1. הגדר: מסגרת ועיצוב קלאמפ להחזקת בעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מסגרת מהדק להחזיק את החיה היתה אישית מעוצבת כדי להתאים את אופק אינסופי (IH) פגיעה בחוט השדרה Impactor. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסיס הפריים היא פלטפורמת האלומיניום וחותכים את הממדים הבאים (30.2 ס&quot;מ X 20.3 ס&quot;מ X 1.3 ס&quot;מ) על מנת להתאים את סוגר את הטבלה המדריך שמגיע כסטנדרט עם המכשיר IH (איור 1 א). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ארבע רגליים Flexaframe תמיכה צלחות (פישר סיינטיפיק, טורונטו, ב) מחוברים פלטפורמת ושמונה תמיכה Flexaframe מוטות (פישר סיינטיפיק, טורונטו, ב, 30.5 ס&quot;מ) נאספו על שימוש שמונה תמיכה Flexaframe מחברים (1B איור). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שתי תמיכה נוספת Flexaframe מחברים, המחוברים לשני מוטות הביניים, מתווכים, בהתאמה אישית מחזיקה עבור מהדק (1B איור). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזווית שבה חוט השדרה של בעלי חיים הוא הסתובב לגבי האנכי היא הוקמה על ידי שמשאירגרם אחד של מוט אופקי במקום ואת שינוי גובה מוט אופקי השני (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מהדק הוא 35.6 מ&quot;מ אורך, 25.4 מ&quot;מ גבוה עם הלסת 7.6 מ&quot;מ שנועדה נוקשה לאחוז מתחת תהליך רוחבי מ C4 עד C6 (איור 1 ג). פרטים נוספים על העיצוב מהדק תוארו בעבר על ידי צ&#39;ו et al., 2009. </li></ol> 2. כירורגיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זכר ספראג Dawley חולדות (Charles River Laboratories) במשקל של 300-350 גרם היו הרדים ידי isoflurane (4% עבור אינדוקציה 2% לצורך תחזוקה) של חמצן (1 ליטר / דקה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחת החיות תחת המטוס של הרדמה, בעלי חיים מושם במסגרת stereotaxic (קופף, Tujunga, CA). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למזער את הדימום במהלך ניתוח ההליך 0.4 מ&quot;ל של לידוקאין (20 מ&quot;ג / מ&quot;ל; Bimeda - MTC בעלי חיים בריאות בע&quot;מ, בקיימברידג&#39;, אונטריו, קנדה) עם אפינפרין מוזרק לשריר סביב האתר כירורגית ב dorsaבאזור הצוואר אני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 4-5 ס&quot;מ הגב חתך קו האמצע נעשית באמצעות אזמל סטרילי (# 15), החל בבסיס הגולגולת והארכת caudally. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סטרילית מלקחיים Adson משמשים בוטה לנתח דרך שרירי הגב להגיע אל עמוד השדרה, והוא מפשק סטרילית אלם (כלי מדעי יפות, צפון ונקובר, BC) מוכנס כדי לשמור על השרירים להפרד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות # 15 אזמל, השרירים כיסו רבדים של C4-C7 הם גירדו, החל קו האמצע ולא לטאטא אותם לרוחב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החתך עם אזמל סטרילי (# 15) הוא עשה לשריר מחובר תהליכים רוחביים בצד שני של עמוד השדרה על מנת להתאים מהדק מתחת התהליכים רוחביים של C4 עד C6. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם קנס סטרילית היטה פרידמן, פירסון Rongeur (כלי מדעי יפות, צפון ונקובר, BC), lamina שמאל C5 מוסרת בזהירות כדי להמחיש את דורה ואת חוט השדרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוט בקוטר של 1.5 מ&quot;מ הוא החליק מתחת לזרועותכדי לתמוך את החיה, ובכך להעלות מעט את עמוד השדרה והקלה הכניסה מהדק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר הלסת של מהדק סטרילית על תהליכים רוחביים הצדדיות של C4 עד C6 והדק את הברגים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מפשק אלם. </li></ol> 3. חוט השדרה פגיעה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מהדק הוא רכוב על בעלי חיים, בעלי חיים מועבר impactor IH. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מהדק מוכנס לתוך מחזיקי מתכת על שני מוטות הביניים של מסגרת שהיו מובטחות בזווית של 22.5 ° מעל אופקי (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ג&#39;ק מספריים המספק התאמות גובה יציבים, (VWR, Mississauga, ON) עולה עד החיה מטילה שטוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא מהדק הוא אופקי על ידי הצבת רמת גליל קטן על גבי מהדק ועל ידי הידוק הברגים. חשוב כי כל הברגים הם חזק הגדרה הוא קשיח, ללא כל תנועה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עד סוף ההליך מתבצע תחת MICRoscope (לייקה MZ8). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחתון לכוון את קצה impactor (15 מ&quot;מ קוטר, עם קצוות מעוגלים-off) באמצעות ידית כוונון אנכי ושני כפתורים התאמה אופקיים על impactor IH עד מרכז עצה impactor מרחף מעל לשיא של תהליך C6 spinous. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר עצה impactor מרוכז, סובבו את הכפתור ציר y התאמה 1 ו 2 בתורה 5 (1.4 מ&quot;מ) כדי להזיז את קצה רוחבית בצד שמאל הציר האופקי x כפתור התאמת כדי להזיז את קצה impactor למרכז C5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מנמיכים את קצה עד שהוא מעל דורה כדי לוודא את קצה impactor הוא מכוון חצי לרוחב של החומר האפור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סובבו את כפתור כוונון אנכי 2 פונה לגייס 4 עצה מ&quot;מ מעל דורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבטיח כי שטח ההשפעה יבש באמצעות מקלון צמר גפן או מקל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את הכוח הרצוי kdyn 150 על התוכנית ולחץ על &quot;ניסוי התחל&quot; כדי להפעיל את impactor. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הפגיעה, הפצע נסגר ב LayeRS עם 5-0 תפרים vicryl. עצירות (0.03 מ&quot;ג / ק&quot;ג SC, Temgesic: Schering-Plough Corporation, Kenilworth, NJ) ו מלוחים (10 מ&quot;ל) מנוהל מתחת לעור לפני פעמיים ביום למשך יומיים לאחר הניתוח. בעלי החיים נמצאים תחת פיקוח הדוק פעמיים ביום במשך 2 שבועות אחד בשבוע במשך 6 שבועות לאחר הפציעה. </li></ol> 4. נציג תוצאות עשרים תשעה גברים ספראג Dawley חולדות (Charles River Laboratories) במשקל של 300-350 גרם נפצעו בהגדרה כוח של kdyn 150. עצה impactor נועדה 1.4 מ&quot;מ לרוחב קו האמצע, בזווית של 22.5 ° מעל אנכי. הכוח האמיתי הממוצע עמד על 155.55 ± 0.73 kdyn. עקירה הממוצע עמד על 1,512.72 ± 27.86 מיקרומטר ואת המהירות היה 120.24 ± 0.52 מ&quot;מ / s (איור 3). התוצאה התנהגות מדדים ההחלמה התפקודית הוערכה באמצעות סולם אופקי הבדיקה, גליל מבחן גידול, טיפוח הבדיקה,ו שונה מבחן מונטויה גרם מדרגות 1. בעלי חיים הוכשרו לפני הפציעה ולהעריך את 2 שבועות, 4 ו -6 לאחר פציעה. היו ליקויים משמעותיים forelimb שנגרמו לאורך תקופת הניסוי. מבחן סולם אופקי. לפני הפציעה, בעלי חיים עשה רק 4.75 ± 0.73% על שגיאות forelimb ipsilateral תוך חוצים לרוחב סולם אופקי ברווח סדיר. בעקבות הפציעה, בעלי החיים הפגינו עלייה ניכרת באחוז שגיאות forelimb. אחוז השגיאות ipsilateral forelimb היו 26.97 ± 2.92%, 26.23 ± 2.84% ו 22.06 ± 2.05% לאחר 2, 4 ו - 6 שבועות לאחר פציעה, בהתאמה (איור 4 א). חשוב לציין, ליקוי forelimb במבחן זה נשמר במשך 6 שבועות. בדיקת גידול צילינדר. אחוז forelimb ipsilateral (שמאל + שניהם) שימוש במהלך חיפושים ירד באופן משמעותי לאחר SCI.לפני הפציעה, בעלי החיים משתמשים forelimb ipsilateral 75.12 ± 2.25%. לאחר הפגיעה בבעלי החיים משמש forelimb ipsilateral 8.59 ± 1.80% ב 2 שבועות, 14.25 ± 2.65% לאחר 4 שבועות ו 11.76 ± 2.66% לאחר 6 שבועות (איור 4B). שונה מבחן מונטויה המדרגות. מספר כדורי שאוחזרו עם forelimb ipsilateral ירד באופן דרמטי לאחר פציעה. לפני הפציעה, בעלי חיים אספו 84.85 ± 2.88% מסך התגמולים מזון. עם זאת, בשבועות 2, 4 ו - 6 שלאחר פציעה, החיות לאחזר רק 30.91 ± 4.03%, 28.94 ± 4.38% ו 25.86 ± 3.09% של כדוריות (איור 4C). טיפוח הבדיקה. היו ירידה דרמטית את התוצאות טיפוח לאחר פציעה. לאחר SCI, עשרות טיפוח ipsilateral היו 2 שבועות: 2.00 ± 0.17, 4 שבועות: 1.83 ± 0.17 6 שבועות: 1.79 ± 0.11 (FiguRe 4D). היסטולוגית תוצאות החומר הלבן חלקי משנה גריי. דוגמה של פגיעה בחוט השדרה לעבר כוח של kdyn 150, זווית של ° 22.5 ואת המטרה רוחבי של 1.4 מ&quot;מ מוצג באיור 5. הפגיעה גרמה נזק משמעותי לעניין אפור ולבן בצד ipsilateral. שניהם corticospinal של שטחי rubrospinal נפצעו 23 מתוך 29 בעלי חיים היה נזק parenchymal הכלול בצד ipsilateral. במידה האורך של נזק של חומר לבן ואפור היה rostrally 2400 ו 2400 caudally (איור 6). כאשר מוסיפים את החלקים לספק הערכה גסה של &quot;התפשטות מצטברת&quot; של חלקי חומר לבן ואפור (2000 מיקרומטר מקורי ואת הזנב אל המוקד), הצד ipsilateral היה רק ​​51.8% של החומר הלבן חסך ו 39.7% של החומר האפור לעומת שנותר לצד הנגדי (איור 6). &lt;img alt = &quot;איור 1&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/3313/3313fig1.jpg&quot; /&gt; באיור 1. אופק אינסופי חוט השדרה פגיעה impactor. א Impactor אופק אינסופי הכוללת להגדיר. ב מסגרת להגדיר. ג מקרוב תמונה של מהדק לקיום תהליכים רוחביים בצוואר הרחם. ד מפרט (יחידה: אינץ&#39;) של מהדק. סובלנות הציע &lt;0.002 ב (צ&#39;ו et al. 2009). <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/3313/3313fig1large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג דמות גדולה</a> . <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig2.jpg" /> איור 2. א מסגרת האיור המתאים להגדיר כדי להשיג סיבוב חוט השדרה של 0 ° (נייטרלי) או ב 22.5 ° במטרה רוחבי של 1.4 מ&quot;מ. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig3.jpg" /> איור 3. נציג כוח תזוזה גרפים עבור impactor אופק אינסופי. החץ אניndicates אז עצה impactor הגיע 20 kdyn ונקודת כאשר הקלטה של ​​עקירה היא יזמה. הכוח האמיתי הוא לקריאה משיא של עקומת כוח לעומת הזמן המקביל עקירה מחושב. הגרפים הבאים מתארים contusion אופיינית 150 kdyn, עקירה א &#39;לעומת גרף הזמן, ב&#39; כוח מול גרף זמן. גרפים אלו מראים כי הכוח האמיתי היה להשיג 152 kdyn, ואת העקירה impactor לתוך כבל נמדד להיות 1287 מיקרומטר. <a href="/files/ftp_upload/3313/3313fig3large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג דמות גדולה</a> . <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig4.jpg" /> באיור 4. הערכות התנהגותיות עבור כוח kdyn 150, זווית impactor של 22.5 מעלות ו מטרת מ&quot;מ 1.4 שנותר קו האמצע. א מבחן סולם אופקי. מבחן ב גידול צילינדר. ג שינוי מבחן מונטויה המדרגות. ד טיפוח הבדיקה. Forelimb ipsilateral הביא משמעותי sustaiנד ליקויי לעומת forelimb הנגדי. <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig5.jpg" /> איור 5. נציג תמונות של חוט השדרה הפגוע מ 1600 מיקרומטר מקורי ל 1600 מיקרומטר הזנב. <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig6.jpg" /> איור 6. הערכות היסטולוגית. א לבן ואפור משנה אחוז חסך. משנה סביב 2000 מיקרומטר של מוקד הנזק היה נחסך במידה רבה. ב &#39;מצטבר לבן ואפור משנה חסך בתוך 2000 מיקרומטר של מוקד הנזק. בצד ipsilateral לא חסך משמעותי פחות חומר לבן ואפור לעומת הצד הנגדי. <a href="/files/ftp_upload/3313/3313fig6large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג דמות גדולה</a> .

