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A Microfluidic Device for Quantifying Bacterial Chemotaxis in Stable Concentration Gradients

Chemotaxis allows bacteria to approach sources of attractant chemicals or to avoid sources of repellent chemicals. Bacteria constantly monitor the ...

Texas A&M University

&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x662F;&#x6E10;&#x53D8;&#x7684; chemoeffector &#x5206;&#x5B50;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x591A;&#x4E2A;&#x76F8;&#x4E92;&#x7ADE;&#x4E89;&#x7684;&#x6E10;&#x53D8;&#x5F80;&#x5F80;&#x5FC5;&#x987B;&#x5171;&#x5B58;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x7684;&#x4F20;&#x7EDF;&#x529E;&#x6CD5;&#x662F;&#x6B21;&#x4F18;&#x7684;&#x91CF;&#x5316;&#x8FC1;&#x79FB;&#x6E10;&#x53D8;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x8BA2;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x7CBE;&#x786E;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6E10;&#x53D8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E;&#x8BBE;&#x5907;&#x8C03;&#x67E5;&#x5BF9;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5355;&#x72EC;&#x548C;&#x8054;&#x5408; chemoeffector &#x6E10;&#x53D8;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5C42;&#x6D41;&#x6269;&#x6563;&#x6DF7;&#x5408;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x751F;&#x6210;&#x6E10;&#x53D8;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x53CD;&#x5E94;&#x786E;&#x5B9A;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x6307;&#x51FA;&#x8BE5;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x5BF9;&#x7FA4;&#x4F53;&#x611F;&#x5E94;&#x5206;&#x5B50;&#x514B;&#x9686;-2 (AI-2&#xFF09; &#x88AB;&#x5438;&#x5F15;&#x4F46;&#x4ECE;&#x56FA;&#x5B9A;&#x76F8;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5432;&#x54DA;&#x51FB;&#x9000;&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E5F;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5BF9;&#x975B;&#x7EA2;&#x8FEA;&#x5965; (&#x5432;&#x54DA;-2&#xFF0C;3-&#x5185;&#xFF09;&#xFF0C;&#x6C27;&#x5316;&#x5432;&#x54DA;&#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x542B;&#x91CF;&#x8F83;&#x9AD8;&#x3002;&#x5BF9; AI 2 &#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x901A;&#x8FC7;&#x5728;&#x5E73;&#x7B49;&#x3001; &#x76F8;&#x4E92;&#x7ADE;&#x4E89;&#x7684;&#x6E10;&#x53D8;&#x4E2D;&#x7684;&#x5432;&#x54DA;&#x514B;&#x670D;&#x65A5;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x5F15;&#x8BF1;&#x5242;&#x548C;&#x9A71;&#x907F;&#x5242;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x80A0;&#x9053;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5B9A;&#x690D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

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Chemotaxis is the migration of cells in gradients of chemoeffector molecules. Although multiple, competing gradients must often coexist in nature, conventional approaches for investigating bacterial chemotaxis are suboptimal for quantifying migration in response to gradients of multiple signals. In this work, we developed a microfluidic device for generating precise and stable gradients of signaling molecules. We used the device to investigate the effects of individual and combined chemoeffector gradients on Escherichia coli chemotaxis. Laminar flow-based diffusive mixing was used to generate gradients, and the chemotactic responses of cells expressing green fluorescent protein were determined using fluorescence microscopy. Quantification of the migration profiles indicated that E. coli was attracted to the quorum-sensing molecule autoinducer-2 (AI-2) but was repelled from the stationary-phase signal indole. Cells also migrated toward higher concentrations of isatin (indole-2,3-dione), an oxidized derivative of indole. Attraction to AI-2 overcame repulsion by indole in equal, competing gradients. Our data suggest that concentration-dependent interactions between attractant and repellent signals may be important determinants of bacterial colonization of the gut.

Flow-based microfluidic device for quantifying bacterial chemotaxis in stable, competing gradients.

La chimiotaxie est la migration des cellules dans des gradients de mol&#xE9;cules chemoeffector. Bien que de multiples concurrents, les gradients doivent coexistent souvent dans la nature, les approches conventionnelles pour enqu&#xEA;ter sur la chimiotaxie bact&#xE9;rienne ne sont pas optimales pour quantifier la migration en r&#xE9;ponse &#xE0; des gradients de signaux multiples. Dans ce travail, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un dispositif microfluidique pour g&#xE9;n&#xE9;rer des gradients pr&#xE9;cis et stable de mol&#xE9;cules de signalisation. Nous avons utilis&#xE9; l&#x26;#39;appareil pour enqu&#xEA;ter sur les effets individuels et combin&#xE9;s de gradients chemoeffector sur la chimiotaxie Escherichia coli. &#xC0; flux laminaire &#xE0; base de m&#xE9;lange diffusif a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour g&#xE9;n&#xE9;rer des gradients, et les r&#xE9;ponses chimiotactiques de cellules exprimant la prot&#xE9;ine fluorescente verte ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;s en utilisant la microscopie &#xE0; fluorescence. La quantification des profils de migration a indiqu&#xE9; que E. coli a &#xE9;t&#xE9; attir&#xE9; par la mol&#xE9;cule quorum-sensing autoinducteur-2 (AI-2) mais a &#xE9;t&#xE9; repouss&#xE9;e de l&#x26;#39;indole signal de phase stationnaire. Cellules &#xE9;galement migr&#xE9; vers des concentrations plus &#xE9;lev&#xE9;es de l&#x26;#39;isatine (indole-2 ,3-dione), un d&#xE9;riv&#xE9; oxyd&#xE9; de l&#x26;#39;indole. Attraction pour AI-2 a surmont&#xE9; la r&#xE9;pulsion par indole dans l&#x26;#39;&#xE9;galit&#xE9;, les gradients de concurrents. Nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que la concentration-d&#xE9;pendants interactions entre les signaux attractifs et r&#xE9;pulsifs peuvent &#xEA;tre des d&#xE9;terminants importants de la colonisation bact&#xE9;rienne de l&#x26;#39;intestin.

Bas&#xE9; sur les flux dispositif microfluidique pour quantifier la chimiotaxie bact&#xE9;rienne dans stable, d&#xE9;grad&#xE9;s en comp&#xE9;tition

Chemotaxis ist die Migration von Zellen in Farbverl&auml;ufe von Chemoeffector Molek&uuml;len. Obwohl zahlreiche miteinander konkurrierende Farbverl&auml;ufe in der Natur h&auml;ufig koexistieren muss, sind konventionelle Ans&auml;tze zur Untersuchung der bakteriellen Chemotaxis suboptimale zur Quantifizierung von Migration als Reaktion auf den Steigungen von mehreren Signalen. In dieser Arbeit entwickelten wir ein mikrofluidische Ger&auml;t zur Erzeugung von pr&auml;zise und stabile Farbverl&auml;ufe Molek&uuml;le zu signalisieren. Wir haben das Ger&auml;t untersuchen die Auswirkungen einzelner und kombinierter Chemoeffector Farbverl&auml;ufe auf Escherichia coli Chemotaxis. Laminar-Flow-basierte diffusiven mischen wurde verwendet, um Farbverl&auml;ufe zu erzeugen, und die chemotaktischen Reaktionen von Zellen auszudr&uuml;cken gr&uuml;nes fluoreszierendes Protein waren entschlossen, mit Fluoreszenzmikroskopie. Quantifizierung der Migrationsprofile angegeben, dass E. Coli war angezogen, das Quorum sensing Molek&uuml;l Autoinducer-2 (AI-2) aber war abgesto&szlig;en von der station&auml;ren Phase Signal-Indol. Zellen migriert auch gegen&uuml;ber h&ouml;heren Konzentrationen von Isatin (Indol-2,3-Dione), ein oxidierte Indol-Derivat. Attraktion zu AI-2 &uuml;berwand Absto&szlig;ung von Indol in gleich, konkurrierende Farbverl&auml;ufe. Unsere Daten zeigen, dass Konzentration abh&auml;ngige Interaktionen zwischen Lockstoff und abweisend Signale wichtige Determinanten der bakterielle Besiedlung des Darms sein k&ouml;nnen.

