Sign In

אלקטרופורזה נימית (CE)

Overview

מקור: המעבדה של ד"ר .B ג'יל וטון - אוניברסיטת וירג'יניה

אלקטרופורזה נימית (CE) היא טכניקת הפרדה המפרידה בין מולקולות בשדה חשמלי בהתאם לגודל ומטען. CE מבוצע בצינור זכוכית קטן הנקרא נימי מלא בתמיסת אלקטרוליטים. ניתוחים מופרדים עקב הבדלים בניידות אלקטרופורטית, המשתנה עם מטען, צמיגות ממס, וגודל. אלקטרופורזה מסורתית בג'לים מוגבלת בכמות המתח שניתן ליישם מכיוון שאפקטי חימום ג'ול יהרסו את הג'ל ואת ההפרדה. נימים יש יחס שטח נפח גדול ובכך לפזרים חום טוב יותר. לכן, המתחים החלים לניסוי אלקטרופורזה נימי הם די גדולים, לעתים קרובות 10,000-20,000 V.

אלקטרופורזה נימית שימושית להפרדות בעלות ביצועים גבוהים. בהשוואה לכרומטוגרפיה נוזלית, הפרדות CE הן לעתים קרובות מהירות ויעילות יותר. עם זאת, אלקטרופורזה נימית פועלת בצורה הטובה ביותר להפריד מולקולות טעונות, אשר אינו מגבלה של כרומטוגרפיה נוזלית. ל- CE יש קיבולת שיא גדולה יותר מאשר כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC), כלומר ההפרדות יעילות יותר וניתן לזהות פסגות נוספות. המכשור יכול להיות פשוט מאוד. עם זאת, HPLC הוא רב-תכליתי יותר ושלבים נייחים וניידים רבים פותחו עבור סוגים שונים של מולקולות.

Procedure

1. הגדרת מכשור CE

  1. הפעל את כלי ה- CE ואת המחשב. באמצעות תוכנת המחשב, הפעל את מקור האור לניתוח UV כדי לאפשר לו להתחמם. לתוכנה מסוימת יש מחוון כאשר המנורה מוכנה לשימוש (סמל המנורה הופך צבע).
  2. הפוך קובץ שיטות. הגדר את הפרמטרים החשובים להפעלת CE. בניתוח זה הטמפרטורות של מחסנית ואחסון מדגם הם 35 °C (5 °F). אורך הגל לגילוי UV הוא 214 ננומטר.
  3. כתוב תוכנית זמן. התוכנית מורכבת בדרך כלל של שלבי שטיפה (כדי לנקות את נימי לפני הניתוח), צעדי הזרקה, ולאחר מכן צעד אלקטרופורזה. לקבלת שלב השטיפה, בצע 2 שטיפות ב

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Results

אלקטרופרוגרמה שנאספו עבור דגימות פפסי ופפסי דיאט מוצגות באיורים 1 ו -2, בהתאמה. שלוש הפסגות של קפאין, אספרטיים וחומצה בנזואית נצפות בתזונה פפסי ויש להם זמני הגירה דומים לסטנדרטים. עבור פפסי רגיל, שיא הקפאין קיים אך לא פסגות אספרטיים וחומצה בנזואית. ניתוח CE מהיר מכיוון ש בז?...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Application and Summary

אלקטרופורזה נימי משמש הפרדות מיוחדות רבות. לדוגמה, הוא משמש בתעשיית התרופות לבדיקות איכות, כדי לוודא שאין מוצרי צד או מפריעים. CE שימושי במיוחד להפרדת תרופות עם קבוצת אמינו בסיסית, כמו הקירות של נימי יכול להיות נייטרלי עם pH חומצי ולכן התרופה לא להיצמד נימי.

נעשה שימוש גם במצב ...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags
Capillary ElectrophoresisCEChemical AnalysisSeparate MoleculesElectric FieldSizeChargeSub millimeter Diameter TubeCapillaryFlowing Electrolyte SolutionVelocityChargeSizeSolvent s ViscosityResolutionHigh performance Liquid ChromatographyEfficiencySensitivity

Skip to...

0:00

Overview

1:06

Principles of Capillary Electrophoresis

3:19

CE Instrumentation Setup

4:26

Preparation of the Standards and Soda Samples

5:23

Running the Samples

6:50

Applications

8:26

Summary

Videos from this collection:

article

Now Playing

אלקטרופורזה נימית (CE)

Analytical Chemistry

93.2K Views

article

הכנה לדוגמה לאפיון אנליטי

Analytical Chemistry

84.1K Views

article

תקנים פנימיים

Analytical Chemistry

204.2K Views

article

שיטת התוספת הסטנדרטית

Analytical Chemistry

319.2K Views

article

עקומות כיול

Analytical Chemistry

792.7K Views

article

ספקטרוסקופיה אולטרה סגולה (UV-Vis)

Analytical Chemistry

619.9K Views

article

רמאן ספקטרוסקופיה לניתוח כימי

Analytical Chemistry

51.0K Views

article

פלואורסצנטיות של קרני רנטגן (XRF)

Analytical Chemistry

25.3K Views

article

כרומטוגרפיה של גז (GC) עם גילוי יינון להבה

Analytical Chemistry

280.7K Views

article

כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC)

Analytical Chemistry

382.6K Views

article

כרומטוגרפיה של חילופי יונג

Analytical Chemistry

263.6K Views

article

מבוא לספקטרומטריית מסה

Analytical Chemistry

111.8K Views

article

סריקת מיקרוסקופיית אלקטרונים (SEM)

Analytical Chemistry

86.7K Views

article

מדידות אלקטרוכימיות של זרזים נתמכים באמצעות פוטנציוסטט /גלוונוסטאט

Analytical Chemistry

51.3K Views

article

וולטמטריה מחזורית (קורות)

Analytical Chemistry

123.9K Views

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved