אנו מודים דניאל פייט לקבלת סיוע טכני ופדרו Gouveia בElectricidade Em PO (electricidadeempo.net) להתאמה אישית של תוכנת המעקב לדרישות שלנו. אנו מודים גם טום Retzke לתמיכה בתהליך הצילומים. מחקר זה נתמך על ידי אגודת מקס פלאנק.

פרטי הבנייה וטכני של Flywalk תוארו במקום אחר 26 (במקרה של בעיות של ההקמה זו הוקמה, מידע נוסף ניתן לקבל מחה&quot;כ). כאן נתמקד בהוראות מפורטות על הטיפול בפרדיגמה שתעזור להשיג תוצאות אמינות. 1. טיפול בזבוב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחורי עף נמוך לתרבויות בינוניות צפיפות על מדיום מזון 27 תחת 12 שעות: 12 שעות אור: משטר אפל ב23-25 ​​מעלות צלזיוס ו -70% לחות יחסית. לשם כך, לאפשר 20-30 מבוגרים יצאו זה עתה עף להתרבות בבקבוקון מזון גדול לשבוע 1, ואז להשליך זבובים בוגרים ולחכות לצאצאים לצוץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף 30-40 (גיל &lt;24 שעות) זבובים בוגרים יצאו זה עתה והגיל בחדש בקבוקון המכיל בינוני אוכל 27 למשך 3-5 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עשרים וארבע שעות לפני תחילת הניסוי התנהגותי: העבר את כל 30-40 שנאספו בעבר 3-5 D ישן (ראה 2.2) טס לvi חדשאל מכיל התוספת קצף גומי לחה או נייר טישו לח באמצעות aspirator. הערה: אל לטשטש זבובים באמצעות CO 2. </li></ol> 2. הכנת התקנת Flywalk <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בבקבוקים 250 מיליליטר במכשירי אדים. מלא מכשירי אדים עם מים מזוקקים 100 מיליליטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן בקבוקוני ריח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן 500 μl 10 -3 דילולים של אצטט ריחות הטהורים אתיל, וטיראט אתיל, אצטט isopentyl ו2,3-butanedione בשמן מינרלי הממס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את שני שסתומי בדיקת כדור לכל בקבוקון ריח. שים לב שסתום לבדוק לאפשר זרימת אוויר חד כיוונית בלבד. לכן, להתחבר סתומה לבדוק באופן כזה שהאוויר יכול להיכנס לבקבוקון בצד אחד ולהשאיר אותו בצד השני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המכסה של צינור תגובה 200 μl PCR. פיפטה של ​​כל דילול ריח 100 μl לתוך צינור תגובה נפרד ולמקם את הצינורות בבקבוקוני ריח נפרדים. כמו כן להכין בקבוקון ריח אחד המכיל רק את oi מינרלי הממסl. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חוזקה לאטום את בקבוקוני ריח על ידי סגירתם באמצעות תקעי נירוסטה ואטמי גומי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר 5 בקבוקוני ריח (4 ריחות המכילים 1 ומכילים שמן מינרלים) למערכת אספקת הריח. הקפד לחבר אותם בכיוון הזרימה תקין. חיבור הלא נכון לא רק לסכן את הניסוי המתוכנן, אבל זה יכול גם לזהם את מערכת המסירה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדקו דליפות על ידי איטום היציאה של תא הערבוב של מכשיר הגירוי. ודא, כי כל זרמי האוויר לפני מכשיר הגירוי עכשיו בהדרגה לרדת לאפס. אם לא, לבדוק אם קיים דליפה שעכשיו ניתן לזהות על ידי הקול שריקה אוויר עוזב את המערכת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעביר בזהירות 15 זבובים בודדים עד 15 צינורות זכוכית בודדים באמצעות aspirator וצינורות זכוכית קרובים בשני הצדדים תוך שימוש במתאמים המתאימים. הערה: מאחר המערכת חייבת להיות הרמטית לניסויים מוצלחים, להבטיח שמתאמים שיתאימו צינורות זכוכית בחוזקהושים לב שצינורות זכוכית עלולים להישבר במהלך שלב זה. לטפל כדי למנוע פציעות על ידי לבישת כפפות ומשקפי מגן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את צינורות זכוכית להתקנת Flywalk ו, מכאן והלאה, לחכות לפחות 15 דקות לפני תחילת הניסוי, כדי לאפשר זבובים להרגיל לסביבה החדשה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שחבר את צינורות זכוכית: לבדוק את ההודעה של זרימת מטרים במורד הזרם הדיגיטלי במחשב 1 אם 16 הזרמים האוויר לאחר צינורות הזכוכית מסתכמים לזרימת האוויר שנכנסה למערכת. כמו כן, בדוק במחשב 1, אם לחות היא בין 60% ו -80%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פרוטוקול גירוי עיצוב שליטה הרצף והתזמון של גירויי ריח הוצגו לזבובים. כדי להשיג למשל את הנתונים שתוארו, 4 ריחות בהווה ובשליטה (שמן מינרלים) ביחידים וכל המשולש האפשרי ותערובות quarternary של הריחות בו זמנית במשך 40 פעמים בכל. להגדיר משך דופק 500 אלפיות שניים בהפרש של 90 שניות interstimulus ואקראי רצף גירוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור על liמקור להילחם (LED-אשכול; λ = 630). הקפד לספק מספיק אור למעקב יעיל מבלי להגדיל את הטמפרטורה בתוך צינורות הזכוכית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את האזור של עניין של מערכת המעקב על ידי גרירת מסגרת על פני השטח כדי להיות במעקב באופן כזה שכל 15 צינורות הזכוכית כלולים וכ 5 מ&quot;מ של קצות הצינורות אינם נכלל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את 14 קווי הפרדה מקבילים בין צינורות הבודדים במערכת המעקב על ידי שינוי Y-עמדותיהם בתסריט המקביל לשמור בודד טס לזיהוי לאורך כל הניסוי. הקפד למקם אותם באופן כזה שתמיד יש שפופרת זכוכית אחד בין שני קווים מפרידים כזה, כי רק אחד זבוב יהיה במעקב בין כל סט של שתי שורות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקפד להגדיר פרמטרים מצלמה בצורה כזאת, כי הזבובים מעקב אמין לאורך צינורות הזכוכית. אם זבובים איבדו בשולי האזור של עניין, להגביר את הבהירות או רווח של מעקב שלoftware. הימנע תנודות מכאניות של מערכת המעקב. עקוב אחר שימוש בתוכנה מסחרית על פי הפרוטוקול של היצרן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל ניסוי על ידי הפעלת פרוטוקול הגירוי. שיא flies&#39; XY-קואורדינטות ב 20 fps (פריימים לשניים) ולהיכנס בשילוב עם מצב שסתום ריח בקבצי טקסט. </li></ol> ניתוח 3. נתונים הערה: השלבים הבאים בניתוח הנתונים automatized באמצעות רוטינות אישית בכתב המתוכנת בר &#39;בגלל צעדים אלה הם קריטיים להשגת תוצאות משמעותיות הניתוח יהיה בכל זאת להיות מוצג באופן צעד-אחר-צעד. הנתונים הגולמיים לניתוח הם ה- csv-קבצים המכילים מידע על מצב מסונכרן שסתום ריח, מספר דופק בניסוי ו- X-15 עמדות לטוס בס&quot;מ על ציר זמן משותף למחזור גירוי ריח אחד. קוד מותאם אישית לניתוח נתונים יכול להיות מסופק על פי דרישה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ה- csv קובץ פתוח, למצוא נקודת זמן של פתיחת השסתום סמלה ידי צ&#39;הnge בעמודה המייצגת את מעמד השסתום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את הפונקציה ליניארית של עמדת ריח של הטופס F (t) = S T * + i כאשר t הוא זמן במחזור הגירוי, שלה מהירות הרוח (כאן 20 סנטימטרים / sec) וליירט אני יכול להיות מחושב באמצעות נקודת זמן הריח נכנס לצינורות בעמדה 0 (פתיחת שסתום בתוספת עיכוב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מצא את הנקודה שבה ריח הזמן ולעוף x-עמדה מצטלבות לכל לטוס ולהגדיר נקודת זמן זו ל0. הערה: בדרך זו עמדות לטוס מיושרות לכל individual&#39;s נתקלת בריח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תכלול זבובים יושבים בקצוות מאוד של האזור של עניין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את המהירות מX-ידי חלוקת תפקידי עקירה לאורך ציר x על ידי מרווח הזמן (100 אלפיות השני) וההליך חוזר לכל מחזור גירוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להשיג בזמן קורסי מהירות כפי שמוצג באיור 2E לחשב זמן כמובן מהירות ממוצעת לכל זבוב וריח ומאלו בזמן כמובן ממוצע לריח מסוים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להשיג עקירה נקי כפי שמוצג באיור 3 ג לחשב את העקירה הנקי בתוך 4 שניות לאחר דופק הריח לכל אירוע מעקב ולאחר מכן העקירה נטו הממוצעת לזבוב וריח. </li></ol> 4. ניקוי נוהל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זכוכית צינורות נקיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר זבובים ומתאמים מצינורות זכוכית ולספוג צינורות זכוכית בחומר ניקוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את צינורות זכוכית מתחת למים מזוקקים ריצה ולייבש אותם באמצעות אוויר דחוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צינורות זכוכית חום ב 200 מעלות צלזיוס במשך 8 שעות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערכת אספקת ריח נקי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל בקבוקוני הריח וצינורות מתא הערבוב המרכזי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר מתאמי צינורות מתא הערבוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תא ערבוב נקי על ידי שטיפתו בתמיסת ניקוי מעבדה וממסים (למשל אתנול, אצטון). בצע את הפעולות הבאות מתחת למכסת מנוע המעבדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תא ערבוב יבש באמצעות אוויר דחוס ולחמם אותו ב 200 מעלות צלזיוס במשך 8 שעות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקי בקבוקי ריח ובדוק שסתומים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר תקע פלדה (אטם גומי שנזרק) ושסתום לבדוק מבקבוקוני ריח ולספוג את כל המרכיבים בתמיסת ניקוי מעבדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רכיבי Sonicate באמבט אולטרסאונד ולשטוף אותם במים מזוקקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקה את כל המרכיבים מלבד שסתומים לבדוק עם אתנול ואצטון. בצע את הפעולות הבאות מתחת למכסת מנוע המעבדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רכיבים יבשים באמצעות אוויר דחוס ולחמם אותם ב 200 מעלות צלזיוס במשך 8 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שסתומי בדיקה נקיים מבפנים על ידי שטיפתם עם אתנול ואצטון באמצעות מזרק (לשקול כיוון זרימה). בצע את הפעולות הבאות מתחת למכסת מנוע המעבדה לובשת משקפי מעבדה. בגלל אצטון תוקף חלקי גומי, מייד סתום סימון יבש על ידי שטיפתם עם אוויר דחוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר ריחות שייר ידי פועם אוויר דרך שסתומים לבדוק במשך כמה ימים. השתמש בחממה ב 60 ° C ואוויר 1 שניות באוויר שניות / 1 את המשטר לצעד זה ניקוי. </li></ol&gt; </li></ol>

