JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

המטרה הכוללת של המחקר הנוכחי היא להציג את הטכניקות של אינדוקציה של אוטם שריר הלב (MI) ואי ספיקת לב אוטם לאחר שריר הלב (לאחר MI HF) בחזה סגור, מבוגר Göttingen minipigs ואפיון של מודל HF פוסט MI ב Göttingen ממזער לעומת חזירי Landrace.

Abstract

התפתחות אי ספיקת לב היא המנבא החזק ביותר של תמותה ארוכת טווח בחולים ששרדו אוטם שריר הלב חריף (MI). יש צורך קליני unmet למניעה וטיפול של אי ספיקת לב אוטם לאחר שריר הלב (לאחר MI HF). דגמי חזירים רלוונטיים קלינית של HF שלאחר MI הם תנאים מוקדמים למחקרים סופיים של הוכחת הרעיון לפני הכניסה לניסויים קליניים בפיתוח תרופות ומכשירים רפואיים.

כאן אנו שואפים לאפיין דגם חזירי בחזה סגור של HF פוסט MI במיניפיגים בוגרים של גטינגן עם מעקב ארוך טווח כולל הדמיית תהודה מגנטית לבבית סדרתית (CMRI) ולהשוות אותו לדגם חזיר Landrace הנפוץ.

MI נגרם על ידי חסימת בלון תוך-אלומיניום של העורק הכלילי השמאלי היורד במשך 120 דקות במיניפיגים של גטינגן ובמשך 90 דקות בחזירי לנדראס, ואחריו רפרושופ. CMRI בוצע כדי להעריך מורפולוגיה לב ותפקוד בבסיס בשני הגזעים ב 3 ו 6 חודשים ב minipigs Göttingen ב 2 חודשים חזירים Landrace, בהתאמה.

גודל הצלקות היה דומה בשני הגזעים, אבל MI הביא לירידה משמעותית של שבר פליטה חדרי שמאלי (LVEF) רק במיניפיגים של גטינגן, בעוד חזירי לנדרס לא הראו הפחתה של LVEF. החלק הימני של פליטת חדרים (RV) גדל בשני הגזעים למרות גודל צלקת הקרוואנים הזניח. בניגוד לעלייה המשמעותית במסת הקצה הדיאסטולית השמאלית (LVED) בחזירי לנדראסה בגיל חודשיים, גטינגן מיניפיגס הראה עלייה קלה במסת LVED רק בגיל 6 חודשים.

לסיכום, זהו האפיון הראשון של HF פוסט MI ב Göttingen ממזער בהשוואה חזירי Landrace, מראה כי מודל Göttingen למזער משקף פרמטרים שלאחר MI HF דומה הפתולוגיה האנושית. אנו מסיקים כי מודל מיניפיג Göttingen עדיף על מודל חזיר Landrace ללמוד את הפיתוח של HF שלאחר MI.

Introduction

למרות התמותה ההולכת ופוחתת של אוטם שריר הלב החריף (MI), השכיחות של אי ספיקת לב אוטם לאחר שריר הלב (לאחר MI HF) לא השתנה עם הזמן1. אי ספיקת לב (HF) הוא אחד מנבאים החזקים ביותר של מוות בחולי MI2. עד כה, טיפול reperfusion היא אפשרות הטיפול הזמינה היחידה להגביל את גודל אוטם שריר הלב כדי להפחית את הסיכון של HF הבאים3,4,5. HF וסיבוכים אחרים עלולים להתרחש כתוצאה מפגיעת רפרופוזיה; לכן, יש עדיין צורך unmet לפיתוח של טיפולים cardioprotective מעבר רפרופוזיה בזמן6,7,8. טיפולים קרדיו-פרוטקטיביים רבים יעילים אפילו במודלים גדולים של בעלי חיים תוארו, אך רק מיזוג איסכמי מרחוק (RIC) נראה לשפר את התוצאות הקליניות של HF שלאחר MI בניסוי קליני קטן9. עם זאת, תוצאה מעודדת זו על היעילות של RIC נחקרה בניסוי מבוקר חד-עיוור, אקראי (CONDI-2/ERIC-PPCI) שבוצע ב 33 מרכזים ברחבי אירופה בחולי STEMI, שם RIC לא הצליח לשפר את התוצאות הקליניות10. סיבות אפשריות לתרגום כושל של הנתונים הפרה-קליניים עשויות להיות השימוש במודלים תת-אופטימליים של בעלי חיים שלאחר MI HF עם רלוונטיות קלינית נמוכה11.

מורפולוגיה קרדיווסקולרית (פאתולוגית) ופיזיולוגיה (פאתו) של מודלים חזיר דומים לתנאים אנושיים; לכן, הוא נמצא בשימוש נרחב ומקובל במחקר לב וכלי דם תרגום12,13,14. גזעי חזירים המשמשים במחקר לב וכלי דם שייכים למינים מגוונים מאוד של חזירים ביתיים (Sus scrofa domestica) הכוללים חזירים המשתנים בגודלם, במראהם וברקע הגנטי15,16. למרות שלאחר MI HF נחקרה חזירים בהרחבה, שום מחקר לא פורסם במטרה לאפיין ולהשוות את ההשפעה של MI על התוצאה של פוסט MI HF חזירים Landrace ו Göttingen minipigs. קצב הצמיחה האינטנסיבי של חזירי Landrace עשוי להשפיע על תוצאות morphofunctional הלב; עם זאת, Göttingen minipigs עם דפוסי צמיחה מוגבלים עשוי להתגבר על חששות אלה והוא יכול לשמש מודל ריאלי למעקב ארוך טווח בהערכת HF שלאחר MI. יתר על כן, קו מנחה על הרלוונטיות של הקפדה ושחזור במחקרים פרה-קליניים על cardioprotection ממליץ על שימוש בהדמיית תהודה מגנטית לבבית (CMRI) כמודל רלוונטי קלינית למדידת תפקוד החדר בחזירים12.

כדי לנתח את העניין המדעי על HF פוסט MI בחזירים ביצענו חיפוש ספרות על PubMed באמצעות מחרוזת החיפוש הבאה: "(חזיר או חזיר או חזיר או חזיר או sus-scrofa או מיני פיג או מיני חזיר או מיני חזיר או מיניאטורי חזיר או מיניאטורי-חזירים) ו (אוטם* או איסכם * או ischaem * או רפרטוס *) ו (לב או לב או קרדי * או שריר הלב *) ו (LAD או שמאלי-anterior * או LCX או שמאל-cir או RCA) ו (אי ספיקת לב או lvef או פליטה-שבר או גודל אוטם או גודל אוטם)" ומצא כי מודלים חזיר של איסכמיה לב / רפרושופ משמשים לעתים קרובות כדי ללמוד MI ו- HF שלאחר MI, אבל רק 17% (71 מתוך 425 מאמרים) של מחקרים מעורבים minipigs ו 7% (30 מתוך 425 מאמרים) השתמשו Göttingen minipigs. רק כ -1% (5 מתוך 425) של מחקרים השתמשו Göttingen minipigs ופרוטוקולים רלוונטיים קלינית עם מעקב ארוך טווח (1-9 חודשים של reperfusion) ו CMRI כדי לנתח את תפקוד הלב. המספר הקטן של מחקרים רלוונטיים קלינית מדגיש את הפער התרגומי בין מחקר בסיסי לניסויים קליניים. לכן, אפיון מקיף של החזה הסגור שלאחר MI HF מודלים Göttingen minipigs ו Landrace חזירים עם הערכה חוזרת ונשנית של תפקוד חדרים שמאלה וימינה ואנטומיה באמצעות CMRI במהלך מעקב ארוך טווח נדרש. כאן אנו שואפים להתמקד ההיתכנות הטכנית והרלוונטיות הקלינית של שני מודלים שלאחר MI HF לתאר פרוטוקולים ניסיוניים סטנדרטיים לשחזור עבור מחקרים שלאחר MI HF שעשויים לשמש להערכת תרופות cardioprotective ו / או טיפולים במכשור רפואי.

המחקר הנוכחי הוא הראשון בספרות שמאפיין מודל רלוונטי קלינית של HF פוסט MI באמצעות מיניפיגים בוגרים של גטינגן ולהשוות פרמטרים מורפולוגיים ולב שמאליים וימניים חדריים עם זה של חזירי Landrace המתבגרים.

