אנו מודים Annalisa Buffo להצעות והערות, תובנות ומאוריציו Grassano, מרינה Boido וErmira Pajaj לירי. עבודה זו מומנה על ידי FP7-MC-214,003-2 (מארי קירי ראשוני ההדרכה AXREGEN רשת) וCompagnia די סן פאולו, פרויקט gliarep.

1. טרום ניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שוקל רוז בנגל בצינור 1.5 מ&quot;ל ולהתמוסס בתמיסת מלח סטרילית עד שמגיע לריכוז סופי של 15 מ&quot;ג / מ&quot;ל. סנן לעקר דרך מסנן 0.2 מיקרומטר ולאחסן אותו בחושך בטמפרטורה של עד חודשים חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר את כל מכשירי הניתוח ידי מעוקר. אזור הניתוח צריך להיות מחוטא פחות משעה לפני ביצוע הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את משקל גוף העכבר כדי להתאים את המינון של רוז בנגל להיות מוזרקת. הזרקנו 10 משקל חיה μl / g בCD1 נקבות עכברי 12 שבועות ישנים בפרוטוקול הנוכחי. הסכום של רוז בנגל דרוש כדי לייצר ניתן לקבוע את גודל נגע קליפת המוח הרצוי בקלות בקבוצה נפרדת של ניסויים ראשוניים על ידי בדיקת מינונים שונים (בדרך כלל 2 μl / g, 5 μl / g או 10 משקל גוף μl / ז). שימו לב שהסכום של רוז בנגל להיות מוזרקים תלוי מאוד בתנאי הניסוי, בעיקר הסוג של מקור אורבשימוש ומשך החשיפה לאור. במחקר הנוכחי, 10 (150 מיקרוגרם / גרם) מינון נמצא μl / g להיות נחוץ כדי לגרום photothrombosis בחשיפה לאור במשך 15 דקות, ואילו קבוצות אחרות דיווחו כי גם 50 מיקרוגרם / g 6,8 ו -100 מיקרוגרם / g 10 זריקת intraperitoneal הייתה מספיקה לגרימת נגע photothrombotic. </li></ol> 2. נוהל הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי עכברים עם isoflurane בתא שקוף אינדוקציה (3.5-4% לזירוז, 1.5-2% לשמירה) בשיעור של 50% (V / V) תערובת גז חד תחמוצת dinitrogen oxygen/50% (V / V). הרדמה גזים מאפשרת בעקבות מהיר עד של בעלי החיים והן ברמה של גז הרדמה יכולה להיות מותאמת בקלות. לחלופין, עכברים יכולים גם להיות מורדמים על ידי תערובת קטמין-xylazine. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כשהוא הגיע הרדמה עמוקה, להסיר את החיה מורדמת מתא האינדוקציה, למקם אותו במסגרת stereotaxic ולשמור על הרדמה באמצעות מסיכת הפנים. התאם isofluraמינון ne כדי להשיג רמה נאותה הרדמה. לפקח על קצב הנשימה לאורך כל ההליך ולוודא שהוא קבוע (40 - 60 נשימות לדקה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש צובט הבוהן על מנת להבטיח את החיה מורדמת היא עמוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל משחה העין, על מנת למנוע את העיניים מהתייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס בעדינות את הבדיקה רקטלית כדי לנטר את הטמפרטורה לאורך כל ההליכים כירורגיים. הגדר את כרית חימום משוב מבוקרת הקשורים לשמירה על טמפרטורת גוף העכבר על 37 ± 0.5 ° C. </li></ol> 3. ניתוח להארת אזור היעד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את קרקפת העכבר עם מכונת גילוח חשמלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקיפות לאבטח את הראש ולהכניס את סורגי האוזן לתוך meatus החיצוני. היזהר שלא עור התוף של נזק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את העור על פני השטח עם לסירוגין swipes של אתנול 70% ובטאדין באמצעות צמר גפן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש באזמל כדי לעשות חתך לאורך קו האמצע מעין leVEL עד לצוואר. החל retractors עור כדי לשמור על הגולגולת חשופה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות לחזור periostium את הקצוות של הגולגולת עם אזמל ולתת פני הגולגולת לייבש באמצעות צמר גפן סטרילי. זהה את גבחת ולמבדה. הנח micropipette זכוכית על גבחת כנקודת ייחוס, ולאחר מכן להעביר אותו לקואורדינטות של אזור עניין שלך. האזור של עניין נבחר למאמר זה הוא בערך בצורה נמרצות, שמרכז כ 2 מ&quot;מ לרוחב גבחת, ומשתרע על שטח של כ -30 מ&quot;מ 2, הכולל את חלק גדול של קליפת המוח הסנסורית פי עכבר המוח על ידי האטלס ופרנקלין 11 Paxinos. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סמן את המיקום של ריבית עם נקודות התייחסות והכניס סיבים אופטיים בקשר הדוק עם משטח הגולגולת כדי למנוע פיזור אור, אך לשים לב לא להפעיל לחץ עליו. האזור המואר יכול להיות מוגבל על ידי יישום על גולגולת מסכה עם צמצם קטן או כובע בקצה הסיב האופטי GUIדה. </li></ol> 4. הזרקת רוז בנגל והפעלה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טען את פתרון נגל רוז במזרק 1 מ&quot;ל ולחשב את הסכום כדי להיות מוזרק בהתאם למינון של 10 μl / גרם של משקל גוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך זריקת intraperitoneal איטית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בוא המפוזר הצבע ולהזין את זרם הדם. לאחר 5 דקות, לעבור על נורת האור הקרה. הימנע מתאורה של בעלי החיים על ידי כל מקור אחר של אור. אנחנו השתמשנו הפנס סיבים אופטי של עצמת W 150. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 15 דקות של תאורה, להפסיק חשיפה לאור ותפר את הפצע. חמש דקות של תאורה כבר מייצרות אוטם ו10 דקות היא סביר מספיק כדי להשיג אפקט מקסימאלי 12. על מנת למזער את השונות, אנו בוחרים להאיר במשך 15 דקות. </li></ol> 5. תפר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את retractors העור ולהחיל את תמיסת מלח סטרילית כדי למנוע התייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסגור את הפצע באמצעות needl חיתוך הפוךדואר ומשי או חוט תפר ניילון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקטוע את אספקת הרדמה, להסיר בזהירות את העכבר ממנגנון stereotaxic ולשים אותו על כרית חימום מראש חימם עד שהוא ער לחלוטין, ולאחר מכן להחזיר אותו לכלוב שלה. טמפרטורת גוף צריך להיות במעקב צמוד לאורך כל ההליכים כדי להגביל את ההשתנות בהארכת האוטם. על פי הריכוז והתוואי של ממשל, רוז עדיין ניתן להבחין בנגל בזרם הדם במשך כמה שעות לאחר הזרקת 13. מעדיף את שמיכת החימום למנורת ההתחממות, כדי למנוע נזקים משניים פוטנציאליים (רוז בנגל קליטת אורך הגל הוא בספקטרום הירוק). </li></ol>

<ol>
	<li>Lopez, A. D., Mathers, C. D., Ezzati, M., Jamison, D. T., Murray, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+and+regional+burden+of+disease+and+risk+factors.">Global and regional burden of disease and risk factors.</a> Lancet. 367, 1747-1757 (2001).</li><li>Mathers, C. D., Boerma, T., Ma Fat, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+and+regional+causes+of+death.">Global and regional causes of death.</a> Br. Med. Bull. 92, 7-32 (2009).</li><li>Rosenblum, W. I., El-Sabban, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+aggregation+in+the+cerebral+microcirculation:+effect+of+aspirin+and+other+agents.">Platelet aggregation in the cerebral microcirculation: effect of aspirin and other agents.</a> Circ. Res. 40, 320-328 (1977).</li><li>Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+reproducible+brain+infarction+by+photochemically+initiated+thrombosis.">Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis.</a> Ann. Neurol. 17, 497-504 (1985).</li><li>Bergeron, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducing+photochemical+cortical+lesions+in+rat+brain.">Inducing photochemical cortical lesions in rat brain.</a> Curr. Protoc. Neurosci. Chapter 9, Unit 9 16 (2003).</li><li>Lee, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+cerebral+ischemia+in+a+mouse+model.">Photochemically induced cerebral ischemia in a mouse model.</a> Surg. Neurol. 67, 620-625 (2007).</li><li>Dietrich, W. D., Watson, B. D., Busto, R., Ginsberg, M. D., Bethea, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+cerebral+infarction.+I.+Early+microvascular+alterations.">Photochemically induced cerebral infarction. I. Early microvascular alterations.</a> Acta Neuropathol. 72, 315-325 (1987).</li><li>Schroeter, M., Jander, S., Stoll, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+induction+of+focal+cerebral+ischemia+in+mice+by+photothrombosis+of+cortical+microvessels:+characterization+of+inflammatory+responses.">Non-invasive induction of focal cerebral ischemia in mice by photothrombosis of cortical microvessels: characterization of inflammatory responses.</a> J. Neurosci. Methods. 117, 43-49 (2002).</li><li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+ischemia+after+bilateral+carotid+artery+occlusion+and+intraluminal+suture+occlusion+in+mice:+evaluation+of+the+patency+of+the+posterior+communicating+artery.">Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 18, 570-579 (1998).</li><li>Sigler, A., Goroshkov, A., Murphy, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hardware+and+methodology+for+targeting+single+brain+arterioles+for+photothrombotic+stroke+on+an+upright+microscope.">Hardware and methodology for targeting single brain arterioles for photothrombotic stroke on an upright microscope.</a> J. Neurosci. Methods. 170, 35-44 (2008).</li><li>Franklin, K. B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , (1997).</li><li>Piao, M. S., Lee, J. K., Jang, J. W., Kim, S. H., Kim, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+photochemically+induced+spinal+cord+injury.">A mouse model of photochemically induced spinal cord injury.</a> J. Korean Neurosurg. Soc. 46, 479-483 (2009).</li><li>Silva, V. M., Corson, N., Elder, A., Oberdorster, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rat+ear+vein+model+for+investigating+in+vivo+thrombogenicity+of+ultrafine+particles+(UFP).">The rat ear vein model for investigating in vivo thrombogenicity of ultrafine particles (UFP).</a> Toxicol. Sci. 85, 983-989 (2005).</li><li>Watson, B. D., Prado, R., Dietrich, W. D., Ginsberg, M. D., Green, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+spinal+cord+injury+in+the+rat.">Photochemically induced spinal cord injury in the rat.</a> Brain Res. 367, 296-300 (1986).</li><li>Van Reempts, J., Van Deuren, B., Van de Ven, M., Cornelissen, F., Borgers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flunarizine+reduces+cerebral+infarct+size+after+photochemically+induced+thrombosis+in+spontaneously+hypertensive+rats.">Flunarizine reduces cerebral infarct size after photochemically induced thrombosis in spontaneously hypertensive rats.</a> Stroke. 18, 1113-1119 (1987).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2, 396-409 (2005).</li><li>Kleinschnitz, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blocking+of+platelets+or+intrinsic+coagulation+pathway-driven+thrombosis+does+not+prevent+cerebral+infarctions+induced+by+photothrombosis.">Blocking of platelets or intrinsic coagulation pathway-driven thrombosis does not prevent cerebral infarctions induced by photothrombosis.</a> Stroke. 39, 1262-1268 (2008).</li><li>Porritt, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photothrombosis-induced+infarction+of+the+mouse+cerebral+cortex+is+not+affected+by+the+Nrf2-activator+sulforaphane.">Photothrombosis-induced infarction of the mouse cerebral cortex is not affected by the Nrf2-activator sulforaphane.</a> PLoS One. 7, e41090 (2012).</li><li>Baskin, Y. K., Dietrich, W. D., Green, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+effective+behavioral+tasks+for+evaluating+sensorimotor+dysfunction+following+traumatic+brain+injury+in+mice.">Two effective behavioral tasks for evaluating sensorimotor dysfunction following traumatic brain injury in mice.</a> J. Neurosci Methods. 129, 87-93 (2003).</li><li>Markgraf, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+histopathologic+consequences+of+photothrombotic+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+artery+in+Sprague-Dawley+and+Wistar+rats.">Comparative histopathologic consequences of photothrombotic occlusion of the distal middle cerebral artery in Sprague-Dawley and Wistar rats.</a> Stroke. 24, 286-292 (1993).</li><li>Wester, P., Watson, B. D., Prado, R., Dietrich, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+photothrombotic+'ring'+model+of+rat+stroke-in-evolution+displaying+putative+penumbral+inversion.">A photothrombotic 'ring' model of rat stroke-in-evolution displaying putative penumbral inversion.</a> Stroke. 26, 444-450 (1995).</li><li>Hu, X., Wester, P., Brannstrom, T., Watson, B. D., Gu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+and+reproducible+focal+cortical+ischemia+with+or+without+late+spontaneous+reperfusion+generated+by+a+ring-shaped,+laser-driven+photothrombotic+lesion+in+rats.">Progressive and reproducible focal cortical ischemia with or without late spontaneous reperfusion generated by a ring-shaped, laser-driven photothrombotic lesion in rats.</a> Brain Res. Brain Res. Protoc. 7, 76-85 (2001).</li><li>Maxwell, K. A., Dyck, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+reproducible+focal+ischemic+lesions+in+neonatal+mice+by+photothrombosis.">Induction of reproducible focal ischemic lesions in neonatal mice by photothrombosis.</a> Dev. Neurosci. 27, 121-126 (2005).</li><li>Kuroiwa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+rat+model+of+photothrombotic+ischemia+and+infarction+within+the+caudoputamen.">Development of a rat model of photothrombotic ischemia and infarction within the caudoputamen.</a> Stroke. 40, 248-253 (2009).</li></ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

שינויים והחלפות בגלל שיא הספיגה שלה ב 562 ננומטר, לייזר אור ירוק ממנורת קשת קסנון מסוננת נבחר במקור כדי להקרין רוז בנגל רגיש לאור. למרות עירור לייזר בתיווך עדיין היה בשימוש recently5, ניתן להחליף אותו על ידי מנורת אור הקרה שגם להבטיח עירו...

בתחילת המאה ה -21, שבץ איסכמי הוא הפרעה הרסנית, המייצגת את הגורם השני של נכות לטווח ארוכים 1 והגורם השני לתמותה בעולם, שבו השבץ היווה כ 5,7 מיליון מקרי מוות בשנת 2004 2. למרות המאמצים הרבים שהשקיעו, אין עדיין טיפול יעיל זמין כדי לשפר את ההתאוששות תפקודית לאחר שבץ. מודלים של בעלי חיים של שבץ נמצאים בשימוש נרחב בתחום מחקר שבץ מאחר שהם מאפשרים מידול של הפתופיזיולוגיה של נזק איסכמי ולבדוק את היעילות של אסטרטגיות neuroprotective שונות in vivo. רוב המודלים האלה שואפים לגרום לאוטם נרחב על ידי הפרעה (זמני או קבוע) זרימת הדם בתוך עורק המוח האמצעי, ואילו דגמים אחרים פותחו ללמוד נגעים בגודל קטן באזורים ספציפיים, בדרך כלל רכב וקליפת המוח חושי. עם זאת, מספר גורמים עשויים לתרום ליצירת ACתואר ertain של השתנות במחקרים ניסיוניים שבץ, כוללים זן העכבר בשימוש, גיל והמין של בעלי חיים שנכללו במחקר, ומעל לכל, את הטכניקה אימצה כדי לגרום את נזק איסכמי. בהתייחס לנקודה האחרונה, משך הזמן והפולשנות של הניתוח (כלומר את הצורך בפתיחת גולגולת), כמו גם את המיומנות כירורגית נדרשת למפעיל כדי לגרום לנגע איסכמי מהימן הם גורמים קריטיים להצלחה ובלתי משוחד במחקר שבץ vivo . הרעיון של photothrombosis בתחילה הוצע על ידי רוזנבלום ואל Sabban בשנת 1977 והפך 3 נודע על ידי היישום שלה במוח חולדה על ידי ווטסון ואח&#39; בשנת 1985 4 שבטכניקה השתפרה במידה רבה, ולהגדיר את הבסיס של המודל הנוכחי 3. - 6. גישת photothrombotic מטרתו לגרום לאוטם קליפת המוח דרך צילום ההפעלה של צבע רגיש לאור נמסרה בעבר למערכת דם, WHIch התוצאה פקקת כלי מקומי באזורים החשופים לאור. כאשר הצבע במחזור מואר באורך הגל המתאים על ידי מקור אור קר, הוא משחרר אנרגיה למולקולות חמצן, אשר בתורו לייצר כמות גדולה של מוצרי חמצן גופייה תגובתי. ביניים חמצן אלו לגרום לחמצון ממברנת תא האנדותל, שהובילו להידבקות ואגרגציה של טסיות דם, וסופו של דבר להיווצרות של thrombi אשר קובעת הפרעה זרימת מוחין מקומית 7. Photothrombosis הוא מודל איסכמי שאינם קנוני שלא לחסום או לשבור את עורק אחד בלבד כפי שקורה בדרך כלל בשבץ מוחי אנושי, אבל גורם לנגעים בכלי שטחיים יותר, וכתוצאה מההפרעה סלקטיבית של זרימת דם באזורים החשופים לאור. מסיבה זו, גישה זו עשויה להיות מתאימה ללימודים תאיים ומולקולריים של פלסטיות בקליפת המוח. היתרון העיקרי של שיטה זו נמצא בפשטות הפעלה שלו.יתר על כן, ניתן לבצע בקלות בphotothrombosis כארבעים דקות לכל בעל חיים, כולל המתנה בת עשרים דקות (3 דקות להרדמה; 1 דקות לגלח את הקרקפת; 3 עד 5 דקות למקום את החיה על מנגנון stereotaxic; 2 דקות לקרצף קרקפת עם תמיסת חיטוי, עושה חתך ולנקות את הגולגולת; 2 עד 4 דקות למקום הקרים סיבי האור; 1 דקות להזריק את פתרון נגל הוורד; 5 דקות-ההמתנה לדיפוזיה intraperitoneal; 15 דקות של תאורה, ו5 דקות כדי לנקות את הפצע ותפר את בעלי החיים). יתר על כן, אין צורך במומחיות כירורגית לבצע טכניקה זו כנגע מושרה באמצעות תאורה פשוטה של ​​הגולגולת השלמה. בניגוד לחסימת עורקים קלסית, בשיטה זו קובעת occlusions סלקטיבית של microvessels pial וintraparenchymal בתוך האזור המוקרן ומקטינה את השונות בין נגעים ככלי אין ביטחונות שנותר כדי לספק חמצן באזור ממוקד. למרות האופי המסוים שלה,מניות נזק photothrombotic מנגנונים חיוניים המתרחשים בשבץ מוחי. בדומה לחסימת עורק בשבץ מוחי אנושי, הצטברות טסיות דם והיווצרות קריש דם לקבוע הפרעה של זרימת דם באזור המוקרן 7. כמו כן, מודל זה גם מניות תגובות דלקתיות חיוניות כמו בחסימת עורק מוח אמצעית 8. עם זאת, בגלל גבולות delimitated היטב, אזור פנומברה, אשר מתאים לאזור של חילוף חומרים נשמרו באופן חלקי, הוא מאוד מופחת או חסר של אחרי נגע photothrombotic. גבול ברור זה יכול להקל על המחקר של תגובות הסלולר באזור קליפת המוח איסכמי או בשלמותה. מודל עכבר Photothrombosis מתאים במיוחד למחקרי שבץ במגוון רחב של בעלי חיים מהונדסים. ואכן מודלים הקלסיים לא יכולים להתאים לכל הזנים והמחקרים תקופה ארוכות בC57BL / 6 זן עכבר דיווח יחס תמותה גבוה שיכולים לגרום להטיה 9.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td>MATERIAL NAME</td>
 <td>COMPANY </td>
 <td>CATALOGUE NUMBER</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Solutions and chemicals</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rose Bengal </td>
 <td>Sigma, Italy </td>
 <td>330000 </td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Isoflurane Vet </td>
 <td>Merial </td>
 <td> 103120022 </td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Betadine </td>
 <td>Asta Medica </td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Paraformaldehyde </td>
 <td>Sigma-Aldrich </td>
 <td> 158127 </td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Surgical material and equipment</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Fluosorber Filter </td>
 <td>Havard apparatus </td>
 <td> 340415 </td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>150W fiber optic illuminator</td>
 <td>Photonic</td>
 <td>PL3000</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Temperature Controller for Plate TCAT-2DF </td>
 <td>Havard apparatus</td>
 <td>727561 </td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Stereotaxic Instrument </td>
 <td>Stoelting</td>
 <td> 51950 </td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Operating microscope </td>
 <td>Takagi </td>
 <td> OM8 </td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heating pad </td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Oxygen and nitrogen gas</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Surgery Tools</td>
 <td>World precision instrument </td>
 <td></td>
 <td>Optic fiber taps and mask are custom-made </td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

photothrombotic ischemia: a minimally invasive and reproducible photochemical cortical lesion model for mouse stroke studies

מודל שבץ photothrombotic מטרתו לגרום נזק איסכמי באזור בקליפת המוח שניתן על ידי אמצעי צילום ההפעלה של צבע רגיש לאור הזריק בעבר. בעקבות תאורה, הצבע מופעל ומייצר חמצן גופייה שרכיבי נזקים של קרומי תאי אנדותל, עם הצטברות טסיות דם ולאחר מכן היווצרות thrombi, שסופו של דבר קובע את ההפרעה של זרימת דם מקומית. גישה זו, בתחילה הוצעה על ידי רוזנבלום ואל Sabban בשנת 1977, מאוחר יותר השתפר ובוטסון בשנת 1985 במוח חולדה ולהגדיר את הבסיס של המודל הנוכחי. כמו כן, הזמינות המוגברת של קווי עכבר מהונדסים עוד תרמה להעלאת ריבית על מודל photothrombosis. בקצרה, צבע רגיש (רוז בנגל) מוזרק intraperitoneally ונכנס לזרם הדם. כאשר מוארים על ידי מקור אור קר, הצבע הופך להיות פעיל וגורם לניזק אנדותל עם הפעלה ופקק טסיות דם, וכתוצאה מכך מקומיתהפרעה לזרימת דם. מקור האור יכול להיות מיושם על הגולגולת השלמה ללא צורך בפתיחת הגולגולת, המאפשר מיקוד של כל אזור בקליפת המוח של עניין בדרך לשחזור ולא פולשנית. העכבר לאחר מכן נתפר ואפשרו להתעורר. ההערכה של נזק איסכמי יכולה להתבצע במהירות על ידי כלוריד triphenyl-tetrazolium או כתמים סגול cresyl. טכניקה זו מייצרת אוטם בגודל קטן וגבולות מופרדים היטב, וזה יתרון מאוד לאפיון מדויק של תאים או מחקרים תפקודיים. יתר על כן, הוא מתאים במיוחד ללימוד תגובות תאיות ומולקולריים שבבסיס פלסטיות מוח בעכברים מהונדסים.

פרוטוקול זה יהיה לייצר נגע קליפת המוח שכבר נראה לעין על נתיחה של קליפת המוח לעין בלתי מזוינת (איורים 1 א &#39;, 1 ג&#39;). נגע photothrombotic מתפתח בשכבות בקליפת המוח שטחיות ועמוקות שבו הרקמה שקופה במידה מספקת כדי לאפשר צילום הפעלה של רוז בנגל. מדידה של היקף אוטם מוחי יכול?...

Watch this Scientific Journal Video about Photothrombotic Ischemia: A Minimally Invasive and Reproducible Photochemical Cortical Lesion Model for Mouse Stroke Studies at JoVE.com

Photothrombotic Ischemia: A Minimally Invasive and Reproducible Photochemical Cortical Lesion Model for Mouse Stroke Studies

Photothrombosis היא טכניקה מהירה, מינימאלי פולשנית לגרימת אוטם קטן ומופרד היטב בתחומי העניין באופן מאוד לשחזור. זה מתאים במיוחד ללימוד תגובות תאיות ומולקולריים שבבסיס פלסטיות מוח בעכברים מהונדסים.

איסכמיה Photothrombotic: דגם נגע פולשנית לשעתק פוטו קליפתיים לעכבר מחקרי שבץ

The photothrombotic stroke model aims to induce an ischemic damage within a given cortical area by means of photo-activation of a previously injected ...

photothrombotic-ischemia-minimally-invasive-reproducible

Research

JoVE Journal

Medicine

34.4K Views.  University of Turin. Photothrombosis היא טכניקה מהירה, מינימאלי פולשנית לגרימת אוטם קטן ומופרד היטב בתחומי העניין באופן מאוד לשחזור. זה מתאים במיוחד ללימוד תגובות תאיות ומולקולריים שבבסיס פלסטיות מוח בעכברים מהונדסים.

Video: Photothrombotic Ischemia: A Minimally Invasive and Reproducible Photochemical Cortical Lesion Model for Mouse Stroke Studies

A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of Willis perforation (CWp) and proven by intracranial pressure (ICP) monitoring. Thereby a homogenous blood distribution in subarachnoid spaces surrounding the arterial circulation and cerebellar fissures is achieved. Animal physiology is maintained by intubation, mechanical ventilation, and continuous on-line monitoring of various physiological and cardiovascular parameters: body temperature, systemic blood pressure, heart rate, and hemoglobin saturation. Thereby the cerebral perfusion pressure can be tightly monitored resulting in a less variable volume of extravasated blood. This allows a better standardization of endovascular filament perforation in mice and makes the whole model highly reproducible. Thus it is readily available for pharmacological and pathophysiological studies in wild type and genetically altered mice.

A standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage by intraluminal Circle of Willis perforation is described. Vessel perforation and subarachnoid bleeding are monitored by intracranial pressure monitoring. In addition various vital parameters are recorded and controlled to maintain physiologic conditions.

מודל Murine של תת עכבישי דימום

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid  hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of  Willis ...

Lesion Explorer: A Video-guided, Standardized Protocol for Accurate and Reliable MRI-derived Volumetrics in Alzheimer's Disease and Normal Elderly

Obtaining in vivo human brain tissue volumetrics from MRI is often complicated by various technical and biological issues. These challenges are exacerbated when significant brain atrophy and age-related white matter changes (e.g. Leukoaraiosis) are present. Lesion Explorer (LE) is an accurate and reliable neuroimaging pipeline specifically developed to address such issues commonly observed on MRI of Alzheimer's disease and normal elderly. The pipeline is a complex set of semi-automatic procedures which has been previously validated in a series of internal and external reliability tests1,2. However, LE's accuracy and reliability is highly dependent on properly trained manual operators to execute commands, identify distinct anatomical landmarks, and manually edit/verify various computer-generated segmentation outputs.
LE can be divided into 3 main components, each requiring a set of commands and manual operations: 1) Brain-Sizer, 2) SABRE, and 3) Lesion-Seg. Brain-Sizer's manual operations involve editing of the automatic skull-stripped total intracranial vault (TIV) extraction mask, designation of ventricular cerebrospinal fluid (vCSF), and removal of subtentorial structures. The SABRE component requires checking of image alignment along the anterior and posterior commissure (ACPC) plane, and identification of several anatomical landmarks required for regional parcellation. Finally, the Lesion-Seg component involves manual checking of the automatic lesion segmentation of subcortical hyperintensities (SH) for false positive errors.
While on-site training of the LE pipeline is preferable, readily available visual teaching tools with interactive training images are a viable alternative. Developed to ensure a high degree of accuracy and reliability, the following is a step-by-step, video-guided, standardized protocol for LE's manual procedures.

Lesion Explorer: A Video-guided, Standardized Protocol for Accurate and Reliable MRI-derived Volumetrics in Alzheimer&#039;s Disease and Normal Elderly

Lesion Explorer (LE) is a semi-automatic, image-processing pipeline developed to obtain regional brain tissue and subcortical hyperintensity lesion volumetrics from structural MRI of Alzheimer's disease and normal elderly. To ensure a high level of accuracy and reliability, the following is a video-guided, standardized protocol for LE's manual procedures.

הנגע Explorer: מודרך וידאו, סטנדרטי פרוטוקול Volumetrics מדויק ואמין הנגזר-MRI במחלה אלצהיימר וקשישים רגיל

Obtaining in vivo human brain tissue volumetrics from MRI is often complicated by various technical and biological issues. These challenges are ...

Minimally Invasive Thumb-sized Pterional Craniotomy for Surgical Clip Ligation of Unruptured Anterior Circulation Aneurysms

Less invasive surgical approaches for intracranial aneurysm clipping may reduce length of hospital stay, surgical morbidity, treatment cost, and improve patient outcomes. We present our experience with a minimally invasive pterional approach for anterior circulation aneurysms performed in a major tertiary cerebrovascular center and compare the results with an aged matched dataset from the Nationwide Inpatient Sample (NIS). From August 2008 to December 2012, 22 elective aneurysm clippings on patients &#8804;55 years of age were performed by the same dual fellowship-trained cerebrovascular/endovascular neurosurgeon. One patient (4.5%) experienced transient post-operative complications. 18 of 22 patients returned for follow-up imaging and there were no recurrences through an average duration of 22 months. A search in the NIS database from 2008 to 2010, also for patients aged &#8804;55 years of age, yielded 1,341 hospitalizations for surgical clip ligation of unruptured cerebral aneurysms. Inpatient length of stay and hospital charges at our institution using the minimally invasive thumb-sized pterional technique were nearly half that of NIS (length of stay: 3.2 vs 5.7 days; hospital charges: $52,779 vs. $101,882). The minimally invasive thumb-sized pterional craniotomy allows good exposure of unruptured small and medium-sized supraclinoid anterior circulation aneurysms. Cerebrospinal fluid drainage from key subarachnoid cisterns and constant bimanual microsurgical techniques avoid the need for retractors which can cause contusions, localized venous infarctions, and post-operative cerebral edema at the retractor sites. Utilizing this set of techniques has afforded our patients with a shorter hospital stay at a lower cost compared to the national average.

Minimally invasive thumb-sized pterional craniotomy for aneurysm clipping has afforded our patients with a shorter hospital stay at a lower cost compared to the national average.

מינימאלי אגודל בגודל פולשנית Pterional Craniotomy לקשירת קליפ כירורגי של מפרצת Circulation Unruptured הקדמית

Less invasive surgical approaches for intracranial aneurysm clipping may reduce length of hospital stay, surgical morbidity, treatment cost, and improve ...

A Thrombotic Stroke Model Based On Transient Cerebral Hypoxia-ischemia

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA thrombolysis) rarely produces benefits in mechanical occlusion-based experimental models, which dominate preclinical stroke research. This split between the bench and bedside suggests the need to employ tPA-responsive models in preclinical stroke research. To this end, a simple and tPA-reactive thrombotic stroke model is invented and described here. This model consists of transient occlusion of the unilateral common carotid artery and delivery of 7.5% oxygen through a face mask in adult mice for 30 min, while maintaining the animal rectal temperature at 37.5 &#177; 0.5 &#176;C. Although reversible ligation of the unilateral carotid artery or hypoxia each suppressed cerebral blood flow only transiently, the combination of both insults caused lasting reperfusion deficits, fibrin and platelet deposition, and large infarct in the middle cerebral artery-supplied territory. Importantly, tail-vein injection of recombinant tPA at 0.5, 1, or 4 hr post-tHI (10 mg/kg) provided time-dependent reduction of the mortality rate and infarct size. This new stroke model is simple and can be standardized across laboratories to compare experimental results. Further, it induces thrombosis without craniectomy or introducing pre-formed emboli. Given these unique merits, the tHI model is a useful addition to the repertoire of preclinical stroke research.

Thromboembolic stroke models are vital tools for optimizing the recanalization therapy. Here we report a murine thrombotic stroke model based on transient cerebral hypoxic-ischemic (tHI) insult, which triggers thrombosis and infarction, and responds favorably to tissue plasminogen activator (tPA)-mediated fibrinolysis in a therapeutic window similar to those in stroke patients.

דגם שבץ טרומבוטיים בהתבסס על היפוקסיה-איסכמיה מוחית חולפת

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA ...

Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia

Spinal cord ischemia is a fatal complication following thoracoabdominal aortic aneurysm surgery. Researchers can investigate the strategies for preventing and treating this complication using experimental models of spinal cord ischemia. The model described here demonstrates varying degrees of paraplegia that relate to the length of occlusion following thoracic aortic occlusion in a rat spinal cord ischemia model.
A 2-Fr. balloon-tipped catheter was advanced through the femoral artery into the descending thoracic aorta until the catheter tip was placed at the left subclavian artery in anesthetized male Sprague-Dawley rats. Spinal cord ischemia was induced by inflating the catheter balloon. After a set period of occlusion (9, 10, or 11 min), the balloon was deflated. Neurologic assessment was performed using the motor deficit index at 24 h after surgery, and the spinal cord was harvested for histopathological examination.
Rats that underwent 9 min of aortic occlusion showed mild and reversible motor impairment in the hind limb. Rats subjected to 10 min of aortic occlusion presented with moderate but reversible motor impairment. Rats subjected to 11 min of aortic occlusion displayed complete and persistent paralysis. The motor neurons in the spinal cord sections were more preserved in rats subjected to shorter duration of aortic occlusion.
Researchers can achieve a reproducible hind limb motor deficit following thoracic aortic occlusion using this spinal cord ischemia model.

This study demonstrates the technique to make a minimally invasive and easily reproducible model of spinal cord ischemia in rats. Various degrees of hind limb motor deficit can be produced by controlling the aortic occlusion time.

גרעון מוטורי חוזר לאחר חסימת אבי העורקים במודל חולדה של איסכמיה של חוט השדרה

Spinal cord ischemia is a fatal complication following thoracoabdominal aortic aneurysm surgery. Researchers can investigate the strategies for preventing ...

A Minimally Invasive Model to Analyze Endochondral Fracture Healing in Mice Under Standardized Biomechanical Conditions

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an increased use of mouse models in orthopedic research was noted, most probably because mouse models offer a large number of genetically-modified strains and special antibodies for the analysis of molecular mechanisms of fracture healing. To control the biomechanical conditions, well-characterized osteosynthesis techniques are mandatory, also in mice. Here, we report on the design and use of a closed bone healing model to stabilize femur fractures in mice. The intramedullary screw, made of medical-grade stainless steel, provides through fracture compression an axial and rotational stability compared to the mostly used simple intramedullary pins, which show a complete lack of axial and rotational stability. The stability achieved by the intramedullary screw allows the analysis of endochondral healing. A large amount of callus tissue, received after stabilization with the screw, offers ideal conditions to harvest tissue for biochemical and molecular analyses. A further advantage of the use of the screw is the fact that the screw can be inserted into the femur with a minimally invasive technique without inducing damage to the soft tissue. In conclusion, the screw is a unique implant that can ideally be used in closed fracture healing models offering standardized biomechanical conditions.

This protocol describes a minimally invasive osteosynthesis technique using an intramedullary screw for standardized stabilization of femur fractures, which can be used to analyze endochondral bone healing in mice.

מודל פולשנית לניתוח שבר Endochondral ריפוי בעכברים בתנאים מתוקננים ביו-מכני

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an ...

Electromagnetic Navigation Transthoracic Nodule Localization for Minimally Invasive Thoracic Surgery

The increased use of chest computed tomography (CT) has led to an increased detection of pulmonary nodules requiring diagnostic evaluation and/or excision. Many of these nodules are identified and excised via minimally invasive thoracic surgery; however, subcentimeter and subsolid nodules are frequently difficult to identify intra-operatively. This can be mitigated by the use of electromagnetic transthoracic needle localization. This protocol delineates the step-by-step process of electromagnetic localization from the pre-operative period to the postoperative period and is an adaptation of the electromagnetically guided percutaneous biopsy previously described by Arias et al. Pre-operative steps include obtaining a same day CT followed by the generation of a three-dimensional virtual map of the lung. From this map, the target lesion(s) and an entry site are chosen. In the operating room, the virtual reconstruction of the lung is then calibrated with the patient and the electromagnetic navigation platform. The patient is then sedated, intubated, and placed in the lateral decubitus position. Using a sterile technique and visualization from multiple views, the needle is inserted into the chest wall at the prechosen skin entry site and driven down to the target lesion. Dye is then injected into the lesion and, then, continuously during needle withdrawal, creating a tract for visualization intra-operatively. This method has many potential benefits when compared to the CT-guided localization, including a decreased radiation exposure and decreased time between the dye injection and the surgery. Dye diffusion from the pathway occurs over time, thereby limiting intra-operative nodule identification. By decreasing the time to surgery, there is a decrease in wait time for the patient, and less time for dye diffusion to occur, resulting in an improvement in nodule localization. When compared to electromagnetic bronchoscopy, airway architecture is no longer a limitation as the target nodule is accessed via a transparenchymal approach. Details of this procedure are described in a step-by-step fashion.

Presented here is a protocol for lung nodule localization using dye marking via electromagnetically navigated transthoracic needle access. The technique described here can be accomplished in the peri-operative period to optimize nodule localization and to successful resection when performing minimally invasive thoracic surgery.

לוקליזציה של גושים טרנסתורציים לניווט אלקטרומגנטי לניתוחי חזה זעיר פולשניים

The increased use of chest computed tomography (CT) has led to an increased detection of pulmonary nodules requiring diagnostic evaluation and/or ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many areas of biomedical research due to its cost-effectiveness and its translation to humans. This protocol describes a method to create a preclinical free skin flap model in rats with ischemia-reperfusion injury. The described 3 cm x 6 cm rat free skin flap model is easily obtained after the placement of several vascular ligatures and the section of the vascular pedicle. Then, 8 h after the ischemic insult and completion of the microsurgical anastomosis, the free skin flap develops the tissue damage. These ischemia-reperfusion injury-related damages can be studied in this model, making it a suitable model for evaluating therapeutic agents to address this pathophysiological process. Furthermore, two main monitoring techniques are described in the protocol for the assessment of this animal model: transit-time ultrasound technology and laser speckle contrast analysis.

Here, we describe a pre-clinical animal model for studying the pathophysiology of ischemia-reperfusion injury in reconstructive microsurgery. This free skin flap model based on the superficial caudal epigastric vessels in the rat may also allow for the evaluation of different therapies and compounds to counteract ischemia-reperfusion injury-related damage.

מודל מפרה קליני לחקר איסכמיה-reperfusion פציעה במיקרו-כירורגיה משחזרת

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Evaluation of Capnography Sampling Line Compatibility and Accuracy when Used with a Portable Capnography Monitor

Capnography is commonly used to monitor patient&#8217;s ventilatory status. While sidestream capnography has been shown to provide a reliable assessment of end-tidal CO2 (ETCO2), its accuracy is commonly validated using commercial kits composed of a capnography monitor and its matching disposable nasal cannula sampling lines. The purpose of this study was to assess the compatibility and accuracy of cross-paired capnography sampling lines with a single portable bedside capnography monitor. A series of 4 bench tests were performed to evaluate the tensile strength, rise time, ETCO2 accuracy as a function of respiratory rate, and ETCO2 accuracy in the presence of supplemental O2. Each bench test was performed using specialized, validated equipment to allow for a full evaluation of sampling line performance. The 4 bench tests successfully differentiated between sampling lines from different commercial sources and suggested that due to increased rise time and decreased ETCO2 accuracy, not all nasal cannula sampling lines provide reliable clinical data when cross-paired with a commercial capnography monitor. Care should be taken to ensure that any cross-pairing of capnography monitors and disposable sampling lines is fully validated for use across respiratory rates and supplemental O2 flow rates commonly encountered in clinical settings.

The goal of this study was to evaluate the accuracy of capnography sampling lines used in conjunction with a portable bedside capnography monitor. Sampling lines from 7 manufacturers were evaluated for tensile strength, rise time, and ETCO2 accuracy as a function of respiratory rate or supplemental oxygen flow rate.

הערכה של תאימות ודיוק של קו דגימה קפונוגרפיה בעת שימוש עם צג קפונוגרפיה נייד

Capnography is commonly used to monitor patient&#8217;s ventilatory status. While sidestream capnography has been shown to provide a reliable assessment ...

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely correlated with a history of articular cartilage damage and ligament avulsion. Surgical animal models of OA of the knee play an important role in understanding the onset and progression of post-traumatic OA and aid in the development of novel therapies for this disease. However, non-surgical models have been recently considered to avoid traumatic inflammation that could affect the evaluation of the intervention. 
In this study, an intra-articular cartilage lesion rat model induced by in vivo cyclic compressive loading was developed, which allowed researchers to (1) determine the optimal magnitude, speed, and duration of load that could cause focal cartilage damage; (2) assess post-traumatic spatiotemporal pathological changes in chondrocyte vitality; and (3) evaluate the histological expression of destructive or protective molecules that are involved in the adaptation and repair mechanisms against joint compressive loads. This report describes the experimental protocol for this novel cartilage lesion in a rat model.

Here, we present the cyclic loading-induced intra-articular cartilage lesion model of the rat knee, generated by 60 cyclic compressions over 20 N, resulting in damage to the femoral condylar cartilage in rats.

שיטה לא פולשנית ליצירת מודל סחוס תוך מפרקי הנגרם על ידי העמסה מחזורית של ברך החולדה

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...