visualization-mitochondrial-respiratory-function-using-cytochrome-c

Visualization of Mitochondrial Respiratory Function using Cytochrome <em>C</em> Oxidase / Succinate Dehydrogenase (COX/SDH) Double-labeling Histochemistry

Mitochondrial DNA (mtDNA) defects are an important cause of disease and may underlie aging and aging-related alterations 1,2. The mitochondrial theory of ...

histological-based-stainings-using-free-floating-tissue-sections

Histological-Based Stainings Using Free-Floating Tissue Sections

Immunohistochemistry is a widely used technique to visualize specific tissue structures as well as protein expression and localization. Two alternative ...

Karolinska Institutet

National Institute on Drug Abuse (NIDA)

University of Rhode Island

5&#39; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; deiodination &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xBA54;&#xC2DC;&#xC9C0;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xB2E4;&#xD615;&#xC131; 258 A &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; 5&#39;-untranslated &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xD55C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;/G, T4/T3 &#xBE44;&#xC728;, &#xC21C;&#xD658;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC81C;&#xC548; &#xC99D;&#xAC00; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;.

258 A/G (d 2-ORFa-Gly3Asp) &#xC778;&#xAC04; &#xC720;&#xD615; 2 deiodinase &#xB2E4;&#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;: &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xBCC0;&#xC885;&#xC5D0;&#xB294; 5&#39; UTR &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC0C1; &#xC9C4;&#xC555; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

5 &#x26;#39;desyodaci&#xF3;n de la hormona tiroidea representa un paso importante en la modulaci&#xF3;n del mensaje hormonal. Estudios previos indican que el polimorfismo de origen natural localizado en la regi&#xF3;n 5 &#x26;#39;no traducida del gen, 258 A / G, est&#xE1; asociado con una disminuci&#xF3;n en la relaci&#xF3;n T4/T3 circulante, lo que sugiere un aumento de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica. El objetivo de este estudio fue caracterizar la variante del gen in vitro.

Caracterizaci&#xF3;n funcional de la 258 A / G (D2-ORFA-Gly3Asp) humana tipo-2 Polimorfismo deiodinase: &#xBF;una versi&#xF3;n naturalmente presentes Aumenta la actividad enzim&#xE1;tica mediante la eliminaci&#xF3;n de un sitio putativo represor en el 5 &#x26;#39;UTR del gen

5&#39; deiodination &#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x6FC0;&#x7D20;&#x8868;&#x793A;&#x8377;&#x5C14;&#x8499;&#x6D88;&#x606F;&#x7684;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x81EA;&#x7136;&#x53D1;&#x751F;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x4F4D;&#x4E8E; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x533A;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;258 A/G&#xFF0C;&#x662F;&#x4E0E;&#x5FAA;&#x73AF; T4/T3 &#x6BD4;&#x4F8B;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x76F8;&#x5173;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x4F53;&#x5916;&#x57FA;&#x56E0;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;

258 A/G &#xFF08;D2-ORFa-Gly3Asp) &#x4EBA;&#x7C7B;&#x7C7B;&#x578B; 2 &#x7898;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x529F;&#x80FD;&#x63CF;&#x8FF0;&#xFF1A; &#x81EA;&#x7136;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x53D8;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0; 5&#39; UTR &#x5220;&#x9664;&#x5047;&#x5B9A;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x7F51;&#x7AD9;&#x589E;&#x52A0;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

5' deiodination of thyroid hormone represents an important step in the modulation of the hormonal message. Previous studies indicate that the naturally occurring polymorphism located in 5'-untranslated region of the gene, 258 A/G, is associated with a decrease in circulating T4/T3 ratio, suggesting an increased gene expression. The aim of this study was to characterize the gene variant in vitro.

Functional characterization of the 258 A/G (D2-ORFa-Gly3Asp) human type-2 deiodinase polymorphism: a naturally occurring variant increases the enzymatic activity by removing a putative repressor site in the 5' UTR of the gene.

5 &#x26;#39;d&#xE9;siodation de l&#x26;#39;hormone thyro&#xEF;dienne repr&#xE9;sente une &#xE9;tape importante dans la modulation du message hormonal. &#xC9;tudes ant&#xE9;rieures indiquent que le polymorphisme naturel situ&#xE9; dans la r&#xE9;gion non traduite en 5 &#x26;#39;du g&#xE8;ne, 258 A / G, est associ&#xE9; &#xE0; une diminution de la circulation T4/T3 rapport, sugg&#xE9;rant une expression du g&#xE8;ne accrue. Le but de cette &#xE9;tude &#xE9;tait de caract&#xE9;riser la variante du g&#xE8;ne in vitro.

Caract&#xE9;risation fonctionnelle des 258 A / G (D2-ORFA-Gly3Asp) Human Polymorphisme d&#xE9;iodinase Type-2: une variante d&#x26;#39;origine naturelle augmente l&#x26;#39;activit&#xE9; enzymatique par suppression d&#x26;#39;un site putatif de r&#xE9;presseur dans la r&#xE9;gion 5 &#x26;#39;UTR du g&#xE8;ne

5&#39; Deiodination der Schilddr&uuml;senhormone ist ein wichtiger Schritt in der Modulation der hormonelle Nachricht. Fr&uuml;here Studien zufolge befindet sich die nat&uuml;rlich vorkommende Polymorphie nicht 5&#39;-&uuml;bersetzte Region des Gens, 258 A/G, ist verbunden mit einem R&uuml;ckgang der zirkulierenden T4/T3-Verh&auml;ltnis, was auf eine erh&ouml;hte Genexpression. Ziel dieser Studie war, die in-vitro-Genvariante zu charakterisieren.