Protocol

13 נקבה בריאה ובוגרת מינית Göttingen minipigs (גיל בין 12 ל 14 חודשים) ו 10 חזירי Landrace נקבה בריאה ולא בוגרת מינית (גיל בין 2 ל 3 חודשים) שוכנו בדוכני חזיר בהתאם להמלצות הגודל של המדריך האחרון לטיפול ושימוש של חיות מעבדה DHEW והנחיות האיחוד האירופי 63/2010. בעלי חיים לא עוקו. הטמפרטורה של חדרי בעלי החיים נשלטה, ובעלי חיים נשמרו במחזור אור / כהה של 12 שעות וללא שרצים. האכלת ליביטום מודעה מובילה לעלייה במשקל גלויה הן במיני-פיגים של גטינגן והן בחזירי לנדרייס, ולכן חזירים משני הגזעים ניזונים ממשטר תזונה מוגבל. מיניפיגים של גטינגן הוכנסו לתנור מוגבל כבר כשהגיעו למתקן בעלי החיים ולמשך כל המחקר. שירותי דיאטה מיוחדים חזיר אוכל 180-220 גרם / ארוחה / בעל חיים ניתנה פעמיים ביום על פי "טיפול טוב של Ellegaard Göttingen Minipigs" הנחיות (תאריך תיקון: 13 מרץ, 2013) ב 2 הימים הראשונים. בין היום 3 ל -12 בעלי חיים הוזנו 50% שירותי דיאטה מיוחדת חזיר אוכל ו 50% תחזוקה מיניפיג דיאטה. מהיום ה-14 ועד סוף המחקר הוזנו בעלי החיים במיני-דיאטה תחזוקתית. חזירי Landrace קיבלו אוכל חזיר בהריון, 1.5% ממשקל הגוף שניתן פעמיים ביום על פי PIC Wean כדי לסיים ידני 2008 ו 2013. כל בעלי החיים קיבלו מזון בנפרד וצריכת המזון הייתה במעקב כדי למנוע תחרות על אוכל. בעלי חיים עם קשיי הזנה הוזנו בנפרד בסיוע כוח אדם מטפל. כל בעלי החיים קיבלו ליביטום מודעת מי ברז. הפרוטוקול הניסיוני של HF שלאחר MI במיני-פיגים של גטינגן ובחזירי לנדרייס מוצג באיור 1.

figure-protocol-1439
איור 1. פרוטוקול ניסיוני לאי ספיקת לב הנגרמת על ידי אוטם פוסט-שריר הלב בחזירי לנדרייס ובמיני-פיגים של גטינגן. CMRI - דימות תהודה מגנטית לבבית. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

1. CMRI בסיסי

  1. למשוך מזון מבעלי חיים לפחות 12 שעות לפני תחילת ההרדמה אבל גישה מאובטחת למים כדי למנוע התייבשות.
  2. הרדמה
    1. לגרום להרדמה של בעלי החיים עם קטמין הידרוכלוריד (12 מ"ג / קילוגרם), xylazine (1 מ"ג / קילוגרם), ואטרופין (0.04 מ"ג / קילוגרם) כהזרקה תוך שרירית לאזור הצוואר.
    2. למדוד את משקל הגוף ואת אורך בעלי החיים. החישוב של נוסחאות פני השטח של הגוף (BSA) תוארו על ידי איטוק ואח '. עבור Göttingen minipigs (BSA [m2] = (7.98 × BW [ק"ג]2/3)/100)17 ועל ידי Swindle et al. עבור חזירי Landrace (BSA [m2] = (7.34 × BW [ק"ג]0.656)/100)18.
    3. צנרור בעלי חיים, לשמור על הרדמה עם isoflurane (2% isoflurane, 2 L / min חמצן). גודל הצינור האנדוטרצ'יאלי תלוי במאפיינים האנטומיים האינדיבידואליים של כל בעל חיים והוא נע בין 6.0 ל-7.5 מ"מ.
    4. Cannulate את וריד האוזן עם מחט 18 G ולהתחיל הממשל של 5% גלוקוז בתמיסת רינגר (1 L / hour).
  3. CMRI
    1. להעביר בעלי חיים למתקן CMRI ולנהל 0.4-0.5 מ"ג /ק"ג atracurium besylate i.v. Atracurium besylate הוא מרפה שרירים לא קוטבי ושלד המשמש כדי למנוע חפצי נשימה במהלך מדידות CMRI. התחל אוורור לחץ חיובי (תדירות 16/min, נפח 350 מ"ל, 25-30 מ"מ לחץ חיובי).
    2. מקם את החיות בתנוחה סופית. מניחים סלילים גמישים על החזה וסלילים 32 ערוצים ממוקמים במיטת CMRI. בצע MRI לבבי ללא ניגודיות עם סורק 1.5T, באמצעות סליל מערך בשלבים ומערכת אלקטרוקרדיוגרמה וקטורית (ECG) כדי להעריך את תפקוד הלב והמורפולוגיה (שבר פליטה (EF), תפוקת לב (CO), מידות תא וקיר). לרכוש תמונות MRI cine באמצעות בדיעבד אק"ג מגודר, מצב יציב ללא טכניקת MRI cine cine בציר קצר ותצוגות ציר ארוך של הלב באמצעות זמן הד 1.2 ms, 40 ms זמן חזרה, זווית היפוך 50 מעלות, שדה ראייה 300 מ"מ, עובי פרוסת 8 מ"מ, ולפחות 256x256 מטריצת תמונה.
    3. כימות אמצעי אחסון של חדרים שמאליים וימניים (LVEDV ו- RVEDV) ונפחי קצה-סיסטוליים (LVESV ו- RVESV), אמצעי אחסון של שבץ (LVSV ו- RVSV), EF-s (LVEF ו- RVEF) ומסות לפי לוחות פלומטריה ידניים של תמונות cine של צירים קצרים (מסה LVED) וסוף-סיסטולי (מסה קרוואנית). כימות השאיר נפח פנים על ידי מעקבים על שתי וארבעה תאים cine תמונות. תקן את אמצעי האחסון של המשפט השמאלי ל- BSA כדי לקבל נפח אסוציאלי שמאלי הכלול באינדקס לאזור פני הגוף (LAVi). להעריך את נוכחותה של בצקת ריאות על תמונות localizer.
    4. לחישוב מדד לב (CI) יש להשתמש ב-BSA ובתפוקת לב.
    5. לסיים את ההרדמה על ידי נסיגה של isoflurane. כאשר הנשימה הספונטנית חוזרת, לצנרר את החיה, להסיר i.v. קנולה ולהחזיר אותו לכלוב שלה.

