Après avoir fabriqué les nanoparticules composites de points de carbone doré, placez une puce de saphir stérile dans les plaques de 24 puits et les cellules de semence avec un millilitre de milieu dans un seul puits. Incuber les plaques dans un environnement humide pour atteindre 70 à 80% de confluence. Ajoutez les nanoparticules composites de points de carbone doré au puits unique et incuber pendant quatre à six heures.
À la fin de l’incubation, retirez le milieu des copeaux de saphir. Rincez doucement les copeaux avec du PBS et trempez les copeaux de saphir dans du PBS pour la détection du SERS. Pour effectuer l’expérience SERS, allumez l’ordinateur, le spectromètre Raman et le laser 785 nanomètres.
Ensuite, démarrez le logiciel d’accompagnement et effectuez l’étalonnage à l’aide de plaquettes de silicium. Cliquez sur une nouvelle mesure suivie d’une acquisition spectrale et ajustez la plage de spectre. Ensuite, allez dans l’onglet acquisition, ajustez le temps d’exposition et la puissance laser, puis cliquez sur OK pour lancer une nouvelle acquisition spectrale.
Utilisez un objectif 20X pour une image cellulaire claire. Passez ensuite à un objectif 50X. Après avoir sélectionné un point sur les cellules à mesurer, cliquez sur Exécuter pour lancer le processus, puis enregistrez les spectres.
Pour obtenir l’imagerie SERS des cellules A549, cliquez sur Nouvelle acquisition d’image simplifiée, sélectionnez la plage à photographier et cliquez sur OK. Définissez la fluidité du bord sur 785 nanomètres au centre à 1 200 centimètres inverse, la durée d’exposition sur cinq secondes et la puissance laser sur 50%Le paramètre peut être modifié selon les besoins. Cliquez sur Nouveau de l’imagerie en direct, choisissez le signal à la ligne de base et définissez la première limite à 725 et la deuxième limite à 1 700. Ensuite, allez dans la zone configurée, définissez les étapes appropriées et cliquez sur OK. Enfin, cliquez sur Exécuter pour commencer à effectuer l’imagerie SERS.
SERS Spectra a révélé que même lorsque la concentration de bleu de méthylène est aussi faible que 10 à moins neuf molaires, les nanoparticules composites de points de carbone doré présentent d’excellentes performances SERS par rapport aux nanoparticules d’or. Les spectres SERS acquis sur 20 points présentaient une grande similitude. Un mois après le placement des nanoparticules composites de points de carbone doré à quatre degrés Celsius, l’activité moyenne du SERS à 950, 1, 185 et 1 620 centimètres inverse a montré un degré de désintégration d’environ 5,43%11,44% et 13,94% respectivement.
Les nanoparticules composites à points de carbone doré ont à peine montré une cytotoxicité pour les cellules A549. Le spectre moyen des cellules A549 est présenté. Les agrégats composites de nanoparticules composites à points de carbone doré présentent des signaux SERS évidents sans bruit de fond dans la cartographie SERS des cellules A549.
Les spectres de différents points cellulaires ont démontré l’hétérogénéité des composants dans diverses régions cytoplasmiques.
