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Shrinky-Dink Hanging Drops: A Simple Way to Form and Culture Embryoid Bodies

Embryoid bodies (EB) are aggregates of embryonic stem cells. The most common way of creating these aggregates is the hanging drop method, a laborious ...

University of California Merced - UC Merced

&#x6297;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF; &#xFF08;ABC&#xFF09; &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x672F;&#x8BED;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6297;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5173;&#x8054;&#x7528;&#x6570;&#x91CF;&#x8868;&#x793A;&#x8BE5;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0A;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;ABC &#x5141;&#x8BB8;&#x78C1;&#x5171;&#x8F6D;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x76EE;&#x6807;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F20;&#x6388; magnetophoretic &#x6D41;&#x52A8;&#x5BF9;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x8FD9;&#x5C06;&#x542F;&#x7528;&#x6392;&#x5E8F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C; magnetophoretic &#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684; ABC &#x503C;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x78C1;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684; ABC &#x503C;&#x662F;&#x8FDE;&#x7EED;&#x78C1;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7279;&#x522B;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7684; immunomagnetically &#x6807;&#x8BB0;&#x91CF;&#x5B50;&#x53EA;&#x662F;&#x8702;&#x7A9D;&#x6821;&#x51C6;&#x5FAE;&#x7403;&#x7684;&#x5DF2;&#x77E5; ABC &#x503C;&#x5230;&#x6D41;&#x4F53;&#x6D41;&#x7ECF;&#x56DB;&#x6781;&#x78C1;&#x5206;&#x6361;&#x673A;&#x6682;&#x505C;&#x6CE8;&#x5C04;&#x8C03;&#x67E5; ABC &#x548C;&#x78C1;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x6548;&#x7387;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x63D2;&#x5EA7;&#x6EAA;&#x6D41;&#x7684;&#x6D17;&#x8131;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x4F7F;&#x7528;&#x7D2B;&#x5916;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;&#x8868;&#x660E;&#x4F18;&#x5316;&#x5206;&#x79BB;&#x6D41;&#x52A8;&#x7387;&#x662F;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5FAE;&#x7403;&#x7684; ABC &#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7406;&#x8BBA;&#x548C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x7406;&#x8BBA;&#x6B63;&#x786E;&#x9884;&#x6D4B;&#x6700;&#x5927;&#x5206;&#x79BB;&#x6D41;&#x52A8;&#x7387;&#xFF0C;&#x4F46;&#x9AD8;&#x4F30;&#x5206;&#x79BB;&#x5C0F;&#x6570;&#x90E8;&#x5206;&#x6062;&#x590D;&#x3002;

Magnetophoretic &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FDB;&#x884C;&#x6392;&#x5E8F;&#x662F;&#x6297;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Antibody binding capacity (ABC) is a term representing a cell's ability to bind antibodies, correlating with the number of specific cellular antigens expressed on that cell. ABC allows magnetically conjugated antibodies to bind to the targeted cells, imparting a magnetophoretic mobility on each targeted cell. This enables sorting based on differences in the cell magnetophoretic mobility and, potentially, a magnetic separation based on the differences in the cell ABC values. A cell's ABC value is a particularly important factor in continuous magnetic cell separation. This work investigates the relationship between ABC and magnetic cell separation efficiency by injection of a suspension of immunomagnetically labeled quantum simply cellular calibration microbeads of known ABC values into fluid flowing through a quadrupole magnetic sorter. The elution profiles of the outlet streams were evaluated using UV detectors. Optimal separation flow rate was shown to correlate with the ABC of these microbeads. Comparing experimental and theoretical results, the theory correctly predicted maximum separation flow rates but overestimated the separation fractional recoveries.

Magnetophoretic cell sorting is a function of antibody binding capacity.

Capacit&eacute; de liaison d&#39;anticorps (ABC) est un terme qui repr&eacute;sente la capacit&eacute; de la cellule pour lier les anticorps, en corr&eacute;lation avec le nombre d&#39;antig&egrave;nes cellulaires sp&eacute;cifiques exprim&eacute;es sur cette cellule. ABC permet magn&eacute;tiquement conjugu&eacute;s anticorps se lient aux cellules cibl&eacute;es, conf&eacute;rant une mobilit&eacute; magnetophoretic sur chaque cellule cibl&eacute;e. Cette mesure de tri bas&eacute; sur des diff&eacute;rences dans la mobilit&eacute; de la cellule magnetophoretic et, &eacute;ventuellement, une s&eacute;paration magn&eacute;tique bas&eacute; sur les diff&eacute;rences dans les valeurs de cellule ABC. Une valeur de cellule ABC est un facteur particuli&egrave;rement important dans la s&eacute;paration de la cellule magn&eacute;tique continue. Cet ouvrage &eacute;tudie la relation entre ABC et l&#39;efficacit&eacute; de s&eacute;paration des cellules magn&eacute;tiques par injection d&#39;une suspension d&#39;immunomagnetically &eacute;tiquet&eacute; microbilles &eacute;talonnage simplement cellulaire quantique des valeurs connues de ABC dans le fluide circulant dans un trieur magn&eacute;tique quadripolaire. Les profils d&#39;&eacute;lution de l&#39;&eacute;missaires ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;s &agrave; l&#39;aide de d&eacute;tecteurs UV. D&eacute;bit optimal de s&eacute;paration s&#39;est av&eacute;r&eacute; en corr&eacute;lation avec l&#39;ABC de ces microbilles. Comparaison des r&eacute;sultats exp&eacute;rimentaux et th&eacute;oriques, la th&eacute;orie correctement pr&eacute;dit les d&eacute;bits maximum de s&eacute;paration mais surestim&eacute; les r&eacute;cup&eacute;rations fractionnaire de s&eacute;paration.

Magnetophoretic cellule tri est fonction de la capacit&eacute; de liaison d&#39;anticorps.

Magnetophoretic Zellsortierung ist eine Funktion der Antik&#xF6;rperbindungskapazit&#xE4;t.

Capacit&agrave; di legame dell&#39;anticorpo (ABC) &egrave; un termine che rappresenta la capacit&agrave; di una cellula di legare gli anticorpi, correlazione con il numero di antigeni cellulari specifici espressi su tale cella. ABC permette anticorpi magneticamente coniugati di legarsi alle cellule bersaglio, impartendo una mobilit&agrave; magnetophoretic su ogni cella mirato. In questo modo l&#39;ordinamento basato su differenze di mobilit&agrave; magnetophoretic cella e, potenzialmente, una separazione magnetica basato sulle differenze nei valori di cella ABC. Valore di una cella ABC &egrave; un fattore particolarmente importante nella separazione cellulare magnetico continuo. Questo lavoro indaga il rapporto tra ABC e l&#39;efficienza di separazione magnetica delle cellule tramite l&#39;iniezione di una sospensione di immunomagnetically etichettati quantum calibrazione semplicemente cellulare microsfere di valori noti di ABC nel fluido che scorre attraverso una quadrupolo magnetico selezionatrice. I profili di eluizione dei flussi di uscita sono stati valutati utilizzando rivelatori UV. Portata ottimale separazione &egrave; stato mostrato per correlare con l&#39;ABC di queste microsfere. Confronto tra risultati sperimentali e teorici, la teoria correttamente predetto tassi di flusso massima separazione ma sopravvalutato i recuperi di separazione frazionata.

Ordinamento delle cellule Magnetophoretic &egrave; una funzione della capacit&agrave; di legame dell&#39;anticorpo.

&#x6297;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF; (ABC) &#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x7279;&#x5B9A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x6570;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x7528;&#x8A9E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;ABC &#x306F;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x5F79;&#x6297;&#x4F53; magnetophoretic &#x30E2;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x5404;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x4ED8;&#x4E0E;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x643A;&#x5E2F; magnetophoretic &#x30E2;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3068;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x3001;ABC &#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x5024;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x78C1;&#x6C17;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E; ABC &#x5024;&#x9023;&#x7D9A;&#x78C1;&#x6C17;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x96E2;&#x3067;&#x7279;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x6D41;&#x4F53;&#x56DB;&#x91CD;&#x6975;&#x78C1;&#x529B;&#x9078;&#x5225;&#x6A5F;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x6D41;&#x308C;&#x308B;&#x306B;&#x91CF;&#x5B50;&#x5358;&#x7D30;&#x80DE;&#x6821;&#x6B63;&#x3055;&#x308F;&#x308A;&#x5FC3;&#x5730; ABC &#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x5024;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4ED8;&#x3044;&#x305F; immunomagnetically &#x306E;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; ABC &#x3068;&#x78C1;&#x6C17;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x96E2;&#x52B9;&#x7387;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6EB6;&#x51FA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB; UV &#x691C;&#x51FA;&#x5668;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;.&#x6700;&#x9069;&#x5206;&#x96E2;&#x6D41;&#x91CF;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E; ABC &#x3068;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x7406;&#x8AD6;&#x304C;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x6700;&#x5927;&#x5206;&#x96E2;&#x6D41;&#x91CF;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5206;&#x96E2;&#x5206;&#x5225;&#x56DE;&#x53CE;&#x7387;&#x904E;&#x5927;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3002;

Magnetophoretic &#x30BB;&#x30EB;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x6297;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xD56D; &#xCCB4; &#xC758;&#xBB34; &#xC218; &#xC6A9;&#xB7C9; (ABC)&#xB294; &#xD56D; &#xCCB4;&#xACFC; &#xD574;&#xB2F9; &#xC140;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC218;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC140;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC6A9;&#xC5B4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. ABC &#xAC01; &#xB300;&#xC0C1;&#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; magnetophoretic &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; &#xBD80;&#xC5EC; &#xC790;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC6A9;&#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xAC00; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xB82C; &#xC140; magnetophoretic &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; &#xBC0F; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC140; ABC &#xAC12;&#xC758; &#xCC28;&#xC774;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC790;&#xAE30; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC758; &#xCC28;&#xC774;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140;&#xC758; ABC &#xAC12;&#xC740; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xC790;&#xAE30; &#xC140; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xD788; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488; quadrupole &#xC790;&#xAE30; &#xC815;&#xB82C; &#xD750;&#xB974;&#xB294; &#xC720;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; ABC &#xAC12;&#xC758; &#xC591;&#xC790; &#xB2E8;&#xC21C;&#xD788; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xAD50;&#xC815; microbeads &#xB77C;&#xB294; immunomagnetically&#xC758; &#xC11C; &#xC2A4; &#xD39C; &#xC158;&#xC758;&#xB97C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; ABC&#xC640; &#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xD2F1; &#xC140; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC;. &#xCF58;&#xC13C;&#xD2B8; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC;&#xC758; &#xCC28;&#xC785; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; UV &#xAC80;&#xCD9C;&#xAE30;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC720;&#xB7C9;&#xC774;&#xC774; microbeads&#xC758; ABC&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xD5D8;&#xACFC; &#xC774;&#xB860; &#xACB0;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xC774;&#xB860; &#xC62C;&#xBC14;&#xB974;&#xAC8C; &#xCD5C;&#xB300; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD750;&#xB984; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBD80;&#xBD84; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB97C;&#xACFC; &#xB300; &#xD3C9;&#xAC00;.

Magnetophoretic &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD56D; &#xCCB4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Capacidad de uni&oacute;n del anticuerpo (ABC) es un t&eacute;rmino que representa la capacidad de una c&eacute;lula anticuerpos, la correlaci&oacute;n con el n&uacute;mero de ant&iacute;genos celulares espec&iacute;ficos expresados en esa celda. ABC permite magn&eacute;ticamente conjugados anticuerpos enlazar a las c&eacute;lulas apuntadas, impartiendo una movilidad magnetofor&eacute;ticos en cada c&eacute;lula espec&iacute;fica. Esto permite clasificar basados en diferencias en la movilidad de la magnetofor&eacute;ticos de la c&eacute;lula y, potencialmente, una separaci&oacute;n magn&eacute;tica basada en las diferencias en los valores de ABC de la c&eacute;lula. Valor de una celda ABC es un factor particularmente importante en la separaci&oacute;n de la c&eacute;lula magn&eacute;tico continua. Este trabajo investiga la relaci&oacute;n entre ABC y eficacia de la separaci&oacute;n magn&eacute;tica de la c&eacute;lula por la inyecci&oacute;n de una suspensi&oacute;n de immunomagnetically con la etiqueta cu&aacute;ntica simplemente celular calibraci&oacute;n microesferas de valores conocidos de ABC en l&iacute;quido que fluye a trav&eacute;s de un clasificador de cuadrupolo magn&eacute;tico. Los perfiles de eluci&oacute;n de las corrientes de salida fueron evaluados usando detectores de UV. Caudal de separaci&oacute;n &oacute;ptima mostr&oacute; correlaci&oacute;n con el ABC de estas microesferas. Comparar los resultados experimentales y te&oacute;ricos, la teor&iacute;a correctamente predijo caudales de separaci&oacute;n m&aacute;xima pero hab&iacute;a sobreestimado las recuperaciones fraccional de separaci&oacute;n.

Magnetofor&eacute;ticos separaci&oacute;n celular depende de la capacidad de uni&oacute;n del anticuerpo.

&#x78C1;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x975E;&#x5E38;&#x6D41;&#x884C;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E30;&#x5BCC;&#x6216;&#x8017;&#x5C3D;&#x5F02;&#x6784;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4ECE;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x78C1;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x65B9;&#x9762;&#x662F;&#x5BF9;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x987A;&#x78C1;&#x6750;&#x6599;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x6B64;&#x4F20;&#x6388;&#x79EF;&#x6781; magnetophoretic &#x79FB;&#x52A8;&#x5230;&#x76EE;&#x6807;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4F7F;&#x6709;&#x6548;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x987A;&#x78C1;&#x6750;&#x6599;&#x3002;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5B8C;&#x6210;&#x7684;&#x6570;&#x5B66;&#x5173;&#x7CFB;&#x5173;&#x8054;&#x78C1;&#x6027;&#x6807;&#x7B7E;&#x5230;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E3A; immunomagnetically &#x7684; magnetophoretic &#x6D41;&#x52A8;&#x3002;&#x56DB;&#x4E2A;&#x53C2;&#x6570;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x5355;&#x5143;&#x683C; immunomagnetically magnetophoretic &#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#xFF1A; &#x6297;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x80FD;&#x529B; &#xFF08;ABC&#xFF09; &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4EBA;&#x53E3;&#xFF0C;&#x4E8C;&#x7EA7;&#x6297;&#x4F53;&#x653E;&#x5927; &#xFF08;psi&#xFF09;&#xFF0C;&#x7C92;&#x5B50;&#x78C1;&#x573A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53C2;&#x6570; &#xFF08;DeltachiV(m)) &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F4;&#x5F84; &#xFF08;D(c))&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x53D6;&#x503C;&#x8303;&#x56F4;&#x8BA1;&#x7B97;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4EA4;&#x53C2;&#x6570;&#x5982;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD; magnetophoretic &#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x6700;&#x5C0F;&#x548C;&#x6700;&#x5927;&#x8303;&#x56F4;&#x3002;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x4E86;&#x89E3;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53C2;&#x6570;&#x5141;&#x8BB8;&#x7EC6;&#x80DE; magnetophoretic &#x601C;&#x9884;&#x6D4B;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x63A7;&#x5236;&#x901A;&#x8FC7;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x79FB;&#x52A8;&#x548C;&#x78C1;&#x6027;&#x7C92;&#x5B50;&#x5171;&#x8F6D;&#x3002;

&#x78C1;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#xFF1A; magnetophoretic &#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

Magnetic cell separation has become a popular technique to enrich or deplete cells of interest from a heterogeneous cell population. One important aspect of magnetic cell separation is the degree to which a cell binds paramagnetic material. It is this paramagnetic material that imparts a positive magnetophoretic mobility to the target cell, thus allowing effective cell separation. A mathematical relationship has been developed to correlate magnetic labeling to the magnetophoretic mobility of an immunomagnetically labeled cell. Four parameters have been identified that significantly affect magnetophoretic mobility of an immunomagnetically labeled cell: the antibody binding capacity (ABC) of a cell population, the secondary antibody amplification (psi), the particle-magnetic field interaction parameter (DeltachiV(m)), and the cell diameter (D(c)). The ranges of these parameters are calculated and presented along with how the parameters affect the minimum and maximum range of magnetophoretic mobility. A detailed understanding of these parameters allows predictions of cellular magnetophoretic mobilities and provides control of cell mobility through selection of antibodies and magnetic particle conjugates.

Magnetic cell separation: characterization of magnetophoretic mobility.