Funktionelle Charakterisierung der 258 A/G (D2-ORFa-Gly3Asp) menschlichen Typ-2-Deiodinase Polymorphismus: eine nat&uuml;rlich vorkommende Variante erh&ouml;ht die Enzymaktivit&auml;t durch Entfernen einer vermeintlichen Verdr&auml;nger-Website in 5&#39; UTR des Gens.

5&#39; deiodination di ormone tiroideo rappresenta un passo importante nella modulazione del messaggio ormonale. Gli studi precedenti indicano che il polimorfismo natura situato in 5&#39;-regione non tradotta del gene, 258 A/G, &egrave; associato con una diminuzione della circolazione rapporto T4/T3, suggerendo un&#39;espressione aumentata del gene. Lo scopo di questo studio era di caratterizzare la variante genica in vitro.

Caratterizzazione funzionale del 258 polimorfismo umano deiodinasi di tipo 2 A/G (D2-ORFa-Gly3Asp): una variante natura aumenta l&#39;attivit&agrave; enzimatica rimuovendo un sito putativo repressor nel 5&#39; UTR del gene.

&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;5 &#x26;#39;&#x8131;&#x30E8;&#x30FC;&#x30C9;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4E00;&#x6B69;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5929;&#x7136;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x591A;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;258 / G&#x306E;5&#x26;#39;-&#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;T4/T3&#x6BD4;&#x3092;&#x5FAA;&#x74B0;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x5929;&#x7136;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;5 &#x26;#39;UTR&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x5927;&#x3055;&#xFF1A;258 / G&#xFF08;D2-ORFa-Gly3Asp&#xFF09;&#x30D2;&#x30C8;2&#x578B;&#x8131;&#x30E8;&#x30A6;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;&#x591A;&#x578B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;

Filopodes sentir le milieu extracellulaire et le mouvement direct dans de nombreux types cellulaires, y compris les neurones. Des rapports r&#xE9;cents sugg&#xE8;rent que la forme transmembranaire de la largement exprim&#xE9; agrine prot&#xE9;oglycane (TM-agrine) r&#xE9;gule la formation et la stabilit&#xE9; de filopodes neuronale. Afin d&#x26;#39;&#xE9;lucider le m&#xE9;canisme par lequel TM-agrine r&#xE9;glemente filopodes, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; le r&#xF4;le de glycosaminoglycane agrine de (GAG) des cha&#xEE;nes dans l&#x26;#39;induction de la formation des filopodes par TM-agrine sur-expression dans les neurones de l&#x26;#39;hippocampe, et dans l&#x26;#39;induction de filopodes-like processus dans des cellules COS7. Suppression des cha&#xEE;nes de GAG &#x200B;&#x200B;de TM-agrine fortement r&#xE9;duit la formation de filopodes-comme les fibres de r&#xE9;traction ramifi&#xE9;s (BRFs) dans des cellules COS7, avec la suppression des cha&#xEE;nes d&#x26;#39;h&#xE9;parane sulfate GAG &#x200B;&#x200B;&#xE9;tant plus efficace, et d&#x26;#39;&#xE9;liminer l&#x26;#39;induction filopodes dans les neurones hippocampiques. Suppression de la cha&#xEE;ne GAG &#x200B;&#x200B;a &#xE9;galement r&#xE9;duit l&#x26;#39;activation de Rac1 et Cdc42 r&#xE9;sultant de TM-agrine sur-expression. En outre, dominante-n&#xE9;gative Cdc42 et Rac1 inhib&#xE9; la formation de BRF. Enfin, la surexpression de la TM-agrine augment&#xE9; l&#x26;#39;adh&#xE9;rence de cellules COS7 et cette augmentation a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duite par la suppression des cha&#xEE;nes de GAG. Nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que MC-agrine r&#xE9;glemente l&#x26;#39;actine &#xE0; base de saillies en grande partie gr&#xE2;ce &#xE0; l&#x26;#39;interaction de ses cha&#xEE;nes de GAG &#x200B;&#x200B;avec des prot&#xE9;ines extracellulaires ou transmembranaire, conduisant &#xE0; l&#x26;#39;activation de Rac1 et Cdc42.

L&#x26;#39;induction de filopodes-comme des saillies par agrine transmembranaire: R&#xF4;le des cha&#xEE;nes de glycosaminoglycanes AGRIN et Rho-GTPases de la famille

&#x4F8B;&#x8BC1;&#x611F;&#x89C9;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x73AF;&#x5883;&#x548C;&#x8BB8;&#x591A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x76F4;&#x63A5;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x8868;&#x660E;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8868;&#x8FBE;&#x86CB;&#x767D;&#x591A;&#x7CD6;&#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D; (TM-&#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;) &#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x5F62;&#x5F0F;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x6F84;&#x6E05; TM &#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;&#x4F5C;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x4E86;&#x89C4;&#x5B9A;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7531; TM &#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;&#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x5728;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x5728; COS7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E2D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x5F62;&#x6210;&#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7CD6;&#x80FA;&#x805A;&#x7CD6; &#xFF08;GAG) &#x94FE;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5220;&#x9664; TM &#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D; GAG &#x94FE;&#x5927;&#x5E45;&#x964D;&#x4F4E;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x6837;&#x5206;&#x652F;&#x7684;&#x9000;&#x7F29;&#x7EA4;&#x7EF4; (BRFs) &#x5728; COS7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x5220;&#x9664;&#x6B63;&#x5728;&#x6700;&#x6709;&#x6548;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6D88;&#x9664;&#x4E86;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E59;&#x9170;&#x809D;&#x7D20;&#x786B;&#x9178; GAG &#x94FE;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;GAG &#x94FE;&#x5220;&#x9664;&#x4E5F;&#x51CF;&#x5C11; Cdc42 &#x548C; Rac1 &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; TM &#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;&#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; Cdc42 &#x548C; Rac1 &#x6291;&#x5236; BRF &#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;TM &#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;&#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0; COS7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x548C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x589E;&#x52A0;&#x51CF;&#x5C11; GAG &#x94FE;&#x7684;&#x5220;&#x9664;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; TM &#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7A81;&#x8D77;&#x5728;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176; GAG &#x94FE;&#x4E0E;&#x80DE;&#x5916;&#x6216;&#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5BFC;&#x81F4; Cdc42 &#x548C; Rac1 &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

