JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

כאן נתאר פרוטוקול מפורט למדידות פולשנית של פרמטרים והמודינמיקה כולל הפורטל לחץ, זרימת הדם splanchnic ספיקת הדם מערכתית על מנת לאפיין את התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם אצל חולדות.

Abstract

זהו פרוטוקול מפורט המתאר פולשנית מדידות והמודינמיקה בחולדות חולה איידס על האפיון של תסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם. פורטל יתר לחץ דם (PHT) עקב שחמת הכבד אחראי על סיבוכים חמורים ביותר בחולים עם מחלת כבד. תמונה מלאה של התסמונת עם יתר לחץ דם הפורטל מאופיין על ידי לחץ מוגבר פורטל (PP) עקב מוגברת התנגדות כלי הדם intrahepatic (IHVR), hyperdynamic זרימת הדם, זרימת דם מוגברת splanchnic. מתקדמת splanchnic vasodilation עורקי, תפוקת הלב מוגבר עם קצב לב גבוה (HR) אבל לחץ הדם בעורק נמוך מאפיין את התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם.

טיפולים כיום מפותחים הזה במטרה להקטין PP מאת גם IHVR מיקוד או מוגברת זרימת הדם splanchnic — אבל תופעות לוואי על ספיקת הדם מערכתית עלולה להתרחש. לפיכך, אפיון מפורט של פורטל ורידים, splanchnic ופרמטרים והמודינמיקה מערכתית, כולל מדידה של PP זרימת דם ורידי פורטל (PVBF), זרימת דם עורקית מצע המעי העליון, כלומר לחץ הדם בעורק (מפה), HR יש צורך פרה הערכת יעילותם של טיפולים חדשניים עבור PHT. המאמר הסרטונים שלנו מספק את הקורא עם פרוטוקול מובנה לביצוע מדידות והמודינמיקה פולשנית בחולדות חולה איידס. בפרט, נתאר את צנתור עורק הירך, וריד שער הכבד דרך הווריד ileocolic ואת המידה של פורטל ורידים, splanchnic הדם לזרום דרך perivascular אולטרסאונד דופלר זרימה הגששים. התוצאות נציג של עכברוש שונים דגמי PHT יוצגו.

Introduction

PHT מוגדר כמו לחץ דם מוגברת פתולוגית וריד שיכולים לגרום סיבוכים חמורים בחולים עם שחמת כגון דימום variceal, מיימת1. בעוד ולשננו מראש (למשל, פקקת וריד שער), שלאחר ולשננו (למשל, תסמונת באד-קיארי) PHT נדירים, PHT intrahepatic עקב שחמת הכבד מייצג הגורם הנפוץ ביותר של PHT2.

בשחמת הכבד, PP הוא גדל בעיקר כתוצאה IHVR גבוהות3. בשלבים מתקדמים, PHT מועצמת על ידי PVBF מוגברת עקב תפוקת הלב מוגבר וירידה מערכתית ו splanchnic התנגדות כלי הדם – הגדרת תסמונת הפורטל לחץ דם גבוהה4. חוק אוהם (ΔP = Q * R) מרמז על כי IHVR וזרימת הדם אינם פרופורציונליים לעמ'5. בחולים, מדידה ישירה של PP הוא מסוכן, לא שגרתי שבוצעו; במקום זאת, מעבר הצבע לחץ ורידי הכבד (HVPG) משמש מדד עקיף של6,עמ'7. HVPG מחושבת על-ידי חיסור חינם הכבד ורידים הלחץ (FHVP) wedged הכבד ורידים הלחץ (WHVP), אשר נמדדים באמצעות צנתר בלון ממוקמת ב וריד הכבד8. HVPG פיזיולוגית נע בין 1-5 מ מ כספית, בזמן HVPG ≥ 10 מ מ כספית מגדיר משמעותיים קלינית הפורטל לחץ דם (CSPH), מצביעה על סיכון מוגבר לסיבוכים הקשורים PHT, כגון דימום variceal, מיימת, אנצפלופתיה כבדית9 . למרות PP (קרי, HVPG) הוא הפרמטר הרלוונטי ביותר עבור חומרת PHT, מידע על רכיבים אחרים של PHT, כולל חומרת hyperdynamic מחזור (HR, מפה), זרימת דם עורקית מצע המעי splanchnic העליון /, IHVR, הם קריטיים להשיג הבנה מקיפה של המנגנון הבסיסי ברורים של PHT.

לפיכך, בניגוד מדידות עקיפות של PP בבני אדם, המתודולוגיה הציג על חולדות מציעה את היתרון של מדידה ישירה של PP ו מאפשרת ההקלטה של פרמטרים נוספים והמודינמיקה אפיון התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם. בנוסף, מדידה ישירה של PP readout אינטגרטיבית מעולה הסכום של פיברוזיס בכבד (דטרמיננטה העיקריים של IHVR), מתגבר על מגבלות מסוימות של כימות פיברוזיס הקשורים טעויות דגימה של רקמת הכבד.

הדגמים מכרסמים הנפוצות ביותר של חולה איידס PHT כוללים מצדו צינור המרה כירורגי (BDL) הנוצרות על-ידי רעלן הכבד פגיעה (כלומר, על ידי פחמן tetrachloride, thioacetamide או אינטרוסמין המינהל), תזונה-induced כבד מטבולית מודלים המחלה. Prehepatic PHT (הלא-חולה איידס) יכולה להיגרם על ידי חלקי וריד שער הכבד מצדו (PPVL)10.