<ol>
	<li>Lee, J. H., Tigchelaar, S., Liu, J., Stammers, A. M., Streijger, F., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+neuroprotective+effects+of+simvastatin+and+minocycline+in+a+model+of+cervical+spinal+cord+injury.">Lack of neuroprotective effects of simvastatin and minocycline in a model of cervical spinal cord injury.</a> Exp. Neurol. 225, 219-230 (2010).</li><li>Kwon, B. K., Hillyer, J., Tetzlaff, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+research+in+spinal+cord+injury:+a+survey+of+opinion+from+the+SCI+community.">Translational research in spinal cord injury: a survey of opinion from the SCI community.</a> J. Neurotrauma. 27, 21-33 (2010).</li><li>Gensel, J. C., Tovar, C. A., Hamers, F. P., Deibert, R. J., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+histological+characterization+of+unilateral+cervical+spinal+cord+contusion+injury+in+rats.">Behavioral and histological characterization of unilateral cervical spinal cord contusion injury in rats.</a> J. Neurotrauma. 23, 36-54 (2006).</li><li>Kwon, B. K., Borisoff, J. F., Tetzlaff, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+targets+for+therapeutic+intervention+after+spinal+cord+injury.">Molecular targets for therapeutic intervention after spinal cord injury.</a> Mol. Interv. 2, 244-258 (2002).</li><li>Allen, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+of+experimental+lesions+of+spinal+cord+equivalent+to+crush+injury+of+fracture+dislocation.">Surgery of experimental lesions of spinal cord equivalent to crush injury of fracture dislocation.</a> J. Am. Med. Assoc. 57, 878-880 (1911).</li><li>Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+histological+and+locomotor+outcomes+after+spinal+cord+contusion+using+the+NYU+weight-drop+device+versus+transection.">Graded histological and locomotor outcomes after spinal cord contusion using the NYU weight-drop device versus transection.</a> Exp Neurol. 139, 244-256 (1996).</li><li>Gruner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+monitored+contusion+model+of+spinal+cord+injury+in+the+rat.">A monitored contusion model of spinal cord injury in the rat.</a> J. Neurotrauma. 9, 123-128 (1992).</li><li>Choo, A. M., Liu, J., Liu, Z., Dvorak, M., Tetzlaff, W., Oxland, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+spinal+cord+contusion,+dislocation,+and+distraction:+characterization+of+vertebral+clamps,+injury+severities,+and+node+of+Ranvier+deformations.">Modeling spinal cord contusion, dislocation, and distraction: characterization of vertebral clamps, injury severities, and node of Ranvier deformations.</a> J. Neurosci. Methods. 181, 6-17 (2009).</li><li>Whishaw, I. Q., Piecharka, D. M., Drever, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complete+and+partial+lesions+of+the+pyramidal+tract+in+the+rat+affect+qualitative+measures+of+skilled+movements:+impairment+in+fixations+as+a+model+for+clumsy+behavior.">Complete and partial lesions of the pyramidal tract in the rat affect qualitative measures of skilled movements: impairment in fixations as a model for clumsy behavior.</a> Neural. Plast. 10, 77-92 (2003).</li><li>Jones, T. A., Schallert, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overgrowth+and+pruning+of+dendrites+in+adult+rats+recovering+from+neocortical+damage.">Overgrowth and pruning of dendrites in adult rats recovering from neocortical damage.</a> Brain Res. 581, 156-160 (1992).</li><li>Liu, Y., Kim, D., Himes, B. T., Chow, S. Y., Schallert, T., Murray, M., Tessler, A., Fischer, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplants+of+fibroblasts+genetically+modified+to+express+BDNF+promote+regeneration+of+adult+rat+rubrospinal+axons+and+recovery+of+forelimb+function.">Transplants of fibroblasts genetically modified to express BDNF promote regeneration of adult rat rubrospinal axons and recovery of forelimb function.</a> J. Neurosci. 19, 4370-4387 (1999).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Soblosky, J. S., Song, J. H., Dinh, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+unilateral+cervical+spinal+cord+injury+in+the+rat:+evaluation+of+forelimb+recovery+and+histological+effects.">Graded unilateral cervical spinal cord injury in the rat: evaluation of forelimb recovery and histological effects.</a> Behav. Brain Res. 119, 1-13 (2001).</li><li>McKenna, J. E., Prusky, G. T., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cervical+motoneuron+topography+reflects+the+proximodistal+organization+of+muscles+and+movements+of+the+rat+forelimb:+a+retrograde+carbocyanine+dye+analysis.">Cervical motoneuron topography reflects the proximodistal organization of muscles and movements of the rat forelimb: a retrograde carbocyanine dye analysis.</a> J. Comp. Neurol. 419, 286-296 (2000).</li><li>Sandrow, H. R., Shumsky, J. S., Amin, A., Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspiration+of+a+cervical+spinal+contusion+injury+in+preparation+for+delayed+peripheral+nerve+grafting+does+not+impair+forelimb+behavior+or+axon+regeneration.">Aspiration of a cervical spinal contusion injury in preparation for delayed peripheral nerve grafting does not impair forelimb behavior or axon regeneration.</a> Exp. Neurol. 210, 489-500 (2008).</li><li>Popovich, P. G., Lemeshow, S., Gensel, J. C., Tovar, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Independent+evaluation+of+the+effects+of+glibenclamide+on+reducing+progressive+hemorrhagic+necrosis+after+cervical+spinal+cord+injury.">Independent evaluation of the effects of glibenclamide on reducing progressive hemorrhagic necrosis after cervical spinal cord injury.</a> Exp. Neurol. 233, 615-622 (2012).</li><li>Dunham, K. A., Siriphorn, A., Chompoopong, S., Floyd, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+graded+cervical+hemicontusion+spinal+cord+injury+model+in+adult+male+rats.">Characterization of a graded cervical hemicontusion spinal cord injury model in adult male rats.</a> J. Neurotrauma. 27, 2091-2106 (2010).</li><li>Lee, J. H., Roy, J., Sohn, H. M., Cheong, M., Liu, J., Stammers, A. T., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnesium+in+a+polyethylene+glycol+formulation+provides+neuroprotection+after+unilateral+cervical+spinal+cord+injury.">Magnesium in a polyethylene glycol formulation provides neuroprotection after unilateral cervical spinal cord injury.</a> Spine (Phila Pa 1976). 35, 2041-2048 (2010).</li><li>Alstermark, B., Isa, T., Lundberg, A., Pettersson, L. G., Tantisira, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+low+pyramidal+lesions+on+forelimb+movements+in+the+cat.">The effect of low pyramidal lesions on forelimb movements in the cat.</a> Neurosci. Res. 7, 71-75 (1989).</li></ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