La s&eacute;paration des cellules magn&eacute;tiques est devenu une technique populaire pour enrichir ou appauvrir les cellules d&#39;int&eacute;r&ecirc;t d&#39;une population h&eacute;t&eacute;rog&egrave;ne de cellules. Un aspect important de la s&eacute;paration de la cellule magn&eacute;tique est le degr&eacute; auquel une cellule li&eacute;e mat&eacute;riau paramagn&eacute;tique. C&#39;est ce mat&eacute;riau paramagn&eacute;tique qui conf&egrave;re une mobilit&eacute; magnetophoretic positif &agrave; la cellule cible, ce qui permet la s&eacute;paration des cellules efficaces. Une relation math&eacute;matique a &eacute;t&eacute; &eacute;labor&eacute;e pour mettre en corr&eacute;lation le marquage &agrave; la mobilit&eacute; magnetophoretic d&#39;une immunomagnetically intitul&eacute;e cellule magn&eacute;tique. Quatre param&egrave;tres ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s qui affectent significativement mobilit&eacute; magnetophoretic d&#39;une immunomagnetically marqu&eacute;e des cellules : la capacit&eacute; de liaison d&#39;anticorps (ABC) d&#39;une population de cellules, l&#39;amplification de l&#39;anticorps secondaire (lb/po2), le param&egrave;tre d&#39;interaction de champ magn&eacute;tique de particules (DeltachiV(m)) et le diam&egrave;tre de la cellule (D(c)). Les plages de ces param&egrave;tres sont calcul&eacute;s et pr&eacute;sent&eacute;s avec comment les param&egrave;tres affectent la plage minimale et maximale de la mobilit&eacute; magnetophoretic. Une compr&eacute;hension d&eacute;taill&eacute;e de ces param&egrave;tres permet des pr&eacute;dictions des mobilit&eacute;s de magnetophoretic cellulaire et permet un contr&ocirc;le de la mobilit&eacute; de la cellule par le biais de s&eacute;lection d&#39;anticorps et les conjugu&eacute;s de particules magn&eacute;tiques.

La s&eacute;paration des cellules magn&eacute;tiques : caract&eacute;risation de la mobilit&eacute; magnetophoretic.

Magnetische Zellseparation: Charakterisierung von magnetophoretic Mobilit&#xE4;t.

Separazione magnetica delle cellule &egrave; diventata una tecnica popolare per arricchire o impoverire le celle di interesse da parte di una popolazione cellulare eterogenea. Un aspetto importante della separazione magnetica delle cellule &egrave; il grado a cui una cellula si associa materiale paramagnetico. &Egrave; questo materiale paramagnetico che impartisce una mobilit&agrave; magnetophoretic positivo alla cellula bersaglio, permettendo cos&igrave; la separazione effettiva delle cellule. Una relazione matematica &egrave; stata sviluppata per correlare magnetico etichettatura alla mobilit&agrave; magnetophoretic di un immunomagnetically con etichettati cell. Sono stati identificati quattro parametri che influenzano in modo significativo la mobilit&agrave; magnetophoretic di un immunomagnetically con etichettati cell: capacit&agrave; di legare l&#39;anticorpo (ABC) di una popolazione di cellule, l&#39;amplificazione di anticorpo secondario (psi), il parametro di interazione delle particelle magnetiche campo (DeltachiV(m)) e il diametro delle cellule (D(c)). Le gamme di questi parametri sono calcolate e presentate insieme come i parametri influenzano l&#39;intervallo minimo e massimo di mobilit&agrave; magnetophoretic. Una dettagliata comprensione di questi parametri permette di previsioni di mobilit&agrave; magnetophoretic cellulare e fornisce il controllo della mobilit&agrave; delle cellule attraverso la selezione di anticorpi e coniuga la particella magnetica.

Separazione magnetica delle cellule: caratterizzazione della mobilit&agrave; magnetophoretic.

&#x78C1;&#x6C17;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x96E2;&#x8C4A;&#x304B;&#x306B;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x7570;&#x7A2E;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8208;&#x5473;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x624B;&#x6CD5;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x78C1;&#x6C17;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x96E2;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x304C;&#x5E38;&#x78C1;&#x6027;&#x6750;&#x6599;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x96E2;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30BB;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x80AF;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A; magnetophoretic &#x306E;&#x30E2;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x5E38;&#x78C1;&#x6027;&#x6750;&#x6599;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F; immunomagnetically &#x3078; magnetophoretic &#x306E;&#x30E2;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x78C1;&#x6C17;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x6570;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x95A2;&#x4FC2;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;4 &#x3064;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F; immunomagnetically &#x306E; magnetophoretic &#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;: &#x6297;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x80FD; &#xFF08;ABC&#xFF09; &#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x6B21;&#x6297;&#x4F53;&#x5897;&#x5E45; (psi) &#x7C92;&#x5B50;&#x78C1;&#x6C17;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#xFF08;DeltachiV(m))&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BB;&#x30EB;&#x5F84; &#xFF08;D(c))&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x8A08;&#x7B97;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; magnetophoretic &#x306E;&#x30E2;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x6700;&#x5C0F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6700;&#x5927;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30FC; magnetophoretic &#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3057;&#x3001;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB; &#x30E2;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x3001;&#x78C1;&#x6027;&#x7C92;&#x5B50;&#x62B1;&#x5408;&#x4F53;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x78C1;&#x6C17;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x96E2;: magnetophoretic &#x30E2;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3002;

&#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xD2F1; &#xC140; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC778;&#xAE30; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xD48D;&#xC694;&#xB86D;&#xAC8C; &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC0AC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xACE0;&#xAC08; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC790;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC758; &#xD55C; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCE21;&#xBA74;&#xC740; &#xC140; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xAE30;&#xC874; &#xC790;&#xB8CC; &#xC815;&#xB3C4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xC140; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB418;&#xBBC0;&#xB85C; &#xBAA9;&#xD45C; &#xC140;&#xC5D0; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; magnetophoretic &#xC774;&#xB3D9;&#xC131;&#xC744; &#xBD80;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC874; &#xC790;&#xB8CC;&#xAC00;. &#xC140;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; immunomagnetically&#xC758; magnetophoretic &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; &#xB77C;&#xBCA8; &#xC790;&#xAE30; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC218;&#xD559;&#xC801; &#xAD00;&#xACC4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB124; &#xAC1C;&#xC758; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB294; &#xC140;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; immunomagnetically&#xC758; magnetophoretic &#xC774;&#xB3D9;&#xC131;&#xC5D0; &#xD070; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;: &#xC774;&#xCC28; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC99D;&#xD3ED; (psi), (DeltachiV(m)), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC140; &#xC9C1;&#xACBD; (D(c)) &#xC785;&#xC790;-&#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xD2F1; &#xD544;&#xB4DC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC140; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xD56D; &#xCCB4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC6A9;&#xB7C9; (ABC). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xBC94;&#xC704; &#xACC4;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; magnetophoretic &#xC774;&#xB3D9;&#xC131;&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C; &#xBC0F; &#xCD5C;&#xB300; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xC774;&#xD574; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; magnetophoretic mobilities &#xC608;&#xCE21; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xC131; &#xC785;&#xC790; &#xBCC0;&#xD654;.

&#xC790;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xB9AC;: magnetophoretic &#xC774;&#xB3D9;&#xC131;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

Separaci&oacute;n magn&eacute;tica celular se ha convertido en una t&eacute;cnica popular para enriquecer o agotan las c&eacute;lulas de inter&eacute;s de una poblaci&oacute;n heterog&eacute;nea de la c&eacute;lula. Un aspecto importante de la separaci&oacute;n magn&eacute;tica de la c&eacute;lula es el grado al cual una c&eacute;lula une material paramagn&eacute;tico. Es este material paramagn&eacute;tico que imparte una movilidad de magnetofor&eacute;ticos positiva a la c&eacute;lula diana, permitiendo la separaci&oacute;n efectiva de la c&eacute;lula. Una relaci&oacute;n matem&aacute;tica ha sido desarrollada para correlacionar magn&eacute;tico de etiquetado para la movilidad de la magnetofor&eacute;ticos de un immunomagnetically con la etiqueta de la c&eacute;lula. Se han identificado cuatro par&aacute;metros que afectan significativamente la movilidad de la magnetofor&eacute;ticos de un immunomagnetically con la etiqueta de la c&eacute;lula: la capacidad de uni&oacute;n del anticuerpo (ABC) de una poblaci&oacute;n celular, la amplificaci&oacute;n de anticuerpo secundario (psi), el par&aacute;metro de la interacci&oacute;n de la part&iacute;cula magn&eacute;tica de campo (DeltachiV(m)) y el di&aacute;metro de la c&eacute;lula (D(c)). Las gamas de estos par&aacute;metros se calculan y se present&oacute; junto a c&oacute;mo los par&aacute;metros afectan el rango m&iacute;nimo y m&aacute;ximo de movilidad de la magnetofor&eacute;ticos. Una comprensi&oacute;n detallada de estos par&aacute;metros permite predicciones de movilidades de magnetofor&eacute;ticos celular y proporciona control de la movilidad de la c&eacute;lula a trav&eacute;s de la selecci&oacute;n de anticuerpos y conjugados de part&iacute;culas magn&eacute;ticas.

Separaci&oacute;n magn&eacute;tica celular: caracterizaci&oacute;n de la movilidad magnetofor&eacute;ticos.

(ES) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4F18;&#x79C0;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5B66;&#x4E60;&#x5206;&#x5316;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5236;&#x8BA2;&#x4E86;&#x5404;&#x79CD;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x672A;&#x6765;&#x518D;&#x751F;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x7528;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x969C;&#x788D;&#x5305;&#x62EC;&#xFF1A; (a) &#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x540C;&#x8D28;&#x7FA4;&#x4F53;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; (b) &#x83B7;&#x5F97;&#x7EC8;&#x672B;&#x5206;&#x5316;&#x80FD;&#x591F;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x8005;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x514B;&#x670D;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x969C;&#x788D;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x6210;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5; (&gt; 96%&#xFF09; &#x79EF;&#x6781;&#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7B80;&#x5355;&#x5730;&#x8BF4;&#xFF0C;60,000 ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDB;&#x5C55;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x611F;&#x5E94;/&#x6269;&#x5F20;&#x548C;&#x8D85;&#x8FC7; 3 &#x4EBF;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5206;&#x79BB;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; ES-&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x7279;&#x5F81;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x8FD9;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8868;&#x8FBE;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5F62;&#x6210;&#x4E8C;&#x7EF4; (2D) &#x9488;&#x7EC7;&#x7ED3;&#x6784;&#x590D;&#x6742;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x80F6;&#x539F;&#x7C7B;&#x578B;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6211;&#x51DD;&#x80F6;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4FDD;&#x7559;&#x8FDB;&#x884C;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5176;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x90E8;&#x961F;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5FC5;&#x5C31;&#x53EF;&#x4EE5;&#x83B7;&#x5F97;&#x5747;&#x8D28;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x64CD;&#x7EB5; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x540C;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;

&#x7EAF;&#x5316;&#x548C;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884D;&#x751F;&#x548C;&#x6269;&#x5927;&#x4ECE;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;

Embryonic stem (ES) cells serve as an excellent in vitro system for studying differentiation events and for developing methods of generating various specialized cells for future regenerative therapeutic applications. Two obstacles associated with using embryonic stem cells include (a) isolating homogeneous populations of differentiated cells and (b) obtaining terminally differentiated cell populations that are capable of proliferating further. Here, the authors describe methods in which they have overcome these two obstacles by generating highly purified populations (>96%) of actively proliferating endothelial cells from mouse ES cells. Briefly, 60,000 ES cells progress through three different stages of cell induction/expansion and two cell isolation procedures, generating over 300 million endothelial cells. These ES-derived endothelial cells display characteristics similar to vascular endothelial cells in that they express several common endothelial markers, they form two-dimensional (2D) tubelike structures as well as complex microvessels in three-dimensional (3D) collagen type I gels, and they retain the ability to reorganize their cytoskeleton in response to mechanical forces. Our findings indicate that it is possible to obtain proliferating populations of homogeneous endothelial cells from mouse ES cells without genetically manipulating the ES cells or coculturing with feeder cells.

Purified and proliferating endothelial cells derived and expanded in vitro from embryonic stem cells.

Souches embryonnaires (ES) cellules servent comme un excellent syst&#xE8;me in vitro pour &#xE9;tudier les &#xE9;v&#xE9;nements de diff&#xE9;renciation et de d&#xE9;velopper des m&#xE9;thodes de production diff&#xE9;rentes cellules sp&#xE9;cialis&#xE9;es pour les futurs applications th&#xE9;rapeutiques r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ratrices. Deux obstacles associ&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;utilisation de cellules souches embryonnaires comprennent (a) l&#x26;#39;isolement des populations homog&#xE8;nes de cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es et (b) obtenir les populations de cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es terminale qui sont capables de prolif&#xE9;rer en outre. Ici, les auteurs d&#xE9;crivent les m&#xE9;thodes dans lesquelles ils ont r&#xE9;ussi &#xE0; surmonter ces deux obstacles en g&#xE9;n&#xE9;rant des populations hautement purifi&#xE9;e (&#x26;gt; 96%) de prolif&#xE9;ration active des cellules endoth&#xE9;liales &#xE0; partir de cellules ES de souris. En bref, 60.000 cellules ES progr&#xE8;s gr&#xE2;ce &#xE0; trois diff&#xE9;rents stades de l&#x26;#39;induction de cellules / expansion et deux proc&#xE9;dures d&#x26;#39;isolement des cellules, g&#xE9;n&#xE9;rant plus de 300 millions de cellules endoth&#xE9;liales. Ces cellules ES d&#xE9;riv&#xE9;es endoth&#xE9;liales pr&#xE9;sentent des caract&#xE9;ristiques similaires &#xE0; des cellules endoth&#xE9;liales vasculaires en ce sens qu&#x26;#39;ils expriment plusieurs marqueurs endoth&#xE9;liaux communs, ils forment deux dimensions (2D) en forme de tube structures ainsi que microvaisseaux complexes en trois dimensions du collag&#xE8;ne de type (3D) I gels, et ils conservent la capacit&#xE9; de r&#xE9;organiser leur cytosquelette en r&#xE9;ponse &#xE0; des forces m&#xE9;caniques. Nos r&#xE9;sultats indiquent qu&#x26;#39;il est possible d&#x26;#39;obtenir des populations homog&#xE8;nes de prolif&#xE9;ration des cellules endoth&#xE9;liales &#xE0; partir de cellules ES de souris, sans manipulation g&#xE9;n&#xE9;tique des cellules souches embryonnaires ou coculture avec des cellules nourrici&#xE8;res.

Purifi&#xE9;e et cellules endoth&#xE9;liales prolif&#xE9;rantes d&#xE9;riv&#xE9;es et &#xE9;largi in vitro de cellules souches embryonnaires

Gereinigte und proliferierenden Endothelzellen stammenden und in vitro aus embryonalen Stammzellen erweitert.

Le cellule staminali embrionali (ES) servono come un ottimo sistema in vitro per lo studio di eventi di differenziazione e per lo sviluppo di metodi di produzione di varie cellule specializzate per le future applicazioni terapeutiche rigenerative. Due ostacoli connessi con l&#39;utilizzo di cellule staminali embrionali includono (a) isolare popolazioni omogenee di cellule differenziate e (b) ottenendo terminalmente differenziate popolazioni di cellule che sono in grado di proliferare ulteriormente. Qui, gli autori descrivono metodi in cui essi hanno superare questi due ostacoli generando popolazioni altamente purificate (&amp;gt; 96%) di proliferare attivamente le cellule endoteliali da cellule di topo ES. Brevemente, 60.000 ES celle progressi attraverso tre diverse fasi di induzione/espansione di celle e due procedure di isolamento delle cellule, generando oltre 300 milioni di cellule endoteliali. Queste cellule endoteliali derivati ES display caratteristiche simili alle cellule endoteliali vascolari in quanto essi esprimono diversi marcatori endoteliali comuni, hanno forma bidimensionale (2D) tubelike strutture come bene come complesso Talengectasia in tridimensionale (3D) di collagene di tipo gel, e mantengono la capacit&agrave; di riorganizzare le loro citoscheletro in risposta alle forze meccaniche. I nostri risultati indicano che &egrave; possibile ottenere popolazioni proliferazione delle cellule endoteliali omogenee di topo le cellule ES senza geneticamente manipolando le cellule ES o coculturing con cellule di alimentatore.

Purificato e proliferazione delle cellule endoteliali derivano ed espanse in vitro di cellule staminali embrionali.