2. רפואה מוקדמת, גישה לכלי הדם ו חסימת עורקים כליליים

  1. קדם-רפואה
    1. יום אחד לפני ההליך הכירורגי לנהל 500 מ ג של חומצה אצטיל סליצילית ו 300 מ ג של קלופידוגרל דרך הפה.
    2. החל משככי כאבים (meloxicam 0.4 מ"ג / קילוגרם משקל גוף) וקוקטייל אנטיביוטי (בנזילפניצילין-פרוקאין (24.8 מ"ג / מ"ל), בנזילפניצילין בנזטין (83.6 מ"ג/מ"ל), דיהידרוסטרפטומיצין-סולפט (156.3 מ"ג/מ"ל), 3 מ"ל/50 ק"ג משקל גוף) על ידי זריקות תוך שריריות ביום חסימת העורקים הכליליים.
    3. חזור על השלבים המתוארים בסעיפים 1.2.1-1.2.4.
    4. השתמש קנולה וריד האוזן להחלפת נוזלים ומינהל תרופות. לנהל 1g מגנזיום גופרתי לאורך כל ההליך באמצעות וריד האוזן כל 30 דקות כדי למנוע טכיקרדיה חדרית (VT) פרפור חדרים (VF).
  2. גישה לכלי דם
    1. מניחים את החיה על שולחן הניתוחים, מתקנים את הגפיים, ומחילים טריזים כדי לשתק את החיה בתנוחת supine.
    2. לחטא את האתר הכירורגי עם povidone-יוד. האתר הכירורגי נמצא סביב קיפול העור בין השריר גרסיליס ו sartorius.
    3. הסר את השיער באתר הכירורגי עם סכין גילוח.
    4. הנח אלקטרודות א.ק.ג במשולש של איינתיובן. משולש זה נוצר על ידי שתי הגפיים האחוריות והגפיים האחוריות השמאליות והאלקטרודות מונחות על גפיים.
    5. התחל אוורור לחץ חיובי (תדירות 16/min, נפח 350 מ"ל, 25-30 מ"מ לחץ חיובי).
    6. לבודד את האזור הכירורגי מחוטא עם וילון כירורגי.
    7. התקרבו לאזור הירך כמתואר בפירוט על ידי ק.ס. אטטרופ ואח '19. בקצרה, לעשות חתך אורך לעור בין שרירי gracilis ו sartorius. להפריד את הרקמה התת עורית fascia. לבודד את עורק הירך ולשים שני תפרים כירורגיים מתחתיו כדי לשלוט דימום.
    8. לנקב ולפתוח את עורק הירך עם מבוא 6F-ACT באמצעות טכניקת סלדינגר20,21.
    9. תתקן את הנדן לעור.
    10. השתמש בעורק לדגימת דם לניתוחים ביוכימיים נוספים.
    11. לנהל 5000 הפרין IU באמצעות נדן הירך כדי להבטיח קרישה נאותה ולמנוע פקקת במהלך ההתערבות הכירורגית. רידמיניסטר 2500 הפרין IU כל 60 דקות לאורך כל ההליך. בעלי החיים קיבלו בערך 370-440 פרין IU/kg במהלך כל ההתערבות.
    12. חבר חיישן לחץ לכלי הירך כדי לפקח על לחץ הדם העורקי לאורך כל ההתערבות הכירורגית.
    13. לכיול הלחץ מניחים את מערכת הקלטת הלחץ על רמת הלב של כל בעל חיים. לאחר הסרת בועות האוויר, כיול אפס הלחץ מבוצע כאשר העצירה המשולשת נפתחת לכיוון האוויר החופשי.
  3. חסימת עורקים כליליים, רפרופוזיה ומינהל תרופות תוך-קורוני
    1. שים לב כי התערבות זו צריכה להתבצע רק על ידי קרדיולוג התערבותי מיומן. דרך נדן הירך, להציג ולקדם את המדריך לקשת אב העורקים ולהציג את קטטר 5F המנחה על המדריך. ראשית, לקדם את guidewire להתקרב שורש העורקים atraumatically. בצע צנרור עמוק על ידי קטטר דק, 5F מנחה, כדי למנוע חסימה משמעותית של זרימת הדם.
    2. מקם את הפלואורוסקופ בתנוחה אנטרו-אחורית.
    3. ודא כי אין פקקת או בועת אוויר בתוך הקטטר עם שאיפה של לפחות 5 מ"ל של דם, נפח הקטטר, עם המזרק מחובר קטטר.
    4. חבר את החלק החיצוני של הקטטר למזרק מלא סוכן radiocontrast (iobitridol 1.1 מ"ל / 50 ק"ג משקל גוף).
    5. יש לדאוג כי המזרק מוחזק מוגבה כדי למנוע עירוי של בועות אוויר לתוך העורק הכלילי.
    6. כדי לבצע אנגיוגרפיה בסיסית, לצנרר בנפרד ולמלא עם סוכן ניגודיות באופן סלקטיבי את ostia של עורק כלילית ימנית ואת העורק הכלילי הראשי השמאלי. לפרטים טכניים נוספים, עיינו בספרי הלימוד לצנתור20,21.
    7. בצע BARI (לעקוף אנגיופלסטיקה Revascularization חקירה שריר הלב אינדקס סכנה) ניקוד לאחר אנגיוגרפיה בסיסית. ציון לכל עורקי הטרמינל (חלק סופני של החלק השמאלי הראשי היורד, היקף שמאלי ועורק כלילית ימנית, כמו גם לרמוס, אלכסונים, שוליים אטומים, ירידה אחורית וענפים אחוריים) מוקצה על פי אורכם וקליברם על פי קריטריונים ספציפיים22,23. ערך של 0 מייצג גודל כלי כמעט חסר משמעות. לעומת זאת, ערך של 3 מגדיר עורק גדול באורך של שני שלישים מהמרחק בין הבסיס לשיא הלב. אין לקחת בחשבון שוליים חדריים ימניים וענפי מחיצות עורקים יורדים אחוריים.
      1. חשב את הציון הסופי של BARI (% מהחדר השמאלי בסיכון) על-ידי חלוקת הערך הכולל מהעורק הקשור לאוטם על-ידי הערכים הכוללים של כל העורקים (איור 2A-D)המספקים את LV. בחר את אתר החסימה בעורק הכלילי השמאלי (LAD) כדי להשיג כ- 25-30% שריר הלב בסיכון כפי שהוערך על-ידי ניקוד BARI.
    8. הכנס את המדריך האנגיופלסטיקה הטראנס-לומינית (PTCA) המהורהרת דרך הקטטר המנחה. מקם אותו באופן ברור לאתר המתוכנן של החסימה תחת הדרכה פלואורוסקופית, ובדוק אנגיוגרפיה לסיבוכים פוטנציאליים (למשל, ניתוח כלילית, ניקוב).
    9. קבעו על פי הערכה חזותית את גודל הבלון האופטימלי בהתבסס על קוטר העורק הכלילי.
    10. מניחים את קטטר הבלון (קוטר בלון 2.5 מ"מ ואורך בלון 12 מ"מ) מעל המדריך PTCA ולקדם אותו למיקום המתוכנן.
    11. מלא את הבלון עם סוכן ניגוד ולבדוק את המיקום של קטטר בלון על ידי אנגיוגרפיה.
    12. לנפח את הבלון מתחת ללחץ הנומינלי (7-9 אטמוספרות) של הבלון כדי לפתח את המגע הרך בין הקיר הצדדי של הבלון לבין פני השטח של הכלי. מגע רך מוגדר כאינטראקציה של בלון בצד הקיר זה מספיק כדי לחסום את הכלי מבלי לגרום לפגיעה בקיר כלי השיט.
    13. אשר את החסימה (TIMI 0) עם אנגיוגרפיה על-ידי הדמיה של עצירת זרימת הניגודיות. שמור במקום את המדריך ואת הבלון ולמשוך בחזרה את הקטטר המנחה מן האוסטיום של העורק הכלילי, כדי למנוע איסכמיה לב מפוזרת.
    14. מכשירי קלטת לווילון הכירורגי כדי למנוע נקע של הבלון התוך-קורוני.
    15. רשום ותיעד את סימן ה-ECG של חסימה באמצעות העלאת ST.
    16. במהלך כל ההליך, בזהירות לפקח על סימנים חיוניים, קצב הלב (HR), לחץ דם, טמפרטורת הליבה באמצעות בדיקה רקטלית, אוקסימטריה דופק.
    17. מכסים את החיה עם מכשיר חימום כדי לשמור על טמפרטורת הליבה.
    18. לנהל 1 גרם של מגנזיום גופרתי כמו בולוס תוך ורידי אם VT ללא דופק או VF מתרחשת ולהתחיל לחיצות בחזה בתדירות של 100/min מיד. יש למרוח הלם DC 300J ולידוקאין 2-4 מ"ג/ק"ג כבולוס תוך ורידי. לטפל אסוסטול עם 1 מ"ג של אפינפרין כמו בולוס תוך ורידי.
    19. בדוק את לחץ הבלון כל 30 דקות במהלך החסימה כלילית. אם יש ירידה של יותר מ- 0.5 בר בלחץ בלון, הגדר אותו בחזרה לערכים ראשוניים.
    20. בצע אנגיוגרפיה ממש לפני סוף החסימה כלילית כדי לאמת את מיקום הבלון המתוחזק והיעדר זרימה באתר החסימה.
    21. ניהול 2500 IU של הפרין ו 1 גרם של מגנזיום גופרתי intracoronarily כמו בולוס איטי כדי למנוע פקקת והפרעות קצב.
    22. ליזום את reperfusion עם דפלציה בלון לאחר 120 דקות איסכמיה לב ב Göttingen minipigs ואחרי 90 דקות חזירי Landrace.
    23. הסר את הבלון המנוטרל.
    24. אשר את ההצלחה של רפרופוזיה עם אנגיוגרפיה כלילית כדי להדגים את זרימת הדם בחלק הדיסטלי של הכלי הכלילית (TIMI 3).

3. מינהל תרופות תוך-קורוני

  1. כדי למנוע תסחיף עורקים כליליים, מלאו את המיקרו-קתאטר הטיפולי במזעור מלוחים.
  2. הנח את המיקרו-קתטר מעל המדריך של PTCA.
  3. להתקדם ולאשר את המיקום של המיקרו-קתטר. קצה המיקרוקתטר צריך להיות ממוקם ברמת החסימה.
  4. הסר את המדריך של PTCA.
  5. חבר את microcatheter עם משאבת זלוף וליזום ניהול תוך-קורוני 5 דקות לאחר ייזום של reperfusion.
  6. לאחר מתן התרופה להסיר את microcatheter.
  7. הפוך אנגיוגרפיה שליטה כדי לבדוק את זרימת 3 כיתה TIMI של הניגוד ולא לכלול התערבות זו הובילה emboli אוויר או ניתוח כלילית.

4. סגירת פצעים וטיפול לאחר הניתוח

  1. מוציאים את נדן העורקים וקושרים את עורק הירך קרוב לאתר הניקוב. חסימה של עורק הירך בעקבות ההתערבות האנגיוגרפית אין השפעה על תפקוד הרגליים בחזירים כפי שהוערך על ידי תצפיות וטרינריות יומיות.
  2. סגור את הפצע באמצעות תפרים רציפים ולהחיל ציפוי חיטוי.
  3. לסיים את ההרדמה על ידי נסיגה של isoflurane.
  4. לעקוב מקרוב אחר בעלי החיים בתקופת ההחלמה ולבדוק אותם כל 12 שעות עד יום הניתוח 3, ואז כל 24 שעות עד סוף המחקר. יש להקדיש תשומת לב מיוחדת להתנהגות אכילה ושתייה, עייפות, סימני זיהום, מצב כואב, שינוי משקל, ניידות ומצב בריאותי כללי. בעקבות ההליך הועברו בעלי החיים עם טנדר בקבוצות קטנות בכלובים כדי למנוע לחץ מיותר בתקופה שלאחר הניתוח המוקדמת.

5. לאחר MI CMRI והערכתו

  1. הרדמה
    1. השתמש בפרוטוקול ההרדמה המתואר בסעיפים 1.2.1-1.2.4.
  2. CMRI
    1. לנהל בולוס תוך ורידי של סוכן ניגודיות, 0.2 mmol / kg gadobutrol בקצב של 4 מ"ל / שניות, באמצעות מזרק ידני.
    2. צלם תמונות שיפור מושהות באמצעות רצף היפוך שהוכן על-ידי שחזור, ההד ההדרגתי. השג תמונות צירים קצרים ותמונות ציר ארוך 10 עד 15 דקות לאחר ניהול סוכן הניגודיות.
    3. הערכה
      1. בצע הערכה באמצעות תוכנת ניתוח MASS 7.6 בצורה עיוורת.
      2. הערכת עובי הקיר הסגמנטלי של סוף הדיאסטולי בתמונות cine קצרות ציר.
      3. מדוד תעתיק צלקת על תמונות שיפור מושהות בציר קצר.
      4. לכמת נמק שריר הלב עם planimetry ידנית על תמונות שיפור ניגודיות מושהה על ידי התוויית שריר הלב עם עוצמת אות 5 SDs מעל האות הממוצע המתקבל מרחוק, לא אוטם שריר הלב.

