שיטה פשוטה שונה להשראת אוטם שריר הלב בעכברים

דו"ח זה מציג גישה ייחודית להשראת אוטם שריר הלב בעכברים. השיטה הנוכחית קלה, חוסכת זמן, והיא משתמשת בצינורות הכירורגיים ובציוד שניתן למצוא ברוב המעבדות. הקמתם של מודלים לאוטם שריר הלב מספקת הנחת יסוד לחקר מנגנוני העבר של שיפוץ פוסט-MI, ווריאציה של טיפולים חדשניים.

החל את קרם depilatory על תיבת העכבר, ולחכות דקה אחת. לאחר מכן נגב בעדינות את קרם depilatory ואת השיער עם גזה רטובה. אבטח את העכבר על משטח ניתוח במצב שכיבה.

לחטא את אזור הניתוח כמתואר בטקסט. לאחר מכן הניחו וילון סטרילי סביב האזור המחוטא. בצע חתך עור של 0.5 ס"מ לאורך הקו המחבר בין הקסיפואיד לבית השחי, והפריד בבוטות את שרירי החזה והחזה המינוריים באמצעות מלקחיים.

פתח את החלל הבין-קוסטלי הרביעי באמצעות המוסטט מיקרו-מוסקיטו (Micro-Mosquito). להחצין את הלב על ידי דחיפתו לכיוון החלל הבין-קוסטלי הרביעי עם האצבע המורה של יד שמאל. הדקו את הלב ביד שמאל וקשרו את הענף היורד הקדמי השמאלי בתפר 6/0 שלושה מילימטרים ממוצאו.

החזירו את הלב לחלל בית החזה במהירות. יש לפנות את האוויר מחלל בית החזה על ידי לחיצה עדינה על חלל החזה. לטיפול בכאב לאחר הניתוח, יש להזריק בופרנורפין תת עורית כל ארבע עד שש שעות למשך עד שבעים ושתיים שעות לאחר הניתוח.

הניחו את העכבר על כרית חימום כדי להתאושש מההרדמה. אבטחו את העכבר שעבר המתת חסד על משטח הניתוח במצב שכיבה. בצע חתך גחוני של כשלושה עד ארבעה סנטימטרים בבטן העליונה.

חותכים את הצלעות משני צידי חלל בית החזה, ולאחר מכן להסיר את הסרעפת. לנקב את הלב עם 10 מיליליטר של קור ארבע מעלות צלזיוס 1X PBS באמצעות הזרקה תוך חדרית. לאחר מכן לאסוף את הלב על ידי חיתוך שורש אבי העורקים, ומיד לאחסן אותו ב מינוס 80 מעלות צלזיוס.

חתכו את הלב הקפוא למקטעים בעובי מילימטר אחד על קרח באמצעות סכיני גילוח. דגרו על פרוסות הלב המוכנות בתמיסת 1% TTC מומסת ב-1X PBS אחד בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 10 עד 15 דקות. לאחר מכן צלמו את הפרוסות באמצעות מצלמה דיגיטלית.

לאחר קשירת עורקים כליליים, ניתוח צביעת TTC הצביע על השראת אוטם שריר הלב מוצלחת, ושינויים זמניים בגודל הצלקת שלאחר MI. תוצאות ניתוח הישרדות הראו תמותה גלויה בתוך שבעה ימים לאחר MI בעכברים זכרים ונקבות C57BL/6J. קרע חדרי היה סיבה שכיחה למוות לאחר MI.

הערכה אקוקרדיוגרפית לאחר MI הדגימה השראות מוצלחות של תפקוד לקוי של התכווצות ועיצוב מחדש של חדרים. כאשר מנסים להחצין את הלב, אל תלחצו קודם כל על חלל החזה, ובעקבות ההתנגדות שלנו, יש צורך להתאים את הכיוון אל מול השבחים המשוקללים. לאחר הליך זה, הזרקה תוך שריר הלב של וקטורים נגיפיים או תאים יכולה להתבצע כדי לבדוק את היעילות של טיפולים גנטיים או טיפולים תאיים בענייני מחלות לב.