&#x4F8B;&#x8BC1;&#x6837;&#x7A81;&#x8D77;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#xFF1A; &#x96C6;&#x805A;&#x86CB;&#x767D;&#x7CD6;&#x80FA;&#x805A;&#x7CD6;&#x94FE;&#x548C; Rho &#x5BB6;&#x65CF;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Filopodia sense the extracellular environment and direct movement in many cell types, including neurons. Recent reports suggest that the transmembrane form of the widely expressed proteoglycan agrin (TM-agrin) regulates formation and stability of neuronal filopodia. In order to elucidate the mechanism by which TM-agrin regulates filopodia, we investigated the role of agrin's glycosaminoglycan (GAG) chains in the induction of filopodia formation by TM-agrin over-expression in hippocampal neurons, and in the induction of filopodia-like processes in COS7 cells. Deletion of the GAG chains of TM-agrin sharply reduced formation of filopodia-like branched retraction fibers (BRFs) in COS7 cells, with deletion of the heparan sulfate GAG chains being most effective, and eliminated filopodia induction in hippocampal neurons. GAG chain deletion also reduced the activation of Cdc42 and Rac1 resulting from TM-agrin over-expression. Moreover, dominant-negative Cdc42 and Rac1 inhibited BRF formation. Lastly, over-expression of TM-agrin increased the adhesiveness of COS7 cells and this increase was reduced by deletion of the GAG chains. Our results suggest that TM-agrin regulates actin-based protrusions in large part through interaction of its GAG chains with extracellular or transmembrane proteins, leading to the activation of Cdc42 and Rac1.

Induction of filopodia-like protrusions by transmembrane agrin: role of agrin glycosaminoglycan chains and Rho-family GTPases.

Filopodium Sinn der extrazellul&auml;ren Umwelt und direkte Bewegung in vielen Zelltypen, einschlie&szlig;lich Neuronen. J&uuml;ngste Berichten zufolge transmembrane Form die h&auml;ufigsten exprimierten Proteoglycan Agrin (TM-Agrin) Bildung und Stabilit&auml;t des neuronalen Filopodium regelt. Um den Mechanismus zu erhellen die TM-Agrin Filopodium regelt, haben wir die Rolle der Agrin der Glykosaminoglykane (GAG) Ketten in die Induktion der Filopodium-Formation durch TM-Agrin &Uuml;berexpression in Neuronen und die Induktion von Filopodium-artige Prozesse in COS7 Zellen untersucht. L&ouml;schung der GAG-Ketten von TM-Agrin reduziert drastisch Bildung von Filopodium-artigen verzweigte Retraktion Fasern (BRFs) in COS7 Zellen, mit Streichung des Heparan Sulfat GAG Ketten wird am effektivsten und beseitigt Filopodium Induktion in Neuronen. GAG Kette l&ouml;schen reduziert auch die Aktivierung von Cdc42 und Rac1 infolge TM-Agrin-&Uuml;berexpression. Au&szlig;erdem hemmte Dominant-negativen Cdc42 und Rac1 BRF-Bildung. Schlie&szlig;lich &Uuml;berexpression von TM-Agrin erh&ouml;ht die Haftf&auml;higkeit COS7 Zellen und der Anstieg wurde durch Streichung von der GAG-Ketten reduziert. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass TM-Agrin Aktin-basierte Vorspr&uuml;nge im gro&szlig;en Teil durch die Interaktion der GAG-Ketten mit extrazellul&auml;ren oder Transmembran-Proteine, regelt, um die Aktivierung des Cdc42 und Rac1 f&uuml;hrt.

Induktion von Filopodium-artigen Vorspr&uuml;ngen von Transmembran Agrin: Rolle der Agrin Glykosaminoglykane Ketten und Rho-Familie GTPasen.

Filopodia senso l&#39;ambiente extracellulare e movimento diretto in molti tipi di cellule, tra cui i neuroni. Rapporti recenti suggeriscono che la forma del transmembrane del proteoglicano ampiamente espresso Elisa (TM-ELISA) regola la formazione e la stabilit&agrave; di un neurone filopodia. Al fine di delucidare il meccanismo che regola la TM-ELISA filopodia, abbiamo studiato il ruolo delle catene glicosaminoglicano (GAG) di elisa nell&#39;induzione della formazione filopodia da TM-ELISA sovraespressione in neuroni ippocampali e l&#39;induzione di processi filopodia-come nelle cellule COS7. Eliminazione delle catene GAG di TM-ELISA nettamente ridotta formazione di fibre di retrazione ramificato filopodia-come (BRFs) nelle cellule COS7, con eliminazione delle catene eparan solfato GAG essendo pi&ugrave; efficace ed eliminato filopodia induzione in neuroni ippocampali. Eliminazione di catena GAG anche ridotto l&#39;attivazione di Cdc42 e Rac1 derivanti da TM-ELISA sovraespressione. Inoltre, Cdc42 dominante-negativo e Rac1 ha inibito la formazione di BRF. Infine, sovraespressione di TM-ELISA aumentata adesivit&agrave; delle cellule COS7 e questo aumento &egrave; stato ridotto dall&#39;eliminazione delle catene GAG. I nostri risultati suggeriscono che TM-ELISA regola protrusioni actina-basato in gran parte attraverso l&#39;interazione delle sue catene GAG con le proteine transmembrane o extracellulare, che portano all&#39;attivazione di Cdc42 e Rac1.

