ברצוננו להודות לאנשים הבאים על תרומתם לפרויקט הזה: Kakali Sarkar, PhD, Joani כריסטנסן, BS, קייט Buretta, BS, הננס יואן, BS, ויליאם Lehao, MD, יוהנה Grahammer, גיאורג Furtmüller, MD, ארין ראדה MD, מוחמד אל ראכאן MD, כרים Sarhane MD, הסאמי Khalifian, BS, מאו צ&#39;י, MD, ואנג&#39;לו לטו ברונה MD, המעבדה VCA, מחלקה לכירורגיה פלסטית, אוניברסיטת ג&#39;ונס הופקינס הספר לרפואה, ג&#39;ניס טאובה, MD, מארק פישר, MD, מחלקות לרפואת העור ופתולוגיה, אוניברסיטת ג&#39;ונס הופקינס הספר לרפואה, סו אלר, כירורגיה פולשנית מרכז הדרכה, אוניברסיטת ג&#39;ונס הופקינס הספר לרפואה ונג-האנג לין, MD צ&#39;אנג גונג בית החולים ממוריאל, Linkou, טייוואן. מקור מימון: כוחות מזוינים מכון לרפואת רגנרטיבית (DoD W81XWH -08-2-0032)

בפרסום של הסרטון הזה, כל הנהלים בבעלי החיים נערכו בהתאם לפרוטוקול של בעלי חיים אושר על ידי הוועדה באוניברסיטת ג&#39;ונס הופקינס בבעלי חיים המוסדית טיפול ושימוש (IACUC). 1. תכנון לפני ניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אנו מנצלים MHC מוגדר MGH טהור חזירים זעירים (15-20 קילוגרם) במחקרי translational שלנו לallotransplantation האיבר שבו תורם אחד זכר מספק גפיים לשני נמענים נשיים (איור 1). לפני הניתוח, בעלי חיים תורמים והמקבל עוברים הערכה קלינית מדוקדקת על ידי וטרינר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על מנת למזער את ההרדמה וזמן איסכמיה, נהלי תורם למקבל מתבצעים בו זמנית על שלושה שולחנות הפועלים בחדר אחד מוקדש גדול של בעלי חיים הפעלה. עבודת צוות ותיאום בין צוותי כירורגיים, כמו גם צוות הוטרינרים הם קריטיים להצלחה כוללת של הליך זה. התכנית כירורגית נדונה עם צוות הוטרינרים בפגישה רשמית 1-2 שבועות לפני יום הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנתר ורידים מרכזי מנהרה (7 לומן כפול Fr קטטר היקמן) ממוקם בוריד הצוואר חיצוני או פנימי של כל חיה נמען לפני ההשתלה לניטור רמת תרופה לדיכוי המערכת החיסונית ועירוי לוריד של דיכוי המערכת החיסונית ו / או תרופות המערכת החיסונית. צנתרים אלה ממוקמים תחת ראייה ישירה באמצעות טכניקה לחתוך את ורידים ומנהרה אחורי כדי לצאת מגבוה על הצוואר ועל הגב מאובטח באמצעות תפרי nonabsorbable monofilament ולעטוף תחבושת הדבקה סביב הצוואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על בעלי חיים עמותה (לא מזון מוצק אבל מותר lib מודעות מים) שעה לפחות 12 לפני הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביום של ניתוח, בעלי חיים שקט ורגוע עם קטמין 20 מ&quot;ג / קילוגרם ו xylazine 2 מ&quot;ג / קילוגרם IM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח הטובוס בגודל מתאים ולחבר אותו למכונת ההרדמה וההנשמה (שמור על 0.5-3% isoflurane) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח קטטר תוך ורידי בוריד אוזן שולי ולנהל<html> מלוח 0.9% במשקל מבוסס לאורך כל ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל שיכוך כאבים מנע (עצירות 0.02 מ&quot;ג / קילוגרם IV). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל אנטיביוטי מניעתי (מ&quot;ג / קילוגרם IV Cefazolin 20-25) לפני החתך הראשוני לשני תורמים ובעלי חיים נמען. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בטכניקה סטרילית בכל הנהלים לשני נמענים ותורמים. זה כולל את השימוש במכשירי autoclaved או גז מעוקר, מסיכות, כובעי ראש, שמלות כירורגית סטרילית וכפפות סטריליות. לגלח את האזור של החתך עם גוזז ולחטא עם לסירוגין תמיסת פולידין ואלכוהול. </li></ol> ניטור במהלך ניתוח: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר האינדוקציה ואינטובציה, לשמור על הרדמה עם isoflurane 0.5-3% תערובת משאיפת בחמצן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על קצב לב, דופק oximetry, א.ק.ג., CO סוף הגאות 2 וטמפרטורה רקטלית ברציפות ולהקליט כל 15 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למנוע היפותרמיה בשמיכת כפיית אוויר חמה בייר האגר. </li></ol>&quot;Jove_title&quot;&gt; Osteomyocutaneous איבר שתל קציר מחזיר תורם: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה התורם בעמדת פרקדן על שולחן הניתוחים ולעטוף באופן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש אנגיוגרפיה לייזר קרוב לאינפרא אדום כדי לזהות כלי מחוררי לעור anteromedial. הזרק ירוק בכ 0.06 מ&quot;ג / קילוגרם indocyanine המדולל ב2-5 מיליליטר של תמיסת מלח רגיל דרך גישה לכלי דם היקפי. כ 10 שניות מאוחר יותר, לבצע 30 sec-2 דקות של הקלטות אינפרא אדום קרובים. השתמש בוידאו מהקלטות אלה כדי לזהות מחוררים. בהתבסס על מחוררים, לסמן על שטח של עור (כ 100 2 סנטימטר) לניטור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש באזמל כדי לעשות חתך במפשעה עור ברציפות עם סימנים להנעת העור (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לזהות כלי הירך ולבודד אותם distally לרמה של סניפי suprageniculate וproximally לרמה של הרצועה מפשעתי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את העור ורקמה התת עורית תוך preserving תחום ההנעה העור. לתפור את הקצוות של העור לבסיס שרירים, כדי למנוע התכווצות במהלך מסיק דש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע osteotomy בדיוק מעל שורש הרגל באמצעות מסור הדדיות (Pen Drive חשמלי, Synthes, ווסט צ&#39;סטר הרשות הפלסטינית). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את השרירים בהפרוקסימלי ירך באמצעות electrocautery. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את עצם הירך באמצע פיר עוזב את דש osteomyocutaneous על גבעול של כלי דם. הדש מכיל את משוט העור, שרירי ירך בסיסי, מפרק הברך, ירך הדיסטלי והטיביה הפרוקסימלית הכוללת מח עצם vascularized שלם עם התכונות חיסוניות הייחודיות שלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בשעוות עצם כדי להשיג עצירת דימום בחללי מח. עצם החלקת קצוות באמצעות ronjeurs כהכנה לנמען. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור את השתל perfused על הגבעול של כלי הדם שלה עד כלי הירך של הנמען ערוכים (איור 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר נתיחת הנמען היא מוחלטת, ולקשור את כלי הירך התורם כהפרוקסימלי כאפשריnd להחדיר את השתל עם היסטידין-טריפטופן-ketoglutarate (HTK, Custodiol, ניוטאון הרשות הפלסטינית) לפני ההשתלה. הערה: איבר התורם הושתל בצד הנגדי של הנמען כלומר איבר התורם יצא לצד ימין של הנמען ואת איבר התורם המתאים בצד השמאל של הנמען). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את תורם החזיר מייד לאחר קצירת האיבר האחורי השני באמצעות נתרן pentobarbital IV 100 מ&quot;ג / קילוגרם. מוות אושר על ידי צוות הוטרינרים לפרוטוקול מבוסס. </li></ol> 4. נוהל נמען (הינד ימב Allotransplantation) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל אינדוקציה הנמען ואינטובציה מייד לאחר חתך התורם הראשוני כדי לאפשר הכנה של כלי נמען תוך איבר התורם הוא להיות שנקטפו. זה מבטל את זמן ההמתנה מיותרת ומקטין את זמן הרדמה הכולל של התורם ומקבלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את פרקדן החיה עם סיבוב 30 מעלות בצד התפעולי להלוחשיפת w של צד dorsolateral. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך במפשעה ולחשוף את כלי הירך; בודד אותם distally לרמה של סניפי suprageniculate וproximally לרמה של הרצועה מפשעתי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת כיס תת עורית מהמפשעה לדופן בטן dorsolateral להבלעת השתל (איור 4). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ולקשור את כלי התורם ולשטוף את השתל עם HTK. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע הבלעה השתל באופן הפוך: האם ההנעה העור מול dorsolateral כדי לאפשר ניטור קל חיסוניים בעמידה וקצות החתך של כלי הירך מול caudally לאפשר anastomoses כלי דם מקצה לקצה ללא כל מתח בכולים ( איור 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם זמין, השתמש בהתקן צימוד כלי דם (Synovis, סנט פול MN) לanastomoses ורידים (2.5-3.5 גודל מתאים לבעלי החיים 10-20 קילוגרם). זה מפחית באופן משמעותי את זמן איסכמיה בהשוואה לשיטות קונבנציונליות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע anast העורקomoses באמצעות טכניקת תפר קונבנציונלית עם 9-0 תפר (Synovis, סנט פול MN) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר patency כלי הדם הוא אישר, לאבטח את השתל במקום עם 3-0 תפרי PDS (איור 5). השרירים של השתל הם נתפרו לשרירי דופן הבטן. שרירי השתל לא אמורים להיות נתפרו לשרירי ירך הנמען שכן הוא יכול להיות מזיק כאשר המהלכים של בעלי החיים בכלוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Exteriorize ההנעה העור בצד dorsolateral לניטור חיסוניים (איור 6) ותפרתי אותו לעור הסמוך באמצעות 3-0 תפרים תת עורית Vicryl ו4-0 תפרי עור נספגים monofilament שהופסקו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את העור במפשעה בשכבות 3-0 באמצעות תפרים תת עורית Vicryl ו4-0 תפרי עור נספגים monofilament שהופסקו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח תיקון 50-100 פנטניל מק&quot;ג / שעה על כאבים שלאחר ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר השתלה של שתל גפיים האחורי, להחזיר את בעל החיים לעט שלה ברגע שהתעורר ונושמים בכוחות עצמו בנוחות.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Barth, R. N., Rodriguez, E. D., Mundinger, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+bone+marrow-based+immunosuppression+inhibits+rejection+of+vascularized+composite+allografts+in+nonhuman+primates.">Vascularized bone marrow-based immunosuppression inhibits rejection of vascularized composite allografts in nonhuman primates.</a> Am. J. Transplant. 11 (7), 1407-1416 (2011).</li><li>Brandacher, G., Gorantla, V. S., Schneeberger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hand/Forearm+transplantation+using+a+novel+cell-based+immunomodulatory+protocol-experience+with+five+patients.">Hand/Forearm transplantation using a novel cell-based immunomodulatory protocol-experience with five patients.