במאמר זה נתאר מודל צוואר הרחם contusion חד צדדית באמצעות אופק impactor אינסופי (IH) לעבר כוח של 150 kdyn, זווית של 22.5 ° מעל אנכי, ואת המטרה רוחבי של 1.4 מ&quot;מ בין קו האמצע. עם הגדרות אלו, הצלחנו לייצר גירעונות התנהגותיות שנגרמו ב forelimb ipsilateral עם הפרעה parenchymal הכיל בעיקר בצד ipsilateral, שם התבר?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם הציוד </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> אופק אינסופי Impactor </td><td> דיוק מערכות ומכשור </td><td> IH-0400 </td><td></td></tr><tr><td> מתכת אלומיניום </td><td> Metalsupermarlets.com </td><td> APT6061/500 </td><td></td></tr><tr><td> רגל Flexaframe תמיכה צלחות </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 1466625Q </td><td></td></tr><tr><td> Flexaframe מוטות תמיכה </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 1466610GQ </td><td></td></tr><tr><td> Flexaframe תמיכה מחברים </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 1466620Q </td><td></td></tr><tr><td> הצמד 1 </td><td> מותאמים ללקוח </td><td></td><td> צ&#39;ו et al., 2009 </td></tr><tr><td> מתכת בעלי </td><td> מותאמים ללקוח </td><td></td><td> ראה לעיל </td></tr><tr><td> Impactor עצה </td><td> מותאמים ללקוח </td><td></td><td> קוטר: 1.15 מ&quot;מ </td></tr><tr><td> Stereotaxic מסגרת </td><td> דוד קופף מכשירים </td><td> דגם 900 </td><td></td></tr><tr><td> צילינדר ברמה </td><td> ייג&#39;יה כלים </td><td> YJ-SL0620 </td><td></td></tr><tr><td> מיקרוסקופ </td><td> Leica </td><td></td><td> מק&quot;ט: MZ8 </td></tr><tr><td> מספריים מעבדה ג&#39;ק </td><td> VWR </td><td> 12620-902 </td><td></td></tr></tbody></table>

