A;&#x3088;&#x3073; immunotyped 5 &#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; HSV-1 &#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x7531;&#x6765;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x306B;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3055;&#x3001;&#x611F;&#x5EA6;&#x3001;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B; HSV &#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x304C;&#x81E8;&#x5E8A;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x5316;&#x3072;&#x3068;&#x5358;&#x7D14;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x518D;&#x8003;&#x3002;

&#xD5E4; &#xB974; &#xD398; &#xC2A4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC21C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 1 (HSV-1)&#xC744; &#xC785;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; &#xC785;&#xB825; 2 (HSV-2)&#xB294; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC6D0;&#xC778; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xB610;&#xB294; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xD604;&#xC7A5; &#xADFC;&#xCC98;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xD65C; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC;. &#xC131; &#xAE30; HSV-1 &#xAC10;&#xC5FC; &#xC99D;&#xAC00; &#xBD80;&#xAC01; &#xC720;&#xD6A8;&#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC785;&#xB825; &#xC9C4;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC694; &#xC99D;&#xAC00; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xAC80;&#xD1A0; &#xD558; &#xACE0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; ICP4, ICP27, &#xBC0F; VP22 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; mobilities HSV 1&#xACFC; HSV-2 &#xBCC0;&#xC885; &#xAC04;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558;&#xB294; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC785;&#xB825; &#xC808;&#xCC28;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACE0;&#xB9BD; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; 2 &#xC8FC; HSV-2 &#xBCC0;&#xC885; &#xD568;&#xAED8; orofacial, &#xB208;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; immunotyped 5 &#xAE30;&#xBCF8; HSV-1 &#xC885;&#xC790;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC7A5;&#xC810;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C;&#xBC18; &#xAE30;&#xC220; &#xB2E8;&#xC21C;, &#xAC10;&#xB3C4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xACB0;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; HSV&#xB97C; &#xC785;&#xB825; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC740; &#xC784;&#xC0C1; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC608;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04; &#xD5E4; &#xB974; &#xD398; &#xC2A4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC21C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4; &#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; immunoblotting&#xC758; &#xC7AC;&#xAC80;&#xD1A0;.

Virus del herpes simple tipo 1 (HSV-1) y tipo 2 (VHS-2) son pat&oacute;genos humanos ubicuos que infectan sus anfitriones para reactivar la vida para causar enfermedad en o cerca del sitio inicial de la infecci&oacute;n. Como la incidencia de aumento de infecciones por HSV-1 genital, hay una mayor demanda de diagn&oacute;stico v&aacute;lido de mecanograf&iacute;a viral. En este informe, hemos reconsiderado y hemos desarrollado un procedimiento inmunol&oacute;gico-mecanografiar trif&aacute;sico que compara las diferencias en la movilidad electrofor&eacute;tica de prote&iacute;nas virales ICP4, ICP27 y VP22 entre cepas de HSV-1 y HSV-2. Se aislaron y immunotyped 5 cepas de HSV-1 primarias derivan orofacial, ocular y genital &aacute;reas junto con 2 cepas de HSV-2 primarias de la zona genital. Ventajas de esta metodolog&iacute;a son su simplicidad t&eacute;cnica general, sensibilidad y posibilidad de escribir definitivamente HSV. Se prev&eacute; que esta metodolog&iacute;a ser&aacute; &uacute;til en la distinci&oacute;n de virus obtenidos en las culturas de la cl&iacute;nicas.

Reconsideraci&oacute;n de la prote&iacute;na viral immunoblotting para la diferenciaci&oacute;n de virus de simplex de herpes humano.

&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2 (&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2&#xFF09;&#xFF0C;IV &#x578B;&#x80F6;&#x539F;&#x9176;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#x809D;&#x661F;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x661F;)&#x3001; &#x6162;&#x6027;&#x809D;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x662F;&#x589E;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x5E76;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x589E;&#x6B96;&#x57F9;&#x517B;&#x661F;&#x4E0A;&#x7684;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x80F0;&#x817A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8C03;&#x89E3;&#x548C;&#x964D;&#x4F4E;&#x6B63;&#x5E38;&#x809D;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8054;&#x60F3;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x4F53;&#x5185;&#x6A21;&#x578B;&#x5DF2;&#x660E;&#x786E;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x75C5;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2 &#x5728;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x4E0E;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x56E0;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2 &#x7F3A;&#x4E4F;&#x5BF9;&#x6162;&#x6027; CCl(4) &#x809D;&#x635F;&#x4F24;&#x65F6;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x63A2;&#x8BA8;&#x5BF9;&#x80F6;&#x539F;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2 &#x4E0D;&#x8DB3;&#x548C;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x6211;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2 &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x653E;&#x5927;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6BD2;&#x7D20;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x809D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x7684;&#x690D;&#x80F6;&#x539F;&#x6211;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Matrix metalloproteinase-2 (MMP-2), a type IV collagenase secreted by activated hepatic stellate cells (HSCs), is upregulated in chronic liver disease and is considered a profibrotic mediator due to its proliferative effect on cultured HSCs and ability to degrade normal liver matrix. Although associative studies and cell culture findings suggest that MMP-2 promotes hepatic fibrogenesis, no in vivo model has definitively established a pathologic role for MMP-2 in the development and progression of liver fibrosis. We therefore examined the impact of MMP-2 deficiency on liver fibrosis development during chronic CCl(4) liver injury and explored the effect of MMP-2 deficiency and overexpression on collagen I expression.

Loss of matrix metalloproteinase-2 amplifies murine toxin-induced liver fibrosis by upregulating collagen I expression.