מכרסמים קטנים מתאימים היטב שיטת שהוצגו, לרבות עכברים, אוגרים, חולדות או ארנבים, והן משויכות עלויות תחזוקה נמוכה יחסית. למרות זאת כל ההערכות והמודינמיקה ניתנים לביצוע לביצוע עכברים, יותר דיוק, הפארמצבטית של תוצאות נראים עם חולדות או מכרסמים גדולים בשל היתרון הברור של גודל בעלי חיים. בנוסף, מיקרו-הנגינה המסוימים והתקנים נחוצים כדי לקבל פרמטרים והמודינמיקה דומה בעכברים. לבסוף הם עמידים יותר עם תחתון משויכות התחלואה והתמותה, לפיכך, שיעור הנשירה צפויים נמוך אצל חולדות מאשר בעכברים.

המתודולוגיה הציג הוא מתאים היטב עבור הערכת טיפולים ספציפיים של מחלת כבד (קרי, תרופות אנטי דלקתיות או anti-fibrotic) או רומן תרופתי מתקרב את הטון וסקולרית השפעה ו/או אנדותל ביולוגיה; ופרמטרים. לפיכך, סביר אפקט והמודינמיקה PHT.

Protocol

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי ועדת האתיקה של אוניברסיטת וינה רפואי, אוסטרי משרד המדע, המחקר, הכלכלה (BMWFW). נהלים בטח שבוצעו בתנאים aseptic בחדר הניתוח או דומים לנקות אזור עבודה מאז המדידות והמודינמיקה מייצגים התערבויות כירורגיות. באופן כללי, עובד בתנאים סטריליים מומלץ. בעת שימוש של הרדמה אינהלציה, שקול אוורור נאותים של חדר ניתוח על בטיחות בעבודה. תקופת זמן של 40-50 דקות/חיה חייב להילקח בחשבון במקרה כל המפרט והמודינמיקה הוצג פרוטוקול זה.