a contusive model of unilateral cervical spinal cord injury using the infinite horizon impactor

בעוד שרוב בני אדם פגיעות בעמוד השדרה מתרחשות בחוט השדרה הצווארי, הרוב המכריע של מחקרי מעבדה בבעלי חיים מעסיקה של פגיעה בחוט השדרה (SCI), שבו עמוד השדרה החזי פצוע. נוסף על כך, כי רוב פגיעות בעמוד אדם להתרחש כתוצאה של טראומה קהה לא חודר, (למשל תאונת כלי רכב מנועי, פגיעה ספורט) כאשר חוט השדרה הוא היכה באלימות על ידי עצם העקורים או הרקמות הרכות, רוב החוקרים סבורים מדע כי רוב הדגמים פגיעה רלוונטיות קלינית הם אלה שבהם חוט השדרה הוא מבולבל במהירות. 1 לפיכך, צעד חשוב בהערכת קליני של טיפולים חדשניים בדרכם התרגום האנושי הוא הערכת היעילות שלהם במודל של contusion SCI בתוך חוט השדרה הצווארי. כאן, אנו מתארים את ההיבטים הטכניים ותוצאות אנטומיים והתנהגותיים כתוצאה של המודל contusive חד צדדי של צוואר הרחם SCI המעסיקהאופק אינסופי חוט השדרה פגיעה impactor. חולדות Sprague Dawley עברו laminectomy שמאל צדדי חד צדדי ב C5. כדי לייעל את שחזור התוצאות ביומכניים, פונקציונלי, היסטולוגית של המודל פציעה, אנו מבולבל את מיתרי השדרה באמצעות כוח ההשפעה של kdyn 150, מסלול ההשפעה של 22.5 מעלות (בעלי חיים הסתובב על ° 22.5), ומיקום הפגיעה את של קו האמצע של 1.4 מ&quot;מ. ההחלמה התפקודית הוערכה באמצעות גידול גליל מבחן, מבחן סולם אופקי, טיפוח הבדיקה הבדיקה המדרגות שונה של מונטויה עד 6 שבועות, ולאחר מכן מיתרי השדרה הוערכו בהיסטולוגיה על חלקי חומר לבן ואפור. המודל המוצג כאן פגיעה מקנה כוחות ביומכניים עקבית לשחזור אל חוט השדרה, תכונה חשובה של כל מודל ניסיוני SCI. התוצאה היא פגיעה היסטולוגית בדידה לחצי לרוחב של חוט השדרה אשר הכיל בעיקר לאהוא בצד ipsilateral הפציעה. הפגיעה היא נסבל היטב על ידי בעלי החיים, אך האם התוצאה של ליקויים תפקודיים של forelimb כי הם משמעותית ומתמשכת של שבועות בעקבות פציעה. מודל צוואר הרחם פגיעה חד צדדית המוצג כאן עשוי להיות משאב לחוקרים המעוניינים לבדוק טיפולים המבטיחים פוטנציאל לפני התרגום האנושי.

