Électrophorèse capillaire (EC)

Source : Laboratoire du Dr B. Jill Venton - University of Virginia

Électrophorèse capillaire (EC) est une technique de séparation qui sépare les molécules dans un champ électrique selon la taille et de la charge. CE est réalisé dans un tube de verre appelé un capillaire qui est rempli d’une solution électrolytique. Analytes sont séparés en raison des différences dans la mobilité électrophorétique, qui varie en fonction de la charge, la viscosité du solvant et la taille. Traditionnel électrophorèse en gels est limitée au montant de tension qui peut être appliquée parce que Joule effets de chauffage va ruiner le gel et la séparation. Capillaires ont un surface zone-à-volume élevé et dissipent ainsi mieux la chaleur. Par conséquent, les tensions appliquées pour une expérience de l’électrophorèse capillaire sont assez grandes, souvent 10 000 – 20 000 V.

L’électrophorèse capillaire est utile pour des séparations de haute performance. Par rapport à la chromatographie en phase liquide, séparations CE sont souvent plus rapides et plus efficaces. Toutefois, l’électrophorèse capillaire fonctionne mieux pour séparer les molécules chargées, qui n’est pas une limitation de la chromatographie en phase liquide. EC a une plus grande capacité de pointe que la chromatographie liquide à haute performance (HPLC), ce qui signifie que les séparations sont plus efficaces et plus de pics peuvent être détectées. L’instrumentation peut être très simple. Cependant, HPLC est plus souple et beaucoup de phases stationnaires et mobiles ont été développés pour différents types de molécules.

1. CE Instrumentation Setup

1. Allumer l’instrument CE et l’ordinateur. En utilisant le logiciel de l’ordinateur, allumez la source de lumière pour l’analyse des UV pour lui permettre de se réchauffer. Un logiciel a un indicateur lorsque la lampe est prête à l’emploi (lampe icône devient couleur).
2. Faire un fichier de méthodes. Définissez les paramètres importants pour le marquage CE en cours d’exécution. Dans cette analyse, les températures de stockage de la cartouche et échantillon sont 35 ° C. La lon

Électrophérogrammes collectées pour diète Pepsi et Pepsi échantillons sont présentés aux Figures 1 et 2, respectivement. Les trois sommets de l’aspartame, la caféine et l’acide benzoïque sont observées dans la diète Pepsi et ont des temps de migration similaires comme les normes. Pour Pepsi ordinaire, le pic de caféine est présent mais pas les sommets de l’aspartame et l’acide benzoïque. L’analyse de CE est rapide car les temps de migration sont seulement 3-4 min....

L’électrophorèse capillaire est utilisé pour plusieurs séparations de spécialité. Par exemple, il est utilisé dans l’industrie pharmaceutique pour test, assurez-vous qu’il n’y a pas de produits secondaires ou interférants de qualité. CE est particulièrement utile pour séparer les médicaments avec un groupe amino de base, comme les parois du capillaire peuvent être faites à neutres avec un pH acide et donc la drogue ne collera pas au capillaire.

Un mode de CE servait aussi...