Optimized Staining and Proliferation Modeling Methods for Cell Division Monitoring using Cell Tracking Dyes

Fluorescent cell tracking dyes, in combination with flow and image cytometry, are powerful tools with which to study the interactions and fates of ...

University of Pennsylvania 

Flow cytometric analyses of immune cell proliferation, differentiation, and function are limited by the number of different fluorochromes that can be resolved simultaneously. Additional colors to expand functional analytic capability will facilitate higher dimensional analyses of heterogeneous cell populations by basic and clinical scientists. Our aim in these studies was to evaluate CellVue Claret, a fluorescent, far-red emitting, membrane intercalating dye (excitation maximum: 655 nm, emission maximum 677 nm), as an alternative and/or complementary probe to PKH26 and CFSE(1) for polychromatic studies of immune cell proliferation and function. Using a BD FACSCalibur and human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from 8 different donors (2 donors studied twice), we compared CellVue Claret with the two most commonly used visible-emitting proliferation dyes, PKH26 and CFSE, in terms of: (1) compatibility with 7-Amino-actinomycin D (7-AAD) as a viability marker; (2) effect of dye labeling on lymphocyte viability; and (3) the proliferative response of CD3+ T lymphocytes from 0-96 hours as assessed by dilution of each of the 3 cell tracking dyes in cultures stimulated with anti-CD3 plus IL-2. Post-labeling recoveries and viabilities were similar for all 3 dyes, with modestly higher initial staining intensities and coefficients of variation for CellVue Claret than for CFSE or PKH26. Lymphocyte viabilities in stimulated or unstimulated cultures were also unaffected by choice of dye. Proliferative responses of viable CD3+ lymphocytes were comparable for all three dyes, whether results were reported as Proliferative Fraction (percent of cells that had divided one or more times) or as Precursor Frequency (percent of parent population that had gone on to proliferate in response to anti-CD3 plus IL-2). In summary, T cell proliferation analysis using CellVue Claret gives results equivalent to those obtained with PKH26 or CFSE, expanding the choice of proliferation dyes suitable for use in high dimensional polychromatic studies on flow cytometers with far red (633 nm-658 nm) excitation capabilities.

CellVue Claret, a new far-red dye, facilitates polychromatic assessment of immune cell proliferation.

&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3001; &#x5206;&#x5316;&#x3001; &#x548C;&#x51FD;&#x6570;&#x53EF;&#x4EE5;&#x540C;&#x65F6;&#x89E3;&#x51B3;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C; fluorochromes &#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x53D7;&#x5230;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x989C;&#x8272;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6269;&#x5927;&#x529F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x5C06;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x4E09;&#x7EF4;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x4E0E;&#x4E34;&#x5E8A;&#x79D1;&#x5B66;&#x5BB6;&#x5F02;&#x6784;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8BC4;&#x4EF7; CellVue &#x5E72;&#x7EA2;&#x8461;&#x8404;&#x9152;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x3001; &#x8FDC;&#x7EA2;&#x7684;&#x53D1;&#x5149;&#xFF0C;&#x819C;&#x63D2;&#x5C42;&#x67D3;&#x6599; &#xFF08;&#x6700;&#x5927;&#x52B1;&#x78C1;&#xFF1A; 655 nm&#x3001; &#x53D1;&#x5C04;&#x6700;&#x9AD8; 677 nm&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E3A; PKH26 &#x548C; CFSE(1) &#x591A;&#x8272;&#x7814;&#x7A76;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x548C;/&#x6216;&#x8F85;&#x52A9;&#x63A2;&#x9488;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; BD FACSCalibur &#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x8840;&#x6DB2;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x5355;&#x4E2A;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x5916;&#x5468;&#x8840;) &#x4ECE; 8 &#x4E0D;&#x540C;&#x6350;&#x52A9;&#x8005; &#xFF08;2 &#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x5B66;&#x4E60;&#x4E24;&#x6B21;&#xFF09;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6700;&#x5E38;&#x7528;&#x53EF;&#x89C1;&#x53D1;&#x5149;&#x6269;&#x6563;&#x67D3;&#x6599;&#x3001; PKH26 &#x548C; CFSE&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4; CellVue &#x5E72;&#x7EA2;&#x8461;&#x8404;&#x9152;&#x7684;&#x89D2;&#x5EA6;&#xFF1A; &#xFF08;1&#xFF09; &#x517C;&#x5BB9;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0; &#xFF1B; &#x653E;&#x7EBF;&#x83CC; 7-&#x6C28;&#x57FA;-&#x7D20; D &#xFF08;7-&#x53CD;&#x503E;&#x9500;&#x534F;&#x5B9A; &#x300B;&#xFF09;(2) &#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x67D3;&#x6599;&#x6807;&#x8BB0;&#x5BF9;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x529B; &#xFF1B;(3) CD3 + T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4ECE; 0-96 &#x5C0F;&#x65F6;&#x7531;&#x7A00;&#x91CA;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x7684; 3 &#x5355;&#x5143;&#x8BC4;&#x4F30;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x523A;&#x6FC0;&#x6297; CD3 &#x52A0;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2&#x3002;&#x6240;&#x6709; 3 &#x67D3;&#x6599;&#x3001; &#x5C0F;&#x5E45;&#x4E0A;&#x6DA8;&#x521D;&#x6B65;&#x67D3;&#x8272;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x4E0E; CellVue &#x5E72;&#x7EA2;&#x8461;&#x8404;&#x9152;&#x6BD4; CFSE &#x6216; PKH26 &#x7684;&#x53D8;&#x5F02;&#x7CFB;&#x6570;&#x4E3A;&#x7C7B;&#x4F3C; post-labeling &#x7684;&#x6062;&#x590D;&#x548C;&#x4E0A;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x3002;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x523A;&#x6FC0;&#x6216;&#x9759;&#x6001;&#x6587;&#x5316;&#x4E0A;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x4E5F;&#x53D7;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x3002;&#x53EF;&#x884C; CD3 + &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x67D3;&#x6599;&#x3001; &#x76F8;&#x82E5;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426;&#x589E;&#x6B96;&#x5206;&#x6570; (%&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5206;&#x88C2;&#x4E86;&#x4E00;&#x6B21;&#x6216;&#x591A;&#x6B21;) &#x6216;&#x524D;&#x4F53;&#x9891;&#x7387; &#xFF08;&#x7236;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E00;&#x76F4;&#x6301;&#x7EED;&#x6269;&#x6563;&#x54CD;&#x5E94;&#x6297; CD3 &#x52A0;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2%&#xFF09; &#x4F5C;&#x4E3A;&#x7ED3;&#x679C;&#x4F5C;&#x4E86;&#x6C47;&#x62A5;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528; CellVue &#x5E72;&#x7EA2;&#x8461;&#x8404;&#x9152;&#x7ED9;&#x7ED3;&#x679C;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4E0E; PKH26 &#x6216; CFSE&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x5206;&#x6790;&#x6269;&#x5927;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x9009;&#x62E9;&#x67D3;&#x6599;&#x9002;&#x5408;&#x5728;&#x9AD8;&#x4E09;&#x7EF4;&#x6D41;&#x8FDC;&#x7EA2;&#x8272; &#xFF08;633 nm 658 nm&#xFF09; &#x6FC0;&#x52B1;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0E; cytometers &#x591A;&#x8272;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;

CellVue &#x7EA2;&#x8461;&#x8404;&#x9152;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x8FDC;&#x7EA2;&#x67D3;&#x6599;&#xFF0C;&#x4FBF;&#x4E8E;&#x591A;&#x8272;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;

Analyses des flux par cytom&eacute;trie en flux de la prolif&eacute;ration des cellules immunitaires, la diff&eacute;renciation et la fonction sont limit&eacute;s par le nombre des fluorochromes diff&eacute;rents qui peuvent &ecirc;tre r&eacute;solus en m&ecirc;me temps. Couleurs suppl&eacute;mentaires pour augmenter la capacit&eacute; analytique fonctionnelle facilitera sup&eacute;rieurs analyses dimensionnelles des populations de cellules h&eacute;t&eacute;rog&egrave;nes de chercheurs fondamentaux et cliniciens. Notre but dans ces &eacute;tudes &eacute;tait d&#39;&eacute;valuer CellVue Claret, une &eacute;mission fluorescente, rouge sombre, membrane intercalant colorant (excitation maximale : 655 nm, &eacute;mission maximale 677 nm), comme une sonde alternative et/ou compl&eacute;mentaire &agrave; PKH26 et CFSE(1) pour des &eacute;tudes polychromes de la prolif&eacute;ration des cellules immunitaires et la fonction. En utilisant un BD FACSCalibur et p&eacute;riph&eacute;riques humains de sang cellules mononucl&eacute;aires (PBMC) de 8 diff&eacute;rents donateurs (2 donneurs a &eacute;tudi&eacute; deux fois), nous avons compar&eacute; Claret de CellVue avec les deux plus couramment utilis&eacute;s visible &eacute;mettant prolif&eacute;ration colorants, PKH26 et CFSE, en termes de: (1) compatibilit&eacute; avec 7-Amino-l&#39;actinomycine D (7-AAD) comme marqueur de viabilit&eacute; ; (2) l&#39;effet de colorant l&#39;&eacute;tiquetage sur la viabilit&eacute; des lymphocytes ; et (3) la r&eacute;ponse prolif&eacute;rative des lymphocytes T CD3 + de 0 &agrave; 96 heures tel qu&#39;&eacute;valu&eacute; par dilution de chacun de la cellule 3 suivi de colorants dans les cultures stimul&eacute;e avec anti-CD3, plus IL-2. Post-Labeling les recouvrements et les viabilit&eacute;s &eacute;taient similaires pour tous les 3 colorants, avec des intensit&eacute;s de coloration initiales l&eacute;g&egrave;rement plus &eacute;lev&eacute;es et des coefficients de variation pour CellVue Claret que CFSE ou PKH26. Viabilit&eacute;s lymphocytes stimul&eacute;s ou non stimul&eacute;es cultures &eacute;taient &eacute;galement affect&eacute;es par le choix du colorant. Des r&eacute;actions de prolif&eacute;ration des lymphocytes CD3 + viables &eacute;taient comparables pour les trois colorants, si les r&eacute;sultats ont &eacute;t&eacute; pr&eacute;sent&eacute;s sous forme de Fraction prolif&eacute;rative (pourcentage de cellules qui avaient divis&eacute; une ou plusieurs fois) ou comme pr&eacute;curseurs de fr&eacute;quence (% de la population parente qui avait continu&eacute; &agrave; prolif&eacute;rer en r&eacute;ponse aux anti-CD3 et IL-2). En r&eacute;sum&eacute;, l&#39;analyse de prolif&eacute;ration des lymphocytes T &agrave; l&#39;aide de Claret de CellVue donne des r&eacute;sultats &eacute;quivalents &agrave; ceux obtenus avec le PKH26 ou CFSE, &eacute;largir le choix de la prolif&eacute;ration des colorants adapt&eacute; aux hautes &eacute;tudes polychromatiques dimensionnelles sur les cytom&egrave;tres de flux avec des capacit&eacute;s d&#39;excitation rouges sombre (633 nm-658 nm).

CellVue Claret, un nouveau colorant rouge sombre, facilite l&#39;&eacute;valuation polychromatique de prolif&eacute;ration de cellules immunitaires.

