ההליכים מתבצעים באמצעות מערכת Lipogems.

כל ההליכים שבוצעו במחקרים משתתפים בני אדם מעורבים היו לפי סטנדרטים אתיים של ועדת מחקר מוסדיים ו/או לאומי, ועם הצהרת הלסינקי 1964 ו תיקונים מאוחר יותר או מוסרי דומות שלו סטנדרטים.
1. היסטוריה רפואית
<ol><li>התחל בדיקה קלינית עם המטופל היסטוריה רפואית מפורטת. הערה: OLT חייב תמיד להיות חשוד במקרה של חוסר יציבות של הקרסול עם נקעים חוזרים ונשנים המשויכים, נוקשות, כאב, ונפיחות חסימה משותפת. יתר על כן, במקרים רבים OLT עשויה להיות קשורה היסטוריה של מחלה מערכתית, כגון מחלות דלקתיות או כלי דם, נוירופתיה או מחלה נוירולוגית וסוכרת. השימוש בסמים או בעיות רפואיות שעשוי להשפיע על ריפוי חייב להיות מוערכים, נלקח בחשבון.</li>
</ol>2. בדיקה קלינית
<ol><li>הערכת החולה במצב התנוחתית כדי להדגיש את הקרסול או עיוות הינד באורך. להעריך תפקוד שריר וגיד טווח הקרסול של תנועה (ROM). רוך ' מאטום לשקוף ' זה לעיתים קרובות קיים, במיוחד במהלך כיפוף מרבי והסיומת, וזה לא נדיר למפגש אזור רגיש למגע ברמה של המפרק במפרק.</li>
	<li>לבצע מבחן מגירה anterior ואת אחורי כדי לזהות חוסר יציבות של הקרסול הלטראלי והמצוות.</li>
	<li>בייעוץ לפני הניתוח, לתעד את תוצאות קליניים ופונקציונליים הבאות: רגל אורטופדי אמריקאי & הקרסול החברה (AOFAS) קרסול ורגל הינד ציונים15, סולם חזותי אנלוגי (VAS) כאב ציון16, ו טופס קצר 12 פריטים בריאות סקר (SF-12)17.</li>
</ol>3-הערכת רדיולוגי
<ol><li>לבצע משקל דו צדדיים הנושאת radiograph של כף הרגל, הקרסול. זה מורכב קונבנציונאלי mortise anteroposterior (AP) נושאת משקל ותצוגות לרוחב נושאת משקל של הקרסול. לבצע AP mortise בעמדה נייטרלית, ועם 15 מעלות של סיבוב פנימי עבור פריט חזותי טוב יותר טאלוס. הערה: רק 50% OLT יכולים להיות מאובחנים עם radiograph; במקרה של נגעים גדולים, שטח של העצם מנותק ומוקף radiolucency יכול להיות ציין18.</li>
	<li>בצע קונבנציונאלי מחושב טומוגרפיה ממוחשבת-סריקה (CT-סריקה) של הקרסול. בדיקת ct מאפשר מיקום מדויק ושם גודל הנגע, זיהוי גם שברי העצם במקרה של ניתוק. נקודת התורפה של ה-CT הוא היכולת להציג את המצב של הסחוס. מחקר קודם הראה רגישות וסגוליות של 0.81 ו- 0.99, בהתאמה, לגילוי OLTs על CT19,20.</li>
	<li>לבצע דימות תהודה מגנטית (MRI) של הקרסול. MRI היא מהותית הערכת עצם subchondral סחוס. יתר על כן, ה MRI אינה כרוכה קרינה מייננת, ומאפשר ויזואליזציה טובה יותר ברקמות הרכות. בספרות מדווח על רגישות וסגוליות של 96% באיתור OLTs21,22.</li>
</ol>4. טכניקה כירורגית
<ol><li>איסוף ועיבוד של רקמת שומן
	<ol>
<li>להכין פתרון קליין: 1 ליטר של תמיסת מלח 9 גרם/ליטר, 50 מ של לידוקאין 1%, 1 מ"ל של אפינפרין 1:1000, 10 מ של 8.4% סודיום ביקרבונט ו 0.1 מ"ל של 10 מ"ג/מ"ל של triamcinolone acetonide.</li>
		<li>ליצור חתכים שני פארא-חבל הטבור של כ 0.5 ס מ עם להב ומהדקים. להחדיר כ 300 מ"ל של קליין פתרון אל תוך רקמת השומן התת עורית של הבטן דרך חתכים בעזרת מזרקים 60 מ עם מחט 18 גרם (איור 1).</li>
		<li>הקציר 40-45 מ של ADSCs באמצעות בצינורית בוטה של 13G המצורפת מזרק 20-mL והציג בערכת עיבוד (איור 2). בדרך כלל, לבצע קציר באזור הטבור-פרי.</li>
		<li>להוסיף 100-130 מ של lipoaspirate במערכת סגורה. לדחוף את lipoaspirate לתוך המכשיר דרך מסנן גדול כדי להשיג ירידה האשכול הראשון; באותו הזמן, כמות המתאימה של תמיסת יוצא לכיוון הבסיס לבזבז. תפקיד מפתח הוא שיחק על ידי גולות פלדה אל חלד להשיג אמולסיה זמני בין שמן, דם תמיסת מלח. להסיר שאריות שמן דם נגוע על ידי זרם נגד כוח המשיכה של תמיסת מלח.</li>
		<li>לאחר שלב זה כביסה (הפתרון זורם מופיע ברור, הצהוב lipoaspirate), לעצור את שטף מלוחים, להפוך את המכשיר (כובע אפור למעלה), שמוביל ההפחתה אדיפוז האשכול השני. להשיג צמצום על ידי דחיפת האשכולות אדיפוז צף דרך חיתוך משושה המסנן השני, לדחוף נוזלים מלמטה בעזרת מזרק 10-mL. לאסוף את המוצר הסופי לתוך מזרק 10-mL מחובר הפתח העליון של המכשיר. הערה: ערכת עיבוד עבור רקמת השומן משפר את טכניקת lipofilling סטנדרטי: למעשה, המערכת מורכבת מערכת גלילי סגור, עוטפת, בלחץ נמוך, על מנת לקבל מוצר אחיד של נוזלים המכילים מספר רב של pericytes. הליך זה מאפשר העיבוד של אדיפוז תאים אך ורק באמצעות כוחות מכני מתון, שמירה על השלמות של הגומחה וסקולרית סטרומה. התהליך הוא ביותר האפשרי הכי פחות טראומטי, שהופך את המוצר הסופי זמין תוך זמן קצר (15-20 דקות), ללא טיפולים אנזימטי או הרחבה. Vasculostromal ניזוק נישות לסייע בתהליך הריפוי.</li>
		<li>ברגע ADSCs נקצצו, החל תחבושת דחיסה על הבטן.</li>
	</ol></li>
	<li>הליך כירורגי, הזרקת שומן
	<ol>
<li>למקם את המטופל במצב פרקדן תחת הרדמה בעמוד השדרה עם חוסם עורקים, בלחץ של 250 מ מ כספית, ברמה של הירך כדי להקטין את הדימום, לאפשר יותר ארתרוסקופיים ויזואליזציה1.</li>
		<li>סמן ציוני הדרך אנטומי על העור עם עט dermographic. אתרים חיוניים כדי למנוע פציעות iatrogenic. לסמן את הדברים הבאים (איור 3): שני malleoli (לרוחב (LM), המדיאלי (מ מ)) anterior משותפת הקו (JL), המזוהה עם הרחיב - ו plantar-כיפוף של מפרק הקרסול הגיד השוקה (TAT), וכן גיד אכילס הגדול saphenous הווריד, אשר פועל קצת לפני הקרסולית האמצעית שטחי שיתוק (SPN)</li>
		<li>ראשית, לבצע את הפורטל anteromedial המדיאלי רק השוקתי הגיד, בד בבד עם חולשה. פורטל זה מייצג גישה לפורטל. ברוב המקרים, גומה עם הקרסול של dorsiflexion הוא גלוי מוחשי.<ol>
<li>לחתוך רק את העור עם להב ולאחר מכן לנקב את הקפסולה ע י ניתוח עמום. לטפל כדי למנוע העצב saphenous וריד saphenous נהדר. וריד saphenous נמצא במרחק 9 מ מ רוחבית לפורטל, העצב נמצא בערך 7.4 מ"מ לרוחב לפורטל. זה מהווה את אחד מן שני פורטלים צפייה העיקרי.</li>
		</ol>
</li>
		<li>לבדוק את הקו המשותף, מקום בפורטל anterolateral, המדיאלי כדי, בוודאי, לרוחב כדי פושט האצבעות הגיד. הערה: בעת ביצוע בפורטל anterolateral, למנוע פציעות על העצב עורית הגבי ביניים (הסניף לרוחב של שיתוק שטחי); מסיבה זו, לאחר חיתוך, העור חייב להיות במעקב על ידי עמום.</li>
		<li>בדוק את הסחוס במפרק כדי להעריך את גודל ומיקום. להעריך את מצבו ואת האיכות של הסחוס עם palpator. Osteochondral נגעים טאלוס ממוקמים בדרך כלל או posteromedially או anterolaterally.<ol>
<li>לבצע טיפול ארתרוסקופיים באמצעות arthroscopes 2.7-מ מ רחבת זווית זווית 30 מעלות צפייה, למרות כמה מנתחים להשתמש arthroscope גדול של 4 מ מ, ולשמור את המכשיר בגומחה הקדמי של המפרק. טכניקות פולשני הסחת דעת משותף, כיפוף plantar hyper יכול לשמש כדי לגשת רוב הכיפה talar.</li>
			<li>במקרה של פגיעה האחורי, במקום percutaneously מפזר Hintermann כדי להסיח את המפרק, לאפשר חשיפה של הנגע. מפזר Hintermann יש ידית הפתיחה של הזרוע שהוחלו על שני K-חוטי בעבר בכיוון של השוקה ועצם talar medially או רוחבית, לפי הצד הנגע. במקרה של פצע רוחבי, לטפל כדי להוסיף K-החוט proximal העצם בשוקה, הימנעות השוקית, כדי להשיג יותר הסחת דעת של המפרק.</li>
		</ol>
</li>
		<li>הכנת הנגע עם מגרד, הסרת את הסחוס הפגוע ולא יציב, שכבה מסויד ועצם נמק, נוקשה, המאוים על מנת ליצור בצורה רגילה הכיל הנגע עם גבולות כתפיים. בשלב זה, השתמש מגרד ארתרוסקופיים סטנדרטי (איור 4).</li>
		<li>לעורר תאי גזע של מח העצם של עצם subchondral ביצוע microperforations מביס מבחוץ הפנימי של הנגע.<ol>
<li>לבצע ניקובים עם מרווחי זמן כ 3 מ מ ביניהם. זירוז שברים מיקרוסקופיים באמצעות איסוף Chondral על עצם subchondral בריא מתחת הפגם (איור 5). הערה: דימום תת גורמת להיווצרות קריש פיברין. מוצרים, דרך הפעלת המפל דלקתיות, קרישת הדם שחרור מתווכים vasoactive, גורמי גדילה, ציטוקינים. גורמים אלה יש את הכוח כדי לעורר הפלישה וסקולרית והעברה של גזע mesenchymal לתוך החלק chondral של הנגע. אלו תאים pluripotent הם גירוי להתמיין fibroblasts, chondrocytes ותאי העצם, יש תפקיד חשוב בהגירוי של תיקון של הנגע. Paracrine גורמי גדילה בסביבה מפרקיות לקדם היווצרות של מטריצה חוץ-תאית ואת הייצור של fibrocartilage. במקביל, לייצר תאים של החלק העצם של הנגע של רקמת העצם ילדותי זה מוחלף בהדרגה על ידי עצם בוגרת.</li>
		</ol>
</li>
		<li>הסר את המים תוך-מפרקיות באמצעות מכונת הגילוח השאיפה, את הנוזל הנותר באמצעות צמר גפן ספוג עד המפרק יהיה יבש לחלוטין.</li>
	</ol></li>
	<li>הזרקת שומן-derived תאי גזע
	<ol>
<li>להזריק 5-7 מ ל נגזר שומן בתאי גזע, שהוכנו בעבר בשלב 4.1.3, לתוך המפרק הקרסול באמצעות אחד הפורטלים שני (anteromedial או anterolateral).</li>
		<li>לשחרר את חוסם העורקים.</li>
	</ol></li>
</ol>5. לאחר הניתוח טיפול
<ol><li>הימנעו מתנועות הקרסול למשך 15 יום עם האיבר המופעל בפריקה מלאה.</li>
	<li>15 ימים לאחר הניתוח, לאפשר תנועות פעיל וסביל של הקרסול, עד החלמה מלאה ואת טווח התנועה.</li>
	<li>לאפשר תשלום 30 ימים לאחר הניתוח.</li>
</ol>6. קלינית רדיוגרפי מעקב
<ol><li>הערכת חולים קלינית ו radiologically 6 ו 12 חודשים, לאחר מכן, מדי שנה. פרוטוקול מעקב מורכב AOFAS הקרסול, רגל הינד ציונים VAS כאב הציון, SF-12 בגיל16,כל15,מובילים17. רדיוגרפי בחינה כוללת של MRI ו CT-סריקה של הקרסול המופעלים.</li>
</ol>

<ol>
	<li>D'Ambrosi, R., Maccario, C., Serra, N., Liuni, F., Usuelli, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteochondral+Lesions+of+the+Talus+and+Autologous+Matrix-Induced+Chondrogenesis:+Is+Age+a+Negative+Predictor+Outcome?.">Osteochondral Lesions of the Talus and Autologous Matrix-Induced Chondrogenesis: Is Age a Negative Predictor Outcome?.</a> Arthroscopy. 33 (2), 428-435 (2017).</li><li>Becher, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T2-mapping+at+3+T+after+microfracture+in+the+treatment+of+osteochondral+defects+of+the+talus+at+an+average+follow-up+of+8+years.">T2-mapping at 3 T after microfracture in the treatment of osteochondral defects of the talus at an average follow-up of 8 years.</a> Knee Surg. SportsTraumatol. Arthrosc. 23 (8), 2406-2412 (2015).</li><li>Polat, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+results+of+microfracture+in+the+treatment+of+talus+osteochondral+lesions.">Long-term results of microfracture in the treatment of talus osteochondral lesions.</a> Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 24 (4), 1299-1303 (2016).</li><li>van Bergen, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arthroscopic+treatment+of+osteochondral+defects+of+the+talus:+outcomes+at+eight+to+twenty+years+of+follow-up.">Arthroscopic treatment of osteochondral defects of the talus: outcomes at eight to twenty years of follow-up.</a> J. Bone Joint Surg. Am. 95 (6), 519-525 (2013).</li><li>van Eekeren, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Return+to+sports+after+arthroscopic+debridement+and+bone+marrow+stimulation+of+osteochondral+talar+defects:+a+5-+to+24-year+follow-up+study.">Return to sports after arthroscopic debridement and bone marrow stimulation of osteochondral talar defects: a 5- to 24-year follow-up study.</a> Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc. 24 (4), 1311-1315 (2016).</li><li>D'Ambrosi, R., Maccario, C., Ursino, C., Serra, N., Usuelli, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+Microfractures,+Autologous+Bone+Graft,+and+Autologous+Matrix-Induced+Chondrogenesis+for+the+Treatment+of+Juvenile+Osteochondral+Talar+Lesions.">Combining Microfractures, Autologous Bone Graft, and Autologous Matrix-Induced Chondrogenesis for the Treatment of Juvenile Osteochondral Talar Lesions.</a> Foot Ankle Int. 38 (5), 485-495 (2017).</li><li>Usuelli, F. G., D'Ambrosi, R., Maccario, C., Indino, C., Manzi, L., Maffulli, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cells+in+orthopaedic+pathologies.">Adipose-derived stem cells in orthopaedic pathologies.</a> British Medical Bulletin. , (2017).</li><li>Kim, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+clinical+and+MRI+outcomes+after+mesenchymal+stem+cell+implantation+in+patients+with+knee+osteoarthritis:+a+prospective+study.">Assessment of clinical and MRI outcomes after mesenchymal stem cell implantation in patients with knee osteoarthritis: a prospective study.</a> Osteoarthr Cartilage. 24 (2), 237-245 (2016).</li><li>Koh, Y. G., Choi, Y. J., Kwon, S. K., Kim, Y. S., Yeo, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+results+and+second-look+arthroscopic+findings+after+treatment+with+adipose-derived+stem+cells+for+knee+osteoarthritis.">Clinical results and second-look arthroscopic findings after treatment with adipose-derived stem cells for knee osteoarthritis.</a> Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 23 (5), 1308-1316 (2015).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adipose+tissue+is+a+source+of+multipotent+stem+cells.">Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells.</a> Mol. Biol. Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).</li><li>Tal&#233;ns-Visconti, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+mesenchymal+stem+cells+from+adipose+tissue:+Differentiation+into+hepatic+lineage.">Human mesenchymal stem cells from adipose tissue: Differentiation into hepatic lineage.</a> Toxicol. In Vitro. 21 (2), 324-329 (2007).</li><li>Timper, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adipose+tissue-derived+mesenchymal+stem+cells+differentiate+into+insulin,+somatostatin,+and+glucagon+expressing+cells.">Human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells differentiate into insulin, somatostatin, and glucagon expressing cells.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 341 (4), 1135-1140 (2006).</li><li>Tremolada, C., Palmieri, G., Ricordi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+transplantation+and+stem+cells:+plastic+surgery+meets+regenerative+medicine.">Adipocyte transplantation and stem cells: plastic surgery meets regenerative medicine.</a> Cell. Transplant. 19 (10), 1217-1223 (2010).</li><li>Keramaris, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+progenitor+cells+(EPCs)+and+mesenchymal+stem+cells+(MSCs)+in+bone+healing.">Endothelial progenitor cells (EPCs) and mesenchymal stem cells (MSCs) in bone healing.</a> Curr. Stem Cell. Res. Ther. 7 (4), 293-301 (2012).</li><li>Leigheb, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Italian+translation,+cultural+adaptation+and+validation+of+the+American+Orthopaedic+Foot+and+Ankle+Society's+(AOFAS)+ankle-hindfoot+scale.">Italian translation, cultural adaptation and validation of the American Orthopaedic Foot and Ankle Society's (AOFAS) ankle-hindfoot scale.</a> Acta Biomed. 87 (1), 38-45 (2016).</li><li>Ware, J., Kosinski, M., Keller, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+12-Item+Short-Form+Health+Survey:+construction+of+scales+and+preliminary+tests+of+reliability+and+validity.">A 12-Item Short-Form Health Survey: construction of scales and preliminary tests of reliability and validity.</a> Med. Care. 34 (3), 220-233 (1996).</li><li>Hawker, G. A., Mian, S., Kendzerska, T., French, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measures+of+adult+pain:+Visual+Analog+Scale+for+Pain+(VAS+Pain),+Numeric+Rating+Scale+for+Pain+(NRS+Pain),+McGill+Pain+Questionnaire+(MPQ),+Short-Form+McGill+Pain+Questionnaire+(SF-MPQ),+Chronic+Pain+Grade+Scale+(CPGS),+Short+Form-36+Bodily+Pain+Scale+(SF-36+BPS),+and+Measure+of+Intermittent+and+Constant+Osteoarthritis+Pain+(ICOAP).">Measures of adult pain: Visual Analog Scale for Pain (VAS Pain), Numeric Rating Scale for Pain (NRS Pain), McGill Pain Questionnaire (MPQ), Short-Form McGill Pain Questionnaire (SF-MPQ), Chronic Pain Grade Scale (CPGS), Short Form-36 Bodily Pain Scale (SF-36 BPS), and Measure of Intermittent and Constant Osteoarthritis Pain (ICOAP).</a> Arthritis Care (Hoboken). 63, S240-S252 (2011).</li><li>Bergen, C. J., Gerards, R. M., Opdam, K. T., Terra, M. P., Kerkhoffs, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosing,+planning+and+evaluating+osteochondral+ankle+defects+with+imaging+modalities.">Diagnosing, planning and evaluating osteochondral ankle defects with imaging modalities.</a> World. J. Orthop. 6 (11), 944-953 (2015).</li><li>van Dijk, C. N., Reilingh, M. L., Zengerink, M., van Bergen, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteochondral+defects+in+the+ankle:+why+painful?.">Osteochondral defects in the ankle: why painful?.</a> Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 18 (5), 570-580 (2010).</li><li>Madry, H., van Dijk, C. N., Mueller-Gerbl, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+basic+science+of+the+subchondral+bone.">The basic science of the subchondral bone.</a> Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 18 (4), 419-433 (2010).</li><li>Mintz, D. N., Tashjian, G. S., Connell, D. A., Deland, J. T., O'Malley, M., Potter, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteochondral+lesions+of+the+talus:+a+new+magnetic+resonance+grading+system+with+arthroscopic+correlation.">Osteochondral lesions of the talus: a new magnetic resonance grading system with arthroscopic correlation.</a> Arthroscopy. 19 (4), 353-359 (2003).</li><li>Leumann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+imaging+method+for+osteochondral+lesions+of+the+talus--comparison+of+SPECT-CT+with+MRI.">A novel imaging method for osteochondral lesions of the talus--comparison of SPECT-CT with MRI.</a> Am. J. Sports Med. 39 (5), 1095-1101 (2011).</li><li>Kim, Y. S., Park, E. H., Kim, Y. C., Koh, Y. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+outcomes+of+mesenchymal+stem+cell+injection+with+arthroscopic+treatment+in+older+patients+with+osteochondral+lesions+of+the+talus.">Clinical outcomes of mesenchymal stem cell injection with arthroscopic treatment in older patients with osteochondral lesions of the talus.</a> Am. J. Sports Med. 41 (5), 1090-1099 (2013).</li><li>Kim, Y. S., Lee, H. J., Choi, Y. J., Kim, Y. I., Koh, Y. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+an+injection+of+a+stromal+vascular+fraction+containing+adipose-derived+mesenchymal+stem+cells+influence+the+outcomes+of+marrow+stimulation+in+osteochondral+lesions+of+the+talus?+A+clinical+and+magnetic+resonance+imaging+study.">Does an injection of a stromal vascular fraction containing adipose-derived mesenchymal stem cells influence the outcomes of marrow stimulation in osteochondral lesions of the talus? A clinical and magnetic resonance imaging study.</a> Am. J. Sports Med. 42 (10), 2424-2434 (2014).</li><li>Kim, Y. S., Koh, Y. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injection+of+Mesenchymal+Stem+Cells+as+a+Supplementary+Strategy+of+Marrow+Stimulation+Improves+Cartilage+Regeneration+After+Lateral+Sliding+Calcaneal+Osteotomy+for+Varus+Ankle+Osteoarthritis:+Clinical+and+Second-Look+Arthroscopic+Results.">Injection of Mesenchymal Stem Cells as a Supplementary Strategy of Marrow Stimulation Improves Cartilage Regeneration After Lateral Sliding Calcaneal Osteotomy for Varus Ankle Osteoarthritis: Clinical and Second-Look Arthroscopic Results.</a> Arthroscopy. 32 (5), 878-889 (2016).</li><li>Kim, Y. S., Lee, M., Koh, Y. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Additional+mesenchymal+stem+cell+injection+improves+the+outcomes+of+marrow+stimulation+combined+with+supramalleolar+osteotomy+in+varus+ankle+osteoarthritis:+short-term+clinical+results+with+second-look+arthroscopic+evaluation.">Additional mesenchymal stem cell injection improves the outcomes of marrow stimulation combined with supramalleolar osteotomy in varus ankle osteoarthritis: short-term clinical results with second-look arthroscopic evaluation.</a> J. Exp. Orthop. 3 (1), 12 (2016).</li><li>Hanke, C. W., Bernstein, G., Bullock, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+of+tumescent+liposuction+in+15,336+patients.+National+survey+results.">Safety of tumescent liposuction in 15,336 patients. National survey results.</a> Dermatol Surg. 21 (5), 459-462 (1995).</li><li>Illouz, Y. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+of+liposuction.">Complications of liposuction.</a> Clin Plast Surg. 33 (1), 129-163 (2006).</li><li>Dixit, V. V., Wagh, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unfavourable+outcomes+of+liposuction+and+their+management.">Unfavourable outcomes of liposuction and their management.</a> Indian J Plast Surg. 46 (2), 377-392 (2013).</li><li>Lehnhardt, M., Homann, H. H., Daigeler, A., Hauser, J., Palka, P., Steinau, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Major+and+lethal+complications+of+liposuction:+review+of+72+cases+in+Germany+between+1998+and+2002.">Major and lethal complications of liposuction: review of 72 cases in Germany between 1998 and 2002.</a> Plast Reconstr Surg. 121 (6), 396e-403e (2008).</li><li>Usuelli, F. G., de Girolamo, L., Grassi, M., D'Ambrosi, R., Montrasio, U. A., Boga, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-Arthroscopic+Autologous+Matrix-Induced+Chondrogenesis+for+the+Treatment+of+Osteochondral+Lesions+of+the+Talus.">All-Arthroscopic Autologous Matrix-Induced Chondrogenesis for the Treatment of Osteochondral Lesions of the Talus.</a> Arthrosc Tech. 4 (3), e255-e259 (2015).</li><li>Simonson, D. C., Roukis, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+of+ankle+arthroscopy+for+the+treatment+of+anterolateral+soft-tissue+impingement.">Safety of ankle arthroscopy for the treatment of anterolateral soft-tissue impingement.</a> Arthroscopy. 30 (2), 256-259 (2014).</li><li>Suzangar, M., Rosenfeld, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ankle+arthroscopy:+is+preoperative+marking+of+the+superficial+peroneal+nerve+important?.">Ankle arthroscopy: is preoperative marking of the superficial peroneal nerve important?.</a> J. Foot. Ankle Surg. 51 (2), 179-181 (2012).</li><li>Kraeutler, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Concepts+Review+Update:+Osteochondral+Lesions+of+the+Talus.">Current Concepts Review Update: Osteochondral Lesions of the Talus.</a> Foot Ankle Int. 38 (3), 331-342 (2017).</li><li>Looze, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+and+Management+of+Osteochondral+Lesions+of+the+Talus.">Evaluation and Management of Osteochondral Lesions of the Talus.</a> Cartilage. 8 (1), 19-30 (2017).</li><li>Dragoo, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Healing+full-thickness+cartilage+defects+using+adipose-derived+stem+cells.">Healing full-thickness cartilage defects using adipose-derived stem cells.</a> Tissue Eng. 13 (7), 1615-1621 (2007).</li><li>Lee, S. Y., Kim, W., Lim, C., Chung, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+Lateral+Epicondylosis+by+Using+Allogeneic+Adipose-Derived+Mesenchymal+Stem+Cells:+A+Pilot+Study.">Treatment of Lateral Epicondylosis by Using Allogeneic Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells: A Pilot Study.</a> Stem Cells. 33 (10), 2995-3005 (2015).</li><li>Feisst, V., Meidinger, S., Locke, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+bench+to+bedside:+use+of+human+adipose-derived+stem+cells.">From bench to bedside: use of human adipose-derived stem cells.</a> Stem Cells Cloning. 8, 149-162 (2015).</li></ol>

