Les auteurs remercient le financement du suivi évaluation de la protection de la santé des forêts Service des forêts des États-Unis et les programmes de développement des technologies spéciales qui ont soutenu le développement, la modification et l&#39;application du protocole décrit ici pour identifier les arbres qui sont résistantes et sensibles à la cochenille du hêtre. Nous sommes également reconnaissants à la Holden Arboretum, Kirtland, OH, pour leur partenariat et leur soutien de notre programme de dépistage de la résistance de hêtre.

1 matériel végétal:. Boisé Field, pot plants, ou en pot greffes <ol><li> Pour les essais sur le terrain, choisir des arbres américains sains matures de hêtres qui ne montrent aucun signe d&#39;infestation à grande échelle ou de maladie pour les tests de résistance possible. Visiblement arbres sensibles devront également être identifiés pour être utilisé comme témoin (Figure 1). </li><li> Pour tester les semis ou les greffes en pot, recueillir et germer faines comme décrit dans Koch &amp; Carey, 2004 ou scion greffé tel que décrit dans Carey et al, 2013. </li><li> Pousser les semis ou les greffes en terreau de sol amendé avec 47 g de micronutriments, 477 g à libération lente engrais 15N-3.9P-9.9K, 700 g de perlite grossière et 75 g de sulfate d&#39;aluminium par 2,8 cu. sac de pieds. Si nécessaire plus tard dans la saison de croissance, fertiliser les plantes hebdomadaires avec soluble 17N-1.3P-14.1K à 200 ppm d&#39;azote. </li><li> Au cours de la saison de croissance, garder les plantes dans une maison de l&#39;ombre. Permettent aux plantes entrent en dormance à l&#39;extérieur à l&#39;automne avant de les déplacerà une installation de stockage à température contrôlée (~ 4 ° C) à partir de Novembre à Avril. </li></ol> 2. Collection de hêtre échelle oeufs <ol><li> Dans un stand BBD infestées, inspecter les arbres fortement infestés (facilement identifiables par leur &quot;blanchi&quot; l&#39;apparence, la figure 1A) avec une loupe à la main pour confirmer la présence d&#39;œufs, généralement abondantes de la mi-Juillet à mi-Août. </li><li> Utilisez un pinceau pour brosser doucement les amas cireux blancs de cochenilles adultes, les œufs et autres débris, dans un sac de collecte d&#39;un gallon refermable en plastique (figure 1B). Collecter un minimum de trois arbres différents au moins 12 m. </li><li> Si nécessaire, stocker les oeufs dans le sac de collecte étanche pour un maximum de deux semaines à 4 ° C. Un petit morceau de bande (2,5 cm carré) de mousse de polyéthylène humidifié à l&#39;intérieur du sac pour empêcher les oeufs de se dessécher. </li><li> Pour séparer les oeufs d&#39;échelle (0,15 x 0,25 mm) des adultes (0,60 mm) et debris, la construction d&#39;un tamis en utilisant un petit morceau de 2 &quot;tuyau en PVC et un couplage pour soutenir un carré de 250 micromètres de nylon (figure 2). </li><li> Videz le mélange des adultes, de la cire, des œufs, et les débris du sac de collecte sur le tamis et utiliser un petit pinceau pour encourager délicatement les œufs à passer à travers les mailles dans une boîte de Pétri en verre ci-dessous. Plats de Pétri en plastique doivent être évités, car ils détiennent l&#39;électricité statique plus, il est difficile de déplacer les œufs. Les œufs avant et après tamisage sont présentés dans la figure 3. </li><li> Oeufs purifiés peuvent être stockés dans la boîte de Pétri à 4 ° C pendant au moins une semaine. Pour empêcher les oeufs de se dessécher, du ruban adhésif un morceau de mousse humide sur le couvercle et sceller avec du Parafilm. </li></ol> 3. Oeufs viabilité dosages <ol><li> Pour évaluer la viabilité des oeufs, en utilisant une seringue de 10 cc d&#39;appliquer un mince anneau de gelée de pétrole autour de la circonférence de la partie inférieure d&#39;une boîte de Pétri de 60 mm de verre (Figure 4A </strong&gt;). </li><li> Transférer environ 100 œufs au centre de l&#39;anneau, placez le couvercle sur la boîte de Pétri et sceller avec du Parafilm. Laisser la boîte de Pétri scellée à demeure intact à température ambiante pendant 2 semaines, 3 semaines, ou si les œufs ont été stockés à 4 ° C avant de commencer l&#39;essai. </li><li> Nymphes écloses vont se retrouver bloqué dans la gelée de pétrole et peuvent être facilement compté, et les œufs vides sont facilement distingués des oeufs non éclos par leur couleur et leur éclat (figure 4B). Calculer la viabilité en divisant le nombre de nymphes par la somme des œufs vides ainsi que les oeufs complets restants. Bonne viabilité doit être dans les 75% à 90% éclos gamme des oeufs. </li></ol> 4. Résistance échelle Projection du Grand âge mûr hêtres dans le domaine <ol><li> Pour un test quantitatif, compter sur 500 oeufs à l&#39;aide d&#39;un microscope à dissection et à l&#39;aide d&#39;une petite spatule les saupoudrer doucement sur le centre d&#39;un predampened, à cellules ouvertes 10 x 15 x 1,3 cm rectangle de mousse de polyéthylène. Àamortir mousse, mouiller puis presser autant d&#39;eau que possible. Pour un test qualitatif, 500 œufs peuvent être comptés et placé dans un petit flacon de verre et une ligne «de remplissage» établi qui peut être utilisé pour mesurer des lots supplémentaires d&#39;environ 500 œufs. </li><li> Placez la garniture de mousse sur l&#39;arbre de test avec le côté de l&#39;œuf face contre l&#39;écorce. Maintenez le pad en place avec de la corde, ficelle, ficelle, fil ou de matériel plastifié. Plastique ou en matériau métallique à base doivent être utilisés plutôt que des matériaux en fibres naturelles, qui sont plus facilement balayés par les animaux sauvages. </li><li> Ligne du dessus et les côtés d&#39;un cm morceau de pellicule étanche perméable à la vapeur de la maison avec de l&#39;acétate à base de silicone adhésif prédécoupé 23 x 30 et placez-le sur le support de test de mousse. Appuyez sur les bords de l&#39;enveloppe de la maison de l&#39;arbre pour créer un joint étanche à l&#39;eau. Placez la ficelle de nylon ou fil de matériel revêtu de plastique autour de l&#39;arbre et de la maison enveloppe, pour le maintenir en place pendant que l&#39;adhésif (Figure 5). </li><li> Placez un minimum de deuxplots de test sur chaque arbre de test, de préférence sur des côtés opposés du tronc. Sur chaque site, placez plots de test sur au moins 2 arbres sensibles (avec évidente infestation à grande échelle naturelle) comme témoin. Avant de placer les plots de test sur les arbres de commande, enlever les insectes ou les œufs à l&#39;échelle naturellement en utilisant une brosse à poils entreprise. Remarque: Mousses avec des oeufs peuvent également être placés sur les arbres dans le but d&#39;œufs à l&#39;échelle de l&#39;élevage, qui peut être particulièrement utile dans les zones où le niveau d&#39;infestation est faible. </li></ol> 5. Résistance échelle de dépistage de pot semis ou aux greffes <ol><li> Pour le test, sélectionner des arbres en pot d&#39;un diamètre minimum de 1 cm (étrier 5 cm au-dessus la ligne du sol) qui sont assez grand pour avoir au moins 2 plots de test distincts qui leur sont imposées. Taillez les petites branches latérales si nécessaire pour faire de la place pour les plots de test. </li><li> Utiliser un microscope de dissection de compter 150 œufs et répands-les sur un prédécoupée et imbibé de 2,5 x 7,6 x 1,3 cm polyethy à cellules ouvertesmatelas en mousse lene. </li><li> Apposer le tampon de mousse à semis avec le côté de l&#39;œuf contre l&#39;écorce, en utilisant un fil recouvert de plastique. Envelopper un petit carré de maison enrouler autour de la plantule juste au-dessus de la mousse et le sceller avec du silicone à base d&#39;acétate (voir figure 6A). </li><li> Inclure connu familles de plantules sensibles ou des greffes de témoins. </li></ol> 6. Collecte de données Remarque: Environ 52 à 57 semaines après le placement des blocs de mousse et des œufs sur les arbres de test, les données peuvent être collectées. Il est important que ce n&#39;est pas fait qu&#39;après adultes ont commencé à pondre des œufs de sorte que leur capacité à reproduire peut être déterminée. Sur certains arbres résistants, il n&#39;est pas rare de voir un petit nombre d&#39;adultes, mais sans établir de reproduction se produire. <ol><li> Retirez délicatement le tapis de mousse et de compter le nombre de cochenilles adultes établis sur l&#39;écorce à l&#39;aide d&#39;une loupe ou une loupe (10X). </li><li> Lorsque le tampon de mousse est retiré, il n&#39;est pas uncommon pour certains adultes et la plupart des grappes d&#39;oeufs à être retiré de l&#39;arbre avec de la mousse (voir Figure 7). En utilisant un microscope de dissection, compter les grappes d&#39;oeufs et les adultes qui sont restés attachés à la garniture de mousse. </li></ol>