Flie&szlig;en Cytometric Analysen von Immunzellen Proliferation, Differenzierung und Funktion werden durch die Anzahl der verschiedenen Fluorochromen begrenzt, die gleichzeitig gel&ouml;st werden k&ouml;nnen. Zus&auml;tzliche Farben erweitern analytic Funktionsf&auml;higkeit werden h&ouml;here dimensionale Analysen der heterogenen Zelle Bev&ouml;lkerungen von Grundlagenforschung und der klinischen Wissenschaftlern erleichtern. Unser Ziel in diesen Studien war, CellVue Claret, ein Neonlicht, dunkelrote ausgeben, Membran intercalating Farbstoff zu bewerten (maximale Erregung: 655 nm, Emission maximale 677 nm), als eine alternative und/oder erg&auml;nzenden Sonde, PKH26 und CFSE(1) f&uuml;r polychromatischen Studien der immun Zellproliferation und Funktion. Mit einem BD FACSCalibur und menschlichen peripheren MONONUKLE&Auml;RE Zellen (PBMCs) von 8 verschiedenen Gebern (2 Spender studierte zweimal) Blut, wir gegen&uuml;ber CellVue Claret die zwei am h&auml;ufigsten verwendeten sichtbaren ausgebende Verbreitung Farbstoffe, PKH26 und CFSE, in Bezug auf: (1) Kompatibilit&auml;t mit 7-Amino-Actinomycin D (7-AAD) als Marker Lebensf&auml;higkeit; (2) Wirkung der Farbstoff Beschriftung auf Lymphozyten Lebensf&auml;higkeit; und (3) die proliferative Antwort von CD3 + T-Lymphozyten von 0-96 Stunden durch Verd&uuml;nnung von jedem der 3 Zelle Verfolgung beurteilten Farbstoffe in Kulturen mit Anti-CD3 plus Il angeregt. Post-Labeling Einziehungen und k&uuml;nstliche waren f&uuml;r alle 3 Farbstoffe, mit geringf&uuml;gig h&ouml;here anf&auml;ngliche F&auml;rbung Intensit&auml;ten und Variationskoeffizienten f&uuml;r CellVue Claret als CFSE oder PKH26. Lymphozyte k&uuml;nstliche stimuliert oder ab Kulturen waren auch durch Wahl der Farbstoff unber&uuml;hrt. Proliferative Reaktionen von lebensf&auml;higen CD3 + Lymphozyten waren f&uuml;r alle drei Farbstoffe, vergleichbar, ob Ergebnisse gemeldet wurden, als Proliferative Bruch (Prozent der Zellen, die einmal oder mehrmals geteilt hatten) oder als Vorl&auml;ufer-Frequenz (Prozent der &uuml;bergeordneten Bev&ouml;lkerung, die auf gegangen waren, als Reaktion auf Anti-CD3 plus Il vermehren). Zusammenfassend, T-Zell-Vermehrung-Analyse mit CellVue Claret gibt Ergebnisse gleichwertig mit PKH26 oder CFSE, erzielten Farbstoffe erweitern die Wahl der Verbreitung geeignet f&uuml;r den Einsatz in hoch dimensionalen polychromatischen Studien zu flie&szlig;en Cytometers mit weit rot (633 nm-658 nm)-Erregung-Funktionen.

CellVue Claret, einen neuen dunkelrote Farbstoff erleichtert polychromatischen Bewertungder immun Zellproliferation.

Analisi cytometric flusso di proliferazione delle cellule immunitarie, la differenziazione e la funzione sono limitate dal numero dei fluorocromi diversi che possono essere risolte simultaneamente. Colori aggiuntivi per espandere la capacit&agrave; analitica funzionale faciliter&agrave; l&#39;analisi dimensionale superiore delle popolazioni delle cellule eterogenee da scienziati di base e clinici. Il nostro obiettivo in questi studi &egrave; stato di valutare CellVue Claret, un&#39;emissione fluorescente, far-red, membrana intercalando colorante (eccitazione massima: 655 nm, emissione massima 677 nm), come una sonda alternativa o complementare per PKH26 e CFSE(1) per policromatici studi di proliferazione delle cellule immunitarie e funzione. Utilizzando un BD FACSCalibur e periferico umano sangue cellule mononucleate (PBMCs) da 8 diversi donatori (2 donatori ha studiati due volte), abbiamo confrontato CellVue Claret con i due pi&ugrave; comunemente usati che emettono visibile proliferazione coloranti, PKH26 e CFSE, in termini di: (1) compatibilit&agrave; con 7-Amino-actinomicina D (7-AAD) come un indicatore di redditivit&agrave;; (2) effetto di tintura etichettatura sulla redditivit&agrave; dei linfociti; e (3) la risposta proliferativa dei linfociti CD3 + T da 0-96 ore come valutato mediante diluizione di ciascuna cella 3 monitoraggio dei coloranti nelle culture stimolata con anti-CD3 plus IL-2. Post-Labeling recuperi e viabilit&agrave; erano simili per tutti i 3 coloranti, con intensit&agrave; di colorazione iniziale pi&ugrave; modestamente elevate e coefficienti di variazione per CellVue Claret rispetto per CFSE o PKH26. Viabilit&agrave; dei linfociti stimolati o sia culture erano anche influenzata dalla scelta di colorante. Risposte proliferative dei linfociti CD3 + vitali erano paragonabili per tutti e tre i coloranti, se i risultati sono stati segnalati come frazione proliferativa (percentuale di cellule che avevano diviso una o pi&ugrave; volte) o come precursore di frequenza (per cento della popolazione del padre che aveva continuato a proliferare in risposta all&#39;anti-CD3 plus IL-2). In sintesi, analisi di proliferazione delle cellule T utilizzando CellVue Claret d&agrave; risultati equivalenti a quelli ottenuti con PKH26 o CFSE, ampliando la scelta di proliferazione coloranti adatto all&#39;utilizzo in alti studi policromatici dimensionali su citometri a flusso con capacit&agrave; di eccitazione lontano rossa (633 nm-658 nm).

CellVue Claret, un nuovo colorante far-red, facilita la valutazione policromo di proliferazione delle cellule immunitarie.