פדריקו ג'וזפה Usuelli, MD, דוחות שכר אישי של Integra ו- Geistlich, מענקים ודמי אישי מצימר, מחוץ לעבודה הועלה.

בשנים האחרונות, ניסויים פרה קליניים מתמקדת תשומת הלב שלהם על ההשפעה של ADSCs לטיפול הלקויות השונות השלד והשרירים. מטרת מאמר זה היא לתאר את פרוטוקול הטיפול של נגעים osteochondral טאלוס באמצעות microfractured ורקמת שומן מטוהרים בשיתוף עם microperforations ארתרוסקופיים. הפרוטוקול כרוך במספר שלבים קריטיים עם סיכונ?...

ארתרוסקופיה הוא תקן זהב על הטיפול של נגעים osteochondral טאלוס (OLTs) עם המטרה של הקלה בכאב, שחזור פונקציונליות ושיפור איכות החיים, במיוחד בחולים צעירים ובעלי.
כיום, ניתן לסווג טכניקות ארתרוסקופיים בשלוש דרכים. הטכניקה תיקוני מגרה תאים שמקורם במח העצם דרך הטריה microperforations ברמה של הנגע. הטכניקה שיקומיים מחליף את הנגע באמצעות של שתל אוטולוגי או heterologous ostechondral. הטכניקה משובי מנצל את היכולת של תאי multipotent כדי להבדיל וישכפלו לשחזר את רקמות שנפגעו1,2,3,4,5,6 .
בשנים האחרונות, טכניקות רגנרטיבית כבר הנושא של מחקרים במבחנה , ויוו רבים לטיפול OLTs, במיוחד בתאי גזע mesenchymal נגזר רקמת שומן (ADSCs)7,8 , 9. אלה בתאי גזע mesenchymal מייצגים מאפיינים פונקציונליים מורפולוגיים דומים לתאים אחרים multipotent, מבודד לרקמות אחרות; יש להם גם את היכולת להתמיין מספר, סלולריים שונים קווים גם בתוך vitro וגם ויוו10,11,12,13. ההתמקדות מחקר לגבי תאים אלה נובעת בעיקר לוקליזציה שלהם, למעשה הם מייצגים מ 10% 30% של משקל גוף נורמלי עם ריכוז של תאים 5,000 לגרם של רקמות13,14. מצד שני, גורם מגביל את השימוש של תאים אלה קשורה טיפול במהלך הליכי מעבדה. Lipoaspirate המכיל אגרגטים של adipocytes, סיבי קולגן ורכיבים כלי דם נורמלי מעובד enzymatically עם קולגן מסוג I A ו נתון המוליזה לפני תרבות. המטרה כאן היא לתאר את פרוטוקול הטיפול של נגעים osteochondral טאלוס באמצעות microfractured ורקמת שומן מטוהרים.

<table><tbody><tr><td>PROCESS KIT - PROCESSING KIT FOR FAT TISSUE</td><td>LIPOGEMS</td><td>LG PK 60</td><td>Lipogems Kit to obtain microfractured and purified ADSCs</td></tr><tr><td>HINTERMANN SPREADER</td><td>INTEGRA</td><td>119654</td><td>The spreader allow to access most of the talar dome, in particular in case of posterior lesion</td></tr><tr><td>CUP CURETTE</td><td>ARTHREX</td><td>AR-8655-02</td><td>To remove the damaged cartilage and necrotic and sclerotic bone</td></tr><tr><td>CHONDRAL PICK 30&amp;deg; TIP / 60&amp;deg; TIP</td><td>ARTHREX</td><td>AR-8655-05&lt;br/&gt; AR-8655-06</td><td>To perfrom microperforation at the level of the lesion, stimulating bleeding from the subchondral bone</td></tr><tr><td>SHAVER</td><td>ARTHREX</td><td>AR-7300SR</td><td>To clean the joint and aspirate water</td></tr></tbody></table>

autologous microfractured and purified adipose tissue for arthroscopic management of osteochondral lesions of the talus

בשנים האחרונות, טכניקות משובי יש כבר למד ויותר המשמשת לטיפול osteochondral נגעים טאלוס. בפרט, מספר מחקרים התמקדו את תשומת ליבם גזע mesenchymal נגזר רקמת שומן. נגזר שומן בתאי גזע (ADSCs) התערוכה מאפיינים מורפולוגיים ומאפיינים דומים לתאים אחרים mesenchymal, והם מסוגלים להתמיין מספר קווי סלולר. יתר על כן, תאים אלה זמינים גם באופן נרחב הרקמה התת עורית, המייצג 10-30% ממשקל גוף נורמלי, עם ריכוז של תאים 5,000 לגרם של רקמות.
בשיטה שהוצגו, הצעד הראשון כרוך קציר ADSCs מן הבטן ותהליך של מכניקת השבר וטיהור; בשלב הבא, הליך כירורגי מבוצעת לחלוטין arthroscopically, עם פחות לנתיחה רקמות רכות, כאחראית משותפת החלמה מהיר יותר בהשוואה נהלי פתוח. ארתרוסקופיה מאופיין על ידי השלב הראשון בו הנגע הוא מזוהה, מבודד, המוכנים microperforations; השלב השני, יבש שבוצעו, כרוך הזרקה של רקמת שומן ברמה של הנגע.
בינואר 2016 בין ספטמבר 2016, ארבעה חולים שעברו טיפול ארתרוסקופיים של הנגע osteochondral טאלוס עם microfractured, רקמת שומן מטוהרים. כל המטופלים דיווחו שיפור קליני שישה חודשים לאחר הניתוח עם לא דווח על סיבוכים. ציונים פונקציונלי-ההמשך האחרון מעודדות ואשר כי הטכניקה מספק הקלה בכאב אמין ושיפורים בחולים עם osteochondral לפצע טאלוס.

בינואר 2016 בין ספטמבר 2016, ארבעה חולים שעברו טיפול ארתרוסקופיים של הנגע osteochondral טאלוס עם microfractured, רקמת שומן מטוהרים. כל המטופלים דיווחו על שיפור קליני שישה חודשים לאחר הניתוח. תוצאות קליניות ראשוני מדווחים בטבלה1. דווח על שום סיבוכים.
<p class="jove_content" fo:keep-together.within-page...

Watch this Scientific Journal Video about Autologous Microfractured and Purified Adipose Tissue for Arthroscopic Management of Osteochondral Lesions of the Talus at JoVE.com

Autologous Microfractured and Purified Adipose Tissue for Arthroscopic Management of Osteochondral Lesions of the Talus

מטרת מחקר זה היא לדווח פרוטוקול לטיפול ארתרוסקופיים של נגעים osteochondral טאלוס באמצעות microfractured ומטוהרים נגזר שומן בתאי גזע.

