ציור דם מן החולדות דרך וריד Saphenous ועל ידי נקר לב

Summary

שואב דם יש צורך במספר רב של מחקרים, למשל ללמוד את פרופיל פרמקוקינטיקה של תרכובת. כאן, אנו מדגימים כיצד להקיז דם מן החולדות באמצעות שתי טכניקות: להקיז דם מהעורק saphenous או לנקב לב.

Abstract

ציור דם מכרסמים הוא הכרחי עבור מספר גדול של הן במבחנה במחקרים vivo. אתרים של דם שואבת הן רבות במכרסמים: לב רטרו מסלולית סינוס, וריד, וריד לסתי, וריד saphenous,. טכניקה לכל היתרונות והחסרונות שלה, וחלק אינם מאושרים יותר במדינות מסוימות (למשל, רטרו מסלולית שואבת בהולנד). דיון בטכניקות שונות של ציור דם הם ^1-3 זמין. כאן, אנו מציגים שתי טכניקות ציור דם חולדות, כל אחד עם יישומים ספציפיים שלה.

להקיז דם מהעורק saphenous, בתנאי שזה נעשה כראוי, גורמת מצוקה מינימלית בבעלי חיים ואינו דורש הרדמה. טכניקה זו מאפשרת חזר שואבת של כמויות קטנות של דם, כגון הצורך ללימודי פרמוקוקינטיים ^4,5, בקביעת כימיה פלזמה, או ספירת דם ^6.

לנקב לב מאפשר איסוף כמויות גדולות של דם מבעל חיים אחד (עד 10 מ"ל של דם ניתן להסיק חולדה ז 150). טכניקה זו שימושית מאוד ולכן כהליך סופני כאשר ציור דם saphenous לא יספק מדגם מספיק גדול. אנו משתמשים לנקב לב כאשר אנחנו צריכים כמות מספקת של בסרום של זן מסוים של חולדות לגדול קווי לימפוציטים T במבחנה ^4-9.

Protocol

ציור דם מן החולדות דרך וריד Saphenous ועל ידי נקר לב

הערה: כל הנהלים חייב להיות מאושר על ידי טיפול בבעלי חיים במכון שלך, ועדה להשתמש.

1. שואבים דם בווריד saphenous

1. הליך זה מבוצע ללא הרדמה דורש שני אנשים, מי מטפל חולדה, ומי מבצע את תיקו.
2. הפוך חרוט מתוך מגבת או להחזיק את העכברוש עם כפפות מכרסם טיפול, עוזב אחד הגפיים האחוריות חשוף.
3. לגלח את החלק האחורי של הרגל עם גוזם חשמלי עד הווריד saphenous גלוי. שבי שטח מספיק גדול, כך השיער לא יבוא במגע עם האתר לנקב. השתמש כמות קטנה של קרם שאינו ריחני יד כדי לשמור על השיער הלא מגולח מהמקום לנקב.
4. הקפידו דחיסה בבסיס של הרגל על ​​מנת להפוך את וריד saphenous בליטה החוצה (בדומה באמצעות חוסם עורקים כאשר זוב דם מבן אדם או חיה גדולה). את הווריד לנקב באמצעות מחט 20 גרם ו סקופ הדם כפי שהוא יוצא באמצעות microvette. שאיבה עם הרגל תסייע להקיז דם ועוד. לאחר שאספת מספיק דם, להחזיק לדחוס נקי באתר לנקב כדי לעצור את הדימום.

2. דם לצייר על ידי לנקב לב

1. הליך זה מחייב הרדמה היא סופנית. בעלי חיים צריכים להיות מורדמים מיד בסוף לנקב לב.
2. הכן מזרק 5 מ"ל עם מחט 23G1.
3. עמוק anesthesize את העכברוש ולבדוק הרדמה על ידי חוסר תנועה ספונטנית, קצב נשימה איטי, חוסר תגובה לגירויים (כגון צובט אצבע). כדי להבטיח הרדמה ממושכת, במקום לחבית מזרק המכיל מגבת נייר ספוגה הרדמה נדיף על אפו של עכברוש במהלך ההליך.
4. מניחים את חולדה על גבו, מול ממך.
5. אם אתם ימניים, מקום לאצבע שמאל ברמה של הצלעות הנמוך ביותר, ללא החלת כל לחץ. הלב יהיה ממוקם ~ 1 ס"מ מעל לנקודה זו, מעט ימינה.
6. החזקת המזרק שלך בזווית של 45 מעלות, להכניס את המחט בין שתי הצלעות לצפות טיפת דם להיכנס המחט. זו אינדיקציה לכך שאתה בלב. מבלי להזיז מזרק שלך, יש למשוך את הבוכנה כדי למלא את המזרק. לאחר מזרק מלא, בזהירות נתק אותו המחט ולרוקן אותו לתוך צינור. מזרק אז יכול להיות מחדש מחוברת המחט לציור יותר דם. זה צריך להיות אפשרי לצייר 50-10 מ"ל של דם חולדה 120-180 גרם.
7. מיד להרדים את העכברוש.

Discussion

ציור דם מהעורק saphenous הוא דרך נוחה לקבל כמויות קטנות של דם ללא הרדמה. אם הדגימה חזר נדרש, לבדוק את התקנות כדי לוודא שאתה לא למשוך יותר מדי דם מן עכברוש אחד.

ציור דם על ידי לנקב לב הוא דרך נוחה לקבל כמויות גדולות של דם, אבל זה הליך סופנית. בעל חיים חייב להיות מ...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Needle 20G 1/2	Tool	BD Biosciences	305176	For puncturing the saphenous vein
Microvette 300	Tool	Sarstedt Ltd	20.1308.100	To collect blood from the saphenous vein
Electric trimmer	Tool	Braintree Scientific, Inc.	CLP-32130
Needle 23 G 1	Tool	BD Biosciences	305145	For cardiac puncture
5 ml plastic syringe, slip tip	Tool	Fisher Scientific	14-826-12	For cardiac puncture