&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC; &#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x5225;&#x306E;&#x87A2;&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x6570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x62E1;&#x5927;&#x3059;&#x308B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x8272;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x6B21;&#x5143;&#x89E3;&#x6790;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x306E;&#x79D1;&#x5B66;&#x8005;&#x306E;&#x7570;&#x7A2E;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CellVue &#x3092;&#x767A;&#x5149;&#x86CD;&#x5149;&#x3001;&#x9060;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x584A;&#x72B6;&#x8272;&#x7D20;&#x819C;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x3060;&#x3063;&#x305F; &#xFF08;&#x6700;&#x5927;&#x52B1;&#x8D77;: 655 nm&#x3001;&#x6392;&#x51FA;&#x6700;&#x5927; 677 nm&#xFF09;&#x3001;PKH26 &#x3068; CFSE(1) &#x3092;&#x4EE3;&#x66FF;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3057;&#x5408;&#x3046;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x591A;&#x8272;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3002;BD FACSCalibur &#x3068;&#x3072;&#x3068;&#x672B;&#x68A2;&#x8840;&#x5358;&#x6838;&#x7403; (Pbmc) (2 &#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x306F;&#x52C9;&#x5F37; 2 &#x56DE;) 8 &#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7528;&#x8A9E;&#x3092; 2 &#x3064;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x8996;&#x767A;&#x5149;&#x5897;&#x6B96;&#x67D3;&#x6599;&#x3001;PKH26 &#x3068; CFSE&#x3001;CellVue &#x30AF;&#x30E9;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;: (1) &#x306E;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027; 7 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CE;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; D (7 AAD) &#x3092;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;; &#x3068;&#x3057;&#x3066;(2) &#x8272;&#x7D20;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306B;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;;(3) CD3 + T &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x53CD;&#x5FDC;&#x8FFD;&#x8DE1; 3 &#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x5E0C;&#x91C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3068;&#x3057;&#x3066; 0 96 &#x6642;&#x9593;&#x304B;&#x3089;&#x67D3;&#x6599;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3067;&#x6297; CD3 &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9; IL-2 &#x3067;&#x523A;&#x6FC0;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Post-labeling &#x30FB; &#x30EA;&#x30AB;&#x30D0;&#x30EA;&#x3068;&#x597D;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; 3 &#x67D3;&#x6599; CFSE &#x307E;&#x305F;&#x306F; PKH26 &#x3088;&#x308A; CellVue &#x30AF;&#x30E9;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5909;&#x52D5;&#x4FC2;&#x6570;&#x3068;&#x63A7;&#x3048;&#x3081;&#x306A;&#x9AD8;&#x3044;&#x521D;&#x671F;&#x67D3;&#x8272;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x597D;&#x523A;&#x6FC0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7121;&#x523A;&#x6FC0;&#x6587;&#x5316;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x67D3;&#x6599;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;.&#x7D50;&#x679C;&#x5897;&#x6B96;&#x5272;&#x5408; (&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E; 1 &#x56DE;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x304C;&#x5206;&#x304B;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;) &#x3084;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570; (&#x6297; CD3 &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9; IL-2 &#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x5897;&#x6B96;&#x3059;&#x308B;&#x884C;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x89AA;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E; &#xFF05;&#xFF09; &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x73FE;&#x5B9F;&#x7684;&#x306A; CD3 &#x967D;&#x6027;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; 3 &#x3064;&#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;CellVue &#x30AF;&#x30E9;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F; PKH26 &#x307E;&#x305F;&#x306F; CFSE&#x3001;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x306B;&#x3088;&#x308B; T &#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x80A2;&#x3092;&#x62E1;&#x5927;&#x4F7F;&#x7528; cytometers &#x9060;&#x8D64; (633 nm 658 nm) &#x52B1;&#x8D77;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x9AD8;&#x6B21;&#x5143;&#x591A;&#x8272;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x67D3;&#x6599;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CellVue &#x30AF;&#x30E9;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x9060;&#x8D64;&#x8272;&#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x591A;&#x8272;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD750;&#xB984; cytometric &#xBD84;&#xC11D; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;, &#xBD84;&#xD654;, &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xD574;&#xACB0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xD615;&#xAD11;&#xC758; &#xC218;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xCD94;&#xAC00; &#xC0C9;&#xC0C1; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xACFC;&#xD559;&#xC790; &#xB4E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xCC28;&#xC6D0; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; CellVue Claret, &#xD615;&#xAD11;, &#xC9C0;&#xAE08; &#xBC29;&#xCD9C;, &#xC5FC;&#xB8CC; intercalating &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4; (&#xC5EC;&#xAE30; &#xCD5C;&#xB300;: 655 nm, &#xBC29;&#xCD9C; &#xCD5C;&#xB300; 677 nm), &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC0C9;&#xCC44; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xCCB4; &#xB610;&#xB294; &#xBCF4;&#xC644; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; pkh26&#xC640; CFSE(1)&#xB85C;. (2 &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xACF5;&#xBD80; &#xB450; &#xBC88;) 8 &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xB2E8; &#xC138;&#xD3EC; (PBMCs)&#xB97C; &#xD608;&#xC561; BD FACSCalibur &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBC1C;&#xAD11; &#xD655;&#xC0B0; &#xC5FC;&#xB8CC;, PKH26 &#xBC0F; CFSE, CellVue Claret&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;: &#xC0DD;&#xC874; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB85C;; 7-&#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC545;&#xD2F0;&#xB178;&#xB9C8;&#xC774;&#xC2E0; d (7-AAD) (1) &#xD638;&#xD658;&#xC131; (2) &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xC0DD;&#xC874;;&#xC5D0; &#xB77C;&#xBCA8; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; (3) &#xCD94;&#xC801; 3 &#xC140;&#xC758; &#xAC01;&#xAC01;&#xC758; &#xD76C;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; 0-96 &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; CD3 + T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC18;&#xC751; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xBB38;&#xD654; &#xC548;&#xD2F0; CD3 &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2&#xC640; &#xC790;&#xADF9;. Post-labeling &#xBCF5;&#xAD6C; &#xBC0F; viabilities &#xACB8;&#xC190; &#xD558; &#xAC8C; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xCD08;&#xAE30; &#xCC29; &#xC0C9; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC0F; CFSE &#xB610;&#xB294; PKH26 &#xBCF4;&#xB2E4; CellVue Claret&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCC0;&#xB3D9; &#xACC4;&#xC218;&#xC640; &#xBAA8;&#xB4E0; 3 &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; viabilities &#xC790;&#xADF9; &#xB610;&#xB294; unstimulated &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; CD3 + &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC751;&#xB2F5; &#xD588;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB450; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xAD50; &#xACB0;&#xACFC; &#xC804;&#xC870; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; (&#xC548;&#xD2F0;-CD3 &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC73C;&#xB85C; &#xACA9; &#xC99D;&#xC5D0; &#xAC14;&#xB2E4; &#xBD80;&#xBAA8; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xD37C;&#xC13C;&#xD2B8;) &#xB610;&#xB294; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBD84;&#xC218; (1 &#xD68C; &#xC774;&#xC0C1; &#xBD84;&#xD560; &#xD588;&#xB2E4; &#xC140; %)&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, CellVue Claret &#xC81C;&#xACF5; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5BB;&#xC740; PKH26 &#xB610;&#xB294; CFSE, &#xB3D9;&#xC77C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD655;&#xC0B0; &#xBD84;&#xC11D; &#xD750;&#xB984; cytometers&#xAE4C;&#xC9C0; &#xB808;&#xB4DC; (633 nm 658 nm) &#xC5EC;&#xAE30; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xCC28;&#xC6D0; &#xC0C9;&#xCC44; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xD655;&#xC0B0;&#xC758; &#xD655;&#xB300;.