Induzione di protrusioni simil-filopodia da Elisa transmembrana: ruolo delle catene glicosaminoglicano Elisa e famiglia Rho GTPases.

&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x74B0;&#x5883;&#x3068;&#x76F4;&#x63A5;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x611F;&#x77E5;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x304F;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;TM-&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF09;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x578B;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; TM-&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x6D77;&#x99AC;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;TM-&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30CE;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#xFF08;GAG&#xFF09;&#x9396;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x3001;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x7B49;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;COS7&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3002; TM-&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;GAG&#x9396;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30D8;&#x30D1;&#x30E9;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x306E;GAG&#x9396;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x3001;COS7&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5206;&#x679D;&#x72B6;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#xFF08;BRFs&#xFF09;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x6D77;&#x99AC;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x305F;&#x3002; GAG&#x9396;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x3067;&#x3082;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;TM-&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;Cdc42&#x3068;Rac1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;Cdc42&#x3068;Rac1&#x306F;BRF&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;TM-&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;COS7&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;GAG&#x9396;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;TM-&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x304C;Cdc42&#x3068;Rac1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x305D;&#x306E;GAG&#x9396;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x7A81;&#x8D77;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8CAB;&#x200B;&#x200B;&#x901A;&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#xFF1A;&#x30A2;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30CE;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x9396;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Rho&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;GTP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

Filopodia &#xAC10;&#xAC01; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD658;&#xACBD;&#xACFC; &#xC9C1;&#xC811; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC5D0;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xB110;&#xB9AC; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; proteoglycan agrin (TM-agrin)&#xC758; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xD615;&#xD0DC; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; &#xC2E0;&#xACBD; filopodia&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xC2DC;&#xAE30; &#xBC14;&#xB78D;&#xB2C8;&#xB2E4;. TM agrin filopodia&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; TM agrin over-expression hippocampal &#xB274;&#xB7F0;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; COS7 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; filopodia &#xAC19;&#xC740; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; filopodia &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; agrin&#xC758; glycosaminoglycan (&#xAC1C; &#xADF8;) &#xCCB4;&#xC778;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC;. TM agrin&#xC758; &#xAC1C; &#xADF8; &#xCCB4;&#xC778;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C; &#xAE09;&#xACA9;&#xD788; hippocampal &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC81C;&#xAC70; filopodia &#xC720;&#xB3C4; &#xB418; &#xACE0; heparan &#xD669;&#xC0B0; &#xAC1C; &#xADF8; &#xCCB4;&#xC778;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; COS7 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; filopodia &#xAC19;&#xC740; &#xBD84;&#xAE30; &#xCCA0;&#xD68C; &#xC12C;&#xC720; (BRFs)&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C;. &#xAC1C; &#xADF8; &#xCCB4;&#xC778; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB610;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C; Cdc42 &#xBC0F; Rac1 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; TM agrin over-expression&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC9C0;&#xBC30; &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; Cdc42 &#xBC0F; Rac1 BRF &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC800;&#xD574;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, over-expression TM agrin&#xC758; COS7 &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC811;&#xCC29; &#xB825; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xC99D;&#xAC00; &#xAC1C; &#xADF8; &#xCCB4;&#xC778;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; TM agrin &#xC870;&#xC808; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB610;&#xB294; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC1C; &#xADF8; &#xCCB4;&#xC778;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB9CE;&#xC740; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xCD9C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; Cdc42 &#xBC0F; Rac1 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; agrin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; filopodia &#xAC19;&#xC740; &#xB3CC;&#xCD9C;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;: agrin glycosaminoglycan &#xCCB4;&#xC778; &#xBC0F; Rho &#xAC00;&#xC871; Gtpases&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

Filopodios sentir el ambiente extracelular y dirigir el movimiento en muchos tipos celulares, incluyendo las neuronas. Los informes recientes sugieren que la forma de transmembrana de la ampliamente expresada agrina proteoglicanos (TM-agrina) regula la formaci&#xF3;n y estabilidad de los filopodios neuronal. Con el fin de dilucidar el mecanismo por el cual TM-agrina regula filopodios, que investig&#xF3; el papel de los glicosaminoglicanos agrina de (GAG), las cadenas en la inducci&#xF3;n de la formaci&#xF3;n de filopodios por TM-agrina de expresi&#xF3;n en las neuronas del hipocampo, y en la inducci&#xF3;n de filopodios, como- procesos en c&#xE9;lulas COS7. Supresi&#xF3;n de las cadenas de GAG &#x200B;&#x200B;de la MT-agrina reducido dr&#xE1;sticamente la formaci&#xF3;n de filopodios-como las fibras de retracci&#xF3;n ramificados (SLRV) en c&#xE9;lulas COS7, con la supresi&#xF3;n de las cadenas de GAG &#x200B;&#x200B;hepar&#xE1;n sulfato, siendo el m&#xE1;s eficaz, y se elimina la inducci&#xF3;n de filopodios en las neuronas del hipocampo. Eliminaci&#xF3;n de la cadena de GAG &#x200B;&#x200B;tambi&#xE9;n se reduce la activaci&#xF3;n de Cdc42 y Rac1 resultante de TM-agrina sobre-expresi&#xF3;n. Por otra parte, dominante negativo Cdc42 y Rac1 inhibi&#xF3; la formaci&#xF3;n de BRF. Por &#xFA;ltimo, la sobre-expresi&#xF3;n de la MT-agrina aument&#xF3; la adhesividad de las c&#xE9;lulas COS7 y este incremento se redujo por la eliminaci&#xF3;n de las cadenas de GAG. Nuestros resultados sugieren que la MT-agrina regula actina basados &#x200B;&#x200B;salientes en gran parte a trav&#xE9;s de la interacci&#xF3;n de sus cadenas de GAG &#x200B;&#x200B;con prote&#xED;nas extracelulares o de transmembrana, que conduce a la activaci&#xF3;n de Cdc42 y Rac1.