M&eacute;talloprot&eacute;inase matricielle-2 (MMP-2), une collag&eacute;nase de type IV s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e par des cellules h&eacute;patiques &eacute;toil&eacute;es activ&eacute;es (CSH), est augment&eacute;e dans l&#39;affection h&eacute;patique chronique et est consid&eacute;r&eacute; comme un m&eacute;diateur de profibrotic en raison de son effet prolif&eacute;ratif sur autorenouveler cultiv&eacute;es et capacit&eacute; &agrave; d&eacute;grader la matrice du foie normal. Bien que les &eacute;tudes associatives et des r&eacute;sultats de culture cellulaire sugg&egrave;rent que favorise la MMP-2 FIBROG&Eacute;N&Egrave;SE h&eacute;patique, aucun mod&egrave;le in vivo n&#39;a d&eacute;finitivement &eacute;tabli un r&ocirc;le pathologique de MMP-2 dans le d&eacute;veloppement et la progression de la fibrose h&eacute;patique. Nous avons donc a examin&eacute; l&#39;incidence de la carence de la MMP-2 sur le d&eacute;veloppement de la fibrose h&eacute;patique au cours des l&eacute;sions chroniques de CCl(4) du foie et explor&eacute; l&#39;effet de la carence de MMP-2 et &agrave; la surexpression sur le collag&egrave;ne I expression.

Perte de matrix metalloproteinase-2 amplifie murine induite par la toxine fibrose h&eacute;patique par cytoprotectrices collag&egrave;ne I expression.

Matrix-Metalloproteasen-2 (MMP-2), eine Typ IV-Collagenase abgesondert von aktivierten hepatischen stellate Zellen (HSCs), ist herraufreguliert in chronische Lebererkrankung und gilt als Profibrotic Vermittler aufgrund seiner proliferative Wirkung auf kultivierten HSCs und F&auml;higkeit zu normalen Leber Matrix zu erniedrigen. Obwohl assoziative Studien und Zelle Kultur Ergebnisse legen nahe, dass MMP-2 f&ouml;rdert Leber Fibrogenesis, keine in-vivo Modell hat definitiv festgelegt eine pathologische Rolle f&uuml;r MMP-2 in der Entwicklung und Progression der Leberfibrose. Wir daher untersucht die Auswirkungen von MMP-2-Mangel Leberfibrose Entwicklung w&auml;hrend chronische Sch&auml;digung der Leber CCl(4) und erforscht die Wirkung von MMP-2-Mangel und eine &Uuml;berexpression auf Kollagen ich Ausdruck.

Verlust von Matrix-Metalloproteasen-2 verst&auml;rkt murinen Toxin-induzierten Leberfibrose durch Heraufregulierung Kollagen ich Ausdruck.

Matrix metalloproteinase-2 (MMP-2), una collagenasi di tipo IV secreta dalle cellule stellate epatiche attivate (HSCs), sono sovraregolati nella malattia cronica del fegato ed sono considerato un mediatore profibrotic dovuto il relativo effetto proliferativo su HSCs colta e la capacit&agrave; di degradare la matrice fegato normale. Sebbene studi associativi e cella cultura scoperte suggeriscono che MMP-2 promuove fibrogenesis epatica, nessun modello in vivo ha definitivamente stabilito un ruolo patologico per MMP-2 nello sviluppo e nella progressione della fibrosi epatica. Abbiamo quindi esaminato l&#39;impatto del deficit di MMP-2 sullo sviluppo di fibrosi epatica durante l&#39;infortunio di CCl(4) epatica cronica ed esplorato l&#39;effetto della carenza di MMP-2 e iperespressione sul collagene sono espressione.

La perdita di matrix metalloproteinase-2 amplifica murina fibrosi epatica tossina-indotta dal collagene upregulating sono espressione.

&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; 2 &#xFF08;MMP-2), &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; IV &#x30B3;&#x30E9;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x809D;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE; (HSCs) &#x5206;&#x6CCC;&#x4EA2;&#x9032;&#x6162;&#x6027;&#x809D;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3059;&#x3001;profibrotic &#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x57F9;&#x990A; HSCs &#x305D;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6B63;&#x5E38;&#x809D;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9023;&#x60F3;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x77E5;&#x898B;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x304C; MMP 2 &#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B; in vivo &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x305F;&#x306A;&#x3044;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x5F79;&#x5272; MMP-2 &#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306B;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x958B;&#x767A;&#x6162;&#x6027; CCl(4) &#x809D;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6642;&#x306B; MMP 2 &#x6B20;&#x4E4F;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306B; MMP 2 &#x6B20;&#x4E4F;&#x3068;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x79C1;&#x306F;&#x5F0F;&#x3002;

&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; 2 &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x5897;&#x5E45;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x809D;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x75C7;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9AA8;&#x6298;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3; I &#x5F0F;&#x3002;

&#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase-2 (MMP-2), &#xC720;&#xD615; IV &#xCF5C;&#xB77C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC8FC;&#xBB38;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; (HSCs)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84; &#xBE44;, &#xB9CC;&#xC131; &#xAC04; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; upregulated&#xC740; &#xACE0; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; Hscs&#xC5D0; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD6A8;&#xACFC; profibrotic &#xC911;&#xC7AC;&#xC790;&#xC640; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xAC04; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC800;&#xD558; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548; MMP 2 &#xCD09;&#xC9C4; &#xAC04;&#xC7A5; fibrogenesis, &#xC544;&#xB2C8; in vivo &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xACB0;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; pathologic &#xC5ED;&#xD560; MMP 2 &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xC124;&#xB9BD;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xADF8;&#xB7EC;&#xBBC0;&#xB85C; MMP 2 &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xB9CC;&#xC131; CCl(4) &#xAC04; &#xBD80;&#xC0C1; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC5D0; MMP 2 &#xACB0;&#xD54D; &#xBC0F; overexpression&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD0D0;&#xD5D8; &#xB098; &#xC2DD;.

