JoVE Logo

S'identifier

ConceptExperiment

Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.

Viral-Mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence Cells for In Vivo Studies

-- views • 1:30 min

Transcription

Harvest the medial ganglionic eminence tissue, containing cortical interneuron progenitors, from genetically modified mouse embryos. 

Add a cationic polymer and dissociate the tissue into a single-cell suspension.

Add lentiviral vectors carrying a Cre recombinase-dependent GFP reporter flanked by lox sites. Incubate.

The polymer neutralizes the viral- and host-cell-membrane charges, enabling viral fusion and RNA release.

The viral RNA is reverse-transcribed and integrated into the host genome.

Centrifuge and discard the supernatant. Absorb excess media.

Transfer the cells to a hydrophobic surface and load them into an injection device.

Inject the cells into an anesthetized mouse pup's cortex.

Allow the pup to recover and grow.

The transplanted progenitors differentiate into mature interneurons in the cortex.

A subgroup of these interneurons co-expresses Cre recombinase and RFP.

In these interneurons, Cre excises the lox sites, flipping the GFP gene and enabling its expression.

Visualize the RFP and GFP co-expression to identify Cre-expressing interneurons.

article

05:02

Viral-Mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence Cells for In Vivo Studies

Vidéos Associées

14 Views

article

15:13

Structure-fonction des études chez la souris à l'aide de cellules souches embryonnaires recombinase médiation cassette d'échange

Vidéos Associées

10.9K Views

article

09:16

Ex Vivo Modèle organoïde de délétions de gènes médiés par l’adénovirus-Cre dans des cellules urothéliales de souris

Vidéos Associées

2.6K Views

article

10:29

Induisant la recombinaison Cre-lox dans le Cortex cérébral par l’intermédiaire de In Utero électroporation de souris

Vidéos Associées

11.6K Views

JoVE Logo

Confidentialité

Conditions d'utilisation

Politiques

Recherche

Enseignement

À PROPOS DE JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. Tous droits réservés.