6. סטטיסטיקה

  1. הצג נתונים רציפים כשגיאת תקן ± ממוצעת.
  2. להעריך את ההבדל באמצעות אמצעים חוזרים ונשנים ANOVA ואחריו מבחן LSD של פישר ב minipigs גטינגן מזווג t-test בחזירי Landrace. ציוני BARI הושוו לשיעורי מבחן ותמותה לא משודרגים עם מבחן צ'י-ריבוע בין שני הגזעים.
  3. השתמש במנסרה של GraphPad להערכת נתונים. ההבדלים נטען להיות מובהק סטטיסטית אם p<0.05.

תוצאות

התמותה

מתוך 13 מיניפיגים של גטינגן שנחשפו לאוטם שריר הלב, שני בעלי חיים מתו (15.4% תמותה), אחד בתקופה האיסכמית עקב VT בלתי הפיך ואחד בשל אסטיסול ברפרופורציה. במיני-פיגים של גטינגן, חיה אחת עברה החייאה מוצלחת במהלך איסכמיה לבבית. שיעור התמותה היה 0% אצל חזירי לנדרייס, עשרה מתוך עשרה בעלי חיים שרדו, שניים מהם נזקקו להחייאה עקב VF בתקופה האיסכמית. התמותה לא הייתה שונה באופן משמעותי בין שני הגזעים.

מידות צלקת שריר הלב היו דומות בין שני הגזעים

כדי למדוד את מידת צלקת הלב כתוצאה של MI, CMRI בוצע. גודל הצלקות וציוני BARI היו דומים בין שני הגזעים שנמדדו בחודש השני למעקב בחזירי לנדרייס, ובחודש השלישי והשישי במיני-פיגים של גטינגן(איור 2E,F). לא נצפו הבדלים כאשר גדלי צלקת היו קשורים ציוני BARI חזירים Landrace ב 2 חודשים (0.55 ± 0.1) וב Göttingen minipigs ב 3 חודשים ו 6 חודשים בהתאמה (0.75 ± 0.12 ו 0.57 ± 0.08). הצלקות היו מקומיות בקטעים הצדדיים, הanteroseptal, septal, anteroapical ו apical של הלב בשני הגזעים. הקיר לרוחב הושפע רק במיניפיגים של גטינגן. אוטם החדר הימני היה זניח, השפיע רק על חיה אחת מתוך 11 ששרדו את גטינגן מיניפיג ואחד מתוך עשרה חזירי לנדרס (2.11 ± 2.11 לעומת 0.97 ± 0.97).

עלייה במסת החדר השמאלי היה בולט יותר חזירי Landrace במהלך מעקב

קצב צמיחת הלב נמדד על ידי CMRI. מסה LVED במיניפיגים של גטינגן עלתה רק במתינות (8%) בגיל 6 חודשים (איור 3A). לעומת זאת, בחזירי לנדרייס עלתה מסת LVED בכמעט 100% בחודשיים (איור 3B).

שבר פליטה חדרי שמאלי ירד רק במיני-פיגים של גטינגן

LVEF, כמו הפרמטר הנפוץ ביותר של הפונקציה הסיסטולית חדרית שמאל, נמדד על ידי CMRI. ה-MI הביא לירידה משמעותית ב-LVEF במיני-פיגים בגיל 3 חודשים ו-6 חודשים (איור 4A). אצל חזירי לנדאס, LVEF לא השתנתה לאחר חודשיים (איור 4B).

LVESV ו- LVEDV שלאחר האוטם גדלו באופן משמעותי בשני הגזעים (טבלה 1). LVESV עלה ב-69% וב-80% ב-Göttingen minipigs לאחר 3 ו-6 חודשים, בהתאמה, וב-80% בחזירי לנדרייס לאחר חודשיים. LVEDV הראה עלייה של 28% לאחר 3 חודשים ועלייה של 42% לאחר 6 חודשים במיניפיגים של גטינגן ועלייה של 82% בחזירי לנדרייס לאחר חודשיים. LVSV של חזירי Landrace גדל ב 85% ב 2 חודשים ו LVSV של מיניפיגים Göttingen לא גדל באופן משמעותי אפילו ב 6 חודשים.

נפח פרוזדורי שמאלי צמוד לאזור פני הגוף גדל רק במיני-פיגים של גטינגן, אך שני הגזעים פיתחו בצקת ריאות בעקבות אוטם שריר הלב

על מנת לבחון עוד יותר סימנים של HF, ביצענו מדידה של נפח הפטרון השמאלי צמוד לאזור פני הגוף (LAVi). LAVi עלתה ב-34% במיני-פיגים של גטינגן לאחר 6 חודשים (איור 5A)ולא השתנתה באופן משמעותי בחזירי לנדרייס לאחר חודשיים (איור 5B). תמונות מייצגות מציגות את המעקב אחר האטריה השמאלית (איור 5C-D). יתר על כן, נוכחות או היעדר בצקת ריאות הוערך על ידי CMRI על תמונות לוקליזציה (איור 5E). בצקת ריאות נצפתה בשני הגזעים כתוצאה של פיצוי לב. עשרה מתוך אחד עשר מיניפיגים של גטינגן ותשעה מתוך עשרה חזירי לנדרייס הראו סימנים ברורים לבצקת ריאות.

עלייה במשקל הגוף היה בולט יותר חזירי Landrace במהלך מעקב

ב Göttingen minipigs עלייה במשקל הגוף היה רק 8% לאחר 3 חודשים ו 30% לאחר 6 חודשים (איור 6A), ואילו משקל לב מוגבר לווה על ידי עלייה של כמעט 100% במשקל הגוף חזירי Landrace ב 2 חודשים (איור 6B).

מגמות בפרמטרים תפקודיים לבביים שונות בין מיניפיגים של גטינגן לבין חזירי לנדרייס

חסימת עורקים כליליים הובילה לירידה כמעט משמעותית בלחץ העורקים הממוצע (MAP) במיני-פיגים של גטינגן (57.9 ± 3.98 מ"מ כספית לעומת 3.98 מ"מ כספית לעומת 3.98 מ"מ כספית לעומת 3.98 מ"מ כספית לעומת 3.98 מ"מ כספית. 49.89 ± 1.24 מ"מ)וירדו משמעותית בחזירי לנדאצה (65.4 ± 5.97 מ"מ-ח"ג לעומת 45.47 ± 4.79* מ"מ היג) בשלב ההפרעה המוקדם בהשוואה לערכי הבסיס (אוטם מקדים).

CI הוא אינדיקטור אמין של ביצועי לב, אשר מתייחס שמאל חדרית CO ל BSA. במיני-פיגים של גטינגן, CI לא השתנתה בנקודות הזמן הנמדדות (איור 7A),ואילו אצל חזירי לנדרייס התגלתה נטייה לעלייה במדד הלב (איור 7B).

משאבי אנוש של Göttingen minipigs גדל באופן משמעותי ב 3 (20%) ו-6 חודשים (22%) לאחר MI בהשוואה לערכי תוכנית בסיסית (טבלה 2).

לעומת זאת, משאבי האנוש של חזירי Landrace לא השתנו באופן משמעותי במהלך תקופת המעקב. ב Göttingen minipigs CO הראה עלייה משמעותית של 32% רק ב 6 חודשים של מעקב, ואילו CO הוגדלה על ידי 76% חזירי Landrace לאחר 2 חודשים עקב עלייה משמעותית LVSV (טבלה 2). BSA גדל באופן משמעותי בשני הגזעים בנקודות הזמן הנמדדות (טבלה 2). BSA עלה ב-4% וב-19% ב-Göttingen minipigs לאחר 3 ו-6 חודשים, בהתאמה, וב-54% בחזירי לנדרייס לאחר חודשיים.

עלייה בפרמטרים morphofunctional חדרית הימנית נצפו הן מיניפיגים גטינגן חזירים Landrace

MI השפיע לא רק על תפקוד החדר השמאלי, אלא גם הביא לעלייה משמעותית של RVEF בשני הגזעים (איור 8) שנמדד על ידי CMRI, למרות גודל הצלקת הימנית הזניחה. מסה RVED גדל חזירים Landrace בלבד (טבלה 3).