Upregulating &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; murine &#xB3C5; &#xC18C; &#xC720;&#xBC1C; &#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;&#xC744; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558;&#xB294; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 2&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xB09C; &#xC2DD;.

Metaloproteinasa de matriz-2 (MMP-2), una colagenasa tipo IV secretada por las c&eacute;lulas radiadas hep&aacute;ticas activadas (HSCs), es el alza en la enfermedad hep&aacute;tica cr&oacute;nica y es considerado un mediador citosinas debido a su efecto proliferativo en HSCs cultivadas y capacidad para degradar matriz h&iacute;gado normal. Aunque estudios asociativos y c&eacute;lula cultura resultados sugieren que promueve la MMP-2 fibrog&eacute;nesis hep&aacute;tica, ning&uacute;n modelo in vivo tiene definitivamente establecido un papel patol&oacute;gico de MMP-2 en el desarrollo y progresi&oacute;n de la fibrosis hep&aacute;tica. Por lo tanto examinamos el impacto de la deficiencia de la MMP-2 en el desarrollo de la fibrosis hep&aacute;tica durante la lesi&oacute;n cr&oacute;nica de la CCl(4) hep&aacute;tica y analiz&oacute; el efecto de la deficiencia de MMP-2 y sobreexpresi&oacute;n en col&aacute;geno I expresi&oacute;n.

P&eacute;rdida de matriz metaloproteinasa-2 amplifica murina fibrosis hep&aacute;tica inducida por la toxina por col&aacute;geno regular me expresi&oacute;n.

&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x67D3;&#x5F88;&#x96BE;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6700;&#x9AD8;&#x6548;&#x7387;&#x548C;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x3002;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (Dc) &#x4EE3;&#x8868;&#x4E4B;&#x95F4;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x3001; &#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x73AF;&#x8282;&#x3002;&#x5212;&#x5B9A;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E3B;&#x8981;&#x96C6;&#x6563;&#x63A7;&#x5236;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x53CD;&#x5411;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x708E;&#x75C7;&#x901A;&#x8DEF;&#x9887;&#x5177;&#x6311;&#x6218;&#x6027;&#x7684;&#x4EFB;&#x52A1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F18;&#x5316;&#x548C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x67D3;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x6709;&#x6548;&#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x8BA9;&#x6211;&#x4EEC;&#x77ED;&#x6682;&#x5FEB;&#x9012; DNA &#x7684;&#x5929;&#x771F;&#x4E3B;&#x533A;&#x8BAE;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF; nucleofection &#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027; DCs &#x4E0E;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x53CA;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x67D3;&#x6548;&#x7387;&#x7531;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x8D28;&#x7C92;&#x662F; nucleoporated&#x3002;&#x4EE5; nucleoporation &#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x5BF9;&#x76F4;&#x6D41;&#x6210;&#x719F;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6807;&#x8BB0;&#x7269; CD86 &#x548C; MHCII GFP &#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x8FDB;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x8FBE;&#x5230; 70%&#xFF0C;&#x8D85;&#x8FC7; 50%&#xFF0C;&#x8F6C;&#x67D3;&#x6548;&#x7387;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x6700;&#x4F73;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x6761;&#x4EF6;&#x548C; CD86 &#x548C; MHCII &#x8868;&#x8FBE;&#x4E0D;&#x53D8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; RNA (siRNA) &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7684;&#x94BB;&#x673A;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E00;&#x3001; &#x5173;&#x952E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x8BC6;&#x522B;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &#xFF08;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#xFF09; &#x53CD;&#x5E94;&#x611F;&#x67D3;&#x65B0;&#x57CE;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x96C6;&#x6563;&#x63A7;&#x5236;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x3002;&#x94BB;&#x673A;-&#x6211;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x65E0;&#x6CD5;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7684;&#x897F;&#x65B9; siRNA &#x6CBB;&#x7597;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x3002;&#x94BB;&#x673A;-&#x6211;&#x51FB;&#x5012;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; IFN&beta; mRNA &#x4E0E;&#x8D1F;&#x63A7;&#x5236; siRNA &#x76F8;&#x6BD4;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; 75%&#x3002;&#x672C;&#x8BAE;&#x5B9A;&#x4E66;&#x5E94;&#x63A2;&#x8BA8;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B; DCs &#x4E2D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x5B9D;&#x8D35;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x8F6C;&#x8D28;&#x7C92;&#x548C; siRNA &#x67D3;&#x4EBA;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x6E90;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Transfection of primary immune cells is difficult to achieve at high efficiency and without cell activation and maturation. Dendritic cells (DCs) represent a key link between the innate and adaptive immune systems. Delineating the signaling pathways involved in the activation of human primary DCs and reverse engineering cellular inflammatory pathways have been challenging tasks. We optimized and validated an effective high-throughput transfection protocol, allowing us to transiently express DNA in naÃ¯ve primary DCs, as well as investigate the effect of gene silencing by RNA interference. Using a high-throughput nucleofection system, monocyte-derived DCs were nucleoporated with a plasmid expressing green fluorescent protein (GFP), and transfection efficiency was determined by flow cytometry, based on GFP expression. To evaluate the effect of nucleoporation on DC maturation, the expression of cell surface markers CD86 and MHCII in GFP-positive cells was analyzed by flow cytometry. We established optimal assay conditions with a cell viability reaching 70%, a transfection efficiency of over 50%, and unchanged CD86 and MHCII expression. We examined the impact of small interfering RNA (siRNA)-mediated knockdown of RIG-I, a key viral recognition receptor, on the induction of the interferon (IFN) response in DCs infected with Newcastle disease virus. RIG-I protein was undetectable by Western blot in siRNA-treated cells. RIG-I knockdown caused a 75% reduction in the induction of IFNÎ² mRNA compared with the negative control siRNA. This protocol should be a valuable tool for probing the immune response pathways activated in human DCs.