Watch this Scientific Journal Video about A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor at JoVE.com

A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

באופן אמין לשחזור לייצר פגיעה בחוט השדרה הצווארי חד צדדית באמצעות impactor אופק אינסופי מתואר. השיטה מנצלת את מסגרת שנועדה מותאם אישית לצבוט לייצב את עמוד השדרה. הליך סטנדרטי ופגיעה פרמטרים ביומכנית לגרום פציעות די מתמשכת.

דגם Contusive של פגיעה בחוט השדרה באמצעות צוואר הרחם חד צדדית Impactor אופק אינסופי

While the majority of human spinal cord injuries occur in the cervical spinal cord, the vast majority of laboratory research employs animal models of ...

a-contusive-model-unilateral-cervical-spinal-cord-injury-using

Research

JoVE Journal

Medicine

19.3K Views.  University of British Columbia. באופן אמין לשחזור לייצר פגיעה בחוט השדרה הצווארי חד צדדית באמצעות impactor אופק אינסופי מתואר. השיטה מנצלת את מסגרת שנועדה מותאם אישית לצבוט לייצב את עמוד השדרה. הליך סטנדרטי ופגיעה פרמטרים ביומכנית לגרום פציעות די מתמשכת.

Video: A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory testing in rat SCI models is needed. However, until recently, no single testing approach had been validated for SCI so that standardized methods have not been implemented across labs. Additionally, available testing methods could not be implemented acutely or when severe motor impairments existed, preventing studies of the development of SCI-induced allodynia3. Here we present two validated sensory testing methods using von Frey Hair (VFH) monofilaments which quantify changes in tactile sensory thresholds after SCI4-5. One test is the well-established Up-Down test which demonstrates high sensitivity and specificity across different SCI severities when tested chronically5. The other test is a newly-developed dorsal VFH test that can be applied acutely after SCI when allodynia develops, prior to motor recovery4-5. Each VFH monofilament applies a calibrated force when touched to the skin of the hind paw until it bends. In the up-down method, alternating VFHs of higher or lower forces are used on the plantar L5 dermatome to delineate flexor withdrawal thresholds. Successively higher forces are applied until withdrawal occurs then lower force VFHs are used until withdrawal ceases. The tactile threshold reflects the force required to elicit withdrawal in 50% of the stimuli. For the new test, each VFH is applied to the dorsal L5 dermatome of the paw while the rat is supported by the examiner. The VFH stimulation occurs in ascending order of force until at least 2 of 3 applications at a given force produces paw withdrawal. Tactile sensory threshold is the lowest force to elicit withdrawal 66% of the time. Acclimation, testing and scoring procedures are described. Aberrant trials that require a retest and typical trials are defined. Animal use was approved by Ohio State University Animal Care and Use Committee.

We describe two tactile sensory testing methods for acute or chronic periods of spinal cord injury in rats. These validated procedures can detect the development and maintenance of allodynia-like sensations.

אקוטי וכרוני בדיקה חושי טקטילי לאחר פגיעה בחוט השדרה של חולדות

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

Use of genetically modified mice enhances our understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders such as a spinal cord injury (SCI). Freehand manual control used to produce a laceration model of SCI creates inconsistent injuries often associated with a crush or contusion component and, therefore, a novel technique was developed. Our model of cervical laceration SCI has resolved inherent difficulties with the freehand method by incorporating 1) cervical vertebral stabilization by vertebral facet fixation, 2) enhanced spinal cord exposure, and 3) creation of a reproducible laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm in depth without associated contusion. Compared to the standard methods of creating a SCI laceration such as freehand use of a scalpel or scissors, our method has produced a consistent lesion. This method is useful for studies on axonal regeneration of corticospinal, rubrospinal, and dorsal ascending tracts.

A novel technique to create a reproducible in vivo model of cervical spinal cord laceration injury in the mouse is described. This technique is based on spine stabilization by fixation of the cervical facets and laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm.

פגיעה קריעת צוואר הרחם מבוקרת בעכברים

Use of genetically modified mice enhances our  understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders  such as a spinal cord ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is described to obtain a consistent model of severe SCI. Use of a stereotactic frame and computer controlled impactor allows for creation of reproducible injury. Hypothermia and urinary tract infection pose significant challenges in the post-operative period. Careful monitoring of animals with daily weight recording and bladder expression allows for early detection of post-operative complications. The functional results of this contusion model are equivalent to transection models. The contusion model can be utilized to evaluate the efficacy of both neuroprotective and neuroregenerative approaches.

A contusion model of severe spinal cord injury is described. Detailed pre-operative, operative and post-operative steps are described to obtain a consistent model.

דגם חבורה של פגיעה בחוט השדרה חמורה בחולדות

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

A Novel Vertebral Stabilization Method for Producing  Contusive Spinal Cord Injury

Clinically-relevant animal cervical spinal cord injury (SCI) models are essential for developing and testing potential therapies; however, producing reliable cervical SCI is difficult due to lack of satisfactory methods of vertebral stabilization. The conventional method to stabilize the spine is to suspend the rostral and caudal cervical spine via clamps attached to cervical spinous processes. &#160;However, this method of stabilization fails to prevent tissue yielding during the contusion as the cervical spinal processes are too short to be effectively secured by the clamps (Figure 1). &#160;Here we introduce a new method to completely stabilize the cervical vertebra at the same level of the impact injury. &#160;This method effectively minimizes movement of the spinal column at the site of impact, which greatly improves the production of consistent SCIs. &#160;We provide visual description of the equipment (Figure 2-4), methods, and a step-by-step protocol for the stabilization of the cervical 5 vertebra (C5) of adult rats, to perform laminectomy (Figure 5) and produce a contusive SCI thereafter. &#160;Although we only demonstrate a cervical hemi-contusion using the NYU/MASCIS impactor device, this vertebral stabilization technique can be applied to other regions of the spinal cord, or be adapted to other SCI devices. &#160;Improving spinal cord exposure and fixation through vertebral stabilization may be valuable for producing consistent and reliable injuries to the spinal cord. &#160;This vertebral stabilization method can also be used for stereotactic injections of cells and tracers, and for imaging using two-photon microscopy in various neurobiological studies.

Vertebral stabilization is necessary for minimizing variability, and for producing consistent experimental spinal cord injuries.&#160; Using a customized stabilizing apparatus in conjunction with the NYU/MASCIS impactor device, we have demonstrated here the proper equipment and procedure for generating reproducible hemi-contusive cervical (C5) spinal cord injuries in adult rats.

ייצוב שיטה חדש להפקת חוליות פגיעה בחוט השדרה Contusive

Clinically-relevant animal cervical spinal cord injury (SCI) models are essential for developing and testing potential therapies; however, producing ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed to improve/ameliorate the respiratory failure following high cervical spinal cord injury (SCI). Here we propose a murine pre-clinical model of high SCI at the cervical 2 (C2) metameric level to study diverse post-lesional respiratory neuroplasticity. The technique consists of a surgical partial injury at the C2 level, which will induce a hemiparalysis of the diaphragm due to a deafferentation of the phrenic motoneurons from the respiratory centers located in the brainstem. The contralateral side of the injury remains intact and allows the animal recovery. Unlike other SCIs which affect the locomotor function (at the thoracic and lumbar level), the respiratory function does not require animal motivation and the quantification of the deficit/recovery can be easily performed (diaphragm and phrenic nerve recordings, whole body ventilation). This pre-clinical C2 SCI model is a powerful, useful, and reliable pre-clinical model to study various respiratory and non-respiratory neuroplasticity events at different levels (molecular to physiology) and to test diverse putative therapeutic strategies which might improve the respiration in SCI patients.

Respiratory failure is the leading cause of death following a cervical spinal cord injury. Having a reproducible, quantifiable, and reliable pre-clinical animal model of respiratory failure induced by a partial cervical injury will help to understand the subsequent respiratory and non-respiratory neuroplasticity and allow testing putative repair strategies.

מודל Murine של חוט השדרה הצווארי פגיעה לחקר פוסט lesional הנשימה Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI). Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, social, and economical effects are staggering. Therefore, further research into the effects of TBI and effective treatments is necessary. The controlled cortical impact (CCI) model induces traumatic brain injuries ranging from mild to severe. This method uses a rigid impactor to deliver mechanical energy to an intact dura exposed following a craniectomy. Impact is made under precise parameters at a set velocity to achieve a pre-determined deformation depth. Although other TBI models, such as weight drop and fluid percussion, exist, CCI is more accurate, easier to control, and most importantly, produces traumatic brain injuries similar to those seen in humans. However, no TBI model is currently able to reproduce pathological changes identical to those seen in human patients. The CCI model allows investigation into the short-term and long-term effects of TBI, such as neuronal death, memory deficits, and cerebral edema, as well as potential therapeutic treatments for TBI.

Traumatic brain injuries (TBIs) remain a serious health problem. Using the controlled cortical impact surgery model, research on the effects of TBI and possible treatment methods may be performed.

השפעת דגם קליפת המוח מבוקר לפגיעה מוחית טראומטית

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter connected to a radio transmitter into the femoral artery of rats that underwent a T4 spinal cord transection with or without grafting of embryonic brainstem-derived neural stem cells expressing green fluorescent protein. Compared to other methods such as cannula insertion or tail-cuff, telemetry is advantageous to continuously monitor blood pressure and heart rate in freely moving animals. It is also capable of long term multiple data acquisitions. In spinal cord injured rats, basal cardiovascular data under unrestrained condition and autonomic dysreflexia in response to colorectal distension were successfully recorded. In addition, cardiovascular parameters before and after SCI can be compared in the same rat if a transmitter is implanted before a spinal cord transection. One limitation of the described telemetry procedure is that implantation in the femoral artery may influence the blood supply to the ipsilateral hindlimb.

