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Kapillarelektrophorese (CE)

Überblick

Quelle: Labor von Dr. B. Jill Venton - University of Virginia

Kapillarelektrophorese (CE) ist eine Trennung Technik, die Moleküle in einem elektrischen Feld je nach Größe und Ladung trennt. CE erfolgt in einer kleinen Glasröhre genannt eine Kapillare, die mit einer Elektrolytlösung gefüllt ist. Analyten sind aufgrund von Unterschieden bei der elektrophoretischen Mobilität, getrennt mit Ladung, solvent Viskosität und Größe variiert. Traditionelle Elektrophorese in den Gelen beschränkt sich in der Höhe von Spannung, die angewendet werden kann, weil Joule Heizung Auswirkungen das Gel und die Trennung zu ruinieren. Kapillaren haben ein große Oberfläche Bereich-zu-Volumen-Verhältnis und damit entstehende Wärme besser. Daher die Spannungen beantragt eine Kapillarelektrophorese-Experiment sind recht groß, oft 10.000 – 20.000 V.

Kapillarelektrophorese eignet sich für Hochleistungs-Trennungen. Im Vergleich zu Flüssigchromatographie, sind CE Trennungen oft schneller und effizienter. Jedoch funktioniert Kapillarelektrophorese am besten, um geladene Moleküle zu trennen, die ist keine Einschränkung der Flüssigkeitschromatographie. CE hat eine höhere Gipfel Kapazität als Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (HPLC), d. h. die Trennungen sind effizienter und mehr Peaks detektiert werden. Die Instrumentierung kann sehr einfach sein. Allerdings HPLC ist vielseitiger und viele stationäre und mobile Phasen wurden für verschiedene Arten von Molekülen.

Verfahren

(1) CE Instrumentierung Setup

  1. Das CE-Gerät und den Computer einschalten. Computersoftware, schalten Sie die Lichtquelle für UV-Analyse, zum Aufwärmen zu können. Einige Software hat einen Indikator, wenn die Lampe betriebsbereit ist (Lampe-Symbol dreht sich Farbe).
  2. Machen Sie eine Methoden-Datei. Legen Sie die wichtigen Parameter für die Ausführung der CE. In dieser Analyse sind die Temperaturen der Patrone und Sample Speicherung 35 ° C. Die Wellenlänge für UV-Detektion ist 214 nm.
  3. Schreibe

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Ergebnisse

Electropherograms gesammelt für Diät Pepsi und Pepsi Proben sind in den Abbildungen 1 und 2, bzw. gezeigt. Die drei Zinnen für Koffein, Aspartam und Benzoesäure Diät Pepsi eingehalten werden und haben ähnliche Zugzeiten als Maßstab. Für reguläre Pepsi ist der Koffein-Gipfel vorhanden, aber nicht die Aspartam und Benzoesäure Gipfel. Die CE-Analyse ist schnell, wie die Zugzeiten nur 3 – 4 Minuten sind.

Die Eichkurve für Koffein ist in Abbild...

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Anwendung und Zusammenfassung

Kapillarelektrophorese wird für viele Spezialität Trennungen verwendet. Beispielsweise ist es in der pharmazeutischen Industrie für Qualitätsprüfung, um sicherzustellen, dass keine Nebenprodukte oder Interferents verwendet. CE ist besonders nützlich für Drogen mit einer grundlegenden Aminogruppe zu trennen, da die Wände der Kapillaren mit einem sauren pH-Wert neutral erfolgen können und somit das Medikament nicht Sie sich an der Kapillare halten wird.

Ein CE-Modus wurde auch zur Seque...

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Tags
Capillary ElectrophoresisCEChemical AnalysisSeparate MoleculesElectric FieldSizeChargeSub millimeter Diameter TubeCapillaryFlowing Electrolyte SolutionVelocityChargeSizeSolvent s ViscosityResolutionHigh performance Liquid ChromatographyEfficiencySensitivity

pringen zu...

0:00

Overview

1:06

Principles of Capillary Electrophoresis

3:19

CE Instrumentation Setup

4:26

Preparation of the Standards and Soda Samples

5:23

Running the Samples

6:50

Applications

8:26

Summary

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