La inducci&#xF3;n de filopodios-como piezas que sobresalen por Agrin transmembrana: Papel de AGRIN cadenas de glucosaminoglucanos y Rho GTPasas de la familia

Derzeit gibt es nur wenige Mittel zur symptomatische Stadien der CNS Alterung zu verfolgen. So obgleich metabolische Ver&auml;nderungen im MtDNA Mutation-gesteuerte Altern verwickelt sind, bleiben die Symptome unklar. Hier haben wir normalerweise Alterungs- und vorzeitig alternde MtDNA Mutator M&auml;use verwendet, eine molekulare Verbindung zwischen mitochondriale Dysfunktion und abnorme Stoffwechsel des Alterungsprozesses herzustellen. Mit Proton-Magnetresonanz-Spektroskopie und HPLC, fanden wir, dass Gehirn Laktat Stufen erh&ouml;hten zweifach in normal und vorzeitig alternden M&auml;usen w&auml;hrend der Alterung waren. Um die markante Zunahme der Laktat mit Gewebe-Pathologie zu korrelieren, wir untersucht die Enzyme der Atmungskette und mitochondriale Scheitern in wichtige Hirnareale von Regel und vorzeitig alternden M&auml;usen festgestellt. Wir haben in-situhybridation um zu zeigen, dass erh&ouml;hte Gehirn-Laktat-Ebenen mit einer Verschiebung der transcriptional T&auml;tigkeit der Laktat-Dehydrogenases verursacht wurden, um die Konvertierung zu Laktat Pyruvat zu f&ouml;rdern. Trennung von f&uuml;nf tetrameren Lactat-Dehydrogenase (LDH) Isoenzymes ergab eine Erh&ouml;hung dieser dominiert das Ldh-A-Produkt und einem R&uuml;ckgang um die reich an der Ldh-B-Produkt, das, wiederum, um die Konvertierung zu Laktat Pyruvat erh&ouml;ht. Spektralphotometrische Proben, die Messung der LDH-Aktivit&auml;t von Pyruvat und Laktat Seiten der Reaktion zeigte eine h&ouml;here &rarr; Pyruvat Laktat Aktivit&auml;t im Gehirn. Wir pl&auml;dieren f&uuml;r die Verwendung von Laktat-Proton-Magnetresonanz-Spektroskopie als nicht-invasive Strategie f&uuml;r die &Uuml;berwachung dieses Markenzeichen des Alterungsprozesses. Die MtDNA-Mutator-Maus kann wir schlie&szlig;en, dass das erh&ouml;hte LDH-A/LDH-B-Verh&auml;ltnis hohe Gehirn Laktat-Stufen,, die wiederum pr&auml;diktive verursacht alternder Ph&auml;notypen sind.

Hohe Gehirn Laktat ist ein Markenzeichen des Alterns und verursacht durch eine Verschiebung des Laktats / B-Verh&auml;ltnis.

&#x76EE;&#x524D;&#xFF0C;&#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#x624B;&#x6BB5;&#x6765;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8001;&#x5316;&#x75C7;&#x72B6;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4EE3;&#x8C22;&#x53D8;&#x5316;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684; mtDNA &#x7A81;&#x53D8;&#x9A71;&#x52A8;&#x8001;&#x5316;&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B63;&#x5E38;&#x8001;&#x5316;&#x548C;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8001;&#x5316;&#x7684; mtDNA &#x8D4B;&#x503C;&#x51FD;&#x6570;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5206;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x8054;&#x7CFB;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x53CA;&#x8870;&#x8001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5F02;&#x5E38;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6CE2;&#x8C31;&#x548C;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8111;&#x4E73;&#x9178;&#x6C34;&#x5E73;&#x901A;&#x5E38;&#x548C;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5728;&#x8001;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x4E24;&#x500D;&#x3002;&#x80FD;&#x591F;&#x5C06;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x4E73;&#x9178;&#x4E0E;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x547C;&#x5438;&#x94FE;&#x9176;&#x548C;&#x4ECE;&#x901A;&#x5E38;&#x548C;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5927;&#x8111;&#x5173;&#x952E;&#x5730;&#x533A;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x5931;&#x8D25;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x663E;&#x793A;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8111;&#x4E73;&#x9178;&#x6C34;&#x5E73;&#x9020;&#x6210;&#x4E73;&#x9178; dehydrogenases &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x8F6C;&#x79FB;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E19;&#x916E;&#x9178;&#xFF0C;&#x4E73;&#x9178;&#x8F6C;&#x6362;&#x3002;&#x4E94; tetrameric &#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; &#xFF08;LDH&#xFF09; &#x540C;&#x5DE5;&#x9176;&#x5206;&#x79BB;&#x663E;&#x793A;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4EE5;&#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; A &#x4EA7;&#x54C1;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; B &#x4EA7;&#x54C1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x589E;&#x52A0;&#x4E19;&#x916E;&#x9178;&#xFF0C;&#x4E73;&#x9178;&#x8F6C;&#x6362;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x3002;&#x5206;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E19;&#x916E;&#x9178;&#x548C;&#x4E73;&#x9178;&#x4E24;&#x8FB9;&#x68C0;&#x6D4B;&#x663E;&#x793A;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x4E19;&#x916E;&#x9178; &rarr; &#x4E73;&#x9178;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E3B;&#x5F20;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E73;&#x9178;&#x8D28;&#x5B50;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6CE2;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x65E0;&#x521B;&#x6027;&#x6218;&#x7565;&#x76D1;&#x6D4B;&#x6B64;&#x6807;&#x5FD7;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;MtDNA &#x8D4B;&#x503C;&#x51FD;&#x6570;&#x9F20;&#x6807;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; A &#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; B &#x6BD4;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x9AD8;&#x8111;&#x4E73;&#x9178;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x662F;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x8868;&#x578B;&#x3002;