&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;ES&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x6CBB;&#x7642;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;in vitro&#x306E;&#x7CFB;&#x306B;&#x512A;&#x308C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;2&#x3064;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#xFF08;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5747;&#x8CEA;&#x306A;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#xFF08;b&#xFF09;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5897;&#x6B96;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x8457;&#x8005;&#x3089;&#x306F;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5897;&#x6B96;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x96C6;&#x56E3;&#xFF08;&#x26;gt; 96&#xFF05;&#xFF09;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 300&#x4E07;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;/&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x53CA;&#x3073;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x96E2;&#x6CD5;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6BB5;&#x968E;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x3001;60,000 ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x72B6;&#x6CC1;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;ES&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x70B9;&#x3067;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;3&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;3D&#xFF09;I&#x578B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x30B2;&#x30EB;&#x306B;2&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;2D&#xFF09;&#x7BA1;&#x72B6;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x8840;&#x7BA1;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x529B;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3092;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5747;&#x4E00;&#x306A;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x6D3E;&#x751F;&#x3068;&#x62E1;&#x5F35;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;

&#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC218; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC131;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C; &#xB4F1; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; &#xADE0;&#xC9C8; &#xC778;&#xAD6C; (a) &#xBC0F; &#xC140; &#xC778;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB354;&#xC6B1; &#xD655;&#xC0B0; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; (b) &#xB9D0;&#xAE30;&#xB97C; &#xC5BB;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C;, &#xC800;&#xC790; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xC560;&#xB97C; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; (&amp;gt; 96%) &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC0B0;&#xC758; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;. &#xAC04;&#xB2E8;&#xD788;, 60000 ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC9C4;&#xD589; &#xC140; &#xC720;&#xB3C4;/&#xD655;&#xC7A5; &#xBC0F; 300&#xB9CC; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC131; &#xB450; &#xC140; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC808;&#xCC28;&#xC758; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;. &#xC774; ES &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xB0B4; &#xD53C; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131; &#xD45C;&#xC2DC;, &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; microvessels &#xB0B4;&#xAC00; &#xC824;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; cytoskeleton &#xAE30;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xD798;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; 2 &#xCC28;&#xC6D0; (2D) tubelike &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xB610;&#xB294; &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; coculturing ES &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC885; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xAC00;&#xC838;&#xC62C; &#xC218; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xD30C;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4; &#xC678; &#xD655;&#xC7A5;.

Madre embrionarias (ES) las c&#xE9;lulas de servir como un excelente sistema in vitro para el estudio de fen&#xF3;menos de diferenciaci&#xF3;n y el desarrollo de m&#xE9;todos de generaci&#xF3;n de varias c&#xE9;lulas especializadas para futuras aplicaciones terap&#xE9;uticas regenerativas. Dos obst&#xE1;culos asociados con el uso de c&#xE9;lulas embrionarias incluyen (a) aislar poblaciones homog&#xE9;neas de c&#xE9;lulas diferenciadas y (b) la obtenci&#xF3;n de las poblaciones de c&#xE9;lulas terminalmente diferenciadas que son capaces de proliferar a&#xFA;n m&#xE1;s. Aqu&#xED;, los autores describen los m&#xE9;todos en que se han superado estos dos obst&#xE1;culos por la generaci&#xF3;n de poblaciones altamente purificada (&#x26;gt; 96%) de forma activa la proliferaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas endoteliales a partir de c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n. En pocas palabras, el progreso 60.000 ES c&#xE9;lulas a trav&#xE9;s de tres etapas diferentes de la inducci&#xF3;n de c&#xE9;lulas / expansi&#xF3;n y dos procedimientos de aislamiento de c&#xE9;lulas, generando m&#xE1;s de 300 millones de c&#xE9;lulas endoteliales. Estas c&#xE9;lulas endoteliales derivadas de ES-presentan caracter&#xED;sticas similares a las c&#xE9;lulas endoteliales vasculares en que expresan varios marcadores endoteliales comunes, forman estructuras tubulares bidimensionales (2D), as&#xED; como complejos en microvasos tridimensional de col&#xE1;geno de tipo (3D) I geles, y siempre tienen la posibilidad de reorganizar su citoesqueleto, en respuesta a fuerzas mec&#xE1;nicas. Nuestros resultados indican que es posible obtener poblaciones homog&#xE9;neas de la proliferaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas endoteliales a partir de c&#xE9;lulas embrionarias de rat&#xF3;n sin manipular gen&#xE9;ticamente las c&#xE9;lulas ES o cocultivo con c&#xE9;lulas alimentadoras.

Purificada y la proliferaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas endoteliales derivadas y expandidas in vitro de c&#xE9;lulas madre embrionarias

(ES) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x5E94;&#x7528;&#x4F18;&#x79C0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x662F;&#x7279;&#x522B;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x53EF;&#x91CD;&#x73B0;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E3A;&#x751F;&#x6210;&#x6E90;&#x7EC4;&#x7EC7;/&#x5668;&#x5B98;&#x91CD;&#x5EFA; prevascularized &#x6750;&#x6599;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x540E;&#x53D1;&#x5C55;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x65B9;&#x6CD5; (&gt; 96%&#xFF09; &#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7A97;&#x4F53;&#x4E09;&#x7EF4; (3-D) &#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x5D4C;&#x5165;&#x5728;&#x4E09;&#x7EF4;&#x80F6;&#x539F;&#x51DD;&#x80F6;&#x6784;&#x9020;&#x4E0E;&#x9F20;&#x5C3E;&#x80F6;&#x539F; &#x2170; &#x578B; (2 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;) &#x7684; 10(6) &#x7EC6;&#x80DE;/mL &#x51DD;&#x80F6;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x5728;&#x51DD;&#x80F6;&#x53D1;&#x73B0;&#x6BCF;&#x5929;&#x7528;&#x76F8;&#x886C;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5206;&#x6790;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;3 &#x548C;&#x51DD;&#x80F6;&#x6784;&#x5EFA;&#x5F62;&#x6210;&#x540E; 5 &#x5929;&#x4E4B;&#x95F4;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7B2C;&#x4E00;&#x7684;&#x8239;&#x53EA;&#x3002;&#x6570;&#x91CF;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x4E0D;&#x65AD;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x5F00;&#x59CB;&#x5012;&#x9000;&#x524D;&#x8FBE;&#x5230;&#x6700;&#x5927;&#x3002;2 &#x661F;&#x671F;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x8239;&#x53EA;&#x6837;&#x7ED3;&#x6784;&#x5DF2;&#x90FD;&#x5012;&#x9000;&#x56DE;&#x5230;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x56FE;&#x50CF;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x6837;&#x7ED3;&#x6784;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7B52;&#x7ED3;&#x6784;&#x662F;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E13;&#x5229;&#x6D41;&#x660E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#x6D3E;&#x751F;&#x3001; &#x7EAF;&#x5316;&#x548C;&#x6269;&#x5927;&#x4ECE;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EF4;&#x6301;&#x91CD;&#x8981;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x80FD;&#x591F;&#x63A5;&#x53D7;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x7684;&#x80F6;&#x539F;&#x51DD;&#x80F6;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x5185;&#x76AE;&#x4EA7;&#x54C1;&#x6D3E;&#x751F;&#x4ECE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x53EF;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x975E;&#x5E38;&#x6709;&#x7528;&#x3002;

&#x5229;&#x7528;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x751F;&#x6210;&#x5BB9;&#x5668;&#x7ED3;&#x6784;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;

Embryonic stem (ES) cells could potentially serve as an excellent cell source for various applications in regenerative medicine and tissue engineering. Our laboratory is particularly interested in generating a reproducible endothelial cell source for the development of prevascularized materials for tissue/organ reconstruction. After developing methods to isolate highly purified (>96%) proliferating populations of endothelial cells from mouse embryonic stem cells, we tested their ability to form three-dimensional (3-D) vascular structures in vitro. The ES cell-derived endothelial cells were embedded in 3-D collagen gel constructs with rat tail collagen type I (2 mg/mL) at a concentration of 10(6) cells/mL of gel. The gels were observed daily with a phase-contrast microscope to analyze the time course for endothelial cell assembly. The first vessels were observed between days 3 and 5 after gel construct formation. The number and complexity of structures steadily increased, reaching a maximum before beginning to regress. By 2 weeks, all vessel-like structures had regressed back to single cells. Histology and fluorescent images of the vessel-like structures verified that tube structures were multicellular and could develop patent lumens. We have shown that endothelial cells derived, purified and expanded in vitro from ES cells sustain an important endothelial cell function, the ability to undergo vasculogenesis in collagen gels, indicating that endothelial products derived in vitro from stem cells could be useful in regenerative medicine applications.

Use of embryonic stem cell-derived endothelial cells as a cell source to generate vessel structures in vitro.

Les cellules souches embryonnaires (ES) pourraient potentiellement constituer une source excellente de cellule pour diverses applications en m&eacute;decine r&eacute;g&eacute;n&eacute;ratrice et g&eacute;nie tissulaire. Notre laboratoire s&#39;int&eacute;resse particuli&egrave;rement aux g&eacute;n&eacute;rant une source de cellules endoth&eacute;liales reproductible pour le d&eacute;veloppement de mat&eacute;riaux PR&Eacute;VASCULARIS&Eacute;S pour la reconstruction de tissus ou d&#39;organes. Apr&egrave;s avoir d&eacute;velopp&eacute; des m&eacute;thodes pour isoler hautement purifi&eacute;e (&gt; 96 %) la prolif&eacute;ration des populations de cellules endoth&eacute;liales de cellules souches embryonnaires de souris, nous avons test&eacute; leur capacit&eacute; de former en trois dimensions (3d) des structures vasculaires in vitro. Les cellules endoth&eacute;liales de ES culture cellulaire ont &eacute;t&eacute; incorpor&eacute;s dans le collag&egrave;ne 3D constructions de gel au collag&egrave;ne de queue de rat de type I (2 mg/mL) &agrave; une concentration de 10 6 cellules/mL de gel. Les gels ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s quotidiennement avec un microscope &agrave; contraste de phase pour analyser l&#39;&eacute;volution temporelle pour l&#39;assemblage de cellules endoth&eacute;liales. Les premiers navires ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;es entre les jours 3 et 5, apr&egrave;s le gel de construction formation. Le nombre et la complexit&eacute; des structures constamment augment&eacute;, atteignant un maximum avant de commencer &agrave; r&eacute;gresser. De 2 semaines, toutes les structures ressemblant &agrave; des navires avaient r&eacute;gress&eacute; vers des cellules individuelles. Histologie et images fluorescentes des structures comme navire v&eacute;rifi&eacute; que les structures de tubes &eacute;taient multicellulaires et pourraient d&eacute;velopper des brevets lumens. Nous avons montr&eacute; que les cellules endoth&eacute;liales d&eacute;riv&eacute;es, purifi&eacute; et d&eacute;velopp&eacute; in vitro de cellules d&#39;ES soutiennent une fonction importante de cellules endoth&eacute;liales, l&#39;aptitude &agrave; vasculog&eacute;n&egrave;se dans les gels collag&egrave;ne, indiquant que les produits endoth&eacute;liales d&eacute;riv&eacute;s in vitro de cellules souches pourrait &ecirc;tre utile dans des applications en m&eacute;decine r&eacute;g&eacute;n&eacute;rative.

Utilisation d&#39;embryonnaires cellules souches d&eacute;riv&eacute;es de cellules endoth&eacute;liales comme une source de cellules pour g&eacute;n&eacute;rer des structures de navire in vitro.

Verwendung von embryonalen Stammzellen gewonnenen endothelialen Zellen als Zell-Quelle zu Gef&#xE4;&#xDF;strukturen in vitro zu generieren.

Le cellule staminali embrionali (ES) potenzialmente potrebbero servire come fonte di cellule eccellente per varie applicazioni in medicina rigenerativa e ingegneria tissutale. Il nostro laboratorio &egrave; particolarmente interessato a generare una fonte di cellule endoteliali riproducibili per lo sviluppo di materiali prevascularized per la ricostruzione del tessuto/organo. Dopo lo sviluppo di metodi per isolare altamente purificata (&amp;gt; 96%) proliferare delle popolazioni di cellule endoteliali da cellule staminali embrionali di topo, abbiamo testato la loro capacit&agrave; di forma tridimensionale (3D) strutture vascolari in vitro. Le cellule endoteliali cellule derivate ES sono state incorporate in 3-d collagene gel costrutti con collagene coda di topo di tipo I (2 mg/mL) ad una concentrazione di 10 cellule/mL di gel. I gel sono stati osservati quotidianamente con un microscopio a contrasto di fase per analizzare il corso del tempo per l&#39;assemblaggio delle cellule endoteliali. Le prime navi sono state osservate tra i giorni 3 e 5 dopo gel costruire formazione. Il numero e la complessit&agrave; delle strutture costantemente aumentato, raggiungendo un massimo prima di iniziare a regredire. Da 2 settimane, tutte le strutture della nave-come erano regredito torna a cellule singole. Istologia e immagini fluorescenti delle strutture vaso-come verificato che tubo strutture erano pluricellulari e potrebbero sviluppare brevetti lumen. Abbiamo dimostrato che le cellule endoteliali derivati, purificato e si espanse in vitro da cellule ES sostengono una funzione importante delle cellule endoteliali, la capacit&agrave; di subire vasculogenesi in gel di collagene, che indica che i endoteliali derivati in vitro cellule staminali potrebbe essere utile nelle applicazioni di medicina rigenerativa.

Uso di cellule endoteliali derivato da cellule staminali embrionali come una fonte di cellule per generare strutture di nave in vitro.

&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x306E;&#x830E; (ES) &#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x30FB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x512A;&#x79C0;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x52E4;&#x3081;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x5F53;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x306F;&#x7D44;&#x7E54;/&#x81D3;&#x5668;&#x518D;&#x5EFA;&#x7528; prevascularized &#x6750;&#x6599;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x518D;&#x73FE;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x7279;&#x306B;&#x8208;&#x5473;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x7D14;&#x5EA6;&#x5206;&#x96E2;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C; (&#x76EE; 96%) &#x4EBA;&#x53E3;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; 3 &#x6B21;&#x5143; (3-D) &#x8840;&#x7BA1;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x5916;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;ES &#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F; 3 D &#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x3067;&#x30B2;&#x30EB;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x5C3E;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; I (2 mg/mL) &#x306F;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E; 10(6) &#x30BB;&#x30EB;/mL &#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x3002;&#x30B2;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6BCE;&#x65E5;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7D4C;&#x904E;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x4F4D;&#x76F8;&#x5DEE;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8239;&#x306F;&#x5E7E;&#x65E5; 3 &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x69CB;&#x7BC9;&#x5F8C;&#x5F62;&#x6210; 5 &#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6570;&#x3068;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3001;&#x9000;&#x884C;&#x3092;&#x59CB;&#x3081;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x6700;&#x5927;&#x306B;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x5897;&#x52A0;&#x3002;2 &#x9031;&#x9593;&#x3067;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x623B;&#x308B;&#x3068;&#x601D;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x5F8C;&#x9000;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x3084;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x753B;&#x50CF;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x69CB;&#x9020;&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x7279;&#x8A31;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x6D3E;&#x751F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3001;ES &#x7D30;&#x80DE;&#x3092; in vitro &#x3067;&#x62E1;&#x5927;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7DAD;&#x6301;, &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; in vitro &#x3067;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x88FD;&#x54C1;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3; &#x30FB; &#x30B2;&#x30EB;&#x5185;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; in vitro &#x8840;&#x7BA1;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3002;

&#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC758;&#xD559;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xC140; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB85C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC18C;&#xB294; &#xD2B9;&#xD788; &#xC870;&#xC9C1;/&#xC7A5;&#xAE30; &#xC7AC;&#xAC74;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; prevascularized &#xC790;&#xB8CC;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC7AC;&#xD604; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC18C;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC774;. &#xACE0; &#xC21C;&#xB3C4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xD6C4; (&amp;gt; 96%) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3 &#xCC28;&#xC6D0;) &#xD615;&#xC2DD; &#xD608;&#xAD00; &#xAD6C;&#xC870; &#xCCB4; &#xC678; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC5D0; &#xC950; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC824; &#xAD6C;&#xBB38; &#xC720;&#xD615; I (2 mg/mL) &#xC824;&#xC758; &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; &#xC140;/Ml&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC824; &#xB9E4;&#xC77C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xCF54;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC11D; &#xC704;&#xC0C1; &#xB300;&#xBE44; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC120;&#xBC15; &#xC0AC;&#xC774; &#xC77C; 3 &#xBC0F; 5 &#xC824; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD55C; &#xD6C4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC640; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131; &#xAFB8;&#xC900;&#xD788; &#xC99D;&#xAC00;, &#xBCF5;&#xADC0;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xB300;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC;. 2 &#xC8FC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC120;&#xBC15; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB418;&#xB3CC;&#xC544;&#xAC04; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xBC0F; &#xC120;&#xBC15; &#xD615; &#xAD6C;&#xC870;&#xBB3C;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xD655;&#xC778; &#xD29C;&#xBE0C; &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xD2B9;&#xD5C8; &#xB8E8;&#xBA58;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD30C;&#xC0DD;, &#xC815;&#xD654; &#xBC0F; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xD655;&#xB300; &#xC720;&#xC9C0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;, &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC824;, &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC81C;&#xD488; &#xD30C;&#xC0DD; &#xCCB4; &#xC678; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; vasculogenesis&#xB97C; &#xBC1B;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xAC8C; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC758;&#xD559; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC120;&#xBC15; &#xAD6C;&#xC870; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xC140; &#xC6D0;&#xBCF8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;.

Las c&eacute;lulas madre embrionarias (ES) pueden llegar a servir como una fuente excelente de la c&eacute;lula para diversas aplicaciones en medicina regenerativa y la ingenier&iacute;a de tejidos. Nuestro laboratorio est&aacute; particularmente interesado en la generaci&oacute;n de una fuente de c&eacute;lulas endoteliales reproducibles para el desarrollo de materiales prevascularized para la reconstrucci&oacute;n de &oacute;rgano o tejido. Despu&eacute;s de desarrollar m&eacute;todos para aislar altamente purificado (&gt; 96%) proliferando las poblaciones de c&eacute;lulas endoteliales de c&eacute;lulas madre embrionarias de rat&oacute;n, probamos su capacidad de estructuras vasculares de forma tridimensional (3D) in vitro. Las c&eacute;lulas endoteliales c&eacute;lula-derivados ES fueron encajadas en 3-d col&aacute;geno construcciones de gel con col&aacute;geno de cola de rata tipo I (2 mg/mL) en una concentraci&oacute;n de 10 c&eacute;lulas/mL de gel. Los geles fueron observados diariamente con un microscopio de contraste de fase para analizar el curso del tiempo para el montaje de la c&eacute;lula endotelial. Los primeros buques fueron observados entre los d&iacute;as 3 y 5 despu&eacute;s de gel construir formaci&oacute;n. El n&uacute;mero y la complejidad de las estructuras aumentaron constantemente, alcanzando un m&aacute;ximo antes de empezar a retroceder. Por 2 semanas, todas las estructuras del buque-como hab&iacute;an regresado a las c&eacute;lulas. Histolog&iacute;a e im&aacute;genes fluorescentes de las estructuras semejantes a buque verific&oacute; que tubo estructuras multicelulares y podr&iacute;an desarrollar patentes l&uacute;menes. Hemos demostrado que las c&eacute;lulas endoteliales derivados, purificada y expandido in vitro de c&eacute;lulas madre embrionarias sostienen una funci&oacute;n importante de la c&eacute;lula endotelial, la capacidad de experimentar la vasculog&eacute;nesis en geles de col&aacute;geno, lo que indica que endoteliales derivados in vitro de c&eacute;lulas madre podr&iacute;a ser &uacute;til en aplicaciones de la medicina regenerativa.

Uso de las c&eacute;lulas endoteliales derivadas de c&eacute;lulas madre embrionarias como fuente de c&eacute;lulas para generar estructuras del buque in vitro.

&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x6E90;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x3002;(ES) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4F18;&#x79C0;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5B66;&#x4E60;&#x5206;&#x5316;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5236;&#x8BA2;&#x4E86;&#x5404;&#x79CD;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x672A;&#x6765;&#x518D;&#x751F;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x969C;&#x788D;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x7528;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5305;&#x62EC;&#x5173;&#x8054; &#xFF08;1&#xFF09; &#x9694;&#x79BB;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x540C;&#x8D28;&#x7FA4;&#x4F53;&#x548C; (2) &#x83B7;&#x5F97;&#x672B;&#x671F;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x79CD;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x589E;&#x6B96;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F7F;&#x7528; Flk-1 &#x6297;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x8865;&#x5145;&#x548C;&#x4E00;&#x79CD;&#x5177;&#x6709;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x624B;&#x52A8;&#x9009;&#x62E9;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4E25;&#x683C;&#xFF0C;&#x514B;&#x670D;&#x5728; ES &#x63A8;&#x5BFC;&#x548C;&#x6587;&#x5316;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x969C;&#x788D;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x6210;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EAF;&#x5316; (&gt; 96%&#xFF09; &#x4EBA;&#x53E3;&#x79EF;&#x6781;&#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x9F20;&#x6807; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B64;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x63A8;&#x5BFC;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x83B7;&#x5F97;&#x548C;&#x6269;&#x5927;&#x4E86; 25 &#x4EBA;&#x53E3;&#x5E76;&#x5408;&#x6570;&#x6570;&#x4EE5;&#x767E;&#x4E07;&#x8BA1;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;

&#x4F53;&#x5916;&#x63A8;&#x5BFC;&#x548C;&#x6269;&#x5F20;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Vascular endothelial cells or endothelial progenitor cells derived from stem cells could potentially lead to a variety of clinically relevant applications, including cell-based therapies and tissue engineering. Embryonic stem (ES) cells serve as an excellent in vitro system for studying differentiation events and for developing methods of generating various specialized cells for future regenerative therapeutic applications. Two obstacles associated with using embryonic stem cells include (1) isolating homogeneous populations of differentiated cells and (2) obtaining terminally differentiated cell populations that are capable of proliferating further. Here, we describe methods for isolating purified proliferating populations of endothelial cells from mouse ES cells using Flk-1-positive cells, vascular endothelial growth factor supplementation, and a highly selective manual selection technique. This methodology, although rigorous, overcomes two current obstacles in ES derivation and culture by generating highly purified (>96%) populations of actively proliferating endothelial cells from mouse ES cells. Using this in vitro derivation procedure, millions of cells at various stages of differentiation may be obtained and expanded up to 25 population doublings.

In vitro derivation and expansion of endothelial cells from embryonic stem cells.

Les cellules endoth&eacute;liales vasculaires ou des cellules endoth&eacute;liales prog&eacute;nitrices d&eacute;riv&eacute;es de cellules souches pourraient entra&icirc;ner une vari&eacute;t&eacute; d&#39;applications cliniquement pertinentes, y compris les th&eacute;rapies &agrave; base cellulaire et ing&eacute;nierie tissulaire. Les cellules souches embryonnaires (ES) servent un excellent syst&egrave;me in vitro pour l&#39;&eacute;tude des &eacute;v&eacute;nements de diff&eacute;renciation et d&#39;&eacute;laborer des m&eacute;thodes de production diff&eacute;rentes cellules sp&eacute;cialis&eacute;es pour de futures applications th&eacute;rapeutiques r&eacute;g&eacute;n&eacute;ratives. Deux obstacles associ&eacute;s &agrave; l&#39;utilisation de cellules souches embryonnaires cellules incluent (1) isoler des populations homog&egrave;nes de cellules diff&eacute;renci&eacute;es et (2) obtenir en phase terminale diff&eacute;rencient des populations de cellules qui sont capables de prolif&eacute;rer davantage. Nous d&eacute;crivons ici les m&eacute;thodes pour isoler les populations prolif&eacute;rantes purifi&eacute;es des cellules endoth&eacute;liales de cellules ES de souris &agrave; l&#39;aide de cellules Flk-1 positives, suppl&eacute;mentation en facteur de croissance endoth&eacute;lial vasculaire et une technique hautement s&eacute;lectif de s&eacute;lection manuelle. Cette m&eacute;thodologie, bien que rigoureux, surmonte deux obstacles actuels &agrave; la d&eacute;rivation de ES et de la culture en g&eacute;n&eacute;rant hautement purifi&eacute;e (&gt; 96 %) des populations d&#39;activement la prolif&eacute;ration endoth&eacute;liale des cellules de souris ES cellules. &Agrave; l&#39;aide de cette proc&eacute;dure de d&eacute;rivation in vitro, des millions de cellules &agrave; diff&eacute;rents stades de diff&eacute;renciation peuvent &ecirc;tre obtenues et &eacute;tendues jusqu&#39;&agrave; 25 doublements de population.

D&eacute;rivation in vitro et l&#39;expansion des cellules endoth&eacute;liales de cellules souches embryonnaires.

Vaskul&auml;re Endothelzellen oder endothelialen Vorl&auml;uferzellen Stammzellen abgeleitet k&ouml;nnte potenziell zu einer Vielzahl von klinisch relevanten Anwendungen, einschlie&szlig;lich zellbasierte Therapien und Tissue Engineering. Embryonale Stammzellen (ES) dienen als eine ausgezeichnete in-vitro-System f&uuml;r das Studium Differenzierung Ereignisse und f&uuml;r die Entwicklung von Methoden zur Generierung von verschiedenen spezialisierter Zellen f&uuml;r zuk&uuml;nftige regenerative therapeutische Anwendungen. Zwei Hindernisse bei der Verwendung von embryonalen Stammzellen, die Zellen einf&uuml;gen (1) homogene Bev&ouml;lkerungen von differenzierten Zellen zu isolieren und (2) Erhalt unheilbar differenzierte Zelle Bev&ouml;lkerungen, die weiter vermehren k&ouml;nnen. Hier beschreiben wir Methoden f&uuml;r die Isolierung von gereinigter ausufernde Populations von Endothelzellen aus Maus-ES-Zellen mit Flk-1-positiven Zellen, vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor-Erg&auml;nzung und eine hochselektive manuelle Auswahl-Technik. Diese Methodik, obwohl strenge, &uuml;berwindet zwei aktuelle Hindernisse ES Ableitung und Kultur durch die Generierung von hochreinem (&gt; 96 %) Populationen von aktiv vermehren endothelial Zellen von Maus ES-Zellen. Verwenden dieses Verfahren f&uuml;r in-vitro-Ableitung, Millionen von Zellen in den verschiedenen Stadien der Differenzierung m&ouml;glicherweise erhalten und bis zu 25 Bev&ouml;lkerung Verdoppelungen erweitert.

In-vitro-Ableitung und Ausbau von Endothelzellen aus embryonalen Stammzellen.

Le cellule endoteliali vascolari o cellule progenitrici endoteliali derivate da cellule staminali potrebbero potenzialmente portare ad una variet&agrave; di applicazioni clinicamente rilevanti, comprese le terapie cell-based e l&#39;ingegneria tessutale. Le cellule staminali embrionali (ES) servono come un ottimo sistema in vitro per lo studio di eventi di differenziazione e per lo sviluppo di metodi di produzione di varie cellule specializzate per le future applicazioni terapeutiche rigenerative. Due ostacoli associati con l&#39;utilizzo di staminali embrionali, cellule includono (1) isolamento di popolazioni omogenee di cellule differenziate e (2) ottenendo terminalmente differenziano popolazioni di cellule che sono in grado di proliferare ulteriormente. Qui, descriviamo metodi per isolare purificate popolazioni proliferazione di cellule endoteliali da cellule ES del mouse utilizzando cellule Flk-1-positivi, supplementazione di fattore di crescita endoteliale vascolare e una tecnica di selezione manuale altamente selettiva. Questa metodologia, anche se rigorosa, supera due ostacoli correnti di derivazione ES e cultura generando altamente purificata (&amp;gt; 96%) delle popolazioni di proliferare attivamente endothelial cellule di topo ES. Usando questa procedura di derivazione in vitro, milioni di cellule nelle varie fasi di differenziazione possono essere ottenute e ampliati fino a 25 accoppiamenti di popolazione.

Derivazione in vitro e l&#39;espansione delle cellule endoteliali da cellule staminali embrionali.

&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x6CBB;&#x7642;&#x3068;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x306F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x306E;&#x830E; (ES) &#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3057;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x6CBB;&#x7642;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7279;&#x6B8A;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x512A;&#x308C;&#x305F; in vitro &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5747;&#x8CEA;&#x306A;&#x96C6;&#x56E3;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x53D6;&#x5F97; &#xFF08;2&#xFF09; &#x672B;&#x671F;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B; 2 &#x3064;&#x969C;&#x5BB3; (1) &#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5897;&#x6B96;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x96C6;&#x56E3; Flk 1 &#x967D;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x88DC;&#x5145;&#x3001;&#x9AD8;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x306E;&#x624B;&#x52D5;&#x9078;&#x629E;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; ES &#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9694;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x306F;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x304C;&#x3001;ES &#x5C0E;&#x51FA;&#x3068;&#x6587;&#x5316;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x969C;&#x5BB3;&#x9AD8;&#x7D14;&#x5EA6;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x514B;&#x670D; (&#x76EE; 96%) &#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; ES &#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x3053;&#x306E; in vitro &#x306E;&#x5C0E;&#x51FA;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306E;&#x6570;&#x767E;&#x4E07;&#x3092;&#x5F97;&#x3001;25 &#x306E;&#x4EBA;&#x53E3; doublings &#x307E;&#x3067;&#x62E1;&#x5927;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

In vitro &#x306E;&#x5C0E;&#x51FA;&#x3068;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x3002;

&#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB098; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559; &#xB4F1; &#xC784;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC218; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC131;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; (1) &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xADE0;&#xC9C8; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; (2) &#xB9D0;&#xAE30;&#xB97C; &#xC5BB;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C; &#xB354;&#xC6B1; &#xD655;&#xC0B0; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Flk 1 &#xC591;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;, &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xBCF4;&#xCDA9;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC218;&#xB3D9; &#xC120;&#xD0DD; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC815;&#xD654; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; &#xBE44;&#xB85D; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C;, &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; ES &#xC720;&#xB798;&#xC640; &#xBB38;&#xD654; &#xB450; &#xD604;&#xC7AC; &#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5; (&amp;gt; 96%) &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; ES &#xC138;&#xD3EC;. &#xCCB4; &#xC678; &#xD30C;&#xC0DD;&#xC774; &#xC808;&#xCC28;, &#xC218;&#xBC31;&#xB9CC;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xACE0; 25 &#xC778;&#xAD6C; doublings&#xAE4C;&#xC9C0; &#xD655;&#xC7A5; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCCB4; &#xC678; &#xD30C;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;.

Las c&eacute;lulas endoteliales vasculares o derivadas de c&eacute;lulas madre las c&eacute;lulas progenitoras endoteliales potencialmente podr&iacute;an conducir a una variedad de aplicaciones cl&iacute;nicamente relevantes, incluyendo terapia celular e ingenier&iacute;a de tejidos. Las c&eacute;lulas madre embrionarias (ES) servir como un excelente sistema in vitro para estudiar eventos de diferenciaci&oacute;n y para desarrollar m&eacute;todos de generar varias c&eacute;lulas especializadas para futuras aplicaciones terap&eacute;uticas regenerativas. Dos obst&aacute;culos asociados al uso de madre embrionaria c&eacute;lulas incluyen (1) aislamiento de poblaciones homog&eacute;neas de c&eacute;lulas diferenciadas y (2) obtener terminal distinguieron poblaciones celulares que son capaces de proliferar m&aacute;s. Aqu&iacute; se describen m&eacute;todos para aislar poblaciones purificadas proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas endoteliales de c&eacute;lulas madre embrionarias c&eacute;lulas Flk-1-positive, suplementaci&oacute;n de factor de crecimiento endotelial vascular y una t&eacute;cnica de selecci&oacute;n manual altamente selectivo. Esta metodolog&iacute;a, aunque riguroso, supera dos obst&aacute;culos actuales en derivaci&oacute;n ES y cultura generando altamente purificado (&gt; 96%) las poblaciones de activamente la proliferaci&oacute;n endotelial con c&eacute;lulas de rat&oacute;n c&eacute;lulas madre embrionarias. Usar este procedimiento de derivaci&oacute;n in vitro, millones de c&eacute;lulas en diversas etapas de la diferenciaci&oacute;n pueden obtener y ampliados hasta 25 doblajes de la poblaci&oacute;n.

Derivaci&oacute;n in vitro y la expansi&oacute;n de las c&eacute;lulas endoteliales de las c&eacute;lulas madre embrionarias.

&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7597;&#x6CD5;&#x53EA;&#x4F1A;&#x6210;&#x4E3A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x76F8;&#x5173;&#xFF0C;&#x5982;&#x679C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4F53;&#x5916;&#x529F;&#x80FD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x540C;&#x884C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x96C7;&#x4E86;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x4EA7;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (&gt; &#x7EAF;&#x5EA6; 96%&#xFF09; &#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;ESC&#xFF09; &#x548C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (MAEC) &#x83B7;&#x5F97;&#x4ECE;&#x80F8;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x3002;ESC &#x6E90;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (EC) &#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x79EF;&#x6781;&#x4E3A; EC &#x6807;&#x8BB0;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x5408;&#x6210;&#x9176; (eNOS)&#x3001; Flk 1&#x3001; &#x5916;&#x8BED;&#x6559;&#x5B66; 1&#x3001; &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9499; (VEcad)&#x3001; &#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 (PECAM-1) &#x548C; CD34&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;ESC &#x6E90;&#x6027; EC &#x5FEB;&#x9012;&#x7A0D;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; PECAM-1 &#x548C;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5927;&#x5927;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D; (LDL) &#x5438;&#x6536;&#x548C;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;&#x56E0;&#x5B50;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x867D;&#x7136; ESC &#x6E90;&#x6027; EC &#x505A;&#x5FEB;&#x9012;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;VE-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x5728; ESC &#x6E90;&#x6027;&#x6B27;&#x5171;&#x4F53;&#x786E;&#x5B9E;&#x4E0D;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4EE5;&#x53CA; MAEC &#x4E0E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x8DEF;&#x53E3;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;ESC &#x6E90;&#x6027; EC &#x8868;&#x793A;&#x5F88;&#x591A;&#x66F4;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CA;&#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x7269; CD34 &#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x6027;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x6BD4; MAEC &#x53D1;&#x82BD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; ESC &#x6E90;&#x6027; EC &#x540C;&#x65F6;&#x4FDD;&#x7559;&#x5907;&#x7528;&#x5305;&#x62EC;&#x672A;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x6807;&#x8BB0;&#x5171;&#x4EAB;&#x6210;&#x719F;&#x6559;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x4E3B;&#x5E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5173;&#x952E;&#x7279;&#x5F81;&#x3002;

&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x529F;&#x80FD;&#x6210;&#x719F;&#x3002;

Stem cell therapies will only become clinically relevant if the stem cells differentiated in vitro function as their in vivo counterparts. Here, we employed our previously developed techniques for deriving endothelial cells (>96% purity) from mouse embryonic stem cells (ESC) and compared these with mouse aortic endothelial cells (MAEC) obtained from thoracic aortas. Immunocytochemical analysis of ESC-derived endothelial cells (EC) demonstrates that both cell types are positive for the EC markers endothelial nitric oxide synthase (eNOS), Flk-1, Flt-1, vascular endothelial cadherin (VEcad), platelet-endothelial cell adhesion molecule-1 (PECAM-1), and CD34. However, ESC-derived EC express slightly lower levels of PECAM-1 and VE-cadherin, and significantly lower levels of acetylated low-density lipoprotein (LDL) uptake and von Willebrand factor. Although ESC-derived EC do express VE-cadherin, the VE-cadherin in the ESC-derived EC did not localize as well at the cell-cell junctions as in the MAEC. Interestingly, ESC-derived EC express much greater levels of the endothelial and hematopoietic stem cell marker CD34 and vasculogenic and angiogenic sprouting than MAEC. These results indicate that ESC-derived EC share some key characteristics of 'mature' EC, while retaining markers of alternate phenotypes including immature endothelium.