RVESV לא השתנה במהלך המעקב באף אחד מהגזעים. RVEDV גדל באופן משמעותי על ידי 37% רק חזירי Landrace (לוח 3). בעוד RVSV ב מיניפיגים Göttingen גדל באופן משמעותי על ידי 23% רק לאחר 6 חודשים, חזירי Landrace עלייה משמעותית 80% RVSV נצפתה ב 2 חודשים.

figure-results-6632
איור 2. הערכת שריר הלב בסיכון בהתבסס על BARI (לעקוף אנגיופלסטיקה Revascularization חקירה שריר הלב מדד הסיכון) ציון (A-D). הערך הכולל של העורק הקשור לאוטם מחולק בסכום של 3 הערכים הכוללים של כל עורק כלילי, העורק הכלילי הימני (RCA), העורק הכלילי ההיקפי השמאלי (LCX), ואת העורק הכלילי היורד השמאלי (LAD). גודל צלקת חדרית שמאלית במיניפיגים של גטינגן וחזירי לנדרייס הנמדדים על ידי הדמיית תהודה מגנטית לבבית (E). גודל הצלקת מוצג כיחס של מסה של אוטם למסה של החדר השמאלי בסוף diastole (LVED). ציוני BARI במיניפיגים של גטינגן וחזירי לנדרייס נמדדו לפני חסימה כלילית (F). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-7558
איור 3. מסת קצה-דיאסטולית חדרית שמאלית (LVED) (g) של מיניפיגים של גטינגן (A) וחזירי לנדרייס (B) הנמדדים על ידי הדמיית תהודה מגנטית לבבית. *p<0.05 לעומת בסיס מקביל (מדדים חוזרים ונשנים ANOVA לכיוון אחד ואחריו מבחן LSD של פישר במיניפיגים של גטינגן; זיווג t-test בחזירי Landrace). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-8168
איור 4. שבר פליטה של חדר שמאלי (LV) (%) של מיניפיגים של גטינגן (A) וחזירי לנדאס (B) הנמדדים על ידי הדמיית תהודה מגנטית לבבית. *p<0.05 לעומת בסיס מקביל (מדדים חוזרים ונשנים ANOVA לכיוון אחד ואחריו מבחן LSD של פישר במיניפיגים של גטינגן; זיווג t-test בחזירי Landrace). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

פרמטר נמדדמיניפיגים של גטינגןחזירי לנדראס
בסיסית3 חודשים6 חודשיםבסיסיתחודשיים
LVESV [מ"ל]25.77 ± 1.7343.65 ± 4.53*46.28 ± 4.35*54.59 ± 2.0098.26 ± 8.60*
LVEDV [מ"ל]55.49 ± 3.1471.08 ± 5.25*78.81 ± 5.46*93.99 ± 3.85171.20 ± 11.50*
LVSV [מ"ל]29.71 ± 1.6527.44 ± 1.9732.52 ± 2.3739.40 ± 3.0572.94 ± 3.99*

שולחן 1. נפח קצה-סיסטולי חדרי שמאלי (LVESV), נפח קצה-דיאסטולי שמאלי (LVEDV), ונפח שבץ חדרי שמאלי (LVSV) בנקודות הזמן הנמדדות בחזירי לנדרייס ובמיני-פיגים של גטינגן. *p<0.05 לעומת בסיס מקביל (מדדים חוזרים ונשנים ANOVA לכיוון אחד ואחריו מבחן LSD של פישר במיניפיגים של גטינגן; זיווג t-test בחזירי Landrace).

figure-results-10170
איור 5. נפח קוטל שמאלי צמוד לאזור פני הגוף (LAVi) ב- mL/m2 במיני-פיגים של גטינגן (A) וחזירי לנדרייס (B) הנמדדים על ידי הדמיית תהודה מגנטית לבבית. תמונות מייצגות של כרכים בין בתי ספר שמאליים, מעקבים נעשו על שתיים ( C) וארבעה תאים (D) cine תמונות. החצים הלבנים מראים את נוכחותה של בצקת ריאות בתמונת ה-localizer הייצוגית (E). *p<0.05 לעומת בסיס מתאים (מבחן t מזווג במיני-פיגים של גטינגן וחזירי לנדרייס). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-10949
איור 6. משקל גוף (ק"ג) של מיניפיגים של גטינגן (A) וחזירי לנדרייס (B). *p<0.05 לעומת בסיס מקביל (מדדים חוזרים ונשנים ANOVA לכיוון אחד ואחריו מבחן LSD של פישר במיניפיגים של גטינגן; זיווג t-test בחזירי Landrace). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-11495
איור 7. מדדי לב חדריים שמאליים (LV) (L/min/m2)של מיניפיגים של גטינגן (A) וחזירי לנדרייס (B). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

פרמטר נמדדמיניפיגים של גטינגןחזירי לנדראס
בסיסית3 חודשים6 חודשיםבסיסיתחודשיים
משאבי אנוש [1/min]79.64 ± 4.0395.55 ± 5.34*97.00 ± 4.46*93.44 ± 2.7388.00 ± 2.52
CO [L/min]2.37 ± 0.162.58 ± 0.203.12 ± 0.24*3.65 ± 0.256.41 ± 0.39*
BSA [m2]0.70 ± 0.010.73 ± 0.01*0.83 ± 0.03*0.70 ± 0.011.08 ± 0.03*

שולחן 2. קצב לב (HR), תפוקת לב (CO), ושטח פני הגוף (BSA) של מיניפיגים של גטינגן וחזירי לנדרייס. *p<0.05 לעומת בסיס מקביל (מדדים חוזרים ונשנים ANOVA לכיוון אחד ואחריו מבחן LSD של פישר במיניפיגים של גטינגן; זיווג t-test בחזירי Landrace).

figure-results-13287
איור 8. שברי פליטה של חדר ימני (RV) (%) של מיניפיגים של גטינגן (A) וחזירי לנדרייס (B). *p<0.05 לעומת בסיס מקביל (מדדים חוזרים ונשנים ANOVA לכיוון אחד ואחריו מבחן LSD של פישר במיניפיגים של גטינגן; זיווג t-test בחזירי Landrace). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

פרמטר נמדדמיניפיגים של גטינגןחזירי לנדראס
בסיסית3 חודשים6 חודשיםבסיסיתחודשיים
מסת קרוואנים [g]8.64 ± 0.688.98 ± 0.767.94 ± 0.7716.49 ± 0.9023.61 ± 1.40*
RVESV [מ"ל]18.27 ± 1.4716.91 ± 1.8014.57 ± 1.0243.59 ± 3.6842.65 ± 2.37
קרוואן [מ"ל]44.16 ± 2.6142.14 ± 2.8346.27 ± 3.4583.03 ± 3.42113.72 ± 5.12*
קרוואנים [מ"ל]25.82 ± 1.7225.25 ± 1.6731.71 ± 2.99*39.44 ± 3.5271.06 ± 3.38*

טבלה 3. מסת קצה דיאסטולית חדרית ימנית (RVED), נפח סיסטוק חדרי ימני (RVESV), נפח דיאסטולי קצה חדרי ימני (RVEDV), ונפח שבץ חדרי ימני (RVSV) במיני-פיגים של גטינגן וחזירי לנדאס. *p<0.05 לעומת בסיס מקביל (מדדים חוזרים ונשנים ANOVA לכיוון אחד ואחריו מבחן LSD של פישר במיניפיגים של גטינגן; זיווג t-test בחזירי Landrace).

Discussion

כאן תיארנו פרוטוקול מפורט המדגיש את השלבים הקריטיים של טכניקה של אינדוקציה של MI חריפה והערכה של HF שלאחר MI במודל חזה סגור של מיניפיגים בוגרים של גטינגן. תיארנו גם את השיטה של מינהל תרופות תוך-קורוני, ניקוד BARI, ודיווחנו על שינויים במורפו-פונקציונליות של חדרים על ימין ועל שמאל במודל HF מתורגמי שלאחר MI. זהו האפיון הראשון של HF פוסט MI ב Göttingen ממזער בהשוואה חזירי Landrace, מראה כי מודל Göttingen למזער משקף פרמטרים שלאחר MI HF דומה לבני אדם. אנו מסיקים כי מודל מיניפיג Göttingen עדיף על חזיר Landrace כדי לעקוב אחר הפיתוח של לאחר MI HF. מודלים חזיר רלוונטי קלינית של HF שלאחר MI הם תנאים מוקדמים למחקרים הוכחת הרעיון הסופי לפני הכניסה לניסויים קליניים ברוב התרופות הקרדיווסקולריות ופיתוח מכשירים רפואיים פרויקטים6,7,12. אכן, מודלים חזיר דומים לבני אדם באנטומיה, פיזיולוגיה, תכונות ביוכימיות בפרט בתחום המחקר MI כפי שהם מפתחים אוטמים טרנס-ציוריים בשל היעדר זלוף בטחונות14. לכן, מודלים חזיר יכול לשמש מודלים לניתוח של טיפולים cardioprotective ואת המנגנונים שלהם24,25,26,27,28,29.