&#x9AD8;&#x8111;&#x4E73;&#x9178;&#x662F;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x6807;&#x5FD7;&#x53CA;&#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; A &#x8F6C;&#x53D8;&#x6240;&#x9020;&#x6210;&#x7684; / B &#x6BD4;&#x7387;&#x3002;

At present, there are few means to track symptomatic stages of CNS aging. Thus, although metabolic changes are implicated in mtDNA mutation-driven aging, the manifestations remain unclear. Here, we used normally aging and prematurely aging mtDNA mutator mice to establish a molecular link between mitochondrial dysfunction and abnormal metabolism in the aging process. Using proton magnetic resonance spectroscopy and HPLC, we found that brain lactate levels were increased twofold in both normally and prematurely aging mice during aging. To correlate the striking increase in lactate with tissue pathology, we investigated the respiratory chain enzymes and detected mitochondrial failure in key brain areas from both normally and prematurely aging mice. We used in situ hybridization to show that increased brain lactate levels were caused by a shift in transcriptional activities of the lactate dehydrogenases to promote pyruvate to lactate conversion. Separation of the five tetrameric lactate dehydrogenase (LDH) isoenzymes revealed an increase of those dominated by the Ldh-A product and a decrease of those rich in the Ldh-B product, which, in turn, increases pyruvate to lactate conversion. Spectrophotometric assays measuring LDH activity from the pyruvate and lactate sides of the reaction showed a higher pyruvate â†’ lactate activity in the brain. We argue for the use of lactate proton magnetic resonance spectroscopy as a noninvasive strategy for monitoring this hallmark of the aging process. The mtDNA mutator mouse allows us to conclude that the increased LDH-A/LDH-B ratio causes high brain lactate levels, which, in turn, are predictive of aging phenotypes.

High brain lactate is a hallmark of aging and caused by a shift in the lactate dehydrogenase A/B ratio.

&#xC0; l&#x26;#39;heure actuelle, il ya peu de moyens pour suivre les &#xE9;tapes symptomatiques de la CNS, le vieillissement. Ainsi, bien que des changements m&#xE9;taboliques sont impliqu&#xE9;s dans l&#x26;#39;ADNmt mutation ax&#xE9;e sur le vieillissement, les manifestations restent floues. Ici, nous avons utilis&#xE9; normalement le vieillissement et vieillissement pr&#xE9;matur&#xE9; des souris mutantes ADNmt d&#x26;#39;&#xE9;tablir un lien mol&#xE9;culaire entre la dysfonction mitochondriale et le m&#xE9;tabolisme anormal dans le processus de vieillissement. En utilisant la spectroscopie par r&#xE9;sonance magn&#xE9;tique du proton et par HPLC, nous avons constat&#xE9; que les taux de lactate du cerveau ont &#xE9;t&#xE9; multipli&#xE9;s par deux &#xE0; la fois normalement et pr&#xE9;matur&#xE9;ment souris vieillissement au cours du vieillissement. Pour mettre en corr&#xE9;lation l&#x26;#39;augmentation frappante de lactate avec pathologie des tissus, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les enzymes de la cha&#xEE;ne respiratoire mitochondriale et d&#xE9;tect&#xE9; un d&#xE9;faut dans les zones cl&#xE9;s du cerveau &#xE0; la fois normalement et les souris vieillissement pr&#xE9;matur&#xE9;. Nous avons utilis&#xE9; l&#x26;#39;hybridation in situ de montrer que les niveaux accrus de lactate du cerveau ont &#xE9;t&#xE9; caus&#xE9;s par un changement dans les activit&#xE9;s de la transcription des d&#xE9;shydrog&#xE9;nases lactate de promouvoir &#xE0; la conversion du pyruvate en lactate. S&#xE9;paration des cinq t&#xE9;tram&#xE8;res lactate d&#xE9;shydrog&#xE9;nase (LDH) isoenzymes a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une augmentation de ceux qui sont domin&#xE9;s par la LDH-A produit et une diminution de ceux qui sont riches dans le produit de la LDH-B, qui, &#xE0; son tour, augmente &#xE0; la conversion du pyruvate en lactate. Dosages spectrophotom&#xE9;triques de mesure activit&#xE9; de la LDH &#xE0; partir des c&#xF4;t&#xE9;s pyruvate et le lactate de la r&#xE9;action a montr&#xE9; une activit&#xE9; plus &#xE9;lev&#xE9;e pyruvate &#x2192; lactate dans le cerveau. Nous plaidons pour l&#x26;#39;utilisation de la spectroscopie par r&#xE9;sonance proton lactate magn&#xE9;tique comme une strat&#xE9;gie non invasive pour le suivi de cette caract&#xE9;ristique du processus de vieillissement. La souris ADNmt mutator nous permet de conclure que le rapport LDH-A/LDH-B accrue entra&#xEE;ne des niveaux &#xE9;lev&#xE9;s de lactate du cerveau, qui, &#xE0; son tour, ont une valeur pr&#xE9;dictive des ph&#xE9;notypes de vieillissement.