CellVue Claret, &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xC0C9;&#xCC44; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

An&aacute;lisis de citometr&iacute;a de flujo de funci&oacute;n, diferenciaci&oacute;n y proliferaci&oacute;n celular inmune est&aacute;n limitados por el n&uacute;mero de diferentes fluorocromos que pueden resolverse simult&aacute;neamente. Colores adicionales para ampliar la capacidad anal&iacute;tica funcional facilitar&aacute; mayor an&aacute;lisis dimensionales de poblaciones heterog&eacute;neas de la c&eacute;lula por cient&iacute;ficos b&aacute;sicos y cl&iacute;nicos. Nuestro objetivo en estos estudios fue evaluar CellVue Claret, una emisi&oacute;n fluorescente, far-red, membrana intercalando tinte (excitaci&oacute;n m&aacute;xima: 655 nm, emisi&oacute;n m&aacute;xima 677 nm), como una sonda alternativa y/o complementaria a PKH26 y CFSE(1) para estudios pol&iacute;cromas de proliferaci&oacute;n celular inmune y funci&oacute;n. Usando una BD FACSCalibur y humano perif&eacute;rico de la sangre c&eacute;lulas mononucleares (PBMCs) de 8 diferentes donantes (2 donantes estudiaron dos veces), comparamos CellVue Claret con los dos m&aacute;s utilizados visible emiten proliferaci&oacute;n tintes, PKH26 y CFSE, en t&eacute;rminos de: (1) compatibilidad con 7-Amino-Actinomicina D (7-AAD) como un marcador de viabilidad; (2) efecto de tinte etiquetado sobre viabilidad de linfocito; y (3) la respuesta proliferativa de linfocitos T CD3 + de 0-96 horas, seg&uacute;n lo determinado por diluci&oacute;n de cada una de la celda 3 seguimiento tintes en cultivos estimulada con anti-CD3 y IL-2. Post-Labeling recuperaciones y viabilidades fueron similares para todos 3 tintes, con intensidades de coloraci&oacute;n iniciales modestamente m&aacute;s altas y coeficientes de variaci&oacute;n para CellVue Claret que CFSE o PKH26. Viabilidades de linfocitos en culturas sin estimular o estimuladas tambi&eacute;n fueron afectadas por la opci&oacute;n del tinte. Respuesta proliferativa de linfocitos CD3 + viables fueron comparable para todos los tres tintes, si los resultados se informaron como fracci&oacute;n proliferativa (porcentaje de c&eacute;lulas que dividieron una o m&aacute;s veces) o como Precursor de frecuencia (porcentaje de la poblaci&oacute;n de padres que hab&iacute;a ido a proliferan en respuesta a anti-CD3 y IL-2). En Resumen, an&aacute;lisis de proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas T con CellVue Claret da resultados equivalentes a las obtenidas con PKH26 o CFSE, ampliando la elecci&oacute;n de la proliferaci&oacute;n tintes conveniente para el uso en altos estudios policrom&aacute;ticos dimensionales en cit&oacute;metros de flujo con mucho rojas capacidades de excitaci&oacute;n (633 nm-658 nm).

CellVue Claret, un nuevo tinte far-red, facilita la evaluaci&oacute;n de pol&iacute;croma de proliferaci&oacute;n celular inmune.

&#x4ECE;&#x5931;&#x8861;&#x51CB;&#x4EA1;&#x8C03;&#x63A7;&#x5316;&#x7597;&#x8010;&#x836F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5728; t(4;11) &#x4E0E;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7684;&#x9884;&#x540E;&#x8F83;&#x5DEE;&#x3002;&#x6297;&#x51CB;&#x4EA1; BCL 2 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53CA;&#x76EE;&#x6807;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x5728; t(4;11) &#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x548C; MLL &#x5BA1;&#x67E5; bcl-2 &#x8868;&#x8FBE;&#x4E86;&#x548C;&#x975E; MLL &#x5A74;&#x513F;/&#x513F;&#x7AE5;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x75C5;&#x4F8B;&#x7531;&#x897F;&#x65B9;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x5206;&#x6790;&#x548C;/&#x6216;&#x5B9E;&#x65F6;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;Genasensetrade &#x6807;&#x8BB0; G3139 Oblimersen &#x94A0;&#xFF09; &#x5355;&#x72EC;&#x6216;&#x7ED3;&#x5408;&#x5316;&#x7597;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F5C;&#x7528;&#x88AB;&#x8BC4;&#x4F30; MTT [(3-4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl &#x56DB;&#x6C2E;&#x5511;&#x6EB4;] &#x68C0;&#x6D4B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x5E94;&#x7528; pharmacostatistical &#x54CD;&#x5E94;&#x66F2;&#x9762;&#x9020;&#x578B;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;RS4:11 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;&#x4E3B;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x548C; t(4;11) &#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E30;&#x5BCC; BCL2 mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x53D8;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6709;&#x65F6;&#x5927;&#x91CF; BCL2 mRNA &#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5176;&#x4ED6;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x4E9A;&#x578B;&#x3002;G3139 &#x51CF;&#x5C11; BCL2 mRNA &#x548C; RS4:11 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5355;&#x5242; G3139 &#x5230;&#x6700;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x662F; RS4:11&#x3002;G3139 &#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x81F4;&#x654F; RS4:11 &#x548C; MV4 11 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4EE5;&#x9009;&#x62E9; anti-leukaemia &#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x3002;RS4:11 &#x7EC6;&#x80DE; G3139 &#x7ED3;&#x5408;&#x963F;&#x9709;&#x7D20; &#xFF08;ADR&#xFF09; &#x589E;&#x52A0;&#x6D3B;&#x52A8;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 3 &#x548C; TUNEL &#x67D3;&#x8272;&#x76F8;&#x6BD4; ADR &#x72EC;&#x81EA;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3001; &#x548C; G3139 &#x589E;&#x52A0; S &#x9636;&#x6BB5;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684; BCL-2 &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5728; t(4;11) &#x4E0E;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x9776;&#x3002;G3139 &#x5C55;&#x54C1;&#x4E34;&#x5E8A;&#x524D;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x4E0E;&#x5728; RS4:11 &#x548C; MV4 11 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x9009;&#x62E9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x534F;&#x540C;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5F71;&#x54CD;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;

