עבודה זו נתמכת על ידי המילטון-פיירלי NHMRC מלגה (ר&quot;ה, א&quot;ל); תכנית התמיכה בתשתית התפעולית של הממשלה ויקטוריאני (RH, EW) ומארי קירי Industria-האקדמיה השותפות ומסלולי מענק בחסות הנציבות האירופית (ME, פ&quot;ד) . המחברים מבקשים להודות לד&quot;ר אנדרה Miyague, ד&quot;ר פרנצ&#39;סקה רוסו, גב &#39;רוזיטה Kinnart ומר איוון Laermans למומחיות הטכנית שלהם בהפקת סרטון זה.

פרוטוקול הניסוי הבא הוא אושר על ידי ועדת האתיקה של בעלי החיים, אוניברסיטה הקתולית של לובן, לובן, בלגיה. אנחנו אחרי שתוארו קודם לכן 13 הליך כירורגי הכוללים כמה שינויים מתודולוגיים, בעיקר בהליך הרדמה. 1. גרימת הגבלת גדילה תוך רחמית (IUGR) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זמן מתאריך ארנבות בהריון (ההיברידי Dendermonde וניו זילנד הלבן) הם שוכנו בכלובים בודדים על לוח הזמנים של שעות אור 12/12 עם גישה למים וlibitum הסטנדרטי ארנב צ&#39;או מודעה מגיל הריון (GA) 18 ימים. ב-GA 25 ימים (טווח מלא הוא כ 31 ימים), ארנבות מועברות לחדר הניתוח ליצירה כירורגית של IUGR. לפני הניתוח, באופן אקראי יקצה &quot;במקרה&quot; (IUGR) וקרן &quot;שליטה&quot; רחם ברחם ארנב bicornuate באמצעות תוכנה אקראית (תוכנת GraphPad, ארה&quot;ב) 19. גודל מדגם צריך להיקבע על ידי חישובי כוח אדם על ידי Researchers לשאלה של אינטרס שלהם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדמה לפרוצדורה. הרדמה אינדוקציה מושגת על ידי מתן קטמין 35 מ&quot;ג / ק&quot;ג (Ceva סנטה Animale, בריסל, בלגיה) וxylazine מ&quot;ג / ק&quot;ג (Ceva סנטה Animale, בריסל, בלגיה) לתוך שריר 5 ברגלו האחורית. הרדמה ולאחר מכן שמרה על עם שאיפת תערובת של 1-4% isoflurane (Isoba וטרינר; אבוט מעבדות בע&quot;מ, Queenborough, קנט, בריטניה) בO 2 ב2 ליטר / דקה. הנח oximeter דופק (Nellcor N-20, Covidien, אירלנד) על הבוהן השנייה ושלישית האימהית כדי לפקח על קצב לב ואת הרוויה עורקי O 2 ברציפות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הליך כירורגי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Premedication. לפני תחילת ניתוח, לנהל אנטיביוטיקה טיפול מונע פניצילין G, 300,000 IU (קלע פארמה, Hoogstraten, בלגיה), אצטט מדרוקסיפרוגסטרון tocolytic רחם 0.9 מ&quot;ג / ק&quot;ג (Depo-פרוברה, פרמסיה Upjohn, Puurs, בלגיה) ועצירות כאבים 0.03 מ&quot;ג / ק&quot;ג (Temgesic; שרינג פלאו) תת עורי במזרק 2.5 מ&quot;ל אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת ארנב. מניחים את הארנב על כרית חימום למשך של הניתוח. להסיר שיער משדה ניתוח הבטן ולהחיל חיטוי povidone-יוד 7.5% (פולידין, פרדו, קונטיקט, ארה&quot;ב). פרוטוקול מלא מזוהם אז מועסק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> laparotomy בטן. לחדור אתר החתך עם הרדמה המקומית (2 מ&quot;ל 1% לידוקאין, B בראון רפואי, בלגיה) תת עורי. אתר החתך צריך להיות כ 5 ס&quot;מ באורך בקו האמצע, בתחתון 2/3 מהבטן. ברגע שהעור נפתח, להשתמש בתערובת של נתיחה חדה ובוטה לחשוף את נדן Rectus. יש להקפיד להימנע מבלוטות החלב ממוקמות כלי דם אימהיים משני צדי קו האמצע בכניסה (איור 1 א). לתפוס את נדן Rectus והצפק, אוהל כדי למנוע הכללה מכוונת של תוכן בטן, ולהיכנס בזהירות באמצעות נתיחה חדה (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החצנת רחם. מקיפה את השדה כירורגית עם וילונות גזה הספוגים בתמיסת מלח מחוממת. לתפוס בזהירות וexteriorize שני צידי רחם bicornuate. יש להקפיד שלא למקם גם בנרתיק או בסופו השחלות של כל קרן רחם תחת מתח, מכיוון שהדבר עלול לגרום לדימום בלתי רצוי, כאב והתכווצות רחם. עוזר רציפות משקה רחם נחשף עם מי מלח מחומם כדי למנוע התכווצויות רחם. למשש ולהקליט את מספר העוברים המצויים בכל קרן. לפי אמנה, את העובר בסוף השחלות מיועד העובר הראשון. קרן רחם אחת היא מקרה הצופר והשני הוא קרן השליטה. זהה את העבר הוקצה באופן אקראי מקרה הקרן לזירוז IUGR ולאחר מכן להחליף את צופר השליטה בחזרה לתוך הבטן (עוברים בקרה הפנימית). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> IUGR מושרה בניתוח. זהה את כלי שלייה לכל השק הריון במקרה הקרן המיועד (איור 1 ג).בניתוח לקשור 40-50% מכולים אלה באמצעות 5-0 polyglactin תפר (Ethicon Vicryl, ג&#39;ונסון אנד ג&#39;ונסון רפואי, ארה&quot;ב) (איורים 1D-1E). בפועל, יש לעתים קרובות שלוש חבילות כלי דם המספקים כל השק הריון. במקרה זה, את חבילת כלי הדם הגדולה ביותר היא ligated. לאחר מלא, הרחם מושקה שוב עם מי מלח מחומם וחזר בזהירות אל הבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגירת בטן. סגור את הבטן בשתי שכבות רציפה באמצעות ריצת 2-0 polyglactin תפר (Ethicon Vicryl, ג&#39;ונסון אנד ג&#39;ונסון רפואי, ארה&quot;ב). סגור את העור עם subcuticular 3-0 polyglactin תפר (Ethicon Vicryl, ג&#39;ונסון אנד ג&#39;ונסון רפואי, ארה&quot;ב). תרסיס ספריי אלומיניום על הפצע כדי למנוע מהארנב מאוחר יותר מפריע לתפרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שחזור. להפסיק הרדמה ולבחון את ההתאוששות של נשימה באופן הדוק. הארנב אז שוכנו כמתואר לעיל עם גישה כלרצונך אוכל ומים וצפו מדי יום. </li></ol></li></ol> 2. ביצוע אקו העוברי ואולטראסאונד דופלר פעמו גל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אותו הארנב מועבר לאחר מכן ב-GA 30 ימים לאקו והערכת אולטרסאונד. הארנב מונח על כרית חימום למשך תקופת הבדיקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדמה לפרוצדורה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדמה אינדוקציה מושגת על ידי מתן קטמין 35 מ&quot;ג / ק&quot;ג (Ceva סנטה Animale, בריסל, בלגיה) וxylazine 5 מ&quot;ג / ק&quot;ג (Ceva סנטה Animale, בריסל, בלגיה) לתוך שריר. ברגע שקט ורגוע, לקבל גישה לוריד באמצעות צינורית 24 מד (BD Insyte-W, בקטון דיקינסון עירוי תרפים מערכות, יוטה, ארה&quot;ב) מוחדרת לוריד אוזן היקפי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על הרדמה בעירוי מתמשך של קטמין וxylazine: 2 מ&quot;ל קטמין (100 מ&quot;ג / מ&quot;ל) ו 1.5 מ&quot;ל xylazine (20 מ&quot;ג / מ&quot;ל) ל46.5 מ&quot;ל של תמיסת מלח רגיל, ולאחר מכן החדיר באמצעות משאבת מזרק ב 40 מ&quot;ל / שעה. לאבטח את שלוש דרך ברז ולצרף מזרק 5 מ&quot;ל של הרדמה הצלה: 2 מ&quot;לקטמין (100 מ&quot;ג / מ&quot;ל) ו 1.5 מ&quot;ל xylazine (20 מ&quot;ג / מ&quot;ל). הבולוסים של 0.5 מיליליטר הצלת הרדמה נדרשים רק לעתים נדירות. לנהל עצירות כאבים 0.03 מ&quot;ג / ק&quot;ג (Temgesic; רינג פלאו) subcutaneouslyprior לניתוח. L חמצן 2 / דקה מוחלת על ידי מסכה. הנח oximeter דופק (Nellcor N-20, Covidien, אירלנד) על הבוהן השנייה ושלישית האימהית כדי לפקח על קצב לב ואת הרוויה עורקי O 2 ברציפות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> laparotomy בטן והחצנת רחם. עיינו 1.3.3 ו1.3.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיצוב עוברי לאקו ובדיקת אולטרסאונד. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את הארנב במצב לרוחב פונה כלפי החוקר. זה מאפשר שליפה קלה של השק הריון אחד לבדיקה ומונע מתיחה מוגזמת על כלי שלייה. עד כמה שניתן, נסה exteriorize יחיד השק הריון בזמן כדי לצמצם את החשיפה. להבטיח את השק ההריון החשוף מושם על גזה מושקה עםחימם מלוח. כדי להבטיח תוצאות אחידות בין קבוצות שונות במחקר, בדרך כלל רק עוברים בשחלות ומסתיימת בנרתיק של כל קרן רחם נמצאים בשימוש בבדיקת אולטרסאונד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפקוד לב העובר הוא מאוד רגיש להשפעה של החצנת רחם, שינוי בטמפרטורה ולחץ ממתמר אולטרסאונד על ספינות השליה. כדי למזער את ההשפעות הללו iatrogenic סביבתי ובלבול בתפקוד לב, בדיקת אולטרסאונד חייבת להתחיל מייד לאחר החצנה של השק ההריון, והיא צריכה להיות שיטתית ויעילה. מניסיוננו, שינויים בתפקוד לב העובר מתרחשים רק לעתים רחוקות ב5 דקות הראשונה של חשיפה. אם רדיקרדיה העוברית הוא נתקל, הסר את הבדיקה אולטרסאונד, למקם את העובר כדי למנוע מסתלסל של כלי fetoplacental, להשקות עם מי מלח מחומם או לחזור בקצרה את השק ההריון בחזרה לתוך הבטן האימהית. אם רדיקרדיה העוברית היא מתמשכת, הבדיקה זו להנקהTUS יש ננטש לטובת בוחן את העובר הבא. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אקו העוברי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Visualsonics VEVO 2100 (טורונטו, קנדה) פלטפורמת microultrasound ברזולוציה גבוהה עם תוכנת ניתוח לב ומתח המותקנת נדרש. מתמר VisualSonics MS-250 (VisualSonics, טורונטו, קנדה) משמש לרכישת נתונים. זו יש תדר מרכזי של 21 MHz עם רוחב פס MHz 13-24. המוקד הגיאומטרי הוא 15 מ&quot;מ, רוחב התמונה המקסימאלי הוא 23 מ&quot;מ ועומק התמונה המקסימאלי הוא 30 מ&quot;מ. טביעת הרגל היא 28 מ&quot;מ X 5.75. הנתונים הוא רכש בהתאם להנחיות של האגודה האמריקנית אקו וסטנדרטים לביצוע echocardiogram העוברי. 20 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נתוני רכישה 1: תצוגה לרוחב ברמה של הארבע קאמרי תצוגה לרוחב, להקליט לולאת Cine B-מצב של לפחות חמישה מחזורי לב כדי לקבוע זן, שיעור זן, מהירות ועקירה.. זה ניתחו מקוון באמצעות VevoStrainלאחר מכן ניתן לקבל (Visualsonics, טורונטו, קנדה) אלגוריתם כפי שתואר לעיל בכתב העת בפירוט. מדדי אקו 21 M-mode בתצוגה רגילה זה. מדידות של שניהם מנותק מבנה ותפקוד לב ואז ניתן לנתח: חדרית הפנימית וקטרים ​​במחיצה בהתכווצות וירוויח, נפחים, נפח פעימה, קיצור השבר, מקטע פליטה ותפוקת לב 21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתן לחזור על תצוגת הפסגה ברמה של ארבעה תא הצפייה, לולאת Cine B-מצב לפסגת VevoStrain ניתוחים כפי שתואר לעיל: נתוני רכישה 2.. אקו M-mode משמש כדי להעריך tricuspid (TAPSE) וטיול טבעתי צניפי מטוס הסיסטולי (MAPSE) ומתח אורך ושיעור זן. 22,23 תצוגת הפסגה זו מאפשרת גם הערכה של צורות גל מהירות זרימת valvular ומדד ביצועי שריר הלב שונה כמו בעבר תאר. 24 </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Fetoplacental הדופק נופף דופלר ultrasound. </li></ol> גל מהירות זרימה (FVW) של עורק הטבור מתקבלים על ידי איתור את כלי הטבור באמצעות דופלר צבע ולאחר מכן הצבת שער מדגם דופלר פעם מעל עורק הטבור בלולאה חופשי של חבל טבור. -25 העורק (MCA) FVW המוח האמצעי הוא ממוקם על ידי הצבת שער מדגם דופלר פעם רק מעבר למקורו של MCA פעם אחת המעגל של ויליס ממוקם על ידי דופלר הצבע. 26 FVW ductus venosus (DV) מתקבל על ידי הצבת שער מדגם דופלר פעם בחלק הפרוקסימלי של DV ראה עם הצבע דופלר שבו מקורו בוריד טבור intrahepatic גם בתצוגת sagittal או רוחבית של העובר. -26 מדד pulsatility (PI) מחושב לא מקוון באמצעות תוכנת ניתוח לב וכלי דם VisualSonics.

