מודל נושא משקל ללא מתח של אוסטאונקרוזיס המושרה על ידי סטרואידים של ראש הירך בחולדות

Summary

הפרוטוקול מראה בניית מודל אימון פשוט וחסכוני לנשיאת משקל חולדה עבור אוסטאונקרוזיס המושרה על ידי סטרואידים של ראש הירך באמצעות סרט טיפולי אלסטי.

Abstract

בניגוד לבני אדם, חולדות הן חיות שהולכות על ארבע, בעוד בני אדם הם בעלי חיים דו-רגליים שעומדים, והירכיים נתונות ללחץ עצום בעת הליכה ועמידה. במודלים של נמק ראש הירך המושרה על ידי סטרואידים של חולדות, לעתים קרובות יש צורך לדמות את המאפיינים הביומכניים של הירך האנושית בלחץ גבוה יותר. יש חוקרים שמנסים לחקות את מצב לחץ הירך האנושי על ידי כך שהם גורמים לחולדות לשאת משקל מסוים, אבל קיבוע החפץ נושא המשקל על החולדה הוא קשה. חולדות יכולות להשתחרר בקלות מאימוביליזציה, והדבקת המשקל על החולדות עם סרט הדבקה תגרום לחולדות להיחנק או למות מחסימת מעיים. קבוצת המחקר שלנו השתמשה בטייפ טיפולי אלסטי כדי לבצע אימוביליזציה ללא מתח של חפצים נושאי משקל בחולדות, כך שהחולדות יוכלו לנשום בחופשיות ולא להתנתק מהאימוביליזציה בתנאי נשיאת משקל. בהשוואה למודל הרגיל של נמק ראש הירך הנגרם על ידי סטרואידים, מצאנו כי התערבות נושאת משקל זו יכולה להחמיר את התקדמות נמק ראש הירך בחולדות.

Introduction

מתן גלוקוקורטיקואידים הוא גורם הסיכון השכיח ביותר לאוסטאונקרוזיס לא טראומטי של ראש הירך (ONFH)¹. ראיות רבות מצביעות על כך שבנוסף לגלוקוקורטיקואידים, עומס הלחץ על מפרק הירך בחולים קשור גם להתרחשות של ONFH. גורמים כגון משקל גוף ועוצמת עבודה פיזית מוכרים כגורמי סיכון ל- ONFH². מחקרים קליניים רבים הדגימו קשר הדוק בין תנאי העמסת מפרק הירך לבין העיתוי והשכיחות של החלפת מפרק 3,4,5,6. לכן, קביעת מודל המשקף את הקשר בין נשיאת עומס לבין אוסטאונקרוזיס הנגרמת על ידי סטרואיד....

Protocol

הפרוטוקול תואם את ההנחיות האתיות שנקבעו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC) באוניברסיטת בייג'ינג לרפואה סינית, פרוטוקול מספר BUCM-4-2022062001-2109. הפרוטוקול משתמש בחולדות Sprague Dawley (SD) (SCXK(Jing)2019-0008), בנות 8-10 שבועות ובמשקל 200 גרם-250 גרם.

1. אימון הסתגלות

1. לחולדות אלבינו יש בדרך כלל טווח ראייה של פחות מ 60 ס"מ¹⁵. במהלך תהליך הדוגמנות, הניחו את החולדות בכלובים אטומים והרחיקו אותן ככל האפשר מחולדות שאינן מודלות (לפחות, חולדות אחרות צריכות להיות מחוץ לטווח הראייה המרבי של החולדות המודלות) כדי למנוע מהן לחוות לחץ טראומטי.

תוצאות

ניתוח היסטופתולוגיה
צביעת המטוקסילין ואוזין גילתה כי בקבוצת הביקורת ובקבוצת הביקורת+עומס, קנה הנשימה של העצם היה שלם ומסודר באופן קבוע. תאי אנדותל של כלי דם היו נוכחים בגומות עצם, והמורפולוגיה של התא נראתה שמנמנה. לעומת זאת, קבוצת המודל וקבוצת Model+Load הציגו קנה .......

Discussion

נכון לעכשיו, בעלי חיים שונים, כגון ארנבות²⁵, חולדות²⁶, עכברים²⁷, חזירים²⁸, פטמים²⁹, יענים⁸, ו emus³⁰ ניתן להשתמש כדי להקים מודלים של נמק ראש הירך. ביניהם, חולדות, עכברים וארנבות הם המין הנפו?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
15ml centrifuge tube	Corning,USA	430791
5mm stainless steel bead	Gelisen,China	5mm
Acetic acid	Merck KGaA, Germany	64-19-7
Anhydrous alcohol	Merck KGaA, Germany	64-17-5
clay	Mincai stationery,China	102
Coverslip	Servicebio,China	WMWD-1818
Flat pressure bottle 10ml	BEHNCKE,China	MD10ml
Formic acid	Macklin Biochemical ,China	64-18-6
HE staining kit	Solarbio,China	G1120
HistoCore AUTOCUT	Leica, Germany	149AUTO00C1
Kinesio tape (elastic therapeutic tape)	Fuluo medicine,China	CL1819
Lipopolysaccharide	Solarbio,China	L8880
Lipopolysaccharides (LPS)	Selleck,USA	S7850
Manual carbon dioxide euthanasia box	Yuyan,China	LC-500-S1
Methylprednisolone sodium succinate,MPS	AbMole,China	M25573
MicroCT	Hiscan,China	Hiscan VM Pro
Neutral resin	Beijing Zhongshan Golden Bridge Biotechnology l ,China	ZLI-9555
Paraffin	Servicebio,China	WGHB-319213129
Paraformaldehyde	Servicebio,China	G1101-500ML
Potassium chloride	Macklin Biochemical ,China	7447-40-7
Slide	Servicebio,China	WG6012
Treadmill for Rats and  mice	Litc Life Science,USA	801
Xylene	Macklin Biochemical ,China	1330-20-7