Imagerie calcique en direct de monocouches organoïdes intestinaux humains infectés par un virus à l’aide d’indicateurs de calcium codés génétiquement

Grâce à nos travaux, nous cherchons à comprendre comment les virus perturbent la signalisation au sein de l’épithélium intestinal. Nous sommes particulièrement intéressés à comprendre comment les cellules infectées par le virus dérèglent les cellules voisines non infectées pour contribuer à la pathogenèse. Nous avons récemment découvert que les cellules infectées par le rotavirus libèrent des impulsions d’ADP, qui dérégulent les cellules voisines non infectées et facilitent la propagation virale et exacerbent la maladie.

Bien que l’imagerie calcique soit très populaire dans des domaines comme les neurosciences, elle n’a pas été largement utilisée pour étudier la biologie épithéliale ou la virologie. Ce protocole offre une approche permettant d’adapter les technologies existantes et les systèmes modèles pour étudier la signalisation calcique et les tissus épithéliaux infectés par des virus vivants. En concevant des organoïdes pour exprimer des indicateurs calciques génétiquement codés, notre approche permet une imagerie à long terme cohérente et reproductible dans un système modèle qui récapitule la diversité cellulaire de l’épithélium intestinal humain.

Notre objectif est de comprendre les effets de la signalisation purinergique paracrine induite par le virus à la fois pour l’hôte et pour le virus. Nos travaux futurs détermineront également si ce type de signalisation est largement conservé chez d’autres virus et si les effets sont similaires.