We present a protocol for using a radio-telemetric system to record cardiovascular parameters in T4 spinal cord transected rats eight weeks after embryonic brainstem neural stem cell grafting into the lesion site. Telemetry is an advanced technique to accurately evaluate cardiovascular function in conscious freely moving spinal cord injured rats.

מערכת רדיו-telemetric לפקח פונקצית לב וכלי דם אצל חולדות עם חוט השדרה חיתוך רוחב ועוברי גזע עצבי שתלי סלולארי

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter ...

Synergetic Use of Neural Precursor Cells and Self-assembling Peptides in Experimental Cervical Spinal Cord Injury

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. Clinically, more than 50% of SCI affect the cervical spine1. As a consequence of the primary injury, a cascade of secondary mechanisms including inflammation, apoptosis, and demyelination occur finally leading to tissue scarring and development of intramedullary cavities2,3. Both represent physical and chemical barriers to cell transplantation, integration, and regeneration. Therefore, shaping the inhibitory environment and bridging cavities to create a supportive milieu for cell transplantation and regeneration is a promising therapeutic target4. Here, a contusion/compression model of cervical SCI using an aneurysm clip is described. This model is more clinically relevant than other experimental models, since complete transection or ruptures of the cord are rare. Also in comparison to the weight drop model, which in particular damage the dorsum columns, circumferential compression of the spinal cord appears advantageous. Clip closing force and duration can be adjusted to achieve different injury severity. A ring spring facilitates precise calibration and constancy of clip force. Under physiological conditions, synthetic self-assembling peptides (SAP) self-assemble into nanofibers and thus, are appealing for application in SCI5. They can be injected directly into the lesion minimizing damage to the cord. SAPs are biocompatible structures erecting scaffolds to bridge intramedullary cavities and thus, equip the damaged cord for regenerative treatments. K2(QL)6K2 (QL6) is a novel SAP introduced by Dong et al.6 In comparison to other peptides, QL6 self-assembles into &#946;-sheets at neutral pH6.14 days after SCI, after the acute stage, SAPs are injected into the center of the lesion and neural precursor cells (NPC) are injected into adjacent dorsal columns. In order to support cell survival, transplantation is combined with continuous subdural administration of growth factors by osmotic micro pumps for 7 days.

Treating cervical spinal cord injury with both self-assembling peptides (SAP) and neural precursor cells (NPC), together with growth factors, is a promising approach to promote regeneration and recovery. A contusion/compression aneurysm clip rat model of cervical SCI and combined treatment involving SAP injection and NPC transplantation is established.

שימוש סינרגטי של תאים עצביים מבשר ופפטידים עצמי הרכבה בפגיעה בחוט השדרה הניסויית צוואר הרחם

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. ...

Neural Stem Cell Transplantation in Experimental Contusive Model of Spinal Cord Injury

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can be used both to investigate the biological responses to injury and to test potential therapies. Contusion or compression injury delivered to the surgically exposed spinal cord are the most widely used models of the pathology. In this report the experimental contusion is performed by using the Infinite Horizon (IH) Impactor device, which allows the creation of a reproducible injury animal model through definition of specific injury parameters. Stem cell transplantation is commonly considered a potentially useful strategy for curing this debilitating condition. Numerous studies have evaluated the effects of transplanting a variety of stem cells. Here we demonstrate an adapted method for spinal cord injury followed by tail vein injection of cells in CD1 mice. In short, we provide procedures for: i) cell labeling with a vital tracer, ii) pre-operative care of mice, iii) execution of a contusive spinal cord injury, and iv) intravenous administration of post mortem neural precursors. This contusion model can be utilized to evaluate the efficacy and safety of stem cell transplantation in a regenerative medicine approach.

Spinal cord injury is a traumatic condition that causes severe morbidity and high mortality. In this work we describe in detail a contusion model of spinal cord injury in mice followed by a transplantation of neural stem cells.

השתלת תאי גזע עצבית בדגם ניסיוני של Contusive פגיעה בחוט השדרה

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can ...

Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The calibrated forceps model of compression injury is a convenient, low cost, and very reproducible animal model for SCI. We used a pair of modified forceps in accordance with the method published by Plemel et al. (2008) to laterally compress the spinal cord to a distance of 0.35 mm. In this video, we will demonstrate a dorsal laminectomy to expose the spinal cord, followed by compression of the spinal cord with the modified forceps. In the video, we will also address issues related to the care of paraplegic laboratory animals. This injury model produces mice that exhibit impairment in sensation, as well as impaired hindlimb locomotor function. Furthermore, this method of injury produces consistent aberrations in the pathology of the SCI, as determined by immunohistochemical methods. After watching this video, viewers should be able to determine the necessary supplies and methods for producing SCI of various severities in the mouse for studies on SCI and/or treatments designed to mitigate impairment after injury.

Spinal cord injury models should be highly reproducible. We demonstrate that the calibrated forceps compression model of spinal cord injury is an easy to use surgical method for generating reproducible injuries to the murine spinal cord.

מכויל דגם מלקחיים של חוט השדרה דחיסת פגיעה

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The ...