تسمح هذه الطريقة بالطباعة المشتركة لكل من التركيبات التركيبية الهيكلية والمكونات البيولوجية للسقالات المهندسة للأنسجة. يمكن لهذه السقالات تكرار بيئة الأنسجة الأصلية بشكل أكثر دقة ، والتي يمكن أن تكون مفيدة للخلايا المستزرعة. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن طباعة هياكل الصوت ميكانيكيا دون إتلاف المواد البيولوجية المغلفة داخل السقالات في تقنية الكل في واحد لهندسة الأنسجة.
إنتاج microspheres مع المصفوفة المطلوبة مغلفة. وقد صنعت هذه microspheres مع غضروف decellularized من أطرافها الخلفية porcine. أنها تختلف في الحجم.
العمل مع آلة منخل للحصول على microspheres من حجم موحدة. تأكد من أن الصواني المنخلة الثلاثة قد تم تنظيفها وتجفيفها قبل الاستخدام. تجميع شاكر المنخل مع علبة شبكة أكبر على رأس وصينية شبكة أصغر في الوسط.
ضع مقلاة الغربال في الأسفل. ضع microspheres الجافة في أعلى علبة. ثم ضع الغطاء على الدرج.
منخل خشن لمدة 8 إلى 10 دقائق. ثم منخل غرامة لمدة ثماني إلى عشر دقائق. أثناء الانتظار، وترتيب ورقة وزن للمجالات منخل.
عندما يكتمل الينج، قم بإزالة صينية منخل بعناية. ضع الدرج رأسًا على ورق الوزن. الاستفادة بلطف الجانبين لضمان معظم المجالات تسقط.
مع كل من لوحات المنخل افرغت على ورقة تزن، والتخلص من المجالات المتضخم و الحجم. المجالات المتبقية لها الحجم الصحيح للاستخدام في الخطوات اللاحقة. ضع هذه المجالات في أنبوب الطرد المركزي المسمى.
تخزين الأنبوب في 20 درجة مئوية الفريزر حتى الحاجة. وزن المواد اللازمة لجعل المواد خيوط. جعل نسبة الوزن واحد إلى أربعة من microspheres لمسحوق polycaprolactone مع ما لا يقل عن 25 غراما من microspheres.
نقل خليط مسحوق إلى خلاط المتداول مصغرة. اخلطي المسحوق بمعدل 20 دوران في الدقيقة لمدة خمس دقائق. بعد خمس دقائق، إيقاف التدوير والوجه الحاوية.
ثم اخلطي 20 دورة في الدقيقة لمدة خمس دقائق إضافية. للمتابعة، خذ الخليط إلى إعداد الطارد والمجعد. إعداد الطارد حتى مأخذه حوالي 60 سم من مدخل التخزين المؤقت.
ثم في عنصر التدفئة الطارد، تأكد من عدم وجود سترة عازلة. ضع مروحة سطح المكتب في منتصف الطريق بين الطارد والمجعد لتبريد البثق. وضع مروحة أخرى بالقرب من سترة التدفئة لتبريده مع الهواء المحيط.
المقبل ضمان يتم إرفاق فوهة المناسبة إلى الطارد وتعيين درجة حرارة عنصر التدفئة. بدء تشغيل مراوح التبريد والسماح الصك للوصول إلى حالة ثابتة. بعد 20 إلى 30 دقيقة، والحصول على خليط PCL مجهري وملء النطاط الطارد.
بدوره على التخزين المؤقت وبثق البثق لبدء البثق خيوط. استخدام ملقط وسحب يدويا خيوط مقذوف الأولية. تغذية خيوط إلى التخزين المؤقت خيوط.
كما هو مقذوف، لاحظ خيوط لتحديد تكوينها. بعد بعض الوقت، سوف تظهر تركيبة خيوط موحدة وهو المطلوب. شريط التفاف حول خيوط بمناسبة بداية المنطقة موحدة.
وراء بكرات التخزين المؤقت، مراقبة قطر خيوط. استخدام الفرجار لاختبار ما إذا كان القطر قريب من 1.75 مم المطلوب. ضبط التخزين المؤقت والطارد سرعات ودرجات الحرارة حسب الضرورة.
لضبط قطر خيوط، أولاً قم بتغيير سرعات التخزين المؤقت والطارد. يمكنك أيضا تغيير درجة الحرارة الطارد، على الرغم من أن هذا عادة ما يكون غير ضروري. مواصلة إعادة ملء النطاط وقذف حتى يتم استخدام كل من مسحوق.
عندما يكون النطاط فارغًا تقريبًا ، أضف مسحوق PCL إلى النطاط لطرد خليط الغلاف الدقيق. مراقبة البثق في حين إضافة مسحوق PCL. في البداية، سوف لا تزال microspheres تكون مرئية في مقذوف.
في نهاية المطاف عندما لا يكون أكثر microspheres مرئية، والتوقف عن إضافة PCL. فصل وتسمية خيوط مع microspheres في التركيز المطلوب. عندما يكون هناك الحد الأدنى من مسحوق في النطاط، ووقف البثق وإيقاف تشغيل المعدات.
ويمكن استخدام خيوط في معيار تنصهر ترسب النمذجة الطابعة. قم بتحميل خيوط في الطابعة التي تم تركيبها مع فوهات القطر المطلوب. مع النموذج محملة، تعيين درجة الحرارة وسرعة الخطية للطباعة والبدء في إيداع خيوط.
يتم إيداع خيوط مخصصة طبقة حسب الطبقة. إيلاء اهتمام خاص للطبقة الأولى وضبط الإعدادات حسب الحاجة. من الصعب تمييز هذه السقالات المطبوعة ثلاثية الأبعاد على هذا المقياس.
واحد لديه خيوط تحتوي على البولي كاب تراكيلكتون، PCL فقط. والآخر لديه خيوط PCL مع microspheres جزءا لا يتجزأ من حمض متعدد الولاتشات والمصفوفات ديسيلوارييد. نظر باستخدام المجهر الإلكتروني المسح، سقالة PCL فقط يبدو على نحو سلس في الغالب.
وعلى النقيض من ذلك، بالنسبة للخيوط الأخرى، تظهر الميكروسفيرات المضمّنة في PCL في جميع أنحاء العينة. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن نتذكر أن أكثر من أو أصغر microspheres يمكن أن تؤثر على ديناميات تدفق المواد في الطارد. لهذا السبب، تأكد من إعداد الميكروسفيرات الخاصة بك بشكل صحيح قبل الاستخدام.
من أجل تقليل النفايات ، من المستحسن إنشاء دفعة واحدة كبيرة من خيوط المطلوبة لجميع التجارب بدلا من إنشاء دفعات أصغر بشكل أكثر تواترا. الخبرة في إنتاج خيوط سيأتي مع مرور الوقت. يمكن تقييم السقالات التي يتم إنتاجها بعد هذا الإجراء في المختبر وفي الجسم الحي للإجابة على أسئلة إضافية حول تعزيز الحث والقوة الميكانيكية مقارنة مع السقالات الأخرى المطبوعة بيولوجيا.
بعد تطورها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال هندسة الأنسجة لاستكشاف التعريفي contragenic من مصفوفة البورسين ديسيلوارييد داخل السقالات 3D. لا تنس أن العمل مع الجسيمات الصغيرة يمكن أن يمثل مخاطر الجهاز التنفسي. يتم تشجيع ارتداء قناع جسيمات صغيرة أثناء هذا الإجراء.