Flussbasierte mikrofluidische Ger&auml;t zur Quantifizierung von bakteriellen Chemotaxis in stabilen, konkurrierende Farbverl&auml;ufe.

La chemiotassi &egrave; la migrazione delle cellule nelle sfumature di molecole chemoeffector. Anche se multiple, gradienti in competizione deve spesso coesistono in natura, approcci convenzionali per indagare sulla chemiotassi batterica sono ottimali per quantificare la migrazione in risposta a gradienti di pi&ugrave; segnali. In questo lavoro, abbiamo sviluppato un dispositivo microfluidici per la generazione di gradienti precisi e stabili di molecole di segnalazione. Abbiamo usato il dispositivo per investigare gli effetti delle pendenze singole e combinate chemoeffector sulla chemiotassi di Escherichia coli. Basata sul flusso laminare diffusiva miscelazione &egrave; stato utilizzato per generare le pendenze e le risposte chemiotattiche delle cellule che esprimono la proteina fluorescente verde sono state determinate mediante microscopia di fluorescenza. Quantificazione dei profili di migrazione indicato che e. coli &egrave; stato attirato verso il quorum sensing molecola autoinducer-2 (IA-2) ma fu respinto da indolo il segnale di fase stazionaria. Le cellule anche migrarono verso pi&ugrave; alte concentrazioni di isatin (indolo-2,3-dione), un derivato dell&#39;indolo ossidato. Attrazione di AI-2 ha superato la repulsione da indolo in gradienti uguali, concorrenti. I nostri dati suggeriscono che concentrazione-dipendente interazioni tra attractant e repellente segnali possono essere importanti fattori determinanti della colonizzazione batterica dell&#39;intestino.

Flow-based microfluidic dispositivo per quantificare la chemiotassi batterica in stalla, gradienti in competizione.

&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306F;chemoeffector&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x52FE;&#x914D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x7AF6;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x52FE;&#x914D;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x81EA;&#x7136;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x5171;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x52FE;&#x914D;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6B21;&#x5584;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;&#x500B;&#x3005;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;chemoeffector&#x52FE;&#x914D;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x6DF7;&#x5408;&#x5C64;&#x306F;&#x3001;&#x52FE;&#x914D;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79FB;&#x884C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x304C;&#x30AF;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30E0;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;2&#xFF08;AI-2&#xFF09;&#x306B;&#x60F9;&#x304B;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x56FA;&#x5B9A;&#x76F8;&#x4FE1;&#x53F7;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x53CD;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30A4;&#x30B5;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;-2,3  - &#x30B8;&#x30AA;&#x30F3;&#xFF09;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; AI-2&#x306E;&#x9B45;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x7B49;&#x3057;&#x3044;&#x3001;&#x7AF6;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x53CD;&#x767A;&#x529B;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x8A98;&#x5F15;&#x3084;&#x5FCC;&#x907F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x9593;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x8178;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x7AF6;&#x5408;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;

Chemotaxis &#xC140; chemoeffector &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xB97C; &#xACBD;&#xC7C1; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC790;&#xC5F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xC874; &#xC790;&#xC8FC; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC138;&#xADE0; chemotaxis &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC28;&#xC120;&#xC740;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xACE0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; chemotaxis&#xC5D0; &#xAC1C;&#xC778;&#xACFC; &#xACB0;&#xD569; chemoeffector &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C; &#xD37C;&#xC9C0;&#xB294; &#xD63C;&#xD569; &#xB958; &#xAE30;&#xBC18; &#xBC0F; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xD608; &#xC751;&#xB2F5; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC758; &#xBD80; &#xB7C9; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xCFFC;&#xB7FC; &#xC13C; &#xC2F1; &#xBD84;&#xC790; autoinducer-2 (AI-2)&#xC5D0; &#xB04C; &#xB9B0;&#xB2E4;&#xB294; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACE0;&#xC815; &#xC704;&#xC0C1; &#xC2E0;&#xD638; indole&#xC5D0;&#xC11C; &#xACA9;&#xD1F4; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; &#xC140; isatin (indole-2, 3-dione) indole&#xC758; &#xC0B0;&#xD654; &#xD30C;&#xC0DD;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xD5A5;&#xD574; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5; 2 &#xB9E4;&#xB825; indole &#xB3D9;&#xB4F1;&#xD55C; &#xACBD;&#xC7C1; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC18;&#xBC1C;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xC720;&#xC778; &#xBC0F; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; &#xC2E0;&#xD638; &#xAC04;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xC874; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC6A9;&#xAE30;&#xC758; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xACBD;&#xC7C1; &#xC548;&#xC815;, &#xC138;&#xADE0; chemotaxis &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD50C;&#xB85C;&#xC6B0; &#xAE30;&#xBC18; &#xBBF8;&#xC138; &#xC7A5;&#xCE58;.

La quimiotaxis es la migraci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas en gradientes de mol&#xE9;culas chemoeffector. A pesar de m&#xFA;ltiples gradientes, que compiten a menudo deben convivir en la naturaleza, los enfoques convencionales para la investigaci&#xF3;n de la quimiotaxis bacteriana no son &#xF3;ptimas para la cuantificaci&#xF3;n de la migraci&#xF3;n en respuesta a los gradientes de m&#xFA;ltiples se&#xF1;ales. En este trabajo, hemos desarrollado un dispositivo de microfluidos para la generaci&#xF3;n de gradientes precisos y estables de mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. Se utiliz&#xF3; el dispositivo para investigar los efectos de los gradientes chemoeffector individuales y combinados sobre la quimiotaxis de Escherichia coli. Flujo laminar basado en mezcla difusiva se utiliz&#xF3; para generar gradientes, y las respuestas quimiot&#xE1;cticas de las c&#xE9;lulas que expresan la prote&#xED;na verde fluorescente se determin&#xF3; mediante microscop&#xED;a de fluorescencia. La cuantificaci&#xF3;n de los perfiles de migraci&#xF3;n indican que la E. coli se sinti&#xF3; atra&#xED;do a la mol&#xE9;cula de detecci&#xF3;n de qu&#xF3;rum autoinductor-2 (IA-2), pero fue repelido por el indol se&#xF1;al de la fase estacionaria. Las c&#xE9;lulas tambi&#xE9;n migran hacia concentraciones m&#xE1;s altas de isatina (indol-2 ,3-diona), un derivado de indol oxidado. Atracci&#xF3;n para el AI-2 super&#xF3; la repulsi&#xF3;n por el indol en gradientes de iguales, de la competencia. Nuestros datos sugieren que la concentraci&#xF3;n que dependen de las interacciones entre las se&#xF1;ales atrayentes y repelentes pueden ser determinantes importantes de la colonizaci&#xF3;n bacteriana del intestino.

