Pour commencer, collez la plaquette de silicium maître SU8 pour la conception du canal microfluidique à l’intérieur d’une boîte de Pétri en plastique de 14 centimètres et nettoyez-la avec de l’azote gazeux. Pesez les quantités appropriées de polydiméthylsiloxane, ou de base PDMS et d’agent de durcissement PDMS, dans un gobelet en papier. À l’aide d’une spatule en bois, mélangez les deux jusqu’à ce que le mélange devienne blanc trouble.
Versez le mélange PDMS dans la boîte de Pétri en plastique contenant la plaquette de silicium. Ensuite, placez la boîte de Pétri dans un dessiccateur sous vide équipé d’un robinet d’arrêt à trois voies. Tournez la vanne du robinet d’arrêt pour connecter le vide à la chambre de dessiccation afin d’éliminer les bulles d’air du mélange.
Une fois que toutes les bulles d’air sont éliminées des caractéristiques des canaux, placez la boîte de Pétri dans un four à 70 degrés Celsius pendant quatre heures. Une fois la boîte de Pétri refroidie à température ambiante, placez-la sur un tapis de coupe. À l’aide d’un scalpel, découpez la partie du PDMS au-dessus de la plaquette de silicium.
Placez le PDMS découpé entre deux feuilles du film d’emballage de laboratoire. L’espace entre l’indentation du microcanal et le film permet de localiser l’entrée et la sortie du canal microfluidique. Ensuite, à l’aide d’une lame de rasoir, découpez un canal individuel dans le grand PDMS et, à l’aide des poinçons de biopsie correspondants, faites des trous d’entrée et de sortie appropriés dans le canal.
Placez le canal perforé avec le côté du canal vers le haut sur une lame en verre propre. Placez un substrat en verre contenant de l’oxyde d’indium-étain à couche mince, ou des électrodes interdigitées ITO, sur la même lame avec les électrodes vers le haut. Ensuite, placez délicatement la lame de verre dans un nettoyeur plasma.
Après avoir fermé la vanne de gaz et mis en marche la pompe, attendez deux minutes pour obtenir une lecture du capteur de 600 à 800 millitorr. Ensuite, allumez l’interrupteur d’alimentation et attendez 30 secondes avant de tourner le bouton d’alimentation RF de bas en haut et d’attendre une minute. Ensuite, pour éteindre l’ensemble, suivez l’ordre inverse.
Immédiatement après l’ouverture de la chambre du nettoyeur plasma, soulevez et faites pivoter le PDMS de 180 degrés de manière à ce que le côté du canal soit orienté vers le bas. Placez le canal sur le substrat ITO pour lancer le processus de liaison. À l’aide d’une pince à épiler, appuyez doucement sur les coins du PDMS pendant environ trois secondes.
Chargez le milieu d’amorçage dans une seringue d’un millilitre avec une aiguille de calibre 23. Mouillez lentement et soigneusement le canal en insérant l’aiguille directement dans le puits d’entrée avant de libérer le fluide sans introduire de bulles d’air. Après avoir incubé pendant au moins trois minutes, retirez le milieu d’amorçage à l’aide d’un embout de pipette de 10 microlitres.
Enfin, lavez le canal avec un milieu de diélectrophorèse trois fois en insérant le milieu dans le canal.
