תרבית חצילים מעור עוף למחקר אורגנוגנזה

בתור התחלה, לדגור על ביצי תרנגולות מופרות באינקובטור לח ב 38 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, הניחו עובר עוף שלב 28 עד 32 בצלחת פטרי 60 מ"מ מלאה ב- HBSS. לאחר ניתוח העור והראש של העובר הגבי, משכו בעדינות את ניצני הגפיים כדי למקם מחדש את הצד הגחוני של הגוף כלפי מטה.

כעת, לאורך שני צידי גוף העובר, בצעו חתך קדמי עד אחורי. אחזו את ניצני הגפה לאורכם בעזרת זוג מלקחיים כדי לייצב את הגוף. השתמש במלקחיים של שען כדי לקלף בזהירות את העור מהצוואר ועד לאזור הזנב.

השתמשו במספריים חדים כדי להסיר בעדינות את כל הרקמות התת עוריות שנותרו עדיין מחוברות לעור המקולף ולהחליק את קצוות העור. לאחר מכן, להוסיף שני מיליליטר של DMEM בתוספת לכל באר של צלחת שש באר. לאחר הוספת אנטיביוטיקה לבארות, מניחים בתוך הבאר תוספת תרבית רקמה סטרילית, ומבטיחים שהמדיום מקיף את החלק החיצוני של תוספת התרבית.

לאחר מכן העבירו את העור על מרית בעודו שקוע בHBSS כדי למנוע קימוט וקיפול. לאחר שתסיים, העבירו את העור הנכרת לצלחת המכילה HBSS. החליקו באיטיות את העור מהמרית אל התרבית מבלי לקפל.

בעזרת פיפטה של 200 מיקרוליטר, הסירו את עודפי HBSS מהחדרה. לבסוף, דגרו על תרביות צמחי העור בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם תערובת של 5% פחמן דו חמצני ו-95% אוויר. החלף את המדיום כל יומיים.

פרימורדיה הנוצה התפתחה לניצני נוצות קצרים לאחר יומיים בתרבית. וניצני נוצות ארוכים התפתחו לאחר ארבעה ימים בתרבית. הפלקודים העוריים היו בוגרים יותר בקו האמצע מאשר בצדדים.