</a> Am. J. Transplant. 11, 190 (2011).</li><li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation.">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Res. C Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).</li><li>Brandacher, G., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hand+transplantation.">Hand transplantation.</a> Hand Clin. 27, xiii-xiv (2011).</li><li>Hettiaratchy, S., Mendely, E., Randolph, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tolerance+to+composite+tissue+allografts+across+a+major+histocompatibility+barrier+in+miniature+swine.">Tolerance to composite tissue allografts across a major histocompatibility barrier in miniature swine.</a> Transplantation. 27, 514-521 (2004).</li><li>Ibrahim, Z., Busch, J., Awwad, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selected+physiologic+compatibilities+and+incompatibilities+between+human+and+porcine+organ+systems.">Selected physiologic compatibilities and incompatibilities between human and porcine organ systems.</a> Xenotransplantation. 13 (6), 488-499 (2005).</li><li>Kirk, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crossing+the+bridge:+large+animal+models+in+translational+transplantation+research.">Crossing the bridge: large animal models in translational transplantation research.</a> Immunol. Rev. 19, 176-196 (2003).</li><li>Lee, W. P., Rubin, J. P., Cober, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+swine+model+in+transplantation+of+vascularized+skeletal+tissue+allografts.">Use of swine model in transplantation of vascularized skeletal tissue allografts.</a> Transplant Proc. 30, 2743-2745 (1998).</li><li>Mathes, D. W., Hwang, B., Graves, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tolerance+to+vascularized+composite+allografts+in+canine+mixed+hematopoietic+chimeras.">Tolerance to vascularized composite allografts in canine mixed hematopoietic chimeras.</a> Transplantation. 92 (12), 1301-1308 (2011).</li><li>Mathes, D. W., Randolph, M. A., Solari, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Split+tolerance+to+a+composite+tissue+allotransplant+in+a+swine+model.">Split tolerance to a composite tissue allotransplant in a swine model.</a> Transplantation. 75 (1), 25-31 (2003).</li><li>Mezrich, J. D., Haller, G. W., Arn, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histocompatible+miniature+swine:+an+inbred+largeanimal+model.">Histocompatible miniature swine: an inbred largeanimal model.</a> Transplantation. 75 (6), 904-907 (2003).</li><li>Petruzzo, P., Lanzetta, M., Dubernard, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+International+Registry+on+Hand+and+Composite+Tissue+Transplantation.">The International Registry on Hand and Composite Tissue Transplantation.</a> Transplantation. 90, 1590-1594 (2010).</li><li>Sucher, R., Lin, C., Zanoun, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+hind+limb+transplantation:+a+new+composite+tissue+allotransplantation+model+using+nonsuture+supermicrosurgery.">Mouse hind limb transplantation: a new composite tissue allotransplantation model using nonsuture supermicrosurgery.</a> Transplantation. 90, 1374-1380 (2010).</li><li>Ust&#252;ner, E. T., Majzob, R. K., Ren, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swine+composite+tissue+allotransplant+model+for+preclinical+hand+transplant+studies.">Swine composite tissue allotransplant model for preclinical hand transplant studies.</a> Microsurgery. 20, 400-406 (2000).</li><li>Ust&#252;ner, E. T., Zdichavsky, M., Ren, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+composite+tissue+allograft+survival+in+a+porcine+model+with+cyclosporine/mycophenolate+mofetil+therapy.">Long-term composite tissue allograft survival in a porcine model with cyclosporine/mycophenolate mofetil therapy.</a> Transplantation. 661, 581-587 (1998).</li><li>Wachtman, G. S., Wimmers, E. G., Gorantla, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biologicals+and+donor+bone+marrow+cells+for+targeted+immunomodulation+in+vascularized+composite+allotransplantation:+a+translational+trial+in+swine.">Biologicals and donor bone marrow cells for targeted immunomodulation in vascularized composite allotransplantation: a translational trial in swine.</a> Transplant Proc. 43, 3541-3544 (2011).</li></ol>