&#x4E30;&#x5BCC;&#x6297;&#x51CB;&#x4EA1; BCL-2 &#x662F;&#x5728;&#x4E0E; t(4;11) &#x6613;&#x4F4D;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x5206;&#x5B50;&#x9776;&#x3002;

Chemotherapy resistance from imbalanced apoptosis regulation may contribute to poor outcome in leukaemias with t(4;11). Anti-apoptotic BCL-2 expression and target modulation were characterized in cell lines with t(4;11) and BCL-2 expression was examined in MLL and non-MLL infant/paediatric leukaemia cases by Western blot analysis and/or real-time polymerase chain reaction. Cytotoxicity of Genasensetrade mark (Oblimersen Sodium, G3139) alone or combined with cytotoxic drugs was assessed by MTT [(3-4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide] assays of the cell lines, applying pharmacostatistical response surface modelling of drug interactions. Apoptosis and cell cycle were evaluated by flow cytometry in RS4:11 cells. Primary leukaemias and cell lines with t(4;11) expressed abundant BCL2 mRNA and protein. Variable, sometimes substantial BCL2 mRNA was detected in other leukaemia subtypes. G3139 reduced BCL2 mRNA and protein in RS4:11 cells. The most sensitive cell line to single-agent G3139 was RS4:11. Low G3139 concentrations sensitized RS4:11 and MV4-11 cells to select anti-leukaemia cytotoxic drugs. In RS4:11 cells, combining G3139 with doxorubicin (ADR) increased active caspase 3 and TUNEL staining compared to ADR alone, indicating greater apoptosis, and G3139 increased S-phase progression. The abundant BCL-2 affords a molecular target in leukaemias with t(4;11). G3139 exhibits preclinical activity and synergy with select cytotoxic agents in RS4:11 and MV4-11 cells, and these effects occur through apoptosis.

Abundant anti-apoptotic BCL-2 is a molecular target in leukaemias with t(4;11) translocation.

R&eacute;sistance de la chimioth&eacute;rapie de r&eacute;glementation d&eacute;s&eacute;quilibr&eacute;e de l&#39;apoptose peut contribuer au mauvais pronostic dans les leuc&eacute;mies avec t(4;11). Anti-apoptotiques BCL-2 expression et cible modulation ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;s chez les lign&eacute;es cellulaires avec t(4;11) et l&#39;expression de BCL-2 a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e chez MLL et des cas de leuc&eacute;mie infantile/p&eacute;diatrique non-MLL par Western blot analyse et/ou la r&eacute;action en cha&icirc;ne par polym&eacute;rase en temps r&eacute;el. Cytotoxicit&eacute; de marque Genasensetrade (Oblimersen de Sodium, G3139), seul ou combin&eacute; avec des m&eacute;dicaments cytotoxiques a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e par des essais [(3-4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide] MTT des lign&eacute;es cellulaires, appliquant la r&eacute;ponse pharmacostatistical surface : mod&eacute;lisation des interactions m&eacute;dicamenteuses. Apoptose et cycle cellulaire ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;s par cytom&eacute;trie en flux dans les cellules RS4:11. Les leuc&eacute;mies primaires et lign&eacute;es cellulaires avec t(4;11) exprim&eacute; abondante BCL2 ARNm et prot&eacute;ines. Variable, parfois substantielles BCL2 ARNm a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute; dans les autres sous-types de leuc&eacute;mie. G3139 r&eacute;duit BCL2 ARNm et prot&eacute;ines dans les cellules RS4:11. La lign&eacute;e de cellules plus sensible &agrave; la monoth&eacute;rapie G3139 &eacute;tait RS4:11. Les concentrations basses G3139 sensibilis&eacute;s RS4:11 et MV4-11 cellules de s&eacute;lectionner les m&eacute;dicaments cytotoxiques anti-leukaemia. Dans les cellules RS4:11, combinant G3139 avec la doxorubicine (ADR) a augment&eacute; de caspase actif 3 TUNEL coloration par rapport aux ADR seul, indiquant l&#39;apoptose sup&eacute;rieur et G3139 augment&eacute; la progression de la phase S. La prot&eacute;ine BCL-2 abondante offre une cible mol&eacute;culaire dans les leuc&eacute;mies avec t(4;11). G3139 expositions activit&eacute;s pr&eacute;cliniques et synergie avec certains agents cytotoxiques dans RS4:11 et MV4-11 cellules, et ces effets se manifestent par l&#39;interm&eacute;diaire de l&#39;apoptose.

Abondante anti-apoptotiques BCL-2 est une cible mol&eacute;culaire dans les leuc&eacute;mies avec translocation t(4;11).

Resistencia de la quimioterapia de la regulaci&oacute;n de la apoptosis desequilibrado puede contribuir a un resultado pobre en leucemias con t(4;11). Modulaci&oacute;n de expresi&oacute;n y destino de BCL-2 anti-apoptotic fueron caracterizados en l&iacute;neas celulares con t(4;11) y expresi&oacute;n de BCL-2 fue examinado en MLL y casos de leucemia infantil/pedi&aacute;trico no MLL por Western blot an&aacute;lisis y/o reacci&oacute;n en cadena de polimerasa en tiempo real. Ensayos MTT [(bromuro tetrazolio 3-4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl] de las l&iacute;neas celulares, aplicar pharmacostatistical respuesta modelado superficial de las interacciones medicamentosas evaluaron la citotoxicidad de marca Genasensetrade (Oblimersen s&oacute;dico, G3139) solo o combinado con f&aacute;rmacos citot&oacute;xicos. Ciclo celular y la apoptosis se evaluaron mediante citometr&iacute;a de flujo en las c&eacute;lulas RS4:11. Leucemias primarias y l&iacute;neas celulares con t(4;11) expresan abundante BCL2 mRNA y prote&iacute;na. Variable, a veces sustanciales BCL2 mRNA fue detectada en otros subtipos de leucemia. G3139 hab&iacute;a reducido BCL2 mRNA y prote&iacute;na en las c&eacute;lulas RS4:11. La l&iacute;nea celular m&aacute;s sensible al agente &uacute;nico G3139 fue RS4:11. Concentraciones bajas G3139 sensibilizado RS4:11 y c&eacute;lulas MV4-11 para seleccionar f&aacute;rmacos citot&oacute;xicos anti-leucemia. En las c&eacute;lulas RS4:11, combinando G3139 con doxorrubicina (ADR) aument&oacute; activo caspasa 3 y tinci&oacute;n TUNEL comparado con ADR solo, indicando mayor apoptosis, y G3139 mayor progresi&oacute;n de la fase S. La abundante BCL-2 ofrece una Diana molecular en leucemias con t(4;11). G3139 exhibe actividad precl&iacute;nica y sinergia con seleccionados f&aacute;rmacos citot&oacute;xicos en c&eacute;lulas de MV4-11 y RS4:11, y estos efectos se producen a trav&eacute;s de la apoptosis.

Abundante anti-apopt&oacute;tica BCL-2 es un blanco molecular en leucemias con el desplazamiento de t(4;11).

Chemotherapie-Widerstand von unausgewogenen Apoptose-Verordnung kann zu ung&uuml;nstigen Verlauf in Leuk&auml;mien mit t(4;11) beitragen. Anti-Apoptotic BCL-2-Ausdruck und Ziel-Modulation zeichneten sich in Zelllinien mit t(4;11) und BCL-2-Ausdruck in MLL gepr&uuml;ft und nicht-MLL Kleinkind/p&auml;diatrische Leuk&auml;mief&auml;lle von Western blot Analyse und/oder Echtzeit Polymerase-Kettenreaktion. Die Zytotoxizit&auml;t von Genasensetrade Mark (Oblimersen-Natrium, G3139) allein oder in Kombination mit Zytostatika wurde von MTT [(3-4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl Tetrazolium Bromid] Proben die Zelllinien, Pharmacostatistical Antwort Oberfl&auml;che Modellierung von Wechselwirkungen mit anderen Arzneimitteln anwenden bewertet. Apoptosis und Zelle Zyklus wurden durch Durchflusszytometrie in RS4:11 Zellen ausgewertet. Prim&auml;re Leuk&auml;mien und Zelllinien mit t(4;11) ausgedr&uuml;ckt reichlich BCL2-mRNA und Protein. Variabel, manchmal erhebliche BCL2-mRNA in anderen Leuk&auml;mie-Subtypen aufgetreten. G3139 reduziert BCL2 mRNA und Protein in den RS4:11 Zellen. Die empfindlichste Zelllinie zu Single-Agent G3139 war RS4:11. Low G3139 Konzentrationen sensibilisiert RS4:11 und MV4-11 Zellen anti-leukaemia Zytostatika ausw&auml;hlen. In den RS4:11 Zellen Kombination von G3139 mit Doxorubicin (ADR) erh&ouml;hte aktive Caspase 3 TUNEL F&auml;rbung im Vergleich zu ADR allein angibt, gr&ouml;&szlig;ere Apoptosis und G3139 erh&ouml;ht Fortschreiten der S-Phase. Die reichlich vorhandenen BCL-2 bietet ein molekulares Ziel in Leuk&auml;mien mit t(4;11). G3139 Exponate pr&auml;klinische Aktivit&auml;t und Synergie mit ausgew&auml;hlten zytotoxischen Agenten in RS4:11 und MV4-11 Zellen, und diese Effekte entstehen durch Apoptose.

Reichlich Anti-Apoptotic BCL-2 ist ein molekulares Ziel in Leuk&auml;mien mit Translokation t(4;11).

Resistenza di chemioterapia dal regolamento squilibrata apoptosi pu&ograve; contribuire a prognosi sfavorevole in leucemie con t(4;11). Anti-apoptotic BCL-2 modulazione di espressione e di destinazione sono stati caratterizzati in linee cellulari con t(4;11) ed espressione di BCL-2 &egrave; stato esaminato in MLL e casi di leucemia infantile/pediatrico non MLL di Western blot analisi e/o reazione a catena della polimerasi in tempo reale. Citotossicit&agrave; di mark Genasensetrade (sodio Oblimersen, G3139) da solo o in combinazione con farmaci citotossici &egrave; stato valutato da saggi [(3-4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromuro] MTT delle variet&agrave; di cellula, applicando pharmacostatistical risposta superficiale modellistica delle interazioni farmacologiche. Apoptosi e ciclo cellulare sono stati valutati tramite flusso cytometry nelle cellule RS4:11. Leucemie primarie e linee cellulari con t(4;11) espressero abbondanti BCL2 mRNA e proteina. Variabile, a volte sostanziale BCL2 mRNA &egrave; stato rilevato in altri sottotipi di leucemia. G3139 ridotto BCL2 mRNA e proteina nelle cellule RS4:11. La linea delle cellule pi&ugrave; sensibile a singolo agente G3139 era RS4:11. Concentrazioni basse G3139 sensibilizzati RS4:11 e MV4-11 celle per selezionare anti-leukaemia farmaci citotossici. Nelle cellule RS4:11, combinando G3139 con doxorubicina (ADR) aumentato attiva caspase 3 colorazione TUNEL rispetto all&#39;ADR da solo, che indica una maggiore apoptosi e G3139 aumentato progressione fase S. L&#39;abbondante BCL-2 offre un bersaglio molecolare in leucemie con t(4;11). G3139 esibisce attivit&agrave; preclinici e sinergia con selezionati agenti citotossici in cellule MV4-11 e RS4:11, e questi effetti si verificano tramite apoptosi.