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	<li>Houston, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+to+artificially+infest+beech+bark+with+the+scale,+Cryptococcus+fagisuga+(Lindinger).">A technique to artificially infest beech bark with the scale, Cryptococcus fagisuga (Lindinger).</a> U.S. Forest Service. , (1982).</li><li>Houston, D. 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D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+an+introduced+pathogen+on+resistance+to+natural+disturbance:+beech+bark+disease+and+withdrow.">Effects of an introduced pathogen on resistance to natural disturbance: beech bark disease and withdrow.</a> 35, 1832-1843 (2005).</li><li>Miller-Weeks, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+status+of+beech+bark+disease+in+New+England+and+New+York.">Current status of beech bark disease in New England and New York.</a> Proceeding, IUFRO beech bark disease working party conference. , 21-23 (1983).</li><li>Houston, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beech+bark+disease:+The+aftermath+forests+are+structured+for+a+new+outbreak.">Beech bark disease: The aftermath forests are structured for a new outbreak.</a> J. For. 73, 660-663 (1975).</li><li>Twery, M. J., Patterson, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+beech+bark+disease+and+its+effects+on+species+composition+and+structure+of+northern+hardwood+stands+in+central+New.">Variations in beech bark disease and its effects on species composition and structure of northern hardwood stands in central New.</a> 14, 565-574 (1984).</li><li>Jakubus, W. J., McLaughlin, C. R., Jensen, P. G., McNulty, S. A., Evans, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternate+year+beechnut+production+and+its+influence+on+bear+and+marten+populations.">Alternate year beechnut production and its influence on bear and marten populations.</a> Beech Bark Disease: Proceedings of the Beech Bark Disease Symposium. , 79-87 (2005).</li><li>Koch, J. L., Carey, D. W., Mason, M. E., Nelson, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+beech+scale+resistance+in+full-+and+half-sib+families.">Assessment of beech scale resistance in full- and half-sib families.</a> Can. J. For. Res. 40, 265-272 (2010).</li><li>Koch, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beech+bark+disease:+The+oldest+&#8220;new&#8221;+threat+to+American+beech+in+the+United+States.">Beech bark disease: The oldest &#8220;new&#8221; threat to American beech in the United States.</a> Outlooks Pest Manag. 21, 64-68 (2010).</li><li>Koch, J. L., Mason, M. E., Carey, D. W., Palmieri, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+resistance+to+beech+bark+disease:+improvements+and+results+from+seedlings+and+grafted+field+selections.">Screening for resistance to beech bark disease: improvements and results from seedlings and grafted field selections.</a> Proceedings of the 4th International Workshop on Genetics of Host-Parasite Interactions in Forestry. , (2012).</li><li>Leak, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fifty+year+impacts+of+the+beech+bark+disease+in+the+Bartlett+Experimental+Forest,+New+Hampshire.">Fifty year impacts of the beech bark disease in the Bartlett Experimental Forest, New Hampshire.</a> Northern J. Appl. For. 23, 141-143 (2006).</li><li>Koch, J. L., Carey, D. W., Yaussy, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+cross-pollinations+with+American+beech+trees+that+are+resistant+to+beech+bark+disease.">Controlled cross-pollinations with American beech trees that are resistant to beech bark disease.</a> Proceedings of the 14th Central Hardwood Forest Conference. , 358-364 (2004).</li><li>Carey, D. W., Mason, M. E., Bloese, P., Koch, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hot+callusing+for+propagation+of+American+beech+by+grafting.">Hot callusing for propagation of American beech by grafting.</a> HortSci. 48, 620-624 (2013).</li><li>Koch, J. L., Carey, W. W., Evans, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+genetics+of+resistance+of+American+beech+to+beech+bark+disease:+knowledge+through+2004.">The genetics of resistance of American beech to beech bark disease: knowledge through 2004.</a> Beech Bark Disease: Proceedings of the Beech Bark Disease Symposium. , 98-105 (2005).</li></ol>