Basada en el flujo dispositivo de microfluidos para la cuantificaci&#xF3;n de la quimiotaxis bacteriana en estable, degradados en competencia

&#x8303;&#x5B89;&#x4E1C; &middot; &#x5217;&#x6587;&#x864E;&#x514B;&#x5728;&#x5341;&#x4E03;&#x4E16;&#x7EAA;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7EC6;&#x83CC;&#x52A8;&#x529B;&#x548C;&#x5A01;&#x5EC9; &middot; &#x83F2;&#x8D39;&#x5C14;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x5341;&#x4E5D;&#x4E16;&#x7EAA;&#x672B;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x3002;&#x5F88;&#x591A;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7B80;&#x8981;&#x603B;&#x7ED3;&#x4E86;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x591A;&#x5E74;&#x6765;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x548C;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x4EEC;&#x90FD;&#x4E0D;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x6EE1;&#x610F;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7AE0;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x7EC6;&#x52A0;&#x5DE5;&#x548C;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x5316;&#x9A8C;&#x3002;&#x4E0E;&#x8F7B;&#x677E;&#x53EF;&#x57F9;&#x517B;&#x548C;&#x64CD;&#x7EB5;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5982;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x6216;&#x7EA2;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (RFP) &#x63D0;&#x4F9B;&#x4FBF;&#x5229;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7528;&#x4E8E;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x9274;&#x522B;&#x5728;&#x540C;&#x4E00;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E24;&#x682A;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x73AF;&#x5883;&#x6837;&#x54C1;&#x548C;&#x6DF7;&#x5408;&#x7684;&#x83CC;&#x7FA4;&#x4E0E;&#x5149;&#x5B66;&#x8BB0;&#x5F55;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x7814;&#x7A76;&#x968F;&#x673A;&#x52A8;&#x529B;&#x3001; &#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x5F15;&#x8BF1;&#x5242;&#x6216;&#x9A71;&#x907F;&#x8D8B;&#x5316;&#x540C;&#x6837;&#x6709;&#x7528;&#x3002;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8FD8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5931;&#x53BB;&#x6216;&#x83B7;&#x5F97;&#x5355;&#x9879;&#x5316;&#x5B66;&#x54C1;&#x7684;&#x56DE;&#x5E94;&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#x5927;&#x6982;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x6765;&#x9694;&#x79BB;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x6837;&#x54C1;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x6216;&#x4E0D;&#x54CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5316;&#x5B66;&#x7269;&#x8D28;&#x6216;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x54C1;&#x3002;

&#x7EC6;&#x83CC;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

Anton van Leeuwenhoek first observed bacterial motility in the seventeenth century, and Wilhelm Pfeffer described bacterial chemotaxis in the late nineteenth century. A number of methods, briefly summarized here, have been developed over the years to quantify the motility and chemotaxis of bacteria, but none of them is totally satisfactory. In this chapter, we describe two new assays for chemotaxis that are based on microfabrication and microfluidic techniques. With easily culturable and manipulated bacteria like Escherichia coli, fluorescent labeling of the cells with green fluorescent protein (GFP) or red fluorescent protein (RFP) provides a convenient method for visualizing cells and differentiating two strains in the same experiment. The methods can be extended to environmental samples and mixed bacterial populations with suitable modifications of the optical recording system. The methods are equally useful for studying random motility, attractant chemotaxis, or repellent chemotaxis. The microfluidic system also provides a straightforward way to enrich for mutants that lose or gain responses to individual chemicals. The same approaches can presumably be used to isolate bacteria from environmental samples that respond, or do not respond, to particular chemicals or mixtures of chemicals.

Microfluidic techniques for the analysis of bacterial chemotaxis.

Anton van Leeuwenhoek observ&#xE9; pour la premi&#xE8;re motilit&#xE9; bact&#xE9;rienne dans le dix-septi&#xE8;me si&#xE8;cle, et Wilhelm Pfeffer d&#xE9;crit la chimiotaxie bact&#xE9;rienne dans la fin du XIXe si&#xE8;cle. Un certain nombre de m&#xE9;thodes, bri&#xE8;vement r&#xE9;sum&#xE9;es ici, ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9;es au fil des ans afin de quantifier la motilit&#xE9; et le chimiotactisme des bact&#xE9;ries, mais aucun d&#x26;#39;eux n&#x26;#39;est totalement satisfaisante. Dans ce chapitre, nous d&#xE9;crivons deux nouveaux tests pour le chimiotactisme qui sont bas&#xE9;s sur la microfabrication et techniques microfluidiques. Avec les bact&#xE9;ries cultivables et manipul&#xE9; facilement, comme Escherichia coli, l&#x26;#39;&#xE9;tiquetage fluorescent des cellules avec une prot&#xE9;ine fluorescente verte (GFP) ou prot&#xE9;ine fluorescente rouge (RFP) offre une m&#xE9;thode pratique pour la visualisation des cellules et la diff&#xE9;renciation des deux souches dans la m&#xEA;me exp&#xE9;rience. Les m&#xE9;thodes peuvent &#xEA;tre &#xE9;tendues &#xE0; des &#xE9;chantillons environnementaux et les populations bact&#xE9;riennes mixtes avec les modifications appropri&#xE9;es du syst&#xE8;me d&#x26;#39;enregistrement optique. Les m&#xE9;thodes sont &#xE9;galement utiles pour &#xE9;tudier la motilit&#xE9; al&#xE9;atoire, la chimiotaxie attractives, r&#xE9;pulsives ou chimiotaxie. Le syst&#xE8;me microfluidique fournit &#xE9;galement un moyen simple pour enrichir mutants qui perdent ou gagnent des r&#xE9;ponses &#xE0; des produits chimiques individuels. Les m&#xEA;mes approches peuvent sans doute &#xEA;tre utilis&#xE9; pour isoler les bact&#xE9;ries dans des &#xE9;chantillons environnementaux qui r&#xE9;pondent ou ne r&#xE9;pondent pas, &#xE0; certains produits chimiques ou des m&#xE9;langes de produits chimiques.