<ol>
	<li>Murlis, J., Elkinton, J. S., Card&#233;, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor+plumes+and+how+insects+use+them.">Odor plumes and how insects use them.</a> Annu. Rev. Entomol. 37, 505-532 (1992).</li><li>Kennedy, J. S., Marsh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pheromone-regulated+anemotaxis+in+flying+moths.">Pheromone-regulated anemotaxis in flying moths.</a> Science. 184 (4140), 999-1001 (1974).</li><li>Budick, S. A., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free-flight+responses+of+Drosophila+melanogaster+to+attractive+odors.">Free-flight responses of Drosophila melanogaster to attractive odors.</a> J. Exp. Biol. 209 (15), 3001-3017 (2006).</li><li>Buehlmann, C., Graham, P., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Desert+ants+locate+food+by+combining+high+sensitivity+to+food+odors+with+extensive+crosswind+runs.">Desert ants locate food by combining high sensitivity to food odors with extensive crosswind runs.</a> Curr. Biol. 24 (9), 960-964 (2014).</li><li>Van Breugel, F., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plume-tracking+behavior+of+flying+Drosophila+emerges+from+a+set+of+distinct+sensory-motor+reflexes.">Plume-tracking behavior of flying Drosophila emerges from a set of distinct sensory-motor reflexes.</a> Curr. Biol. 24 (3), 274-286 (2014).</li><li>Schuckel, J., Meisner, S., Torkkeli, P. H., French, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+properties+of+Drosophila+olfactory+electroantennograms.">Dynamic properties of Drosophila olfactory electroantennograms.</a> J. Comp. Physiol. A. 194 (5), 483-489 (2008).</li><li>Geffen, M. N., Broome, B. M., Laurent, G., Meister, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+encoding+of+rapidly+fluctuating+odors.">Neural encoding of rapidly fluctuating odors.</a> Neuron. 61 (4), 570-586 (2009).</li><li>Nagel, K. I., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biophysical+mechanisms+underlying+olfactory+receptor+neuron+dynamics.">Biophysical mechanisms underlying olfactory receptor neuron dynamics.</a> Nat. Neurosci. 14 (2), 208-216 (2011).</li><li>Martelli, C., Carlson, J. R., Emonet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensity+invariant+dynamics+and+odor-specific+latencies+in+olfactory+receptor+neuron+response.">Intensity invariant dynamics and odor-specific latencies in olfactory receptor neuron response.</a> J. Neurosci. 33 (15), 6285-6297 (2013).</li><li>Szyszka, P., Gerkin, R. C., Galizia, C. G., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-speed+odor+transduction+and+pulse+tracking+by+insect+olfactory+receptor+neurons.">High-speed odor transduction and pulse tracking by insect olfactory receptor neurons.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 111 (47), 16925-16930 (2014).</li><li>Nagel, K. I., Hong, E. J., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+and+circuit+mechanisms+promoting+broadband+transmission+of+olfactory+stimulus+dynamics.">Synaptic and circuit mechanisms promoting broadband transmission of olfactory stimulus dynamics.</a> Nat. Neurosci. 18 (1), 56-65 (2014).</li><li>Larsson, M. C., Domingos, A. I., Jones, W. D., Chiappe, M. E., Amrein, H., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Or83b+encodes+a+broadly+expressed+odorant+receptor+essential+for+Drosophila+olfaction.">Or83b encodes a broadly expressed odorant receptor essential for Drosophila olfaction.</a> Neuron. 43 (5), 703-714 (2004).</li><li>Knaden, M., Strutz, A., Ahsan, J., Sachse, S., Hansson, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+representation+of+odorant+valence+in+an+insect+brain.">Spatial representation of odorant valence in an insect brain.</a> Cell Rep. 1 (4), 392-399 (2012).</li><li>Zaninovich, O. A., Kim, S. M., Root, C. R., Green, D. S., Ko, K. I., Wang, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single-fly+assay+for+foraging+behavior+in+Drosophila.">A single-fly assay for foraging behavior in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. (81), e50801 (2013).</li><li>Farhan, A., Gulati, J., Gro&#946;e-Wilde, E., Vogel, H., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+CCHamide+1+receptor+modulates+sensory+perception+and+olfactory+behavior+in+starved+Drosophila.">The CCHamide 1 receptor modulates sensory perception and olfactory behavior in starved Drosophila.</a> Sci. Rep. 3 (2765), 1-6 (2013).</li><li>Fl&#252;gge, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Geruchliche+Raumorientierung+von+Drosophila+melanogaster.">Geruchliche Raumorientierung von Drosophila melanogaster.</a> Z. Vgl. Physiol. 20 (4), 462-500 (1934).</li><li>Borst, A., Heisenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osmotropotaxis+in+Drosophila+melanogaster.">Osmotropotaxis in Drosophila melanogaster.</a> J. Comp. Physiol. A. 147 (4), 479-484 (1982).</li><li>Louis, M., Huber, T., Benton, R., Sakmar, T. P., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+olfactory+sensory+input+enhances+chemotaxis+behavior.">Bilateral olfactory sensory input enhances chemotaxis behavior.</a> Nat. Neurosci. 11 (2), 187-199 (2008).</li><li>Gomez-Marin, A., Stephens, G. J., Louis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+sampling+and+decision+making+in+Drosophila+chemotaxis.">Active sampling and decision making in Drosophila chemotaxis.</a> Nat. Commun. 2 (441), 1-10 (2011).</li><li>Gaudry, Q., Hong, E. J., Kain, J., de Bivort, B. L., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+neurotransmitter+release+enables+rapid+odour+lateralization+in+Drosophila.">Asymmetric neurotransmitter release enables rapid odour lateralization in Drosophila.</a> Nature. 493 (7432), 42442-42448 (2013).</li><li>Quinn, W. G., Harris, W. A., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+behavior+in+Drosophila+melanogaster.">Conditioned behavior in Drosophila melanogaster.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 71 (3), 708-712 (1974).</li><li>Ramdya, P., Lichocki, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanosensory+interactions+drive+collective+behaviour+in+Drosophila.">Mechanosensory interactions drive collective behaviour in Drosophila.</a> Nature. 519 (7542), 233-236 (2014).</li><li>Bhandawat, V., Maimon, G., Dickinson, M. H., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+modulation+of+flight+in+Drosophila+is+sensitive,+selective+and+rapid.">Olfactory modulation of flight in Drosophila is sensitive, selective and rapid.</a> J. Exp. Biol. 213 (21), 3625-3635 (2010).</li><li>Duistermars, B. J., Chow, D. M., Frye, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flies+require+bilateral+sensory+input+to+track+odor+gradients+in+flight.">Flies require bilateral sensory input to track odor gradients in flight.</a> Curr. Biol. 19 (15), 1301-1307 (2009).</li><li>Claridge-Chang, A., Roorda, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Writing+memories+with+light-addressable+reinforcement+circuitry.">Writing memories with light-addressable reinforcement circuitry.</a> Cell. 139 (2), 405-415 (2009).</li><li>Steck, K., Veit, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+behavioral+paradigm+for+Drosophila+olfaction+-+The+Flywalk.">A high-throughput behavioral paradigm for Drosophila olfaction - The Flywalk.</a> Sci. Rep. 2 (361), 1-9 (2012).</li><li>Lewis, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+standard+food+medium.">A new standard food medium.</a> Drosoph. Inf. Serv. 34, 117-118 (1960).</li><li>Lebestky, T., Chang, J. S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+different+forms+of+arousal+in+Drosophila+are+oppositely+regulated+by+the+dopamine+D1+receptor+ortholog+DopR+via+distinct+neural+circuits.">Two different forms of arousal in Drosophila are oppositely regulated by the dopamine D1 receptor ortholog DopR via distinct neural circuits.</a> Neuron. 64, 522-536 (2009).</li><li>Thoma, M., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compound+valence+is+conserved+in+binary+odor+mixtures+in+Drosophila+melanogaster.">Compound valence is conserved in binary odor mixtures in Drosophila melanogaster.</a> J. Exp. Biol. 217 (20), 3645-3655 (2014).</li><li>Olsson, S. B., Kuebler, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+multicomponent+stimulus+device+for+use+in+olfactory+experiments.">A novel multicomponent stimulus device for use in olfactory experiments.</a> J. Neurosci. Meth. 195 (1), 1-9 (2011).</li></ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

למרות שמערכת Flywalk מופיעה ולא מתוחכמת במבט ראשון, להגדיר פעם אחת ולהפעלתו היא קלה לשימוש ומייצר תוצאות מאוד חזקות. להדגיש את העקביות של התוצאות הופקו במבדק זה ניתן לומר כי תוצאות הנציג המוצגות כאן התקבלו כמעט 2 שנים לאחר שהחלק מהתוצאות שמוצגים במחקר קודם 29 עם התק...

מטרת העל של כל מחקר neuroethological היא להקים קשר סיבתי בין מדינות הפעילות של תאי עצב בודדים או מעגלים עצביים וההתנהגות של האורגניזם. כדי להשיג מטרה זו פעילות עצבית והתנהגות צריכה להיות במעקב בתנאי גירוי זהים ותנאי גירוי אלה אידיאלי צריכים להיות דומים לאלה של מערכת העצבים תחת בדיקה התפתחה הגיוני של. במיוחד כאשר מדובר בהתנהגות bioassays, הדרישות אלה הוכיחו די תובעניות מבחינה היסטורית בדרוזופילה melanogaster neuroethology חוש הריח. ברגע ששוחרר מהמקור, נוצות ריח במהירות להתפרק לדקים חוטים עם דיפוזיה הסוערת שנגרמה על ידי תנועת אוויר להיות הקובע העיקרי של הפצת ריח 1. כתוצאה מכך, חרקים ניווט לכיוון מקור ריח חווה גירוי לסירוגין עם חבילות ריח וביניהם מרווחים משתנה של אוויר נקי. שְׁנֵיהֶםהליכה וחרקים מעופפים - כולל תסיסנית - כבר הוכיח לנצל משטר גירוי לסירוגין זה לניווט על ידי גואה נגד הרוח על מפגש פלומה ובעיקר מרגש רוח צולבת בהעדר הריחות 2 - 5. ואילו נהלי גירוי בניסויים פיסיולוגיים לחקות במידה רבה אלה חרקים עלולים להיתקל בסביבתו הטבעית או על ידי עננים בודדים מתן של ריחות וביניהם תקופות ממושכות של אוויר נקי או רצפי גירוי דינמיים 6-11, רב bioassays התנהגות בשימוש בneuroethology תסיסנית כגון assay מלכודת , זירות שטח פתוח או T-מבוך להסתמך על ריח הדרגתיים 12 - 15. עם זאת, בגלל ריח הדרגתיים על ידי הגדרה משתנות בריכוז בהתאם למרחק ממקור הריח, התנהגות מסוימת לא ניתן לייחס לריכוז ריח מדויק באמצעות פרדיגמות אלה. בנוסף, שיפועשיפוע ריח ביקורתי תלוי במאפייני physicochemical של odorant. שיפוע של מתחם תנודתיות גבוהה יהיה רדוד יותר שנוצר על ידי תרכובת פחות תנודתי ולכן גם קשה יותר לעקוב אחר לאורגניזם להסתמך על מדידת הבדלי ריכוז בחלל כאמצעי היחיד של ניווט 16 - 20, דבר שעלול להוביל לפרשנות שגויה העדפות ריח במיוחד במבחני בחירה. השפעה זו היא גם מזיקה מאוד כאשר חוקר התנהגות כלפי תערובות ריח, כי זה מוביל ליחסי רכיב תערובת שונים בכל נקודה במרחב, ולכן שוב מונע מתאם ברור בין פיזיולוגיה והתנהגות. בעוד זבובי חומץ נוטים לצבור על תסיסת פרי, הם בודדים בניווטם כלפי מקורות מזון ואתרי ההטלה. עם זאת, פרדיגמות התנהגות רבות ולא בודקים בעלי חיים בודדים המשמשות בneuroetholo תסיסניתGY לבחון את ההתנהגות מודרכת ריח של קבוצות של זבובים ומשיכה הוא הבקיע כחלק מזבובי בחירת הריח על גירוי שליטה. ניסויי עוקבה אלה תרמו רב להבנת neuroethology זבוב ורב של התצפיות שנעשו על ידי שימוש בהם יכול להיות מאושר בניסויים חד-זבוב. עם זאת, היא נצפתה שעפה יכולה להשפיע כל החלטת other&#39;s 21 ובמקרים קיצוניים ההערכה של ריח יכולה לעבור מאדישות להימנעות בהתאם לצפיפות אוכלוסיית 22. בנוסף, תוצאות מסוג כזה של ניסויים אלה לעתים קרובות לספק רק את נקודת הסיום של רצף של החלטות התנהגותיות ולא התבוננות מה הזבוב עושה בזמן שהוא עושה את זה, שיהיו רצוי בעת הניסיון לתאם התנהגות עם פעילות עצבית. ניסויי עוקבה ברזולוציה נמוכה ולא אלה בניגוד ידי שיטות יחידה לטוס ברזולוציה גבוהה כגון זירות קשורות טיסה והליכונים המאפשריםלתצפית ישירה של תגובות התנהגותיות בזמן הגירוי מוצג 20,23,24. עם זאת, ניסויי עוקבה עדיין פופולריים, כי הם יעילים מאוד ומספקים תוצאות חזקות גם בcomparably גודל מדגם נמוך בגלל שונות בין-אישיות ובין-משפט הן ממוצעים החוצה באופן חלקי בשל התצפית של אוכלוסיות על פני תקופות זמן ארוכות. בעוד טיסה והליכון קשורים כנראה לספק סטנדרטי הנוגעים להצגת גירוי והחלטה זמנית זהב, הזירות משמשות מיועדות לבעלי חיים יחידים ולכן מנת להשיג גודל מדגם דרוש לניתוח סטטיסטי זמן רב. לאחרונה כמה גישות אחרות פותחו המאפשרות רכישה יעילה של נתונים התנהגותיים ברזולוציה גבוהה בשילוב עם משטר גירוי מוגדר היטב. אלה כוללים 3D מעקב ללא השגחה של זבובי חומץ מרובים בwindtunnel בשילוב עם 3D מודל מדויק של פלומת ריח 5 </sup&gt;, מעקב של זבובים בודדים מרובים בתאי בחירה מסופקים עם זרמי אוויר משני הצדדים 25 ואת הפרדיגמה Flywalk 26. בFlywalk, 15 זבובים בודדים נמצאים בצינורות זכוכית קטנים ומנוטר באופן רציף על ידי מצלמה מעל תחת האורות אדומים תנאים. ריחות מתווספים קרון רציף של 20 סנטימטר / sec ולנסוע דרך צינורות הזכוכית במהירות קבועה. הקרון הוא humidified ידי העברתו דרך 250 בקבוקי מיליליטר המכילים מים מזוקקים (אדים) לפני הכניסה למערכת מסירת הריח. עמדות flies&#39; נרשמות בתוך אזור כיכר של העניין (ROI) המקיף את רוב אורכו של צינורות הריח (אך לא כולל את הקצוות החיצוניים של הצינורות (כ 5 מ&quot;מ בכל צד) שבו הזבובים אינם יכולים לנוע למעלה או נוסף בכיוון הרוח) בערך בזמן של מצגת ריח (איור 1 א &#39;, ב&#39;). זהויות לטוס נשמרות קבועות על ידי T מערכת המעקבhroughout הניסוי על בסיס Y-העמדות (כלומר שפופרת זכוכית הגבולות שלהם) שלהם. גירוי ריח מושגת באמצעות מכשיר גירוי רב-רכיב המאפשר ההצגה של עד 8 ​​ריחות אחת וכל תערובות האפשריות 26,29 (איור 1). במהלך ניסוי מבוקר על ידי מחשב המסדיר את מערכת מסירת הריח ואיסוף טמפרטורה ולחות מידע (מחשב 1, איור 1 ג). מחשב זה שולט גם datalogger (להתחיל / הקלטה להפסיק) במחשב שני ברציפות שעוקב עמדות לטוס ב 20 מסגרות לשנייה (מחשב 2). טוס עמדות, מצב שסתום ריח (כלומר נקודת הזמן של פתיחת שסתום), מזהה ריח, טמפרטורה ולחות סביב מחזורי גירוי ריח מחוברים במחשב 2. בדרך זו מידע על ריח ולעוף עמדות מסונכרנות ומיוצאים כקובץ csv-קבצים ש יכול להיות מעובד יותר ונותח באמצעות ניתוח שגרה אישית בכתב. כיהמערכת כולה היא בשליטת מחשב, ללא התערבות אנושית יש צורך בהפעלה ניסיונית.

<table><tbody><tr><td>Flywalk setup</td><td>Custom</td><td></td><td>details available upon request</td></tr><tr><td>stimulus device</td><td>Custom</td><td></td><td>details available upon request</td></tr><tr><td>LED cluster</td><td>Custom</td><td></td><td>details available upon request</td></tr><tr><td>HD Pro Webcam C920</td><td>Logitech, Lausanne, Switzerland</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2 Computers</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Flywalk Reloaded v1.0 software</td><td>Electricidade Em P&amp;oacute; (electricidadeempo.net)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Labview 11.0 software</td><td>National Instruments, Austin, TX</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standard fly food</td><td>Custom</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standard fly vials</td><td>Greiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standard fly vials</td><td>Greiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>aspirator</td><td>Custom</td><td></td><td></td></tr><tr><td>mineral oil</td><td>Sigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>odors</td><td>Sigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>200 &amp;micro;l PCR reaction tubes</td><td>Biozym Scientific GmbH, Oldendorf, Germany</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

high-resolution quantification of odor-guided behavior in drosophila melanogaster using the flywalk paradigm

בסביבתם הטבעית, חרקים כגון החומץ לטוס תסיסנית melanogaster מופגזים עם כמות עצומה של odorants כימי השונה. כדי לסבך את העניינים עוד יותר, הריחות זוהו על ידי מערכת העצבים החרקים הם בדרך כלל לא תרכובות בודדות אלא תערובות הרכב יחסי ריכוז ו משתנים. זה מוביל לסכום כמעט אינסופי של גירויי ריח שונים שצריכים להיות מוערכים על ידי מערכת העצבים. כדי להבין שהיבטים של גירוי ריח לקבוע את הערכתה על ידי הזבוב, זה לכן רצוי לבחון מודרך ריח התנהגות כלפי ניחוחי רב ותערובות ריח ביעילות. ישירות לתאם התנהגות לפעילות עצבית, התנהגות צריכה לכמת במסגרת זמן דומה ובתנאים זהים לגירוי בניסויי neurophysiological. עם זאת, bioassays חוש הריח המשמש כיום רב בneuroethology תסיסנית למדי specialized גם כלפי יעילות או לרזולוציה. Flywalk, מערכת מסירת הריח ומעקב אוטומטית, מגשרת על הפער בין היעילות ורזולוציה. היא מאפשרת הקביעה מתי בדיוק מנות ריח מגורה זבוב הולך בחופשיות, וכדי לקבוע את animal&#39;s תגובה התנהגותית דינמית.

בגלל זבובים מותר להפיץ באופן חופשי בתוך צינורות הזכוכית שלהם בין פולסים ריח ודופק הריח עובר דרך צינורות הזכוכית במהירות קבועה זבובים נתקלים הריח בזמנים שונים בהתאם לx-עמדתם בזמן הגירוי. כתוצאה מכך, onsets של המסלולים במעלה הרוח שעוררו דופק msec 500 של אטרקטיבי 10 -3 דיל...

Watch this Scientific Journal Video about High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm at JoVE.com

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

Flywalk מערכת מעקב האוטומטי משמש לכימות ברזולוציה גבוהה של מודרך ריח התנהגות בmelanogaster תסיסנית.

כימות ברזולוציה גבוהה של התנהגות מודרכת ריח<em&gt; תסיסנית melanogaster</em&gt; שימוש ב<em&gt; Flywalk</em&gt; פרדיגמה

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To ...

high-resolution-quantification-odor-guided-behavior-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

9.2K Views.  Max Planck Institute for Chemical Ecology.  Flywalk מערכת מעקב האוטומטי משמש לכימות ברזולוציה גבוהה של מודרך ריח התנהגות בmelanogaster תסיסנית. 

Video: High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

High-resolution Measurement of Odor-Driven Behavior in Drosophila Larvae

Olfactory responses in Drosophila larvae have been traditionally studied in Petri dishes comprising a single peripheral odor source. In this behavioral paradigm, the experimenter usually assumes that the rapid diffusion of odorant molecules from the source leads to the creation of a stable gradient in the dish. To establish a quantitative correlation between sensory inputs and behavioral responses, it is necessary to achieve a more thorough characterization of the odorant stimulus conditions. In this video article, we describe a new method allowing the construction of odorant gradients with stable and controllable geometries. We briefly illustrate how these gradients can be used to screen for olfactory defects (full and partial anosmia) and to study more subtle features of chemotaxis behavior.

In this video article, we describe a new method allowing the construction of odorant gradients with stable and controllable geometries. We briefly illustrate how these gradients can be used to screen for olfactory defects (full and partial anosmia) and to study more subtle features of chemotaxis behavior.

ברזולוציה גבוהה מדידה של התנהגות ריח מונחה על הזחלים תסיסנית

Olfactory responses in Drosophila larvae have been traditionally studied in Petri dishes comprising a single peripheral odor source. In this behavioral ...

Biology

Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe

The antennal lobe is the primary olfactory center in the insect brain and represents the anatomical and functional equivalent of the vertebrate olfactory bulb1-5. Olfactory information in the external world is transmitted to the antennal lobe by olfactory sensory neurons (OSNs), which segregate to distinct regions of neuropil called glomeruli according to the specific olfactory receptor they express. Here, OSN axons synapse with both local interneurons (LNs), whose processes can innervate many different glomeruli, and projection neurons (PNs), which convey olfactory information to higher olfactory brain regions.
Optical imaging of the activity of OSNs, LNs and PNs in the antennal lobe - traditionally using synthetic calcium indicators (e.g. calcium green, FURA-2) or voltage-sensitive dyes (e.g. RH414) - has long been an important technique to understand how olfactory stimuli are represented as spatial and temporal patterns of glomerular activity in many species of insects6-10. Development of genetically-encoded neural activity reporters, such as the fluorescent calcium indicators G-CaMP11,12 and Cameleon13, the bioluminescent calcium indicator GFP-aequorin14,15, or a reporter of synaptic transmission, synapto-pHluorin16 has made the olfactory system of the fruitfly, Drosophila melanogaster, particularly accessible to neurophysiological imaging, complementing its comprehensively-described molecular, electrophysiological and neuroanatomical properties2,4,17. These reporters can be selectively expressed via binary transcriptional control systems (e.g. GAL4/UAS18, LexA/LexAop19,20, Q system21) in defined populations of neurons within the olfactory circuitry to dissect with high spatial and temporal resolution how odor-evoked neural activity is represented, modulated and transformed22-24.
Here we describe the preparation and analysis methods to measure odor-evoked responses in the Drosophila antennal lobe using G-CaMP25-27. The animal preparation is minimally invasive and can be adapted to imaging using wide-field fluorescence, confocal and two-photon microscopes.

Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe

We describe an established technique to measure and analyze odor-evoked calcium responses in the antennal lobe of living Drosophila melanogaster.

סידן הדמיה של ריח עוררו התגובות תסיסנית מחושים האונה

The antennal lobe is the primary olfactory center in the insect brain and represents the anatomical and functional equivalent of the vertebrate olfactory ...

High-Resolution Video Tracking of Locomotion in Adult Drosophila Melanogaster

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field. Studying locomotor behavior in Drosophila melanogaster relies on the ability to be able to quantify changes in motion during or in response to a given task. For this reason, a high-resolution video tracking system, such as the one we describe in this paper, is a valuable tool for measuring locomotion in real-time. Our protocol involves the use of an initial air pulse to break the flies momentum, followed by a thirty second filming period in a square chamber. A tracking program is then used to calculate the instantaneous speed of each fly within the chamber in 10 msec increments. Analysis software then compiles this data, and outputs a variety of parameters such as average speed, max speed, time spent in motion, acceleration, etc. This protocol will discuss proper feeding and management of flies for behavioral tasks, handling flies without anesthetization or immobilization, setting up a controlled environment, and running the assay from start to finish.

The study of complex locomotor behavior in Drosophila melanogaster is dependent upon the ability to quantify changes in a given fly's movement. This article demonstrates how to do this using a high-resolution tracking system.

וידאו ברזולוציה גבוהה של מעקב אחר תנועה של מבוגרים תסיסנית melanogaster

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field.  Studying ...

Visually Mediated Odor Tracking During Flight in Drosophila

Flying insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals additionally track odors carried in the wind. As such, visual stabilization of upwind tracking directly aids in odor tracking. But do olfactory signals directly influence visual tracking behavior independently from wind cues? Additionally, recent advances in olfactory molecular genetics and neurophysiology have motivated novel quantitative behavioral analyses to assess the behavioral influence of (e.g.) genetically inactivating specific olfactory activation circuits. We modified a magnetic tether system originally devised for vision experiments by equipping the arena with narrow laminar flow odor plumes. Here we focus on experiments that can be performed after a fly is tethered and is able to navigate in the magnetic arena. We show how to acquire video images optimized for measuring body angle, how to judge stable odor tracking, and we illustrate two experiments to examine the influence of visual cues on odor tracking.

Here we describe how to optimize the acquired video image for an olfactory magnetic-tether (OMT) apparatus. We also describe two sample experimental protocols for studying visuo-olfactory fusion.

ראייה ריח מעקב מתווכת במהלך טיסה ב תסיסנית

Flying insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals additionally track odors carried in the wind. As such, visual ...

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

יחיד לטוס Assay עבור התנהגות שיחור מזון ב<em&gt; דרוזופילה</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, mechanoreception, hearing, and chemoperception through taste, via direct contact or through olfaction, which represents the response to a volatile molecule acting at longer range. Volatile chemical molecules are very important signals for most animals in the detection of danger, a source of food, or to communicate between individuals. Drosophila melanogaster is one of the most common biological models for scientists to explore the cellular and molecular basis of olfaction. In order to highlight olfactory abilities of this small insect, we describe a modified choice protocol based on the Y-maze test classically used with mice. Data obtained with Y-mazes give valuable information to better understand how animals deal with their perpetually changing environment. We introduce a step-by-step protocol to study the impact of odorants on fly exploratory response using this Y-maze assay.