Embryonic stem cell-derived endothelial cells may lack complete functional maturation in vitro.

Les th&#xE9;rapies cellulaires ne deviennent cliniquement pertinente si les cellules souches diff&#xE9;renci&#xE9;es en fonction in vitro que leur homologues en vivo. Ici, nous avons utilis&#xE9; nos techniques d&#xE9;j&#xE0; mises au point pour obtenir des cellules endoth&#xE9;liales (puret&#xE9;&#x26;gt; 96%) &#xE0; partir de cellules souches embryonnaires de souris (CES) et les a compar&#xE9;es avec des cellules endoth&#xE9;liales aortiques de souris (MAEC) obtenus &#xE0; partir de aortes thoraciques. Analyse immunocytochimique de ESC-d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules endoth&#xE9;liales (CE) d&#xE9;montre que les deux types de cellules sont positives pour le CE marqueurs oxyde nitrique synthase endoth&#xE9;liale (eNOS), Flk-1, Flt-1, vasculaire endoth&#xE9;liale cadh&#xE9;rine (VEcad), l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire des plaquettes-endoth&#xE9;lial Mol&#xE9;cule-1 (PECAM-1), et CD34. Toutefois, l&#x26;#39;ESC-d&#xE9;riv&#xE9;e CE expresse l&#xE9;g&#xE8;rement inf&#xE9;rieur niveaux de PECAM-1 et VE-cadh&#xE9;rine, et les niveaux significativement plus faibles de ac&#xE9;tyl&#xE9; lipoprot&#xE9;ines de basse densit&#xE9; (LDL) et de l&#x26;#39;absorption du facteur von Willebrand. Bien que l&#x26;#39;ESC-CE d&#xE9;riv&#xE9; faire expr&#xE8;s VE-cadh&#xE9;rine, la VE-cadh&#xE9;rine dans l&#x26;#39;ESC-CE n&#x26;#39;a pas tir&#xE9; de localiser ainsi au niveau des jonctions entre cellules, comme dans le MAEC. Fait int&#xE9;ressant, l&#x26;#39;ESC-d&#xE9;riv&#xE9;e CE expresse niveaux beaucoup plus de la endoth&#xE9;liale et h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tique CD34 sur les cellules souches marqueur et vasculog&#xE8;ne et angiog&#xE9;nique germination de MAEC. Ces r&#xE9;sultats indiquent que l&#x26;#39;ESC-d&#xE9;riv&#xE9;e part de la CE certaines caract&#xE9;ristiques cl&#xE9;s de &#xAB;mature&#xBB; CE, tout en conservant les marqueurs de diff&#xE9;rents ph&#xE9;notypes, y compris l&#x26;#39;endoth&#xE9;lium immature.

Les cellules souches embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;es cellules endoth&#xE9;liales peut Manque compl&#xE9;ter la maturation fonctionnelle in vitro

Stammzell-Therapien werden erst klinisch relevant, wenn die Stammzellen in-vitro-Funktion wie die entsprechenden in-vivo unterschieden. Hier besch&auml;ftigten wir unsere zuvor entwickelten Techniken f&uuml;r die Ableitung von Endothelzellen (&gt; 96 % Reinheit) von Maus embryonalen Stammzellen (ESC) und verglich diese mit Maus Aorten Endothelzellen (MAEC) aus thorakalen Aortas gewonnen. ESC-abgeleitet von Endothelzellen (EG) des Prozesses Immunocytochemical Analyse zeigt, dass beide Zelltypen positiv f&uuml;r die EG-Marker-endotheliale Stickstoffmonoxid-Synthase (eNOS), Flk-1, Flt-1, vaskul&auml;ren endothelialen Cadherin (VEcad), Thrombozyten-endothelial Zelle sind Adh&auml;sion Molek&uuml;l-1 (PECAM-1) und CD34. Jedoch ESC-abgeleitete EG ausdr&uuml;cklich etwas weniger PECAM-1 und VE-Cadherin und bedeutend niedrigeren Niveau acetylierten low density Lipoprotein (LDL) Aufnahme und von-Willebrand-Faktor. Obwohl ESC-abgeleitete EG Ausdr&uuml;cken VE-Cadherin, der VE-Cadherin in der ESC-abgeleitete EG nicht sowie an die Zell-Zell-Kreuzungen wie die MAEC lokalisiert werden. Interessanterweise ESC-abgeleitete EG express viel h&ouml;heres Ma&szlig; an der Markierung endothelial und h&auml;matopoetischen Stammzellen CD34 und Vasculogenic und Angiogenese als MAEC sprie&szlig;en. Diese Ergebnisse zeigen, dass ESC-abgeleitete EG teilen einige Schl&uuml;sselmerkmale der &#39;Reife&#39; EG, unter Beibehaltung der Marker der alternativen Ph&auml;notypen einschlie&szlig;lich unreifen Endothel.

Embryonale Stammzellen Cell-derived Endothelzellen k&ouml;nnen komplette funktionelle Reifung in-vitro-fehlen.

Le terapie con cellule staminali diventano solo clinicamente rilevante se le cellule staminali differenziate in vitro funzione come le loro controparti in vivo. Qui, abbiamo impiegato le nostre tecniche precedentemente sviluppati per la derivazione di cellule endoteliali (&amp;gt; 96% di purezza) da mouse embryonic stem cells (ESC) e confrontato questi con mouse aortica cellule endoteliali (MAEC) ottenute da aortas toracica. Analisi immunocitochimiche delle cellule endoteliali ESC-derivato (CE) dimostra che entrambi i tipi di cella sono positivi per la CE marcatori endoteliali di ossido nitrico sintasi (eNOS), Flk-1, Flt-1, vascolare endoteliale caderina (VEcad), delle cellule endoteliali piastrinica adesione molecola-1 (PECAM-1) e CD34. Tuttavia, ESC-derivato CE express leggermente abbassare i livelli di PECAM-1 e VE-caderina e significativamente pi&ugrave; bassi livelli del fattore di assorbimento e di von Willebrand acetilato lipoproteine a bassa densit&agrave; (LDL). Anche se derivato da ESC CE express VE-caderina, VE-caderina nella CE ESC-derivato ha fatto non localizzare pure presso le giunzioni cellula-cellula come il MAEC. &Egrave; interessante notare che, ESC-derivato CE esprimono livelli molto maggiore del marcatore delle cellule staminali endoteliali ed ematopoietiche CD34 e vasculogenic e angiogenic germinazione rispetto MAEC. Questi risultati indicano che ESC-derivato CE condividono alcune caratteristiche chiave di CE &#39;maturo&#39;, pur mantenendo i marcatori di fenotipi alternativi tra cui endotelio immaturo.

Cellule endoteliali derivato da cellule staminali embrionali possono mancare completa maturazione funzionale in vitro.

&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D3;&#x30DC;&#x306E;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x7642;&#x6CD5;&#x3092;&#x98DF;&#x3044;&#x6B62;&#x3081;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;ESC&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#xFF08;&#x26;gt; 96&#xFF05;&#x7D14;&#x5EA6;&#xFF09;&#x5C0E;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x80F8;&#x90E8;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;MAEC&#xFF09;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002; ESC-&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#xFF08;EC&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306F;EC&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x578B;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;eNOS&#xFF09;&#x3001;Flk-1&#x3092;&#x3001;FLT-1&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;VEcad&#xFF09;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x967D;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;-1&#xFF08;PECAM-1&#xFF09;&#x3001;CD34&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;EC&#x6025;&#x884C;PECAM-1&#x304A;&#x3088;&#x3073;VE-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x306B;&#x4F4E;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;LDL&#xFF09;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x30D5;&#x30A9;&#x30F3;&#x30D3;&#x30EB;&#x30D6;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C8;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x4F4E;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;ESC&#x7531;&#x6765;&#x3002; ESC-&#x7531;&#x6765;&#x306E;EC&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308B;&#x304C;ESC&#x7531;&#x6765;&#x306E;EC&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x660E;&#x793A;&#x7684;&#x306A;VE-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;VE-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;MAEC&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x3067;&#x3082;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;ESC&#x7531;&#x6765;&#x306E;EC&#x6025;&#x884C;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;CD34&#x3068;&#x8108;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;MAEC&#x3088;&#x308A;&#x767A;&#x82BD;&#x65B0;&#x751F;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3002;&#x672A;&#x719F;&#x306A;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4EE3;&#x66FF;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;ESC-&#x7531;&#x6765;&#x306E;EC&#x30B7;&#x30A7;&#x30A2; &#x26;quot;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x26;quot; EC&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;

&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x6210;&#x719F;&#x3092;&#x5B8C;&#x4E86;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4E0D;&#x8DB3;

&#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC784;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD568;&#xC218; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB300;&#xC751;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB9CC; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACE0;&#xC6A9; (&amp;gt; 96% &#xC21C;&#xB3C4;) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (ESC)&#xC640; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (MAEC) &#xD749;&#xBD80; aortas&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC838;&#xC628;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC774; &#xBE44;&#xAD50;. ESC &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (EC)&#xC758; Immunocytochemical &#xBD84;&#xC11D; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xB450; &#xC140; &#xC885;&#xB958;&#xB294; EC &#xB9C8;&#xCEE4; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C; synthase (&#xB178;&#xC2A4;), Flk 1, Flt 1, &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; cadherin (VEcad), &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790;-1 (PECAM-1)&#xC640; CD34. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; esc &#xD0A4; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; EC &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xC57D;&#xAC04; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; PECAM 1 &#xBC0F; VE cadherin&#xC640; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; acetylated &#xC800;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (LDL) &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xBC0F; von Willebrand &#xC778;&#xC790;. ESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; EC VE cadherin &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xD560; &#xBE44;&#xB85D; ESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; EC&#xC5D0; VE cadherin&#xB294; MAEC&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, ESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; EC &#xD6E8;&#xC52C; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBC0F; &#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xC2DD; CD34 &#xBC0F; vasculogenic &#xBC0F; MAEC &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB3CB; &#xC544; angiogenic &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; ESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; EC &#xB300;&#xCCB4; &#xACE0;&#xAE30; &#xB4F1; &#xBBF8; &#xC219; endothelium &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#39;&#xC131;&#xC219;&#xD55C;&#39; EC&#xC758; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC8FC;&#xC694; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC744; &#xACF5;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC131;&#xC219; &#xCCB4; &#xC678; &#xBD80;&#xC871; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Terapias con c&#xE9;lulas madre s&#xF3;lo se har&#xE1; cl&#xED;nicamente relevante si las c&#xE9;lulas madre diferenciadas en funci&#xF3;n in vitro como in vivo en varios ejemplares. En este caso, hemos empleado las t&#xE9;cnicas previamente desarrolladas para derivar las c&#xE9;lulas endoteliales (pureza&#x26;gt; 96%) a partir de c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n (ESC) y los compar&#xF3; con las c&#xE9;lulas endoteliales de aorta de rat&#xF3;n (MAEC) obtenidos a partir de aortas tor&#xE1;cica. Inmuno an&#xE1;lisis de la ESC-derivados de c&#xE9;lulas endoteliales (CE) demuestra que ambos tipos de c&#xE9;lulas son positivas para la CE marcadores de &#xF3;xido n&#xED;trico sintasa endotelial (eNOS), FLK-1, Flt-1, cadherina endotelial vascular (VeCAD), plaquetas de adhesi&#xF3;n celular endotelial mol&#xE9;cula-1 (PECAM-1), y CD34. Sin embargo, el CES-derivada CE expresa ligeramente inferiores niveles de PECAM-1 y VE-cadherina, y niveles significativamente m&#xE1;s bajos de acetilado lipoprote&#xED;na de baja densidad (LDL), la captaci&#xF3;n y el factor de von Willebrand. Aunque CES derivados CE expresan el VE-cadherina, la VE-cadherina en el CES-derivada CE no localizar y en las uniones c&#xE9;lula-c&#xE9;lula, como en el MAEC. Curiosamente, el CES-derivada CE expresa un grado mucho mayor de la madre hematopoy&#xE9;ticas CD34 endotelial y marcadores de c&#xE9;lulas y vasculog&#xE9;nica y angiog&#xE9;nicos surgimiento de MAEC. Estos resultados indican que el ESC derivados de cuota de la CE algunas caracter&#xED;sticas clave de &#x26;quot;maduro&#x26;quot; CE, mientras que conserva los marcadores de fenotipos alternativos, incluyendo endotelio inmaduro.

Madre embrionarias derivadas de la c&#xE9;lula, las c&#xE9;lulas endoteliales puede Falta completar la maduraci&#xF3;n funcional in vitro

&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x6E90;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x589E;&#x6B96;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x5353;) &#x4F7F;&#x7528; Flk-1 &#x6392;&#x5E8F;&#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;VEGF &#x8865;&#x5145;&#x548C;&#x4E00;&#x79CD;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x624B;&#x5DE5;&#x6311;&#x9009;&#x6280;&#x672F;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x53CA;&#x6269;&#x5F20;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B64;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x63A8;&#x5BFC;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5F88;&#x53EF;&#x80FD;&#x83B7;&#x5F97;&#x6570;&#x4EE5;&#x767E;&#x4E07;&#x8BA1;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x8FBE;&#x5230; 25 &#x4EBA;&#x53E3;&#x5E76;&#x5408;&#x6570;&#x7684;&#x5404;&#x4E2A;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;

&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Vascular progenitor cells derived from stem cells could potentially lead to a variety of clinically relevant applications, including cell-based therapies and tissue engineering. Here, we describe methods for isolating purified proliferating populations of vascular endothelial cells from mouse embryonic stem cells (mESC) using Flk-1 positive sorted cells, VEGF supplementation, and a rigorous manual selection technique required for endothelial cell purification and expansion. Using this in vitro derivation procedure, it is possible to obtain millions of cells at various stages of differentiation, with the potential for up to 25 population doublings.

Endothelial differentiation of embryonic stem cells.

Cellules prog&eacute;nitrices vasculaire d&eacute;riv&eacute;es de cellules souches pourraient entra&icirc;ner une vari&eacute;t&eacute; d&#39;applications cliniquement pertinentes, y compris les th&eacute;rapies &agrave; base cellulaire et ing&eacute;nierie tissulaire. Nous d&eacute;crivons ici les m&eacute;thodes pour isoler les populations prolif&eacute;rantes purifi&eacute;es des cellules endoth&eacute;liales vasculaires de souris embryonnaire de cellules souches (mESC) &agrave; l&#39;aide de cellules tri&eacute;es Flk-1, suppl&eacute;mentation de VEGF et une technique rigoureuse s&eacute;lection manuelle requise pour purification de cellules endoth&eacute;liales et expansion. &Agrave; l&#39;aide de cette proc&eacute;dure de d&eacute;rivation in vitro, il est possible d&#39;obtenir des millions de cellules &agrave; diff&eacute;rents stades de diff&eacute;renciation, avec un potentiel de jusqu&#39;&agrave; 25 doublements de population.

Diff&eacute;renciation endoth&eacute;liale de cellules souches embryonnaires.

Vaskul&auml;re Progenitorzellen abgeleitet von Stammzellen k&ouml;nnte potenziell zu einer Vielzahl von klinisch relevanten Anwendungen, einschlie&szlig;lich zellbasierte Therapien und Tissue Engineering. Hier beschreiben wir Methoden f&uuml;r die Isolierung von gereinigter wuchernden Populations von vaskul&auml;ren Endothelzellen von Maus embryonalen Stammzellen (mESC) mit Flk-1 positive sortierte Zellen, VEGF-Erg&auml;nzung und eine strenge Auswahl der manuellen Technik f&uuml;r Endothelzellen Reinigung und Erweiterung erforderlich. Bei diesem in-vitro-Ableitung-Verfahren ist es m&ouml;glich, die Millionen von Zellen in den verschiedenen Stadien der Differenzierung, mit dem Potential f&uuml;r bis zu 25 Verdoppelungen der Bev&ouml;lkerung zu erhalten.

Endothelialen Differenzierung der embryonalen Stammzellen.

Cellule progenitrici vascolari derivate da cellule staminali potrebbero potenzialmente portare ad una variet&agrave; di applicazioni clinicamente rilevanti, comprese le terapie cell-based e l&#39;ingegneria tessutale. Qui, descriviamo metodi per isolare purificate popolazioni proliferazione delle cellule endoteliali vascolari da mouse embrionale staminali (mescita) utilizzando cellule ordinate positive Flk-1, supplementazione di VEGF e una tecnica rigorosa selezione manuale necessaria per la purificazione delle cellule endoteliali e l&#39;espansione. Usando questa procedura di derivazione in vitro, &egrave; possibile ottenere milioni di cellule nelle varie fasi di differenziazione, con il potenziale per fino a 25 accoppiamenti di popolazione.

Endoteliali differenziazione delle cellule staminali embrionali.

&#x8840;&#x7BA1;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30BB;&#x30EB; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3084;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; (mESC) Flk 1 &#x6B63;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3001;VEGF &#x88DC;&#x7D66;&#x3068;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x624B;&#x52D5;&#x9078;&#x629E;&#x624B;&#x6CD5;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D44;&#x5316;&#x3068;&#x62E1;&#x5927;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5897;&#x6B96;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x9694;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E; in vitro &#x306E;&#x5C0E;&#x51FA;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x529B;&#x3092; 25 &#x4EBA;&#x53E3; doublings &#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x767E;&#x4E07;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

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C&eacute;lulas progenitoras vascular de v&aacute;stago potencialmente podr&iacute;an conducir a una variedad de aplicaciones cl&iacute;nicamente relevantes, incluyendo terapia celular e ingenier&iacute;a de tejidos. Aqu&iacute; se describen m&eacute;todos para aislar poblaciones purificadas proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas endoteliales vasculares de rat&oacute;n embrionaria c&eacute;lulas madre (mESC) usando las c&eacute;lulas ordenadas positivas Flk-1, la suplementaci&oacute;n de VEGF y una t&eacute;cnica rigurosa selecci&oacute;n manual necesaria para la purificaci&oacute;n de la c&eacute;lula endotelial y expansi&oacute;n. Usar este procedimiento de derivaci&oacute;n in vitro, es posible obtener millones de c&eacute;lulas en diversas etapas de la diferenciaci&oacute;n, con un potencial de hasta 25 doblajes de la poblaci&oacute;n.

Endotelial diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre embrionarias.

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Mechanical forces are important signals in the development and function of the heart and lung, growth of skin and muscle, and maintenance of cartilage and bone. The specific mechanical force "shear stress" has been implicated as playing a critical role in the physiological responses of blood vessels through endothelial cell signaling. More recently, studies have shown that shear stress can induce differentiation of stem cells toward both endothelial and bone-producing cell phenotypes. This review will highlight current data supporting the role of shear stress in stem cell fate and will propose potential mechanisms and signaling cascades for transducing shear stress into a biological signal.

Can shear stress direct stem cell fate?

Les forces m&eacute;caniques sont des signaux importants dans le d&eacute;veloppement et le fonctionnement du coeur et des poumons, la croissance de la peau et des muscles et l&#39;entretien des cartilages et des os. La force m&eacute;canique sp&eacute;cifique &laquo; cisaillement &raquo; a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;e comme jouant un r&ocirc;le essentiel dans les r&eacute;actions physiologiques des vaisseaux sanguins par le biais de la signalisation des cellules endoth&eacute;liales. Plus r&eacute;cemment, des &eacute;tudes ont montr&eacute; que la contrainte de cisaillement peut induire la diff&eacute;renciation des cellules souches vers les deux ph&eacute;notypes de cellules endoth&eacute;liales et celui des os. Cet examen mettra en &eacute;vidence les donn&eacute;es actuelles soutenant le r&ocirc;le de la contrainte de cisaillement dans le destin des cellules souches et proposera des m&eacute;canismes potentiels et des cascades de signalisation pour la transduction de la contrainte de cisaillement dans un signal biologique.

Peut la contrainte de cisaillement direct sort de cellules souches ?

Mechanische Kr&auml;fte sind wichtige Signale in der Entwicklung und Funktion des Herzens und der Lunge, Wachstum von Haut und Muskeln und Erhaltung von Knorpel und Knochen. Die spezifische mechanische Kraft &quot;Schubspannung&quot; hat verwickelt, als eine entscheidende Rolle spielen, in die physiologischen Reaktionen der Blutgef&auml;&szlig;e durch endothelial Zellen zu signalisieren. In j&uuml;ngerer Zeit, haben Studien gezeigt, dass die Schubspannung Differenzierung von Stammzellen in Richtung beider Ph&auml;notypen endothelial und Knochen-produzierenden Zelle veranlassen k&ouml;nnen. Diesen Bericht beleuchten aktuelle Daten zur Unterst&uuml;tzung der Rolle der Schubspannung in Stammzell-Schicksal und schl&auml;gt m&ouml;gliche Mechanismen und Signalisierung Kaskaden f&uuml;r transducing Schubspannung in ein biologisches Signal.

Kann die Schubspannung Stammzelle Schicksal leiten?

Forze meccaniche sono segnali importanti nello sviluppo e nella funzione del cuore e del polmone, la crescita del muscolo e della pelle e la manutenzione della cartilagine e dell&#39;osso. Lo specifica forza meccanica &quot;shear stress&quot; &egrave; stato implicato come giocare un ruolo fondamentale nelle risposte fisiologiche dei vasi sanguigni attraverso la segnalazione delle cellule endoteliali. Pi&ugrave; recentemente, gli studi hanno dimostrato che lo shear stress pu&ograve; indurre la differenziazione delle cellule staminali verso entrambi fenotipi di cellule endoteliali e la produzione di osso. Questa recensione evidenzier&agrave; i dati correnti, sostenendo il ruolo della sollecitazione di taglio nel destino delle cellule staminali e proporr&agrave; potenziali meccanismi e cascate di segnalazione per transducing shear stress in un segnale biologico.

Shear stress &egrave; in grado di direzionare il destino delle cellule staminali?

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&#xC218; &#xC804;&#xB2E8; &#xC751;&#xB825; &#xC9C1;&#xC811; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC6B4;&#xBA85;?

Fuerzas mec&aacute;nicas son se&ntilde;ales importantes en el desarrollo y la funci&oacute;n del coraz&oacute;n y pulm&oacute;n, crecimiento de la piel y el m&uacute;sculo y el mantenimiento del cart&iacute;lago y del hueso. La fuerza mec&aacute;nica espec&iacute;fica &quot;tensi&oacute;n de esquileo&quot; se ha implicado como desempe&ntilde;ando un papel cr&iacute;tico en las respuestas fisiol&oacute;gicas de los vasos sangu&iacute;neos a trav&eacute;s de la se&ntilde;alizaci&oacute;n de las c&eacute;lulas endoteliales. M&aacute;s recientemente, los estudios han demostrado que la tensi&oacute;n de esquileo puede inducir la diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre hacia ambos fenotipos de la c&eacute;lula endotelial y productoras de hueso. Esta revisi&oacute;n har&aacute; hincapi&eacute; en datos actuales, apoyando la funci&oacute;n de la tensi&oacute;n de esquileo en el destino de la c&eacute;lula de v&aacute;stago y propondr&aacute; mecanismos potenciales y cascadas de se&ntilde;ales de transducci&oacute;n de esfuerzo cortante en una se&ntilde;al biol&oacute;gica.

&iquest;Puede dirigir la tensi&oacute;n de esquileo destino de c&eacute;lulas madre?

(EB) &#x80DA;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x5BC6;&#x5207;&#x5408;&#x4F5C;&#x7EAA;&#x8981;&#x6CBF;&#x88AD;&#x627F;&#x8BFA;&#x5BF9;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x6781;&#x5927;&#x5730;&#x53D7;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x96C6;&#x6599;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x521D;&#x59CB;&#x6570;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x57FA;&#x677F;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x662F;&#x7EDF;&#x4E00; EB &#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x53C2;&#x6570;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x8D85;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684;&#x5236;&#x4F5C;&#x548C;&#x6587;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5229;&#x7528;&#x6FC0;&#x5149;&#x55B7;&#x58A8;&#x6253;&#x5370;&#x673A;&#x751F;&#x6210;&#x5BC6;&#x5207;&#x9635;&#x5217;&#x8702;&#x7A9D;&#x5FAE;&#x5B54;&#x7684;&#x53EF;&#x8C03;&#x5927;&#x5C0F;&#x5747;&#x5300; EBs &#x4ECE;&#x5355;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x60AC;&#x6DB2;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6253;&#x5370;&#x5404;&#x79CD;&#x5FAE;&#x5B54;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5230;&#x9884;&#x5E94;&#x529B;&#x805A;&#x82EF;&#x677F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x901A;&#x8FC7;&#x70ED;&#x81F4;&#x6536;&#x7F29;&#xFF0C;&#x751F;&#x6210;&#x9AD8;&#x65B9;&#x9762; micromolds&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x5FAE;&#x7EC6;&#x52A0;&#x5DE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7403;&#x9762; EBs &#x5B9E;&#x73B0;&#x5706;&#x7684;&#x5E95;&#x805A;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x7845;&#x6C27;&#x70F7; (PDMS) &#x4E95;&#x4E0D;&#x5BB9;&#x6613;&#x5B9E;&#x73B0;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x7B80;&#x5355;&#x5730;&#x63A7;&#x5236;&#x5FAE;&#x5B54;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x548C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x60AC;&#x6D6E;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x521D;&#x59CB;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5F71;&#x54CD;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5FAE;&#x5B54;&#x662F;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x9002;&#x5E94;&#x548C;&#x53EF;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x6700;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x4E95;&#x677F;&#x548C;&#x8F7B;&#x677E;&#x5730;&#x96C6;&#x6210;&#x5230;&#x5546;&#x4E1A;&#x6DB2;&#x4F53;&#x5904;&#x7406;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5EC9;&#x4EF7;&#x800C;&#x4FBF;&#x6377;&#x7684;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x590D;&#x5408;&#x7B5B;&#x9009;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

&#x53EF;&#x8C03;&#x8C10;&#x6536;&#x7F29;&#x5F15;&#x8D77;&#x8702;&#x7A9D;&#x5FAE;&#x5B54;&#x9635;&#x5217;&#x4E3A;&#x7EDF;&#x4E00;&#x7684;&#x80DA;&#x4F53;&#x7684;&#x3002;

Embryoid body (EB) formation closely recapitulates early embryonic development with respect to lineage commitment. Because it is greatly affected by cell-cell and cell-substrate interactions, the ability to control the initial number of cells in the aggregates and to provide an appropriate substrate are crucial parameters for uniform EB formation. Here we report of an ultra-rapid fabrication and culture method utilizing a laser-jet printer to generate closely arrayed honeycomb microwells of tunable sizes for the induction of uniform EBs from single cell suspension. By printing various microwell patterns onto pre-stressed polystyrene sheets, and through heat induced shrinking, high aspect micromolds are generated. Notably, we achieve rounded bottom polydimethylsiloxane (PDMS) wells not easily achievable with standard microfabrication methods, but critical to achieve spherical EBs. Furthermore, by simply controlling the size of the microwells and the concentration of the cell suspension we can control the initial size of the cell aggregate, thus influencing lineage commitment. In addition, these microwells are easily adaptable and scalable to most standard well plates and easily integrated into commercial liquid handling systems to provide an inexpensive and easy high throughput compound screening platform.

Tunable shrink-induced honeycomb microwell arrays for uniform embryoid bodies.

Embryo&#xEF;des corps (EB) de formation de pr&#xE8;s r&#xE9;capitule le d&#xE9;veloppement embryonnaire pr&#xE9;coce par rapport &#xE0; l&#x26;#39;engagement de la lign&#xE9;e. Parce qu&#x26;#39;il est grandement affect&#xE9;e par la cellule-cellule et cellule-substrat interactions, la capacit&#xE9; de contr&#xF4;ler le nombre initial de cellules dans les agr&#xE9;gats et de fournir un substrat appropri&#xE9; sont des param&#xE8;tres cruciaux pour la formation EB uniforme. Nous rapportons ici d&#x26;#39;une fabrication ultra-rapide et m&#xE9;thode de culture en utilisant une imprimante laser jet de g&#xE9;n&#xE9;rer pr&#xE8;s dispos&#xE9;s en nid d&#x26;#39;abeille micropuits de tailles accordables pour l&#x26;#39;induction de l&#x26;#39;uniforme de la suspension EB seule cellule. En imprimant divers modes de micropuits sur des feuilles de polystyr&#xE8;ne pr&#xE9;-stress&#xE9;es, et par la chaleur induite diminue, micromolds aspect &#xE9;lev&#xE9;s sont g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s. Notamment, nous atteignons arrondis fond polydim&#xE9;thylsiloxane (PDMS) puits n&#x26;#39;est pas facilement r&#xE9;alisables avec des m&#xE9;thodes de microfabrication standard, mais essentielle pour atteindre sph&#xE9;rique EBS. Par ailleurs, en contr&#xF4;lant simplement la taille de la micropuits et la concentration de la suspension cellulaire, nous pouvons contr&#xF4;ler la taille initiale de l&#x26;#39;agr&#xE9;gat de cellules, influen&#xE7;ant ainsi l&#x26;#39;engagement de la lign&#xE9;e. En outre, ces micropuits sont facilement adaptables et &#xE9;volutives &#xE0; la plupart des plaques standard ainsi et facilement int&#xE9;gr&#xE9;es dans les syst&#xE8;mes commerciaux de la manipulation de liquides pour fournir une plate-forme peu co&#xFB;teuse et facile criblage &#xE0; haut d&#xE9;bit compos&#xE9;.

Accordables Shrink-induites en nid d&#x26;#39;abeille tableaux micropuits pour uniformes des corps embryo&#xEF;des

Embryoid K&ouml;rper (EB) Bildung rekapituliert eng fr&uuml;hen embryonalen Entwicklung in Bezug auf Linie Engagement. Da es von Zell-Zell und Zell-Substrat Interaktionen stark betroffen ist, die M&ouml;glichkeit, die anf&auml;ngliche Anzahl von Zellen in den Aggregaten zu steuern und zu einem entsprechenden Substrat sind entscheidende Parameter f&uuml;r einheitliche EB-Bildung. Hier berichten wir einer Vorbereiter Fabrikation und Kultur-Methode unter Verwendung eines Laser-Jet-Druckers, eng zu generieren die Waben Inkubation einstellbare Gr&ouml;&szlig;en f&uuml;r die Induktion von einheitlichen EBs aus einzelnen Zellsuspension angetreten. Durch Drucken verschiedene Microwell-Muster auf vorgespannten Polystyrol-Platten und durch Hitze induzierte schrumpfen, werden hohe Aspekt Micromolds generiert. Bemerkenswert ist, erreichen wir abgerundeten unteren Polydimethylsiloxan (PDMS) Brunnen nicht so einfach umsetzbar sind mit standard Microfabrication Methoden, aber entscheidend f&uuml;r sph&auml;rische EBs zu erreichen. Einfach zu steuern, die Gr&ouml;&szlig;e der die Vertiefungen und die Konzentration der Zellsuspension k&ouml;nnen wir dar&uuml;ber hinaus die Anfangsgr&ouml;&szlig;e des Geldmengenaggregats Zelle steuern somit beeinflusst Linie Engagement. Dar&uuml;ber hinaus sind diese Vertiefungen, leicht anpassbar und skalierbar, um die meisten standard-well-Platten und leicht integriert in kommerziellen Liquid handling Systemen um eine billig und einfach Hochdurchsatz-Verbindungs-Screening-Plattform anzubieten.

Einstellbare Schrumpf-induzierte Waben Microwell-Arrays f&uuml;r einheitliche Embryoid K&ouml;rper.

Formazione del corpo embryoid (EB) strettamente ricapitola lo sviluppo embrionale precoce per quanto riguarda l&#39;impegno di lignaggio. Perch&eacute; &egrave; notevolmente influenzato dalle interazioni cellula-cellula e cellula-substrato, la capacit&agrave; di controllare il numero iniziale di cellule in aggregati e di fornire un adeguato substrato sono parametri cruciali per la formazione di EB uniforme. Qui riportiamo di un metodo di fabbricazione e cultura ultra-rapido utilizzando una stampante laser jet per generare strettamente schierati micropozzetti a nido d&#39;ape di dimensioni sintonizzabile per l&#39;induzione di EBs uniforme dalla sospensione unicellulare. Per stampa di vari modelli di pozzetti su lastre di polistirene precompresso e attraverso il calore indotto shrinking, aspetto alta micromolds vengono generati. In particolare, raggiungiamo il fondo arrotondato polidimetilsilossano (PDMS) pozzi non facilmente ottenibile con metodi standard microfabbricazione, ma fondamentale per raggiungere EBs sferica. Inoltre, semplicemente controllando la dimensione dei micropozzetti e la concentrazione della sospensione cellulare possiamo controllare la dimensione iniziale dell&#39;aggregato cellulare, influenzando cos&igrave; l&#39;impegno di lignaggio. Inoltre, questi pozzetti sono facilmente adattabili e scalabile per le piastre ben pi&ugrave; standard e facilmente integrato nel liquido commerciale gestisce sistemi per fornire una piattaforma di screening composto poco costoso e facile ad alto rendimento.

Matrici di micropozzetti sintonizzabile shrink-indotta a nido d&#39;ape per i corpi embryoid uniformi.

&#x80DA;&#x69D8;&#x4F53;&#xFF08;EB&#xFF09;&#x5F62;&#x6210;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x53CD;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE; - &#x57FA;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x96C6;&#x8A08;&#x4E2D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x5024;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x57FA;&#x677F;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x5747;&#x4E00;&#x306A;EB&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8D85;&#x9AD8;&#x901F;&#x52A0;&#x5DE5;&#x3068;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5747;&#x4E00;&#x306A;EB&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8ABF;&#x6574;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x914D;&#x5217;&#x30CF;&#x30CB;&#x30AB;&#x30E0;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B8;&#x30A7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30BF;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x57F9;&#x990A;&#x6CD5;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3002;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x4E0A;&#x306B;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x5370;&#x5237;&#x3057;&#x3001;&#x71B1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53CE;&#x7E2E;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x9AD8;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;micromolds&#x304C;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x5FAE;&#x7D30;&#x52A0;&#x5DE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x7403;&#x72B6;&#x306E;EB&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x4E38;&#x3044;&#x5E95;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B7;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#xFF08;PDMS&#xFF09;&#x4E95;&#x6238;&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5358;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30E9;&#x30D6;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3001;&#x5B89;&#x4FA1;&#x3067;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5546;&#x696D;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30CF;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5236;&#x670D;&#x80DA;&#x69D8;&#x4F53;&#x306E;&#x8ABF;&#x6574;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30B7;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30CF;&#x30CB;&#x30AB;&#x30E0;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;

Embryoid &#xBC14;&#xB514; (EB) &#xD615;&#xC131; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xD608;&#xD1B5;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD558;&#xC5EC; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC140; &#xBC0F; &#xC140; &#xAE30;&#xD310; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xCD08;&#xAE30; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xC218;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xACE0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC720;&#xB2C8;&#xD3FC; EB &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC6B8;&#xD2B8;&#xB77C; &#xC81C;&#xC791;&#xACFC; &#xBB38;&#xD654; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xC11C; &#xC2A4; &#xD39C; &#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADE0;&#xC77C; &#xD55C; Ebs&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xC704;&#xD55C; &#xAC00;&#xBCC0; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xBC8C;&#xC9D1; microwells &#xC9D3;&#xACE0; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xC81C;&#xD2B8; &#xD504;&#xB9B0;&#xD130;&#xB97C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xD504;&#xB9AC; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD2F0; &#xB80C; &#xC2DC;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xACE0; &#xC5F4; &#xC720;&#xB3C4; &#xCD95;&#xC18C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; microwell &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xC778;&#xC1C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xB192;&#xC740; &#xCE21;&#xBA74; micromolds &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAD6C;&#xBA74; Ebs&#xB97C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD45C;&#xC900; &#xC81C;&#xC791; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xB465;&#xADFC;&#xB41C; &#xD558;&#xB2E8; polydimethylsiloxane (PDMS) &#xC6F0; &#xC2A4; &#xC27D;&#xAC8C; &#xB2EC;&#xC131; &#xB2EC;&#xC131;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xAC8C;&#xB294; microwells&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xD604; &#xD0C1; &#xC561;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD560; &#xC218; &#xC140; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xD06C;&#xAE30; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD608;&#xD1B5;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; microwells &#xC27D;&#xAC8C; &#xC801;&#xC751; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xD45C;&#xC900; &#xC798; &#xBC88;&#xD638;&#xD310; &#xD655;&#xC7A5;&#xC131; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xC5C5; &#xC561;&#xCCB4; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC800;&#xB834; &#xD558; &#xACE0; &#xC27D;&#xAC8C; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xBCF5;&#xD569; &#xC0C1;&#xC601; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC27D;&#xAC8C; &#xD1B5;&#xD569; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAC00;&#xBCC0; &#xCD95;&#xC18C; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC8C;&#xC9D1; microwell &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xADE0;&#xC77C; embryoid &#xC2DC;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

Cuerpo embrioides (EB) de formaci&#xF3;n de cerca recapitula el desarrollo embrionario temprano con respecto al compromiso del linaje. Debido a que est&#xE1; muy afectada por c&#xE9;lula-c&#xE9;lula y las interacciones c&#xE9;lula-sustrato, la capacidad de controlar el n&#xFA;mero inicial de c&#xE9;lulas en los agregados y para proporcionar un sustrato apropiado son par&#xE1;metros cruciales para la formaci&#xF3;n de EB uniforme. Aqu&#xED; nos informe de una fabricaci&#xF3;n ultra-r&#xE1;pido y m&#xE9;todo de cultivo utilizando una impresora de chorro de l&#xE1;ser para generar estrechamente dispuestas micropocillos panal de tama&#xF1;os ajustables para la inducci&#xF3;n de uniforme EBs de suspensi&#xF3;n de c&#xE9;lulas individuales. Al imprimir varios patrones de micropocillos en planchas de poliestireno pre-tensadas, y por medio de calor inducido disminuye, micromoldes altas aspecto se generan. En particular, logramos redondeados fondo polidimetilsiloxano (PDMS) pozos no f&#xE1;cilmente alcanzables con los m&#xE9;todos est&#xE1;ndar de microfabricaci&#xF3;n, pero fundamental para lograr esf&#xE9;rica EBS. Adem&#xE1;s, simplemente controlando el tama&#xF1;o de la micropocillos y la concentraci&#xF3;n de la suspensi&#xF3;n celular se puede controlar el tama&#xF1;o inicial del agregado de c&#xE9;lulas, influyendo compromiso linaje. Adem&#xE1;s, estos pocillos son f&#xE1;cilmente adaptables y escalan a placas m&#xE1;s est&#xE1;ndar y puede integrar f&#xE1;cilmente en sistemas comerciales de manejo de l&#xED;quidos para proporcionar un bajo costo y f&#xE1;cil compuesto de alto rendimiento plataforma de cribado.

Sintonizables Reducir inducidos Honeycomb micropocillos matrices para uniformes cuerpos embrionarios

&#x7EB3;&#x7C73;&#x7EA7;&#x4E2D;&#x5C0F;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x5730;&#x5F62;&#x63D0;&#x793A;&#x64AD;&#x653E;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x548C;&#x7EF4;&#x6301;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5F62;&#x6001;&#x3001; &#x7C98;&#x8FDE;&#x3001; &#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x548C;&#x901A;&#x4FE1;&#x4E2D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E00;&#x7EA7;&#x662F;&#x7CBE;&#x7F8E;&#x654F;&#x611F;&#x5230;&#x673A;&#x68B0;&#x63D0;&#x793A;&#x5728;&#x7EB3;&#x7C73;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x548C;&#x5FAE;&#x578B;&#x4E00;&#x7EA7;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5236;&#x4F5C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5B58;&#x5728;&#x751F;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x5730;&#x5F62;&#x7279;&#x5F81;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5F53;&#x524D;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4E0E;&#x7EB3;&#x7C73;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x51B3;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x662F;&#x901A;&#x5E38;&#x590D;&#x6742;&#x3001; &#x8D39;&#x7528;&#x6602;&#x8D35;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x4E0D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BBF;&#x95EE;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x6A21;&#x62DF;&#x8F7B;&#x7387;&#x548C;&#x5F3A;&#x5065;&#x7684;&#x5FC3;&#x810F;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5BF9;&#x9F50;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7684;&#x5FC3;&#x590D;&#x6742;&#x5404;&#x5411;&#x5F02;&#x6027;&#x548C;&#x591A;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x4EFF;&#x751F;&#x76B1;&#x7EB9;&#x53EF;&#x8C03;&#x8C10;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x65E2;&#x65B0;&#x751F;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x90A3;&#x4E9B;&#x6E90;&#x81EA;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5BF9;&#x9F50;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x6A21;&#x4EFF;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x9488;&#x72B6;&#x7F51;&#x7EDC;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x65F6;&#x548C;&#x56E0;&#x6B64;&#x5BF9;&#x50CF;&#x5730;&#x5F62;&#x63D0;&#x793A;&#x4F53;&#x5185;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x751F;&#x7406;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7814;&#x7A76;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3002;

&#x591A;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x4EFF;&#x751F;&#x5730;&#x5F62;&#x4E3A;&#x65B0;&#x751F;&#x513F;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5BF9;&#x9F50;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7684;&#x3002;

Nano- and microscale topographical cues play critical roles in the induction and maintenance of various cellular functions, including morphology, adhesion, gene regulation, and communication. Recent studies indicate that structure and function at the heart tissue level is exquisitely sensitive to mechanical cues at the nano-scale as well as at the microscale level. Although fabrication methods exist for generating topographical features for cell culture, current techniques, especially those with nanoscale resolution, are typically complex, prohibitively expensive, and not accessible to most biology laboratories. Here, we present a tunable culture platform comprised of biomimetic wrinkles that simulate the heart's complex anisotropic and multiscale architecture for facile and robust cardiac cell alignment. We demonstrate the cellular and subcellular alignment of both neonatal mouse cardiomyocytes as well as those derived from human embryonic stem cells. By mimicking the fibrillar network of the extracellular matrix, this system enables monitoring of protein localization in real time and therefore the high-resolution study of phenotypic and physiologic responses to in-vivo like topographical cues.

Multiscale biomimetic topography for the alignment of neonatal and embryonic stem cell-derived heart cells.

Indices Nano-et micro-topographiques jouent un r&#xF4;le critique dans l&#x26;#39;induction et l&#x26;#39;entretien des diverses fonctions cellulaires, y compris la morphologie, l&#x26;#39;adh&#xE9;rence, la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes, et de la communication. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes indiquent que la structure et la fonction au niveau du tissu cardiaque est extr&#xEA;mement sensible &#xE0; des signaux m&#xE9;caniques &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle nanom&#xE9;trique ainsi que sur le plan microscopique. Bien que les m&#xE9;thodes de fabrication existent pour g&#xE9;n&#xE9;rer les caract&#xE9;ristiques topographiques pour la culture cellulaire, les techniques actuelles, en particulier ceux avec une r&#xE9;solution nanom&#xE9;trique, sont g&#xE9;n&#xE9;ralement complexes, trop co&#xFB;teux, et non accessible &#xE0; la plupart des laboratoires de biologie. Ici, nous pr&#xE9;sentons une plate-forme de la culture accordable compos&#xE9; de rides biomim&#xE9;tiques qui simulent anisotrope complexe du c&#x153;ur et de l&#x26;#39;architecture multi-&#xE9;chelle pour l&#x26;#39;alignement des cellules facile et robuste cardiaque. Nous d&#xE9;montrons l&#x26;#39;alignement cellulaire et subcellulaire des deux cardiomyocytes de souris n&#xE9;onatales ainsi que ceux issus de cellules souches embryonnaires humaines. En imitant le r&#xE9;seau fibrillaire de la matrice extracellulaire, ce syst&#xE8;me permet la surveillance de la localisation des prot&#xE9;ines en temps r&#xE9;el et par cons&#xE9;quent l&#x26;#39;&#xE9;tude &#xE0; haute r&#xE9;solution des r&#xE9;ponses ph&#xE9;notypiques et physiologiques &#xE0; in-vivo, comme les indices topographiques.

Multi&#xE9;chelle Topographie biomim&#xE9;tique pour l&#x26;#39;alignement des cellules souches n&#xE9;onatales et embryonnaire Coeur d&#xE9;riv&#xE9;s de cellules

Nano- und Microscale topographische Hinweise spielen wichtige Rollen bei der Induktion und Wartung der verschiedenen Zellfunktionen, einschlie&szlig;lich Morphologie, Adh&auml;sion, Genregulation und Kommunikation. Neuere Studien zeigen, dass die Struktur und Funktion auf der Ebene des Herzens-Gewebe ist vorz&uuml;glich empfindlich auf mechanische Hinweise auf Nanoebene sowie auf die Microscale-Ebene. Obwohl Fabrikation Methoden bestehen f&uuml;r das Generieren von topographische Eigenschaften f&uuml;r die Zellkultur, sind aktuelle Techniken, vor allem solche mit nanoskaligen Aufl&ouml;sung, in der Regel komplex, unerschwinglich teuer und nicht f&uuml;r die meisten Biologie Labors zug&auml;nglich. Hier pr&auml;sentieren wir eine einstellbare Kultur-Plattform bestehend aus biomimetische Falten, die das Herz komplexe anisotropen und Multiskalen-Architektur f&uuml;r einfache und robuste Herzzelle Ausrichtung zu simulieren. Wir demonstrieren die zellul&auml;re und subzellul&auml;re Ausrichtung der beiden Neugeborenen Maus Cardiomyocytes sowie aus humanen embryonalen Stammzellen. Durch die Nachahmung des fibrillar Netzwerks der extrazellul&auml;ren Matrix, erm&ouml;glicht dieses System die &Uuml;berwachung der Proteinlokalisation in Echtzeit und daher das hochaufl&ouml;sende Studium der ph&auml;notypischen und physiologische Reaktionen auf in-Vivo wie topographische Hinweise.

Multiskalen biomimetische Topographie f&uuml;r die Ausrichtung des Neugeborenen und embryonalen Stammzellen Cell-derived Herzzellen.

Nano - e Microscala spunti topografici giocano un ruolo critico nell&#39;induzione e nel mantenimento delle varie funzioni cellulari, tra cui morfologia, adesione, regolazione genica e comunicazione. Studi recenti indicano che la struttura e funzione a livello del tessuto del cuore &egrave; squisitamente sensibile alle meccanici spunti su scala nano, cos&igrave; come a livello di Microscala. Anche se esistono metodi di fabbricazione per la generazione di caratteristiche topografiche per la coltura cellulare, le attuali tecniche, particolarmente quelli con risoluzione nanometrica, sono in genere complessi proibitivamente costoso e non accessibile alla maggior parte dei laboratori di biologia. Presentiamo qui, una piattaforma di cultura sintonizzabile composta biomimetico rughe che simulano la complessa architettura anisotropo e multiscala di cuore per l&#39;allineamento delle cellule cardiache facile e robusto. Dimostriamo l&#39;allineamento cellulare e subcellulare di sia cardiomiociti neonatali del mouse cos&igrave; come quelli derivati da cellule staminali embrionali umane. Imitando la rete fibrillare della matrice extracellulare, questo sistema consente il monitoraggio di localizzazione della proteina in tempo reale e quindi lo studio ad alta risoluzione delle risposte fenotipiche e fisiologiche in vivo come spunti topografici.

Topografia biomimetici multiscala per l&#39;allineamento delle cellule del cuore derivato da cellule staminali embrionali e neonatale.

&#x30CA;&#x30CE;&#xB7;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5730;&#x5F62;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x614B;&#x3001;&#x63A5;&#x7740;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5236;&#x5FA1;&#x3001;&#x901A;&#x4FE1;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D44;&#x7E54;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306B;&#x7D76;&#x5999;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x88FD;&#x9020;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5730;&#x5F62;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3001;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3082;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x9AD8;&#x4FA1;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x3067;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5BB9;&#x6613;&#x306A;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5FC3;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x7570;&#x65B9;&#x6027;&#x3068;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x3092;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DF;&#x30E1;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x308F;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8ABF;&#x6574;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6587;&#x5316;&#xB7;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x914D;&#x7F6E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x5730;&#x5F62;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x3001;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DF;&#x30E1;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5730;&#x5F62;

&#xB098;&#xB178; &#xBC0F; microscale &#xC9C0;&#xD615; &#xB2E8;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;, &#xC811;&#xCC29;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808;, &#xD1B5;&#xC2E0; &#xB4F1; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC720;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC870;&#xC9C1; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC808; &#xBB18;&#xD558;&#xAC8C; microscale &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB098;&#xB178; &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC784;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC870; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC9C0;&#xD615; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD604;&#xC7AC; &#xAE30;&#xC220;, &#xD2B9;&#xD788; &#xB098;&#xB178; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; prohibitively &#xBE44;&#xC2FC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC190;&#xC26C;&#xC6B4; &#xACE0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC140; &#xB9DE;&#xCDA4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2EC;&#xC7A5;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC774;&#xBC29;&#xC131; &#xACE0; multiscale &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xB97C; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xBAA8;&#xBC29; &#xC8FC;&#xB984;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xAC00;&#xB77D; &#xBB38;&#xD654; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC5D0; &#xC120;&#xBB3C;&#xC774;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBAA8;&#xB450; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; cardiomyocytes&#xB85C; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;&#xC758; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xBC0F; subcellular &#xC815;&#xB82C;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC758; fibrillar &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xB97C; &#xD749;&#xB0B4; &#xB0B8;,&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC9C0;&#xD615; &#xB2E8;&#xC11C; &#xAC19;&#xC740; &#xBE44;&#xBCF4; phenotypic&#xACFC; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; &#xBC0F; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB9DE;&#xCDA4; multiscale biomimetic &#xC9C0;&#xD615;.