Les auteurs déclarent qu&#39;ils n&#39;ont aucun intérêt financier concurrents.

Les étapes essentielles nécessaires à la réussite de cet essai comprennent l&#39;exécution d&#39;un test de viabilité sur les oeufs et l&#39;utilisation des contrôles sensibles à chaque site testé, et avec des matériaux en pot. Il est également important d&#39;utiliser plus d&#39;un tampon d&#39;essai par arbre ou semis. Nous avons trouvé que, tant dans le domaine et dans les essais contrôlés plus sur les plantes en pot, une source fréquente d&#39;erreur peut être l&#39;échec de tampon. Par exemple, dan...

Maladie corticale du hêtre (BBD) a eu un impact négatif sur le hêtre américain en Amérique du Nord depuis l&#39;introduction de la invasive cochenille du hêtre, Cryptococcus fagisuga, dans la province canadienne de la Nouvelle-Écosse à la fin des années 1890 3. Ce complexe insecte-maladie est déclenchée lorsque la cochenille du hêtre insère son stylet d&#39;alimentation dans l&#39;écorce de créer de petites fissures qui fournissent porte d&#39;entrée de l&#39;infection par l&#39;une des espèces de champignons Neonectria (Neonectria ditissima ou Neonectria faginata). Comme le mycélium de champignons poussent, de vastes zones de tissus peuvent mourir, éventuellement ceinturant complètement l&#39;arbre. Les dommages causés par la maladie affaiblit l&#39;arbre, ce qui l&#39;expose à claquer dans des vents violents 4. Le taux de mortalité dans la première vague de la maladie ont été signalés à être aussi élevé que 50% 5. Arbres survivants sont souvent gravement déformés comme des chancres se forment en réduisant la valeur de l&#39;arbre comme un produit de bois.0; Ces arbres ont une propension à la racine germination qui conduit à la formation de «taillis de hêtre» qui empêchent d&#39;autres espèces plus désirables de l&#39;établissement, la réduction de la valeur économique et écologique de la position 6. Bien que la maladie de l&#39;écorce de hêtre n&#39;est pas susceptible de conduire à l&#39;extinction de l&#39;hêtre, il modifie la composition du peuplement et de la santé conduisant à une diminution de la nourriture et l&#39;habitat pour la faune 7,8. Dans les peuplements touchés par BBD depuis de nombreuses années, les arbres qui restent sans aucun symptôme de la maladie n&#39;a été signalé. Essais d&#39;inoculation artificielle ont montré que ces arbres sont résistants à l&#39;insecte de l&#39;échelle 2. Sans infestation à grande échelle, il ya peu de risque d&#39;infection Neonectria, en minimisant l&#39;impact du champignon. La mortalité à grande échelle en bois de hêtre américain en raison de l&#39;infection Neonectria en l&#39;absence d&#39;infestation à grande échelle avant n&#39;a jamaisété signalés, si la résistance à l&#39;échelle de hêtre résultats d&#39;insectes dans la résistance à BBD. Des recherches récentes sur la gestion de BBD a mis l&#39;accent sur l&#39;identification, la propagation, la reproduction et la conservation de hêtres américains résistants à l&#39;insecte de la cochenille. Des études génétiques ont montré que la résistance à la cochenille est héréditaire et une sélection rigoureuse et l&#39;élevage des arbres résistants peut entraîner une amélioration significative en une seule génération 9. Ce constat a alimenté les efforts déployés par les gestionnaires de l&#39;État et de la forêt nationale aux États-Unis pour établir des vergers à graines régionales de hêtre résistant pour fournir une source de diversité génétique des semences BBD-résistant pour les plantations de restauration 10,11. La recherche a également indiqué que la manipulation de la génétique sylvicole des peuplements par l&#39;enlèvement des arbres sensibles et le maintien des arbres résistants peut entraîner l&#39;amélioration des peuplements 9,12. &lt;/ P&gt; Gestion des BBD par des activités d&#39;amélioration des arbres ou à travers la réalisation des prescriptions sylvicoles nécessite la capacité à sélectionner et faire la distinction entre les hêtres échelle résistant et sensible. Les méthodes présentées ici ont été adaptés à partir d&#39;une méthode introduite par Dave Houston pour inoculer artificiellement plants avec des oeufs à l&#39;échelle de hêtre 1. La méthode peut être utilisée comme un outil de dépistage pour identifier les locus quantitatifs (QTL) associée à une résistance ou à une distinction entre les plants en pots résistants et sensibles ou ramets greffés dans les études génétiques. Alternativement, il peut être utilisé pour le dépistage des arbres matures dans le domaine pour identifier les arbres résistants pour le développement de vergers à graines, ou le maintien sur le terrain. Arbres sensibles peuvent être détectés et éliminés de minimiser les impacts de la maladie.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1006">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="63" rowspan="2" style="height:63px;width:163px;">Nylon Mesh Sheet, 250 micron</td>
			<td rowspan="2" style="width:120px;">Small Parts</td>
			<td rowspan="2" style="width:99px;">CMN-0250-D</td>
			<td style="width:627px;">Mesh opening size: 250 microns square, % of open area: 34, thread diameter: 180 micron, width: 24&#8221;, Length: 12&#8221;, Package quantity: 1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:627px;"><a href="http://www.amazonsupply.com/dp/B000FMWH1S/ref=sp_dp_g2c_asin">http://www.amazonsupply.com/dp/B000FMWH1S/ref=sp_dp_g2c_asin</a></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="42" rowspan="2" style="height:42px;width:163px;">Tyvek Home Wrap</td>
			<td rowspan="2" style="width:120px;">DuPont</td>
			<td rowspan="2" style="width:99px;">D1349991</td>
			<td style="width:627px;">9 ft x 150 ft roll, can ask for it to be cut in half.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:627px;"><a href="http://www.lowes.com/pd_14582-2020-D13499991_0__">http://www.lowes.com/pd_14582-2020-D13499991_0__</a></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="42" rowspan="2" style="height:42px;width:163px;">Polyethylene foam, &#189;&#8221; thick&#160;</td>
			<td rowspan="2" style="width:120px;">Columbus Foam Products</td>
			<td rowspan="2" style="width:99px;">N/A</td>
			<td style="width:627px;">2 ft x 50 ft roll</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:627px;"><a href="http://www.colsfoam.com/apcfp/products.htm">http://www.colsfoam.com/apcfp/products.htm</a></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="64" rowspan="2" style="height:64px;width:163px;">MetroMix 510</td>
			<td style="width:120px;">Sun Gro&#160;</td>
			<td rowspan="2" style="width:99px;">N/A</td>
			<td style="width:627px;">2.8 cu. ft. bark, peat moss, vermiculite, bark ash, starter nutrient charge (with Gypsum), slow release nitrogen and&#160;dolomitic limestone.</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:120px;">Horticulture</td>
			<td style="width:627px;"><a href="http://sungro.com/products_displayProduct.php?product_id=118&amp;brand_id=17">http://sungro.com/products_displayProduct.php?product_id=118&#38;brand_id=17</a></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="42" rowspan="2" style="height:42px;width:163px;">Osmocote Plus 15-9-12</td>
			<td rowspan="2" style="width:120px;">Everris</td>
			<td rowspan="2" style="width:99px;">E903206</td>
			<td style="width:627px;">Standard 3-4 month release.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:627px;"><a href="http://everris.us.com/product/15-9-12">http://everris.us.com/product/15-9-12</a></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="42" rowspan="2" style="height:42px;width:163px;">Sight Savers 10 X</td>
			<td rowspan="2" style="width:120px;">Bausch &#38; Lomb</td>
			<td rowspan="2" style="width:99px;">813434</td>
			<td style="width:627px;">10 x magnification illuminated coddington</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:627px;"><a href="http://www.amleo.com/Bausch---Lomb-Illuminating-Codington-Magnifier-10x/p/CM10/">http://www.amleo.com/Bausch---Lomb-Illuminating-Codington-Magnifier-10x/p/CM10/</a></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="42" rowspan="2" style="height:42px;width:163px;">Nikon Mini Field Stereoscope</td>
			<td rowspan="2" style="width:120px;">Nikon</td>
			<td rowspan="2" style="width:99px;">7314</td>
			<td style="width:627px;">20 x magnification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:627px;"><a href="http://www.opticsplanet.com/nikon-fieldmicroscope.html">http://www.opticsplanet.com/nikon-fieldmicroscope.html</a></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="42" rowspan="2" style="height:42px;width:163px;">Silicone II clear</td>
			<td rowspan="2" style="width:120px;">GE</td>
			<td rowspan="2" style="width:99px;">159538</td>
			<td style="width:627px;">2.9 oz clear window &#38; door caulk</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:627px;"><a href="http://www.midlandhardware.com/159538.html">http://www.midlandhardware.com/159538.html</a></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a technique to screen american beech for resistance to the beech scale insect (cryptococcus fagisuga lind.)

Hêtre écorce maladie (BBD) se traduit par des niveaux élevés de mortalité initiale, laissant derrière des arbres survivants qui sont grandement affaiblis et déformés. La maladie est déclenchée par l&#39;alimentation activités du invasive cochenille du hêtre, Cryptococcus fagisuga, qui crée des points d&#39;infection d&#39;entrée par l&#39;une des espèces de champignons Neonectria. Sans infestation à grande échelle, il ya peu de risque d&#39;infection fongique. En utilisant des oeufs à l&#39;échelle pour infester artificiellement arbres sains dans les peuplements sévèrement touchés BBD démontré que ces arbres étaient résistants à la partie cochenille du complexe de la maladie 1. Nous présentons ici un protocole que nous avons développé, basé sur la technique de l&#39;infestation artificielle par Houston 2, qui peut être utilisé pour cribler des arbres à l&#39;échelle résistant sur ​​le terrain et dans les petits plants et greffes en pot. L&#39;identification des arbres à l&#39;échelle résistant est un élément important de la gestion de BBD par arbreprogrammes d&#39;amélioration et de la manipulation sylvicole.

La figure 6 montre un plant résistant (C) et deux plants sensibles (D, E) présentant des degrés différents de sensibilité. Un exemple de ce qu&#39;est un arbre mature sensibles ressemble à 57 semaines après le test d&#39;infestation artificielle a été mis en place est représenté sur la figure 5B. Lorsque la mousse est décollée de l&#39;arbre, il n&#39;est pas rare que les cochenilles et leurs groupes d&#39;oeufs de rester collé à la mouss...

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A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect Cryptococcus fagisuga Lind.

Maladie corticale du hêtre est initiée par l&#39;alimentation des activités de la cochenille du hêtre qui créent des points d&#39;entrée fongiques dans l&#39;écorce. Les arbres qui sont résistantes à l&#39;insecte d&#39;échelle sont également résistantes aux maladies. Ici, nous présentons le protocole que nous avons développé pour dépister hêtres individuels pour la résistance à la cochenille.

Une technique à l&#39;écran hêtre américain pour la résistance à la cochenille Hêtre (<em&gt; Cryptococcus fagisuga</em&gt; Lind.)

Beech bark disease (BBD) results in high levels of initial mortality, leaving behind survivor trees that are greatly weakened and deformed.&#160;The ...

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A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect (Cryptococcus fagisuga Lind.)

9.5K vues.  US Forest Service.  Maladie corticale du hêtre est initiée par l'alimentation des activités de la cochenille du hêtre qui créent des points d'entrée fongiques dans l'écorce. Les arbres qui sont résistantes à l'insecte d'échelle sont également résistantes aux maladies. Ici, nous présentons le protocole que nous avons développé pour dépister hêtres individuels pour la résistance à la cochenille. 

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A Noninvasive Method For In situ Determination of Mating Success in Female American Lobsters (Homarus americanus)

Despite being one of the most productive fisheries in the Northwest Atlantic, much remains unknown about the natural reproductive dynamics of American lobsters. Recent work in exploited crustacean populations (crabs and lobsters) suggests that there are circumstances where mature females are unable to achieve their full reproductive potential due to sperm limitation. To examine this possibility in different regions of the American lobster fishery, a reliable and noninvasive method was developed for sampling large numbers of female lobsters at sea. This method involves inserting a blunt-tipped needle into the female&#39;s seminal receptacle to determine the presence or absence of a sperm plug and to withdraw a sample that can be examined for the presence of sperm. A series of control studies were conducted at the dock and in the laboratory to test the reliability of this technique. These efforts entailed sampling 294 female lobsters to confirm that the presence of a sperm plug was a reliable indicator of sperm within the receptacle and thus, mating. This paper details the methodology and the results obtained from a subset of the total females sampled. Of the 230 female lobsters sampled from George&#39;s Bank and Cape Ann, MA (size range = 71-145 mm in carapace length), 90.3% were positive for sperm. Potential explanations for the absence of sperm in some females include: immaturity (lack of physiological maturity), breakdown of the sperm plug after being used to fertilize a clutch of eggs, and lack of mating activity. The surveys indicate that this technique for examining the mating success of female lobsters is a reliable proxy that can be used in the field to document reproductive activity in natural populations.

A Noninvasive Method For In situ Determination of Mating Success in Female American Lobsters Homarus americanus

Fishery-induced changes to exploited crustacean fisheries, such as the American lobster fishery, could potentially influence their reproductive dynamics, leading to a reduction in mating success. This study&#39;s goal was to develop a noninvasive method for ascertaining the mating success of female lobsters that may be physiologically or functionally mature.

Une méthode non invasive pour<em&gt; In situ</em&gt; Détermination du succès de l&#39;accouplement chez les femelles homards américains (<em&gt; Homarus americanus</em&gt;)

Despite being one of the most productive fisheries in the Northwest Atlantic, much remains unknown about the natural reproductive dynamics of American ...