1. בפגישת ההכנות

  1. הפעל ולאחר לכייל את ההקלטה רב-ערוצי אלקטרונית כולל את מתמרים לחץ על-פי הוראות היצרן.
  2. לחבר את הגששים זרימה קולי (1 מ מ ו- 2 מ מ) המגבר גשר.
  3. להכין מאגר של פתרון סטרילי תמיסת מלח פיזיולוגית, מחוממים לטמפרטורת הגוף, 37 ° C, עבור הרטבה רקמות או גזה קומפרסים.
  4. להקליט את משקל הגוף החי כדי לספק הרדמה מותאמים משקל ונורמליזציה של פרמטרים והמודינמיקה לפי משקל הגוף.
  5. להכין את כל ציוד הרדמה אינהלציה.
    הערה: אם שאיפת הרדמה ו/או הציוד הנדרש הוא לא באתר או ריאלי, ואז הזרקת ההרדמה קטמין באמצעות חריגות השירותים הווטרינריים ניתן להשתמש (80 – 100 מ"ג/ק"ג קטמין עם 5-10 מ"ג/ק"ג חריגות השירותים הווטרינריים בפתרון תמיסת מלח פיזיולוגית, בקרום הבטן (i.p.)). מחדש מינון של קטמין (הפחתת מינון של 20-30 מ"ג/ק"ג, תוך שרירית (i.m.)) אחרי 30-45 דקות יש צורך לגרום הרדמה כירורגי-plane רציפה.
  6. את החיה תחת הרדמה איזופלוריין לטווח קצר באמצעות תיבת אינדוקציה של שאיפת הרדמה (5 דקות, 5% v/v איזופלוריין, 3-4 L O2-זרימה). בזהירות להטות את התיבה, בדוק את עומק ההרדמה על-ידי המצב פקקת של החיה.
  7. לצנרר את העכברוש עם צינור מתאים אנדוטרכאליות מתוצרת עצמית.
    הערה: עבור אנשי חדש הטכניקה צנרור, שיכוך כאבים/ההרדמה (שלב 1.10) יכולה להינתן מיד אחרי הרדמה שאיפת לטווח קצר כדי לאפשר זמן נוסף לצנרור. אפשרות נוספת היא facemask חיה ספציפית עבור שאיפה הרדמה.
    1. השתמש צינור אנדוטרכאליות מתוצרת עצמית של קטטר ורידי היקפיים ששונתה (14 גרם). לחתוך את הכנפיים טיפול, ולהצמיד ללולאה סרט דביק על קיבוע אחורי ללחי של החולדה כדי למנוע פריקה של הצינור אנדוטרכאליות (איור 1 א').
    2. להשתמש בהתקן תיל מתוצרת עצמית מדריך מ בצינורית עורקי ששונה וגם בעל חוט מדריך מתאים שקצהו בלאנט חוט (איור 1B).
    3. השתמש שולחן צנרור מתאימים עבור מיקום מתאים של החיה. מקם את החיה במצב פרקדן עם הראש במצב בזווית.
      הערה: אם אין דלפק צנרור זמין, זה אפשר להניח את החיה במצב פרקדן עם הצוואר בקפידה הנמתחת מעל הקצה של הטבלה. עם זאת, הליך זה אינו מומלץ עקב סיכון מוגבר של פציעות.
    4. לתקן את התפר מאחורי החותכות בצד אחד של העכברוש, למתוח בעדינות את צווארו של בעל החיים על ידי קשירת את התפר בצד השני (איור 1C).
    5. להאיר אזור הצווארון הגחון והכו אותי מראש ע י קרן אור ממוקדת. בעיקר בבעלי חיים לבקנים, ודא כי מיתרי מוארים דרך העור כדי לאפשר הדמיה משופר ו צנרור מהירה.
      הערה: השתמש laryngoscope של בעל חיים ספציפי לצנרור בעלי פיגמנט.
    6. . תפוס את הלשון, משוך אותו בעדינות באמצעות שתי אצבעות.
    7. השתמש במקלון צמר גפן מטופלים על ידי לידוקאין (משאבה ריסוס) כדי בקפידה עזים ומתנגד האזור בגרון.
    8. לצנרר את החיה על-ידי הוספת הצינור אנדוטרכאליות בין את שפתות הקול לתוך קנה הנשימה, באמצעות התמיכה של המכשיר תיל מדריך (איור 1D).
    9. הסר את ההתקן תיל מדריך.
    10. לחבר את הצינור ההנשמה.
    11. להתחיל ההנשמה באמצעות ההגדרות המתאימות עבור החיה (1 ליטר/דקה O2-זרימה, זרימה אוטומטי = 90/min; לחץ inspiratory: 18 מ מ כספית; הצצה: 3 מ מ כספית, אני / E = 1:2) וחפש צנרור נכונה.
      הערה: אם האינפלציה של הקיבה הוא ציין, להסיר את הצינור ונסה שוב. בנוסף, להשוות את פעילות מערכת הנשימה לקצב ההנשמה, או שתי אצבעות על קיר הבטן נכון על הבטן כדי להעריך את פוטנציאל האינפלציה של הקיבה.
  8. תתחיל איזופלוריין הרדמה בבית 0.5-1.0% v/v ו- 1 ליטר/דקה O2-זרימה מיד לאחר מוצלחת צנרור (איור 2 א).
  9. לתקן את הצינור אנדוטרכאליות מאת בתפר transbuccal דרך הלחי לבין הלולאה מוצמדת דבק של הצינור.
  10. לנהל נגד כאבים על ידי שני מזרקים 1 מ"ל, למשל, קטמין (100 מ ג/ק ג) i.p. (23 גרם בצינורית) [או i.m. על ידי הפצת האחסון מוזרק (מנה) הדו-צדדי זריקות לשריר הירך סימטרית (30 גרם בצינורית)] והרדמה נוספים, piritramide (2 מ"ג/ק"ג) על ידי הזרקה תת-עוריים (ש) (23 גרם בצינורית). הערה הנפח המרבי של זריקות i.m. בכל אתר ההחדרה (איור 2B).
  11. להחיל משחה העין. קליפ של שיער הגוף-אזור הבטן והירכיים הפנימיות הן. לחטא את העור.
    הערה: ינשל הפנימי צריך גלחו לאפשר השימוש עורק הירך contralateral למדידות HR והמפה במקרה צנתור של עורק הירך נכשל בצד אחד. גילוח בנקודת זמן מאוחרת יותר עלול לגרום לשיער לזהם את השדה הכירורגי.
  12. לתקן את החיה במצב פרקדן על כרית החימום (38 ° C) עם דבק (איור 2C).
  13. לפקח על טמפרטורת הגוף של בעל החיים ללא הרף, למשל, באמצעות בדיקה טמפרטורה רקטלית (איור דו-ממדי).
  14. להעריך את עומק הרדמה על ידי סגירת המכסה רפלקס ואת הבוהן-קורט-בדיקה לפני כל התערבות או ניתוח.

