שיטה זו מאפשרת הדפסה במשותף של רכיבים סינתטיים מבניים ורכיבים ביולוגיים עבור פיגומים מהונדסים ברקמות. פיגומים אלה יכולים לשכפל את סביבת הרקמה המקומית בצורה מדויקת יותר, אשר יכול להיות מועיל עבור תאים מתורבתים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא יכולה להדפיס מבנים קוליים מכניים מבלי לפגוע בחומר הביולוגי המוקפץ בתוך הפיגומים בטכניקת All-in-One להנדסת רקמות.
יש לייצר מיקרוספרות עם המטריצה הרצויה. מיקרוספרות אלה נעשו עם סחוס decellularized מגפיים אחוריות פורצ'ין. גודלם משתנה.
לעבוד עם מכונת מנופים כדי להשיג מיקרוספרות בגודל אחיד. ודא ששלושת מגשי המנזר נוקו ויובצו ביסודיות לפני השימוש. להרכיב את שייקר מנומר עם מגש רשת גדולה יותר על גבי מגש רשת קטנה באמצע.
שים את מחבת המסמן בתחתית. מניחים מיקרוספרות יבשות במגש העליון ביותר. לאחר מכן מניחים את המכסה על המגש.
מנומר גס במשך שמונה עד עשר דקות. ואז לסנון בסדר במשך שמונה עד עשר דקות. בזמן ההמתנה, לארגן נייר לשקול עבור הספירות הלוהטות.
כאשר ההתקנה הושלמה, הסר בזהירות מגש מנוון. מניחים את המגש הפוך על נייר השקילה. הקישו בעדינות על הצדדים כדי להבטיח שרוב הספירות ייפלו.
עם כל לוחות המסור מרוקנים על נייר לשקול, להשליך את הכדורים גדולים ו undersized. לתחומים הנותרים יש את הגודל הנכון לשימוש בשלבים הבאים. מניחים את הכדורים האלה לתוך צינור צנטריפוגה שכותרתו.
יש לאחסן את הצינור במקפיא של 20 מעלות עד לצורך. לשקול את החומר הדרוש כדי להפוך את החומר תריס. הפוך יחס משקל של 1 עד 4 של מיקרוספרות לאבקת פוליקפרלקטון עם לפחות 25 גרם של מיקרוספרות.
מעבירים את תערובת האבקה למיקסר מתגלגל מיניאטורי. מערבבים את האבקה ב 20 סיבובים לדקה במשך חמש דקות. לאחר חמש דקות, לעצור את הסיבוב ולהפוך את המיכל.
לאחר מכן מערבבים ב 20 סל"ד במשך חמש דקות נוספות. כדי להמשיך, לקחת את התערובת להגדרה extruder ו סליל. הגדר את extruder כך השקע שלה הוא כ 60 ס"מ מן הפנינה של סליל.
ואז בגוף חימום extruder, להיות בטוח שאין ז'קט בידוד. מניחים מאוורר שולחן עבודה בערך באמצע הדרך בין extruder ו spooler כדי לקרר את extrudate. שים מאוורר נוסף ליד ז'קט החימום כדי לקרר אותו עם אוויר הסביבה.
לאחר מכן ודא את הזרבובית הנכונה מחובר extruder ולהגדיר את טמפרטורת גוף החימום. הפעל את מאווררי הקירור ואפשר לכלי להגיע למצב יציב. לאחר 20 עד 30 דקות, לקבל את תערובת PCL מיקרוספרה ולמלא את הופר extruder.
הפעל את סליל ואת auger extruder ליזום שחול חוט. השתמש במדפים ומושך ידנית את התוויב ההבלטה הראשוני. הזן את חוט החייב לסליל התסיסה.
כפי שהוא מובלט, להתבונן את התסיסה כדי לזהות את הרכבו. לאחר זמן מה, הרכב התסיסה ייראה אחיד אשר רצוי. לעטוף את הקלטת סביב הסימן כדי לסמן את תחילתו של האזור האחיד.
מעבר לגלגיליות הסלילים, נטר את קוטר התסיסה. השתמש calipers כדי לבדוק אם הקוטר קרוב הרצוי 1.75 מ"מ. כוונן את מהירויות ההדפסה ברקע ואת מהירויות ההבלטה והטמפרטורות לפי הצורך.
כדי להתאים את קוטר חוט, תחילה לשנות את מהירויות מנגנון ההדפסה ברקע ואת extruder. אתה יכול גם לשנות את טמפרטורת extruder, אם כי זה בדרך כלל לא הכרחי. המשך למלא את הופר הבלטה עד כל אבקה משמש.
כאשר הופר הוא כמעט ריק, להוסיף אבקת PCL להופר כדי לשטוף את תערובת המיקרוספרה. נטר את הבלטה בעת הוספת אבקת PCL. בהתחלה, מיקרוספרות עדיין יהיו גלויות בבלט.
בסופו של דבר, כאשר אין יותר מיקרוספרות גלויים, להפסיק להוסיף את PCL. יש להפריד ולתייג את התווית במיקרוספרות בריכוז הרצוי. כאשר יש אבקה מינימלית בהופר, להפסיק extruding ולכבות את הציוד.
ניתן להשתמש ב- filament במדפסת מידול תצהיר מותכת סטנדרטית. טען את חוט החיים לתוך המדפסת המצויד ב חרירים בקוטר הרצוי. כאשר הדגם טעון, הגדר את הטמפרטורה והמהירות ליניארית להדפסה והתחל להפקיד את התמיסה.
התבלין המותאם אישית מופקד שכבה אחר שכבה. שימו לב במיוחד לשכבה הראשונה והתאימו את ההגדרות לפי הצורך. קשה להבחין בין שני פיגומים מודפסים תלת-ממד אלה בקנה מידה זה.
אחד יש תכלית המכילה פוליקפרלקטון, PCL בלבד. השני יש סיסם PCL עם מיקרוספרות מוטבעות של חומצה פולילקטית מטריצות decelluarized. הפיגום PCL בלבד, הנצפי באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סריקה, נראה ברובו חלק.
לעומת זאת, עבור כלים אחרים, מיקרוספרות מוטבע PCL גלויים לאורך המדגם. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור כי מעל או מיקרוספרות קטן יכול להשפיע על דינמיקת הזרימה של החומר ב extruder. מסיבה זו, הקפד להכין כראוי את המיקרוספרות שלך לפני השימוש.
על מנת למזער את הפסולת, מומלץ ליצור קבוצה אחת גדולה של תריס נדרש עבור כל הניסויים ולא ליצור אצוות קטנות בתדירות גבוהה יותר. מומחיות בייצור תריסים תגיע עם הזמן. פיגומים המיוצרים בעקבות הליך זה ניתן להעריך עוד יותר במבחנה ו vivo כדי לענות על שאלות נוספות על אינדוקציה משופרת וכוח מכני בהשוואה פיגומים ביו מודפסים אחרים.
לאחר התפתחותה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום הנדסת הרקמות לחקור אינדוקציה קונטרגנית של מטריצת חזירים נטולת קפאין בתוך פיגומים תלת-מימדיים. אל תשכח כי עבודה עם חלקיקים קטנים יכול להציג מפגעים נשימתיים. לבישת מסכת חלקיקים קטנה במהלך הליך זה מעודדת.