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Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey bee colony numbers have been declining in the United States and many European countries since 1947. A number of factors play a role in this decline, including the unintentional exposure of honey bees to pesticides. The development of new methods and regulations are warranted to reduce pesticide exposures to these pollinators. One approach is the use of repellent chemistries that deter honey bees from a recently pesticide-treated crop. Here, we describe a protocol to discern the deterrence of honey bees exposed to select repellent chemistries. Honey bee foragers are collected and starved overnight in an incubator 15 h prior to testing. Individual honey bees are placed into Petri dishes that have either a sugar-agarose cube (control treatment) or sugar-agarose-compound cube (repellent treatment) placed into the middle of the dish. The Petri dish serves as the arena that is placed under a camera in a light box to record the honey bee locomotor activities using video tracking software. A total of 8 control and 8 repellent treatments were analyzed for a 10 min period with each treatment was duplicated with new honey bees. Here, we demonstrate that honey bees are deterred from the sugar-agarose cubes with a compound treatment whereas honey bees are attracted to the sugar-agarose cubes without an added compound.

The loss of honey bee colonies presents a challenge to crop pollination services. Current pollinator protection practices warrant an alternative approach to minimize the contact of honey bees to harmful pesticides using repellent chemistries. Here, we provide detailed methods for a visual tracking protocol to screen deterrents for bees.

Protocole de suivi vidéo pour les chimies de dissolution d&#39;écran pour les abeilles

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

Lab-Scale Model to Evaluate Odor and Gas Concentrations Emitted by Deep Bedded Pack Manure

A lab-scaled simulated bedded pack model was developed to study air quality and nutrient composition of deep-bedded packs used in cattle mono-slope facilities. This protocol has been used to effectively evaluate many different bedding materials, environmental variables (temperature, humidity), and potential mitigation treatments that can improve air quality in commercial deep-bedded mono-slope facilities. The model is dynamic and allows researchers to easily collect many chemical and physical measurements from the bedded pack. Weekly measurements, collected over the course of six to seven weeks, allows sufficient time to see changes in air quality measurements over time as the bedded pack matures. The data collected from the simulated bedded packs is within the range of concentrations previously measured in commercial deep-bedded mono-slope facilities. Past studies have demonstrated that 8 - 10 experimental units per treatment are sufficient to detect statistical differences among the simulated bedded packs. The bedded packs are easy to maintain, requiring less than 10 minutes of labor per bedded packs per week to add urine, feces, and bedding. Sample collection using the gas sampling system requires 20 - 30 minutes per bedded pack, depending on the measurements that are being collected. The use of lab-scaled bedded packs allows the researcher to control variables such as temperature, humidity, and bedding source that are difficult or impossible to control in a research or commercial facility. While not a perfect simulation of &#34;real-world&#34; conditions, the simulated bedded packs serve as a good model for researchers to use to examine treatment differences among bedded packs. Several lab-scale studies can be conducted to eliminate possible treatments before trying them in a research or commercial-sized facility.

A protocol has been developed to measure gases, odors, and nutrient composition in lab-scaled bedded manure packs, which can be used to study ways to improve air quality in commercial cattle facilities using deep-bedded manure packs.

Modèle de laboratoire pour évaluer les odeurs et les Concentrations de gaz émises par Deep lits Pack fumier

A lab-scaled simulated bedded pack model was developed to study air quality and nutrient composition of deep-bedded packs used in cattle mono-slope ...

Double-stranded RNA Oral Delivery Methods to Induce RNA Interference in Phloem and Plant-sap-feeding Hemipteran Insects

Phloem and plant sap feeding insects invade the integrity of crops and fruits to retrieve nutrients, in the process damaging food crops. Hemipteran insects account for a number of economically substantial pests of plants that cause damage to crops by feeding on phloem sap. The brown marmorated stink bug (BMSB), Halyomorpha halys (Heteroptera: Pentatomidae) and the Asian citrus psyllid (ACP), Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae) are hemipteran insect pests introduced in North America, where they are an invasive agricultural pest of high-value specialty, row, and staple crops and citrus fruits, as well as a nuisance pest when they aggregate indoors. Insecticide resistance in many species has led to the development of alternate methods of pest management strategies. Double-stranded RNA (dsRNA)-mediated RNA interference (RNAi) is a gene silencing mechanism for functional genomic studies that has potential applications as a tool for the management of insect pests. Exogenously synthesized dsRNA or small interfering RNA (siRNA) can trigger highly efficient gene silencing through the degradation of endogenous RNA, which is homologous to that presented. Effective and environmental use of RNAi as molecular biopesticides for biocontrol of hemipteran insects requires the in vivo delivery of dsRNAs through feeding. Here we demonstrate methods for delivery of dsRNA to insects: loading of dsRNA into green beans by immersion, and absorbing of gene-specific dsRNA with oral delivery through ingestion. We have also outlined non-transgenic plant delivery approaches using foliar sprays, root drench, trunk injections as well as clay granules, all of which may be essential for sustained release of dsRNA. Efficient delivery by orally ingested dsRNA was confirmed as an effective dosage to induce a significant decrease in expression of targeted genes, such as juvenile hormone acid O-methyltransferase (JHAMT) and vitellogenin (Vg). These innovative methods represent strategies for delivery of dsRNA to use in crop protection and overcome environmental challenges for pest management.

This article demonstrates novel techniques developed for oral delivery of double-stranded RNA (dsRNA) through the vascular tissues of plants for RNA interference (RNAi) in phloem sap feeding insects.

Méthodes de prestation orale ARN double-brin d’induire l’interférence d’ARN dans le phloème et insectes hémiptères plante-sap-alimentation

Phloem and plant sap feeding insects invade the integrity of crops and fruits to retrieve nutrients, in the process damaging food crops. Hemipteran ...

The Barnacle Balanus improvisus as a Marine Model - Culturing and Gene Expression

Barnacles are marine crustaceans with a sessile adult and free-swimming, planktonic larvae. The barnacle Balanus (Amphibalanus) improvisus is particularly relevant as a model for the studies of osmoregulatory mechanisms because of its extreme tolerance to low salinity. It is also widely used as a model of settling biology, in particular in relation to antifouling research. However, natural seasonal spawning yields an unpredictable supply of cyprid larvae for studies. A protocol for the all-year-round culturing of B. improvisus has been developed and a detailed description of all steps in the production line is outlined (i.e., the establishment of adult cultures on panels, the collection and rearing of barnacle larvae, and the administration of feed for adults and larvae). The description also provides guidance on troubleshooting and discusses critical parameters (e.g., the removal of contamination, the production of high-quality feed, the manpower needed, and the importance of high-quality seawater). Each batch from the culturing system maximally yields roughly 12,000 nauplii and can deliver four batches in a week, so up to almost 50,000 larvae per week can be produced. The method used to culture B. improvisus is, probably, to a large extent also applicable to other marine invertebrates with free-swimminglarvae. Protocols are presented for the dissection of various tissues from adults as well as the production of high-quality RNA for studies on gene expression. It is also described how cultured adults and reared cyprids can be utilized in a wide array of experimental designs for examining gene expression in relation to external factors. The use of cultured barnacles in gene expression is illustrated with studies of possible osmoregulatory roles of Na+/K+ ATPase and aquaporins.

The Barnacle Balanus improvisus as a Marine Model - Culturing and Gene Expression

The barnacle Balanus (Amphibalanus) improvisus is a model for studying osmoregulation and antifouling. However, natural seasonal spawning yields an unpredictable supply of cyprid larvae. Here, a protocol for the all-year-round culturing of B. improvisus is described, including the production of larvae. The use of cultured barnacles in gene expression studies is illustrated.

balane Balanus improvisus comme modèle Marine - culture et l’Expression des gènes

Barnacles are marine crustaceans with a sessile adult and free-swimming, planktonic larvae. The barnacle Balanus (Amphibalanus) improvisus is particularly ...

Experimental Protocol for Examining Behavioral Response Profiles in Larval Fish: Application to the Neuro-stimulant Caffeine

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and toxicological studies. Using automated digital tracking platforms, recent efforts in neuropharmacology are leveraging larval fish locomotor behaviors to identify potential therapeutic targets for novel small molecules. Similar to these efforts, research in the environmental sciences and comparative pharmacology and toxicology is examining various behaviors of fish models as diagnostic tools in tiered evaluation of contaminants and real-time monitoring of surface waters for contaminant threats. Whereas the zebrafish is a popular larval fish model in the biomedical sciences, the fathead minnow is a common larval fish model in ecotoxicology. Unfortunately, fathead minnow larvae have received considerably less attention in behavioral studies. Here, we develop and demonstrate a behavioral profile protocol using caffeine as a model neurostimulant. Though photomotor responses of fathead minnows were occasionally affected by caffeine, zebrafish&#160;were markedly more sensitive for photomotor and locomotor endpoints, which responded at environmentally relevant levels. Future studies are needed to understand comparative behavioral sensitivity differences among fish with age and time of day, and to determine whether similar behavioral effects would occur in nature and be indicative of adverse outcomes at the individual or population levels of biological organization.

Here, we present a protocol to examine larval zebrafish and fathead minnow locomotor activities and photomotor responses (PMR) using an automated tracking software. When incorporated in common toxicology bioassays, analyses of these behaviors provide a diagnostic tool to examine chemical bioactivity. This protocol is described using caffeine, a model neurostimulant.

Protocole expérimental pour l’examen des profils de réponse comportementale dans les larves de poissons : Application à la caféine Neuro-stimulant

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and ...

A Precise and Autonomous System for the Detection of Insect Emergence Patterns

Existing systems to measure insect emergence patterns have limitations; they are only partially automated and are limited in the maximum number of emerging insects they can detect. In order to obtain precise measurement of insect emergence, it is necessary for systems to be semi-automated and able to measure large numbers of emerging insects. We addressed these issues by designing and building a system that is automated and can measure emergence of up to 1200 insects. We modified the existing &#34;falling-ball&#34; system using Arduino microcontrollers to automate data collection and expand the sample size through multiple data channels. Multiple data channels enable the user to not only increase their sample size, but also allows for multiple treatments to be run simultaneously in a single experiment. Furthermore, we created an R script to automatically visualize the data as a bubble plot, while also calculating the median day and time of emergence. The current system was designed using 3D printing so the user can modify the system to be adjusted for different species of insects. The goal of this protocol is to investigate important questions in chronobiology and stress physiology, using this precise and automated system to measure insect emergence patterns.

Measurement of insect emergence patterns requires precision. Existing systems are only semi-automated and sample size is limited. We addressed these issues by designing a system using microcontrollers to precisely measure the time of emergence of large numbers of emerging insects.

Un système précis et autonome pour la détection des patrons d’émergence insectes

Existing systems to measure insect emergence patterns have limitations; they are only partially automated and are limited in the maximum number of ...