Abbondanti anti-apoptotic BCL-2 &egrave; un bersaglio molecolare in leucemie con traslocazione t(4;11).

&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x62B5;&#x6297;&#x4E0D;&#x5747;&#x8861;&#x306A;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x304B;&#x3089; t(4;11) &#x3068;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306E;&#x4E88;&#x5F8C;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x6297;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; BCL 2 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF; t(4;11) &#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x304A;&#x3088;&#x3073; bcl-2 &#x767A;&#x73FE; MLL &#x3067;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x975E; MLL &#x5E7C;&#x5150;/&#x5C0F;&#x5150;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9; &#x30A6;&#x30A8;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x3057;&#x307F;&#x306E;&#x3002;Genasensetrade &#x30DE;&#x30FC;&#x30AF; Oblimersen &#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; &#xFF08;G3139&#xFF09; &#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x85AC;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; pharmacostatistical &#x5FDC;&#x7B54;&#x8868;&#x9762;&#x85AC;&#x7269;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x9069;&#x7528;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; MTT [(3-4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl &#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30BE;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x81ED;&#x5316;] &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;RS4:11 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A; t(4;11) &#x3092;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A; BCL2 &#x306E; mRNA &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5909;&#x6570;&#x3001;&#x6642;&#x3005; &#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A; BCL2 &#x306E; mRNA &#x4ED6;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;G3139 BCL2 &#x306E; mRNA &#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; RS4:11 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3002;G3139 &#x5358;&#x5264;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x884C;&#x306F;&#x3001;RS4:11 &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;G3139 &#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6; RS4:11 &#x3068; anti-leukaemia &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x85AC;&#x5264;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3059;&#x308B; MV4 11 &#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x611F;&#x3002;RS4:11 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C9;&#x30AD;&#x30BD;&#x30EB;&#x30D3;&#x30B7;&#x30F3; (ADR) G3139 &#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC; 3 &#x5897;&#x52A0;&#x3057; TUNEL &#x67D3;&#x8272; ADR &#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x3001;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3001;G3139 S &#x671F;&#x9032;&#x884C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A; BCL-2 t(4;11) &#x3068;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092; affords &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;G3139 &#x51FA;&#x54C1;&#x524D;&#x81E8;&#x5E8A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068; RS4:11 &#x3068; MV4 11 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9078;&#x629E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x85AC;&#x5264;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E57;&#x52B9;&#x679C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x6297;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; BCL 2 t(4;11) &#x8EE2;&#x5EA7;&#x3068;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xBD88;&#xADE0;&#xD615; apoptosis &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD654;&#xD559; &#xC694;&#xBC95; &#xC800;&#xD56D; t(4;11)&#xC640; leukaemias&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBE48;&#xC57D;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC548;&#xD2F0;-apoptotic BCL-2 &#xC2DD; &#xBC0F; &#xB300;&#xC0C1; &#xBCC0;&#xC870; t(4;11)&#xC640; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC740; &#xD558; &#xACE0; BCL-2 &#xC2DD;&#xC740; MLL &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC11C;&#xC591; &#xC5EC; &#xBE44; MLL &#xC720;&#xC544;/&#xC18C;&#xC544; &#xC885; &#xC591; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC624; &#xC810; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751;. &#xB9C8;&#xD06C; Genasensetrade (Oblimersen &#xB098;&#xD2B8;&#xB968;, G3139) &#xD63C;&#xC790; &#xB610;&#xB294; cytotoxic &#xC57D;&#xBB3C;&#xACFC; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131; pharmacostatistical &#xC751;&#xB2F5; &#xD45C;&#xBA74; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC801;&#xC6A9; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; MTT [(3-4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium &#xD654;] &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Apoptosis&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; cytometry RS4:11 &#xC140;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBCF8; leukaemias &#xBC0F; t(4;11) &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xD45C;&#xD604; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; BCL2 Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xBCC0;&#xC218;, &#xB54C;&#xB85C;&#xB294; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; BCL2 mRNA &#xB2E4;&#xB978; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xD558;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. G3139 BCL2 mRNA &#xBC0F; RS4:11 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; g3139&#xC5D0; &#xAC00;&#xC7A5; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; RS4:11 &#xD588;&#xB2E4;. &#xB0AE;&#xC740; G3139 &#xB18D;&#xB3C4; sensitized RS4:11 &#xBC0F; anti-leukaemia cytotoxic &#xC57D;&#xBB3C; &#xC120;&#xD0DD; MV4 11 &#xC140;. RS4:11 &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131; caspase 3 &#xC99D;&#xAC00; G3139 &#xB3C5; &#xC18C; &#xB8E8;&#xBE44; (ADR)&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xACE0; &#xD63C;&#xC790; &#xD070; apoptosis&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; ADR&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB4F1; &#xC5BC;&#xB8E9; G3139 &#xC99D;&#xAC00; S &#xB2E8;&#xACC4; &#xC9C4;&#xD589;. &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; BCL-2 t(4;11)&#xC640; leukaemias&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC790; &#xB300;&#xC0C1; &#xC6D4;&#xAE09;. G3139 &#xC804; &#xC784;&#xC0C1; &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; RS4:11 &#xBC0F; MV4 11 &#xC140; &#xC120;&#xD0DD; cytotoxic &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; apoptosis&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC1C;&#xC0DD;.

&#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC548;&#xD2F0;-apoptotic BCL-2 leukaemias t(4;11) &#xC804;&#xC73C;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC790; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Andrew D. Bantly

Flow Cytometry & Cell Sorting Resource Laboratory

University of Pennsylvania

Optimized Staining and Proliferation Modeling Methods for Cell Division Monitoring using Cell Tracking Dyes

Andrew D. Bantly

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University of Pennsylvania

Optimized Staining and Proliferation Modeling Methods for Cell Division Monitoring using Cell Tracking Dyes

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