Techniques microfluidiques pour l&#x26;#39;analyse de la chimiotaxie bact&#xE9;rienne

Anton van Leeuwenhoek ersten beobachteten bakterielle Motilit&auml;t im siebzehnten Jahrhundert und Wilhelm Pfeffer beschrieben bakterielle Chemotaxis im sp&auml;ten neunzehnten Jahrhundert. Eine Reihe von Methoden, die hier kurz zusammengefasst wurden in den Jahren, die Motilit&auml;t und Chemotaxis von Bakterien zu quantifizieren, aber keiner von ihnen ist absolut zufrieden. In diesem Kapitel beschreiben wir zwei neue Assays f&uuml;r Chemotaxis, die auf Microfabrication und mikrofluidische Techniken basieren. Leicht kultivierbarer und manipulierten Bakterien wie Escherichia coli bietet fluoreszierende Kennzeichnung der Zellen mit gr&uuml;n fluoreszierendes Protein (GFP) oder rot fluoreszierende Protein (RFP) eine bequeme Methode zum Visualisieren von Zellen und Differenzierung von beiden Sorten im gleichen Experiment. Die Methoden k&ouml;nnen erweiterte zu &ouml;kologischen Proben und bakterielle Mestizen mit geeigneten &Auml;nderungen des Systems optische Aufnahme sein. Die Methoden eignen sich gleicherma&szlig;en f&uuml;r zuf&auml;llige Motilit&auml;t, Lockstoff Chemotaxis oder abweisend Chemotaxis zu studieren. Das Microfluidic System bietet auch eine einfache M&ouml;glichkeit f&uuml;r Mutanten zu bereichern, die verlieren oder gewinnen Antworten zu einzelnen Chemikalien. Die gleichen Ans&auml;tze k&ouml;nnen vermutlich verwendet werden, um Bakterien aus Umweltproben zu isolieren, die reagieren, oder reagieren nicht, bestimmte Chemikalien oder Mischungen von Chemikalien.

Mikrofluidische Techniken f&uuml;r die Analyse der bakteriellen Chemotaxis.

Anton van Leeuwenhoek prima osservato motilit&agrave; batterica nel XVII secolo e Wilhelm Pfeffer descritto chemiotassi batterica nel tardo XIX secolo. Un certo numero di metodi, brevemente riassunte qui, &egrave; stato sviluppato nel corso degli anni per quantificare la motilit&agrave; e la chemiotassi dei batteri, ma nessuno di loro &egrave; totalmente soddisfacente. In questo capitolo, descriveremo due nuove analisi per chemiotassi che sono basate su tecniche di microfabbricazione e microfluidica. Con batteri facilmente coltivabili e manipolati come Escherichia coli, etichettatura fluorescente delle cellule con la proteina fluorescente verde (GFP) o la proteina fluorescente rossa (RFP) fornisce un metodo conveniente per visualizzare le celle e differenziare due ceppi l&#39;esperimento stesso. I metodi possono essere campioni estesi a ambientali e popolazioni batteriche miste con adatte modifiche del sistema di registrazione ottica. I metodi sono ugualmente utili per lo studio della motilit&agrave; casuale, chemiotassi attractant o repellente chemiotassi. Il sistema microfluidico fornisce anche un modo semplice per arricchire di mutanti che perdono o guadagno risposte ai singoli prodotti chimici. Gli stessi approcci presumibilmente possono essere utilizzati per isolare i batteri dai campioni ambientali che rispondono, o non rispondono, in particolari prodotti chimici o miscele di sostanze chimiche.

Microfluidica tecniche per l&#39;analisi di chemiotassi batterica.

&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x30F3;&#xB7;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#xB7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30A6;&#x30A7;&#x30F3;&#x30D5;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306B;17&#x4E16;&#x7D00;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x3001;&#x30F4;&#x30A3;&#x30EB;&#x30D8;&#x30EB;&#x30E0;&#x30D7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;19&#x4E16;&#x7D00;&#x5F8C;&#x534A;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x307E;&#x3068;&#x3081;&#x305F;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9577;&#x5E74;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3069;&#x308C;&#x3082;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x826F;&#x597D;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x7D30;&#x52A0;&#x5DE5;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x6280;&#x8853;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#xFF08;Escherichia coli&#xFF09;&#x3001;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8D64;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x3001;&#x64CD;&#x4F5C;&#x7D30;&#x83CC;&#xFF08;RFP&#xFF09;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;2&#x3064;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4FBF;&#x5229;&#x306A;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x8A18;&#x9332;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x74B0;&#x5883;&#x8A66;&#x6599;&#x3068;&#x6DF7;&#x5408;&#x7D30;&#x83CC;&#x96C6;&#x56E3;&#x306B;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3001;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x200B;&#x200B;&#x8A98;&#x5F15;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x64A5;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7D1B;&#x5931;&#x3057;&#x305F;&#x308A;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7269;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x8C4A;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x540C;&#x3058;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x305F;&#x74B0;&#x5883;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x83CC;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5316;&#x5B66;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7269;&#x8CEA;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x306B;&#x3001;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x6280;&#x8853;

&#xC548;&#xD1A4; &#xD310; &#xB808;&#xC774;&#xC6B0;&#xC5D4;&#xD6C5; 17 &#xC138;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCC98;&#xC74C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC138;&#xADE0;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC0F; &#xBE4C;&#xD5EC;&#xB984; Pfeffer &#xC138;&#xADE0; chemotaxis 19 &#xC138;&#xAE30;&#xC758; &#xD6C4;&#xBC18;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;, &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xAC8C; &#xC694;&#xC57D; &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC0F; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; chemotaxis &#xCC99;&#xB3C4;&#xB97C; &#xC218; &#xB144;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4; &#xC911; &#xB204;&#xAD6C;&#xB3C4; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xB9CC;&#xC871;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB4A4;&#xD2C0;&#xB9BC; &#xBC0F; &#xBBF8;&#xC138; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xD55C; chemotaxis&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC124;&#xBA85;. Culturable &#xC27D;&#xACE0; &#xC870;&#xC791; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xAC19;&#xC740; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;, &#xD615;&#xAD11; &#xB77C;&#xBCA8; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP) &#xB610;&#xB294; &#xBE68;&#xAC04;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (RFP) &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC140;&#xC758; &#xC140;&#xC744; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC885;&#xC790;&#xB97C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xD3B8;&#xB9AC;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD658;&#xACBD; &#xD655;&#xC7A5;&#xB41C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBC0F; &#xD63C;&#xD569;&#xB41C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xC778;&#xAD6C; &#xAD11; &#xAE30;&#xB85D; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC218;&#xC815; &#xBC29;&#xBC95; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xB611;&#xAC19;&#xC774; &#xBB34;&#xC791;&#xC704; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, &#xC720;&#xC778; chemotaxis &#xB610;&#xB294; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; chemotaxis &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xD569; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xB294; &#xC783;&#xC744; &#xB610;&#xB294; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xD654;&#xD559; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC5BB;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD; &#xB300;&#xC751;, &#xD658;&#xACBD; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xB97C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xB610;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xD654;&#xD559; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB610;&#xB294; &#xD654;&#xD559; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBBF8;&#xC138; &#xC138;&#xADE0; chemotaxis &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAE30;&#xBC95;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Anton van Leeuwenhoek observ&#xF3; por primera vez la motilidad bacteriana en el siglo XVII, y Wilhelm Pfeffer describe la quimiotaxis bacteriana en el siglo XIX. Un n&#xFA;mero de m&#xE9;todos, resumen brevemente aqu&#xED;, se han desarrollado en los &#xFA;ltimos a&#xF1;os para cuantificar la motilidad y la quimiotaxis de las bacterias, pero ninguno de ellos es totalmente satisfactorio. En este cap&#xED;tulo, se describen dos nuevos ensayos de quimiotaxis que se basan en la microfabricaci&#xF3;n y las t&#xE9;cnicas de microflu&#xED;dica. Con las bacterias f&#xE1;cilmente cultivables y manipulada como la Escherichia coli, el etiquetado fluorescente de las c&#xE9;lulas con la prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) o la prote&#xED;na fluorescente roja (RFP) proporciona un m&#xE9;todo conveniente para la visualizaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas y la diferenciaci&#xF3;n de dos cepas en el mismo experimento. Los m&#xE9;todos se puede extender a muestras medioambientales y mixtos poblaciones bacterianas con modificaciones adecuadas del sistema de registro &#xF3;ptico. Los m&#xE9;todos son igualmente &#xFA;tiles para estudiar la motilidad azar, quimiotaxis atrayentes, repelentes o quimiotaxis. El sistema de microfluidos tambi&#xE9;n proporciona una manera f&#xE1;cil de enriquecer para los mutantes que pierden o ganan las respuestas a las sustancias qu&#xED;micas individuales. Los mismos enfoques presumiblemente se puede utilizar para aislar las bacterias a partir de muestras ambientales que responden, o no responden, a productos qu&#xED;micos o mezclas de productos qu&#xED;micos.