Composition and Distribution Analysis of Bioaerosols Under Different Environmental Conditions

Variable microorganisms in particulate matter (PM) under different environmental conditions may have significant impacts on human health. In this study, we described a protocol for multiple analyses of the biological compositions in environmental PM. Five experiments are presented: (1) PM number monitoring by using a laser particle counter; (2) PM collection by using a cyclonic aerosol sampler; (3) PM collection by using a high-volume air sampler with filters; (4) culturable microbes collection by the Andersen six-stage sampler; and (5) detection of biological composition of environmental PM by bacterial 16SrDNA and fungal ITS region sequencing. We selected hazy days and a livestock farm as two typical examples of the application in this protocol. In this study, these two sampling methods, cyclonic aerosol sampler and filter sampler, showed different sampling efficiency. The cyclonic aerosol sampler performed much better in terms of collecting bacteria, while these two methods showed the same efficiency in collecting fungi. Filter samplers can work under low temperature conditions while cyclonic aerosol samplers have a sampling limitation for temperature. A solid impacting sampler, such as an Andersen six-stage sampler, can be used to sample bioaerosols directly into the culture medium, which increases the survival rate of culturable microorganisms. However, this method mainly relies on culture while more than 99% of microbes cannot be cultured. DNA extracted from the culturable bacteria collected by the Andersen six-stage sampler and samples collected by cyclonic aerosol sampler and filter sampler were detected by bacterial 16S rDNA and fungal ITS region sequencing.All the methods above may have wide application in many fields of study, such as environmental monitoring and airborne pathogen detection. From these results, we can conclude that these methods can be used under different conditions and may help other researchers further explore the health impacts of environmental bioaerosols.

Understanding the biological composition of environmental particulate matter is important for the study of its significant impacts on human health and disease spread. Here, we used three types of bioaerosol sampling methods and a biological analysis of airborne microbes to better explore airborne microbial communities under different environmental conditions.

Composition et analyse de la Distribution des bioaérosols sous différentes Conditions environnementales

Variable microorganisms in particulate matter (PM) under different environmental conditions may have significant impacts on human health. In this study, ...

Detached Leaf Assays to Simplify Gene Expression Studies in Potato During Infestation by Chewing Insect Manduca sexta

The multitrophic nature of gene expression studies of insect herbivory demands large numbers of biological replicates, creating the need for simpler, more streamlined herbivory protocols. Perturbations of chewing insects are usually studied in whole plant systems. While this whole organism strategy is popular, it is not necessary if similar observations can be replicated in a single detached leaf. The assumption is that basic elements required for signal transduction are present within the leaf itself. In the case of early events in signal transduction, cells need only to receive the signal from the perturbation and transmit that signal to neighboring cells which are assayed for gene expression.
The proposed method simply changes the timing of the detachment. In whole plant experiments, larvae are confined to a single leaf which is eventually detached from the plant and assayed for gene expression. If the order of excision is reversed, from last in whole plant studies, to first in the detached study, the feeding experiment is simplified.
Solanum tuberosum var. Kennebec is propagated by nodal transfer in a simple tissue culture medium and transferred to soil for further growth if desired. Leaves are excised from the parent plant and relocated to Petri dishes where the feeding assay is conducted with the larval stages of M. sexta. Damaged leaf tissue is assayed for the expression of relatively early events in signal transduction. Gene expression analysis identified infestation-specific Cys2-His2 (C2H2) transcription factors, confirming the success of using detached leaves in early response studies. The method is easier to perform than whole plant infestations and uses less space.

The presented method creates natural herbivore damaged plant tissue through the application of Manduca sexta larvae to detached leaves of potato. The plant tissue is assayed for expression of six transcription factor homologs involved in early responses to insect herbivory.

Des essais de feuilles détachées pour simplifier les études sur l'expression génique de la pomme de terre pendant l'infestation par l'insecte à mâcher Manduca sexta

The multitrophic nature of gene expression studies of insect herbivory demands large numbers of biological replicates, creating the need for simpler, more ...

Implantation of a New Micro Acoustic Tag in Juvenile Pacific Lamprey and American Eel

Juvenile Pacific Lamprey and American eels were used for laboratory evaluations to determine potential effects from tag implantation. Telemetry technology has been identified as a way to obtain more detailed information on movement and behavior across a broader spatial scale than is possible with other known technology. The purpose of this method is to provide a detailed step by step instruction on tag implantation for both lampreys and eel. For laboratory studies using actively migrating juvenile Pacific Lamprey (120-160 mm), we determined that the presence of the tag did not alter the swimming ability between tagged and untagged Individuals or have any significant tag loss (&lt;3%). Similar results were determined during laboratory testing of Yellow phase American Eels (113-175 mm). No mortality occurred during a 38-day holding period and there was minimal tag loss (3.8%). The presence of the tag did not have any significant effect on the swimming ability or survival of tagged eels compared to untagged controls and there was minimal tag loss.

This article illustrates the procedure for implanting a micro acoustic tag in juvenile Pacific Lamprey and American Eel. Our application is based on laboratory trials, which indicate that acoustic tags can be successfully implanted with no apparent effects on swimming ability or survival and minimal tag loss.

Implantation d’une nouvelle balise acoustique Micro en juvénile lamproie du Pacifique et l’anguille d’Amérique

Juvenile Pacific Lamprey and American eels were used for laboratory evaluations to determine potential effects from tag implantation. Telemetry technology ...