1. Montaje: Estructura y diseño de pinza para sujetar el animal <ol><li> El marco y la pinza para sostener el animal ha sido especialmente diseñada para acomodar el horizonte infinito (IH) Impactador Lesión medular. </li><li> La base de la estructura es una plataforma de aluminio cortado en las siguientes dimensiones (30,2 cm x 20,3 cm x 1,3 cm) con el fin de encajar en el soporte de guía de la tabla que viene de serie con el dispositivo de IH (Figura 1A). </li><li> Cuatro placas Flexaframe pie de apoyo (Fisher Scientific, Toronto, ON) se unen a la plataforma y ocho varillas de soporte Flexaframe (Fisher Scientific, Toronto, ON, 30,5 cm) se reunieron con ocho conectores de apoyo Flexaframe (fig. 1B). </li><li> Dos conectores adicionales de apoyo Flexaframe, unidos a las medias de dos barras, la casa tiene por encargo de la abrazadera (fig. 1B). </li><li> El ángulo por el cual la médula espinal del animal se hace girar con respecto a la vertical se establece por keeping uno de la barra horizontal en su lugar y variando la altura de la varilla de otro horizontal (figura 2). </li><li> La pinza es 35,6 mm de largo, 25,4 mm de alto y con una mandíbula mm 7.6 diseñada para agarrar rígidamente mantenga por debajo de la apófisis transversa de C4 a C6 (fig. 1C). Detalles adicionales sobre el diseño de abrazadera se han descrito anteriormente por Choo y col., 2009. </li></ol> 2. Cirugía <ol><li> Macho Sprague Dawley (Charles River Laboratories) con un peso de 300-350 g se anestesiaron por isoflurano (4% para la inducción y 2% para el mantenimiento) en oxígeno (1 l / min). </li><li> Una vez que los animales están bajo el plano de la anestesia, el animal se coloca en un marco estereotáxico (Kopf, Tujunga, CA). </li><li> Para minimizar el sangrado durante el procedimiento quirúrgico 0,4 ml de lidocaína (20 mg / ml; Bimeda - MTC Animal Health Inc., Cambridge, Ontario, Canadá), con la adrenalina se inyecta por vía intramuscular en el área quirúrgica en el dorsol región del cuello. </li><li> Una incisión 4-5 cm línea media dorsal se realiza utilizando un escalpelo estéril (# 15), a partir de la base del cráneo y que se extiende caudalmente. </li><li> Pinzas de Adson estériles se usan para diseccionar sin rodeos a través de la musculatura dorsal para llegar a la columna vertebral, y un separador estéril Alm (Herramientas de Bellas ciencia, North Vancouver, BC) se introduce para mantener los músculos se separan. </li><li> Utilizando el bisturí # 15, los músculos que se superponen las láminas de C4-C7 se raspan, a partir de la línea media y barrer hacia fuera lateralmente. </li><li> Se hace una incisión con un bisturí estéril (# 15) se hace a los músculos adheridos a los procesos transversales a ambos lados de la columna vertebral con el fin de ajustar la abrazadera por debajo de las apófisis transversas de C4 a C6. </li><li> Con una multa estéril con punta de Friedman y gubia de Pearson (Herramientas de Bellas ciencia, North Vancouver, BC), la izquierda C5 lámina se retira cuidadosamente para visualizar la duramadre y la médula espinal. </li><li> Una varilla con un diámetro de 1,5 mm se deslizó debajo de los brazospara sostener al animal, con lo cual la columna vertebral un poco y facilitar la inserción de sujeción. </li><li> Montar la mordaza de la pinza estéril en laterales apófisis transversas de C4 a C6 y apriete los tornillos. </li><li> Retire el separador Alm. </li></ol> 3. Lesión de la Médula Espinal <ol><li> Después de la pinza está montada sobre el animal, el animal se mueve a la impactador IH. </li><li> La pinza se inserta en los titulares de metal en las dos varillas medio del marco que se han protegido con un ángulo de 22,5 ° fuera de la línea horizontal (Figura 2). </li><li> El gato de tijera que permite ajustes de altura, estables (VWR, Mississauga, ON) se levanta hasta que el animal quede plana. </li><li> Asegurarse de que la pinza es horizontal mediante la colocación de un nivel pequeño cilindro en la parte superior de la abrazadera y apretando los tornillos. Es importante que todos los tornillos están apretados y la puesta en marcha es rígido sin ningún movimiento. </li><li> El resto del procedimiento se realiza en un MICRoscope (Leica MZ8). </li><li> Baje y dirija la punta del impactador (15 mm de diámetro, con bordes redondeados), utilizando la perilla de ajuste vertical y los dos mandos de ajuste horizontal del impactador IH hasta que el centro de la punta del impactador se cierne sobre el ápice del proceso de C6 espinosa. </li><li> Una vez que la punta impactador está centrada, girar el mando de ajuste del eje y una y dos quinto turno (1,4 mm) para mover la punta lateralmente hacia el lado izquierdo y el mando de ajuste horizontal del eje X para mover la punta impactador al centro de C5. </li><li> Baje la punta hasta que quede justo por encima de la duramadre para verificar que la punta del impactador tiene como objetivo la mitad lateral de la materia gris. </li><li> Gire la perilla de ajuste vertical dos vueltas para elevar la punta de 4 mm por encima de la duramadre. </li><li> Asegúrese de que el área de impacto es en seco mediante el uso de un hisopo de algodón o un palillo. </li><li> Establecer la fuerza deseada a 150 kdyn sobre el programa y haga clic en &quot;Experimento de Inicio&quot; para activar el impactador. </li><li> Después de la lesión, la herida se cierra en LayeRS con puntos de sutura vicryl 5-0. La buprenorfina (0,03 mg / kg SC, Temgesic, Schering-Plough Corporation, de Kenilworth, NJ) y solución salina (10 ml) se administra por vía subcutánea dos veces al día antes y dos días después de la cirugía. Los animales son supervisados ​​de cerca dos veces al día durante 2 semanas y uno a la semana durante 6 semanas después de la lesión. </li></ol> 4. Los resultados representativos Vigésimo Noveno ratas Sprague Dawley (Charles River Laboratories) con un peso de 300-350 g fueron heridos en un ajuste de la fuerza de 150 kdyn. La punta impactador estaba destinado 1,4 mm lateral a la línea media, en un ángulo de 22,5 ° fuera de la vertical. La fuerza real promedio fue de 155,55 ± 0,73 kdyn. El desplazamiento medio fue de 1512,72 ± 27,86 micras y la velocidad era 120,24 ± 0,52 mm / s (Figura 3). Las medidas de resultado del comportamiento La recuperación funcional se evaluó mediante la prueba horizontal de escalera, prueba de la crianza del cilindro, la preparación de prueba,y modificar la prueba Montoya escalera 1. Los animales fueron entrenados y evaluados antes de la lesión en las semanas 2, 4 y 6 después de la lesión. Había deficiencias significativas extremidades anteriores sufridas durante el período experimental. Prueba de escalera horizontal. Antes de la lesión, los animales sólo hizo 4,75 ± 0,73% los errores en la extremidad anterior ipsilateral al atravesar a través de la escalera horizontal espaciados irregularmente. Después de la lesión, los animales demostraron un marcado incremento en el porcentaje de errores de las extremidades anteriores. Los errores de las extremidades anteriores ipsilaterales por ciento fueron 26,97 ± 2,92%, 26,23 ± 2,84% y 22,06 ± 2,05% a los 2, 4 y 6 semanas después de la lesión, respectivamente (Figura 4). Es importante destacar que el deterioro extremidad anterior en esta prueba se mantuvo durante las 6 semanas. Prueba de Crianza del cilindro. El porcentaje de miembro superior ipsilateral (izquierda y los dos) el uso durante la exploración se redujo significativamente después de la lesión.Antes de la lesión, los animales utilizan la extremidad anterior ipsilateral 75,12 ± 2,25%. Después de la lesión a los animales utilizado el mismo lado extremidad anterior 8,59 ± 1,80% a 2 semanas, 14,25 ± 2,65% a las 4 semanas y 11,76 ± 2,66% a las 6 semanas (Figura 4B). Modificado prueba de Montoya Escalera. El número de pellets obtenidos con la extremidad anterior ipsilateral disminuyó drásticamente después de la lesión. Antes de la lesión, los animales recogidos 84,85 ± 2,88% de los beneficios de los alimentos. Sin embargo, en las semanas 2, 4 y 6 después de la lesión, los animales recuperados sólo 30,91 ± 4,03%, 28,94 ± 4,38% y 25,86 ± 3,09% de los gránulos (Figura 4C). Grooming prueba. Hubo una disminución drástica en las puntuaciones de aseo después de la lesión. Después de la LME, los resultados fueron ipsilaterales aseo 2 semanas: 2.00 ± 0.17, 4 semanas: 1,83 ± 0,17 y 6 semanas: 1,79 ± 0,11 (FiguRe 4D). Los resultados histológicos La materia blanca y la preservación de la materia gris. Un ejemplo de una lesión de la médula espinal en una fuerza de 150 kdyn, el ángulo de 22,5 ° y el objetivo lateral de 1,4 mm, se presentan en la Figura 5. La lesión resultó en un daño sustancial a la materia gris y blanca en el lado ipsilateral. Tanto corticoespinal y vías rubrospinales resultaron heridas y 23 de los 29 animales tuvieron daño parenquimatoso contenida en el lado ipsilateral. La extensión longitudinal de los daños de la sustancia blanca y gris, era de 2400 rostral y caudalmente 2400 (Figura 6). Al agregar las secciones para proporcionar una estimación bruta de la &quot;propagación acumulativo&quot; de la preservación materia blanca y gris (2000 m rostral y caudal al epicentro), el lado ipsilateral sólo tenía el 51,8% de la sustancia blanca a salvo y el 39,7% de la materia gris en comparación restante hacia el lado contralateral (Figura 6). &lt;img alt = &quot;Figura 1&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/3313/3313fig1.jpg&quot; /&gt; Figura 1. Horizonte infinito de la médula espinal impactador lesión. A. Impactador horizonte infinito y general establecido. B. Marco de configurar. C. Primer plano de la imagen de la pinza para la celebración de las apófisis transversas cervicales. D. Especificaciones (unidad: pulgadas) de la abrazadera. La tolerancia sugerido &lt;0,002 en (Choo et al. 2009). <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/3313/3313fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver más grande la figura</a> . <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig2.jpg" /> Figura 2. A. Marco de la ilustración y el correspondiente creado para lograr la rotación de la médula espinal de 0 ° (neutral) o B. 22,5 °, con el objetivo lateral de 1,4 mm. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig3.jpg" /> Figura 3. Representante de la fuerza y el desplazamiento de los gráficos impactador horizonte infinito. La flecha indica el momento en que la punta ha alcanzado impactador 20 kdyn y el momento en que la grabación de desplazamiento se inicia. La fuerza real se lee desde el pico de la curva de fuerza en función del tiempo y el desplazamiento correspondiente se calcula. Los siguientes gráficos muestran una típica 150 contusión kdyn, A. Desplazamiento vs gráfico de tiempo, B. Fuerza vs gráfico de tiempo. Estos gráficos muestran que la fuerza real alcanzada fue de 152 kdyn, y el desplazamiento del impactador en el cable de medida fue de 1287 m. <a href="/files/ftp_upload/3313/3313fig3large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver más grande la figura</a> . <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig4.jpg" /> Figura 4. Evaluaciones del comportamiento de la fuerza de 150 kdyn, angulación impactador de 22,5 ° y el objetivo de 1,4 mm a la izquierda de la línea media. A. Prueba de escalera horizontal. B. Prueba de cría del cilindro. C. Modificado prueba de escalera Montoya. D. Grooming prueba. El miembro superior ipsilateral resultado significativo y sostene deficiencias en comparación con la extremidad anterior contralateral. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig5.jpg" /> Figura 5. Imágenes representativas de la médula espinal lesionada de 1600 m rostral a caudal de 1600 m. <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig6.jpg" /> Figura 6. Evaluaciones histológicas. A. Porcentaje de materia blanca y gris a salvo. Importa alrededor de 2000 m del epicentro de los daños se libró en gran medida. B. acumulado sustancia blanca y gris a salvo dentro de 2000 m del epicentro del daño. El lado ipsilateral había ahorrado mucho menos materia blanca y gris en comparación con el lado contralateral. <a href="/files/ftp_upload/3313/3313fig6large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver más grande la figura</a> .

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	<li>Lee, J. H., Tigchelaar, S., Liu, J., Stammers, A. M., Streijger, F., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+neuroprotective+effects+of+simvastatin+and+minocycline+in+a+model+of+cervical+spinal+cord+injury.">Lack of neuroprotective effects of simvastatin and minocycline in a model of cervical spinal cord injury.</a> Exp. Neurol. 225, 219-230 (2010).</li><li>Kwon, B. K., Hillyer, J., Tetzlaff, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+research+in+spinal+cord+injury:+a+survey+of+opinion+from+the+SCI+community.">Translational research in spinal cord injury: a survey of opinion from the SCI community.</a> J. Neurotrauma. 27, 21-33 (2010).</li><li>Gensel, J. C., Tovar, C. A., Hamers, F. P., Deibert, R. J., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+histological+characterization+of+unilateral+cervical+spinal+cord+contusion+injury+in+rats.">Behavioral and histological characterization of unilateral cervical spinal cord contusion injury in rats.</a> J. Neurotrauma. 23, 36-54 (2006).</li><li>Kwon, B. K., Borisoff, J. F., Tetzlaff, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+targets+for+therapeutic+intervention+after+spinal+cord+injury.">Molecular targets for therapeutic intervention after spinal cord injury.</a> Mol. Interv. 2, 244-258 (2002).</li><li>Allen, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+of+experimental+lesions+of+spinal+cord+equivalent+to+crush+injury+of+fracture+dislocation.">Surgery of experimental lesions of spinal cord equivalent to crush injury of fracture dislocation.</a> J. Am. Med. Assoc. 57, 878-880 (1911).</li><li>Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+histological+and+locomotor+outcomes+after+spinal+cord+contusion+using+the+NYU+weight-drop+device+versus+transection.">Graded histological and locomotor outcomes after spinal cord contusion using the NYU weight-drop device versus transection.</a> Exp Neurol. 139, 244-256 (1996).</li><li>Gruner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+monitored+contusion+model+of+spinal+cord+injury+in+the+rat.">A monitored contusion model of spinal cord injury in the rat.</a> J. Neurotrauma. 9, 123-128 (1992).</li><li>Choo, A. M., Liu, J., Liu, Z., Dvorak, M., Tetzlaff, W., Oxland, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+spinal+cord+contusion,+dislocation,+and+distraction:+characterization+of+vertebral+clamps,+injury+severities,+and+node+of+Ranvier+deformations.">Modeling spinal cord contusion, dislocation, and distraction: characterization of vertebral clamps, injury severities, and node of Ranvier deformations.</a> J. Neurosci. Methods. 181, 6-17 (2009).</li><li>Whishaw, I. Q., Piecharka, D. M., Drever, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complete+and+partial+lesions+of+the+pyramidal+tract+in+the+rat+affect+qualitative+measures+of+skilled+movements:+impairment+in+fixations+as+a+model+for+clumsy+behavior.">Complete and partial lesions of the pyramidal tract in the rat affect qualitative measures of skilled movements: impairment in fixations as a model for clumsy behavior.</a> Neural. Plast. 10, 77-92 (2003).</li><li>Jones, T. A., Schallert, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overgrowth+and+pruning+of+dendrites+in+adult+rats+recovering+from+neocortical+damage.">Overgrowth and pruning of dendrites in adult rats recovering from neocortical damage.</a> Brain Res. 581, 156-160 (1992).</li><li>Liu, Y., Kim, D., Himes, B. T., Chow, S. Y., Schallert, T., Murray, M., Tessler, A., Fischer, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplants+of+fibroblasts+genetically+modified+to+express+BDNF+promote+regeneration+of+adult+rat+rubrospinal+axons+and+recovery+of+forelimb+function.">Transplants of fibroblasts genetically modified to express BDNF promote regeneration of adult rat rubrospinal axons and recovery of forelimb function.</a> J. Neurosci. 19, 4370-4387 (1999).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Soblosky, J. S., Song, J. H., Dinh, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+unilateral+cervical+spinal+cord+injury+in+the+rat:+evaluation+of+forelimb+recovery+and+histological+effects.">Graded unilateral cervical spinal cord injury in the rat: evaluation of forelimb recovery and histological effects.</a> Behav. Brain Res. 119, 1-13 (2001).</li><li>McKenna, J. E., Prusky, G. T., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cervical+motoneuron+topography+reflects+the+proximodistal+organization+of+muscles+and+movements+of+the+rat+forelimb:+a+retrograde+carbocyanine+dye+analysis.">Cervical motoneuron topography reflects the proximodistal organization of muscles and movements of the rat forelimb: a retrograde carbocyanine dye analysis.</a> J. Comp. Neurol. 419, 286-296 (2000).</li><li>Sandrow, H. R., Shumsky, J. S., Amin, A., Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspiration+of+a+cervical+spinal+contusion+injury+in+preparation+for+delayed+peripheral+nerve+grafting+does+not+impair+forelimb+behavior+or+axon+regeneration.">Aspiration of a cervical spinal contusion injury in preparation for delayed peripheral nerve grafting does not impair forelimb behavior or axon regeneration.</a> Exp. Neurol. 210, 489-500 (2008).</li><li>Popovich, P. G., Lemeshow, S., Gensel, J. C., Tovar, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Independent+evaluation+of+the+effects+of+glibenclamide+on+reducing+progressive+hemorrhagic+necrosis+after+cervical+spinal+cord+injury.">Independent evaluation of the effects of glibenclamide on reducing progressive hemorrhagic necrosis after cervical spinal cord injury.</a> Exp. Neurol. 233, 615-622 (2012).</li><li>Dunham, K. A., Siriphorn, A., Chompoopong, S., Floyd, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+graded+cervical+hemicontusion+spinal+cord+injury+model+in+adult+male+rats.">Characterization of a graded cervical hemicontusion spinal cord injury model in adult male rats.</a> J. Neurotrauma. 27, 2091-2106 (2010).</li><li>Lee, J. H., Roy, J., Sohn, H. M., Cheong, M., Liu, J., Stammers, A. T., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnesium+in+a+polyethylene+glycol+formulation+provides+neuroprotection+after+unilateral+cervical+spinal+cord+injury.">Magnesium in a polyethylene glycol formulation provides neuroprotection after unilateral cervical spinal cord injury.</a> Spine (Phila Pa 1976). 35, 2041-2048 (2010).</li><li>Alstermark, B., Isa, T., Lundberg, A., Pettersson, L. G., Tantisira, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+low+pyramidal+lesions+on+forelimb+movements+in+the+cat.">The effect of low pyramidal lesions on forelimb movements in the cat.</a> Neurosci. Res. 7, 71-75 (1989).</li></ol>

No hay conflictos de interés declarado.

En este trabajo se describe un modelo de cuello de útero contusión unilateral con el horizonte infinito (IH) impactador a una fuerza de 150 kdyn, un ángulo de 22.5 ° fuera de la vertical, y un objetivo lateral de 1,4 mm de la línea media. Con estos ajustes, que fueron capaces de producir sostenidos déficits de comportamiento en la extremidad anterior ipsilateral con la interrupción del parénquima contenida en gran parte al lado ipsilateral, donde aparentemente se produjo un daño considerable a las regiones dond...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre del equipo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentarios </td></tr><tr><td> Impactador horizonte infinito </td><td> Precision Systems e Instrumentación </td><td> IH-0400 </td><td></td></tr><tr><td> Aluminio chapa metálica </td><td> Metalsupermarlets.com </td><td> APT6061/500 </td><td></td></tr><tr><td> Flexaframe placas de soporte del pie </td><td> Los pescadores Científico </td><td> 1466625Q </td><td></td></tr><tr><td> Flexaframe varillas de soporte </td><td> Los pescadores Científico </td><td> 1466610GQ </td><td></td></tr><tr><td> Flexaframe Apoyo Conectores </td><td> Los pescadores Científico </td><td> 1466620Q </td><td></td></tr><tr><td> Fijar un </td><td> Una medida que se </td><td></td><td> Choo et al.De 2009 </td></tr><tr><td> Los titulares de metal </td><td> Una medida que se </td><td></td><td> Véase más arriba </td></tr><tr><td> Impactador la punta </td><td> Una medida que se </td><td></td><td> Diámetro: 1,15 mm </td></tr><tr><td> Marco estereotáxico </td><td> David Kopf Instruments </td><td> Modelo 900 </td><td></td></tr><tr><td> Nivel del cilindro </td><td> Yijia HERRAMIENTAS </td><td> YJ-SL0620 </td><td></td></tr><tr><td> Microscopio </td><td> Leica </td><td></td><td> Modelo #: MZ8 </td></tr><tr><td> Laboratorio de gato de tijera </td><td> VWR </td><td> 12620-902 </td><td></td></tr></tbody></table>

a contusive model of unilateral cervical spinal cord injury using the infinite horizon impactor

Mientras que la mayoría de los humanos las lesiones de la médula espinal se producen en la médula espinal cervical, la gran mayoría de las investigaciones de laboratorio emplea modelos animales de lesión de la médula espinal (LME) en el que se lesiona la médula espinal torácica. Además, dado que la mayoría de lesiones de la médula humana se producen como resultado de romo, no penetrante traumatismo (accidente por ejemplo, los vehículos de motor, lesiones deportivas) donde se violentamente la médula espinal golpeado por hueso desplazado o tejidos blandos, la mayoría de los investigadores SCI son de la opinión que los modelos de lesión más clínicamente relevantes son aquellos en los que rápidamente la médula espinal contusión. 1 Por lo tanto, un paso importante en la evaluación preclínica de nuevos tratamientos en su camino a la traducción humana es una evaluación de su eficacia en un modelo de contusión en SCI la médula espinal cervical. A continuación, describimos los aspectos técnicos y la consiguiente los resultados anatómicos y de comportamiento de un modelo unilateral de cuello de útero SCI contundente que emplea elHorizonte infinito de la médula espinal impactador lesión. Ratas Sprague Dawley, se sometió a una laminectomía unilateral del lado izquierdo en C5. Para optimizar la reproducibilidad de los resultados biomecánicos, funcionales e histológicos del modelo de lesión, contusión la médula espinal utilizando una fuerza de impacto de 150 kdyn, una trayectoria de impacto de 22,5 ° (animales girado a 22,5 °), y un lugar de impacto de de la línea media de 1,4 mm. La recuperación funcional se evaluó mediante la prueba de cilindros de cría, la prueba de escalera horizontal, el aseo y la prueba modificada de Montoya escalera para un máximo de 6 semanas, después de lo cual la médula espinal fueron evaluados histológicamente para la preservación de la materia blanca y gris. El modelo que aquí se presenta una lesión imparte fuerzas biomecánicas consistentes y reproducibles a la médula espinal, una característica importante de cualquier modelo experimental de SCI. Esto provoca una lesión histológica discreta a la mitad lateral de la médula espinal que se contiene en gran parte a la tque lado ipsilateral de la lesión. La lesión es bien tolerado por los animales, pero da lugar a un déficit funcional de la extremidad anterior que son significativos y sostenidos en las semanas posteriores a la lesión. El modelo de cuello de útero lesión unilateral que aquí se presenta puede ser un recurso para los investigadores que deseen evaluar terapias potencialmente prometedores antes de la traducción humana.

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A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

Una manera confiable y repetible para producir una lesión unilateral del cuello uterino de la médula espinal con el impactador horizonte infinito es descrito. El método aprovecha las ventajas de un marco de diseño personalizado y la abrazadera para estabilizar la columna. El procedimiento estandarizado y las lesiones biomecánicas resultado los parámetros de las lesiones suficiente y sostenida.

Un modelo de la contundente unilateral Lesión Medular Cervical Uso del Impactador Infinite Horizon

While the majority of human spinal cord injuries occur in the cervical spinal cord, the vast majority of laboratory research employs animal models of ...

a-contusive-model-unilateral-cervical-spinal-cord-injury-using

Research

JoVE Journal

Medicine

19.3K vistas.  University of British Columbia. Una manera confiable y repetible para producir una lesión unilateral del cuello uterino de la médula espinal con el impactador horizonte infinito es descrito. El método aprovecha las ventajas de un marco de diseño personalizado y la abrazadera para estabilizar la columna. El procedimiento estandarizado y las lesiones biomecánicas resultado los parámetros de las lesiones suficiente y sostenida.

Video: A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory testing in rat SCI models is needed. However, until recently, no single testing approach had been validated for SCI so that standardized methods have not been implemented across labs. Additionally, available testing methods could not be implemented acutely or when severe motor impairments existed, preventing studies of the development of SCI-induced allodynia3. Here we present two validated sensory testing methods using von Frey Hair (VFH) monofilaments which quantify changes in tactile sensory thresholds after SCI4-5. One test is the well-established Up-Down test which demonstrates high sensitivity and specificity across different SCI severities when tested chronically5. The other test is a newly-developed dorsal VFH test that can be applied acutely after SCI when allodynia develops, prior to motor recovery4-5. Each VFH monofilament applies a calibrated force when touched to the skin of the hind paw until it bends. In the up-down method, alternating VFHs of higher or lower forces are used on the plantar L5 dermatome to delineate flexor withdrawal thresholds. Successively higher forces are applied until withdrawal occurs then lower force VFHs are used until withdrawal ceases. The tactile threshold reflects the force required to elicit withdrawal in 50% of the stimuli. For the new test, each VFH is applied to the dorsal L5 dermatome of the paw while the rat is supported by the examiner. The VFH stimulation occurs in ascending order of force until at least 2 of 3 applications at a given force produces paw withdrawal. Tactile sensory threshold is the lowest force to elicit withdrawal 66% of the time. Acclimation, testing and scoring procedures are described. Aberrant trials that require a retest and typical trials are defined. Animal use was approved by Ohio State University Animal Care and Use Committee.

We describe two tactile sensory testing methods for acute or chronic periods of spinal cord injury in rats. These validated procedures can detect the development and maintenance of allodynia-like sensations.

Aguda y crónica Prueba sensorial táctil después de la lesión de la médula espinal en ratas

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Investigación

Medicina

Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

Use of genetically modified mice enhances our understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders such as a spinal cord injury (SCI). Freehand manual control used to produce a laceration model of SCI creates inconsistent injuries often associated with a crush or contusion component and, therefore, a novel technique was developed. Our model of cervical laceration SCI has resolved inherent difficulties with the freehand method by incorporating 1) cervical vertebral stabilization by vertebral facet fixation, 2) enhanced spinal cord exposure, and 3) creation of a reproducible laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm in depth without associated contusion. Compared to the standard methods of creating a SCI laceration such as freehand use of a scalpel or scissors, our method has produced a consistent lesion. This method is useful for studies on axonal regeneration of corticospinal, rubrospinal, and dorsal ascending tracts.

A novel technique to create a reproducible in vivo model of cervical spinal cord laceration injury in the mouse is described. This technique is based on spine stabilization by fixation of the cervical facets and laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm.

Controlado lesiones laceración cervical en ratones

Use of genetically modified mice enhances our  understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders  such as a spinal cord ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is described to obtain a consistent model of severe SCI. Use of a stereotactic frame and computer controlled impactor allows for creation of reproducible injury. Hypothermia and urinary tract infection pose significant challenges in the post-operative period. Careful monitoring of animals with daily weight recording and bladder expression allows for early detection of post-operative complications. The functional results of this contusion model are equivalent to transection models. The contusion model can be utilized to evaluate the efficacy of both neuroprotective and neuroregenerative approaches.

A contusion model of severe spinal cord injury is described. Detailed pre-operative, operative and post-operative steps are described to obtain a consistent model.

Un modelo Contusión de la lesión de la médula espinal severa en ratas

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

A Novel Vertebral Stabilization Method for Producing  Contusive Spinal Cord Injury

Clinically-relevant animal cervical spinal cord injury (SCI) models are essential for developing and testing potential therapies; however, producing reliable cervical SCI is difficult due to lack of satisfactory methods of vertebral stabilization. The conventional method to stabilize the spine is to suspend the rostral and caudal cervical spine via clamps attached to cervical spinous processes. &#160;However, this method of stabilization fails to prevent tissue yielding during the contusion as the cervical spinal processes are too short to be effectively secured by the clamps (Figure 1). &#160;Here we introduce a new method to completely stabilize the cervical vertebra at the same level of the impact injury. &#160;This method effectively minimizes movement of the spinal column at the site of impact, which greatly improves the production of consistent SCIs. &#160;We provide visual description of the equipment (Figure 2-4), methods, and a step-by-step protocol for the stabilization of the cervical 5 vertebra (C5) of adult rats, to perform laminectomy (Figure 5) and produce a contusive SCI thereafter. &#160;Although we only demonstrate a cervical hemi-contusion using the NYU/MASCIS impactor device, this vertebral stabilization technique can be applied to other regions of the spinal cord, or be adapted to other SCI devices. &#160;Improving spinal cord exposure and fixation through vertebral stabilization may be valuable for producing consistent and reliable injuries to the spinal cord. &#160;This vertebral stabilization method can also be used for stereotactic injections of cells and tracers, and for imaging using two-photon microscopy in various neurobiological studies.

Vertebral stabilization is necessary for minimizing variability, and for producing consistent experimental spinal cord injuries.&#160; Using a customized stabilizing apparatus in conjunction with the NYU/MASCIS impactor device, we have demonstrated here the proper equipment and procedure for generating reproducible hemi-contusive cervical (C5) spinal cord injuries in adult rats.

Una novela Vertebral Método de Estabilización para Producir contuso Lesiones de la Médula Espinal

Clinically-relevant animal cervical spinal cord injury (SCI) models are essential for developing and testing potential therapies; however, producing ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed to improve/ameliorate the respiratory failure following high cervical spinal cord injury (SCI). Here we propose a murine pre-clinical model of high SCI at the cervical 2 (C2) metameric level to study diverse post-lesional respiratory neuroplasticity. The technique consists of a surgical partial injury at the C2 level, which will induce a hemiparalysis of the diaphragm due to a deafferentation of the phrenic motoneurons from the respiratory centers located in the brainstem. The contralateral side of the injury remains intact and allows the animal recovery. Unlike other SCIs which affect the locomotor function (at the thoracic and lumbar level), the respiratory function does not require animal motivation and the quantification of the deficit/recovery can be easily performed (diaphragm and phrenic nerve recordings, whole body ventilation). This pre-clinical C2 SCI model is a powerful, useful, and reliable pre-clinical model to study various respiratory and non-respiratory neuroplasticity events at different levels (molecular to physiology) and to test diverse putative therapeutic strategies which might improve the respiration in SCI patients.

Respiratory failure is the leading cause of death following a cervical spinal cord injury. Having a reproducible, quantifiable, and reliable pre-clinical animal model of respiratory failure induced by a partial cervical injury will help to understand the subsequent respiratory and non-respiratory neuroplasticity and allow testing putative repair strategies.

Un modelo murino de la médula espinal cervical Lesión en estudio post-lesional Respiratorio Neuroplasticidad

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI). Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, social, and economical effects are staggering. Therefore, further research into the effects of TBI and effective treatments is necessary. The controlled cortical impact (CCI) model induces traumatic brain injuries ranging from mild to severe. This method uses a rigid impactor to deliver mechanical energy to an intact dura exposed following a craniectomy. Impact is made under precise parameters at a set velocity to achieve a pre-determined deformation depth. Although other TBI models, such as weight drop and fluid percussion, exist, CCI is more accurate, easier to control, and most importantly, produces traumatic brain injuries similar to those seen in humans. However, no TBI model is currently able to reproduce pathological changes identical to those seen in human patients. The CCI model allows investigation into the short-term and long-term effects of TBI, such as neuronal death, memory deficits, and cerebral edema, as well as potential therapeutic treatments for TBI.

Traumatic brain injuries (TBIs) remain a serious health problem. Using the controlled cortical impact surgery model, research on the effects of TBI and possible treatment methods may be performed.

Controlado Modelo de Impacto cortical de la lesión cerebral traumática

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter connected to a radio transmitter into the femoral artery of rats that underwent a T4 spinal cord transection with or without grafting of embryonic brainstem-derived neural stem cells expressing green fluorescent protein. Compared to other methods such as cannula insertion or tail-cuff, telemetry is advantageous to continuously monitor blood pressure and heart rate in freely moving animals. It is also capable of long term multiple data acquisitions. In spinal cord injured rats, basal cardiovascular data under unrestrained condition and autonomic dysreflexia in response to colorectal distension were successfully recorded. In addition, cardiovascular parameters before and after SCI can be compared in the same rat if a transmitter is implanted before a spinal cord transection. One limitation of the described telemetry procedure is that implantation in the femoral artery may influence the blood supply to the ipsilateral hindlimb.

We present a protocol for using a radio-telemetric system to record cardiovascular parameters in T4 spinal cord transected rats eight weeks after embryonic brainstem neural stem cell grafting into the lesion site. Telemetry is an advanced technique to accurately evaluate cardiovascular function in conscious freely moving spinal cord injured rats.

Un sistema de radio-telemetría para monitorizar la función cardiovascular en ratas con la médula espinal y transección Embryonic Stem Neural injertos de células

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter ...

Synergetic Use of Neural Precursor Cells and Self-assembling Peptides in Experimental Cervical Spinal Cord Injury

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. Clinically, more than 50% of SCI affect the cervical spine1. As a consequence of the primary injury, a cascade of secondary mechanisms including inflammation, apoptosis, and demyelination occur finally leading to tissue scarring and development of intramedullary cavities2,3. Both represent physical and chemical barriers to cell transplantation, integration, and regeneration. Therefore, shaping the inhibitory environment and bridging cavities to create a supportive milieu for cell transplantation and regeneration is a promising therapeutic target4. Here, a contusion/compression model of cervical SCI using an aneurysm clip is described. This model is more clinically relevant than other experimental models, since complete transection or ruptures of the cord are rare. Also in comparison to the weight drop model, which in particular damage the dorsum columns, circumferential compression of the spinal cord appears advantageous. Clip closing force and duration can be adjusted to achieve different injury severity. A ring spring facilitates precise calibration and constancy of clip force. Under physiological conditions, synthetic self-assembling peptides (SAP) self-assemble into nanofibers and thus, are appealing for application in SCI5. They can be injected directly into the lesion minimizing damage to the cord. SAPs are biocompatible structures erecting scaffolds to bridge intramedullary cavities and thus, equip the damaged cord for regenerative treatments. K2(QL)6K2 (QL6) is a novel SAP introduced by Dong et al.6 In comparison to other peptides, QL6 self-assembles into &#946;-sheets at neutral pH6.14 days after SCI, after the acute stage, SAPs are injected into the center of the lesion and neural precursor cells (NPC) are injected into adjacent dorsal columns. In order to support cell survival, transplantation is combined with continuous subdural administration of growth factors by osmotic micro pumps for 7 days.

Treating cervical spinal cord injury with both self-assembling peptides (SAP) and neural precursor cells (NPC), together with growth factors, is a promising approach to promote regeneration and recovery. A contusion/compression aneurysm clip rat model of cervical SCI and combined treatment involving SAP injection and NPC transplantation is established.

El uso sinérgico de las células precursoras neuronales y Péptidos de autoensamblaje en Experimental cervical Lesión de la Médula Espinal

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. ...

Neural Stem Cell Transplantation in Experimental Contusive Model of Spinal Cord Injury

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can be used both to investigate the biological responses to injury and to test potential therapies. Contusion or compression injury delivered to the surgically exposed spinal cord are the most widely used models of the pathology. In this report the experimental contusion is performed by using the Infinite Horizon (IH) Impactor device, which allows the creation of a reproducible injury animal model through definition of specific injury parameters. Stem cell transplantation is commonly considered a potentially useful strategy for curing this debilitating condition. Numerous studies have evaluated the effects of transplanting a variety of stem cells. Here we demonstrate an adapted method for spinal cord injury followed by tail vein injection of cells in CD1 mice. In short, we provide procedures for: i) cell labeling with a vital tracer, ii) pre-operative care of mice, iii) execution of a contusive spinal cord injury, and iv) intravenous administration of post mortem neural precursors. This contusion model can be utilized to evaluate the efficacy and safety of stem cell transplantation in a regenerative medicine approach.

Spinal cord injury is a traumatic condition that causes severe morbidity and high mortality. In this work we describe in detail a contusion model of spinal cord injury in mice followed by a transplantation of neural stem cells.

Neural Trasplante de células madre en Experimental contuso Modelo de Lesión de la Médula Espinal

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can ...

Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The calibrated forceps model of compression injury is a convenient, low cost, and very reproducible animal model for SCI. We used a pair of modified forceps in accordance with the method published by Plemel et al. (2008) to laterally compress the spinal cord to a distance of 0.35 mm. In this video, we will demonstrate a dorsal laminectomy to expose the spinal cord, followed by compression of the spinal cord with the modified forceps. In the video, we will also address issues related to the care of paraplegic laboratory animals. This injury model produces mice that exhibit impairment in sensation, as well as impaired hindlimb locomotor function. Furthermore, this method of injury produces consistent aberrations in the pathology of the SCI, as determined by immunohistochemical methods. After watching this video, viewers should be able to determine the necessary supplies and methods for producing SCI of various severities in the mouse for studies on SCI and/or treatments designed to mitigate impairment after injury.

Spinal cord injury models should be highly reproducible. We demonstrate that the calibrated forceps compression model of spinal cord injury is an easy to use surgical method for generating reproducible injuries to the murine spinal cord.

Calibrado Pinzas Modelo de Lesión Medular Compresión

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The ...