Las t&#xE9;cnicas de microflu&#xED;dica para el an&#xE1;lisis de la quimiotaxis bacteriana

Ni(2+) &#x548C; Co(2+) &#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x7126;&#x6CB9;&#x5316;&#x5B66;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x611F;&#x89C9;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9A71;&#x907F;&#x5242;&#x3002;Ni(2+) &#x5468;&#x8D28;&#x7684;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x59AE;&#x5361;&#xFF0C;&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x611F; Ni(2+)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x59AE;&#x5361;&#x65E2;&#x819C; NikB &#x548C; NikC &#x86CB;&#x767D; Ni(2+) &#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x9A71;&#x868A;&#x5242;&#x7684;&#x58EB; Ni(2+) &#x54CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x62D2;&#x7684;&#x58EB;&#x7684;&#x954D;&#x79BB;&#x5B50;&#x54CD;&#x5E94;&#x8981;&#x6C42; Ni2 + &#x8FD0;&#x8F93;&#x65E2;&#x5468;&#x8D28;&#x59AE;&#x5361;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

Ni(2+) and Co(2+) are sensed as repellents by the Escherichia coli Tar chemoreceptor. The periplasmic Ni(2+) binding protein, NikA, has been suggested to sense Ni(2+). We show here that neither NikA nor the membrane-bound NikB and NikC proteins of the Ni(2+) transport system are required for repellent taxis in response to Ni(2+).

Repellent taxis in response to nickel ion requires neither Ni2+ transport nor the periplasmic NikA binding protein.

Ni (2 +) et Co (2 +) sont d&#xE9;tect&#xE9;es comme r&#xE9;pulsifs par la chimior&#xE9;cepteurs Escherichia coli Tar. Le Ni p&#xE9;riplasmique (2 +) la prot&#xE9;ine de liaison, Nika, a &#xE9;t&#xE9; sugg&#xE9;r&#xE9; de Ni sens (2 +). Nous montrons ici que ni NikA ni le NikB li&#xE9;e &#xE0; la membrane et les prot&#xE9;ines de la VCIN Ni (2 +) syst&#xE8;me de transport sont n&#xE9;cessaires pour les taxis r&#xE9;pulsives en r&#xE9;ponse &#xE0; Ni (2 +).

Taxis Repellent en r&#xE9;ponse &#xE0; l&#x26;#39;ion nickel ne n&#xE9;cessite ni Ni2 + Transports, ni la prot&#xE9;ine de liaison p&#xE9;riplasmique NikA

NI(2+) und Co(2+) sind durch die Escherichia-coli-Tar-Chemorezeptor als Repellentien sp&uuml;rte. Das periplasmatischen Ni(2+) verbindliches Protein, NikA, wurde Gef&uuml;hl Ni(2+) vermutet. Wir zeigen hier, dass weder NikA noch die Membrane-springen NikB und NikC Proteine des Verkehrssystems Ni(2+) f&uuml;r abweisend Taxis als Reaktion auf Ni(2+) erforderlich sind.

Abweisend Taxis als Reaktion auf Nickel-Ionen erfordert weder Ni2 + Transport noch der periplasmatischen NikA verbindliches Protein.

NI(2+) e Co(2+) sono percepito come repellenti dalla chemoreceptor Tar di Escherichia coli. Periplasmico Ni(2+) binding protein, NikA, &egrave; stato suggerito in senso Ni(2+). Mostriamo qui che NikA n&eacute; le proteine di membrana-limiti NikB e NikC del sistema di trasporto Ni(2+) sono necessarie per i taxi repellenti in risposta a Ni(2+).

Repellente per i taxi in risposta a ioni di nichel non richiede n&eacute; Ni2 + trasporto n&eacute; la proteina periplasmica NikA.

&#x30CB;&#x30C3;&#x30B1;&#x30EB;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3068;Co&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#xFF08;Escherichia coli&#xFF09;&#x30BF;&#x30FC;&#x30EB;&#x5316;&#x5B66;&#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x3067;&#x9632;&#x866B;&#x5264;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x611F;&#x77E5;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DA;&#x30EA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;Ni&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30CB;&#x30AB;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30C3;&#x200B;&#x200B;&#x30B1;&#x30EB;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3092;&#x611F;&#x77E5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30CB;&#x30AB;&#x3082;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;NikB&#x3068;Ni&#x306E;NikC&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3082;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x8F38;&#x9001;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;Ni&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3067;&#x64A5;&#x30BF;&#x30AF;&#x30B7;&#x30FC;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30CB;&#x30C3;&#x30B1;&#x30EB;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x305F;&#x64A5;&#x30BF;&#x30AF;&#x30B7;&#x30FC;&#x306F;NI2 +&#x4EA4;&#x901A;&#x3082;&#x30DA;&#x30EA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E0;&#x30CB;&#x30AB;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x3082;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

Ni(2+)&#xC640; Co(2+) &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xD0C0;&#xB974; chemoreceptor&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; repellents&#xB85C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Periplasmic Ni(2+) &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB2C8; &#xCE74;, Ni(2+) &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC5EC;&#xAE30; &#xB2C8; &#xCE74;&#xB3C4; Ni(2+) &#xC804;&#xC1A1; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; Nikb&#xC640; NikC &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; ni(2+)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; &#xD0DD;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;.

&#xB2C8;&#xCF08; &#xC774;&#xC628;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; &#xD0DD;&#xC2DC; Ni2 + &#xC804;&#xC1A1;&#xB3C4; periplasmic &#xB2C8; &#xCE74; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Ni (2 +) y Co (2 +) se detectan como repelentes por el quimiorreceptor alquitr&#xE1;n de Escherichia coli. El Ni peripl&#xE1;smico (2 +) la prote&#xED;na de uni&#xF3;n, Nika, ha sugerido a Ni sentido (2 +). Mostramos aqu&#xED; que ni Nika ni el NikB unida a la membrana y las prote&#xED;nas de la Nikc Ni (2 +) sistema de transporte se requieren para los taxis repelentes en respuesta a Ni (2 +).

Repelente de taxis en respuesta a los iones de n&#xED;quel no requiere ni de Ni2 + transporte ni la prote&#xED;na peripl&#xE1;smica Nika Encuadernaci&#xF3;n

&#x63D2;&#x4EF6;&#x5728;&#x6C60;&#x5858;&#x548C;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x662F;&#x5F15;&#x8BF1;&#x5242;&#x3001; &#x9A71;&#x907F;&#x5242;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8D8B;&#x5316;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x65B9;&#x4FBF;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E0D;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x4FE1;&#x606F;&#x548C;&#x4E0D;&#x9002;&#x5408;&#x8C03;&#x67E5;&#x62D2;&#x7684;&#x58EB;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6D41;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF; (&#x5FAE;&#x6D41;&#x52A8;&#xFF09; &#x5B9A;&#x91CF;&#x8C03;&#x67E5;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x8BF1;&#x5242;&#x3001; &#x9A71;&#x907F;&#x5242;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x68AF;&#x5EA6;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x534F;&#x8BAE;&#x3002;&#x5FAE;&#x6D41;&#x52A8;&#x8BBE;&#x5907;&#x4F7F;&#x7528;&#x6269;&#x6563;&#x6DF7;&#x5408;&#x751F;&#x6210;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6574;&#x4E2A;&#x8D8B;&#x5EAD;&#x548C;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x68AF;&#x5EA6;&#x3002;&#x6E10;&#x53D8;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x68AF;&#x5EA6;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x5F53;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8F93;&#x5165;&#x8D8B;&#x5EAD;&#xFF0C;&#x5E76;&#x54CD;&#x5E94;&#x6E10;&#x53D8;&#x8FC1;&#x79FB;&#x76D1;&#x89C6;&#x955C; gfp &#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7ACB;&#x5373;&#x4F1A;&#x9047;&#x5230;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x68AF;&#x5EA6;&#x3002;&#x5F71;&#x54CD;&#x5FAE;&#x6D41;&#x52A8;&#x8BBE;&#x5907;-&#x7F16;&#x5199;&#x7684;&#x80FD;&#x52A8;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4EBA;&#x53E3;&#x51C6;&#x5907;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x68AF;&#x5EA6;&#x7684;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x548C;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x6E10;&#x53D8;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x7684;&#x9A71;&#x868A;&#x5242;&#x7684;&#x58EB; chemotactically &#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; NiSO(4) &#x6E10;&#x53D8;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x540C;&#x65F6;&#x7B79;&#x5907;&#x80FD;&#x52A8;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE; 1 (d) &#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x5236;&#x9020;&#x5E76;&#x5F00;&#x5C55;&#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8003;&#x8651; 4-6 (h) &#x5B8C;&#x6210;&#x3002;

&#x57FA;&#x4E8E;&#x6D41;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x5668;&#x4EF6;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;

The plug-in-pond and capillary assays are convenient methods for measuring attractant and repellent bacterial chemotaxis. However, these assays do not provide quantitative information on the extent of migration and are not well-suited for investigating repellent taxis. Here, we describe a protocol for a flow-based microfluidic system (microFlow) to quantitatively investigate chemotaxis in response to concentration gradients of attractants and repellents. The microFlow device uses diffusive mixing to generate concentration gradients that are stable throughout the chemotaxis chamber and for the duration of the experiment. The gradients may be of any desired absolute concentration and gradient strength. GFP-expressing bacteria immediately encounter a stable concentration gradient when they enter the chemotaxis chamber, and the migration in response to the gradient is monitored by microscopy. The effects of different parameters that influence the extent of migration in the microFlow device-preparation of the motile bacterial population preparation, strength of the concentration gradient and duration of exposure to the gradient-are discussed in the context of repellent taxis of chemotactically wild-type Escherichia coli cells in a gradient of NiSO(4). Fabrication of the microfluidic device takes 1 d while preparing motile cells and carrying out the chemotaxis experiment takes 4-6 h to complete.

Investigation of bacterial chemotaxis in flow-based microfluidic devices.

Les tests de plug-in-&#xE9;tang et capillaire sont des m&#xE9;thodes pratiques pour mesurer attractifs et r&#xE9;pulsifs chimiotaxie bact&#xE9;rienne. Toutefois, ces tests ne fournissent pas d&#x26;#39;informations quantitatives sur l&#x26;#39;ampleur de la migration et ne sont pas bien adapt&#xE9;s pour enqu&#xEA;ter sur les taxis r&#xE9;pulsives. Ici, nous d&#xE9;crivons un protocole pour un syst&#xE8;me bas&#xE9; sur les flux microfluidique (MicroFlow) pour enqu&#xEA;ter sur la chimiotaxie quantitativement en r&#xE9;ponse &#xE0; des gradients de concentration de attractifs et r&#xE9;pulsifs. Le dispositif utilise le m&#xE9;lange diffusif MicroFlow pour g&#xE9;n&#xE9;rer des gradients de concentration qui sont stables tout au long de la chambre de chimiotactisme et pour la dur&#xE9;e de l&#x26;#39;exp&#xE9;rience. Les gradients peuvent &#xEA;tre de toute concentration d&#xE9;sir&#xE9;e et la force absolue du gradient. GFP-exprimer les bact&#xE9;ries imm&#xE9;diatement rencontrez un gradient de concentration stable quand ils entrent dans la chambre de chimiotactisme et la migration en r&#xE9;ponse au gradient est contr&#xF4;l&#xE9;e par microscopie. Les effets de diff&#xE9;rents param&#xE8;tres qui influent sur la mesure de la migration dans le micro-dispositif de pr&#xE9;paration de la pr&#xE9;paration de la population bact&#xE9;rienne mobiles, la force du gradient de concentration et la dur&#xE9;e de l&#x26;#39;exposition &#xE0; la pente, sont discut&#xE9;s dans le contexte de taxis r&#xE9;pulsives de chimiotactique de type sauvage des cellules de E. coli dans un gradient de NiSO (4). Fabrication du dispositif microfluidique prend 1 lors de la pr&#xE9;paration d cellules mobiles et de r&#xE9;aliser l&#x26;#39;exp&#xE9;rience chimiotactisme prend 4-6 heures pour terminer.

Enqu&#xEA;te sur la chimiotaxie bact&#xE9;rienne dans les syst&#xE8;mes microfluidiques bas&#xE9;s sur

Die plug-Teich und Kapillar-Assays sind bequeme Methoden zur Messung von Lockstoff und abweisend bakterielle Chemotaxis. Jedoch diese Proben bieten keine quantitative Angaben &uuml;ber das Ausma&szlig; der Migration und eignen sich nicht f&uuml;r die Untersuchung von abweisend Taxis. Hier beschreiben wir, ein Protokoll f&uuml;r eine flussbasierte Microfluidic System (Kleinstmengen), Chemotaxis als Reaktion auf Konzentration Steigungen Lockstoffe und Repellentien quantitativ zu untersuchen. Das Kleinstmengen-Ger&auml;t verwendet diffusiven mischen, um die Konzentration Steigungen zu generieren, die stabil, w&auml;hrend die Chemotaxis-Kammer und f&uuml;r die Dauer des Experiments sind. Die Farbverl&auml;ufe k&ouml;nnen jede gew&uuml;nschte absolute Konzentration und gradient St&auml;rke sein. GFP-Ausdruck Bakterien auftreten sofort eine stabile Konzentrationsgradienten die Chemotaxis-Kammer betreten, und die Migration als Reaktion auf den Farbverlauf wird durch Mikroskopie &uuml;berwacht. Die Auswirkungen verschiedener Parameter, die das Ausma&szlig; der Migration in Kleinstmengen Ger&auml;t-Vorbereitung der st&auml;bchenf&ouml;rmiges Bakterienpopulation Zubereitung beeinflussen, diskutiert St&auml;rke des Farbverlaufs Konzentration und Dauer der Exposition gegen&uuml;ber der Farbverlauf-sind im Zusammenhang mit abweisend Taxis chemotactically Wildtyp Escherichia coli Zellen in einer Steigung von NiSO(4). Herstellung des Ger&auml;ts mikrofluidische nimmt 1D w&auml;hrend der Vorbereitung st&auml;bchenf&ouml;rmiges Zellen und Durchf&uuml;hrung des Chemotaxis-Experiments 4-6 h in Anspruch nimmt.

Untersuchung der bakteriellen Chemotaxis in flussbasierte Microfluidic Vorrichtungen.

I plug-in-stagno e capillare dosaggi sono metodi convenienti per la misura dell&#39;esca e repellente chemiotassi batterica. Tuttavia, questi dosaggi non forniscono informazioni quantitative sull&#39;entit&agrave; della migrazione e non sono adatti per indagare i taxi repellenti. Qui, descriviamo un protocollo per un sistema di microfluidica basati sul flusso (microflusso) indagare quantitativamente chemiotassi in risposta a gradienti di concentrazione di attrattivi e repellenti. Il dispositivo di microflusso utilizza diffusivo di miscelazione per generare i gradienti di concentrazione che sono stabili in tutta la camera di chemiotassi e per tutta la durata dell&#39;esperimento. I gradienti possono essere di qualsiasi concentrazione assoluta desiderata e la forza di gradiente. Batteri che esprimono GFP incontrano immediatamente un gradiente di concentrazione stabile quando entrano nella camera di chemiotassi e migrazione in risposta al gradiente &egrave; monitorata da microscopia. Gli effetti dei diversi parametri che influenzano la misura della migrazione nella microflusso dispositivo-preparazione della preparazione motili popolazione batterica, forza del gradiente di concentrazione e durata dell&#39;esposizione per il gradiente sono discusso nel contesto del repellenti taxi di chemotactically selvaggio-tipo Escherichia coli cellule in una sfumatura di NiSO(4). Fabbricazione del dispositivo microfluidico prende 1 d mentre preparano le cellule motili e svolgere l&#39;esperimento di chemiotassi prende 4-6 h per completare.

Indagine della chemiotassi batterica in dispositivi microfluidici basati sul flusso.

&#x30D7;&#x30E9;&#x30B0;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6C60;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D4;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304C;&#x8A98;&#x5F15;&#x3068;&#x5FCC;&#x907F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4FBF;&#x5229;&#x306A;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x64A5;&#x30BF;&#x30AF;&#x30B7;&#x30FC;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x8A98;&#x5F15;&#x3068;&#x5FCC;&#x907F;&#x5264;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x52FE;&#x914D;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#xFF08;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#xFF09;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5B9F;&#x9A13;&#x671F;&#x9593;&#x4E2D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x52FE;&#x914D;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x6DF7;&#x5408;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x52FE;&#x914D;&#x306F;&#x3001;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x7D76;&#x5BFE;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x52FE;&#x914D;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; GFP&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306F;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x52FE;&#x914D;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x52FE;&#x914D;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x904A;&#x8D70;&#x306F;&#x3001;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x76E3;&#x8996;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x52FE;&#x914D;&#x3068;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x671F;&#x9593;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x3001;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x52FE;&#x914D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8D70;&#x5316;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x64A5;&#x30BF;&#x30AF;&#x30B7;&#x30FC;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x8B70;&#x8AD6;NISO&#xFF08;4&#xFF09;&#x306E;&#x52FE;&#x914D;&#x3067;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x8ABF;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x304C;&#x5B8C;&#x4E86;&#x3059;&#x308B;&#x307E;&#x3067;&#x306B;4-6&#x6642;&#x9593;&#x304B;&#x304B;&#x308A;&#x884C;&#x3044;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x4F5C;&#x88FD;&#x306F;&#x3001;1 d&#x3092;&#x3068;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;

&#xD50C;&#xB7EC;&#xADF8; &#xC5F0;&#xBABB; &#xBC0F; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xC720;&#xC778; &#xBC0F; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; &#xC138;&#xADE0; chemotaxis &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD3B8;&#xB9AC;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xC815;&#xB7C9;&#xC801; &#xC778; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; &#xD0DD;&#xC2DC; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC591;&#xC801; chemotaxis attractants &#xBC0F; &#xBC29;&#xCDA9;&#xC81C;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAE30;&#xC6B8;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBBF8;&#xC138; &#xD750;&#xB984; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (microFlow)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. MicroFlow &#xC7A5;&#xCE58; chemotaxis &#xC0C1;&#xACF5; &#xC804;&#xC5ED;&#xACFC; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xAE30;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB18D;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB798;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xD37C;&#xC9C0;&#xB294; &#xD63C;&#xD569;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xC808;&#xB300; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xAC15;&#xB3C4;&#xAC00; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. GFP &#xD45C;&#xD604; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAE30;&#xC628; &#xBCC0;&#xD654;&#xB3C4; &#xC989;&#xC2DC; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; chemotaxis &#xCC54;&#xBC84;&#xB97C; &#xC785;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; microFlow &#xC7A5;&#xCE58; &#xC900;&#xBE44;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC778;&#xAD6C; &#xC900;&#xBE44;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;, &#xB18D;&#xB3C4; &#xAE30;&#xC628; &#xBCC0;&#xD654;&#xB3C4;&#xC758; &#xAC15;&#xB3C4;&#xC640; &#xAE30;&#xAC04; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xB294; &#xB178;&#xCD9C;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB17C;&#xC758; chemotactically &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; &#xD0DD;&#xC2DC;&#xC758; Niso(4)&#xC758; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xC140;. &#xBBF8;&#xC138; &#xC18C;&#xC790;&#xC758; &#xC81C;&#xC870; &#xBA54;&#xAD6C;&#xBBF8; &#xC140;&#xC744; &#xC900;&#xBE44; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; 1 &#xC77C; &#xAC78;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC644;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; 4-6 &#xC2DC;&#xAC04; &#xAC78;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4; chemotaxis &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589;.

&#xD750;&#xB984; &#xAE30;&#xBC18; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; chemotaxis &#xC870;&#xC0AC;.

Los ensayos de plug-in-estanques y capilares son m&#xE9;todos adecuados para medir la quimiotaxis bacteriana atrayente y repelente. Sin embargo, estas pruebas no proporcionan informaci&#xF3;n cuantitativa sobre la magnitud de la migraci&#xF3;n y no est&#xE1;n bien adaptadas para la investigaci&#xF3;n de los taxis repelentes. A continuaci&#xF3;n, describimos un protocolo para un sistema basado en el flujo de microfluidos (microflujo) para investigar cuantitativamente la quimiotaxis en respuesta a gradientes de concentraci&#xF3;n de atrayentes y repelentes. El dispositivo utiliza microflujo mezcla difusiva para generar gradientes de concentraci&#xF3;n que son estables a lo largo de la c&#xE1;mara de quimiotaxis y por la duraci&#xF3;n del experimento. Los gradientes pueden ser de cualquier concentraci&#xF3;n deseada absoluta y la fuerza de gradiente. GFP-expresi&#xF3;n de bacterias inmediatamente encontrar un gradiente de concentraci&#xF3;n estable cuando entran en la c&#xE1;mara de quimiotaxis y la migraci&#xF3;n en respuesta al gradiente es supervisado por microscop&#xED;a. Los efectos de diferentes par&#xE1;metros que influyen en el grado de migraci&#xF3;n en el dispositivo de microflujo-preparaci&#xF3;n de la preparaci&#xF3;n de la poblaci&#xF3;n bacteriana m&#xF3;viles, la fuerza del gradiente de concentraci&#xF3;n y duraci&#xF3;n de la exposici&#xF3;n al gradiente-se discuten en el contexto de los taxis repelentes de quimiot&#xE1;cticamente de tipo salvaje Escherichia coli c&#xE9;lulas en un gradiente de NiSO (4). La fabricaci&#xF3;n del dispositivo de microfluidos tiene una d, mientras que la preparaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas m&#xF3;viles y llevar a cabo el experimento de la quimiotaxis de toma 4.6 horas para completar.

La investigaci&#xF3;n de la quimiotaxis bacteriana en basados &#x200B;&#x200B;en los flujos de dispositivos de microflu&#xED;dica

AI-2 &#x662F;&#x7531;&#x5F88;&#x591A;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x3002;LsrB &#x5C06; AI 2 periplasm &#x4E2D;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C; Tsr &#x662F; l-&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x5316;&#x5B66;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; AI 2 &#x5F3A;&#x70C8;&#x5438;&#x5F15;&#x4E86;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x3002;LsrB &#x548C; Tsr &#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x9065;&#x611F; AI-2&#xFF0C;&#x4F46; AI 2 &#x5438;&#x6536;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x6697;&#x793A; LsrB &#x548C; Tsr &#x5728; periplasm &#x4E2D;&#x76F4;&#x63A5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

&#x8D8B;&#x5316;&#x6027; AI 2 &#x7FA4;&#x4F53;&#x611F;&#x5E94;&#x4FE1;&#x53F7;&#x9700;&#x8981; Tsr &#x5316;&#x5B66;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x548C;&#x5468;&#x8D28; LsrB AI-2 &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

AI-2 is an autoinducer made by many bacteria. LsrB binds AI-2 in the periplasm, and Tsr is the l-serine chemoreceptor. We show that AI-2 strongly attracts Escherichia coli. Both LsrB and Tsr are necessary for sensing AI-2, but AI-2 uptake is not, suggesting that LsrB and Tsr interact directly in the periplasm.

Chemotaxis to the quorum-sensing signal AI-2 requires the Tsr chemoreceptor and the periplasmic LsrB AI-2-binding protein.

AI-2 est un autoinducteur faite par de nombreuses bact&#xE9;ries. LsrB lie AI-2 dans le p&#xE9;riplasme, et de la TSR est la chimior&#xE9;cepteurs L-s&#xE9;rine. Nous montrons que l&#x26;#39;IA-2 attire fortement Escherichia coli. Les deux LsrB et Tsr sont n&#xE9;cessaires pour d&#xE9;tecter AI-2, mais AI-2 n&#x26;#39;est pas l&#x26;#39;absorption, ce qui sugg&#xE8;re que LsrB et Tsr interagir directement dans le p&#xE9;riplasme.

Chimiotactisme aux conditions de quorum-sensing Signal AI-2 N&#xE9;cessite l&#x26;#39;Chimior&#xE9;cepteur Tsr et la p&#xE9;riplasmique LsrB AI-2-La liaison aux prot&#xE9;ines

AI-2 ist ein Autoinducer von vielen Bakterien gemacht. LsrB bindet AI-2 in der Periplasm und Tsr ist die l-Serin-Chemorezeptor. Wir zeigen, dass AI-2 Escherichia coli stark anzieht. LsrB und Tsr sind notwendig zur Erfassung von AI-2, aber AI-2 Aufnahme ist nicht, was darauf hindeutet, dass LsrB und Tsr direkt in die Periplasm interagieren.

Chemotaxis auf das Quorum sensing Signal AI-2 erfordert die Tsr-Chemorezeptor und der periplasmatischen LsrB AI-2-verbindliches Protein.

IA-2 &egrave; un autoinducer fatto da molti batteri. LsrB si lega AI-2 nella periplasm, e Tsr &egrave; la chemoreceptor l-Serina. Mostriamo che IA-2 attira fortemente Escherichia coli. Tsr and LsrB sono necessari per il rilevamento di AI-2, ma AI-2 assorbimento &egrave; non, suggerendo che LsrB e Tsr interagire direttamente nel periplasm.

Chemiotassi al quorum sensing segnale AI-2 richiede la chemoreceptor Tsr e la periplasmica LsrB IA-2-proteina.

AI-2&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; LsrB&#x306F;&#x30DA;&#x30EA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;AI-2&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3001;TSR&#x306F;L-&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x5316;&#x5B66;&#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;AI-2&#x304C;&#x5F37;&#x304F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; LsrB&#x304A;&#x3088;&#x3073;TSR&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;AI-2&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;AI-2&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306F;LsrB&#x3068;TSR&#x304C;&#x30DA;&#x30EA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30AF;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30E0;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x4FE1;&#x53F7;AI-2&#x301C;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306F;&#x3001;TSR&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x53D7;&#x5BB9;&#x3068;&#x30DA;&#x30EA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E0;LsrB AI-2&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

&#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5;-2&#xB294; autoinducer &#xB9CE;&#xC740; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Lsrb&#xB294; periplasm&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5; 2 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; Tsr&#xC740; l &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; chemoreceptor. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5; 2 &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC744; &#xC720;&#xCE58; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. LsrB &#xBC0F; Tsr AI 2 &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5; 2 &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;&#xC740;, LsrB &#xBC0F; Tsr&#xB294; periplasm&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;.

&#xCFFC;&#xB7FC; &#xC13C; &#xC2F1; &#xC2E0;&#xD638; AI 2 chemotaxis Tsr chemoreceptor periplasmic LsrB AI 2 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

IA-2 es un autoinductora hecha por muchas bacterias. LsrB une AI-2 en el periplasma, y &#x200B;&#x200B;Tsr es el quimiorreceptor L-serina. Se demuestra que el AI-2 atrae fuertemente la Escherichia coli. Tanto LsrB y Tsr son necesarios para la detecci&#xF3;n de AI-2, pero el AI-2 no es absorci&#xF3;n, lo que sugiere que LsrB y Tsr interactuar directamente en el periplasma.

La quimiotaxis a la detecci&#xF3;n de qu&#xF3;rum se&#xF1;al AI-2 requiere el Quimioreceptor Tsr y el Periplasmic LsrB IA-2-La uni&#xF3;n a prote&#xED;nas

Derek L. Englert

McFerrin Department of Chemical Engineering

Texas A&M University

A Microfluidic Device for Quantifying Bacterial Chemotaxis in Stable Concentration Gradients

Derek L. Englert

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}McFerrin Department of Chemical Engineering

Texas A&M University

A Microfluidic Device for Quantifying Bacterial Chemotaxis in Stable Concentration Gradients

McFerrin Department of Chemical Engineering