גידול חתיכות גידול מעובדות במסוק ליצירת אורגנואידים תלת-ממדיים של גליומה שמקורם במטופל

1 כדי להתחיל, לקבל את רקמת הגידול2 מן החולים, ולעבד אותו עם מסוק. 3 הטו את צלחת הפטרי המכילה גידול קצוץ 4 כלפי מעלה עד 45 מעלות, והסירו בזהירות 2.5 מיליליטר 5 ממדיום H-GPSA. 6 כדי לשטוף את חתיכות הגידול, מוסיפים שני מיליליטר 7 של חיץ ליזה RBC, ודגרים בשייקר אורביטלי 8 במהירות איטית.

9 לאחר מכן, השליכו את מאגר הליזיס לחלוטין. 10 לאחר מכן, הוסף ארבעה מיליליטר של 11 תווך אורגנואיד שמקורו במטופל לחתיכות הרקמה, 12 והעבר את גושי הרקמה לחיבור נמוך במיוחד 13 שש צלחת היטב. 14 לדגור על הצלחת בשייקר אורביטלי 15 למשך שבועיים עד ארבעה שבועות.

16 כל יומיים, יש להחליף מחצית מהמדיום המשומש 17 בתווך אורגנואיד טרי שחומם מראש ומקורו במטופל. 18 כדי למנוע היפוקסיה ברקמות, 19 להעביר את האורגנואידים שמקורם במטופל 20 לצלוחית פטרי סטרילית מזכוכית 21 ולהתבונן במורפולוגיה של הרקמה תחת מיקרוסקופ. 22 לאחר מכן, באמצעות אזמל, חתכו את רקמת הדבק.

23 אורגנואידים שמקורם במטופל שהתקבלו בשיטת המסוק 24 הגיעו לצורה המעוגלת הרצויה תוך שבוע 25 בהשוואה לאורגנואידים שקוצצו ידנית. 26 ומספר האורגנואידים שנוצרו 27 היה גבוה משמעותית בשיטה זו.