2. מדידה של HR ו מפה

  1. פצעים וחתכים העור על הירך הפנימית (צד אחד בחר) מעל המיקום המשוער של עורק הירך ע י הרמת העור על ידי רקמת מלקחיים, הסרת אזור עור של כ 2 ס מ. אורך מאת מאיו מספריים (איור 3 א).
  2. לחשוף ומנתחים בלשון בוטה המתחם העורק-וריד-העצבים הכוללת את עורק הירך של רקמת חיבור (adventitia) על-ידי פתיחת שוב ושוב עוצר דימום לאורך המתחם.
  3. לנתח המתחם העורק-וריד-עצב מן הרקמה שמסביב לאורך ~1–1.5 ס מ (איור 3B).
  4. במידת הצורך, להסיר שומן תת עורי/perivascular לראות טוב יותר, לנתיחה.
    הערה: להיזהר בעת הסרת שומן תת עורי/perivascular על ידי מספריים לציפורן, מאז כלי הדם הפגוע עלול לגרום לפרקים. אם הדימום הוא ציין, להפעיל לחץ על האזור המדמם בעזרת גזה קטנים או לעצור את הדימום על ידי עוצר דימום.
  5. להפריד בין עורק הירך ווריד הירך, עצב עם שני ברמת דיוק גבוהה 45° זווית רחבה נקודת מלקחיים (שקול וריד הירך היא המבנה ביותר המדיאלי, עורק הירך הינו ממוקם יותר לרוחב) (איור 3C-F).
  6. מקום חבל על עורק הירך כמו דיסטלי ככל האפשר והשתמש מלחציים מעוקל התפר כדי להחיל המתיחה האורך עדין על עורק הירך.
  7. מקום suture אניע מראש (אך הקשר לא סגורה) השני על עורק הירך כמו צינתור כמו האפשר (איור 3G).
  8. להכין צנתר מתאימים (PE-50 עבור עורק הירך עכברוש) עם טיפ ניתוק משופע (~ 45°) סמוקות עם תמיסת מלח פיזיולוגית סטרילית heparinized פתרון (5 מ"ל מזרק, 23 גרם בוטה בצינורית). ודא אין בועות אוויר בתוך הקטטר כמו שהם קוליטיסה את לחץ הדם ואת readout HR (איור 3 H).
  9. לדחוס עורק הירך בסוף הפרוקסימלית של המקטע חשוף באמצעות מלחציים מיקרו כדי לעצור באופן זמני את זרימת הדם בעורקים (איור 3עכשיו).
  10. לנקב הקיר עורקי במיקום דיסטלי של המקטע גזור על-ידי שימוש של בצינורית כפופות (23 גרם) תוך מתן תמיכה מרית מתכת מיקרו מתחת עורק הירך (איור 3J).
  11. בזהירות catheterize עורק הירך דרך הנקב. עם קצה משופע של הקטטר כלפי מעלה. מראש הקטטר עד המלחציים מיקרו לקרב את ערכיהן (איור 3 K).
    הערה: במקרה של צנתור לא מוצלח של עורק הירך בניסיון הראשון, ניסיון נוסף מקורב יותר ניתן לבצע (מתחילים בשלב 2.8). אם העורק יתבקע או דימום חמור מתרחש, מאתרים ומפסיקים או מהדק את העורק הכי קרובים ככל האפשר למנוע איבוד דם. אם איבוד דם הוא מזערי, ניסיון catheterizing עורק הירך contralateral (מתחילים בשלב 2.1).
  12. פתח את המלחציים מיקרו ואבדוק את זרימת הדם בעורקים פועמת לתוך הצנתר (איור 3 L).
  13. למנוע זרימה של דם לתוך הצנתר על ידי חסימת זרימה יוצאת של הקטטר.
  14. לתקן את הצנתר במיקומה intraluminal על-ידי סגירת את הקשירה proximal מוכן סביב הירך הקטטר הציג (איור 3 מ').
  15. שוב ושוב לשטוף, וארוקן את הצנתר בעורק הירך כדי להעריך השמה נכונה קרישה תוך-כלית. עורקי pulsation בעמודה של דם aspirated צריך להיות מורגש בקלות.
  16. לתקן את מיקום הצנתר לאורך הספינה באמצעות קצות הקשירה דיסטלי כדי למנוע נקע ולהבטיח עמדה האורך של הקטטר (איור 3N).
  17. בנוסף, קלטת את הצנתר קרוב החיה על השולחן כירורגי כדי לאבטח וכדי למנוע פריקה בשוגג.
  18. לחבר את הצנתר מלא עם תמיסת מלח פיזיולוגית לפתרון מתמר לחץ תוך הימנעות היווצרות בועות אוויר.
  19. . תתחיל להקליט את HR ומפת באמצעות ממשק דיגיטלי (איור 3O)
  20. לכסות את האזור חשוף על הירך הפנימית עם קומפרס גזה בטעימת קטן (איור 3 P).
  21. חישוב מדד hyperdynamic (HD): HD = מפה לשעה.
    הערה: ב- PHT מתקדם, מדד HD הוא גבוה לעומת יתר לחץ דם שאינו של פורטל חיות. אולם, עלייה במדד HD במהלך הניתוח עשוי גם להצביע על דימום, hypovolemia או כאב. אם מוקלט מפה ערכים נמוכים מאוד אבל האות הוא טוב, זרימה פועמת ומתגלה הקטטר, לבדוק רמת ההרדמה, פוטנציאל להפחית את רמת ההרדמה. לא להפסיק לגמרי איזופלוריין הרדמה, מאז זה עשוי להוביל הרדמה לא מספקת עומק על פי רווחת ותרגול מדעית טובה.

3. זרימת הדם מעולה עורק מצע המעי העליון (SMABF)

