Frozen Liver Tissue Sectioning and BODIPY Staining of Lipid Droplets

Allumez le cryostat et coupez des sections de 12 microns d’épaisseur du tissu hépatique congelé prélevé sur un rat. Placez les sections sur les lames de microscope étiquetées à température ambiante. Pour la coloration BODIPY, laver les sections de tissu trois fois avec du PBS pendant cinq minutes chacune.

Après le dernier lavage, encerclez les sections de la lame avec une couche hydrophobe à l’aide d’un stylo-barrière. Préparer une solution de coloration contenant BODIPY 493/503 et DAPI. Ensuite, pipeter 75 microlitres de solution sur chaque lame.

Incuber les lames à température ambiante pendant 40 minutes dans l’obscurité. Après l’incubation, laver les lames trois fois avec du PBS pendant cinq minutes chacune. Ensuite, à l’aide d’un support de montage à fluorescence, montez soigneusement les glissières de couvercle sur chaque lame.

Laissez les lames sécher pendant 30 minutes avant de sceller les bords avec du vernis à ongles.