כאן מצאנו שלמרות גודל הצלקות השווה, שיעורי התמותה, וציוני BARI בשני הגזעים, תפקוד לקוי של החדר השמאלי המאופיין בירידה ב- LVEF נצפתה רק במיני-פיגים של גטינגן. כאן ראינו 15.4% תמותה חריפה במיניפיגים של גטינגן וללא תמותה בתקופת המעקב, האחרון דומה לזה במחקרים קליניים. ואכן, מטא-אנליזה ברמת המטופל של 10 ניסויים קליניים אקראיים מצאה כי שיעור התמותה של קפלן-מאייר לשנה אחת היה נמוך עד כדי 2.2% בעקבות אוטם שריר הלב30. גודלי צלקת שדווחו כאן דומים לאלה בניסויים קליניים. בניסויים קליניים שבוצעו על ידי Lonborg et al ו- Stone et al בחולים ששרדו אוטם שריר הלב בגובה ST גדלי הצלקת החציוניים, שנמדדו כאחוז ממסת שריר הלב בחדר השמאלי היו 9.5% ו -17.9% בהתאמה30,31. יתר על כן, גודל הצלקות במחקר הנוכחי תואם את אלה שדווחו בפרסומים קודמים ב- Göttingen minipigs (12-25%)32,33,34,35,36,37 ובחזירי לנדרייס (14-18%)38,39,40. הממצא הנוכחי על בסיס LVEF ב חזיר Landrace הוא על פי נתונים שדווחו על ידי אחרים חזיר גדול13,41,42. ערכים אלה ב החזירים הגדולים קטנים יותר בהשוואה לטווחי התייחסות LVEF אנושי בריא (58-61%)43 וערכי קו בסיס (אוטם מראש) במיני-פיגים של Göttingen (55-73%)33,44,45. עם זאת, ראוי לציין כי רק הנתונים שלאחר אוטם או שינויים דלתא של LVEF מדווחים ברוב הפרסומים46,47,48,49,50. בהתאם לתוצאות הנוכחיות, מחקרים קודמים של HF שלאחר MI המושרה על ידי 45 עד 90 דקות חסימת LAD ואחריו רפרופוזיה או על ידי חסימת LAD קבועה הוכיחו או אין הפחתה או הפחתה צנועה של LVEF ב Landrace או חזיר יורקשייר לאחר 4-6 שבועות מעקב לעומת בסיסי (אוטם מראש) LVEF51,52,53. עם זאת, Schuleri et al. השווה פרמטרים morphofunctional בין Göttingen minipigs ו חזיר יורקשייר ומצא כי שני הגזעים הראו ירידה של LVEF 8 שבועות לאחר אינדוקציה של MI על ידי 120 עד 150 דקות LAD חסימה-reperfusion; עם זאת, ערכי LVEF בסיסיים ב החזיר יורקשייר לא דווחו54. בניסויים אחרים נקבה Dalland Landrace חזירים לאחר MI שיפוץ שלילי היה המושרה על ידי 90 דקות חסימת LAD, עם זאת, LVEF לא דווח לאחר 4 שבועות של מעקב55. בניגוד לממצאים שלנו, במחקר של דה יונג ואח ', LVEF ירד במידה ניכרת חזירי Landrace נתון לחסימת LAD חזה פתוח ואחריו מעקב של 12 שבועות56. הבדל זה ניתן לייחס לתקופה איסכמית ארוכה משמעותית (150 דקות), אשר הביא גודל אוטם גדול יותר (23.4 ± 2.1% של LV). במקום אחר, חסימה של 120 דקות בחזה סגור של עורקים כליליים עקיפה שמאלית (LCX) בחזירי Landrace הגרמניים הובילה לירידה משמעותית ב- LVEF לאחר שמונה שבועות של רפרושופ, מה שמרמז כי המיקום השונה של MI עשוי להשפיע גם על תפקוד החדר השמאלי העולמי57. הממצאים הנוכחיים שלנו עולים בקנה אחד עם אחרים המראים ירידה משמעותית ב- LVEF ב- HF שלאחר MI ב- Göttingen minipigs לאחר מעקב ארוך טווח33,44,45.

ההפחתה של LVEF ב Göttingen minipigs בעקבות MI עולה בקנה אחד עם נתונים קליניים המראים תפקוד לקוי של הלב כתוצאה של שיפוץ חדרי בחולים לאחר AMI58. לסיכום, Göttingen minipigs טוב יותר לחקות את התנאים האנושיים, מאז LVEF טרום אוטם, גודל צלקת, LVEF שלאחר אוטם, ותמותה כולם דומים לפרמטרים אלה נמצאו בבני אדם.

כאן ראינו עלייה של 8% במסת LVED לאחר שישה חודשים במיניפיגים של גטינגן וגבוה משמעותית (97%) עלייה בגושי LVED בחזירי Landrace לאחר חודשיים. נתונים דומים דווחו על ידי Schuleri et al. בחזירי יורקשייר, שם נצפתה עלייה של 40% במשקל הלב לאחר חודשיים. לעומת זאת, בניסויים אחרים של חזה סגור שלאחר MI HF ב Göttingen minipigs אין שינויים משמעותיים בגושים חדריים שמאל נצפו33,44. לכן, ניתן לייחס הבדלים בין שני הגזעים לגבי LVEF לקצב גידול לב אינטנסיבי בחזירי לנדאיס ובכך לשנות את שיפוץ הלב.

בהגדרות קליניות, מלבד LVEF, נפח החדר השמאלי מספק תובנה חשובה לתוך פרוגנוזה ארוכת טווח ושיעור התמותה בחולים שלאחר MI59. LVESV הוא הקובע העיקרי של תמותה מוקדמת ומאוחרת בחולים לאחר AMI60,61. כאן הראינו כי נפח החדר מוערך על ידי CMRI גדל באופן משמעותי בשני הגזעים. לאחר MI שיפוץ המושרה עלייה בולטת יותר LVESV מאשר ב LVEDV ב minipigs Göttingen, בעוד הן LVESV ו LVEDV הוגדלו בשיעור דומה חזירים Landrace. כתוצאה מכך, שבר פליטה חדרי שמאלי (LVEF) ירד באופן משמעותי ב 3 ו 6 חודשים רק ב minipigs Göttingen אבל לא חזירים Landrace לאחר 2 חודשים. תוצאות אלה חייבות להתפרש בזהירות חזירי Landrace, שם LVESV מוגברת, LVEDV, ו LVSV (מחושב כמו ההבדל בין LVESV ו LVEDV) נוטים יותר הקשורים לעלייה אינטנסיבית במסת לב. LVESV מוגברת ו LVEDV עולים בקנה אחד עם נתונים קליניים של חולים עם לאחר MI HF62,63,64. יתר על כן, שיפוץ חדרי שמאל שלילי הוגדר כעלייה של 15% או יותר ב LVEDV במחקרים קליניים65,66 ומצאנו כאן עלייה של 28% לאחר 3 חודשים ועלייה של 42% לאחר 6 חודשים ב LVEDV ב Göttingen minipigs מראה שיפוץ שלילי רלוונטי קלינית. בנוסף, כאן הראינו כי LAVi גדל רק במיניפיגים של גטינגן, אך לא בחזירי לנדראס. הגדלת נפח האשכים השמאלי הוא שינוי מבני מפתח נוסף בהקשר של HF והוא מנבא עצמאי של מוות ואשפוז HF בחולים ששרדו MI67.

תפקוד החדר הימני נחקר לעתים רחוקות בדגמי HF שלאחר MI. כאן מצאנו כי שבר פליטה חדרית נכונה גדל בשני הגזעים. למרות RV היה כמעט לא מעורב נמק שריר הלב, RVEF גדל באופן משמעותי בשני הגזעים המציין עומס נפח RV ומכאן עזב תפקוד לקוי של החדר. באופן דומה, מחקר קליני שנרשם 2008 חולים עם HF סיסטולי כרוני הראה כי 733 חולים (37%) שייך לקטגוריית פונקציית חדר ימנית רגילה עם RVEF≥40%68.

לסיכום, הראינו כאן כי מודל מיניפיג Göttingen הבוגר עם מעקב ארוך טווח מחקה פרמטרים פונקציונליים ומורפולוגיים של HF פוסט MI דומה לבני אדם. הנתונים הנוכחיים שלנו מראים גם כי חזירי Landrace אינם מתאימים להערכת HF שלאחר MI בעיקר בשל ההשלכות של העלייה המהירה במשקל הגוף והלב שאינו מאפשר מעקב ארוך טווח ומפריע לפתולוגיה שלאחר MI HF. חזירי Landrace עשוי להיות מתאים להעריך את ההשלכות של אוטם שריר הלב חריפה. האפיון המקיף הנוכחי של מודלי האוטם בחזה הסגור ב Landrace ו Göttingen minipigs יהיה שימושי לבחירת מודלים בעלי חיים גדולים אופטימלית ללמוד לאחר MI HF ופיתוח טיפולים חדשניים נגד פתולוגיה זו.

מגבלות

הניסוי הנוכחי בוצע רק אצל נקבות חזירים, ולכן ההשפעה הפוטנציאלית של המינים השונים על HF שלאחר MI עדיין לא ידועה בדגמים אלה69. סימנים של HF הוערכו על ידי CMRI, על פי המלצות של קו מנחה האחרון על הרלוונטיות של הקפדה ושחזור במחקרים פרה-קוליניים על cardioprotection12. עם זאת, השימוש בזווית ממוקדת יותר של מטוסי הדמיה CMRI ורצף ממוקד יותר עלול לגרום להערכת טוב יותר של נפחי פרוזדוריים שמאליים, ובצקת ריאות. למרות שלא מדדנו סמנים ביולוגיים וסימנים היסטולוגיים של HF שלאחר MI במחקר זה, מודלים אלה מתאימים לניתוח של סמנים ביולוגיים כלשהם מאז הזמינות של דגימות פלזמה ורקמות. בשל הרגישות השונה של 2 גזעים לפגיעה איסכמיה / רפרופוזיה, משכי זמן שונים של חסימות כלילית נבחרו כאן שעשויים למרות להגביל את ההשוואה של 2 מודלים, עם זאת, על ידי גישה זו השגנו גודל אוטם דומה. זמן המעקב בשני הגזעים היה שונה כמו חזירי Landrace רק 2 חודשים מעקב זמן ניתן להשיג מסיבות טכניות, כלומר עלייה מהירה במשקל הגוף המציג מגבלה גדולה של מודל Landrace. מגבלה נוספת היא היעדר גורמי סיכון ותחלואה שונים ולכן המודלים הנוכחיים של בעלי חיים גדולים אינם מחקים לחלוטין את המצב הקליני מבחינת נוכחותם של גורמי סיכון מרובים, כולל תחלואה משותפת ותרופותיהם. עם זאת, כיום, אין מודלים בעלי חיים גדולים הוקמה עם מחלות רקע מרובות לשימוש שגרתי. מודלים גדולים אלה של בעלי חיים אינם יכולים להיות מופעלים לניתוח תמותה מסיבות אתיות של בעלי חיים והעלות הגבוהה של מחקרים אלה.