  1. לבצע פתיחה של הבטן החציוני (איור 4A-C)
    1. הרם את שכבת העור עם מלקחיים רקמות 5-6 ס מ מתחת מצאתי ולהסיר רצועה דקה של העור באמצעות מאז'ו. מספריים מעל linea alba עד מצאתי מתמלאת.
    2. באמצע החתך בעור, הרם את שכבת השרירים על ידי רקמת מלקחיים לאורך לינאה אלבה כדי ליצור את המרחק בין דופן הבטן splanchnic איברים.
    3. פתיחת חלל הצפק על ידי אם לקיר הבטן עם אזמל-linea alba. הרחבת הפתח כשאתם מרימים את דופן הבטן על ידי רקמת מלקחיים עם מספריים Metzenbaum לאורך לינאה אלבה מעל המרחק אותו כמו שכבת העור.
  2. בזהירות חפירת המעי באמצעות צמר גפן רטוב על-ידי הפעלת coecum ומניחים אותו על קומפרס גזה גדולה ספוג בתמיסה תמיסת מלח פיזיולוגית סטרילית ליד החתך (איור 4D-F).
  3. לעטוף את המעי לתוך הקומפרס גזה וודא כי זה הוא לחלח עם תמיסת מלח פיזיולוגית סטרילית פתרון (איור 4G).
  4. לאתר ולחשוף את עורק מצע המעי העליון מעולה.
  5. לנתח את עורק מצע המעי העליון סופריור עם שני מתוצרת עצמית בוטה 'Schwabl'-הוקס: הרם את העורק עם הקרס הראשונה ולנסות למקם את השני דרך המנהרה רקמות באותו. לחשוף את עורק מצע המעי העליון מעולה לאורך מרחק 5 מ מ כדי להבטיח שהחללית זרימה (1 מ מ) ניתן להניח סביבו (איור 4 H-K).
    הערה: אם מועדף, מלקחיים נקודה רחב זווית דיוק 45° ניתן להרים את העורק גם כן. 'Schwabl'-ווים מוכן מ 30 G קנולות עם טיפים בגילוי לב שבור מכופף לצורת וו. אם משני העורקים הן מקיפות 'Schwabl'-ווים עשוי להיות בטוח יותר כמו לפרקים מ בהתקפה בעוד לנתח את עורק מצע המעי העליון סופריור ניתן להימנע. אם הדימום מתרחש תוך כדי הכנת עורק מצע המעי העליון מעולה, במקום לדחוס גזה קטנים על האתר דימום במשך 1-2 דקות עם לחץ עדין. דימום קטן יפסק בדרך כלל במהירות; עליך תמיד לזכור כדי הרטבה רקמות מעת לעת (שלב 1.12). אם עורק מצע המעי העליון מעולה עצמו ייפגע, ההערכות והמודינמיקה חייב להפסק.
  6. חלות אולטרסאונד ג'ל החיישן של החללית זרימה קולי ולחבר אותו עורק מצע המעי העליון splanchnic. . ליישר אותה לתוואי הטבעי של עורק מצע המעי העליון סופריור (איור 4י-ם)
  7. לסגור את המכשיר זרימה (1 מ מ) ולהחיל במידת הצורך בעדינות ג'ל אולטרסאונד נוסף על חיישן דופלר כדי לשפר את איכות האות. לעשות זאת באמצעות מזרק (20 מ ל) מלא ג'ל אולטרסאונד של בצינורית שקצהו בלאנט (18 גרם) (איור 4N-O).
    הערה: אם המכשיר זרימה לא מיושרים כראוי לאורך הנתיב הרגיל של כלי השיט, המתח עלול לגרום כיווץ כלי הדם, וכך מערבולות זרימה, אשר מפחית את הדיוק של המדידות זרימה. נסה ליישר מחדש את הכיוון של המכשיר זרימה לאורך המסלול הטבעי של כלי השיט ואז מספיק לתקן את החללית זרימה במצב המתאים.
  8. למדוד את SMABF ולהעריך את בהתאמה של האות זרימה פועמת ועד לפסגות סיסטולי של ההקלטה בעורק הירך.
    הערה: אם מוקלט מפה ערכים נמוכים מאוד, אך האות היא טובה פועמת זרימה מזוהה הקטטר, לבדוק רמת ההרדמה, פוטנציאל להפחית את רמת ההרדמה. לא להפסיק לגמרי איזופלוריין הרדמה, מאז זה עשוי להוביל לא מספיק עומק ההרדמה על פי רווחת ותרגול מדעית טובה.
  9. בעמדה יציבה של המכשיר זרימה (1 מ מ) ולפתור את הכבל של המכשיר זרימה. . תתחיל להקליט את SMABF בלי עוד יותר מניפולציה של המכשיר זרימה (1 מ) (איור 4 P)

4. PVBF

  1. לאתר ולחשוף את וריד שער הכבד את פני הגבי מצע המעי קרוב hilum הכבד (איור 5A).
  2. בעדינות לנתח את וריד שער הכבד מן הרקמה שמסביב באמצעות מלקחיים נקודה רחב זווית ברמת דיוק גבוהה 45°: לבודד את וריד שער הכבד על ידי בעדינות, שוב ושוב דחיפת המלקחיים תחת וריד שער הכבד כדי ליצור מנהרה רקמות (איור 5B).
    הערה: אם הדם מתרחשת מתוך הרקמה periportal בעת הכנת וריד שער הכבד, להפעיל לחץ עדין באתר דימום למשך 1-2 דקות שימוש במקלון צמר גפן; זה לעתים קרובות עוצר את הדימום.
  3. להגדיל את המנהרה על-ידי פתיחת ברמת דיוק גבוהה 45° זווית רחבה נקודת המלקחיים לאט ולחשוף את וריד שער הכבד לאורך מרחק של 5-6 מ מ, כדי לאפשר את המיקום של המכשיר זרימת perivascular (2 מ מ) (איור 5C, יח).
  4. חלות אולטרסאונד ג'ל החיישן של החללית זרימה קולי ולחבר אותו וריד שער הכבד מיושר עם תוואי טבעי (איור 5E).
  5. לסגור את המכשיר זרימה (2 מ מ) ולהחיל ג'ל אולטרסאונד נוסף אם יש צורך, כפי שתואר לעיל (שלב 3.7) (איור 5F).
  6. ודא כי המכשיר זרימה מושם באופן שאינו שמושגיו סביב וריד שער הכבד (איור 5G).
    הערה: אם המכשיר זרימה לא מיושרים כראוי לאורך הנתיב הרגיל של כלי השיט, המתח עלול לגרום כיווץ כלי הדם, וכך מערבולות זרימה, אשר מפחית את הדיוק של המדידות זרימה. נסה ליישר מחדש את הכיוון של המכשיר זרימה לאורך המסלול הטבעי של כלי השיט ואז מספיק לתקן את החללית זרימה במצב המתאים.
  7. בעמדה יציבה של המכשיר זרימה (2 מ מ) ולפתור את הכבל של המכשיר זרימה. לאחר מכן, התחל הקלטה של PVBF (איור 5 H).
    הערה: אם מוקלט מפה ערכים נמוכים מאוד, אך האות היא טובה פועמת זרימה מזוהה הקטטר, לבדוק רמת ההרדמה, פוטנציאל להפחית את רמת ההרדמה. לא להפסיק לגמרי איזופלוריין הרדמה, מאז זה עשוי להוביל לא מספיק עומק ההרדמה על פי רווחת ותרגול מדעית טובה.

