פרוטוקול זה מספק צורך מפורט לפתח מודל ארוך טווח לפרפור חדרים באמצעות מנגנון לנגנדורף. הוא ממלא את הפער של פרפור חדרים ארוך טווח במודל בעלי החיים הקטנים. הטכני פשוט, חסכוני, ניתן לחזרה ויציב.
טכניקה זו יכולה לשמש במחקר של מעצר פרפור חדרים תחת זילוח אשר מבוצע במצבים קליניים מסוימים בתחום ניתוחי לב וניתוחים. כדי להתחיל, להכין את מאגר Krebs-Henseleit או KH על ידי הוספת 118 מילימולר נתרן כלורי, 4.7 מילימולר אשלגן כלורי, 1.2 מילימולרי מגנזיום כלורי, 1.2 מילימולרי נתרן דימימן פוספט, 1.8 מילימולרי סידן כלורי, 25 מילימולר סודיום ביקרבונט, 11.1 מילימולר גלוקוז, 0.5 מילימולרי EDTA במים מזוקקים. לאחר מכן להכין את מערכת זילוח לנגנדורף שונה.
גז רציף של הבקבוק המכיל חיץ KH עם 95% חמצן ו-5% פחמן דו חמצני בלחץ של כ-80 מילימטרים של כספית. מניחים קצה אחד של צינור הזילוח במאגר KH, מעבירים את אמצע צינור הזילוח דרך אמבט המים, ומחברים מחט קהה 20 מד לקצה השני של צינור הזילוח. לאחר תליית המחט על מעמד תיל, להתאים את הטמפרטורה של אמבט המים כך הטמפרטורה של חיץ KH מקצה מערכת זילוח הוא 37 מעלות צלזיוס.
השתמש במקליט אותות פיזיולוגי כדי לבצע דיגיטציה ולהקליט את כל האותות האנלוגיים. השתמש בשתי אלקטרודות מחט נירוסטה כדי להקליט אלקטרוקרדיוגרמה דו קוטבית או אק"ג ושתי אלקטרודות מחט נירוסטה לגירוי חשמלי. חבר קצה אחד של ארבע האלקטרודות למקליט האותות הפיזיולוגי ואת הקצה השני קרוב לאזור שבו הלב ימוקם לאחר החיבור למנגנון.
לאחר מכן, השתמש בתוכנת המחשב הנייד כדי לזהות, להתאים ולהקליט באופן אוטומטי א.ק.ג דו קוטבי ופרמטרים המודינמיים. הגדר את פרמטרי הממריץ החשמלי לזרם חילופין של 30 הרץ כאשר קבוצת המתח הנמוך מקבלת 2 וולט וקבוצת המתח הגבוה מקבלת 6 וולט. כאשר החולדה המורדמת מחוברת למכונת הנשמה לאחר דיסקציה של צוואר הרחם ואינטובציה בקנה הנשימה, הרימו את העור מתהליך הקסיפואיד בעזרת מלקחיים בשיניים ובצעו חתך רוחבי של שלושה סנטימטרים בעור בעזרת מספריים לרקמות.
יש להרחיב את חתכי העור והצלעות לבית השחי משני הצדדים בצורת V. השתמש בדיסקציה קהה כדי להפריד את הגזע הברכיוצפלי מהרקמה שמסביב. לאחר מכן מהדקים את תא המטען הברכיוצפאלי עם מלקחיים מעוקלים כדי להקל על הסרת הלב.
מיד לטבול את הלב בצלחת פטרי עם חיץ KH ב 0 עד 4 מעלות צלזיוס כדי לשטוף ולשאוב את הדם שאריות. מעבירים את הלב לצלחת פטרי שנייה. חותכים את הרקמה המיותרת ומזהים את אבי העורקים.
השתמש בשני מלקחיים עיניים כדי להרים את אבי העורקים ולהחדיר את אבי העורקים לתוך המחט הקהה של מכשיר לנגנדורף. ואז בעזרת עוזר, לקשור קשר עם חוט תפר 0. הפעל את וסת זרימת הזילוח.
דוחפים את הבלון דרך המסתם המיטרלי לחדר השמאלי. מלאו את הבלון במים מזוקקים כדי להשיג לחץ דיאסטולי סופי של 5 עד 10 מילימטרים של כספית. חבר את אלקטרודות האק"ג והגירוי החשמלי ללב.
הניחו את הלב במרכז תא הזכוכית המעוטר בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס. אפשרו ללב להתאזן למשך 20 דקות בתוך החדר. לאחר מכן התאימו את טמפרטורת אמבט המים כדי לשמור על הטמפרטורה בתוך תא הזכוכית המעוטה ב -30 מעלות צלזיוס.
לאחר שהטמפרטורה הגיעה לרמה הרצויה, הפעל את מתג הגירוי החשמלי בתוכנת המחשב הנייד. אם בעל החיים הוא חלק מקבוצת פרפור החדרים לטווח ארוך או VF המגורה ברציפות, אפשר 90 דקות של גירוי חשמלי. לאחר 90 דקות של VF, השתמש באלקטרודות כדי לתת 0.1 ג'אול של דפיברילציה בזרם ישר.
במקביל, לווסת את טמפרטורת אמבט המים כדי לאפשר לטמפרטורה לעלות לאט בתוך תא הזכוכית המעוטה ל -37 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות. לאחר הדפיברילציה, לאפשר ללב לפעום במשך 60 דקות ולאחר מכן להפסיק את הפעימות על ידי זילוח איטי עם 10% אשלגן כלורי בערך 37 מעלות צלזיוס. הסר את הלב עבור קריאטין קינאז או בדיקת CK-MB וניתוח היסטולוגי.
שיעורי VF, שיעור ההצלחה של דפיברילציה, ואת שיעור ההצלחה של מודל VF מוצגים כאן. קבוצת LC וקבוצת HC קיבלו גירוי חשמלי מתמשך וכך VF התרחש עם שיעור הצלחה של 100%. אבל HC קבוצתי הראה שיעורי הצלחה נמוכים יותר עבור דפיברילציה.
לקבוצה LI ולקבוצה HI שבה הגירוי החשמלי כבה לאחר חמש דקות היו שיעורים שונים של VF, אך קצב ה-VF היה איטי יותר בשתי הקבוצות בהשוואה לקבוצה LC וקבוצה HC. גם לקבוצה LC וגם לקבוצה LI היו שיעורי הצלחה טובים יותר בדפיברילציה. אבל בסך הכל, לקבוצה LC היה שיעור ההצלחה הגבוה ביותר של המודל, בעוד שלקבוצה LI היה שיעור הצלחה נמוך יותר. הדופק או הדופק, הזרימה הכלילית או CF, והפרש הלחץ בחדר השמאלי או קצבי ההתאוששות LVPD מוצגים כאן.
ההמודינמיקה של קבוצה C נשארה יציבה במהלך הניסוי והראתה ירידה קלה ב-HR, CF ו-LVPD. שתי הקבוצות עם VF המושרה במתח נמוך היו בעלי ביצועים דומים ושיעור התאוששות טוב. HR ו- LVPD לא היו שונים באופן משמעותי בקבוצות אלה בהשוואה לקבוצה C.אך שיעור ההתאוששות של CF היה טוב משמעותית מאשר בקבוצה C.In לעומת זאת, קצב ההתאוששות ההמודינמי של שתי הקבוצות עם מתח גבוה המושרה ל- VF לטווח ארוך היה גרוע וקבוצת VF ארוכת טווח עם גירוי מתמשך במתח גבוה הראתה את שיעור ההתאוששות הגרוע ביותר.
ניתוח נוזלי ההיתוך הכליליים הראה כי רמות CK-MB היו גבוהות יותר בשתי קבוצות המתח הגבוה. לא נמצאו הבדלים בין שתי קבוצות המתח הנמוך וקבוצת C.Hematoxylin וצביעת eosin הראתה אזור צריבת אלקטרודות בקבוצה HC. פרוטוקול זה מתאים למחקר הקשור לדום פרפור חדרים ולזילוח בניתוחי לב וכלי דם.