החוקרים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

מבחינה היסטורית, פרוטוקול השתלת איבר האחורי heterotopic כלל החצנה של ההנעה עור דופן בטן הגחון וכלי היו anastomosed באופן מקצה לצד (Hettiarachty 2004). עם זאת, בשיטה שונה שלנו, דש הפוך אחד בהרכבה וanastomoses מקצה לקצה להביא את ההנעה העור יותר רוחבי, ולכן מאפשר ניטור חיסוניים בעמידתו של בעל החי?...

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA), כמו השתלות ידיים ופנים נמצא כעת מציאות קלינית עם השתלות ידיים ופנים רבות שבוצעו ברחבי העולם 12. למרות העובדה כי תוצאות מוקדמות וביניים הן נוחים ועידוד 2 מאוד, הדרישה של דיכוי חיסוני multidrug הכרונית ממשיכה להגביל את היישום הקליני הנרחב שלה. ההתקדמות במודלים עכבריים של VCA כוללים anastomoses סופר microsurgical וטכניקות שרוול nonsuture 13, 3 סללו את הדרך להבנה טובה יותר של alloimmune תגובות בVCA. רבבות של פרוטוקולי המערכת החיסונית הוצעו עבור יישומים קליניים המבוססים על ההבנה טובה יותר שלנו של מנגנונים חיסוניים בVCA אבל הם צריכים להיות תוקף במודל חיה גדול שיהיה חזוי סביר של הביצועים שלהם בבני אדם 7. בהתבסס על דמיון פיסיולוגי וחיסוני בין מערכות איברים אנושיות וחזיריות <sup&gt; 6, יכולים להיחשב דגמי VCA חזירים חלופות אמינות וחסכוניות לכלבי 9 ומודלי קופים לא אנושיים 1. מאמר זה מספק סקירה מפורטת של המתודולוגיה בשימוש במודל שלנו מוגדר MHC החזירים heterotopic האחורית איבר להשתלה, המשמש כבסיס לאסטרטגיות שלנו בהווה ובעתיד המערכת החיסונית שמטרתה גרימת סובלנות החיסונית לVCA ולכן מרחיבים את היישום הקליני שלה. אנו מנצלים חזירים טהורים מאופיינים היטב גידלו homozygosity במוקד אנטיגן ויקוציטים חזירים במיוחד לשימוש שלהם במחקר הקשור להשתלה 11. אנחנו מעלים את דש osteomyocutaneous vascularized מבוסס על כלי הירך. הדש מכיל מח עצם vascularized שלם בירך הדיסטלי והטיביה הפרוקסימלית. עור ירך anteromedial גם כלול בשתל והוא exteriorized להיבט dorsolateral של החיה הנמען לניטור חיסונית של o רכיב immunogenic ביותרו VCA. מיצוב dorsolateral מאפשר בדיקה קלינית בעומד ויושבים בעמדות וגם שומר על העור של השתל יחסית נקי. Ustener et al. הציג את אחד הדגמים הראשונים הגדולים translational בעלי החיים בVCA ידי השתלת דשי osteomyocutaneous forelimb רדיאלי בחזירים בחווה outbred 15. הקבוצה מנוצל במודל זה כדי להפגין בפעם הראשונה שדחייה חריפה בVCA שכלל את מרכיב עור immunogenic מאוד יכולה להתעכב וטופלה באסטרטגיה רלוונטית קליני ללא סיבוכי תרופה ספציפית משמעותיים ותופעות לוואי. התוצאות החיוביות שהושגו במחקר זה נבנה לאחר מכן צעד מכונן בעיצוב משטרי תרופה להשתלה שיקומי אנושית. למרות שדגמי VCA חזיר המוקדם הללו היו גם מתאימים לפיתוח פרוטוקולים למניעת דחייה של עור, שרירים, עצמות, עצבים וכלי לא היו להם מבנים מיוחדים כגון cartilag מפרקדואר וקרומים הסינוביאלי של מפרקים. מאמצים שלאחר מכן התמקדו בכוללים הספרה המדיאלי של בעלי החיים, אשר חייבה השמת גבס באורך מלא כדי למנוע ליפת שתל 14. אמנם מתאים לחקור דחייה של כל הרכיבים העיקריים של השתלת איבר, אחת המגבלות העיקריות של מודל זה היה קושי אמבולטורי לאחר ההשתלה בשל להטיל מיקום. לפיכך, המודלים allotransplantation איבר חזירים heterotopic, בהיקף של השוקה, שוקית, מפרק הברך, ירך הדיסטלי, שרירים שמסביב, והנעת עור, נוצרו כדי ללמוד בעיקר היבטים חיסוניים של VCA, ובמקביל לאפשר את בעל החיים לambulate לאחר הניתוח באופן חופשי עם morbidit המינימלי 8 . הפיתוח של חזירים טהורים מוגדרים SLA היטב מאופיינים דרך עבודתו החלוצית של ד&quot;ר דוד ח סאקס הוביל לעידן חדש של מחקר VCA translational. ניצול מודל השתלת heterotopic אחורית איבר בהגדרת אי התאמת אנטיגן קטין, שטיחוןהס ואח&#39;. 10 הפגינו הישרדות בלתי מוגבלת של רכיבי השלד עם קורס קצר של טיפול ציקלוספורין. הישרדות מרכיב העור, לעומת זאת, הייתה רק ממושכת בהשוואה לטיפול לא שולט. האובדן של מרכיב העור של השתל יוחס לתגובה מבודדת ונמרצת מאוד חיסונית, בפרט, לאפידרמיס. באופן דומה, תוך שימוש בחזירים תואמים באופן מלא עם דלדול תא T, קורס קצר של ציקלוספורין ותאי ציטוקינים גייסו תורם היקפיים mononuclear הדם מושרה סובלנות רק לרכיבי השלד ומרכיב העור עדיין דחה 5. תופעה זו, המכונה &quot;סובלנות חצויה &#39;, הביאה שינוי פרדיגמה במחקר VCA עם דגש גדול יותר על רכיב עור immunogenic ביותר, אשר הוא מרכיב בלתי נפרד של רוב השתלות שחזור שבוצעו עד כה. בדגם שונה זה, אנו מנצלים השקה קצה לקצה על ידי ligatinגרם עורק הירך הנמען וסיבובו cephalad (איור 1). זה לא רק מפחית את זמן איסכמיה ידי מתן אפשרות לשימוש במכשיר צימוד קונבנציונלי, אלא גם מקטין את הסיכוי לכישלון בהשקה. אנחנו לא נצפו כל אירועים איסכמיים לאחר קשירה של עורק הירך בנמענים שלנו מצביע על כך שזרימת הדם בטחונות הייתה מספיק כדי לספק כלי דם ברגלו הילידים. בנוסף, בשיטה זו שונה, מרכיב עור המוחץ מגויס המבוסס על כלי מחוררי הבסיסיים וממוקם רוחבי (איור 1) בניגוד לעמדת מפשעה הגחון במודל המסורתי 10. זה מאפשר להדמיה קלה של השתל לניטור חיסוניים בעמידה או ישיבה של בעלי החיים. לפיכך, מודל חיה גדול אמין לשחזור הוא חיוני כדי לחקור אסטרטגיות אינדוקציה סובלנות כלפי מרכיב העור של VCA ולפתח רומן nאסטרטגיות oninvasive חיסונית ניטור לחיזוי טוב יותר של הישרדות שתל.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Name of the Reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue Number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>REAGENTS</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HTK</td>
			<td>Custodial</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>EQUIPMENT</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Electric Pen Drive</td>
			<td>Synthes, Westchester PA </td>
			<td>05.001.011 </td>
			<td>Reciprocating saw</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Vascular Coupling device</td>
			<td>Synovis, Newtown PA</td>
			<td>21003B</td>
			<td></td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>

a modified heterotopic swine hind limb transplant model for translational vascularized composite allotransplantation (vca) research

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA), כמו השתלות ידיים ופנים מייצג אפשרות טיפול קיימא עבור טראומת שרירים ושלד מורכבת ואובדן רקמה הרסני. למרות תוצאות תפקודיות חיוביות ומעודדות מאוד מוקדמת וביניים, דחייה של רכיב immunogenic מאוד עור של VCA ותופעות לוואי פוטנציאליים של דיכוי חיסוני סמים רב כרוני תמשיך לעכב יישום קליני נרחב של VCA. לכן, מחקר בתחום הרומן הזה צריך להתמקד במחקרי translational הקשורים לתכונות חיסוניות ייחודיות של VCA ולפתח אסטרטגיות חדשניות לתפקוד מערכת חיסון המערכת החיסונית ואינדוקצית הסובלנות הבאה VCA ללא הצורך בדיכוי המערכת החיסוני לטווח ארוך. מאמר זה מתאר מודל אמין לשחזור translational גדול של בעלי חיים של VCA שמורכב מדש osteomyocutaneous בallotransplantation גפיים האחורי heterotopic חזירים מוגדר MHC. Briefly, ההנעה עור vascularized היטב מזוהה באזור הירך anteromedial באמצעות צנתור לייזר קרוב אינפרא אדום. השרירים הבסיסיים, מפרק הברך, הירך הדיסטלי, ועצם השוק הפרוקסימלית נקצרים על גבעול של כלי דם הירך. שתל זה יכול להיחשב גם VCA והשתלת מח עצם vascularized עם התכונות מיוחסות החיסון הייחודי שלה. השתל מושתל לכיס בטן תת עורית בחית הנמען עם מרכיב עור exteriorized לאזור dorsolateral לניטור חיסוניים. שלושה צוותי כירורגיים לעבוד בו זמנית באופן מתואם היטב כדי להפחית את ההרדמה ופעמים איסכמיה, ובכך לשפר את היעילות של המודל הזה והפחתת ערפלנים אפשריים בפרוטוקולי ניסוי. מודל זה משמש כבסיס לאסטרטגיות טיפוליות עתידיות שמטרתה צמצום ואפשרות ביטול הצורך בדיכוי החיסוני סמים רב כרוני בVCA.

עשרים וארבע השתלות heterotopic חזירים מוגדרות SLA גפיים האחורי בוצעו באמצעות הטכניקה שונה שלנו עם זמן איסכמיה ממוצע של 78 דקות (טווח: 62-94 דקות). הבלעה שתל ומיקום ההנעה עור dorsolateral הושגו ללא קושי בכל בעלי החיים. אנגיוגרפיה לייזר אינפרא אדום ליד הראתה זלוף שתל מצוין בכל הנמענים. ?...

Watch this Scientific Journal Video about A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research at JoVE.com

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

Vascularized Composite Allotransplantations (VCA) הפכו למציאות קלינית. עם זאת, יישום קליני רחב של VCA מוגבל על ידי דיכוי חיסוני סמים רב כרוני. המחברים מציגים מודל חיה גדול אמין לשחזור לתרגם אסטרטגיות החיסונית רומן שיכול למזער או פוטנציאלי לבטל את הצורך של דיכוי חיסוני בVCA.

דגם השתלות Heterotopic החזירים הינד איבר השתנה לTranslational vascularized Composite Allotransplantation מחקר (VCA)

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

a-modified-heterotopic-swine-hind-limb-transplant-model-for

Research

JoVE Journal

Medicine

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

12.4K Views.  Johns Hopkins University School of Medicine.  Vascularized Composite Allotransplantations (VCA) הפכו למציאות קלינית. עם זאת, יישום קליני רחב של VCA מוגבל על ידי דיכוי חיסוני סמים רב כרוני. המחברים מציגים מודל חיה גדול אמין לשחזור לתרגם אסטרטגיות החיסונית רומן שיכול למזער או פוטנציאלי לבטל את הצורך של דיכוי חי?...

Video: A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion

Mice are often used as heart transplant donors and recipients in studies of transplant immunology due to the wide range of transgenic mice and reagents available. A difficulty is presented due to the small size of the animal and the considerable technical challenges of the microsurgery involved in heart transplantation. In particular, a high rate of technical failure early after transplantation may result from recipient death and post-operative complications such as hind limb paralysis or a non-beating heart. Here, the complete technique for heterotopic mouse heart transplantation is demonstrated, involving harvesting the donor heart and its subsequent implantation into a recipient mouse. The donor heart is harvested immediately following in situ perfusion with cold heparinized saline and transection of the ascending aorta and pulmonary artery. The recipient operation involves preparation of the abdominal aorta and inferior vena cava (IVC), followed by end-to-side anastomosis of the donor aorta with the recipient aorta using a single running 10-0 microsuture and a similar anastomosis of the donor pulmonary artery with the recipient IVC. Following the operation the animal is injected with 0.6 ml normal saline subcutaneously and allowed to recover on a 37&#160;&#176;C heating pad. The results from 227 mouse heart transplants are summarized with a success rate at 48 hr of 86.8%. Of the 13.2% failures within 48 hr, 5 (2.2%) experienced hind limb paralysis, 10 (4.4%) had a non-beating heart due to graft ischemic injury and/or thrombosis, while 15 (6.6%) died within 48 hr.

A technique is demonstrated for the microsurgical procedure for heterotopic transplantation of hearts in mice, including simplified methods for donor harvesting and recipient vessel anastomosis.

שיטה שונה לHeterotopic מאוס לב Transplantion

Mice are often used as heart transplant donors and recipients in studies of transplant immunology due to the wide range of transgenic mice and reagents ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique was developed and reported in 2001 by Niimi. Described here are the techniques that have evolved over more than a decade in the hands of three surgeons (Plenter, Grazia, Pietra) in our center. These techniques are now being passed on to a younger generation of surgeons and researchers.
Based largely on the Niimi experience, the procedures used have evolved in the fine details - details which we will endeavor to relate here in such a way that others may be able to use this very useful model. Like Niimi, we have found that a video aid to learning is a priceless resource for the beginner.

The manuscript describes the steps required to perform the heterotopic heart transplant in the mouse.

טכניקת השתלות Murine Heterotopic לב

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression must be pursued. Employing vascularized bone marrow transplantation and co-transplantation of the thymus have shown promise in this regard in various animal models.1-11 Vascularized bone marrow transplantation allows for the uninterrupted transfer of donor bone marrow cells within the preserved donor microenvironment, and the incorporation of thymus tissue with vascularized bone marrow transplantation has shown to increase T-cell chimerism ultimately playing a supportive role in the induction of immune regulation. The combination of solid organ and vascularized composite allotransplantation can uniquely combine these strategies in the form of a novel transplant model. Murine models serve as an excellent paradigm to explore the mechanisms of acute and chronic rejection, chimerism, and tolerance induction, thus providing the foundation to propagate superior allograft survival strategies for larger animal models and future clinical application. Herein, we developed a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique. The experience in syngeneic and allogeneic transplant settings is described for future broader immunological investigations via an instructional manuscript and video supplement.

To study combined solid organ and vascularized composite allotransplantation, we describe a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique.

Microsurgical דגם חדשני לHeterotopic, כמקשה אחת בחזה קיר, קורנית, ולב השתלה בעכברים

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and translational research in the field of transplantation medicine. A vast array of reagents is available exclusively in this setting, including mono- and polyclonal antibodies for both diagnostic and interventional applications. In addition, a vast number of genotyped, inbred, transgenic, and knock out strains allow detailed investigation of the individual contributions of humoral and cellular components to the complex interplay of an immune response and make the mouse the gold standard for immunological research. 
Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) delineates a novel field of transplantation using allografts to replace "like with like" in patients suffering traumatic or congenital tissue loss. This surgical methodological protocol shows the use of a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis in an orthotopic mouse hind limb transplantation model. The model specifically allows for comparison between established paradigms in solid organ transplantation with a novel form of transplants consisting of various different tissue components. Uniquely, this model allows for the transplantation of a viable vascularized bone marrow compartment and niche that have the potential to exert a beneficial effect on the balance of immune acceptance and rejection. This technique provides a tool to investigate alloantigen recognition and allograft rejection and acceptance, as well as enables the pursuit of functional nerve regeneration studies to further advance this novel field of transplantation.

This novel model for orthotopic hind limb transplantation in the mouse, applying a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis, provides a powerful tool for in&#160;vivo mechanistic immunological research related to vascularized composite allotransplantation (VCA).

Orthotopic הינד לימב השתלה בבית העכבר

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the availability of the widest range of molecular probes and reagents to perform in vivo as well as in vitro studies. Based on our experience with various murine transplantation models, we developed a heterotopic pancreas transplantation model in mice with the intent to analyze mechanisms underlying severe ischemia reperfusion injury-associated early graft damage. In contrast to previously described techniques using suture techniques, herein we describe a new procedure using a non-suture cuff technique. 
In recent years, we have performed more than 300 pancreas transplantations in mice with an overall success rate of &gt;90%, a success rate never described before in mouse pancreas transplantation. The backbone of this non-suture cuff technique for graft revascularization consists of two major steps: (I) pulling the recipient vessel over a polyethylene/polyamide cuff and fixing it with a circumferential ligature, and (II) placing the donor vessel over the everted recipient vessel and fixing it with a second circumferential ligature. The resultant continuity of the endothelial layer results in less thrombogenic lesions with high patency rates and, finally, high success rates.
In this model, arterial anastomosis is achieved by pulling the abdominal aorta of the donor graft over the everted common carotid artery of the recipient animal. Venous drainage of the graft is achieved by pulling the portal vein of the graft over the everted external jugular vein of the recipient. This manuscript provides details and crucial steps of the organ recovery and organ implantation procedures, which will allow researchers with microsurgical skills to perform the transplantation successfully in their laboratories.

Among abdominal solid organ transplantation, pancreatic grafts are prone to develop severe ischemia reperfusion injury-associated graft damage, leading eventually to early graft loss. This protocol describes a model of murine pancreas transplantation using a non-suture cuff technique, ideally suited for analyzing these early, deleterious damages.

העכבר מודל עבור השתלת לבלב בטכניקה השינוי הצמיד

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Surgical Angiogenesis in Porcine Tibial Allotransplantation: A New Large Animal Bone Vascularized Composite Allotransplantation Model

Segmental bone loss resulting from trauma, infection malignancy and congenital anomaly remains a major reconstructive challenge. Current therapeutic options have significant risk of failure and substantial morbidity.
Use of bone vascularized composite allotransplantation (VCA) would offer both a close match of resected bone size and shape and the healing and remodeling potential of living bone. At present, life-long drug immunosuppression (IS) is required. Organ toxicity, opportunistic infection and neoplasm risks are of concern to treat such non-lethal indications.
We have previously demonstrated that bone and joint VCA viability may be maintained in rats and rabbits without the need of long-term-immunosuppression by implantation of recipient derived vessels within the VCA. It generates an autogenous, neoangiogenic circulation with measurable flow and active bone remodeling, requiring only 2 weeks of IS. As small animals differ from man substantially in anatomy, bone physiology and immunology, we have developed a porcine bone VCA model to evaluate this technique before clinical application is undertaken. Miniature swine are currently widely used for allotransplantation research, given their immunologic, anatomic, physiologic and size similarities to man. Here, we describe a new porcine orthotopic tibial bone VCA model to test the role of autogenous surgical angiogenesis to maintain VCA viability.
The model reconstructs segmental tibial bone defects using size- and shape-matched allogeneic tibial bone segments, transplanted across a major swine leukocyte antigen (SLA) mismatch in Yucatan miniature swine. Nutrient vessel repair and implantation of recipient derived autogenous vessels into the medullary canal of allogeneic tibial bone segments is performed in combination with simultaneous short-term IS. This permits a neoangiogenic autogenous circulation to develop from the implanted tissue, maintaining flow through the allogeneic nutrient vessels for a short time. Once established, the new autogenous circulation maintains bone viability following cessation of drug therapy and subsequent nutrient vessel thrombosis.

Currently any kind of vascularized composite allotransplantation depends on long-term-immunosuppression, difficult to support for non-life-critical indications. We present a new porcine tibial VCA model that can be used to study bone VCA and demonstrate the use of surgical angiogenesis to maintain bone viability without the need of long-term immune-modulation.

אנגיוגנזה כירורגי אלוגרפט הטיביאלי חזירי: עצם חדשים בעלי חיים גדולים Vascularized דגם אלוגרפט ללא הפרדות צבע

Segmental bone loss resulting from trauma, infection malignancy and congenital anomaly remains a major reconstructive challenge. Current therapeutic ...

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular disease is the development of ischemia. In severe cases, patients can develop critical limb ischemia in which they experience constant pain and an increased risk of limb amputation. Current therapies for peripheral ischemia include bypass surgery or percutaneous interventions such as angioplasty with stenting or atherectomy to restore blood flow. However, these treatments often fail to the continued progression of vascular disease or restenosis or are contraindicated due to the overall poor health of the patient. A promising potential approach to treat peripheral ischemia involves the induction of therapeutic neovascularization to allow the patient to develop collateral vasculature. This newly formed network alleviates peripheral ischemia by restoring perfusion to the affected area. The most frequently employed preclinical model for peripheral ischemia utilizes the creation of hind limb ischemia in healthy rabbits through femoral artery ligation. In the past, however, there has been a strong disconnect between the success of preclinical studies and the failure of clinical trials regarding treatments for peripheral ischemia. Healthy animals typically have robust vascular regeneration in response to surgically induced ischemia, in contrast to the reduced vascularity and regeneration in patients with chronic peripheral ischemia. Here, we describe an optimized animal model for peripheral ischemia in rabbits that includes hyperlipidemia and diabetes. This model has reduced collateral formation and blood pressure recovery in comparison to a model with a higher cholesterol diet. Thus, the model may provide better correlation with human patients with compromised angiogenesis from the common co-morbidities that accompany peripheral vascular disease.

We describe a surgical procedure used to induce peripheral ischemia in rabbits with hyperlipidemia and diabetes. This surgery acts as a preclinical model for conditions experienced in peripheral artery disease in patients. Angiography is also described as a means to measure the extent of introduced ischemia and recovery of perfusion.

המודל הקליני של איסכמיה הגפיים האחוריות בארנבים סוכרתית

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

Modified Heterotopic Hindlimb Osteomyocutaneous Flap Model in the Rat for Translational Vascularized Composite Allotransplantation Research

Vascularized composite allotransplantation (VCA) is a relatively new field in the reconstructive surgery. Clinical achievements in human VCA include hand and face transplants and, more recently, abdominal wall, uterus, and urogenital transplants. Functional outcomes have exceeded initial expectations, and most recipients enjoy an improved quality of life. However, as clinical experience accumulates, chronic rejection and complications from the immunosuppression must be addressed. In many cases where grafts have failed, the causative pathology has been ischemic vasculopathy. <span style="font-size: 11pt; line-height: 115%; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(41, 43, 49); background-image: initial; background-position: initial; background-size: initial; background-repeat: initial; background-attachment: initial; background-origin: initial; background-clip: initial;">The biological mechanisms of the acute and chronic rejection associated with VCA, especially ischemic vasculopathy, are important areas of research. However, due to the very small number of VCA patients, the evaluation of proposed mechanisms is better addressed in an experimental model. Multiple groups have used animal models to address some of the relevant unsolved questions in VCA rejection and vasculopathy. Several model designs involving a variety of species are described in the literature. Here we present a reproducible model of VCA heterotopic hindlimb osteomyocutaneous flap in the rat that can be utilized for translational VCA research. This model allows for the serial evaluation of the graft, including biopsies and different imaging modalities, while maintaining a low level of morbidity.

Vascularized composite allograft offers life-altering benefits to transplant recipients, but the biological causes of graft rejection and vasculopathy remain poorly understood. The rodent surgical model presented here offers a reproducible, clinically relevant model of transplantation, allowing researchers to evaluate rejection events and potential therapeutic strategies to prevent their occurrence.

שונה הטרולנושא הגפיים האוסטאופהעורית מודל החולדה על השתלת ואסימטיקה מורכבת מחקר האלוגרפט

Vascularized composite allotransplantation (VCA) is a relatively new field in the reconstructive surgery. Clinical achievements in human VCA include hand ...

A Mouse Model of Vascularized Heterotopic Spleen Transplantation for Studying Spleen Cell Biology and Transplant Immunity

The spleen is a unique lymphoid organ that plays a critical role in the homeostasis of the immune and hematopoietic systems. Patients that have undergone splenectomy regardless of precipitating causes are prone to develop an overwhelming post-splenectomy infection and experience increased risks of deep venous thrombosis and malignancies. Recently, epidemiological studies indicated that splenectomy might be associated with the occurrence of cardiovascular diseases, suggesting that physiological functions of the spleen have not yet been fully recognized. Here, we introduce a mouse model of vascularized heterotopic spleen transplantation, which not only can be utilized to study the function and behavioral activity of splenic immune cell subsets in different biologic processes, but also can be a powerful tool to test the therapeutic potential of spleen transplantation in certain diseases. The main surgical steps of this model include donor spleen harvest, the removal of recipient native spleen, and spleen graft revascularization. Using congenic mouse strains (e.g., mice with CD45.1/CD45.2 backgrounds), we observed that after syngeneic transplantation, both donor-derived splenic lymphocytes and myeloid cells migrated out of the graft as early as post-operative day 1, concomitant with the influx of multiple types of recipient cells, thus generating a unique chimera. &#160;Despite relatively challenging techniques, this procedure can be performed with &#62;90% success rate. This model allows tracking the fate, longevity, and function of splenocytes during steady state and in a disease setting following a spleen transplantation, thereby offering a great opportunity to discover the distinct role for spleen-derived immune cells in different disease processes.

This protocol details the surgical steps of a mouse model of vascularized heterotopic spleen transplantation, a technically challenging model that can serve as a powerful tool in studying the fate and longevity of spleen cells, the mechanisms of distinct spleen cell populations in disease progression, and transplant immunity.

מודל של העכבר של ואסיאני הטרוגרההשתלת הטחול ללמוד תא הטחול ביולוגיה וחסינות להשתלות

The spleen is a unique lymphoid organ that plays a critical role in the homeostasis of the immune and hematopoietic systems. Patients that have undergone ...

Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current limitations in immunosuppression and functional neuromotor recovery. Many animal models have been developed for studying unique features of VCA, but here we present a robust reproducible model of orthotopic hind limb transplant in rats designed to simultaneously investigate both aspects of current VCA limitation: immunosuppression strategies and functional neuromotor recovery. At the core of the model rests a commitment to meticulous, time-tested microsurgical techniques such as hand sewn vascular anastomoses and hand sewn neural coaptation of the femoral nerve and the sciatic nerve. This approach yields durable limb reconstructions that allow for longer lived animals capable of rehabilitation, resumption of daily activities, and functional testing. With short-term treatment of conventional immunosuppressive agents, allotransplanted animals survived up to 70 days post-transplant, and isotransplanted animals provide long lived controls beyond 200 days post-operatively. Evidence of neurologic functional recovery is present by 30 days post operatively. This model not only provides a useful platform for interrogating immunological questions unique to VCA and nerve regeneration, but also allows for in vivo testing of new therapeutic strategies specifically tailored for VCA.

This protocol presents a robust, reproducible model of vascularized composite allotransplant (VCA) geared toward simultaneous study of immunology and functional recovery. The time invested in meticulous technique in a right mid-thigh hind limb orthotopic transplant with hand sewn vascular anastomoses and neural coaptation yields the ability to study functional recovery.

לוקח את הצעד הבא: מודל השתלת גפיים אחוריות קופטציה עצבית כדי למקסם את ההתאוששות תפקודית בחולדה

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current ...