5. PP

  1. להכין צנתר (PE-50 על הורידים מצע המעי העליון עכברוש) עם וחציים (כ- 45°) עצה ניתוק זה התרוקן עם פתרון סטרילי תמיסת מלח פיזיולוגית (מזרק 5 מ ל ו בוטה בצינורית 23 גרם). שימו לב כי אין בועות אוויר הם בתוך הקטטר כפי שהם להכשיל את המדידה PP (איור 6A).
  2. להתמודד עם המעי עם כפפות רטובים ומקום שזה מפוזרים על פני האצבעות (איור 6B).
  3. למטב את התצוגה של המיטה וסקולרית מצע המעי העליון קרוב המעי הדק (איור 6C).
  4. זיהוי של כלי הראשי מצע המעי העליון ורידים מוביל וריד שער הכבד (vena ileocolica - vena mesenterica סופריור - vena portae).
  5. למצוא צומת מתאים של הווריד ileocolonic הנגיש עבור צנתור.
  6. תחילה לתקוע את הצנתר לתוך הרקמה מצע המעי העליון על ידי ניקוב של הצפק הקרביים של מצע המעי קרוב לצומת וסקולרית במחירים צנתור.
  7. בקפידה מראש מלוכסנות קצה הצנתר קרוב לצומת של הווריד ileocolic עד רושם קלה של הצומת כלי נתפסת (6D איור).
  8. לבסוף, catheterize מערכת ורידים בקנה אחד עם המסלול כלי מצטרף על ידי ניקוב הקיר כלי הדם-הזווית למעבר של כלי. (איור 6E).
    הערה: אם הדימום מתרחש צנתור של הווריד ileocolic, באמצעות מכבש האגודל עם קומפרס גזה קטנים באזור דימום. הלחץ הזה צריך להישמר למשך 1-2 דקות לעצור את הדימום. לאחר מכן, מנסה להוסיף את הצנתר בסניף יותר הפרוקסימלית של הווריד של ileocolic.
  9. לקדם הקטטר בעיון נוסף לאורך העורק הראשי ורידים וריד שער הכבד ממש את הווריד (איור 6F) בלי.
    הערה: שומר את הצנתר במרחק מספיק כדי החללית זרימה להציב בסביבת הסניף הראשי של וריד שער הכבד כדי להימנע חפצים בתוך האות זרימה וכדי למנוע לחירור של וריד שער הכבד.
  10. לחבר את הצנתר מלא עם תמיסת מלח פיזיולוגית לפתרון מתמר לחץ תוך הימנעות היווצרות בועות אוויר.
  11. . תתחיל להקליט PP
  12. לתעד את כל הפרמטרים והמודינמיקה בו זמנית. תחת תנאים יציבים למשך מספר דקות (איור 6G, H). באופן אופציונלי, הקטטר ורידים הפורטל יכול להיות קבוע במקום באמצעות דבק רקמות, המעיים עשויה להימצא מחדש לתוך חלל הבטן.
    הערה: אם מוקלט מפה ערכים נמוכים מאוד, אך האות היא טובה פועמת זרימה מזוהה הקטטר, לבדוק רמת ההרדמה, פוטנציאל להפחית את רמת ההרדמה. לא להפסיק לגמרי איזופלוריין הרדמה, מאז זה עשוי להוביל לא מספיק עומק ההרדמה על פי רווחת ותרגול מדעית טובה.

6. IHVR

  1. לאחר הקרבת החיה, למדוד את המשקל הכבד. לחשב את IHVR: IHVR = PVBF/עמ' לנרמל את הערך PVBF למשקל של הכבד.

תוצאות

בהתאם לדגם חיה את חומרת מחלת כבד, מידת PHT ואת חומרת התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם היא שונה (איור 7).

המודל BDL גורמת שחמת המרה עקב לחסימת מרה תוך כבדית. בהתאם לכך, PP מגדילה hyperdynamic ובזמן מחזור מתפתח, כפי שנראה גידול משאבי אנוש וכן ?...

Discussion

PP הוא הפרמטר העיקרי לתוצאה להערכה של התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם, משקף את חומרת שבבסיס שחמת. התצהיר מטריקס (קרי, פיברוזיס) והן vasoconstriction sinusoidal (בשל גדל ביטוי הכבד של vasoconstrictors, ירד היענות vasodilators) לגרום IHVR מוגברת. החשיבות של PP והשפעתה על מחלת כבד כרונית הוכח מרובים פרה11,<...