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

We present a choice test to reveal the influence of odorants on Drosophila behavior using a Y-maze assay.

בדיקה<em&gt; דרוזופילה</em&gt; Olfaction עם Assay Y-מבוך

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

קביעת הפעילות של תנועה הספונטנית ב<em&gt; Melanogaster דרוזופילה</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an excellent model system for such investigations due to its complex behaviors, powerful genetic techniques, and compact nervous system. Laboratory behavioral assays have long been used with Drosophila to simulate properties of the natural environment and study the neural mechanisms underlying the corresponding behaviors (e.g. phototaxis, chemotaxis, sensory learning and memory)1-3. With the recent availability of large collections of transgenic Drosophila lines that label specific neural subsets, behavioral assays have taken on a prominent role to link neurons with behaviors4-11. Versatile and reproducible paradigms, together with the underlying computational routines for data analysis, are indispensable for rapid tests of candidate fly lines with various genotypes. Particularly useful are setups that are flexible in the number of animals tested, duration of experiments and nature of presented stimuli. The assay of choice should also generate reproducible data that is easy to acquire and analyze. Here, we present a detailed description of a system and protocol for assaying behavioral responses of Drosophila flies in a large four-field arena. The setup is used here to assay responses of flies to a single olfactory stimulus; however, the same setup may be modified to test multiple olfactory, visual or optogenetic stimuli, or a combination of these. The olfactometer setup records the activity of fly populations responding to odors, and computational analytical methods are applied to quantify fly behaviors. The collected data are analyzed to get a quick read-out of an experimental run, which is essential for efficient data collection and the optimization of experimental conditions.

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

We describe here a behavioral setup and data analysis method for assaying olfactory responses of up to 100 vinegar flies (Drosophila melanogaster). This system may be used with single or multiple olfactory stimuli, and adaptable for optogenetic activation or silencing of neuronal subsets.

התנהגויות חוש הריח assayed ידי מעקב ממוחשב של<em&gt; תסיסנית</em&gt; בתוך אולפקטומטר ארבעה-רביע

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an ...

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a considerable amount of information has been generated regarding ORN responses to odorants, the role of specific ORNs in driving behavioral responses remains poorly understood. Complications in behavior analyses arise due to different volatilities of odorants that activate individual ORNs, multiple ORNs activated by single odorants, and the difficulty in replicating naturally observed temporal variations in olfactory stimuli using conventional odor-delivery methods in the laboratory. Here, we describe a protocol that analyzes Drosophila larval behavior in response to simultaneous optogenetic stimulation of its ORNs. The optogenetic technology used here allows for specificity of ORN activation and precise control of temporal patterns of ORN activation. Corresponding larval movement is tracked, digitally recorded, and analyzed using custom written software. By replacing odor stimuli with light stimuli, this method allows for a more precise control of individual ORN activation in order to study its impact on larval behavior. Our method could be further extended to study the impact of second-order projection neurons (PNs) as well as local neurons (LNs) on larval behavior. This method will thus enable a comprehensive dissection of olfactory circuit function and complement studies on how olfactory neuron activities translate in to behavior responses.

Tracking Drosophila Larval Behavior in Response to Optogenetic Stimulation of Olfactory Neurons

This protocol analyzes navigational behavior of Drosophila larva in response to simultaneous optogenetic stimulation of its olfactory neurons. Light of 630 nm wavelength is used to activate individual olfactory neurons expressing a red-shifted channel rhodopsin. Larval movement is simultaneously tracked, digitally recorded, and analyzed using custom-written software.

מעקב אחר התנהגות זחל דרוזופילה בתגובה Optogenetic גירוי של חוש הריח נוירונים

The ability of insects to navigate toward odor sources is based on the activities of their first-order olfactory receptor neurons (ORNs). While a ...

Tracking Freely Walking Flies: A Method to Assess Locomotion in Drosophila

Source: Sun, M. and Chen, L. L. <a href="https://www.jove.com/video/55602/" target="_blank">A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila</a>. J. Vis. Exp. (2017).
This video describes how to track freely walking flies to assess their general locomotion ability. The featured protocol demonstrates the assay&#39;s setup and data analysis using video tracking software.

מעקב אחר זבובים מהלכים בחופשיות: שיטה להערכת תנועה בדרוזופילה

Source: Sun, M. and Chen, L. L. A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila. J. Vis. Exp. (2017).
This video describes how to ...

כימות ברזולוציה גבוהה של התנהגות מודרכת ריח

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

ברזולוציה גבוהה מדידה של התנהגות ריח מונחה על הזחלים תסיסנית

סידן הדמיה של ריח עוררו התגובות תסיסנית מחושים האונה

וידאו ברזולוציה גבוהה של מעקב אחר תנועה של מבוגרים תסיסנית melanogaster

ראייה ריח מעקב מתווכת במהלך טיסה ב תסיסנית

יחיד לטוס Assay עבור התנהגות שיחור מזון ב

בדיקה

קביעת הפעילות של תנועה הספונטנית ב

התנהגויות חוש הריח assayed ידי מעקב ממוחשב של

מעקב אחר התנהגות זחל דרוזופילה בתגובה Optogenetic גירוי של חוש הריח נוירונים

מעקב אחר זבובים מהלכים בחופשיות: שיטה להערכת תנועה בדרוזופילה