יש מחבר פרופ &#39;יאן D&#39;hooge הסכם מחקר עם VisualSonics. יש החוקרים שנותרו ללא גילויים.

יש לנו להשתמש בגישה תוקף עבר של ניתוח להקטנת זרימת דם שלייה בארנב לייצר IUGR 13-16 ולאחר מכן בחינת תפקוד לב העובר 14 כדי לתאר את טכנולוגית microultrasound וניתוח תפקוד לב קיים בVEVO VisualSonics 2100. היכולת להתרבות שינויי fetoplacental דופלר של עוברי IUGR אדם במודל חיה קטן ולאחר מכן כדי...

נטל של מחלות לב, כי לא יכול להיות מוגזם נובע מהגבלת צמיחה תוך רחמית של עובר (IUGR). זהו הגורם המוביל ללידה עובר מתה לאחר מומים מולדים. IUGR 1 מתייחס לעובר שלא מצליח לממש את פוטנציאל הצמיחה שלה והוא בדרך כלל תוצאה של אי ספיקת שליה. 2 בניצולים, בריאות לב וכלי דם חולה ניכרה על פני תוחלת החיים בתפקוד שריר הלב נראית לעין בינקות ובילדות 3,4 ויתר לחץ דם לאחר 5, 6 סוכרת, השמנת יתר ומתפתח בחייו בוגרים - כל גורמי הסיכון הלבביים המצטברים מלידה ולקראת המוות בטרם עת ממחלת לב איסכמית 7. פיתוח מודלים של בעלי חיים כדי לאפיין את התקשורת אימהית-העוברית שקובעת IUGR ותגובה העוברית לאחר זמינות מצע מופחתת הוא הכרחי אם אנחנו רוצים גם להבין טובים יותר את הפתופיזיולוגיה של מכונית הקשורה לIUGRליקוי DIAC ולפתח אסטרטגיות Cardio-מגן כדי לשפר את הבריאות של עובר ואחרי לידה. בהקשר זה, מודלים רבים ושונים ברחבי מינים שונים כבר תאר. 8 IUGR מושרה בדרך כלל על ידי אימהית תחת תזונה עם תזונה דלת חלבונים במכרסמים, 9 אבלציה כירורגית או קשירה של זרימת דם ברחם המכרסמים וגינאה חזירי 10 או חסימה של עורק טבור בכבשים. 11 עם זאת, נראה כי אין מודל משחזר באופן מלא את IUGR 12 בני האדם. במחקר מתודולוגי הנוכחי, השתמשנו בגישה תוקף גם מהפרעה של כלי דם ושלייה סלקטיבית בארנב 13-16 שלא רק מייצר תגובות לב וכלי דם עובריות שנצפו באולטרסאונד 14 קליניים, אלא גם מאפשר חקירה של תפקוד לב העובר עם אקו רומן באמצעות טכנולוגיית microultrasound של VEVO VisualSonics 2100. בעוד אולטרסאונד דופלר של fetoplכלי acental נשאר אבן הפינה של מעקב טרום לידה הנוכחית של עוברי IUGR 17, הוא יותר ויותר מנוצלים אקו הפונקציונלי כדי לספק תובנות חדשות על הפתופיזיולוגיה מחלה ולהעריך רווחת העובר. 18 בהתאם לכך, כאן אנחנו לוקחים את ההתפתחויות הללו מהמחקר קליני ולתאר את מודל חיה ש נמלים לא רק תחכום הדמיה זו, אלא גם מספק את הפלטפורמה הניסיונית לחקור מסלולים מכניסטית ותרופות חדשות.

<table border="1">
	<tbody>
 <tr>
 <td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ketamine</td>
 <td>Ceva Sante Animale</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.ceva.com/en" target="_blank">http://www.ceva.com/en</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Xylazine</td>
 <td>Ceva Sante Animale</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.ceva.com/en" target="_blank">http://www.ceva.com/en</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Depot Provera</td>
 <td>Pharmacia Upjohn</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Penicillin G</td>
 <td>Kela Pharma</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.kela.be" target="_blank">http://www.kela.be</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td >Lidocaine</td>
 <td>B Braun Medical</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.bbraun.com/" target="_blank">http://www.bbraun.com/</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Temgesic</td>
 <td>Schering-Plough</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.merck-animal-health-usa.com/" target="_blank">http://www.merck-animal-health-usa.com/</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Isolurane</td>
 <td>Isoba Vet; Abbott Laboratories Ltd</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.abbottanimalhealth.com/index.html" target="_blank">http://www.abbottanimalhealth.com/index.html</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ethicon</td>
 <td>Johnson and Johnson</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures" target="_blank">http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ethicon</td>
 <td>Johnson and Johnson</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures" target="_blank">http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ethicon</td>
 <td>Johnson and Johnson</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures" target="_blank">http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>VEVO 2100</td>
 <td>VisualSonics</td>
 <td>SN100-0032</td>
 <td><a href="http://www.visualsonics.com/" target="_blank">http://www.visualsonics.com/</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Aquasonic Gel</td>
 <td>Parker Laboratories</td>
 <td>01 02</td>
 <td><a href="http://www.parkerlabs.com/ultrasound_products.html" target="_blank">http://www.parkerlabs.com/ultrasound_products.html</a></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Nellcor N-20PA Pulse oximeter</td>
 <td>Covidien</td>
 <td></td>
 <td><a href="http://www.nellcor.com/prod/PRODUCT.ASPX?S1=POX&amp;S2=MON&amp;id=282&amp;V" target="_blank">http://www.nellcor.com/prod/PRODUCT.ASPX?S1=POX&amp;S2=MON&amp;id=282&amp;V</a></td>
 </tr>
	 </tbody>
 </table>

fetal echocardiography and pulsed-wave doppler ultrasound in a rabbit model of intrauterine growth restriction

צמיחת הגבלה (IUGR) תוצאות תוך רחמים של העובר בתפקוד לב לא תקין שניכרו antenatally בשל התקדמות באולטרסאונד דופלר ואקו fetoplacental העוברי. יותר ויותר, שיטות הדמיה אלה להיות מועסקות קליניים לבחינת תפקוד לב ולהעריך את רווחתם ברחם, ובכך מנחה את העיתוי של החלטות מולדים. הנה, השתמשנו במודל ארנבת של IUGR המאפשר ניתוח של תפקוד לב באופן רלוונטי מבחינה קלינית. תוך שימוש בהרדמה מושרה isoflurane, IUGR נוצר בניתוח בגיל הריון 25 יום על ידי ביצוע laparotomy, חושף את הרחם ולאחר מכן bicornuate ligating 40-50% מכלי שלייה המספקים כל השק הריון בקרן רחם אחת. הקרן השנייה ברחם bicornuate הארנב משמשת כעוברי בקרה פנימיים. ואז, לאחר התאוששות ביום הריונית גיל 30 (טווח מלא), אותו הארנב עובר בדיקה של תפקוד לב העובר. הרדמה מושרה עם ketamine וxylazine לתוך שריר, ולאחר מכן מתוחזק על ידי עירוי תוך ורידי מתמשך של קטמין וxylazine כדי למזער את השפעות אבחנה רפואיות על תפקוד לב העובר. Laparotomy חוזר מבוצע כדי לחשוף את כל השק הריון ובדיקת microultrasound (VisualSonics VEVO 2100) של תפקוד לב העובר מתבצעת. אי ספיקה של שליה ניכרה במדד pulsatility מוגבה או זרימה הדיאסטולי נעדרה או הפוכה סוף טבור עורק דופלר צורת הגל. Ductus venosus ואמצע העורק המוחי דופלר אז בדקו. אקו העוברי מתבצע על ידי מצב הקלטת B, מצב M וגל מהירות זרימה בתצוגות לרוחב ופסגה. חישובים מנותק לקבוע משתנים סטנדרטיים M-mode לב, טיול הסיסטולי מטוס טבעתי tricuspid וצניפי, פזור מעקב וניתוח מתח, מדד ביצועי שריר הלב שונה וצורות גל מהירות זרימה בכלי הדם של עניין. מודל חיה קטן זו של IUGR ולכן מאפשר בחינה בuterתפקוד לב O שעולה בקנה אחד עם פרקטיקה קלינית נוכחית, ולכן הוא שימושי בסביבת מחקר translational.

צמיחה לא סימטרית מוגבלת עובר ושליה מקשירת כלי דם שלייה בהשוואה לעובר שליטה נורמלי ושליה באיור 1F. צמיחה לא סימטרית אושר על ידי משקל לידת ילוד מופחת והיקף ראש מוגבר: יחס היקף בטן לבקרות. נציג תוצאות ממחקרי דופלר fetoplacental מוצגות באיור 2. דפוס התנגדות נמו?...

Watch this Scientific Journal Video about Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction at JoVE.com

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

אנו מתארים בדיקה של תפקוד לב העובר עם אקו העוברי הפונקציונלי העכשווי ואולטרסאונד דופלר fetoplacental באמצעות microultrasound VisualSonics VEVO 2100 במודל מושרה בניתוח של הגבלת צמיחה העוברית תוך רחמי בארנב.

אקו העוברי ואולטראסאונד דופלר פעמו גל בדגם ארנב של הגבלת גדילה תוך רחמית

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

fetal-echocardiography-pulsed-wave-doppler-ultrasound-rabbit-model

Research

JoVE Journal

Medicine

28.1K Views.  University Hospitals Leuven. אנו מתארים בדיקה של תפקוד לב העובר עם אקו העוברי הפונקציונלי העכשווי ואולטרסאונד דופלר fetoplacental באמצעות microultrasound VisualSonics VEVO 2100 במודל מושרה בניתוח של הגבלת צמיחה העוברית תוך רחמי בארנב.

Video: Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1 Echocardiography provides a powerful, non-invasive tool to serially assess cardiac morphometry and function in a living animal.2 However, using this technique on mice poses unique challenges owing to the small size and rapid heart rate of these animals.3 Until recently, few ultrasound systems were capable of performing quality echocardiography on mice, and those generally lacked the image resolution and frame rate necessary to obtain truly quantitative measurements. Newly released systems such as the VisualSonics Vevo2100 provide new tools for researchers to carefully and non-invasively investigate cardiac function in mice. This system generates high resolution images and provides analysis capabilities similar to those used with human patients. Although color Doppler has been available for over 30 years in humans, this valuable technology has only recently been possible in rodent ultrasound.4,5 Color Doppler has broad applications for echocardiography, including the ability to quickly assess flow directionality in vessels and through valves, and to rapidly identify valve regurgitation. Strain analysis is a critical advance that is utilized to quantitatively measure regional myocardial function.6 This technique has the potential to detect changes in pathology, or resolution of pathology, earlier than conventional techniques. Coupled with the addition of three-dimensional image reconstruction, volumetric assessment of whole-organs is possible, including visualization and assessment of cardiac and vascular structures. Murine-compatible contrast imaging can also allow for volumetric measurements and tissue perfusion assessment.

This video demonstrates use of a rail-mounted high-frequency ultrasound probe to perform echocardiography on an anesthetized mouse. The methods describe both conventional two-dimensional and M-mode measurements of cardiac function in addition to newer, more powerful tools such as color Doppler, strain analysis, as well as general and targeted contrast imaging.

אקו Murine והדמיה אולטראסאונד

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1  ...

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, including mental retardation due to disordered and damaged brain development. Fetal alcohol spectrum disorder (FASD) is a term used to cover a continuum of birth defects that occur due to maternal alcohol consumption, and occurs in approximately 4% of children born in the United States. With 50% of child-bearing age women reporting consumption of alcohol, and half of all pregnancies being unplanned, unintentional exposure is a continuing issue2. In order to best understand the damage produced by ethanol, plus produce a model with which to test potential interventions, we developed a model of developmental ethanol exposure using the zebrafish embryo. Zebrafish are ideal for this kind of teratogen study3-8. Each pair lays hundreds of eggs, which can then be collected without harming the adult fish. The zebrafish embryo is transparent and can be readily imaged with any number of stains. Analysis of these embryos after exposure to ethanol at different doses and times of duration and application shows that the gross developmental defects produced by ethanol are consistent with the human birth defect. Described here are the basic techniques used to study and manipulate the zebrafish FAS model.

In order to understand the molecular mechanisms of the ethanol-induced developmental damage, we have developed a zebrafish model of ethanol exposure and are exploring the physical, cellular, and genetic alterations that occur after ethanol exposure1. We then seek to find potential interventions and rapidly test them in this animal model.

הערכת שינויים teratogenic במודל דג הזברה של חשיפה אלכוהול עוברית

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and acquired diseases. Apart from congenital or inherited abnormalities with the requirement for long-term expression of the delivered gene, several non-inherited perinatal conditions, where short-term gene expression or pharmacological intervention is sufficient to achieve therapeutic effects, are considered as potential future indications for this kind of approach. Candidate diseases for the application of short-term prenatal therapy could be the transient neonatal deficiency of surfactant protein B causing neonatal respiratory distress syndrome1,2 or hyperoxic injuries of the neonatal lung3. Candidate diseases for permanent therapeutic correction are Cystic Fibrosis (CF)4, genetic variants of surfactant deficiencies5 and &alpha;1-antitrypsin deficiency6.
Generally, an important advantage of prenatal gene therapy is the ability to start therapeutic intervention early in development, at or even prior to clinical manifestations in the patient, thus preventing irreparable damage to the individual. In addition, fetal organs have an increased cell proliferation rate as compared to adult organs, which could allow a more efficient gene or stem cell transfer into the fetus. Furthermore, in utero gene delivery is performed when the individual's immune system is not completely mature. Therefore, transplantation of heterologous cells or supplementation of a non-functional or absent protein with a correct version should not cause immune sensitization to the cell, vector or transgene product, which has recently been proven to be the case with both cellular and genetic therapies7.
In the present study, we investigated the potential to directly target the fetal trachea in a mouse model. This procedure is in use in larger animal models such as rabbits and sheep8, and even in a clinical setting9, but has to date not been performed before in a mouse model. When studying the potential of fetal gene therapy for genetic diseases such as CF, the mouse model is very useful as a first proof-of-concept because of the wide availability of different transgenic mouse strains, the well documented embryogenesis and fetal development, less stringent ethical regulations, short gestation and the large litter size.
Different access routes have been described to target the fetal rodent lung, including intra-amniotic injection10-12, (ultrasound-guided) intrapulmonary injection13,14 and intravenous administration into the yolk sac vessels15,16 or umbilical vein17. Our novel surgical procedure enables researchers to inject the agent of choice directly into the fetal mouse trachea which allows for a more efficient delivery to the airways than existing techniques18.

We developed a novel surgical approach for intratracheal administration of bioactive agents into the mouse fetus. The delivery route is more efficient in targeting the fetal mouse lungs than the commonly used intra-amniotic injection. This procedure has to date not been described in a mouse model.

גישה ניתוחית חדשנית למנהל Intratracheal של סוכני יו במודל של עכברים עוברי

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Murine Fetal Echocardiography

Transgenic mice displaying abnormalities in cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding the molecular mechanisms underlying both normal cardiovascular function and the pathophysiological basis of human cardiovascular disease. Fetal and perinatal death is a common feature when studying genetic alterations affecting cardiac development 1-3. In order to study the role of genetic or pharmacologic alterations in the early development of cardiac function, ultrasound imaging of the live fetus has become an important tool for early recognition of abnormalities and longitudinal follow-up. Noninvasive ultrasound imaging is an ideal method for detecting and studying congenital malformations and the impact on cardiac function prior to death 4. It allows early recognition of abnormalities in the living fetus and the progression of disease can be followed in utero with longitudinal studies 5,6. Until recently, imaging of fetal mouse hearts frequently involved invasive methods. The fetus had to be sacrificed to perform magnetic resonance microscopy and electron microscopy or surgically delivered for transillumination microscopy. An application of high-frequency probes with conventional 2-D and pulsed-wave Doppler imaging has been shown to provide measurements of cardiac contraction and heart rates during embryonic development with databases of normal developmental changes now available 6-10. M-mode imaging further provides important functional data, although, the proper imaging planes are often difficult to obtain. High-frequency ultrasound imaging of the fetus has improved 2-D resolution and can provide excellent information on the early development of cardiac structures 11.

Fetal and perinatal death is a common feature when studying genetic alterations affecting cardiac development. High-frequency ultrasound imaging has improved 2-D resolution and can provide excellent information on early cardiac development and is an ideal method to detect the impact on cardiac structure and function prior to death.

אקו העוברי Murine

Transgenic mice displaying abnormalities in  cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding  the molecular mechanisms ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs across species but is age dependent. The transition from a scarless to scarring phenotype occurs in the third trimester of pregnancy in humans and around embryonic day 18 (E18) in mice. However, this varies with the size of the wound with larger defects generating a scar at an earlier gestational age. The emergence of lineage tracing and other genetic tools in the mouse has opened promising new avenues for investigation of fetal scarless wound healing. However, given the inherently high rates of morbidity and premature uterine contraction associated with fetal surgery, investigations of fetal scarless wound healing in vivo require a precise and reproducible surgical model. Here we detail a reliable model of fetal scarless wound healing in the dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

During mammalian development, early gestational skin wounds heal without a scar. Here we detail a reliable and reproducible model of fetal scarless wound healing in the cutaneous dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

דגם עור עכבר עוברי של תיקון פצע צלקות

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. Despite the discovery of key regulators of uterine contractility, this process is still not fully understood. Transgenic mice provide an ideal model in which to study parturition. Previously, the only method to study uterine contractility in the mouse was ex vivo isometric tension recordings, which are suboptimal for several reasons. The uterus must be removed from its physiological environment, a limited time course of investigation is possible, and the mice must be sacrificed. The recent development of radiometric telemetry has allowed for longitudinal, real-time measurements of in vivo intrauterine pressure in mice. Here, the implantation of an intrauterine telemeter to measure pressure changes in the mouse uterus from mid-pregnancy until delivery is described. By comparing differences in pressures between wild type and transgenic mice, the physiological impact of a gene of interest can be elucidated. This technique should expedite the development of therapeutics used to treat myometrial disorders during pregnancy, including preterm labor.

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

טלמטריה תוך רחמי למדידת לחץ עכבר התכווצות<em&gt; In vivo</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

Percutaneous Contrast Echocardiography-guided Intramyocardial Injection and Cell Delivery in a Large Preclinical Model

Cell and gene therapy are exciting and promising strategies for the purpose of cardiac regeneration in the setting of heart failure with reduced ejection fraction (HFrEF). Before they can be considered for use, and implemented in humans, extensive preclinical studies are required in large animal models to evaluate the safety, efficacy, and fate of the injectate (e.g., stem cells) once delivered into the myocardium. Small rodent models offer advantages (e.g., cost effectiveness, amenability for genetic manipulation); however, given inherent limitations of these models, the findings in these rarely translate into the clinic. Conversely, large animal models such as rabbits, have advantages (e.g., similar cardiac electrophysiology compared to humans and other large animals), whilst retaining a good cost-effective balance. Here, we demonstrate how to perform a percutaneous contrast echocardiography-guided intramyocardial injection (IMI) technique, which is minimally invasive, safe, well tolerated, and very effective in the targeted delivery of injectates, including cells, into several locations within the myocardium of a rabbit model. For the implementation of this technique, we also have taken advantage of a widely available clinical echocardiography system. After putting in practice the protocol described here, a researcher with basic ultrasound knowledge will become competent in the performance of this versatile and minimally invasive technique for routine use in experiments, aimed at hypothesis testing of the capabilities of cardiac regenerative therapeutics in the rabbit model. Once competency is achieved, the whole procedure can be performed within 25 min after anaesthetizing the rabbit.

Novel therapeutic strategies in cardiac regenerative medicine require extensive and detailed studies in large preclinical animal models before they can be considered for use in humans. Here, we demonstrate a percutaneous contrast echocardiography-guided intramyocardial injection technique in rabbits, which is valuable for hypothesis testing the efficacy of such novel therapies.

הזרקת Intramyocardial מונחה אקוקרדיוגרפיה ניגודיות מלעורית ואספקה תא בדגם פרה גדולה

Cell and gene therapy are exciting and promising strategies for the purpose of cardiac regeneration in the setting of heart failure with reduced ejection ...

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study these pulmonary diseases. Previous pleural effusion models paid more attention to biological factors rather than nanoparticles in the environment. Here, we introduce a model to make pleural effusion in rats by intratracheal instillation of polyacrylate/nanosilica, and a method of nanoparticle isolation in the pleural effusion. By intratracheal instillation of polyacrylate/nanosilica with concentrations of 3.125, 6.25 and 12.5 mg/kg&#8729;mL, the pleural effusion in rats presented on day 3, peaked at days 7-10 in 6.25 and 12.5 mg/kg&#8729;mL groups, then slowly decreased and disappeared on day 14. When the concentration of polyacrylate/nanosilica increased, the pleural effusion is produced more and faster. This pleural fluid was detected by ultrasound examination or CT chest scanning and confirmed by dissection of rats. Silica nanoparticles were observed in the rats' pleural effusion by transmission electron microscope. These results showed that the exposure to polyacrylate/nanosilica leads to the induction of pleural effusion, which was consistent with our previous report in humans. Additionally, this model is beneficial for the further study of nanotoxicology and the pleural effusion diseases.

Here, we present a protocol to construct a pleural effusion model in rats by intratracheal instillation of polyacrylate/nanosilica.

מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה Intratracheal של Polyacrylate/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Continuous Venous-Arterial Doppler Ultrasound During a Preload Challenge

A preload challenge (PC) is a clinical maneuver that, first, increases the cardiac filling (i.e., preload) and, second, calculates the change in cardiac output. Fundamentally, a PC is a bedside approach for testing the Frank-Starling-Sarnoff (i.e., "cardiac function") curve. Normally, this curve has a steep slope such that a small change in the cardiac preload generates a large change in the stroke volume (SV) or cardiac output. However, in various disease states, the slope of this relationship flattens such that increasing the volume into the heart leads to little rise in the SV. In this pathological scenario, additional cardiac preload (e.g., intravenous fluid) is unlikely to be physiologically effective and could lead to harm if organ congestion evolves. Therefore, inferring both the cardiac preload and output is clinically useful as it may guide intravenous (IV) fluid resuscitation. Accordingly, the goal of this protocol is to describe a method for contemporaneously tracking the surrogates of cardiac preload and output using a novel, wireless, wearable ultrasound during a well-validated preload challenge.

The Frank-Starling-Sarnoff curve is clinically important and describes the relationship between cardiac preload and output. This report illustrates a novel method of simultaneous jugular venous and carotid arterial Doppler velocimetry as transient surrogates of cardiac preload and output, respectively; this approach is enabled by wireless, wearable Doppler ultrasound.

אולטרסאונד דופלר ורידי ורידי רציף במהלך אתגר טרום העמסה

A preload challenge (PC) is a clinical maneuver that, first, increases the cardiac filling (i.e., preload) and, second, calculates the change in cardiac ...

A Modified Sonographic Algorithm for Image Acquisition in Life-Threatening Emergencies in the Critically Ill Newborn

The use of routine point-of-care ultrasound (POCUS) is increasing in neonatal intensive care units (NICUs), with several centers advocating for 24 h equipment availability. In 2018, the sonographic algorithm for life-threatening emergencies (SAFE) protocol was published, which allows the assessment of neonates with sudden decompensation to identify abnormal contractility, tamponade, pneumothorax, and pleural effusion. In the study unit (with a consulting neonatal hemodynamics and POCUS service), the algorithm was adapted by including consolidated core steps to support at-risk newborns, aiding clinicians in managing cardiac arrest, and adding views to verify correct intubation. This paper presents a protocol that can be applied in the NICU and the delivery room (DR) in relation to three scenarios: cardiac arrest, hemodynamic deterioration, or respiratory decompensation. 
This protocol can be performed with a state-of-the-art ultrasound machine or an affordable handheld device; the image acquisition protocol is carefully detailed. This method was designed to be learned as a general competence to obtain the timely diagnosis of life-threatening scenarios; the method aims to save time but does not represent a substitute for comprehensive and standardized hemodynamic and radiological analyses by a multidisciplinary team, which might not universally be on call but needs to be involved in the process. From January 2019 to July 2022, in our center, 1,045 hemodynamic consultation/POCUS consults were performed with 25 patients requiring the modified SAFE protocol (2.3%), and a total of 19 procedures were performed. In five cases, trained fellows on call resolved life-threatening situations. Clinical examples are provided that show the importance of including this technique in the care of critical newborns.

Here, we present a protocol that can be applied in the neonatal intensive care unit and the delivery room in relation to three scenarios: cardiac arrest, hemodynamic deterioration, or respiratory decompensation. This protocol can be performed with a state-of-the-art ultrasound machine or an affordable handheld device; an image acquisition protocol is carefully detailed.

אלגוריתם סונוגרפי מותאם לרכישת תמונה במצבי חירום מסכני חיים ביילוד חולה אנוש

The use of routine point-of-care ultrasound (POCUS) is increasing in neonatal intensive care units (NICUs), with several centers advocating for 24 h ...