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgements

אנו מודים וטרינרים, אחיות, בעלי חיים שומרי-מרכז של המחקר הביו-רפואי על תמיכתם רציפה במהלך פרויקטים מחקריים שלנו. המחברים להכיר את הקלט החשובים של כל הסוקרים של פרוטוקול זה. כמה המחקר מומן על ידי "יאנג המדע בפרס" של החברה האוסטרית לגסטרואנטרולוגיה ו Hepatology (ÖGGH) ל PS ופרס "סקודה" של האוסטרי החברה לרפואה פנימית כדי ללכוד את...

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Instruments
LabChart 7 Pro softwareADInstruments, Colorado Springs, CO, USA -Software
ML870 PowerLab 8/30ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA -Electronic multichannel recorder
MLT0380/DADInstruments, Colorado Springs, CO, USA -Pressure transducer (x2: for Portal Pressure and Arterial Pressure)
ML112 Quad Bridge AmplifierADInstruments, Colorado Springs, CO, USA -Bridge amplifier
TS420Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA -Flowmeter module
Biological Research Apparatus 7025UGO BASILE S.R.L., Comerio, Italy -Ventilator
Vapor 2000Dräger Medical AG & Co. KG, Lübeck, Germany -Isofluran Vaporizer
Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Superior Mesenteric Artery)Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA#MA1PRBUltrasonic flow probe (1mm)
Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Portal Vein)Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA#MA2PSBUltrasonic flow probe (2mm)
1st for intubation & 2nd for clean skin incisions - -Mayo scissor [x2]
Metzenbaum scissor - - -
Cuticle scissor - - -
e.g. Adson Brown tissue forceps - -Tissue Forceps
High precision 45° angle broad point forceps [x2] - - -
Hemostat [x4] - - -
e.g. Mikulicz peritoneal clamp - -Curved clamp
e.g. Dieffenbach clamp - -Micro clamp
e.g. micro spatula with flat ends, width 4 mm, - -Micro metal spatula
for transbuccal suture at intubation - -Needle holder
Scalpel grip - - -
selfmade - -Intubation desk
blut, flexible and with a suitable diameter for arterial cannula and venflow - -Blunt steel wire
modified arterial line 20G with FlowstichBecton Dickinson, Farady Road, Swindon, UK#682245Arterial line
Heating pad - - -
Rectal temerature probe - - -
Saline heater - - -
Laryngoscope (specific for animal size, e.g. rat) - - -
Inductionbox for inhalation anesthesia - - -
Scale (able to measure mg) - - -
Hair clipper - - -
Name Company Catalog NumberComments
Consumables
e.g. modified BD Venflon Pro Safety 14GABecton Dickinson Infusion Therapy, AB, SE251 06 Helsingborg, Sweden#393230Peripheral venous catheter (14G)
Fine-Bore Polyethylene Tubing, ID 0.58mm, OD 0.96mm, Portex,Smiths Medical International Ltd., Kent, UK#800/100/200Catheter tube (PE-50)
e.g. Omnifix-F SoloB. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany#9161406VSyringe 1mL
e.g. Injekt SoloB. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany#4606051VSyringe 5mL
e.g. Injekt SoloB. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany#4606205VSyringe 20mL
e.g. BD Microlance 3, 18G - 1 1/2"Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain#304622Cannula (18G)
e.g. BD Microlance 3, 23G - 1"Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain#300800Cannula (23G)
e.g. BD Microlance 3, 30G - 1/2"Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain#304000Cannula (30G)
e.g. Leukoplast SBSN medical GmbH, Hamburg,  Germany#47619-00Adhesive tape
e.g. Gazin RK Mullkompressen (18x8cm)Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria#10972Gauze compress (small)
e.g. Gazin RK Mullkompressen (5x5cm)Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria#10961Gauze compress (big)
Silk Braided black, USP 4/0, EP 1.5SMI AG, St. Vith, Belgium#2021-04Suture (Silk 4/0, EP 1.5)
e.g. Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 PrimeJohnson & Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Germany#EH7552Transbuccal suture
e.g. Cottonbuds (2.2mm, 15cm)Paul Hartmann AG, Heidenheim, Germany#967936Cotton buds
e.g. Vue UltrasoundgelOptimum Medical Limited, UK#1157Ultrasound gel
e.g. Glubran 2Gem srl, Viareggio, Italy#G-NB2-50Tissue glue
e.g. Surgical scalpell knife Nr. 10 - carbon steelSwann-Morton, England, B.S.#202Scalpel Knife
Heparin, 5000 i.E./mL (Natriumheparin)Medicamentum Pharma GmbH, Allerheiligen im Mürztal, Austria -Heparin
FloraneAesica Queenborough Ltd., Queenborough, UK -Isoflurane
OeloVital (5g)Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Austria -Eye gel
KetasolaniMedica GmbH, Senden-Bösensell, Germany -Ketamine
RompunBayer Austria Ges.m.b.H., Vienna, Austria -Xylazine
Xylocain 10% PumpsprayAstraZeneca Österreich GmbH, Vienna, Austria -Lidocaine pump spray
DipidolorJansen-Cilag Pharma GmbH, Vienna, Austria -Piritramide
NaCl 0.9% Fresenius, 1LFresenius Kabi Austira GmbH, Graz, Austria#13LIP132Physiological saline solution