Lactate cerveau Haute est une caract&#xE9;ristique de vieillissement et caus&#xE9; par un changement dans la lactate d&#xE9;shydrog&#xE9;nase A / B Ratio

Attualmente, ci sono pochi mezzi per rintracciare fasi sintomatici dell&#39;invecchiamento CNS. Cos&igrave;, anche se cambiamenti metabolici sono implicati nell&#39;invecchiamento basata sulla mutazione del DNA mitocondriale, le manifestazioni rimangono poco chiare. Qui, abbiamo usato normalmente invecchiamento e invecchiamento prematuro del mtDNA topi mutator per stabilire un legame molecolare tra disfunzione mitocondriale e metabolismo anomalo nel processo di invecchiamento. Mediante spettroscopia di risonanza magnetica protonica e HPLC, abbiamo trovato che i livelli di lattato cervello erano duplice aumento nei topi l&#39;invecchiamento sia normalmente e prematuramente durante l&#39;invecchiamento. Per correlare l&#39;impressionante aumento di lattato con patologia dei tessuti, abbiamo indagato gli enzimi della catena respiratoria e rilevato errore mitocondriale in aree chiave del cervello da topi di invecchiamento sia normalmente e prematuramente. Abbiamo usato l&#39;ibridazione in situ per mostrare che cervello aumentata lattato livelli sono stati causati da un cambiamento nelle attivit&agrave; di transcriptional del lattato dehydrogenases per promuovere il piruvato a lattato conversione. Separazione tra i cinque isoenzimi tetramerica lattato deidrogenasi (LDH) hanno rivelato un aumento di quelle dominate da Ldh-un prodotto e una diminuzione di quelli ricchi di prodotto Ldh-B, che, a sua volta, aumenta il piruvato a lattato conversione. Analisi spettrofotometriche misurando attivit&agrave; LDH dai lati della reazione di piruvato e lattato ha mostrato una maggiore &rarr; piruvato lattato attivit&agrave; nel cervello. Ci sostengono l&#39;uso della spettroscopia di risonanza magnetica protonica lattato come una strategia non invasiva per il monitoraggio di questa caratteristica del processo di invecchiamento. Il mouse di mtDNA mutator ci permette di concludere che il rapporto aumento di LDH-A/LDH-B cause cervello alto livelli di lattato, che a loro volta, sono predittivi di fenotipi di invecchiamento.

Cervello alto lattato &egrave; un segno distintivo dell&#39;invecchiamento e causato da uno spostamento della deidrogenasi a del lattato / rapporto di B.

&#x73FE;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x75C7;&#x72B6;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x624B;&#x6BB5;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;DNA&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4E3B;&#x5C0E;&#x578B;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x75C7;&#x72B6;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3068;&#x9014;&#x4E2D;&#x3067;&#x8001;&#x5316;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x969C;&#x5BB3;&#x3068;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7570;&#x5E38;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x78BA;&#x200B;&#x200B;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;mtDNA&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3068;HPLC&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8133;&#x306E;&#x4E73;&#x9178;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x3068;&#x9014;&#x4E2D;&#x3067;&#x8001;&#x5316;&#x6642;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x304C;2&#x500D;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x75C5;&#x7406;&#x3068;&#x4E73;&#x9178;&#x5024;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x65E9;&#x671F;&#x306B;&#x8001;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8133;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x306F;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x8133;&#x306E;&#x4E73;&#x9178;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x4E73;&#x9178;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 5&#x91CF;&#x4F53;&#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;LDH&#xFF09;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306F;&#x3001;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x3001;&#x4E73;&#x9178;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;LDH-&#x88FD;&#x54C1;&#x304A;&#x3088;&#x3073;LDH-B&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x4EBA;&#x3005;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x652F;&#x914D;&#x8005;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x8A8D;&#x3081;&#x305F;&#x3002;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x3068;&#x4E73;&#x9178;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x306E;LDH&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x8133;&#x5185;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x2192;&#x200B;&#x200B;&#x4E73;&#x9178;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x6226;&#x7565;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x4E73;&#x9178;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B9;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; mtDNA&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;LDH-A/LDH-B&#x6BD4;&#x306F;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x8133;&#x306E;&#x4E73;&#x9178;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AD8;&#x3044;&#x8133;&#x306E;&#x4E73;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x4E73;&#x9178;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;A / B&#x6BD4;&#x306E;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;

