1 כדי להתחיל, בצעהדמיה חיה של תא 2 של מולקולה בודדת של עיבוי חלבון HaloTag. 3 באמצעות ImageJ, המירו כל ערוץ 4 מקובץ נתוני ההדמיה הגולמיים 5 לקובץ TIFF עצמאי. 6 במידת הצורך, הפעל מסרק מעקב מקדים.
טקסט 7 ופעל בהתאם להנחיות 8 כדי להחליף מסגרות במסגרות האחרונות. 9 כדי לטעון את המולקולה היחידה של קובץ הסרט ב- SlimFast, לחץ 10 על טען, ואחריו ערימת תמונות. 11 הגדר את הפרמטרים עבור לוקליזציה 12 ורכישה תחת גיליונות אופציות מתאימים.
13 דמיינו את הלוקליזציה של כל המולקולות. 14 ובאמצעות נעילה כל, 15 ליצור קובץ המכיל לוקליזציה 16 של כל המולקולות בכל מסגרת. 17 לאחר מכן, עבור אל טען נתוני חלקיקים 18 ובחר SlimFast כדי לטעון את הקובץ 19 עם הגדרות לוקליזציה ורכישה.
20 באמצעות מעקב אחר אפשרויות וגיליונות, 21 להתאים את הפרמטרים ליצירת מסלול. 22 לחץ על gen traj כדי ליצור קובץ 23 המכיל את המסלולים של כל המולקולות. 24 טען את קובץ המעקב של הגיליון לתוך SPT 25 והגדר את הפרמטרים 26 כדי לסנן את המסלולים קצרים מ -2.5 שניות.
27 באמצעות נתוני ייצוא, צור קובץ 28 עם כל המסלולים המסוננים. 29 הפעלת המאקרו ImageJ, גרעין, 30 ומסיכת אשכול גרסה שתיים. טקסט, סף 31 כל הפריימים של הסרט רכשו 32 בערוץ JFX549 כדי ליצור סרט קיטועי זמן 33 המאוכלס במסיכה בינארית מתפתחת זמן 34 המדגישה מיקומי עיבוי.
35 שימוש בהמרת ASCII מעקב איטי CSS 3. M, 36 לאתחל מחדש את המסלולים 37 ולהריץ את גרסת הסיווג 4. M 38 כדי למיין אותם על פי אורך החיים 39 מולקולה מבלה בעיבוי.
40 לאחר מכן, באמצעות מגרש מגורים hist CSS. M, 41 מחלצים את קצב הדיסוציאציה שנצפה 42 של מולקולות קשורות ספציפית 43 ואת קצב ההלבנה מחלבון בעיבוי 44 של עניין ומסלולי H2B. 45 לבסוף, יש לחשב את זמן המגורים הממוצע המתוקן 46 של החלבון המעניין, 47 קשור ספציפית למעבים שלו.
48 מסגרת מסרט של מולקולה בודדת בשני צבעים 49 של TAF15 IDR-Halo-FTH1 מראה אותות 50 מהגרעין בשני ערוצי PA-JF646 ו-JFX549. 51 לאחר ההרכבה והמיון 52 נצפתה הבחנה ברורה בין המסלולים 53 של PA-JF646 שזוהו מולקולות הקשורות למעבים. 54 ממוצע זמני המגורים המחושב 55 לאחר תיקון עבור הלבנה 56 היו יותר עבור TAF15-Halo-FTH1 מאשר Halo-TAF15.
