פרוטוקול השתלת לב הטרוטופית חזירית להעברת טיפולים לאלוגרפט לבבי

פרוטוקול זה הוא הראשון שמתאר כיצד ניתן לתת טיפולים ביעילות לאלוגרפט לבבי שלם במודל החי הגדול של השתלת לב. היתרון העיקרי של פרוטוקול זה הוא בכך שהוא מאפשר לחוקרים לבחון את ההשפעות של טיפול על אלוגרפט לב שלם על פני פרקי זמן ממושכים לאחר ההשתלה. טכניקה זו יכולה לשמש כדי לחקור התערבויות המונעות דחיית allograft לב, תפקוד לקוי של השתלה הראשונית, למזער את הצורך בדיכוי חיסוני לאחר הניתוח או להאריך את אורך החיים של allograft לב.

אופטימיזציה של החשיפה היא החלק המאתגר ביותר בהליך ההשתלה ודורשת מספר חברי צוות להשלים אותה. באופן דומה, יש צורך בפרפוזיה מנוסה כדי לתאם ולפקח על זלוף ex vivo. כדי להתחיל, בצע חתך באורך 20 עד 30 ס"מ באמצעות להב מספר 10 מן manubrium עד xiphoid, בהתאם לגודל החזיר.

השתמש באלקטרו-קאוטריה כדי לחלק את הפקטוריליס מייג'ור מטה מעצם החזה אל ה-xiphoid תוך הקפדה על חלוקה לאורך קו האמצע של עצם החזה. ברגע שיורדים אל עצם החזה, הבקיע את קו האמצע והתחל את החזה מה-xiphoid על ידי חלוקתו למספריים כבדים. לאחר מכן הרחיבו את הצפלד הסטרנוטומיה לאחר כל חתך.

מפרידים בבוטות את הלב מעצם החזה באמצעות מטאטא אצבעות ומשלימים את החזה דרך המנובריום. לאחר אופטימיזציה של החשיפה לשדה הניתוחי באמצעות רטרקטור עצם החזה, זהה והסיר את התימוס עם אלקטרוקואוטריה על ידי הזנת הפריקרדיום לאורך הסרעפת מהסרעפת לאבי העורקים ויצירת עריסת קרום הלב באמצעות תפרים משי. מחלקים באופן מלא את הרקמה בין אבי העורקים לעורק הריאתי ומדמיינים את מיקום קשת אבי העורקים ואת הגזע הברכיצפלי כדי להקל על מיקום נכון של מהדק צלב אבי העורקים.

באמצעות שימוש במספריים ובדיסקציה קהה, משחררים באופן היקפי את הווריד קאווה המעולה וקושרים שני תפרים משייים בגודל אפס סביב הווריד קאווה העליון. יש למרוח תפר פוליפרופילן בגודל 4-0 על אבי העורקים העולה באופן תפר U ועל האטריום הימני באופן מיתר ארנק. החדר צינורית שורש אבי העורקים לילדים מאובטחת על ידי תפר U שהונח בעבר.

ואז לאחר ביטול שידור הצינורית, לאבטח במקום עם חוסם עורקים רומל. חברו את צינורית השורש אבי העורקים לצינורות הלב-ריאה לאחר שהצינורות נשטפו בקרדיופלגיה של דל נידו. צור אטריוטומיה ימנית בתוך מיתר הארנק שהוצב קודם לכן.

הכניסו צינורית ורידית לאטריום הימני והבטיחו באמצעות חוסם עורקים של רומל. חברו את הצינורית הוורידית לקו יניקה סטרילי המחובר לב-ריאה של שומרי התאים ואספו כ-1 עד 1.3 ליטר דם. לאחר מכן החל את מהדק הצלב אבי העורקים, בזהירות להבטיח כי המהדק חוסם לחלוטין את אבי העורקים העולה.

לאחר הנחת רפש קרח סטרילי על הלב, מחלקים את הווריד הנבוב התחתון והנעלה רק פרוקסימלי לווריד האזיגוס. אבי העורקים ברמת הקשת פשוט דיסטלי לעורק הנקוב ולעורק הריאתי הראשי בביפורקציה. זהה וליטף את הוורידים הריאתיים, ואז הסר את הלב מהחזה והנח אותו במיכל עם קרח סטרילי.

כדי להכין את אבי העורקים למיקום מחבר אבי העורקים, הניחו ארבעה תפרים פוליפרופילן בגודל 4-0 משועבדים בצורה של מזרן אופקי פשוט סביב החלק הפנימי של אבי העורקים הדיסטלי בעומק של חמישה מילימטרים מתחת לקצה החתך, ולאחר מכן קשרו אותם. תוך כדי החזקת התפרים המשועבדים של אבי העורקים, הכנס את מחבר אבי העורקים לתוך אבי העורקים וקשר סרט טבור סביב אבי העורקים כדי לאבטח את המחבר. מניחים מחרוזת ארנק פוליפרופילן בגודל 4-0 סביב קצה החתך הדיסטלי של עורק הריאה הראשי.

מכניסים את צינורית העורק הריאתי וקושרים את קצות חוט הארנק כדי לאבטח את הצינורית. לאחר מכן התחברו לצינורית העורק הריאתי למחבר העורק הריאתי במכשיר ואבטחו אותו עם העניבה. קח את השתל המוכן מהשולחן האחורי להתקן ה- ex vivo perfusion וחבר את מחבר אבי העורקים למקום המכשיר.

פתח האוורור של החדר השמאלי מתנקז דרך וריד הריאתי הלא קשור לתוך האטריום השמאלי ולרוחב המסתם המיטרלי לתוך החדר השמאלי. באמצעות להב מספר 10, בצע חתך עור באורך 20 עד 30 ס"מ ולאחר מכן המשך בניתוח עד לחיתולית באמצעות אלקטרוקואוטריה. לאחר הרמת החיתולית והצפק עם שני מלחצי קוצ'ר, יש לבצע בזהירות חתך קטן לתוך חלל הצפק באמצעות מספריים של מצנבאום.

להאריך את פתח הצפק לכל אורך החתך באמצעות אלקטרוקואוטריה. הנחת אצבע מתחת כדי להגן על הקרביים שמתחת. מניחים נסוג בלפור כדי לייעל את החשיפה ונסוגים למעי הדק באמצעות מגבת רטובה.

לשאת את הנתיחה עד אבי העורקים הבטני בווריד קאווה נחות, ולאחר מכן ligate הלימפה עם קליפסים בינוניים וגדולים. על השולחן האחורי, כאשר הווריד הריאתי השמאלי השאיר את האטריוטומיה שבה הוכנס פתח האוורור לחדר השמאלי, הוא חתך את ההיבט הדיסטלי של אבי העורקים והעורק הריאתי שבו ייתכן שהחיבור לצינוריות ריסק את הרקמה. מניחים מהדק סאטנסקי על הווריד הנבוב התחתון ויוצרים ונוטומיה אורכית באורך של כ-1.5 ס"מ באמצעות הלהב מספר 11 והמספריים של פוט.

אנטומוז את השתל בעורק הריאתי לווריד התחתון האינפרא-רנלי של הנמען בצורה מקצה לקצה באמצעות תפר פוליפרופילן בגודל 4-0 רץ. לאחר מכן anastomose את השתל אבי העורקים לאבי העורקים האינפרא-רנלי של הנמען בצורה מקצה לקצה באמצעות תפר פוליפרופילן בגודל 4-0 רץ. בזהירות למקם את הלב לתוך החלל retroperitoneal הנכון, מניעת מתח על anastomosis ו kinking של כלי הדם.

לאחר מכן החלף את המעי הדק. סגור את החיתולית עם תפר מקסון בגודל אפס לולאה בצורה רצה המתחילה משני קצות החתך וקשירה באמצע, תוך הימנעות מכל פגיעה במעיים. סגור את השכבה העורית העמוקה עם מידה 2-0 Vicryl בצורה רצה ואת העור עם מידה 4-0 Monocryl בצורה רצה.

נרכשו מספר פרמטרים שונים של פרפוזיה. קצבי הזרימה במחזור הדם נמדדו מהעורק הריאתי, מאבי העורקים ומהעורקים הכליליים. נמדדו גם לחץ אבי העורקים הכולל לחץ ממוצע, לחץ סיסטולי, לחץ דיאסטולי.

במהלך זלוף ex vivo, נמדדו גם קצב הלב והטמפרטורה של אלוגרפט הלב. במהלך תקופת הזלוף נמדדו ריווי חמצן ורידי מעורב וערכי ההמטוקריט מהפרפוזט. הכדאיות של הלב ההטרוטופי התוך-רחמי באתרו 35 יום מצביעה על השתלה מוצלחת באמצעות פרוטוקול זה.

הדבר החשוב ביותר שיש לזכור הוא לבחור אתר עבור allograft כי ממזער את הפוטנציאל למתח וקישוט של anastomoses. על ידי ביצוע הליך זה, החוקר יוכל לבחון מספר סוגים שונים של טיפולים כדי לקבוע את השפעתם על תגובות אימונולוגיות נגד allograft, כמו גם לקבוע את תוחלת החיים של אפקט טיפולי על allograft. לאחר פיתוח פרוטוקול זה, הקבוצה שלנו הצליחה לבחון כלי רכב וקטוריים נגיפיים שונים להעברת גנים, כמו גם מודל לדחיית אלוגרף חריפה כדי להבין את הפתופיזיולוגיה של דחייה ויעילות של העברת גנים באמצעות וקטורים ויראליים.