Disclosures

PF היא המייסדת והמנכ"לית של Pharmahungary Group, קבוצת חברות מו"פ

Acknowledgements

מחקר זה מומן על ידי Quark תרופות Inc שבו S.A. ו E.F. הם עובדים. מחקר זה נתמך גם על ידי משרד המחקר, הפיתוח והחדשנות הלאומי של הונגריה (NKFIA; NVKP-16-1-2016-0017 תוכנית הלב הלאומית), ועל ידי התכנית למצוינות מוסדית להשכלה גבוהה של משרד היכולות האנושיות בהונגריה, במסגרת התוכנית נושאית פיתוח טיפולי של אוניברסיטת Semmelweis. GB.B. נתמך על ידי EFOP-3.6.3-VEKOP-16-2017-00009 ו Gedeon ריכטר Plc. מלגת. Z.G. נתמך על ידי מלגות מחקר של ינוס בוליאי של האקדמיה ההונגרית למדעים ועל ידי ÚNKP-19-4 תוכנית מצוינות לאומית חדשה של משרד היכולות האנושיות.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Special Diet Services pig chow SDS, Witham, England, Hungarian distributor: Akronom Kft.
maintenance minipig diet no. 9023, Altromin
pregnant sow chowBonafarm-Bábolna Takarmány Plc
ketamine hydrochlorideRichter Pharma AG
xylazineMedicus Partner
atropineEgis
endotracheal tube Portex
isofluraneAbbot
anesthetic machineDräger Julian
18 G needleAnhul Kangda Medical Products Co. Ltd.
5% glucose in Ringer solutionB Braun
atracurium besylateGSK
cardiac magnetic resonance machineSiemens Healthineers Medical GmbH
acetyl salicylic acidBayer
clopidogrelZentiva
meloxicam (meloxidyl)Ceva
antibiotic coctail (tardomyocel) comp III.Norbrook
ear vein cannulaB Braun Melsungen AG
magnesium sulfateWörwag Pharma GmbH
povidone-iodineEgis
ECG electrodesLeonhard Lang GmbH
6F-ACT introducerSt Jude Medical
heparinTEVA
arterial pressure sensor and monitoring systemGE Healthcare
guidewire PT2MS Boston Scientific
5F guiding catheterMedtronic Launcher, 5F
fluoroscope, C-bowSiemens Medical GmbH
Iobitridol (Xenetix)Guerbet
balloon catheterBoston Scientific, EMERGE, 2.5mm x 12mm
heating device3M
rectal probeVatner Kft
pulse oxymeterComen medical
epinephrineRichter Gedeon Rt.
lidocaineEGIS
microcatheterCaravel ASAHI
defibrillatorGE Marquette Responder 1100
perfusion pump TSE system
antiseptic coatingFriedrich Huber aeronova GmbH&Co
gadobutrolBayer
MASS 7.6 analysis softwareMedis Medical Imaging Software, Leiden