Validation of efficient high-throughput plasmid and siRNA transfection of human monocyte-derived dendritic cells without cell maturation.

La transfection de cellules immunitaires primaires est difficile &#xE0; r&#xE9;aliser avec une grande efficacit&#xE9; et sans activation cellulaire et la maturation. Les cellules dendritiques (DC) repr&#xE9;sentent un lien essentiel entre les syst&#xE8;mes immunitaire inn&#xE9;e et adaptative. D&#xE9;limiter les voies de signalisation impliqu&#xE9;es dans l&#x26;#39;activation de l&#x26;#39;homme PED primaires et reverse engineering cellulaires voies inflammatoires ont &#xE9;t&#xE9; des t&#xE2;ches difficiles. Nous avons optimis&#xE9; et valid&#xE9; un protocole de transfection efficaces &#xE0; haut d&#xE9;bit, ce qui nous permet d&#x26;#39;exprimer de fa&#xE7;on transitoire l&#x26;#39;ADN dans les PED na&#xEF;fs primaires, ainsi que d&#x26;#39;&#xE9;tudier l&#x26;#39;effet de l&#x26;#39;inactivation des g&#xE8;nes par ARN interf&#xE9;rence. Gr&#xE2;ce &#xE0; un syst&#xE8;me nucl&#xE9;ofection haut d&#xE9;bit, d&#xE9;riv&#xE9;es de monocytes PED ont &#xE9;t&#xE9; nucleoporated avec un plasmide exprimant la prot&#xE9;ine fluorescente verte efficacit&#xE9; (GFP), et la transfection a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;e par cytom&#xE9;trie de flux, bas&#xE9; sur l&#x26;#39;expression de GFP. Pour &#xE9;valuer l&#x26;#39;effet de la maturation des DC sur nucleoporation, l&#x26;#39;expression de marqueurs de surface cellulaire CD86 et CMH II dans la GFP-positives cellules a &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;e par cytom&#xE9;trie de flux. Nous avons &#xE9;tabli les conditions optimales de dosage avec une viabilit&#xE9; cellulaire atteignant 70%, une efficacit&#xE9; de transfection de plus de 50%, et inchang&#xE9;e expression CD86 et CMH II. Nous avons examin&#xE9; l&#x26;#39;impact de petits ARN interf&#xE9;rents (siARN) m&#xE9;di&#xE9;e par inactivation de RIG-I, un r&#xE9;cepteur de reconnaissance cl&#xE9; virale, sur l&#x26;#39;induction de l&#x26;#39;interf&#xE9;ron (IFN) de r&#xE9;ponse dans les PED infect&#xE9;es par le virus de la maladie de Newcastle. RIG-I prot&#xE9;ine a &#xE9;t&#xE9; ind&#xE9;tectable par Western blot dans les cellules trait&#xE9;es siARN. RIG-I knockdown a provoqu&#xE9; une r&#xE9;duction de 75% dans l&#x26;#39;induction de l&#x26;#39;ARNm IFN&#x3B2; par rapport &#xE0; la siRNA contr&#xF4;le n&#xE9;gatif. Ce protocole devrait &#xEA;tre un outil pr&#xE9;cieux pour sonder les voies de la r&#xE9;ponse immunitaire activ&#xE9;es dans les PED de l&#x26;#39;homme.

Validation des efficace &#xE0; haut d&#xE9;bit transfection de plasmide et SiRNA des cellules dendritiques d&#xE9;riv&#xE9;es de monocytes Sans la maturation des cellules

Transfektion von prim&auml;ren Immunzellen ist schwierig, mit hoher Effizienz und ohne ZELLAKTIVIERUNG und Reifung zu erzielen. Dendritische Zellen (DCs) stellen eine wichtige Verbindung zwischen der angeborenen und erworbenen immunen Systemen dar. Abgrenzung der Signalwege die Aktivierung des menschlichen prim&auml;re DCs beteiligt und reverse engineering zellul&auml;re entz&uuml;ndliche Wege haben anspruchsvolle Aufgaben. Wir optimiert und validiert eine effektive Hochdurchsatz-Transfection-Protokoll, so dass wir vor&uuml;bergehend schnelles DNA in naiven prim&auml;re DCs sowie untersuchen die Auswirkungen der Gen-silencing von RNA-Interferenz. Mit einem hohen Durchsatz-Nucleofection-System, abgeleitete Monozyt DCs wurden Nucleoporated mit einem Plasmid Ausdr&uuml;cken gr&uuml;n fluoreszierende Protein (GFP) und Transfektion Effizienz von Durchflusszytometrie, basierend auf GFP-Expression festgelegt wurde. Um die Wirkung der Nucleoporation auf DC Reifung zu bewerten, wurde der Ausdruck der Zelle Oberfl&auml;che Marker CD86 und MHCII in den GFP-positiven Zellen durch Durchflusszytometrie analysiert. Wir optimale Assay-Bedingungen mit einer Zelle Entwicklungsf&auml;higkeit erreichen eine Transfektionseffizienz von &uuml;ber 50 %, 70 % und CD86 und MHCII Ausdruck unver&auml;ndert. Wir untersuchten die Auswirkungen der small interfering RNA (SiRNA) - vermittelten Niederschlag von RIG - ich, eine virale Tastenerkennung Rezeptor, auf die Induktion von Interferon (IFN) Antwort in DCs mit Newcastle Disease Virus infiziert. RIG-ich Protein wurde durch Western blot in SiRNA behandelten Zellen. RIG-ich Niederschlag verursachte eine Erm&auml;&szlig;igung von 75 % in die Induktion von IFN&beta; mRNA im Vergleich mit der Negativkontrolle SiRNA. Dieses Protokoll sollte ein wertvolles Werkzeug f&uuml;r die &Uuml;berpr&uuml;fung der Immunantwort Wege in menschlichen DCs aktiviert sein.

Validierung der effiziente Hochdurchsatz-Plasmid und SiRNA Transfektion von menschlichen Monozyte abgeleiteten dendritischen Zellen ohne Zelle Reifung.

Transfezione delle cellule del sistema immunitario primarie &egrave; difficile da realizzare ad alta efficienza e senza maturazione e attivazione delle cellule. Le cellule dendritiche (DCs) rappresentano un collegamento fondamentale tra il sistema immunitario innato e adattivo. Delineare le vie di segnalazione coinvolte nell&#39;attivazione dei controller di dominio primario umano e reverse engineering cellulare infiammatorie percorsi hanno stato impegnativo compiti. Abbiamo ottimizzato e convalidato un protocollo di transfezione di alto-rendimento effettivo, ci permette di DNA transitoriamente espresso in na&iuml;ve controller primario di dominio, come pure indagare l&#39;effetto di silenziamento genico di interferenza del RNA. Utilizzando un sistema di alto-rendimento nucleofection, monocyte-derivati DCs sono stati nucleoporated con un plasmide esprimendo la green fluorescent protein (GFP) e transfezione efficienza &egrave; stata determinata mediante citometria a flusso, basato sull&#39;espressione di GFP. Per valutare l&#39;effetto di nucleoporation sulla maturazione della DC, l&#39;espressione di marcatori di superficie cellulare CD86 e MHCII in cellule GFP-positive &egrave; stato analizzato tramite flusso cytometry. Abbiamo stabilito le condizioni di dosaggio ottimale con una vitalit&agrave; cellulare raggiungendo il 70%, un&#39;efficienza di trasfezione di oltre il 50% e immutata espressione CD86 e MHCII. Abbiamo esaminato l&#39;impatto di piccolo RNA interferente (siRNA) - mediata atterramento di RIG - I, un recettore chiave riconoscimento virale, sull&#39;induzione della risposta di interferone (IFN) in DCs infettati con virus della malattia di Newcastle. RIG-I della proteina era inosservabile da Western blot in cellule trattate con siRNA. RIG-atterramento mi ha causato una riduzione del 75% nell&#39;induzione di mRNA IFN&beta; confrontato con il controllo negativo siRNA. Questo protocollo dovrebbe essere un prezioso strumento per sondare il risposta immunitaria percorsi attivati nel controller di dominio umano.

Convalida di efficiente transfezione high-throughput del plasmide e siRNA di umane monocyte-derived cellule dendritiche senza maturazione delle cellule.

&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x52B9;&#x7387;&#x3067;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6210;&#x719F;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;DC&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x3068;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x9593;&#x306E;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x8F2A;&#x90ED;&#x3092;&#x63CF;&#x304F;&#x3068;&#x3001;&#x30EA;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30B9;&#x30AF;&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306B;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;&#x4E3B;&#x8981;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;DNA&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5358;&#x7403;&#x7531;&#x6765;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x3067;nucleoporated&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x52B9;&#x7387;&#x306F;&#x3001;GFP&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; DC&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306B;nucleoporation&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;GFP&#x967D;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;CD86&#x304A;&#x3088;&#x3073;MHCII&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;70&#xFF05;&#x3001;50&#xFF05;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x52B9;&#x7387;&#x3068;&#x3001;&#x5909;&#x308F;&#x3089;&#x306A;&#x3044;CD86&#x304A;&#x3088;&#x3073;MHCII&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x6761;&#x4EF6;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30AB;&#x30C3;&#x30B9;&#x30EB;&#x75C5;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;IFN&#xFF09;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6E09;RNA&#xFF08;siRNA&#xFF09;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;RIG-I&#x3001;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8A8D;&#x8B58;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; RIG-I&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;siRNA&#x51E6;&#x7406;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A6;&#x30A8;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; RIG-I&#x3092;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;siRNA&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;IFN&#x3B2;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;75&#xFF05;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;DC&#x3067;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x63A2;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x304C;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x30D2;&#x30C8;&#x5358;&#x7403;&#x7531;&#x6765;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x3068;siRNA&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x691C;&#x8A3C;

&#xAE30;&#xBCF8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; transfection &#xACE0;&#xD6A8;&#xC728; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC131;&#xC219; &#xC5C6;&#xC774; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB835;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (DCs) &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBC0F; &#xC801;&#xC751;&#xD615; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC04;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; Dc&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xBB18;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xB9AC;&#xBC84;&#xC2A4; &#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC5FC;&#xC99D; &#xACBD;&#xB85C; &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xB3C4;&#xC804; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; Dc &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; transiently &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; DNA&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; transfection &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; RNA &#xAC04;&#xC12D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC;. &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; nucleofection &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, monocyte &#xD30C;&#xC0DD; Dc nucleoporated &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP)&#xACFC; transfection &#xD6A8;&#xC728; cytometry, GFP &#xC2DD;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xC5EC; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. DC &#xC131;&#xC219;&#xC5D0; nucleoporation&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xB9C8;&#xCEE4; CD86 &#xBC0F; MHCII GFP-&#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD; cytometry &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; 70%, 50% &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; transfection &#xD6A8;&#xC728;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xC124;&#xB9BD;&#xACFC; cd86&#xACFC; MHCII &#xC2DD;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA (siRNA)-&#xC911;&#xC7AC; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC7A5;&#xBE44;-&#xC601;&#xD5A5; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB098;, &#xB274;&#xCE90;&#xC2AC; &#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; Dc&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; (IFN) &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD0A4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC778;&#xC2DD; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;. &#xC7A5;&#xBE44;-&#xB098; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC11C; &#xBD80;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC9C0; siRNA &#xCDE8;&#xAE09; &#xC140;&#xC5D0; &#xC624; &#xC810;. &#xC7A5;&#xBE44;-&#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xB09C; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC81C;&#xC5B4; Sirna&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; IFN&beta; Mrna&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; 75% &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC740; &#xC778;&#xAC04; Dc&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xACBD;&#xB85C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xC140; &#xC131;&#xC219; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; monocyte &#xC720;&#xB798; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC640; siRNA transfection&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La transfecci&#xF3;n de c&#xE9;lulas primarias inmunes es dif&#xED;cil de lograr en una alta eficiencia y sin activaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas y la maduraci&#xF3;n. Las c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas (DC) representan un v&#xED;nculo clave entre los sistemas inmune innata y adaptativa. Delimitaci&#xF3;n de las v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n implicadas en la activaci&#xF3;n de los pa&#xED;ses en desarrollo humanos b&#xE1;sicos y de ingenier&#xED;a inversa inflamatorios v&#xED;as celulares han sido dif&#xED;ciles tareas. Hemos optimizado y validado un sistema eficaz de alto rendimiento de protocolo de transfecci&#xF3;n, lo que nos permite expresar de forma transitoria de ADN en los pa&#xED;ses en desarrollo no tratados previamente primaria, as&#xED; como investigar el efecto de silenciamiento g&#xE9;nico por ARN de interferencia. El uso de un sistema de nucleofection de alto rendimiento, derivados de los monocitos pa&#xED;ses en desarrollo fueron nucleoporated con un pl&#xE1;smido que expresa la eficiencia de la prote&#xED;na verde fluorescente (GFP), y la transfecci&#xF3;n se determin&#xF3; por citometr&#xED;a de flujo, sobre la base de la expresi&#xF3;n de GFP. Para evaluar el efecto de la maduraci&#xF3;n nucleoporation DC, la expresi&#xF3;n de marcadores de superficie celular CD86 y MHCII en las buenas pr&#xE1;cticas agrarias de c&#xE9;lulas positivas se analizaron por citometr&#xED;a de flujo. Hemos establecido las condiciones &#xF3;ptimas de ensayo con una viabilidad celular llegando al 70%, una eficiencia de transfecci&#xF3;n de m&#xE1;s del 50%, y sin cambiar de expresi&#xF3;n CD86 y MHCII. Se examin&#xF3; el impacto de peque&#xF1;os ARN de interferencia (siRNA) mediada por ca&#xED;da de RIG-I, un receptor clave de reconocimiento viral, en la inducci&#xF3;n del interfer&#xF3;n (IFN) de respuesta en los pa&#xED;ses en desarrollo infectados por el virus de la enfermedad de Newcastle. RIG-I prote&#xED;nas era indetectable por Western blot en pacientes tratados con siRNA-c&#xE9;lulas. RIG-I precipitaci&#xF3;n caus&#xF3; una reducci&#xF3;n del 75% en la inducci&#xF3;n de ARNm de IFN en comparaci&#xF3;n con el siRNA control negativo. Este protocolo debe ser una valiosa herramienta para sondear las v&#xED;as de la respuesta inmune activadas en pa&#xED;ses en desarrollo humano.

Validaci&#xF3;n de alto rendimiento eficiente de la transfecci&#xF3;n de pl&#xE1;smidos y SiRNA de las c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas humanas derivadas de monocitos-Sin la maduraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas

&#x4E3B;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D; ICP22 &#x662F;&#x72EC;&#x4E00;&#x65E0;&#x4E8C;&#x7684;&#x7ACB;&#x5373;&#x65E9;&#x671F;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5220;&#x9664; ICP22 &#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x4E5F;&#x5728;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x5206;&#x88C2;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x9759;&#x6B62;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x556E;&#x9F7F;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x67D0;&#x4E9B;&#x884C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;ICP22 &#x8868;&#x793A;&#x8FD9;&#x662F;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x8840;&#x8102;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F97;&#x5230;&#x5145;&#x5206;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; (HSV) &#x795E;&#x7ECF;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x578B;&#x7684; ICP22 &#x622A;&#x65AD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; HSV-1(BACX)&#x3002;HSV-1(BACX) &#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x786E;&#x8BA4;&#x4E86;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x6297; ICP22 &#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x3002;HSV-1(BACX) &#x663E;&#x793A;&#x5154;&#x76AE;&#x80A4;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528; ICP22 null &#x75C5;&#x6BD2;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x590D;&#x5236;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;HSV-1(BACX) &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x611F;&#x67D3;&#x7075;&#x957F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; ICP22 Vero &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;HSV-1(BACX) &#x5C06;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x6765;&#x89E3;&#x5BC6;&#x7684;&#x4E0D;&#x5BFB;&#x5E38;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5C5E;&#x6027;&#x548C; ICP22 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x622A;&#x65AD;&#x7A81;&#x53D8; ICP22 &#x86CB;&#x767D;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6280;&#x672F;&#x6307;&#x6807;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x3002;

The major regulatory protein ICP22 is unique among the immediate early proteins of herpes simplex virus. Viruses deleted for ICP22 replicate well in actively dividing cells, but not in quiescent cells or certain rodent lines. Accordingly, ICP22 represents an understudied herpes simplex virus (HSV) neurovirulence marker which is absolutely essential for viral neurogrowth. We utilized the bacterial artificial chromosome methodology to create a novel ICP22 truncation mutant, termed HSV-1(BACX). The integrity of HSV-1(BACX) was confirmed by detailed polymerase chain reaction analyses and immunoblotting using anti-ICP22 antibody. HSV-1(BACX) showed a reduced replication capacity in rabbit skin cells, consistent with previous studies using ICP22-null viruses. Importantly, HSV-1(BACX) localized to nuclei of infected primate Vero cells in a manner similar to wild-type ICP22. Thus, HSV-1(BACX) will serve as a useful tool to decipher the unusual biological properties and functions of the ICP22 protein.

A truncation mutation of the neurovirulence ICP22 protein produced by a recombinant HSV-1 generated by bacterial artificial chromosome technology targets infected cell nuclei.

La prot&eacute;ine r&eacute;gulatrice majeure ICP22 est unique parmi les prot&eacute;ines d&eacute;but imm&eacute;diats du virus de l&#39;herp&egrave;s simplex. Virus supprim&eacute;s pour ICP22 r&eacute;pliquent bien dans les cellules se divisant activement, mais pas dans les cellules quiescentes ou certaines lignes de rongeurs. En cons&eacute;quence, ICP22 repr&eacute;sente un marqueur de neurovirulence sous-&eacute;tudi&eacute; herp&egrave;s simplex virus (HSV) qui est absolument indispensable pour neurogrowth virale. Nous avons utilis&eacute; la m&eacute;thodologie des chromosomes artificiels bact&eacute;riens pour cr&eacute;er un mutant de troncature ICP22 roman, appel&eacute; HSV-1(BACX). L&#39;int&eacute;grit&eacute; des HSV-1(BACX) a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e par les analyses de r&eacute;action en cha&icirc;ne de polym&eacute;rase d&eacute;taill&eacute;e et immunoblotting utilisant des anticorps anti-ICP22. HSV-1(BACX) a montr&eacute; une capacit&eacute; r&eacute;duite de la r&eacute;plication dans les cellules de peau de lapin, les &eacute;tudes pr&eacute;c&eacute;dentes &agrave; l&#39;aide de virus ICP22 null. Ce qui est important, HSV-1(BACX) localis&eacute;e aux noyaux des primates infect&eacute;s sur cellules Vero d&#39;une mani&egrave;re analogue &agrave; la ICP22 de type sauvage. Ainsi, HSV-1(BACX) sera un outil utile pour d&eacute;chiffrer les propri&eacute;t&eacute;s biologiques inhabituelles et les fonctions de la prot&eacute;ine ICP22.

Une mutation de la troncature de la neurovirulence ICP22 prot&eacute;ine produite par un recombinant HSV-1 g&eacute;n&eacute;r&eacute;s par les chromosomes artificiels bact&eacute;riens technologie cible cellule infect&eacute;e noyaux.

Die wichtigsten regelndes Protein ICP22 ist einzigartig unter den unmittelbaren fr&uuml;hen Proteine von Herpes-Simplex-Virus. Viren gel&ouml;scht f&uuml;r ICP22 replizieren in aktiv teilenden Zellen gut, aber nicht in den Ruhezustand Zellen oder bestimmte Nagetier-Linien. Dementsprechend stellt ICP22 einen erforschten Herpes-Simplex-Virus (HSV) Neurovirulence Marker f&uuml;r die virale Neurogrowth absolut notwendig ist. Wir verwendet die bacterial artificial Chromosome-Methodik, um einen neuartigen ICP22 Abschneiden Mutant, genannt HSV-1(BACX) zu erstellen. Die Integrit&auml;t des HSV-1(BACX) wurde durch detaillierte Polymerase Kettenreaktion Analysen und Immunoblotting mit Anti-ICP22-Antik&ouml;rper best&auml;tigt. HSV-1(BACX) zeigte eine reduzierte Replikations-Kapazit&auml;t in Kaninchen Hautzellen, konsistent mit fr&uuml;heren Studien mit ICP22-Null-Viren. Wichtig ist, lokalisierte HSV-1(BACX), Kerne von infizierten Primaten Vero-Zellen in Wildtyp ICP22 &auml;hnlich. So dienen die HSV-1(BACX) als ein n&uuml;tzliches Instrument, um die ungew&ouml;hnliche biologischen Eigenschaften und Funktionen des ICP22 Proteins zu entziffern.

Abschneiden Mutation des Neurovirulence ICP22 Protein produziert durch ein rekombinantes HSV-1 durch bacterial artificial Chromosome Technologie Ziele infizierten Zelle Kerne erzeugt.

La principale proteina normativa ICP22 &egrave; unica tra le proteine inizio immediate del virus herpes simplex. Virus eliminato per ICP22 replicare bene nella proliferazione delle cellule, ma non in cellule quiescenti o alcune linee di roditore. Di conseguenza, ICP22 rappresenta un marcatore di neurovirulence understudied herpes simplex virus (HSV) che &egrave; assolutamente essenziale per neurogrowth virale. Abbiamo utilizzato la metodologia del cromosoma artificiale batterico per creare un romanzo mutante di troncamento ICP22, chiamato HSV-1(BACX). L&#39;integrit&agrave; del HSV-1(BACX) &egrave; stata confermata dall&#39;analisi di reazione a catena della polimerasi dettagliate e immunoblotting utilizzando anticorpi anti-ICP22. HSV-1(BACX) ha mostrato una capacit&agrave; ridotta di replica nelle cellule della pelle di coniglio, coerente con precedenti studi utilizzando virus ICP22-null. Importante, HSV-1(BACX) localizzato ai nuclei di primate infetta cellule Vero in maniera simile al wild-type ICP22. Cos&igrave;, HSV-1(BACX) servir&agrave; come uno strumento utile a decifrare le funzioni della proteina ICP22 e inusuali propriet&agrave; biologiche.

Una mutazione di troncamento di neurovirulence ICP22 proteina prodotta da un ricombinante HSV-1 generato dal cromosoma artificiale batterico tecnologia obiettivi nuclei delle cellule infette.

&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; ICP22 &#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x524D;&#x521D;&#x671F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x9593;&#x3067;&#x4E00;&#x610F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;ICP22 &#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3088;&#x304F;&#x3067;&#x6D3B;&#x767A;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4F11;&#x6B62;&#x671F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x9F67;&#x6B6F;&#x985E;&#x306E;&#x884C;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;ICP22 &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E; neurogrowth &#x306F;&#x7D76;&#x5BFE;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (HSV) &#x306E; neurovirulence &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E; ICP22 &#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; HSV-1(BACX) &#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x83CC;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x3092;&#x6D3B;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HSV-1(BACX) &#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3068;&#x6297; ICP22 &#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;HSV-1(BACX) &#x306F;&#x3001;ICP22 null &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x904E;&#x53BB;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;&#x306E;&#x76AE;&#x819A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;HSV-1(BACX) &#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x970A;&#x9577;&#x985E;&#x306E;&#x6838;&#x306B;&#x30D9;&#x30ED;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; ICP22 &#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;HSV-1(BACX) &#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3068; ICP22 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x89E3;&#x8AAD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x751F;&#x7523; ICP22 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; neurovirulence &#x306E; HSV-1 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x83CC;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6280;&#x8853;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x751F;&#x6210;&#x3002;

&#xC8FC;&#xC694; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; ICP22 &#xD5E4; &#xB974; &#xD398; &#xC2A4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC21C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC989;&#xAC01;&#xC801;&#xC778; &#xC870;&#xAE30; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC77C; &#xD558;&#xB2E4;. Icp22&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBB34;&#xBD80;&#xD558; &#xC140; &#xB610;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xC124;&#xCE58;&#xB958; &#xB77C;&#xC778; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC140; &#xBD84;&#xD560;&#xC5D0; &#xC798;. &#xC774; &#xB530;&#xB77C;, ICP22 &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; neurogrowth &#xC808;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD544;&#xC218; understudied &#xB2E8;&#xC21C; &#xD3EC;&#xC9C4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (HSV) neurovirulence &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xC124; ICP22 &#xC798;&#xB9BC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, &#xBD88;&#xB9B0;&#xB41C; HSV-1(BACX)&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xC138;&#xADE0; &#xC778;&#xACF5; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. HSV-1(BACX)&#xC758; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC548;&#xD2F0;-ICP22 &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; immunoblotting&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. HSV-1(BACX) &#xD1A0;&#xB07C; &#xD53C;&#xBD80; &#xC138;&#xD3EC;, ICP22 null &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xAC10;&#xC18C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, HSV-1(BACX) &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; ICP22 Vero &#xC138;&#xD3EC; &#xD575; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC601;&#xC7A5;&#xB958;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, HSV-1(BACX) &#xD2B9;&#xC774; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; ICP22 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD574;&#xB3C5; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neurovirulence ICP22 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xC81C;&#xC791;&#xC758; &#xC798;&#xB9BC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; HSV-1 &#xC138;&#xADE0; &#xC778;&#xACF5; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xAE30;&#xC220; &#xB300;&#xC0C1; &#xAC10;&#xC5FC;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD575;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C;.

La prote&iacute;na reguladora importante ICP22 es &uacute;nico entre las prote&iacute;nas principios inmediatas de virus del herpes simple. Virus eliminados para ICP22 replicar&aacute;n en dividir activamente las c&eacute;lulas, pero no en c&eacute;lulas quiescentes o determinadas l&iacute;neas de roedores. En consecuencia, el ICP22 representa un marcador de neurovirulencia escasamente herpes simplex virus (HSV) que es absolutamente esencial para la neurogrowth viral. Se utiliz&oacute; la metodolog&iacute;a del cromosoma artificial bacteriano para crear a un nuevo mutante de truncamiento ICP22, llamado HSV-1(BACX). La integridad de la HSV-1(BACX) fue confirmada por an&aacute;lisis de la reacci&oacute;n en cadena de polimerasa detallada y immunoblotting usando anticuerpos anti-ICP22. HSV-1(BACX) demostr&oacute; una capacidad reducida de la replicaci&oacute;n en c&eacute;lulas de la piel del conejo, consistentes con estudios previos usando virus ICP22-null. Importante, HSV-1(BACX) hab&iacute;a localizada a n&uacute;cleos de primates infectados c&eacute;lulas Vero en forma similar a ICP22 de tipo salvaje. As&iacute;, HSV-1(BACX) servir&aacute; como una herramienta &uacute;til para descifrar las funciones de la prote&iacute;na ICP22 y propiedades biol&oacute;gicas inusuales.

Una mutaci&oacute;n de truncamiento de la prote&iacute;na de ICP22 producida por una recombinante de neurovirulencia HSV-1 generado por cromosoma artificial bacteriano tecnolog&iacute;a objetivos n&uacute;cleos de c&eacute;lula infectada.

Robert Bowles

Center for Translational Systems Biology and Department of Neurology

Mount Sinai School of Medicine

Optimized Protocol for Efficient Transfection of Dendritic Cells without Cell Maturation