המחברים מודים לצוות במעבדה של מחקר כירורגי, מארי Lannelongue בית החולים, לקבלת סיוע טכני וטיפול בבעלי חיים. מערכת אולטרסאונד לב VividE9 (מערכת הרפואית ג&#39;נרל אלקטריק) מומנה על ידי מענק מCardio-vasculaire-Obésité Domaine D&#39;interet איתן הטבע (CODDIM בקלה 100,158, RégionIle-דה-פראנס, צרפת).

פרוטוקול זה אושר על ידי ועדת האתיקה המקומית בניסויים בבעלי חיים ועל ידי הוועדה המוסדית על רווחת בעלי החיים של המוסד שלנו. כל בעלי החיים קיבלו טיפול הומני בעמידה ב&quot; העקרונות של מעבדה טיפול בבעלי חיים &quot;שגובשו על ידי האגודה הלאומית למחקר רפואי ו&quot; המדריך לטיפול והשימוש בחי מעבדה&quot; שהוכנו על ידי המכון למשאבי חיות מעבדה ופורסמו על ידי הלאומי מוסדות לבריאות (NIH פרסום מס &#39;86-23, מתוקנים 1996). שיקולים כלליים: יש לטפל בכל בעלי החיים בכבוד, על פי כללי 3Rs (המרכז הלאומי לחידוד החלפה והפחתה של בעלי חיים במחקר). ניתוחים חייבים להתבצע עם עקרות קפדניות ובאותו אופן שבי לבני אדם. כל המכשירים רפואיים חייבים להיות סטרילי. 1. הרדמת פרוטוקול הערה: ויט גדולחזירונים דואר במשקל 20 קילו (3-שבועות-ישן) היו בשימוש. יתר לחץ דם הריאה היה מושרה בהדרגה. השלב הראשון כלל קשירת שמאל עורק הריאה (הרשות הפלסטינית) באמצעות פתיחת בית החזה שמאלי. השלבים הבאים כללו ביצוע embolizations הרשות הפלסטינית השבועית במהלך 5 שבועות. כל הנהלים בוצעו בהרדמה כללית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לא להאכיל את החיות 12 שעות לפני ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האם premedication של החזרזיר, לבצע זריקה תוך שרירית באמצעות 30 מ&quot;ג / קילוגרם של קטמין הידרוכלוריד וaropine 0.05 מ&quot;ג / קילוגרם בשרירי הצוואר, 30 דקות לפני ההליך. 8 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר החזיר הוא מסומם, להכניס צנתר לוריד האוזן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע תוך ורידי בולוס של פנטניל (0.005 מ&quot;ג / קילוגרם) וpropofol (2mg / קילוגרם) לפני אינטובציה. להזריק לוריד בוריד אוזן Cisatracurium (0.3 מ&quot;ג / קילוגרם) וצנרר החזיר (אינטובציה הלא סלקטיבי עם בדיקה צרפתית 7) 9. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח מכשירי ניטור רציפים על החזרזיר: EKG הרציף, CO 2 הנשיפה וoxymetry 8,9. הכנס קטטר שדה נוזל דם דרך עורק התרדמה תחת הדרכת echography כדי לפקח על לחץ הדם המערכתי 8-10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על הרדמה כללית עם isoflurane (2%) בתוספת 100% חמצן, עירוי מתמשך תוך ורידי של פנטניל (0.004 מ&quot;ג / קילוגרם) וpropofol (3 מ&quot;ג / קילוגרם). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף antibioprophylaxy עם הזרקה של Cefatoxine (ז 1) וGentamycine (80 מ&quot;ג). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למנוע אופרטיבי תוך וכאב שלאחר ניתוח עם הזרקה של nalbuphine tid (0.01 מ&quot;ג / קילוגרם) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק כל 15 דקות השלמות של ההרדמה: היעדר התנועה, קצב לב יציב, לחץ דם, חמצון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במשחת וטרינר בעיניים כדי למנוע יובש ואילו בהרדמה. </li></ol> 2. קשירת של עורק הריאה השמאלית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התקן את החזרזיר במצב שוכב בצד שמאל, לגלח את אזור הניתוח ולחטא את העור עם alcoholiפתרון ג. השתמש בשדה סטרילי מקומי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את החזה באמצעות פתיחת בית החזה שמאלי קטנה לרוחב (5 עד 10 סנטימטרים) בחלל &#39;4 צלעיים ה. אל תלכו למאחורי הקצה של עצם השכמה. לחזור בזהירות לכיוון ריאות הסרעפת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שחלון כירורגית אידיאלי ממוקם, לחזור בו משמאל azygos הווריד ולנתח את עורק הריאה השמאלי הראשי לפני שקשרת אותו עם משי 2/0 שאינו נספג. הערה: חשוב מאוד שלא לפתוח את קרום הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את השכבה אחרי שכבת החזה עם תפרים נספגים. השתמש בצינור חזה כדי להסיר את pneumothorax לאחר הניתוח. הסר את צינור החזה רק לאחר האקסטובציה החזרזיר. </li></ol> 3. אמבוליזציה של העורק הימני התחתונה אונה הריאה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הרדמה כללית, לשים את החזרזיר במצב שכיבה. לבצע ניטור רציף של oxymetry, CO 2 הנשיפה, EKG, אומר לחץ דם מערכתי (MPA) ומתכוון לחץ בעורק ריאה (mPAP) לאורך כל ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את כל הצנתרים percutaneously עם הדרכת echographic. הכנס קטטר הצרפתי עורקי 6 בעורק התרדמה לניטור לחץ דם ונדן צרפתי 8 בווריד הנבוב מעולה דרך וריד הצוואר (בצע לנקב 2 סנטימטרים מעל חריץ suprasternal עם כיוון זווית 45 מעלות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת הדרכתו fluoroscopic, הכנס, בנדן Fr 8, 5 קטטר אנגיוגרפיה צרפתי בעורק הריאה הימני. קצה הצנתר חייב להיות בעורק ריאה אונה תחתונה מגזרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את החומר לאמבוליזציה עורק ריאה: 1 מיליליטר של דבק רקמות רך המכיל N-בוטיל-2-cyanoacrylate מתווסף 2 מיליליטר של צבע ניגוד lipidic. זהירות: יש להימנע ממגע בעור או בעיניים עם N-בוטיל-2-cyanoacrylate. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר צנתר אנגיוגרפיה הוא ממוצבת היטב, להזריק 0.2 מיליליטר ל -0.4 מיליליטר של ההכנה בעורק הריאה. להעריך את הסובלנות של אמבוליזציה על ידי המדידהיחס mPAP / MPA שלא יעלה על 0.5. תפסיק אמבוליזציה אם ריווי החמצן היה &lt;90% ו / או MPA ירד מתחת לגיל 60 מ&quot;מ כספית ו / או תפוקת הלב היה תחת 2 L / min. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הקטטר ונדני אנגיוגרפיה ולבצע לחיצות דיגיטליות של האתר לנקב. </li></ol> 4. הערכה המודינמית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הרדמה כללית, מקם את החזרזיר במצב שכיבה. לבצע ניטור רציף של oxymetry, הנשיפה CO 2, EKG, לחץ מערכתי דם (MPA) ולחץ ריאתי דם (mPAP) לאורך כל ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאוורר את החזרזירים עם הנמוך ביותר FiO 2 ככל האפשר בהתאם לריווי החמצן (&gt; 95%). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את כל קטטר percutaneously תחת הדרכת echographic. קטטר הצרפתי עורקי 6 מוכנס בעורק התרדמה ונדן צרפתי 8 מוכנס בווריד הנבוב מעולה (בצע לנקב 2 סנטימטרים מעל חריץ suprasternal עם 45 מעלותכיוון זווית). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס קטטר הצרפתי סוואן-גנץ 7 בתא מטען עורק הריאה. להעריך את תפוקת לב בטכניקת הדילול תרמו, עם הזרקה של 10 מיליליטר של תמיסת מלח על 4 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את הפרמטרים הבאים: סיסטולי, דיאסטולי ומתכוון לחץ מערכתי וריאת עורקים, קצב לב, ריווי חמצן, לחץ פרוזדורים תקין, תפוקת לב. </li></ol> 5. אקו הערכה של החדר ממני <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הרדמה כללית, להתקין את החזרזיר במצב שכיבה ולבצע בדיקת אקו חזה טרנס פי הנחיות אנושיות להקרנת RV. הקלטת וידאו לולאות במהלך הפסקה הסוף-נשיפה. </li></ol> 6. לחץ-נפח לולאות הערכה עם שיטת המוליכות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הרדמה כללית, להתקין את החזרזיר במצב שכיבה. לבצע ניטור רציף של oxymetry, CO 2 נשיפה, EKG, לחץ מערכתי דם (MPA) ולחץ ריאתי דם (mPAP) לאורך כל ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס קטטר עורקי 6 צרפתי בימין או בעורק תרדמה שמאלי וקטטר אנגיוגרפיה בחדר השמאלי. הכנס נדן 9 צרפתי בוריד הנבוב מעולה, 8 צרפתי בימין או וריד הירך שמאל וקטטר Picco עורקים בימין או עורק הירך שמאל. הכנס את כל הצנתרים percutaneously תחת הדרכת echographic. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את כיול לחץ ונפח של חללית מוליכות על פי המלצות היצרן. מדוד את התנגדות הדם (Rho) על ידי דגימת 5 מיליליטר של דם עורקים. קציר 5 מיליליטר של דם עורקים, דה-אוויר המזרק ולמלא את הבדיקה למדידת התנגדות הדם. 10-13. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את קטטר המוליכות בחדר ממני בנדן 9Fr בוריד veina מעולה. מניחים כראוי סוף הצנתר עם הדרכת fluoroscopic. מניחים את הקצה של הצנתר בשיא של האסדהחדר HT ולהכניס את כל זמן רב ככל האפשר בחדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בקרת האיכות של הלולאות. (איור 6) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס בלון מתכלה בוריד veina הנחותים דרך וריד הירך. הנח את הקצה ממש מתחת לפרוזדורים הנכונים. השתמש בהדרכת fluoroscopic. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לולאות לחץ נפח הקלטה של החדר ממני במדינה בסיסית ובמהלך חסימת וריד נבוב נחות כפי שתוארו לעיל 10-12. (איור 7) </li></ol> 7. Endomyocardial ביופסיות של החדר ממני <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הרדמה כללית, מקם את החזרזיר במצב שכיבה. לבצע ניטור רציף של oxymetry, הנשיפה CO 2, EKG, לחץ מערכתי דם (MPA) ולחץ ריאתי דם (mPAP) לאורך כל ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס percutaneously נדן צרפתי 10 בוריד הנבוב מעולה. הכנס 7 הצרפתי סוואן-גנץ בדיקה (SG) ונדן ארוך 7.5 צרפתי קטטר בAtri תקיןאממ. כאשר הקצה של חללית SG ממוקם היטב בחדר ממני (RV), לנפח את הבלון של חללית SG, לדחוף את הצנתר ארוך הנדן בRV נגד הבלון. להוציא את האוויר הבלון ולהסיר את הבדיקה SG עוזב את הצנתר ארוך נדן בקרוואנים. העמדה טובה של הקצה של ארוך הנדן נשלטת על ידי שיקוף ובדיקה אקו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את biotome בנדן הארוך ולבצע ביופסיות endomyocardial תחת echographic, fluoroscopic והשליטה EKG. </li></ol> 8. שיקולי טיפול שלאחר ניתוח כללי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ניתוח, extubate החזרזיר רק לאחר ההתאוששות של פונקציות נשימה ספונטניות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתרופות לאחר ניתוח, לבצע זריקה תוך שרירית של Cefatoxine (ז 1) Die במשך 5 ימים ולספק שיכוך כאבים appropieted (Buprenorphin, מ&quot;ג 0.01 הזרקת intramusculary / קילוגרם הצעה במשך 10 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אל תשאיר חיה שעברה ניתוח לחברה של בעלי חיים אחרים, עד rec מלאovered. </li></ol> 9. המתת חסד שיטה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים בעלי החיים במצבים המיושמת; סוף הניסויים, איבד ממשקל של 15% או יותר בשבוע אחד, unibability להאכיל את עצמם כראוי, אנורקסיה, זיהום לא ניתן לטפל, כאב או didease אחר, desease מדי קשה: קוצר נשימה כיחלון, גדולה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במהלך הרדמה כללית עם 8% sevoluorane, להזריק מינון גבוה של propofol (0.5 מ&quot;ג / קילוגרם) הקשורים למנה קטלנית של אשלגן כלורי (0.2 גר &#39;/ קילוגרם). כאשר הלב עצר בירוויח, harveste הלב וריאות גוש כדי לעשות מחקר היסטולוגית ומולקולרי. </li></ol>

<ol>
	<li>Simonneau, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Updated+clinical+classification+of+pulmonary+hypertension.">Updated clinical classification of pulmonary hypertension.</a> J Am Coll Cardiol. 54, S43-S54 (2009).</li><li>Dartevelle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension.">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. 23 (4), 637-648 (2004).</li><li>Hoeper, M. M., Mayer, E., Simonneau, G., Rubin, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension.">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Circulation. 113 (16), 2011-2020 (2006).</li><li>Galie, N., Kim, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+microvascular+disease+in+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension.">Pulmonary microvascular disease in chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Proc Am Thorac Soc. 3 (7), 571-576 (2006).</li><li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+in+patients+with+idiopathic,+familial,+and+anorexigen-associated+pulmonary+arterial+hypertension+in+the+modern+management+era.">Survival in patients with idiopathic, familial, and anorexigen-associated pulmonary arterial hypertension in the modern management era.</a> Circulation. 122 (2), 156-163 (2010).</li><li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+right+heart+failure:+a+window+for+translational+research+in+pulmonary+hypertension.">Experimental models of right heart failure: a window for translational research in pulmonary hypertension.</a> Semin Respir Crit Care Med. 34 (5), 689-699 (2013).</li><li>Mercier, O., Fadel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension:+animal+models.">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension: animal models.</a> Eur Respir J. 41 (5), 1200-1206 (2013).</li><li>Kaiser, G. M., Heuer, M. M., Fruhauf, N. R., Kuhne, C. A., Broelsch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+handling+and+anesthesia+for+experimental+surgery+in+pigs.">General handling and anesthesia for experimental surgery in pigs.</a> J Surg Res. 130 (1), 73-79 (2006).</li><li>Flegal, M. C., Kuhlman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+monitoring+equipment+for+laboratory+animals.">Anesthesia monitoring equipment for laboratory animals.</a> Lab Anim (NY). 33 (7), 31-36 (2004).</li><li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+ventricular+reserve+in+a+piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension.">Right ventricular reserve in a piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. , (2014).</li><li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+ventricular+plasticity+in+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload.">Right ventricular plasticity in a porcine model of chronic pressure overload.</a> J Heart Lung Transplant. 33 (2), 194-202 (2014).</li><li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+indices+of+right+ventricular+function+are+markers+of+ventricular-arterial+coupling+rather+than+ventricular+contractility:+insights+from+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload.">Non-invasive indices of right ventricular function are markers of ventricular-arterial coupling rather than ventricular contractility: insights from a porcine model of chronic pressure overload.</a> Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 14 (12), 1140-1149 (2013).</li><li>Kass, D. A., Yamazaki, T., Burkhoff, D., Maughan, W. L., Sagawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relationships+by+the+conductance+(volume)+catheter+technique.">Determination of left ventricular end-systolic pressure-volume relationships by the conductance (volume) catheter technique.</a> Circulation. 73 (3), 586-595 (1986).</li><li>Mercier, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension.">Piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Pulm Circ. 3 (4), 908-915 (2013).</li><li>Brooks, H., Kirk, E. S., Vokonas, P. S., Urschel, C. W., Sonnenblick, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performance+of+the+right+ventricle+under+stress:+relation+to+right+coronary+flow.">Performance of the right ventricle under stress: relation to right coronary flow.</a> J Clin Invest. 50 (10), 2176-2183 (1971).</li><li>Boulate, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+microvascular+lesions+regress+in+reperfused+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension.">Pulmonary microvascular lesions regress in reperfused chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> J Heart Lung Transplant. , (2014).</li></ol>

אין ניגוד האינטרסים לחשוף.

כמו בתרגול קליני בבני אדם, בגין כללי asepsis הוא חובה בכל ההליכים כירורגיים. במודל המקורי חזרזיר CTEPH המתואר על ידי א &#39;מרסייה et al., קשירת עורק הריאה השמאלית בוצעה לאחר פתיחת קרום הלב, דרך חציון sternotomy 14. בגלל קרום הלב נשאר נפתח, האינטראקציה בין החדר ממני וקרום הלב...

תרומבואמבוליים יתר לחץ דם הריאה כרוני (CTEPH) הוא תת-סוג של יתר לחץ דם הריאה (PH) עקב חסימת כלי דם ריאתי כרונית מיטה על ידי קרישים עיקשים ומאורגנים הקשורים לתסחיפי ריאה אחת או חריף יותר 1-3. שילוב של מחלה חסימתית כלי דם ושאינו חסימתית מוביל לעלייה נוספת בתנגודת כלי דם ריאתי 4. ראשון חייב החדר ממני להתאים עם היפרטרופיה מפוצה לשמור על תפוקת הלב. ללא טיפול, החדר מן מרחיב ולא מצליח לאורך זמן. בעידן המודרני, PH נשאר מחלה מתקדמת ולעתים קרובות קטלנית למרות השימוש בטיפולים ממוקדים המודרניים 5. מחקרים רבים הראו כי חדר ממני ההסתגלות (RV) לעומס יתר לחץ היא הקובע העיקרי של הישרדות בחולי PH. מסיבה זו, הבנת המנגנונים בבסיס המעבר מהסתגלות לשיפוץ קרוואנים הסתגלות היא אבן הראשה לטיפול וdevelopment של טיפולים חדשים. בגלל PH הוא נדיר ודגימת רקמה היא כמעט infeasible בחולים התשושים אלה, מחקרי ניסויים נדרשים. יתר על כן, מחקרים פרה-קליניים הם חובה לוודא שתרופה עם יתרון בכלי דם ריאתי אינה גורמת לירידת ערך RV. במשך שנים רבות, מודלים ניסיוניים שונים של PH וכישלון RV פותחו עם 6,7 יתרונות ומגבלות. במודלים עכברי התרופתי (Monocrotaline, SU5416, היפוקסיה), PH וכישלון RV להתרחש משניים לדלקת מסיבית, איסכמיה או לחץ רעיל שעלולות לגרום לכמה &quot;תופעות צדדים&quot; והטיה בניתוח מסלול מולקולרי. Furthemore, ביופסיות endomyocardial RV במודל עכברי צריכה להיות מאוד מאתגרות ללא sacrifying בעלי החיים. מודלים כירורגי בבעלי חיים גדולים יותר הם פיסיולוגיים יותר אך אינו משפיעים על כלי דם ריאתי (פסי עורק ריאה, מחלף מערכתי לריאות) או לגרום לPH וRV חריפיםF (תסחיף ריאתי חריף). מטרת מאמר זה היא לתאר מודל מקורי של CTEPH בחזרזיר שהוא יותר נציג של הפתופיזיולוגיה CTEPH. מודל חיה גדול זה מאפשר מדידות חוזרת ונשנית לא פולשנית וחודרניות מבוצעות בדרך כלל בפרקטיקה קלינית (צנתור לב ימין) כדי לעקוב אחר שינויים בפרמטרים המודינמיים ריאות ותפקוד RV.

chronic thromboembolic pulmonary hypertension and assessment of right ventricular function in the piglet

מודל מקורי של חזרזיר תרומבואמבוליים יתר לחץ דם ריאה כרונית (CTEPH) הקשורים לבעיות בתפקוד כרוניים ימין חדרית (RV) מתואר. יתר לחץ דם ריאה (PH) היה מושרה בחזירונים 3 שבועות בן ידי חסימה הדרגתית של מיטת כלי דם ריאתי. קשירה של עורק הריאה השמאלי (הרשות הפלסטינית) בוצעה לראשונה במיני-פתיחת בית החזה. שנית, embolizations השבועי של אונת הריאה הימנית התחתונה נעשה תחת הדרכת fluoroscopic עם n-בוטיל-2-cyanoacrylate במהלך 5 שבועות. אומר לחץ ריאתי עורקים (mPAP) נמדד על ידי catheterism לב ritght, גדל בהדרגה, כמו גם לחצן עכבר מן הפרוזדורים ועמידויות ריאות וכלי דם (PVR) לאחר 5 שבועות בהשוואה לבעלי חיים דמה. חדרית שיפוץ מבני ותפקודי (RV) תקין הוערך על ידי אקו transthoracic (קטרי RV, עובי קיר RV, תפקוד הסיסטולי RV). elastance RV וצימוד RV-ריאה הוערכו על ידי לולאות לחץ-נפחניתוח (PVL) עם שיטת מוליכות. מחקר היסטולוגית של הריאה והחדר ממני גם בוצע. מולקולרי ניתוחים על RV ניתן לבצע רקמות טריות באמצעות ביופסיות endomyocardial transcutaneous חוזרות ונשנות. מחלת כלי דם ריאתי בשטחים חסומים ובלא הפרעה נחקרה מביופסיות ריאה באמצעות ניתוחים ופתולוגיה מולקולריים. יתר על כן, את האמינות והשחזור הייתה קשור עם מגוון של חומרת PH בבעלי חיים. רוב ההיבטים של המחלה CTEPH האנושית לשכפל במודל זה, המאפשר נקודות מבט חדשות להבנת המנגנונים בבסיס (מיטוכונדריה, דלקת) וגישות טיפוליות חדשות (ממוקד, טיפולים סלולריים או גן) של חדר ממני עומס יתר אלא גם כלי דם ריאתי מחלה.

Feasability מודל זה של חזרזיר יתר לחץ דם ריאה פוסט-תסחיפים כרוניים הוקם במעבדה שלנו בשנתי 2009-2010. מאז 2011, השתמשנו 70 חזירונים ובצענו 63 דגמים הושלמו. מניסיוננו, המימוש של מודל זה נדרש עקום למידה. <p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet at JoVE.com

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

תרומבואמבוליים כרוני יתר לחץ דם ריאה והערכה של תפקוד ימין חדרית בחזרזיר

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

chronic-thromboembolic-pulmonary-hypertension-assessment-right

Research

JoVE Journal

Medicine

12.1K Views.  Marie Lannelongue Hospital. Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

Video: Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential therapies. Given the expense and time involved in creating animal models of disease, it is critical that researchers have tools to accurately assess phenotypic expression of disease. Right ventricular dysfunction is the major manifestation of pulmonary hypertension. Echocardiography is the mainstay of the noninvasive assessment of right ventricular function in rodent models and has the advantage of clear translation to humans in whom the same tool is used. Published echocardiography protocols in murine models of PAH are lacking.
In this article, we describe a protocol for assessing RV and pulmonary vascular function in a mouse model of PAH with a dominant negative BMPRII mutation; however, this protocol is applicable to any diseases affecting the pulmonary vasculature or right heart. We provide a detailed description of animal preparation, image acquisition and hemodynamic calculation of stroke volume, cardiac output and an estimate of pulmonary artery pressure.

This article provides a protocol for the echocardiographic assessment of right ventricular size and pulmonary hypertension in mice. Applications include phenotype determination and serial assessment in transgenic and toxin-induced mouse models of cardiomyopathy and pulmonary vascular disease.

אקו הערכה של הלב הימני בעכברים

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential ...

Assessment of Right Ventricular Structure and Function in Mouse Model of Pulmonary Artery Constriction by Transthoracic Echocardiography

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, the RV is significantly affected in pulmonary diseases such as pulmonary artery hypertension (PAH). In addition, the RV is remarkably sensitive to cardiac pathologies, including left ventricular (LV) dysfunction, valvular disease or RV infarction4. To understand the role of RV in the pathogenesis of cardiac diseases, a reliable and noninvasive method to access the RV structurally and functionally is essential.
A noninvasive trans-thoracic echocardiography (TTE) based methodology was established and validated for monitoring dynamic changes in RV structure and function in adult mice. To impose RV stress, we employed a surgical model of pulmonary artery constriction (PAC) and measured the RV response over a 7-day period using a high-frequency ultrasound microimaging system. Sham operated mice were used as controls. Images were acquired in lightly anesthetized mice at baseline (before surgery), day 0 (immediately post-surgery), day 3, and day 7 (post-surgery). Data was analyzed offline using software.
Several acoustic windows (B, M, and Color Doppler modes), which can be consistently obtained in mice, allowed for reliable and reproducible measurement of RV structure (including RV wall thickness, end-diastolic&#160;and end-systolic dimensions), and function (fractional area change, fractional shortening, PA peak velocity, and peak pressure gradient) in normal mice and following PAC.
Using this method, the pressure-gradient resulting from PAC was accurately measured in real-time using Color Doppler mode and was comparable to direct pressure measurements performed with a Millar high-fidelity microtip catheter. Taken together, these data demonstrate that RV measurements obtained from various complimentary views using echocardiography are reliable, reproducible and can provide insights regarding RV structure and function. This method will enable a better understanding of the role of RV cardiac dysfunction.

Right ventricle (RV) dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease, yet limited methodologies are available for its evaluation. Recent advances in ultrasound imaging provide a noninvasive and accurate option for longitudinal RV study. Herein, we detail a step-by-step echocardiographic method using a murine model of RV pressure overload.

הערכה של מבנה הנכון חדרית ותפקוד בעכבר הדגם של תעוקת עורק ריאה על ידי Transthoracic אקו

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this is only partially explained by traditional CVD risk factors. Vascular dysfunction is an important non-traditional risk factor, characterized by vascular endothelial dysfunction (most commonly assessed as impaired endothelium-dependent dilation [EDD]) and stiffening of the large elastic arteries. While various techniques exist to assess EDD and large elastic artery stiffness, the most commonly used are brachial artery flow-mediated dilation (FMDBA) and aortic pulse-wave velocity (aPWV), respectively. Both of these noninvasive measures of vascular dysfunction are independent predictors of future cardiovascular events in patients with and without kidney disease. Patients with CKD demonstrate both impaired FMDBA, and increased aPWV. While the exact mechanisms by which vascular dysfunction develops in CKD are incompletely understood, increased oxidative stress and a subsequent reduction in nitric oxide (NO) bioavailability are important contributors. Cellular changes in oxidative stress can be assessed by collecting vascular endothelial cells from the antecubital vein and measuring protein expression of markers of oxidative stress using immunofluorescence. We provide here a discussion of these methods to measure FMDBA, aPWV, and vascular endothelial cell protein expression.

The degree of vascular dysfunction and contributing physiological mechanisms can be assessed in patients with chronic kidney disease by measuring brachial artery flow-mediated dilation, aortic pulse-wave velocity, and vascular endothelial cell protein expression.

הערכה של תפקוד כלי דם בחולים עם מחלת כליות כרונית

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt (MCT+Flow). The shunt is created by inserting an 18-G needle from the abdominal aorta into the adjacent caval vein. Increased pulmonary flow has been demonstrated as an essential trigger for a severe form of PAH with distinct phases of disease progression, characterized by early medial hypertrophy followed by neointimal lesions and the progressive occlusion of the small pulmonary vessels. To measure the right heart and pulmonary hemodynamics in this model, right heart catheterization is performed by inserting a rigid cannula containing a flexible ball-tip catheter via the right jugular vein into the right ventricle. The catheter is then advanced into the main and the more distal pulmonary arteries. The histopathology of the pulmonary vasculature is assessed qualitatively, by scoring the pre- and intra-acinar vessels on the degree of muscularization and the presence of a neointima, and quantitatively, by measuring the wall thickness, the wall-lumen ratios, and the occlusion score.

This protocol describes a surgical procedure to create a model for flow-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) in rats and the procedures to analyze the principle hemodynamic and histological end-points in this model.

כירורגיה שאנט, צנתור לב ימני, וכלי הדם Morphometry במודל חולדה עבור נגרמת זרימה ריאתי עורקי יתר לחץ דם

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV diastolic function is rarely quantified in experimental studies. This might be due to technical difficulties in the visualization of the RV in the apical four-chamber view in rodents. Here we describe two positions facilitating the visualization of the apical four-chamber view in mice to assess the RV diastolic function.
The apical four-chamber view is enabled by tilting the mouse fixation platform to the left and caudally (LeCa) or to the right and cranially (RiCr). Both positions provide images of comparable quality. The results of the RV diastolic function obtained from two positions are not significantly different. Both positions are comparably easy to perform. This protocol can be incorporated into published protocols and enables detailed investigations of the RV function.

Here we describe and compare two positions for obtaining the apical four-chamber view in mice. These positions enable the quantification of the right ventricular function, provide comparable results, and can be used interchangeably.

המדידה האקוקרדיוגרפית של פרמטרים של הימני החדרית בעכבר

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV ...

A Pulmonary Trunk Banding Model of Pressure Overload Induced Right Ventricular Hypertrophy and Failure

Right ventricular (RV) failure induced by sustained pressure overload is a major contributor to morbidity and mortality in several cardiopulmonary disorders. Reliable and reproducible animal models of RV failure are therefore warranted in order to investigate disease mechanisms and effects of potential therapeutic strategies. Banding of the pulmonary trunk is a common method to induce isolated RV hypertrophy but in general, previously described models have not succeeded in creating a stable model of RV hypertrophy and failure.
We present a rat model of pressure overload induced RV hypertrophy caused by pulmonary trunk banding (PTB) that enables different phenotypes of RV hypertrophy with and without RV failure. We use a modified ligating clip applier to compress a titanium clip around the pulmonary trunk to a pre-set inner diameter. We use different clip diameters to induce different stages of disease progression from mild RV hypertrophy to decompensated RV failure.
RV hypertrophy develops consistently in rats subjected to the PTB procedure and depending on the diameter of the applied banding clip, we can accurately reproduce different disease severities ranging from compensated hypertrophy to severe decompensated RV failure with extra-cardiac manifestations.
The presented PTB model is a valid and robust model of pressure overload induced RV hypertrophy and failure that has several advantages to other banding models including high reproducibility and the possibility of inducing severe and decompensated RV failure.

We present a surgical method to induce right ventricular hypertrophy and failure in rats.

עורק ריאתי פסים דגם של עומס המושרה היפרטרופיה נכון חדרית וכישלון

Right ventricular (RV) failure induced by sustained pressure overload is a major contributor to morbidity and mortality in several cardiopulmonary ...

Induction and Phenotyping of Acute Right Heart Failure in a Large Animal Model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The morphological and functional phenotyping of the right ventricle is of particular importance in the context of hemodynamic compromise in patients with ARHF. Here, we describe a method to induce ARHF in a previously described large animal model of chronic PH, and to phenotype, dynamically, right ventricular function using the gold standard method (i.e., pressure-volume PV loops) and with a non-invasive clinically available method (i.e., echocardiography). Chronic PH is first induced in pigs by left pulmonary artery ligation and right lower lobe embolism with biological glue once a week for 5 weeks. After 16 weeks, ARHF is induced by successive volume loading using saline followed by iterative pulmonary embolism until the ratio of the systolic pulmonary pressure over systemic pressure reaches 0.9 or until the systolic systemic pressure decreases below 90 mmHg. Hemodynamics are restored with dobutamine infusion (from 2.5 &#181;g/kg/min to 7.5 &#181;g/kg/min). PV-loops and echocardiography are performed during each condition. Each condition requires around 40 minutes for induction, hemodynamic stabilization and data acquisition. Out of 9 animals, 2 died immediately after pulmonary embolism and 7 completed the protocol, which illustrates the learning curve of the model. The model induced a 3-fold increase in mean pulmonary artery pressure. The PV-loop analysis showed that ventriculo-arterial coupling was preserved after volume loading, decreased after acute pulmonary embolism and was restored with dobutamine. Echocardiographic acquisitions allowed to quantify right ventricular parameters of morphology and function with good quality. We identified right ventricular ischemic lesions in the model. The model can be used to compare different treatments or to validate non-invasive parameters of right ventricular morphology and function in the context of ARHF.

We present a protocol to induce and phenotype an acute right heart failure in a large animal model with chronic pulmonary hypertension. This model can be used to test therapeutic interventions, to develop right heart metrics&#160;or to improve the understanding of acute right heart failure pathophysiology.

אינדוקציה ופנוטיפינג של אי ספיקת לב ימנית חריפה במודל בעלי חיים גדול של יתר לחץ דם ריאתי תרומבואמבולי כרוני

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of group 2 PH, due to mitral stenosis (MS), to facilitate the investigation of disease mechanisms and potential therapeutic strategies. We present a novel rat model of pulmonary venous congestion-induced pulmonary venous arterialization and group 2 PH caused by left atrial stenosis (LAS). LAS is achieved by constricting the left atrium using a half-closed titanium clip. After the LAS surgery, a rat model with a transmitral inflow velocity greater than or equal to 2.0 m/s on echocardiography gradually develops pulmonary venous arterialization and group 2 PH over an 8- to 10-week period. In this protocol, we provide the step-by-step procedure of how to perform the LAS surgery. The presented LAS rat model mimics MS in humans and is useful for studying the underlying molecular mechanism of pulmonary venous arterialization and for the preclinical evaluation of therapies for group 2 PH.

Left atrial stenosis (LAS) is a novel surgical technique used for studying group 2 pulmonary hypertension (PH) and mechanisms underlying pulmonary venous arterialization. Here, we present a protocol to constrict the left atrium using a titanium clip to cause pulmonary venous arterialization and moderate PH in a rat.

היצרות פרפור השמאלי המושרה Arterialization ורידית ריאתית יתר לחץ דם ריאתי קבוצה 2 בעכברוש

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. However, the evaluation of right ventricular pressure (RVP) and pulmonary artery pressure (PAP) remains technically challenging in mice. RVP and PAP are more difficult to measure than left ventricular pressure because of the anatomical differences between the left and right heart systems. In this paper, we describe a stable right heart hemodynamic measurement method and its validation using healthy and PAH mice. This method is based on open-chest surgery and mechanical ventilation support. It is a complicated procedure compared to closed chest procedures. While a well-trained surgeon is required for this surgery, the advantage of this procedure is that it can generate both RVP and PAP parameters at the same time, so it is a preferable procedure for the evaluation of PAH models.

Here, we present a protocol to perform an invasive hemodynamic assessment of the right ventricle and pulmonary artery in mice using an open-chest surgery approach.

פולשנית הערכה היפודינמית עבור מערכת המוח הימני ואת ההיפוקסיה המושרה לחץ דם ריאתי בעכברים

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

Generation and Characterization of Right Ventricular Myocardial Infarction Induced by Permanent Ligation of the Right Coronary Artery in Mice

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In contrast to the extensively used mouse myocardial infarction (MI) model generated by left coronary artery ligation, the RVI mouse model is rarely employed due to the difficulty associated with model generation. Research on the mechanisms and treatment of RVI-induced RV remodeling and dysfunction requires animal models to mimic the pathophysiology of RVI in patients. This study introduces a feasible procedure for RVI model generation in C57BL/6J mice. Further, this model was characterized based on the following: infarct size evaluation at 24 h after MI, assessment of cardiac remodeling and function with echocardiography, RV hemodynamics assessment, and histology of the infarct zone at 4 weeks after RVI. In addition, a coronary vasculature cast was performed to observe the coronary arterial arrangement in RV. This mouse model of RVI would facilitate the research on mechanisms of right heart failure and seek new therapeutic targets of RV remodeling.

There are several differences between the right and left ventricles. However, the pathophysiology of right ventricular infarction (RVI) has not been clarified. In the present protocol, a reproducible method for RVI mouse model generation is introduced, which may provide a means to explain the mechanism of RVI.

יצירת ואפיון של אוטם שריר הלב בחדר הימני המושרה על ידי קשירת קבועה של העורק הכלילי הימני בעכברים

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In ...