&#xD604;&#xC7AC;, &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; CNS &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC9D5;&#xD6C4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B8; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xCD94;&#xC801; &#xD558;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC218;&#xB2E8;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xBCC0;&#xD654;&#xB294; mtDNA &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;&#xB294;, &#xBE44;&#xB85D; &#xBC1C;&#xD604; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5D0;&#xC774;&#xC9D5; &#xD558; &#xACE0; &#xC131;&#xAE09; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5D0;&#xC774;&#xC9D5; mtDNA &#xBCC0;&#xACBD;&#xC790; (mutator) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC7A5;&#xC560; &#xBC0F; &#xB178;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0AC; &#xAC04;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xB9C1;&#xD06C; &#xC124;&#xC815; &#xD558;. &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559; &#xBC0F; HPLC&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB1CC; &#xC816; &#xC0B0; &#xC218;&#xC900;&#xC740; &#xC99D;&#xAC00; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBAA8;&#xB450; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; &#xC131;&#xAE09; &#xD558; &#xAC8C; &#xB178;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC870;&#xC9C1; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xC640; &#xC816; &#xC0B0;&#xC758; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xC99D;&#xAC00; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD638;&#xD761; &#xC0AC;&#xC2AC; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC8FC;&#xC694; &#xB450;&#xB1CC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE0; &#xC870;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB178;&#xD654; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC2E4;&#xD328;&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCC0;&#xD658; &#xC816;&#xC774; &#xB098;&#xC62C; pyruvate &#xD64D;&#xBCF4; &#xC99D;&#xAC00; &#xB1CC; &#xC816; &#xC0B0; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC816; &#xC0B0; dehydrogenases&#xC758; transcriptional &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xC0AC;&#xC6A9;. 5 Tetrameric &#xC816; &#xC0B0; &#xD6A8;&#xC18C; (LDH) isoenzymes &#xBD84;&#xB9AC; Ldh &#xC81C;&#xD488; &#xB4E4;&#xACFC; &#xADF8; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; Ldh B &#xC81C;&#xD488;&#xC744; &#xCC28;&#xB840; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD658; &#xC816;&#xC774; &#xB098;&#xC62C; pyruvate &#xC99D;&#xAC00; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xC751;&#xC758; pyruvate &#xBC0F; &#xC816; &#xC0B0; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; LDH &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; spectrophotometric &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB192;&#xC740; pyruvate &rarr; &#xC816;&#xC774; &#xB098;&#xC62C; &#xB1CC;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xAC01; &#xC778; &#xB178;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC816; &#xC0B0; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB17C;&#xC7C1;. MtDNA &#xBCC0;&#xACBD;&#xC790; (mutator) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC99D;&#xAC00; LDH A/LDH B &#xBE44;&#xB294;, &#xCC28;&#xB840; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;, phenotypes &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC608;&#xCE21;&#xC740; &#xC816;&#xC774; &#xB098;&#xC62C; &#xC218;&#xC900; &#xB192;&#xC740; &#xB1CC; &#xC778;&#xD574; &#xACB0;&#xB860;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC816; &#xC0B0; &#xB192;&#xC740; &#xB1CC; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xAC01; &#xC778; &#xC774;&#xBA70; &#xC816; &#xC0B0; &#xD6A8;&#xC18C; A&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; / B &#xBE44;.

En la actualidad, hay pocos medios para hacer un seguimiento de las etapas sintom&#xE1;ticas SNC envejecimiento. Por lo tanto, a pesar de los cambios metab&#xF3;licos est&#xE1;n implicados en el ADNmt mutaci&#xF3;n impulsada por el envejecimiento, las manifestaciones siguen sin estar claros. Aqu&#xED;, utilizamos normalmente el envejecimiento y envejecimiento prematuro de los ratones ADNmt mutadores para establecer un v&#xED;nculo molecular entre la disfunci&#xF3;n mitocondrial y el metabolismo anormal en el proceso de envejecimiento. Usando espectroscop&#xED;a de resonancia magn&#xE9;tica de prot&#xF3;n y HPLC, se encontr&#xF3; que los niveles cerebrales de lactato se duplic&#xF3; en tanto normalmente y prematuramente ratones envejecimiento durante el envejecimiento. Para correlacionar el aumento notable de lactato con la patolog&#xED;a del tejido, que investig&#xF3; las enzimas de la cadena respiratoria mitocondrial y detectado un fallo en las &#xE1;reas clave del cerebro de los ratones normalmente y prematuramente envejecidas. Se utiliz&#xF3; la hibridaci&#xF3;n in situ para demostrar que el aumento de los niveles cerebrales de lactato fueron causadas por un cambio en las actividades de la transcripci&#xF3;n de las deshidrogenasas lactato piruvato para promover la conversi&#xF3;n de lactato. La separaci&#xF3;n de los cinco tetram&#xE9;ricos lactato deshidrogenasa (LDH) isoenzimas revel&#xF3; un aumento de los dominados por la LDH-A producto y una disminuci&#xF3;n de aquellos que son ricos en el producto de LDH-B, que, a su vez, aumenta el piruvato a la conversi&#xF3;n de lactato. Los ensayos espectrofotom&#xE9;tricos que miden la actividad de LDH de los lados piruvato y lactato de la reacci&#xF3;n mostr&#xF3; una mayor piruvato &#x2192; actividad de lactato en el cerebro. Abogamos por el uso de espectroscopia por resonancia magn&#xE9;tica de prot&#xF3;n de lactato como una estrategia no invasiva para el seguimiento de esta se&#xF1;a de identidad del proceso de envejecimiento. El rat&#xF3;n ADNmt mutador nos permite concluir que la relaci&#xF3;n LDH-A/LDH-B mayor causa altos niveles de lactato del cerebro, que, a su vez, son predictivos de los fenotipos del envejecimiento.

Jaime M. Ross

Department of Neuroscience,
Biomedicum

Karolinska Institutet

Visualization of Mitochondrial Respiratory Function using Cytochrome C Oxidase / Succinate Dehydrogenase (COX/SDH) Double-labeling Histochemistry

Histological-Based Stainings Using Free-Floating Tissue Sections

Jaime M. Ross

Department of Neuroscience,Biomedicum

Karolinska Institutet

Visualization of Mitochondrial Respiratory Function using Cytochrome C Oxidase / Succinate Dehydrogenase (COX/SDH) Double-labeling Histochemistry

Histological-Based Stainings Using Free-Floating Tissue Sections

Department of Neuroscience,
Biomedicum