Microfractured עצמיים, רקמת שומן מטוהרים לניהול ארתרוסקופיים של נגעים Osteochondral טאלוס

In recent years, regenerative techniques have been increasingly studied and used to treat osteochondral lesions of the talus. In particular, several ...

autologous-microfractured-purified-adipose-tissue-for-arthroscopic

Research

JoVE Journal

Medicine

10.2K Views.  IRCCS Istituto Ortopedico Galeazzi - C.A.S.C.O. Piede e Caviglia. מטרת מחקר זה היא לדווח פרוטוקול לטיפול ארתרוסקופיים של נגעים osteochondral טאלוס באמצעות microfractured ומטוהרים נגזר שומן בתאי גזע.

Video: Autologous Microfractured and Purified Adipose Tissue for Arthroscopic Management of Osteochondral Lesions of the Talus

Repair of a Critical-sized Calvarial Defect Model Using Adipose-derived Stromal Cells Harvested from Lipoaspirate

Craniofacial skeletal repair and regeneration offers the promise of de novo tissue formation through a cell-based approach utilizing stem cells. Adipose-derived stromal cells (ASCs) have proven to be an abundant source of multipotent stem cells capable of undergoing osteogenic, chondrogenic, adipogenic, and myogenic differentiation. Many studies have explored the osteogenic potential of these cells in vivo with the use of various scaffolding biomaterials for cellular delivery. It has been demonstrated that by utilizing an osteoconductive, hydroxyapatite-coated poly(lactic-co-glycolic acid) (HA-PLGA) scaffold seeded with ASCs, a critical-sized calvarial defect, a defect that is defined by its inability to undergo spontaneous healing over the lifetime of the animal, can be effectively show robust osseous regeneration. This in vivo model demonstrates the basis of translational approaches aimed to regenerate the bone tissue - the cellular component and biological matrix. This method serves as a model for the ultimate clinical application of a progenitor cell towards the repair of a specific tissue defect.

This protocol describes the isolation of adipose-derived stromal cells from lipoaspirate and the creation of a 4 mm critical-sized calvarial defect to evaluate skeletal regeneration.

תיקון של דגם פגם Calvarial הקריטי בגודל תאי שומן באמצעות נגזרת סטרומה נקטפו מן Lipoaspirate

Craniofacial skeletal repair and regeneration offers the promise of de novo tissue formation through a cell-based approach utilizing stem cells. ...

Treatment of Ankle Osteoarthritis with Total Ankle Replacement Through a Lateral Transfibular Approach

Total ankle replacement (TAR) is a valid option for the treatment of ankle osteoarthritis. The traditional surgical approach for TAR is the anterior approach. Recently, the lateral transfibular approach to the ankle has gained popularity since a new TAR implant was designed to be performed via this approach that results in an ideal visualization of the center of rotation of the ankle and curved resections that allow for sparing bone cuts. The aim of the present paper is to present our preoperative, operative, and postoperative protocols for the treatment of the osteoarthritis of the ankle with TAR via lateral approach. We present our preoperative clinical and radiographic protocol. In addition, we describe our surgical technique with some technical tips. Finally, we report our follow-up schedule that includes the collection of clinical, functional, and radiographic data. The results of this procedure are encouraging: TAR through a lateral transfibular approach provides reliable pain relief and improvements in functional outcomes in patients with ankle osteoarthritis.

We present our preoperative, operative, and postoperative protocols for the treatment of osteoarthritis of the ankle with total ankle replacement via lateral transfibular approach.

טיפול של דלקת מפרקים ניוונית הקרסול עם קרסול הכולל באמצעות גישה Transfibular לרוחב

Total ankle replacement (TAR) is a valid option for the treatment of ankle osteoarthritis. The traditional surgical approach for TAR is the anterior ...

Behavior

Matrix-assisted Autologous Chondrocyte Transplantation for Remodeling and Repair of Chondral Defects in a Rabbit Model

Articular cartilage defects are considered a major health problem because articular cartilage has a limited capacity for self-regeneration 1. Untreated cartilage lesions lead to ongoing pain, negatively affect the quality of life and predispose for osteoarthritis. During the last decades, several surgical techniques have been developed to treat such lesions. However, until now it was not possible to achieve a full repair in terms of covering the defect with hyaline articular cartilage or of providing satisfactory long-term recovery 2-4. Therefore, articular cartilage injuries remain a prime target for regenerative techniques such as Tissue Engineering. In contrast to other surgical techniques, which often lead to the formation of fibrous or fibrocartilaginous tissue, Tissue Engineering aims at fully restoring the complex structure and properties of the original articular cartilage by using the chondrogenic potential of transplanted cells. Recent developments opened up promising possibilities for regenerative cartilage therapies.
The first cell based approach for the treatment of full-thickness cartilage or osteochondral lesions was performed in 1994 by Lars Peterson and Mats Brittberg who pioneered clinical autologous chondrocyte implantation (ACI) 5. Today, the technique is clinically well-established for the treatment of large hyaline cartilage defects of the knee, maintaining good clinical results even 10 to 20 years after implantation 6. In recent years, the implantation of autologous chondrocytes underwent a rapid progression. The use of an artificial three-dimensional collagen-matrix on which cells are subsequently replanted became more and more popular 7-9.
MACT comprises of two surgical procedures: First, in order to collect chondrocytes, a cartilage biopsy needs to be performed from a non weight-bearing cartilage area of the knee joint. Then, chondrocytes are being extracted, purified and expanded to a sufficient cell number in vitro. Chondrocytes are then seeded onto a three-dimensional matrix and can subsequently be re-implanted. When preparing a tissue-engineered implant, proliferation rate and differentiation capacity are crucial for a successful tissue regeneration 10. The use of a three-dimensional matrix as a cell carrier is thought to support these cellular characteristics 11.
The following protocol will summarize and demonstrate a technique for the isolation of chondrocytes from cartilage biopsies, their proliferation in vitro and their seeding onto a 3D-matrix (Chondro-Gide, Geistlich Biomaterials, Wollhusen, Switzerland). Finally, the implantation of the cell-matrix-constructs into artificially created chondral defects of a rabbit's knee joint will be described. This technique can be used as an experimental setting for further experiments of cartilage repair.

An experimental technique for the treatment of chondral defects in the rabbit's knee joint is described. The implantation of autologous chondrocytes seeded on a matrix is a well-accepted method for the remodeling and repair of articular cartilage lesions providing satisfying long-term results. Matrix-assisted autologous chondrocyte transplantation (MACT) offers a standardized and clinically established implantation method.

השתלת chondrocyte אוטולוגיים מטריקס בסיוע לשיפוץ ותיקון פגמי Chondral בדגם ארנב

Articular cartilage defects are considered a major health problem because articular cartilage has a limited capacity for self-regeneration 1. Untreated ...

Treatment of Osteochondral Defects in the Rabbit's Knee Joint by Implantation of Allogeneic Mesenchymal Stem Cells in Fibrin Clots

The treatment of osteochondral articular defects has been challenging physicians for many years. The better understanding of interactions of articular cartilage and subchondral bone in recent years led to increased attention to restoration of the entire osteochondral unit. In comparison to chondral lesions the regeneration of osteochondral defects is much more complex and a far greater surgical and therapeutic challenge. The damaged tissue does not only include the superficial cartilage layer but also the subchondral bone. For deep, osteochondral damage, as it occurs for example with osteochondrosis dissecans, the full thickness of the defect needs to be replaced to restore the joint surface 1. Eligible therapeutic procedures have to consider these two different tissues with their different intrinsic healing potential 2. In the last decades, several surgical treatment options have emerged and have already been clinically established 3-6.
Autologous or allogeneic osteochondral transplants consist of articular cartilage and subchondral bone and allow the replacement of the entire osteochondral unit. The defects are filled with cylindrical osteochondral grafts that aim to provide a congruent hyaline cartilage covered surface 3,7,8. Disadvantages are the limited amount of available grafts, donor site morbidity (for autologous transplants) and the incongruence of the surface; thereby the application of this method is especially limited for large defects.
New approaches in the field of tissue engineering opened up promising possibilities for regenerative osteochondral therapy. The implantation of autologous chondrocytes marked the first cell based biological approach for the treatment of full-thickness cartilage lesions and is now worldwide established with good clinical results even 10 to 20 years after implantation 9,10. However, to date, this technique is not suitable for the treatment of all types of lesions such as deep defects involving the subchondral bone 11.
The sandwich-technique combines bone grafting with current approaches in Tissue Engineering 5,6. This combination seems to be able to overcome the limitations seen in osteochondral grafts alone. After autologous bone grafting to the subchondral defect area, a membrane seeded with autologous chondrocytes is sutured above and facilitates to match the topology of the graft with the injured site. Of course, the previous bone reconstruction needs additional surgical time and often even an additional surgery. Moreover, to date, long-term data is missing 12.
Tissue Engineering without additional bone grafting aims to restore the complex structure and properties of native articular cartilage by chondrogenic and osteogenic potential of the transplanted cells. However, again, it is usually only the cartilage tissue that is more or less regenerated. Additional osteochondral damage needs a specific further treatment. In order to achieve a regeneration of the multilayered structure of osteochondral defects, three-dimensional tissue engineered products seeded with autologous/allogeneic cells might provide a good regeneration capacity 11.
Beside autologous chondrocytes, mesenchymal stem cells (MSC) seem to be an attractive alternative for the development of a full-thickness cartilage tissue. In numerous preclinical in vitro and in vivo studies, mesenchymal stem cells have displayed excellent tissue regeneration potential 13,14. The important advantage of mesenchymal stem cells especially for the treatment of osteochondral defects is that they have the capacity to differentiate in osteocytes as well as chondrocytes. Therefore, they potentially allow a multilayered regeneration of the defect.
In recent years, several scaffolds with osteochondral regenerative potential have therefore been developed and evaluated with promising preliminary results 1,15-18. Furthermore, fibrin glue as a cell carrier became one of the preferred techniques in experimental cartilage repair and has already successfully been used in several animal studies 19-21 and even first human trials 22.
The following protocol will demonstrate an experimental technique for isolating mesenchymal stem cells from a rabbit's bone marrow, for subsequent proliferation in cell culture and for preparing a standardized in vitro-model for fibrin-cell-clots. Finally, a technique for the implantation of pre-established fibrin-cell-clots into artificial osteochondral defects of the rabbit's knee joint will be described.

An experimental technique for the treatment of osteochondral defects in the rabbit's knee joint is described. The implantation of allogeneic mesenchymal stem cells into osteochondral defects provides a promising development in the field of tissue engineering. The preparation of fibrin-cell-clots in vitro offers a standardized method for implantation.

טיפול במומי Osteochondral במפרק הברך של הארנב על ידי השתלה של תאי גזע mesenchymal אלוגנאית בקרישי הפיברין

The treatment of osteochondral articular defects has been challenging physicians for many years. The better understanding of interactions of articular ...

Surgical Retrieval, Isolation and In vitro Expansion of Human Anterior Cruciate Ligament-derived Cells for Tissue Engineering Applications

Injury to the ACL is a commonly encountered problem in active individuals. Even partial tears of this intra-articular knee ligament lead to biomechanical deficiencies that impair function and stability. Current options for the treatment of partial ACL tears range from nonoperative, conservative management to multiple surgical options, such as: thermal modification, single-bundle repair, complete reconstruction, and reconstruction of the damaged portion of the native ligament. Few studies, if any, have demonstrated any single method for management to be consistently superior, and in many cases patients continue to demonstrate persistent instability and other comorbidities.
The goal of this study is to identify a potential cell source for utilization in the development of a tissue engineered patch that could be implemented in the repair of a partially torn ACL. A novel protocol was developed for the expansion of cells derived from patients undergoing ACL reconstruction. To isolate the cells, minced hACL tissue obtained during ACL reconstruction was digested in a Collagenase solution. Expansion was performed using DMEM/F12 medium supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) and 1% penicillin/streptomycin (P/S). The cells were then stored at -80 &#186;C or in liquid nitrogen in a freezing medium consisting of DMSO, FBS and the expansion medium. After thawing, the hACL derived cells were then seeded onto a tissue engineered scaffold, PLAGA (Poly lactic-co-glycolic acid) and control Tissue culture polystyrene (TCPS). After 7 days, SEM was performed to compare cellular adhesion to the PLAGA versus the control TCPS. Cellular morphology was evaluated using immunofluorescence staining. SEM (Scanning Electron Microscope) micrographs demonstrated that cells grew and adhered on both PLAGA and TCPS surfaces and were confluent over the entire surfaces by day 7. Immunofluorescence staining showed normal, non-stressed morphological patterns on both surfaces. This technique is promising for applications in ACL regeneration and reconstruction.

Surgical Retrieval, Isolation and In vitro Expansion of Human Anterior Cruciate Ligament-derived Cells for Tissue Engineering Applications

For future applications as a patch to repair partial tears of the Anterior Cruciate Ligament (ACL), human ACL derived cells were isolated from tissue obtained during reconstructive procedures, expanded in vitro and grown on tissue engineered scaffolds. Cellular adhesion and morphology was then performed to confirm biocompatibility on scaffold surface.

אחזור כירורגי, בידוד ו<em&gt; במבחנה</em&gt; הרחבת תאים הצולבות קדמי אדם נגזרים רצועה עבור יישומי הנדסת רקמות

Injury to the ACL is a commonly encountered problem in active individuals. Even partial tears of this intra-articular knee ligament lead to biomechanical ...