References

  1. Ripoll, C., et al. Hepatic venous pressure gradient predicts clinical decompensation in patients with compensated cirrhosis. Gastroenterology. 133 (2), 481-488 (2007).
  2. Bosch, J., Groszmann, R. J., Shah, V. H. Evolution in the understanding of the pathophysiological basis of portal hypertension: How changes in paradigm are leading to successful new treatments. J Hepatol. 62, S121-S130 (2015).
  3. Blachier, M., Leleu, H., Peck-Radosavljevic, M., Valla, D. C., Roudot-Thoraval, F. The burden of liver disease in Europe: a review of available epidemiological data. J Hepatol. 58 (3), 593-608 (2013).
  4. Colle, I., Geerts, A. M., Van Steenkiste, C., Van Vlierberghe, H. Hemodynamic Changes in Splanchnic Blood Vessels in Portal Hypertension. Advances in Integrative Anatomy and Evolutionary Biology. 291 (6), 699-713 (2008).
  5. Laleman, W., Van Landeghem, L., Wilmer, A., Fevery, J., Nevens, F. Portal hypertension: from pathophysiology to clinical practice. Liver International. 25 (6), 1079-1090 (2005).
  6. Franchis, R. d. . Updating Consensus in Portal Hypertension: Report of the Baveno III Consensus Workshop on definitions, methodology and therapeutic strategies in portal hypertension. Journal of Hepatology. 33 (5), 846-852 (2000).
  7. Zardi, E. M., Di Matteo, F. M., Pacella, C. M., Sanyal, A. J. Invasive and non-invasive techniques for detecting portal hypertension and predicting variceral bleeding in cirrhosis: a review. Annals of medicine. 46 (1), 8-17 (2014).
  8. Kumar, A., Sharma, P., Sarin, S. K. Hepatic venous pressure gradient measurement: time to learn. Indian J Gastroenterol. 27 (2), 74-80 (2008).
  9. Tsochatzis, E. A., Bosch, J., Burroughs, A. K. Liver cirrhosis. Lancet. 383 (9930), 1749-1761 (2014).
  10. Abraldes, J. G., Pasarín, M., García-Pagán, J. C. Animal models of portal hypertension. World Journal of Gastroenterology : WJG. 12 (41), 6577-6584 (2006).
  11. Reiberger, T., et al. Sorafenib attenuates the portal hypertensive syndrome in partial portal vein ligated rats. Journal of Hepatology. 51 (5), 865-873 (2009).
  12. Schwabl, P., et al. Pioglitazone decreases portosystemic shunting by modulating inflammation and angiogenesis in cirrhotic and non-cirrhotic portal hypertensive rats. Journal of Hepatology. 60 (6), 1135-1142 (2014).
  13. Reiberger, T., et al. Nebivolol treatment increases splanchnic blood flow and portal pressure in cirrhotic rats via modulation of nitric oxide signalling. Liver International. 33 (4), 561-568 (2013).
  14. Schwabl, P., et al. The FXR agonist PX20606 ameliorates portal hypertension by targeting vascular remodelling and sinusoidal dysfunction. Journal of Hepatology. 66 (4), 724-733 (2017).
  15. Mandorfer, M., et al. Sustained virologic response to interferon-free therapies ameliorates HCV-induced portal hypertension. J Hepatol. 65 (4), 692-699 (2016).
  16. Schwabl, P., et al. Interferon-free regimens improve portal hypertension and histological necroinflammation in HIV/HCV patients with advanced liver disease. Aliment Pharmacol Ther. 45 (1), 139-149 (2017).
  17. Reiberger, T., Mandorfer, M. Beta adrenergic blockade and decompensated cirrhosis. Journal of Hepatology. 66 (4), 849-859 (2017).
  18. Reiberger, T., et al. Carvedilol for primary prophylaxis of variceal bleeding in cirrhotic patients with haemodynamic non-response to propranolol. Gut. 62 (11), 1634-1641 (2013).
  19. Reiberger, T., et al. Austrian consensus guidelines on the management and treatment of portal hypertension (Billroth III). Wiener klinische Wochenschrift. 129 (3), 135-158 (2017).
  20. de Franchis, R. Expanding consensus in portal hypertension. Journal of Hepatology. 63 (3), 743-752 (2015).
  21. Pinter, M., et al. The effects of sorafenib on the portal hypertensive syndrome in patients with liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma - a pilot study. Alimentary Pharmacology & Therapeutics. 35 (1), 83-91 (2012).
  22. Schwabl, P., Laleman, W. Novel treatment options for portal hypertension. Gastroenterol Rep (Oxf). 5 (2), 90-103 (2017).
  23. Klein, S., Schierwagen, R., Uschner, F., Trebicka, J. . Mouse and Rat Models of Induction of Hepatic Fibrosis and Assessment of Portal Hypertension. , (2017).
  24. Russell, W. M. S., Burch, R. L. . The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).
  25. Langhans, W., Myrtha, A., Riediger, T., Lutz, T. A. . Routine animal use procedures. , (2016).
  26. Animal Care and Use Program. . Rat and Mouse anesthesia and analgesia: Formulary and General Drug Information. , (2016).
  27. Davis, J. A. . Current Protocols in Neuroscience. , (2001).
  28. Albrecht, M., Henke, J., Tacke, S., Markert, M., Guth, B. Effects of isoflurane, ketamine-xylazine and a combination of medetomidine, midazolam and fentanyl on physiological variables continuously measured by telemetry in Wistar rats. BMC Veterinary Research. 10 (1), 198 (2014).
  29. Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Laboratory Animals. 48 (1), 6-14 (2014).
  30. Becker, K., et al. . Statement on anesthesia methodologies: Recommondations on anaesthesia methodologies for animal experimentation in rodents and rabbits. , (2016).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

138

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved