Cette méthode peut aider à répondre aux questions clés dans le domaine de la régénération des tissus durs et mous. Le principal avantage de cette technique est que l’utilisation d’une souris permet une analyse détaillée de la régénération osseuse. Commencez par une souris adulte entièrement anesthésiée.
Raser et désinfecter soigneusement la zone chirurgicale avec une solution à 10% d’iode. Ensuite, administrer 0,5% d’hydrochlorure lidocaïne au membre inférieur droit. Puis, après avoir fait une incision longitudinale de la peau de 15 millimètres à la jambe inférieure droite avec un scalpel numéro 15, séparer brutalement les muscles sous-jacents, en prenant soin de ne pas enlever tout périoste.
Ensuite, coupez le péroné avec des ciseaux. Saisissez la cheville avec des forceps étroits et minces, et utilisez une aiguille de calibre 27 pour faire un trou dans l’os, à environ cinq millimètres du talon. L’aiguille doit pénétrer dans la peau, l’os et la peau dans cet ordre.
Lorsque l’aiguille pénètre complètement, couper la pointe et la racine à l’aide d’une pince de sorte que l’aiguille est d’environ 15 millimètres. Faire un autre trou de la même manière, environ deux à trois millimètres proximaux. Ensuite, tenez autour de la cheville, et passez une aiguille de calibre 25 sous le genou de la même manière.
Après que l’aiguille pénètre, couper la pointe et la racine à l’aide d’un pincement. Faire un autre trou de la même manière, environ deux à trois millimètres distal. Placez le distrayant sur mesure de telle sorte qu’il soit parallèle à la direction d’extension.
Fixez les aiguilles et l’appareil avec suffisamment de résine dentaire de polymérisation pour remplir les rainures de l’appareil. Attendez que la polymérisation se termine, ce qui devrait prendre environ cinq minutes. Puis, tout en prenant soin de ne pas endommager les tissus environnants, couper le milieu de la diaphyse du tibia à l’aide d’un disque de coupe très mince tout en appliquant une solution saline.
Fermez la plaie avec une suture en nylon 4-0. Donnez des injections sous-cutanées de buprénorphine pour l’analgésie immédiatement après la chirurgie. Il existe divers rapports sur la période de latence et le taux de distraction, mais ici, des protocoles représentatifs sont affichés.
Après une période de latence de cinq jours, commencer la procédure de distraction. Pour l’extension, utilisez la goupille attachée à la vis d’expansion rapide. Déplacez la goupille dans la direction de la flèche jaune fixée à la vis d’extension.
Tenez la queue avec le petit doigt et la paume, et fixez le dispositif d’extension avec l’index et le pouce. Effectuez l’extension en déplaçant la goupille dans la direction de la flèche jaune de 0,2 millimètre pour un quart de tour. Continuer à allonger à la vitesse de 0,2 millimètre toutes les 12 heures pendant huit jours, ce qui se traduira par un écart total de 3,2 millimètres.
Cette image montre les résultats typiques de radiographie à quatre semaines après distraction dans le modèle. L’os nouvellement formé est vu au site de distraction. Des résultats de coloration d’hématoxyline et d’éosine sont vus ici.
Un pont d’os nouvellement formé a été observé, et l’os nouvellement formé pourrait être facilement distingué de l’os indigène. Nous avons présenté un modèle do tibial de souris développé à l’aide d’un distrayant sur mesure. L’utilisation d’un modèle DO de souris facilite une analyse plus détaillée.
Il est particulièrement approprié pour les expériences utilisant des souris KNOCK-OUT.