References

  1. Gerber, Y., et al. A contemporary appraisal of the heart failure epidemic in Olmsted County, Minnesota 2000 to 2010. JAMA Internal Medicine. 175 (6), 996-1004 (2015).
  2. Gerber, Y., et al. Mortality Associated With Heart Failure After Myocardial Infarction: A Contemporary Community Perspective. Circulation: Heart Failure. 9 (1), e002460(2016).
  3. Paradies, V., Chan, M. H. H., Hausenloy, D. J. Primary Angioplasty: A Practical Guide. Watson, T. J., Ong, P. J. L., Tcheng, J. E. , Springer. 307-322 (2018).
  4. Ponikowski, P., et al. 2016 ESC Guidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failure: The Task Force for the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failure of the European Society of Cardiology (ESC)Developed with the special contribution of the Heart Failure Association (HFA) of the ESC. European Heart Journal. 37 (27), 2129-2200 (2016).
  5. Windecker, S., et al. ESC/EACTS Guidelines on myocardial revascularization: The Task Force on Myocardial Revascularization of the European Society of Cardiology (ESC) and the European Association for Cardio-Thoracic Surgery (EACTS)Developed with the special contribution of the European Association of Percutaneous Cardiovascular Interventions (EAPCI). European Heart Journal. 35 (37), 2541-2619 (2014).
  6. Hausenloy, D. J., et al. Novel targets and future strategies for acute cardioprotection: Position Paper of the European Society of Cardiology Working Group on Cellular Biology of the Heart. Cardiovascular Research. 113 (6), 564-585 (2017).
  7. Lecour, S., et al. ESC working group cellular biology of the heart: position paper: improving the preclinical assessment of novel cardioprotective therapies. Cardiovascular Research. 104 (3), 399-411 (2014).
  8. Ferdinandy, P., Hausenloy, D. J., Heusch, G., Baxter, G. F., Schulz, R. Interaction of risk factors, comorbidities, and comedications with ischemia/reperfusion injury and cardioprotection by preconditioning, postconditioning, and remote conditioning. Pharmacological Reviews. 66 (4), 1142-1174 (2014).
  9. Gaspar, A., et al. Randomized controlled trial of remote ischaemic conditioning in ST-elevation myocardial infarction as adjuvant to primary angioplasty (RIC-STEMI). Basic Research in Cardiology. 113 (3), 14(2018).
  10. Hausenloy, D. J., et al. Effect of remote ischaemic conditioning on clinical outcomes in patients with acute myocardial infarction (CONDI-2/ERIC-PPCI): a single-blind randomised controlled trial. Lancet. 394 (10207), 1415-1424 (2019).
  11. Heusch, G. Cardioprotection research must leave its comfort zone. European Heart Journal. 39 (36), 3393-3395 (2018).
  12. Bøtker, H. E., et al. Practical guidelines for rigor and reproducibility in preclinical and clinical studies on cardioprotection. Basic Research in Cardiology. 113 (5), 39(2018).
  13. McCall, F. C., et al. Myocardial infarction and intramyocardial injection models in swine. Nature Protocols. 7 (8), 1479-1496 (2012).
  14. Cesarovic, N., Lipiski, M., Falk, V., Emmert, M. Y. Animals in cardiovascular research. European Heart Journal. 41 (2), 200-203 (2020).
  15. Gutierrez, K., Dicks, N., Glanzner, W. G., Agellon, L. B., Bordignon, V. Efficacy of the porcine species in biomedical research. Frontiers in Genetics. 6, 293(2015).
  16. Lelovas, P. P., Kostomitsopoulos, N. G., Xanthos, T. T. A comparative anatomic and physiologic overview of the porcine heart. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 53 (5), 432-438 (2014).
  17. Itoh, T., et al. Body surface area measurement in laboratory miniature pigs using a computed tomography scanner. Journal of Toxicological Sciences. 41 (5), 637-644 (2016).
  18. Swindle, M. M., Makin, A., Herron, A. J., Clubb, F. J. Jr, Frazier, K. S. Swine as models in biomedical research and toxicology testing. Veterinary Pathology. 49 (2), 344-356 (2012).
  19. Ettrup, K. S., et al. Basic surgical techniques in the Gottingen minipig: intubation, bladder catheterization, femoral vessel catheterization, and transcardial perfusion. Journal of Visualized Experiments. (52), (2011).
  20. Pepine, C. J., Hill, J. A., Labert, C. R. Diagnostic and therapeutic cardiac catheterization. , Wilkins & Wilkins. (1998).
  21. Thompson, C. A. Textbook Of Cardiovascular Intervention. , Springer London LTD. (2016).
  22. Moral, S., et al. Quantification of myocardial area at risk: validation of coronary angiographic scores with cardiovascular magnetic resonance methods. Revista Española de Cardiología (English Edition). 65 (11), 1010-1017 (2012).
  23. Candell-Riera, J., et al. Culprit lesion and jeopardized myocardium: correlation between coronary angiography and single-photon emission computed tomography. Clinical Cardiology. 20 (4), 345-350 (1997).
  24. Baranyai, T., et al. In vivo MRI and ex vivo histological assessment of the cardioprotection induced by ischemic preconditioning, postconditioning and remote conditioning in a closed-chest porcine model of reperfused acute myocardial infarction: importance of microvasculature. Journal of Translational Medicine. 15 (1), 67(2017).
  25. Giricz, Z., et al. Swiprosin-1/EFhD-2 Expression in Cardiac Remodeling and Post-Infarct Repair: Effect of Ischemic Conditioning. International Journal of Molecular Sciences. 21 (9), (2020).
  26. Gyöngyösi, M., et al. Inhibition of interleukin-1beta convertase is associated with decrease of neointimal hyperplasia after coronary artery stenting in pigs. Molecular and Cellular Biochemistry. 249 (1-2), 39-43 (2003).
  27. Gyöngyösi, M., et al. Platelet activation and high tissue factor level predict acute stent thrombosis in pig coronary arteries: prothrombogenic response of drug-eluting or bare stent implantation within the first 24 hours. Thrombosis and Haemostasis. 96 (2), 202-209 (2006).
  28. Lukovic, D., et al. Transcriptional Alterations by Ischaemic Postconditioning in a Pig Infarction Model: Impact on Microvascular Protection. International Journal of Molecular Sciences. 20 (2), (2019).
  29. Pavo, N., et al. On-line visualization of ischemic burden during repetitive ischemia/reperfusion. JACC Cardiovascular Imaging. 7 (9), 956-958 (2014).
  30. Stone, G. W., et al. Relationship Between Infarct Size and Outcomes Following Primary PCI: Patient-Level Analysis From 10 Randomized Trials. Journal of the American College of Cardiology. 67 (14), 1674-1683 (2016).
  31. Lønborg, J., et al. Final infarct size measured by cardiovascular magnetic resonance in patients with ST elevation myocardial infarction predicts long-term clinical outcome: an observational study. European Heart Journal: Cardiovascular Imaging. 14 (4), 387-395 (2013).
  32. Karantalis, V., et al. Synergistic Effects of Combined Cell Therapy for Chronic Ischemic Cardiomyopathy. Journal of the American College of Cardiology. 66 (18), 1990-1999 (2015).
  33. Natsumeda, M., et al. A Combination of Allogeneic Stem Cells Promotes Cardiac Regeneration. Journal of the American College of Cardiology. 70 (20), 2504-2515 (2017).
  34. Quevedo, H. C., et al. Allogeneic mesenchymal stem cells restore cardiac function in chronic ischemic cardiomyopathy via trilineage differentiating capacity. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (33), 14022-14027 (2009).
  35. Schuleri, K. H., et al. CT for evaluation of myocardial cell therapy in heart failure: a comparison with CMR imaging. JACC: Cardiovascular Imaging. 4 (12), 1284-1293 (2011).
  36. Schuleri, K. H., et al. Cardiovascular magnetic resonance characterization of peri-infarct zone remodeling following myocardial infarction. Journal of Cardiovascular Magnetic Resonance. 14 (1), 24(2012).
  37. Schuleri, K. H., et al. Autologous mesenchymal stem cells produce reverse remodelling in chronic ischaemic cardiomyopathy. European Heart Journal. 30 (22), 2722-2732 (2009).
  38. Jansen of Lorkeers, S. J., et al. Xenotransplantation of Human Cardiomyocyte Progenitor Cells Does Not Improve Cardiac Function in a Porcine Model of Chronic Ischemic Heart Failure. Results from a Randomized, Blinded, Placebo Controlled Trial. PLoS One. 10 (12), e0143953(2015).
  39. van Hout, G. P., et al. Admittance-based pressure-volume loops versus gold standard cardiac magnetic resonance imaging in a porcine model of myocardial infarction. Physiological Report. 2 (4), e00287(2014).
  40. Thavapalachandran, S., et al. Platelet-derived growth factor-AB improves scar mechanics and vascularity after myocardial infarction. Science Translational Medicine. 12 (524), (2020).
  41. Pahlm, U. S., et al. Regional wall function before and after acute myocardial infarction; an experimental study in pigs. BMC Cardiovascular Disorders. 14, 118(2014).
  42. Baranyai, T., et al. In vivo MRI and ex vivo histological assessment of the cardioprotection induced by ischemic preconditioning, postconditioning and remote conditioning in a closed-chest porcine model of reperfused acute myocardial infarction: importance of microvasculature. Journal of Translational Medicine. 15 (1), 67(2017).
  43. Petersen, S. E., et al. Reference ranges for cardiac structure and function using cardiovascular magnetic resonance (CMR) in Caucasians from the UK Biobank population cohort. Journal of Cardiovascular Magnetic Resonance. 19 (1), 18(2017).
  44. Bellera, N., et al. Single intracoronary injection of encapsulated antagomir-92a promotes angiogenesis and prevents adverse infarct remodeling. Journal of the American Heart Association. 3 (5), e000946(2014).
  45. Sharp, T. E. 3rd, et al. Cortical Bone Stem Cell Therapy Preserves Cardiac Structure and Function After Myocardial Infarction. Circulation Research. 121 (11), 1263-1278 (2017).
  46. Crisostomo, V., et al. Delayed administration of allogeneic cardiac stem cell therapy for acute myocardial infarction could ameliorate adverse remodeling: experimental study in swine. Journal of Translational Medicine. 13, 156(2015).
  47. Uitterdijk, A., et al. VEGF165A microsphere therapy for myocardial infarction suppresses acute cytokine release and increases microvascular density but does not improve cardiac function. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 309 (3), H396-H406 (2015).
  48. Vilahur, G., et al. HMG-CoA reductase inhibition prior reperfusion improves reparative fibrosis post-myocardial infarction in a preclinical experimental model. International Journal of Cardiology. 175 (3), 528-538 (2014).
  49. Vilahur, G., et al. Reperfusion-triggered stress protein response in the myocardium is blocked by post-conditioning. Systems biology pathway analysis highlights the key role of the canonical aryl-hydrocarbon receptor pathway. European Heart Journal. 34 (27), 2082-2093 (2013).
  50. Zalewski, J., et al. Cyclosporine A reduces microvascular obstruction and preserves left ventricular function deterioration following myocardial ischemia and reperfusion. Basic Research in Cardiology. 110 (2), 18(2015).
  51. Galvez-Monton, C., et al. Comparison of two preclinical myocardial infarct models: coronary coil deployment versus surgical ligation. Journal of Translational Medicine. 12, 137(2014).
  52. Ghugre, N. R., Pop, M., Barry, J., Connelly, K. A., Wright, G. A. Quantitative magnetic resonance imaging can distinguish remodeling mechanisms after acute myocardial infarction based on the severity of ischemic insult. Magnetic Resonance in Medicine. 70 (4), 1095-1105 (2013).
  53. Sim, D. S., et al. Cardioprotective effect of fimasartan, a new angiotensin receptor blocker, in a porcine model of acute myocardial infarction. Journal of Korean Medical Science. 30 (1), 34-43 (2015).
  54. Schuleri, K. H., et al. The adult Gottingen minipig as a model for chronic heart failure after myocardial infarction: focus on cardiovascular imaging and regenerative therapies. Comparative Medicine. 58 (6), 568-579 (2008).
  55. Koudstaal, S., et al. Myocardial infarction and functional outcome assessment in pigs. Journal of Visualized Experiments. (86), (2014).
  56. de Jong, R., et al. Cardiac function in a long-term follow-up study of moderate and severe porcine model of chronic myocardial infarction. BioMed Research International. 2015, 209315(2015).
  57. Raake, P. W. J., et al. Comprehensive cardiac phenotyping in large animals: comparison of pressure-volume analysis and cardiac magnetic resonance imaging in pig post-myocardial infarction systolic heart failure. International Journal of Cardiovascular Imaging. 35 (9), 1691-1699 (2019).
  58. Burns, R. J., et al. The relationships of left ventricular ejection fraction, end-systolic volume index and infarct size to six-month mortality after hospital discharge following myocardial infarction treated by thrombolysis. Journal of the American College of Cardiology. 39 (1), 30-36 (2002).
  59. Cohn, J. N., Ferrari, R., Sharpe, N. Cardiac remodeling--concepts and clinical implications: a consensus paper from an international forum on cardiac remodeling. Behalf of an International Forum on Cardiac Remodeling. Journal of the American College of Cardiology. 35 (3), 569-582 (2000).
  60. Migrino, R. Q., et al. End-systolic volume index at 90 to 180 minutes into reperfusion therapy for acute myocardial infarction is a strong predictor of early and late mortality. The Global Utilization of Streptokinase and t-PA for Occluded Coronary Arteries (GUSTO)-I Angiographic Investigators. Circulation. 96 (1), 116-121 (1997).
  61. White, H. D., et al. Left ventricular end-systolic volume as the major determinant of survival after recovery from myocardial infarction. Circulation. 76 (1), 44-51 (1987).
  62. Asgeirsson, D., et al. Longitudinal shortening remains the principal component of left ventricular pumping in patients with chronic myocardial infarction even when the absolute atrioventricular plane displacement is decreased. BMC Cardiovascular Disorders. 17 (1), 208(2017).
  63. Pfeffer, M. A., Lamas, G. A., Vaughan, D. E., Parisi, A. F., Braunwald, E. Effect of captopril on progressive ventricular dilatation after anterior myocardial infarction. New England Journal of Medicine. 319 (2), 80-86 (1988).
  64. McKay, R. G., et al. Left ventricular remodeling after myocardial infarction: a corollary to infarct expansion. Circulation. 74 (4), 693-702 (1986).
  65. Cung, T. T., et al. Cyclosporine before PCI in Patients with Acute Myocardial Infarction. New England Journal of Medicine. 373 (11), 1021-1031 (2015).
  66. Savoye, C., et al. Left ventricular remodeling after anterior wall acute myocardial infarction in modern clinical practice (from the REmodelage VEntriculaire [REVE] study group). American Journal of Cardiology. 98 (9), 1144-1149 (2006).
  67. Meris, A., et al. Left atrial remodelling in patients with myocardial infarction complicated by heart failure, left ventricular dysfunction, or both: the VALIANT Echo study. European Heart Journal. 30 (1), 56-65 (2009).
  68. Meyer, P., et al. Effects of right ventricular ejection fraction on outcomes in chronic systolic heart failure. Circulation. 121 (2), 252-258 (2010).
  69. Perrino, C., et al. Improving Translational Research in Sex-specific Effects of Comorbidities and Risk Factors in Ischemic Heart Disease and Cardioprotection: Position Paper and Recommendations of the ESC Working Group on Cellular Biology of the Heart. Cardiovascular Research. , (2020).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

170sus scrofacardioprotectionBARI

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved