מחקר זה מומן על ידי NSFC 81570244, Foko 23/2013, SFB 1116 / B01 ועל ידי מכון המחקר לב וכלי דם דיסלדורף (CARID).

כל הניסויים אושרו על ידי סוכנות הרגולציה המקומית ( LANUV של Nordrhein-Westfalen, גרמניה) בוצעו על פי הנחיות השימוש בבעלי חיים. בעלי החיים היו מוזנים בדיאטה סטנדרטית של צ&#39;או וקיבלו את מי הברז. כל הציוד והכימיקלים הדרושים לכל שלב של הניסוי זמינים בטבלה של חומרים . 1. הכנת כובע לטקס ו בלון Intraventricular <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת עובש אלומיניום באמצעות מכונת כרסום התואמת את הגודל הממוצע של הלב חולדה (bodyweight של 300-350 גרם). פולנית תבנית עם נייר superfine (10/0) ​​אמרי. הערה: המדדים המפורטים של התבנית מוצגים בתרשים 1A . </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אנכית לתקן את הצוואר של עובש אלומיניום למכונת כרסום כדי להכין את כובע לטקס. הערה: מכונת הטחינה גורמת לעובי להסתובב לאט. לחלופין, מנוע חשמלי יכול לשמש. </<html> Li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> יוצקים 20 מ&quot;ל של לטקס נוזלי (רכש מסחרית, ראה טבלה של חומרים ) לתוך כוס זכוכית 50 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להנמיך את עובש עד הגוף כולו של עובש שקוע הפתרון לטקס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם לאט את התבנית (5 ס&quot;מ לדקה) תוך כדי סיבוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור סיבוב עובש במשך 15 דקות נוספות, עד לטקס על פני השטח של עובש הוא solidified. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף על 1 גרם של אבקת טלק על פני השטח של עובש (כבר מכוסה על ידי סרט לטקס דק) כדי למנוע נזק בעת ניתוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות לנתק עם האצבעות כבר מיובש כובע לטקס משטח עובש; כובע לטקס מוכן כעת לשימוש ( איור 1 ב ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את שקע לטקס ל -15 ס&quot;מ צינורות סיליקון (ID = 0.2 מ&quot;מ), המשמש מאוחר יותר עבור אוסף של CT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממלאים את הבלון לטקס חדרית עם מים בתקיפות לתקן אותו על צינור מתכת בצורת L מחובר מזרק 1 מ&quot;ל, מלא מים (&gt; איור 1 ג). הערה: זה ישמש כדי להבטיח את מיקום זקוף של הלב (ראה להלן). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא כי הבלון הוא אטום על ידי ביצוע מספר ניפוח / ניפוח בדיקות עם המזרק המצורף 1 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את הצינורית, דרך לעצור שלוש פעמים, כדי מתמר הלחץ למדידה העתידית של הלחץ פיתחה intraventricular ( איור 1C ). </li></ol> 2. הכנת קרבס- Henseleit הצפת (KHB) ואת מערכת Langendorff זלוף <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרת מערכת זלוף Langendorff באמצעות זרימה קבועה (מונע על ידי משאבת הרים) או קבוע הלחץ (שנוצר על ידי לחץ סטטי בעמודה זכוכית) במצב. הערה: פרטים על הכנת Langendorff הלב תוארו בעבר 12 . </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן 2 L של KHB שונה (ב mM: 116.02 NaCl, 4.63 KCl, 1.10 MgSO 4 · 7H 2 O, 1.21 K 2 HPO 4 </suB&gt;, 2.52 CaCl 2 · 2H 2 O, 24.88 NaHCO 3 , 8.30 D גלוקוז, ו 2.0 נתרן pyruvate). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את כל הכימיקלים אבל CaCl 2 ו לפזר אותם 1.8 L של מים מזוקקים פעמיים בקבוק 2-L. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבועה המדיום עם carbogen (95% O 2 /5% CO 2 ) במשך 5 דקות לפחות עבור איזון (pH: 7.4) תחת ערבוב מגנטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 0.74 גרם של CaCl 2 .2H 2 O ולהעלות את נפח הכולל ל 2 עם מים מזוקקים פעמיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך ערבוב מבעבע בינוני עם פחמן במשך 5 דקות נוספות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סינון KHB דרך מסנן 0.2 מיקרומטר לחסל חלקיקים קטנים שעלולים לחסום את microcirculation של הלב. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת מערכת זלוף Langendorff. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את KHB מסונן לתוך אמבט מים מחומם מראש (38 ° C); לשמור מבעבע עם carbogen כדי ליצור לחץ של 100 ס&quot;מ 2 O InsidE מאגר KHB. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את המאגר לעמודה זכוכית להקים 100 cmH 2 O לחץ הידרוסטטי עבור זלוף Langendorff עם KHB; להמשיך מבעבע KHB בתוך הטור עם carbogen. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את הטמפרטורה של מערכת ההתחממות, כך הטמפרטורה בבית השקע אבי העורקים הוא 37 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא כי מערכת צינורות הוא ללא בועה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחמצן את KHB עם פחמן במשך 5 דקות נוספות, עד PO 2 ב KHB מגיע 500-600 מ&quot;מ כספית (נמדדת על ידי מנתח גז בדם). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרת מערכת זלוף לרוץ או בלחץ קבוע של 100 cmH 2 O או בזרימה קבועה של כ 10-20 מ&quot;ל / דקה באמצעות מיתוג ידני. לחלופין, להשתמש בקר משאבת STH להחלפה כדי לעבור באופן מיידי למצב זלוף. </li></ol> 3. בידוד ו cannulation של הלב הערה: חולדות Wistar זכר עם משקולות של 300-350 גרם שימשו כך גדלים של לבבות תאמו מראש הטלת לטקס. חולדות עברו גם קשירת של העורקים השמאלית יורד (LAD) במשך 50 דקות, ואחריו reperfusion או הופעלו הונאה. פרטים על המתודולוגיה של אינדוקציה של אוטם שריר הלב (MI) דווחו במקום אחר 13 . ניסויי הלב הפוכים בחיות האינפריות בוצעו 5 ימים לאחר הניתוח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים חולדות באמצעות מאדה isoflurane (2% V / V) מחובר לחדר בעל חיים מחזיק (20 L). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את החולדות לטבלת הניתוח (לא טמפרטורה מבוקרת) לאחר הרדמה עמוקה הוא הגיע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם את העור ואת השריר ממש מתחת לחזה באמצעות מלקחיים לחתוך סביב השוליים התחתונים של הצלעות עם מספריים כבדים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מספריים בסדר, לעשות חתך קטן לתוך הסרעפת, על שולי צלעות. חותכים את הצלעות caudally לעשות דש של הקיר החזה כולו הגחון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות לתפוס את הלב עם האגודל אNd אינדקס ואצבעות באמצע לאט להרים אותו כלפי מעלה, כך כלי הדם להיות מתוח מעט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבלו את הלב עד אבי העורקים נחשף במלואו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הלב בתוך כוס 100 מ&quot;ל המכיל 50 מ&quot;ל של KHB קר כקרח (4 מעלות צלזיוס) ולהעביר אותו למנגנון זלוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיד לעלות על הלב דרך אבי העורקים על צינורית נוטף בבטחה להדק אותו עם תפר (4-0). הימנע בועות אוויר נכנסים ללב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל לחץ זלוף קבוע (100 ס&quot;מ 2 O). לחלופין, קצב זרימה מלא (החל מ 20 מ&quot;ל / דקה) ניתן להחיל. הערה: הזמן מפתיחת בית החזה כדי המצורף של הלב צינורית זלוף צריך לקחת בערך 3 דקות בידיו של מפעיל מנוסה. </li></ol> 4. הפוך לב דגם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות לסובב את צינורית אבי העורקים עד הקיר האחורי של הלב הוא בפנים אל פנים . </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את רקמת החיבור במספרייםכדי לחשוף את הפתיחה של אטריום שמאל, מה שהופך אותו מוכן cannulation intraventricular. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את בלון לטקס deflated מחוברת קטטר נוקשה דרך אטריום שמאל לתוך החדר השמאלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנפח את הבלון עד שהוא ממלא את חלל החדר כולו (נפח מנפח מסומן מראש על המזרק). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך את הלב עד שהוא הפוך, תומך בו על ידי קטטר בלון תוך תוך ורידי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כפי שמוצג בתרשים 1C , לייצב באופן מכני את הלב הפוכה במצב זקוף באמצעות בלון תוך intraventricular עם קטטר מתכת נוקשה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את המיקום של הלב כדי למנוע פיתול מוגזם של שורש אבי העורקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את הלחץ diastolic ל 3-5 מ&quot;מ כספית (נמדדת על ידי בלון תוך חדרתי, ראה איור 1C ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צפו על פני השטח של הלב של הלב ולוודא כי טיפות קטנות הטופס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את כובע לטקס oאל פני השטח של הלב על ידי דחיפה בעדינות אותו כדי לכסות את הלב כולו באמצעות האצבעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא כי מכסה לטקס מכסה את רוב השטח החדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את בועות אוויר, אם בכלל, בתוך הכובע ואת צינורות על ידי מציצה בעדינות עם מזרק 1 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את הפתיחה הדיסטלית של צינור ה- CT לתת עד 10 ס&quot;מ מתחת לרמה האופקית של הלב. הערה: הליך זה מבטיח מציצה קלה על ידי לחץ הידרוסטטי שלילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף טיפות של CT בצינור 1.5 מ&quot;ל צינור להציב בקרח מעורב 1: 1 עם NaCl. איסוף על 0.15-1.5 מ&quot;ל של CT. הערה: תערובת הקרח / NaCl מייצבת את הטמפרטורה בצינור האיסוף מתחת לאפס (כ -4 ° C). הערה: זמן הדגימה תלוי במטרות הניסוי. קצב הזרימה של CT הוא כ 27 ± 20 μL / min בחיות המופעלות בדם (n = 3) ו 100 ± 47 μL / min עבור בעלי חיים ligated כלילית (n = 11). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול ו-להקפיא דגימות CTב חנקן נוזלי ולאחסן אותם ב -80 מעלות צלזיוס למדידות מאוחר יותר. </li></ol> 5. ניתוח של CT <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש נוזל CT לניתוח של מטבוליטים, בהתאם לשאלה המדעית. הערה: הנתונים המוצגים באיור 2 איור 3 נאספו מתוך זלוף לחץ מתמיד (100 ס&quot;מ 2 O), ועל 0.15-1.5 מ&quot;ל של נוזל CT נאסף בתוך תקופה של 10 דקות. הפעם והנפח היו מספיק עבור proteomic (מינימום: 50 μL, איור 2 ) 14 ו HPLC (מינימום: 20 μL, איור 3 ) 15 ניתוח של purines שונים. </li></ol>

<ol>
	<li>Henkel, D. M., Redfield, M. M., Weston, S. A., Gerber, Y., Roger, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Death+in+heart+failure:+a+community+perspective.">Death in heart failure: a community perspective.</a> Circ Heart Fail. 1 (2), 91-97 (2008).</li><li>Limana, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarction+induces+embryonic+reprogramming+of+epicardial+c-kit(+)+cells:+role+of+the+pericardial+fluid.">Myocardial infarction induces embryonic reprogramming of epicardial c-kit(+) cells: role of the pericardial fluid.</a> J Mol Cell Cardiol. 48 (4), 609-618 (2010).</li><li>Brunner, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+tissue+endothelin-1+levels+under+basal,+stimulated,+and+ischemic+conditions.">Cardiac tissue endothelin-1 levels under basal, stimulated, and ischemic conditions.</a> J Cardiovasc Pharmacol. 26, S44-S46 (1995).</li><li>de Lannoy, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renin-angiotensin+system+components+in+the+interstitial+fluid+of+the+isolated+perfused+rat+heart.+Local+production+of+angiotensin+I.">Renin-angiotensin system components in the interstitial fluid of the isolated perfused rat heart. Local production of angiotensin I.</a> Hypertension. 29 (6), 1240-1251 (1997).</li><li>Strupp, M., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interstitial+Lactate+And+Glucose-Concentrations+Of+the+Isolated-Perfused+Rat-Heart+before,+during+And+after+Anoxia.">Interstitial Lactate And Glucose-Concentrations Of the Isolated-Perfused Rat-Heart before, during And after Anoxia.</a> Pflugers Arch. 423 (3-4), 232-237 (1993).</li><li>Wienen, W., Jungling, E., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enzyme-Release+into+the+Interstitial+Space+of+the+Isolated+Rat-Heart+Induced+by+Changes+in+Contractile+Performance.">Enzyme-Release into the Interstitial Space of the Isolated Rat-Heart Induced by Changes in Contractile Performance.</a> Cardiovasc Res. 28 (8), 1292-1298 (1994).</li><li>De Deckere, E. A., Ten Hoor, ., P, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+Langendorff+technique+for+metabolic+investigations.">A modified Langendorff technique for metabolic investigations.</a> Pflugers Arch. 370 (1), 103-105 (1977).</li><li>Tschubar, F., Rose, H., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid+transfer+across+the+myocardial+capillary+wall.">Fatty acid transfer across the myocardial capillary wall.</a> J Mol Cell Cardiol. 25 (4), 355-366 (1993).</li><li>Wienen, W., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-+and+extracellular+markers+in+interstitial+transudate+of+perfused+rat+hearts.">Intra- and extracellular markers in interstitial transudate of perfused rat hearts.</a> Am J Physiol. 254 (4 Pt 2), H785-H794 (1988).</li><li>Sasse, A., Ding, Z. P., Wallich, M., Godecke, A., Schrader, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+transfer+of+adenovirus+is+augmented+by+nitric+oxide+in+the+rat+heart.">Vascular transfer of adenovirus is augmented by nitric oxide in the rat heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 287 (3), H1362-H1368 (2004).</li><li>Gnecchi, M., Zhang, Z., Ni, A., Dzau, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paracrine+mechanisms+in+adult+stem+cell+signaling+and+therapy.">Paracrine mechanisms in adult stem cell signaling and therapy.</a> Circ Res. 103 (11), 1204-1219 (2008).</li><li>Herr, D. J., Aune, S. E., Menick, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+and+Assessment+of+Ischemia-reperfusion+Injury+in+Langendorff-perfused+Rat+Hearts.">Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts.</a> J Vis Exp. (101), e52908 (2015).</li><li>Ding, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epicardium-Derived+Cells+Formed+After+Myocardial+Injury+Display+Phagocytic+Activity+Permitting+In+Vivo+Labeling+and+Tracking.">Epicardium-Derived Cells Formed After Myocardial Injury Display Phagocytic Activity Permitting In Vivo Labeling and Tracking.</a> Stem Cells Transl Med. 5 (5), 639-650 (2016).</li><li>Hartwig, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretome+profiling+of+primary+human+skeletal+muscle+cells.">Secretome profiling of primary human skeletal muscle cells.</a> Biochim Biophys Acta. 1844 (5), 1011-1017 (2014).</li><li>Smolenski, R. T., Lachno, D. R., Ledingham, S. J. M., Yacoub, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+sixteen+nucleotides,+nucleosides+and+bases+using+high-performance+liquid+chromatography+and+its+application+to+the+study+of+purine+metabolism+in+hearts+for+transplantation.">Determination of sixteen nucleotides, nucleosides and bases using high-performance liquid chromatography and its application to the study of purine metabolism in hearts for transplantation.</a> J Chromatogr. 527 (2), 414-420 (1990).</li><li>Decking, U. K., Juengling, E., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interstitial+transudate+concentration+of+adenosine+and+inosine+in+rat+and+guinea+pig+hearts.">Interstitial transudate concentration of adenosine and inosine in rat and guinea pig hearts.</a> Am J Physiol. 254 (6 Pt 2), H1125-H1132 (1988).</li><li>Heller, L. J., Mohrman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimates+of+interstitial+adenosine+from+surface+exudates+of+isolated+rat+hearts.">Estimates of interstitial adenosine from surface exudates of isolated rat hearts.</a> J Mol Cell Cardiol. 20 (6), 509-523 (1988).</li></ol>

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

מודל הלב הפוכה מבוסס על טכניקת זלוף הלב המבוצעת היטב של Langendorff 12 , והיא מבוצעת על ידי הפיכת הלב למצב הפוך ולהחזקה בתנוחה זו באמצעות קטטר נוקשה בתוך חדר הבלון. בדרך זו, transudate interstitial הלב יכול להיות מופרד פיזית מן perfusate כלילי ורידי, נוטף על ידי כוח הכבידה מן הב?...

אי ספיקת לב (HF) היא הגורם המוביל למוות בבני אדם בעולם 1 . HF מתרחשת לעיתים קרובות עקב דלקת שריר הלב, עלבונות איסכמיים בשריר הלב, ושיפוץ חדרי החדר, מה שמוביל להידרדרות הדרגתית של תפקוד הלב וכלי הדם של המטופלים. למרות ההתקדמות הקרדיולוגית וניתוח לב הורידו באופן משמעותי את תמותה HF, הם רק לשמש &quot;מעכבים&quot; חולף של תהליך מחלה מתקדמת באופן בלתי נמנע, כי יש תחלואה משמעותית. לכן, היעדר הטיפול היעיל הנוכחי מדגיש את הצורך לזהות מטרות מולקולריות חדשות שיכולות למנוע או אפילו להפוך HF. הדבר כולל שינויים במטריצה ​​החוץ-תאית, תגובה חיסונית בלתי מבוקרת של הלב, ואינטראקציות בין תאי לב ולא-לב 2 . חשוב להכיר כי microenvironment כי תאים לב חשופים direcTly צורות התגובה החיסונית והתחדשות של הלב הפגוע. בלב המבודד, המלוח-מלוח, נוצר CT על פני השטח בצורת טיפות קטנות הנגזרות מחלל הנוזלים הבין-ממדי ( כלומר, מיקרו-סביבה), הן בתנאים פיזיולוגיים והן בפאתופיזיולוגיים 3 , 4 , 5 . לכן, ניתוח של CT ( כלומר, נוזל interstitial) עשוי לעזור לזהות גורמים המווסתים את חילוף החומרים של הלב ואת תפקוד התכווצות 6 או להשפיע על תפקודי התא החיסונית לאחר המעבר אל הלב הפגוע. פוטנציאל זה עשוי להוביל לפיתוח אסטרטגיות טיפוליות חדשות לטיפול ב- HF. אוסף CT מ לבבות Murine הוא מאתגר מבחינה טכנית. ב Langendorff-perfused לבבות רגילים, את האוסף הבלעדי של CT קשה כי תערובת של CT עם קורונארY ורידי שפכים ורידי באופן בלתי צפוי מדלל כל ריכוז של מטבוליטים / אנזימים ששוחררו מן החלל interstitial. אחת האסטרטגיות האפשריות להתגבר על הגבלה זו היא להוציא את השפכים הוורידים על ידי חשיפת הריאתי ובאותו זמן ליגנציה של הווריד הריאתי. עם זאת, שיטה זו עומדת בפני קשיים הקשורים cannulation ו קשירת של העורק הריאתי ואת הווריד, גרימת דליפה פוטנציאלית של שפכים ורידי לתוך transudate הלב. הרעיון של שימוש במודל לב הפוכה הוצג לראשונה על ידי קבוצת קמרמאייר, שהפכה את הלב המבודד והמבודד למצב הפוך, והניחה כובע לטקס דק על משטח האפיכארדיאל כדי למדוד ללא הרף את ה- CT ללא זיהום של שפכים ורידיים 8 , 9 . באמצעות הליך זה, CT הוצגה לספק מדד רגיש מאוד של מטבוליטים שוחרר מהלב 9 ,העברה נימית של חומצות שומן 8 , וחלקיקים נגיפיים 10 . לאחרונה, גורמי פרקרין שיכולים להסדיר את התגובה החיסונית המקומית ולהגדיל את אנגיוגנזה לב 11 היו מעורבים בהשפעות החיוביות של טיפול מבוסס תאי גזע למחלות לב. הניתוח של CT בלב הפוך עשוי לסייע לזהות את הגורמים הפרקריים האישיים הללו באופן כימי. בנוסף, CT עשוי לעזור לזהות את הגורמים המעורבים ההפעלה vivo של תאים חיסוניים בלב. התיאור המפורט של אוסף ה- CT ממשטח הלב, הניתן כאן, הוא שימושי עבור חוקרים החוקרים את יחסי הגומלין בין תאי החיסון, fibroblasts, תאי האנדותל, ואת cardiomyocytes ביחס לתפקוד הלב הכולל. כפי שצוין לעיל, נוזל interstitial נושאת את המידע לתקשורת תא אל תוך התא, בתוך הלב, WHIch ניתן להעריך בנוחות על ידי אוסף של CT. תיאור טכני מפורט, כולל פרוטוקול וידאו של איך לאסוף CT מן הלב הפוכה, צריך להקל על היישום העתידי של טכניקה ייחודית זו.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="815">
	<tbody>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Latex Solution</td>
			<td style="width:129px;">ProChemie</td>
			<td style="width:184px;">Z-Latex LA-TZ</td>
			<td style="width:201px;">&#160;http://kautschukgesellschaft.de/%E2%80%A8z-latexla-tz%E2%80%A8</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Aluminum Mold</td>
			<td style="width:129px;">Home made</td>
			<td style="width:184px;">-</td>
			<td>Reverse heart model</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Universal Ovens</td>
			<td style="width:129px;">Memmert</td>
			<td style="width:184px;">UNB 400</td>
			<td>Reverse heart model</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Latex Balloon</td>
			<td style="width:129px;">Hugo Sachs</td>
			<td style="width:184px;">Size 4</td>
			<td>Reverse heart model</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Milling Machine</td>
			<td style="width:129px;">Proxxon</td>
			<td style="width:184px;">MF70</td>
			<td>Reverse heart model</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Sodium Chloride</td>
			<td style="width:129px;">Sigma</td>
			<td style="width:184px;">SZBD0810V</td>
			<td>Chemicals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Sodium Hydrogen Carbonate</td>
			<td style="width:129px;">Roth</td>
			<td style="width:184px;">68852</td>
			<td>Chemicals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Potassium Chloride</td>
			<td style="width:129px;">Merck</td>
			<td style="width:184px;">49361</td>
			<td>Chemicals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Magnesium Sulphate Heptahydrate</td>
			<td style="width:129px;">Merck</td>
			<td style="width:184px;">58861</td>
			<td>Chemicals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Potassium Dihydrogen Phosphate</td>
			<td style="width:129px;">Merck</td>
			<td style="width:184px;">48731</td>
			<td>Chemicals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">D(+)-Glucose Anhydrous</td>
			<td style="width:129px;">Merck</td>
			<td style="width:184px;">83371</td>
			<td>Chemicals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Calcium Chloride Dihydrate</td>
			<td style="width:129px;">Fluka</td>
			<td style="width:184px;">21097</td>
			<td>Chemicals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Balance</td>
			<td style="width:129px;">VWR</td>
			<td>SE 1202&#160;</td>
			<td>Weighing chemicals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Double Distilled Water</td>
			<td style="width:129px;">Millpore</td>
			<td style="width:184px;">-</td>
			<td>Disolving chemicals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Medical Pressure Transducer</td>
			<td style="width:129px;">Gold</td>
			<td style="width:184px;">-</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Medical Flow Probe</td>
			<td style="width:129px;">Transonic</td>
			<td style="width:184px;">3PXN</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Heating Circulating Bath</td>
			<td style="width:129px;">Haake&#160;</td>
			<td style="width:184px;">B3 ; DC1</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Laboratory and Vaccum Tubing</td>
			<td style="width:129px;">Tygon</td>
			<td style="width:184px;">R-3603</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Animal Research Flowmeters</td>
			<td style="width:129px;">Transonic</td>
			<td style="width:184px;">T206</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">PowerLab Data Acquisition Device</td>
			<td style="width:129px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:184px;">Chart 7.1</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">LabChart Data Acquisition Software</td>
			<td style="width:129px;">AD Instruments</td>
			<td style="width:184px;">Chart 7.1</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Peristaltic Pump</td>
			<td style="width:129px;">Glison</td>
			<td style="width:184px;">MINIPULS 3</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Glass Water Column</td>
			<td style="width:129px;">home made</td>
			<td style="width:184px;">-</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Water Bath Protective Agent</td>
			<td style="width:129px;">VWR</td>
			<td style="width:184px;">462-7000</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:301px;">Sterile Disposable&#160; Filters (0.2&#181;m)</td>
			<td style="width:129px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:184px;">595-4520</td>
			<td>Langendorff apparatus</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Blood gas analyzers</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td style="width:184px;">ABL90 FLEX PLUS</td>
			<td>Gas analyzer</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">70% ethanol</td>
			<td style="width:129px;">VWR</td>
			<td style="width:184px;">UN1170</td>
			<td>Cleaning&#160; tubings</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">100% ethanol</td>
			<td style="width:129px;">Merck</td>
			<td style="width:184px;">64-17-5</td>
			<td>Cleaning tubings</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;">Wistar Rats</td>
			<td style="width:129px;">Janvier</td>
			<td style="width:184px;">-</td>
			<td>Animals</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Stainless Scissors</td>
			<td style="width:129px;">AESCULAP</td>
			<td style="width:184px;">BC702R</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Stainless Scissors</td>
			<td style="width:129px;">AESCULAP</td>
			<td style="width:184px;">BC257R</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">Big Forceps&#160;</td>
			<td style="width:129px;">AESCULAP</td>
			<td style="width:184px;">-</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">8m/m Stainless Forceps</td>
			<td style="width:129px;">F.S.T</td>
			<td style="width:184px;">11052-10</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:301px;">superfine (10/0) emery paper</td>
			<td style="width:129px;">3M</td>
			<td style="width:184px;">051111-11694</td>
			<td>Reverse heart model</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the inverted heart model for interstitial transudate collection from the isolated rat heart

הפרוטוקול הנוכחי מתאר גישה ייחודית המאפשרת אוסף של transudate לב (CT) מן הלב מבודד, מלוחים perfused חולדה. לאחר בידוד ו זלילה מדרדר של הלב על פי טכניקת Langendorff, הלב הוא הפוך למצב הפוך הפוכה מיוצב מכנית על ידי קטטר בלון מוכנס לתוך החדר השמאלי. ואז, כובע לטקס דק - בעבר יצוק כדי להתאים את הגודל הממוצע של הלב חולדה - ממוקם מעל פני השטח epichardial. השקע של כובע לטקס מחובר צינורות סיליקון, עם פתיחת דיסטלי 10 ס&quot;מ מתחת לרמת הבסיס של הלב, יצירת יניקה קלה. CT מיוצר ברציפות על פני השטח אפיקארדיאל נאסף בקבוקונים מקורר כקרח לניתוח נוסף. שיעור היווצרות ה- CT נע בין 17 ל -147 μL / min (n = 14) בשליטה ובליבות לא מקובעות, המייצגות 0.1-1% מהפרפוראטציה הקולית הוורידית. ניתוח פרוטאומי ופרפו גבוהRmance נוזל כרומטוגרפיה (HPLC) גילה כי CT שנאספו מכיל מגוון רחב של חלבונים ו metinerolic purinergic.

<html> מודל הלב הפוכה מאפשר איסוף של transstate interstitial הלב בלב מבודד, רטרו perfused חולדה ( איור 1A- C ). כאשר perfused בלחץ קבוע של 100 cmH 2 O, שיעור היווצרות נוזל interstitial נע בין 17 ו 147 μL / min, בהיקף של 0.1-1% של שפכים ורידי הלב כליל בלב בודד. <p class="j...

Watch this Scientific Journal Video about The Inverted Heart Model for Interstitial Transudate Collection from the Isolated Rat Heart at JoVE.com

The Inverted Heart Model for Interstitial Transudate Collection from the Isolated Rat Heart

פרוטוקול זה מתאר שיטה לאסוף נוזל interstitial לב מבודדים, בלב עכברוש perfused. כדי להפריד פיזית transudate interstitial מ perfossate כלילי ורידי לב, הלב Langendorff perfused הוא הפוך, ואת transudate (נוזל interstitial) נוצר על פני הלב נאסף באמצעות כובע לטקס רכה.

מודל הלב הפוכה עבור אוסף transstate Interstitial מן הלב עכברוש מבודד

The present protocol describes a unique approach that enables the collection of cardiac transudate (CT) from the isolated, saline-perfused rat heart. ...

the-inverted-heart-model-for-interstitial-transudate-collection-from

Research

JoVE Journal

Medicine

8.3K Views.  Second Military Medical University.  פרוטוקול זה מתאר שיטה לאסוף נוזל interstitial לב מבודדים, בלב עכברוש perfused. כדי להפריד פיזית transudate interstitial מ perfossate כלילי ורידי לב, הלב Langendorff perfused הוא הפוך, ואת transudate (נוזל interstitial) נוצר על פני הלב נאסף באמצעות כובע לטקס רכה. 

Video: The Inverted Heart Model for Interstitial Transudate Collection from the Isolated Rat Heart

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant vasculopathy (TVP).
The commonly used animal model for cardiovascular chronic rejection studies is the heterotopic heart transplant model performed in laboratory rodents. This model is used widely in experiments since Ono and Lindsey (3) published their technique. To analyze the findings in the blood vessels, the heart has to be sectioned and all vessels have to be measured.
Another method to investigate chronic rejection in cardiovascular questionings is the aortic transplant model (1, 2). In the orthotopic aortic transplant model, the aorta can easily be histologically evaluated (2). The PVG-to-ACI model is especially useful for CAV studies, since acute vascular rejection is not a major confounding factor and Cyclosporin A (CsA) treatment does not prevent the development of CAV, similar to what we find in the clinical setting (4). A7-day period of CsA is required in this model to prevent acute rejection and to achieve long-term survival with the development of TVP.
This model can also be used to investigate acute cellular rejection and media necrosis in xenogeneic models (5).

This video demonstrates the orthotopic aortic transplant model as a simple model to study the development of transplant vasculopathy (TVP) in rats.

Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Magnetic Resonance Derived Myocardial Strain Assessment Using Feature Tracking

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF. Current technologies for CMR are time consuming and difficult to implement in clinical practice. Feature tracking is a technology that can lead to more automization and robustness of quantitative analysis of medical images with less time consumption than comparable methods.
Methods: An automatic or manual input in a single phase serves as an initialization from which the system starts to track the displacement of individual patterns representing anatomical structures over time. The specialty of this method is that the images do not need to be manipulated in any way beforehand like e.g. tagging of CMR images.
Results: The method is very well suited for tracking muscular tissue and with this allowing quantitative elaboration of myocardium and also blood flow.
Conclusions: This new method offers a robust and time saving procedure to quantify myocardial tissue and blood with displacement, velocity and deformation parameters on regular sequences of CMR imaging. It therefore can be implemented in clinical practice.

An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF.

תהודה מגנטית נגזר מסננים הערכה שריר הלב באמצעות מעקב אחר תכונות

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

דגם של שריר הלב איסכמיה reperfusion הפגיעה Murine באמצעות קשירת של העורק השמאלי קדמי יורד

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Implantation of Total Artificial Heart in Congenital Heart Disease

In patients with end-stage heart failure (HF), a total artificial heart (TAH) may be implanted as a bridge to cardiac transplant. However, in congenital heart disease (CHD), the malformed heart presents a challenge to TAH implantation. 
In the case presented here, a 17 year-old patient with congenital transposition of the great arteries (CCTGA) experienced progressively worsening HF due to his congenital condition. He was hospitalized multiple times and received an implantable cardioverter defibrillator (ICD). However, his condition soon deteriorated to end-stage HF with multisystem organ failure. 
Due to the patient's grave clinical condition and the presence of complex cardiac lesions, the decision was made to proceed with a TAH. The abnormal arrangement of the patient's ventricles and great arteries required modifications to the TAH during implantation.
With the TAH in place, the patient was able to return home and regain strength and physical well-being while awaiting a donor heart. He was successfully bridged to heart transplantation 5 months after receiving the device. This report highlights the TAH is feasible even in patients with structurally abnormal hearts, with technical modification.

This is a case report of a patient with congenitally corrected transposition of the great arteries (CCTGA) who received a total artificial heart (TAH) as a bridge to heart transplant. The TAH was successfully implanted with modifications to accommodate the patient's congenitally malformed heart.

השתלת הלב המלאכותי סך במחלת הלב מולדת

In patients with end-stage heart failure (HF), a total artificial heart (TAH) may be implanted as a bridge to cardiac transplant. However, in congenital ...

An Isolated Working Heart System for Large Animal Models

Since its introduction in the late 19th century, the Langendorff isolated heart perfusion apparatus, and the subsequent development of the working heart model, have been invaluable tools for studying cardiovascular function and disease1-15. Although the Langendorff heart preparation can be used for any mammalian heart, most studies involving this apparatus use small animal models (e.g., mouse, rat, and rabbit) due to the increased complexity of systems for larger mammals1,3,11. One major difficulty is ensuring a constant coronary perfusion pressure over a range of different heart sizes &#8211; a key component of any experiment utilizing this device1,11. By replacing the classic hydrostatic afterload column with a centrifugal pump, the Langendorff working heart apparatus described below allows for easy adjustment and tight regulation of perfusion pressures, meaning the same set-up can be used for various species or heart sizes. Furthermore, this configuration can also seamlessly switch between constant pressure or constant flow during reperfusion, depending on the user&#8217;s preferences. The open nature of this setup, despite making temperature regulation more difficult than other designs, allows for easy collection of effluent and ventricular pressure-volume data.

Most studies involving the Langendorff apparatus use small animal models due to the increased complexity of systems for larger mammals. We describe a Langendorff system for large animal models that allows for use across a range of species, including humans, and relatively easy data acquisition.

מערכת העבודה לב מבודדת למודלים בבעלי חיים גדולים

Since its introduction in the late 19th century, the Langendorff isolated heart perfusion apparatus, and the subsequent development of the working heart ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. As this technology expands and improves, the ability to potentially evaluate and improve the quality of substandard lungs prior to transplant is a critical need. In order to more rigorously evaluate these approaches, a reproducible animal model needs to be established that would allow for testing of improved techniques and management of the donated lungs as well as to the lung-transplant recipient. In addition, an EVLP animal model of associated pathologies, e.g., ventilation induced lung injury (VILI), would provide a novel method to evaluate treatments for these pathologies. Here, we describe the development of a rat EVLP lung program and refinements to this method that allow for a reproducible model for future expansion. We also describe the application of this EVLP system to model VILI in rat lungs. The goal is to provide the research community with key information and &#8220;pearls of wisdom&#8221;/techniques that arose from trial and error and are critical to establishing an EVLP system that is robust and reproducible.

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. Here, we describe the development of a rat EVLP program and refinements that allow for a reproducible model for future expansion.

שיטה של ​​מבודד<em&gt; Ex Vivo</em&gt; ריאות זלוף במודל עכברוש: ​​לקחים מפיתוח תכנית EVLP עכברוש

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Murine Isolated Heart Model of Myocardial Stunning Associated with Cardioplegic Arrest

The following protocol is of use to evaluate impaired cardiac function or myocardial stunning following moderate ischemic insults. The technique is useful for modeling ischemic injury associated with numerous clinically relevant phenomenon including cardiac surgery with cardioplegic arrest and cardiopulmonary bypass, off-pump CABG, transplant, angina, brief ischemia, etc. The protocol presents a general method to model hypothermic hyperkalemic cardioplegic arrest and reperfusion in rodent hearts focusing on measurement of myocardial contractile function. In brief, a mouse heart is perfused in langendorff mode, instrumented with an intraventricular balloon, and baseline cardiac functional parameters are recorded. Following stabilization, the heart is then subject to brief infusion of a cardioprotective hypothermic cardioplegia solution to initiate diastolic arrest. Cardioplegia is delivered intermittently over 2 hr. The heart is then reperfused and warmed to normothermic temperatures and recovery of myocardial function is monitored. Use of this protocol results in reliable depressed cardiac contractile function free from gross myocardial tissue damage in rodents.

The goal of this protocol to assess myocardial stunning following ischemic cardioplegic arrest in rodents.

דגם לב מבודד עכברי של Associated מקסימה שריר הלב עם מעצר Cardioplegic

The following protocol is of use to evaluate impaired cardiac function or myocardial stunning following moderate ischemic insults. The technique is useful ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the tail vein is thin so that it is sometimes hard to puncture. In addition, the tail vein has low blood flow and requires a long sampling time to get sufficient blood. The present report describes a simple blood sampling method, the vacuum blood collection method, which is usually used to obtain blood samples from patients, here used for non-anesthetized rats. The 22 G butterfly needle tip was inserted into one of the lateral tail veins approximately 2-3 cm from the tip of the tail at an angle of approximately 20&#176;, and blood was collected in the vacuum collection tube by inserting the rubber end of the butterfly needle into the vacuum blood collection tube. The present experimental results show that the success rate was 95% in the experimental group and 90% in the beginner group. The success rate and puncture times were similar between two groups. The sampling duration was significantly shorter in the experimental group compared to beginner group. In conclusion, this vacuum blood collection method for sequential blood sampling from the tail vein of non- anesthetized rats is feasible and easy-to-learn, which might serve as a reliable alternative to other conventionally used blood sampling techniques for rats.

Here, we describe a simple tail vein blood sampling method in non-anesthetized rats using a vacuum extraction tube system. This method reduces the risk of direct exposure to blood and simplifies taking multiple samples from a single venipuncture.

חזר על איסוף דם של וריד הזנב של חולדות שאינם מרדימים עם מערכת איסוף דם ואקום

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

מודל לפציעה בהקפאה לחקור אוטם שריר הלב בעכבר

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

An Image Guided Transapical Mitral Valve Leaflet Puncture Model of Controlled Volume Overload from Mitral Regurgitation in the Rat

Mitral regurgitation (MR) is a widely prevalent heart valve lesion, which causes cardiac remodeling and leads to congestive heart failure. Though the risks of uncorrected MR and its poor prognosis are known, the longitudinal changes in cardiac function, structure and remodeling are incompletely understood. This knowledge gap has limited our understanding of the optimal timing for MR correction, and the benefit that early versus late MR correction may have on the left ventricle. To investigate the molecular mechanisms that underlie left ventricular remodeling in the setting of MR, animal models are necessary. Traditionally, the aorto-caval fistula model has been used to induce volume overload, which differs from clinically relevant lesions such as MR. MR represents a low-pressure volume overload hemodynamic stressor, which requires animal models that mimic this condition. Herein, we describe a rodent model of severe MR in which the anterior leaflet of the rat mitral valve is perforated with a 23G needle, in a beating heart, with echocardiographic image guidance. The severity of MR is assessed and confirmed with echocardiography, and the reproducibility of the model is reported.&#160;&#160;

A rodent model of left heart volume overload from mitral regurgitation is reported. Mitral regurgitation of controlled severity is induced by advancing a needle of defined dimensions into the anterior leaflet of the mitral valve, in a beating heart, with ultrasound guidance.&#160;

תמונה מונחית Transapical צניפי העלון נקב מודל של נפח מבוקרת עומס יתר מ צניפי אי-ספיקת בעכברוש

Mitral regurgitation (MR) is a widely prevalent heart valve lesion, which causes cardiac remodeling and leads to congestive heart failure. Though the ...