Bioengineering

Application of Atomic Force Microscopy to Detect Early Osteoarthritis

Biomechanical properties of cells and tissues not only regulate their shape and function but are also crucial for maintaining their vitality. Changes in elasticity can propagate or trigger the onset of major diseases like cancer or osteoarthritis (OA). Atomic force microscopy (AFM) has emerged as a strong tool to qualitatively and quantitatively characterize the biomechanical properties of specific biological target structures on a microscopic scale, measuring forces in a range from as small as the piconewton to the micronewton. Biomechanical properties are of special importance in musculoskeletal tissues, which are subjected to high levels of strain. OA as a degenerative disease of the cartilage results in the disruption of the pericellular matrix (PCM) and the spatial rearrangement of the chondrocytes embedded in their extracellular matrix (ECM). Disruption in PCM and ECM has been associated with changes in the biomechanical properties of cartilage. In the present study we used AFM to quantify these changes in relation to the specific spatial pattern changes of the chondrocytes. With each pattern change, significant changes in elasticity were observed for both the PCM and ECM. Measuring the local elasticity thus allows for drawing direct conclusions about the degree of local tissue degeneration in OA.

We present a method to investigate early osteoarthritic changes at the cellular level in articular cartilage by using atomic force microscopy (AFM).

יישום של מיקרוסקופ כוח אטומי כדי לזהות אוסטיאוארתריטיס מוקדם

Biomechanical properties of cells and tissues not only regulate their shape and function but are also crucial for maintaining their vitality. Changes in ...

Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the knees by using different forms of mesenchymal stem cells (MSCs). In Korea, bone marrow concentrates and cord blood-derived stem cells have been approved by the Korean Food and Drug Administration (KFDA) for cartilage regeneration. In addition, an adipose tissue-derived stromal vascular fraction (SVF) has been allowed by the KFDA for joint injections in human patients. Autologous adipose tissue-derived SVF contains extracellular matrix (ECM) in addition to mesenchymal stem cells. ECM excretes various cytokines that, along with hyaluronic acid (HA) and platelet-rich plasma (PRP) activated by calcium chloride, may help MSCs to regenerate cartilage and improve knee functions. In this article, we presented a protocol to improve knee functions by regenerating cartilage-like tissue in human patients with OA. The result of the protocol was first reported in 2011 followed by a few additional publications. The protocol involves liposuction to obtain autologous lipoaspirates that are mixed with collagenase. This lipoaspirates-collagenase mixture is then cut and homogenized to remove large fibrous tissue that may clog up the needle during the injection. Afterwards, the mixture is incubated to obtain adipose tissue-derived SVF. The resulting adipose tissue-derived SVF, containing both adipose tissue-derived MSCs and remnants of ECM, is injected into knees of patients, combined with HA and calcium chloride activated PRP. Included are three cases of patients who were treated with our protocol resulting in improvement of knee pain, swelling, and range of motion along with MRI evidence of hyaline cartilage-like tissue.

Here, we present a protocol to produce an adipose tissue-derived stromal vascular fraction and its application to improve knee functions by regenerating cartilage-like tissue in human patients with osteoarthritis.

פרוטוקול קליני של ייצור רקמת שומן-Derived השבר בכלי הדם סטרומה עבור פוטנציאל התחדשות הסחוס

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the ...

<meta charset="utf8"></head><body>ניתוח מולטימודאלי של היווצרות עצם באמצעות מודלים explant

Comprehensive Characterization of Tissue Mineralization in an Ex Vivo Model

The extensive characterization of tissue mineralization in the context of bone regeneration represents a significant challenge, given the numerous modalities that are currently available for analysis. Here, we propose a workflow for a comprehensive evaluation of new bone formation using a relevant large animal osseous ex vivo explant. A bone defect (diameter = 3.75 mm; depth = 5.0 mm) is created in an explanted sheep femoral head and injected with a macroporous bone substitute loaded with a pro-osteogenic growth factor (bone morphogenetic protein 2 - BMP2). Subsequently, the explant is maintained in culture for a 28-day period, allowing cellular colonization and subsequent bone formation. To evaluate the quality and structure of newly mineralized tissue, the following successive methods are set up: (i) Characterization and high-resolution 3D images of the entire explant using micro-CT, followed by deep learning image analyses to enhance the discrimination of mineralized tissues; (ii) Nano-indentation to determine the mechanical properties of the newly formed tissue; (iii) Histological examinations, such as Hematoxylin/Eosin/Saffron (HES), Goldner's trichrome, and Movat's pentachrome to provide a qualitative assessment of mineralized tissue, particularly with regard to the visualization of the osteoid barrier and the presence of bone cells; (iv) Back-scattering scanning electron microscopy (SEM) mapping with internal reference to quantify the degree of mineralization and provide detailed insights into surface morphology, mineral composition, and bone-biomaterial interface; (v) Raman spectroscopy to characterize the molecular composition of the mineralized matrix and to provide insights into the persistence of BMP2 within the cement through the detection of peptide bonds. This multimodal analysis will provide an effective assessment of newly formed bone and comprehensive qualitative and quantitative insights into mineralized tissues. Through the standardization of these protocols, we aim to facilitate interstudy comparisons and improve the validity and reliability of research findings.

<meta charset="utf8"></head><body>מחבר זרקור: טכניקות מתקדמות לאפיון מינרליזציה של רקמות במחקר התחדשות עצם

The proposed protocol entails a global approach to assess bone formation in the context of bone regeneration using multimodal analyses. It aims to provide qualitative and quantitative information on new bone formation, enhancing the rigor and validity of basic and pre-clinical investigations.

Microfractured עצמיים, רקמת שומן מטוהרים לניהול ארתרוסקופיים של נגעים Osteochondral טאלוס

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

תיקון של דגם פגם Calvarial הקריטי בגודל תאי שומן באמצעות נגזרת סטרומה נקטפו מן Lipoaspirate

טיפול של דלקת מפרקים ניוונית הקרסול עם קרסול הכולל באמצעות גישה Transfibular לרוחב

השתלת chondrocyte אוטולוגיים מטריקס בסיוע לשיפוץ ותיקון פגמי Chondral בדגם ארנב

טיפול במומי Osteochondral במפרק הברך של הארנב על ידי השתלה של תאי גזע mesenchymal אלוגנאית בקרישי הפיברין

אחזור כירורגי, בידוד ו

יישום של מיקרוסקופ כוח אטומי כדי לזהות אוסטיאוארתריטיס מוקדם

פרוטוקול קליני של ייצור רקמת שומן-Derived השבר בכלי הדם סטרומה עבור פוטנציאל התחדשות הסחוס

אפיון מקיף של מינרליזציה של רקמות במודל Ex Vivo

אפיון מקיף של מינרליזציה של רקמות במודל Ex Vivo

אפיון מקיף של מינרליזציה של רקמות במודל Ex Vivo