Se&#xF1;ales nano y microescala topogr&#xE1;ficas desempe&#xF1;an un papel cr&#xED;tico en la inducci&#xF3;n y mantenimiento de diversas funciones celulares, incluyendo la morfolog&#xED;a, la adhesi&#xF3;n, la regulaci&#xF3;n de genes, y la comunicaci&#xF3;n. Estudios recientes indican que la estructura y funci&#xF3;n a nivel de tejido del coraz&#xF3;n es exquisitamente sensible a las se&#xF1;ales mec&#xE1;nicas a nano-escala, as&#xED; como a nivel de microescala. Aunque existen m&#xE9;todos de fabricaci&#xF3;n para la generaci&#xF3;n de las caracter&#xED;sticas topogr&#xE1;ficas para el cultivo celular, las t&#xE9;cnicas actuales, especialmente aquellos con resoluci&#xF3;n nanom&#xE9;trica, suelen ser complejas, prohibitivamente caros, y no es accesible para la mayor&#xED;a de los laboratorios de biolog&#xED;a. A continuaci&#xF3;n, presentamos una plataforma de la cultura ajustable compuesta por las arrugas biomim&#xE9;ticos que simulan anisotr&#xF3;pico compleja del coraz&#xF3;n y de la arquitectura multi-escala para la alineaci&#xF3;n de celdas f&#xE1;cil y robusta card&#xED;aco. Se demuestra la alineaci&#xF3;n celular y subcelular de los dos cardiomiocitos de ratones reci&#xE9;n nacidos, as&#xED; como las derivadas de c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas. Al imitar la red fibrilar de la matriz extracelular, este sistema permite el seguimiento de localizaci&#xF3;n de la prote&#xED;na en tiempo real y por lo tanto el estudio de alta resoluci&#xF3;n de las respuestas fenot&#xED;picas y fisiol&#xF3;gicas a la in-vivo como se&#xF1;ales topogr&#xE1;ficas.

Topograf&#xED;a multiescala biomim&#xE9;tico para la alineaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas madre neonatales y embrionario de las c&#xE9;lulas card&#xED;acas derivadas de

&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (ECs) &#x975E;&#x5E38;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x5728;&#x5404;&#x79CD;&#x9886;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CBB;&#x7597;&#x3001; &#x5FC3;&#x810F;&#x518D;&#x751F;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x8840;&#x7BA1;&#x79FB;&#x690D;&#x7269;&#xFF0C;&#x53D1;&#x5C55;&#x5176;&#x6CBB;&#x7597;&#x6F5C;&#x529B;&#x548C; prevascularized &#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x79FB;&#x690D;&#x3002;&#x53EF;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x6765;&#x533A;&#x5206;&#x5230; ECs &#x4F53;&#x5916;&#x4F7F;&#x7528;&#x80DA;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5355;&#x5C42;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#xFF0C;&#x6216;&#x7531;&#x57FA;&#x56E0;&#x64CD;&#x7EB5;&#x548C;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97;&#x589E;&#x6B96; ESC &#x6E90;&#x6027; ECs &#x65E0;&#x9057;&#x4F20;&#x64CD;&#x7EB5;&#x7684;&#x9F50;&#x6587;&#x5316;&#x662F;&#x4E00;&#x9879;&#x5177;&#x6709;&#x6311;&#x6218;&#x6027;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x5F80;&#x5F80;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#x548C;&#x4E25;&#x683C;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x6280;&#x672F;&#x4F18;&#x5316;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E2D;&#x578B;&#x542B;&#x80CE;&#x725B;&#x6216;&#x725B;&#x8840;&#x6E05;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7531;&#x4E8E;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x63A7;&#x5236;&#x5206;&#x5316;&#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#x5BF9;&#x6279;&#x53D8;&#x5316;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x63A2;&#x7D22;&#x4E86;&#x65B0;&#x6599;&#x914D;&#x65B9;&#x4E3A;&#x6D3E;&#x751F; ECs &#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (mESCs) &#x4F7F;&#x7528;&#x552F;&#x4E00;&#x5B9A;&#x4E49;&#x5316;&#x5B66;&#x8BD5;&#x5242;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D; 2 &#x4E0D;&#x540C;&#x4ECB;&#x8D28;&#x914D;&#x65B9;&#x548C;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5DF2;&#x77E5;&#x8981;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x7C98;&#x9644;&#x548C;&#x589E;&#x6B96;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x6D3E;&#x751F;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x4F18;&#x5316;&#x3002;ESC &#x6D3E;&#x751F;&#x7684; ECs &#x8868;&#x5F81;&#x6307;&#x51FA; (1) &#x5316;&#x5B66;&#x6210;&#x5206;&#x786E;&#x5B9A;&#x4ECB;&#x8D28;&#x914D;&#x65B9;&#x53EF;&#x590D;&#x7528;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x4E0A;&#x7EA7; ECs &#x76F8;&#x6BD4;&#x4EE5;&#x524D;&#x8840;&#x6E05;&#x542B;&#x6709;&#x914D;&#x65B9;&#xFF0C;(2) &#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x548C;&#x4E0D;&#x80F6;&#x539F;-IV &#x578B;&#xFF0C;&#x662F;&#x6559;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x611F;&#x5E94;&#x6211;&#x4EEC;&#x5316;&#x5B66;&#x6210;&#x5206;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E2D;&#x578B;&#x914D;&#x65B9;&#x4E2D;&#x7684;&#x6700;&#x4F18;&#x57FA;&#x677F;&#x3001; (3) &#x5728;&#x4E0D;&#x989D;&#x5916;&#x6FC0;&#x6D3B; Notch &#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;ESC ECs &#x4E3A;&#x4E3B;&#x53D1;&#x5C55;&#x5230;&#x9759;&#x8109; ECs&#xFF0C;&#x548C; (4) &#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6599;&#x914D;&#x65B9;&#x3001; &#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x9009;&#x62D4;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6B65;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x751F;&#x6210;&#x4ECE;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96; ECs&#x4F46;&#x5B83;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7684; ECs &#x6700;&#x540E;&#x7EAF;&#x5EA6;&#x3002;

&#x4ECE;&#x5316;&#x5B66;&#x6210;&#x5206;&#x786E;&#x5B9A;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Endothelial cells (ECs) are desired for their therapeutic potential in a variety of areas including gene therapy, cardiac regeneration, development of tissue-engineered vascular grafts, and prevascularized tissue transplants. Pluripotent embryonic stem cells (ESCs) can be induced to differentiate into ECs in vitro using embryoid bodies, monolayer cultures, or by genetic manipulation and immortalization. However, obtaining homogeneous cultures of proliferating ESC-derived ECs without genetic manipulation is a challenging undertaking and often requires optimization of protocols and rigorous purification techniques. Moreover, current differentiation methods that use medium containing fetal calf or bovine serum components introduce additional challenges because of our limited ability to control the differentiation signals and batch-to-batch variations of serum. We have explored the development of new medium formulations for deriving ECs from murine embryonic stem cells (mESCs) using only chemically defined reagents. We present 2 different medium formulations along with the detailed methodologies, including the optimization of extracellular matrix-derived substrates known to play a role in cell attachment and proliferation as well as cell differentiation. Characterization of the ESC-derived ECs indicate that (1) chemically defined medium formulations reproducibly generate superior ECs compared with previous serum-containing formulations, (2) fibronectin, and not collagen type-IV, is the optimal substrate for EC induction in our chemically defined medium formulations, (3) without additional activation of Notch-signaling, ESC-ECs develop predominantly into venous ECs, and (4) using these medium formulations, a second rigorous selection step is not required to generate proliferating ECs from ESCs, but it does enhance the final purity of the ECs.

Endothelial cells from embryonic stem cells in a chemically defined medium.

Cellules endoth&eacute;liales (CE) sont d&eacute;sir&eacute;es pour leur potentiel th&eacute;rapeutique dans une vari&eacute;t&eacute; de domaines, notamment la th&eacute;rapie g&eacute;nique, la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration cardiaque, d&eacute;veloppement des greffes vasculaires tissulaire et greffes de tissus PR&Eacute;VASCULARIS&Eacute;S. Des cellules souches embryonnaires pluripotentes (ESCs) peut &ecirc;tre induites &agrave; se diff&eacute;rencier dans ECs in vitro en utilisant des corps embryo&iuml;des, des cultures monocouches, ou par l&#39;immortalisation et manipulation g&eacute;n&eacute;tique. Toutefois, l&#39;obtention de cultures homog&egrave;nes de prolif&eacute;ration ECs d&eacute;riv&eacute;s ESC sans manipulation g&eacute;n&eacute;tique est une entreprise difficile et n&eacute;cessite souvent l&#39;optimisation des protocoles et des techniques de purification rigoureux. En outre, les m&eacute;thodes actuelles de diff&eacute;renciation qui utilisent foetal de veau contenant des moyens ou des composants de s&eacute;rum bovin introduisent des difficult&eacute;s suppl&eacute;mentaires en raison de notre capacit&eacute; limit&eacute;e pour contr&ocirc;ler les signaux de diff&eacute;renciation et lot &agrave; des variations de s&eacute;rum. Nous avons &eacute;tudi&eacute; le d&eacute;veloppement de nouvelles formulations moyens pour d&eacute;river les ECs de murines cellules souches embryonnaires (mESCs) &agrave; l&#39;aide de r&eacute;actifs chimiquement d&eacute;finis seules. Nous pr&eacute;sentons 2 diff&eacute;rentes formulations moyennes ainsi que les m&eacute;thodes d&eacute;taill&eacute;es, y compris l&#39;optimisation des substrats de d&eacute;riv&eacute;s de matrice extracellulaires connus pour jouer un r&ocirc;le dans la fixation des cellules et de prolif&eacute;ration, mais aussi la diff&eacute;renciation cellulaire. Caract&eacute;risation du SCE ESC d&eacute;riv&eacute;s indiquent que des formulations moyennes (1) chimiquement d&eacute;finies g&eacute;n&egrave;rent reproductible superior ECs par rapport aux pr&eacute;c&eacute;dentes formulations contenant du s&eacute;rum, (2) la fibronectine, et pas de collag&egrave;ne type-IV, est le substrat optimal pour l&#39;induction de EC dans nos formulations milieu chimiquement d&eacute;finies, (3) sans activation suppl&eacute;mentaire de signalisation Notch, ESC-ECs se d&eacute;veloppent principalement en veineux ECs et (4) utilisant des formulations de ces moyennes, une seconde &eacute;tape de s&eacute;lection rigoureuse n&#39;est pas n&eacute;cessaire de g&eacute;n&eacute;rer ECs prolif&eacute;ration de ces, mais il n&#39;am&eacute;liore pas la puret&eacute; finale de l&#39;ECs.

Cellules endoth&eacute;liales de cellules souches embryonnaires dans un milieu chimiquement d&eacute;fini.

Endothelzellen (ECs) sind erw&uuml;nscht, f&uuml;r ihre therapeutische Potenzial in einer Vielzahl von Bereichen wie Gentherapie, kardialen Regeneration, Entwicklung der Gewebe-Engineering vaskul&auml;re Prothesen und prevascularized Gewebetransplantationen. Pluripotenten embryonaler Stammzellen (WSR) k&ouml;nnen dazu gebracht werden, um in ECs in-vitro mit Embryoid K&ouml;rper, Monolayer-Kulturen, oder durch genetische Manipulation und Immortalization zu unterscheiden. Jedoch erhalten homogene Kulturen der wuchernden ESC-abgeleitete ECs ohne Genmanipulation ist eine anspruchsvolle Aufgabe und erfordert h&auml;ufig Optimierung von Protokollen und strenge Reinigung Techniken. Dar&uuml;ber hinaus f&uuml;hren aktuelle Differenzierung-Methoden, die mittlere enthaltenden Fetales Kalb oder Rinderserum-Komponenten verwenden zus&auml;tzliche Herausforderungen aufgrund unserer begrenzten F&auml;higkeit zur Steuerung der Differenzierung Signale und Inter-Chargen-Variationen von Serum. Wir haben die Entwicklung der neuen mittlere Formulierungen zum Ableiten von ECs von murinen embryonalen Stammzellen (mESCs) mit nur chemisch definierte Reagenzien untersucht. Wir pr&auml;sentieren Ihnen 2 verschiedene mittlere Rezepturen zusammen mit den detaillierten Methoden, einschlie&szlig;lich die Optimierung der extrazellul&auml;ren Matrix abgeleitete Substrate bekannt, bei der Zelladh&auml;sion und Verbreitung sowie die Zelldifferenzierung eine Rolle spielen. Charakterisierung des ESC-abgeleitete ECs zufolge (1) chemisch definierte mittlere Formulierungen reproduzierbar generieren Superior ECs im Vergleich mit fr&uuml;heren serumhaltigem Formulierungen, (2) Fibronektin, und nicht Kollagen Typ-IV, ist das optimale Substrat f&uuml;r EG-Induktion in unseren chemisch definierten mittleren Formulierungen, (3) ohne zus&auml;tzliche Aktivierung des Notch-Signalisierung, ESC-ECs &uuml;berwiegend in ven&ouml;sen ECs und (4) verwenden diese mittleren Formulierungen zu entwickeln, in einem zweiter Schritt strenge Auswahl ist nicht erforderlich, wuchernden ECs aus WSR zu generieren, aber es verbessert die endg&uuml;ltige Reinheit des ECs.

Endothelzellen aus embryonalen Stammzellen in einem chemisch definierte Medium.

Le cellule endoteliali (ECs) sono desiderate per il loro potenziale terapeutico in una variet&agrave; di settori, tra cui la terapia genica, rigenerazione cardiaca, sviluppo di innesti vascolari tessutale e di trapianti di tessuto prevascularized. Cellule staminali embrionali pluripotenti (CES) pu&ograve; essere indotta a differenziarsi in ECs in vitro utilizzando corpi embryoid, colture monostrato, o da immortalization e manipolazione genetica. Tuttavia, ottenendo culture omogenee della ECs proliferanti ESC-derivati senza manipolazione genetica &egrave; un&#39;impresa difficile e richiede spesso ottimizzazione dei protocolli e tecniche di purificazione rigoroso. Inoltre, attuali metodi di differenziazione che utilizzano media fetale di vitello contenente o componenti del siero bovino introducono ulteriori sfide a causa della nostra limitata capacit&agrave; di controllare i segnali di differenziazione e variazioni lotto di siero. Abbiamo esplorato lo sviluppo di nuove formulazioni medi per derivare la ECs murine cellule staminali embrionali (mESCs) utilizzando soli reagenti chimicamente definiti. Vi presentiamo 2 diverse formulazioni medi insieme con le metodologie dettagliate, tra cui l&#39;ottimizzazione dei substrati di matrice derivata extracellulari noto per giocare un ruolo nel collegamento cella e proliferazione cos&igrave; come differenziazione delle cellule. Caratterizzazione della ECs ESC-derivati indicano che (1) chimicamente definite formulazioni medi generano reproducibly superior ECs rispetto ai precedenti formulazioni contenenti siero, (2) fibronectina, e non collagene tipo-IV, &egrave; il substrato ottimo per l&#39;induzione CE nelle nostre formulazioni medi chimicamente definite, (3) senza ulteriore attivazione della tacca di segnalazione, ESC-ECs si sviluppano principalmente in venosa ECs e (4) utilizzando queste formulazioni medie, un secondo step di selezione rigorosa non &egrave; necessaria per generare proliferanti ECs da CES, ma essa migliorare la purezza finale della ECs.

Cellule endoteliali da cellule staminali embrionali in un mezzo chimicamente definita.

&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (Ec) &#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7642;&#x3001;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x518D;&#x751F;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x79FB;&#x690D;&#x3068; prevascularized &#x7D44;&#x7E54;&#x79FB;&#x690D;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5206;&#x91CE;&#x3067;&#x6F5C;&#x5728;&#x6CBB;&#x7652;&#x529B;&#x3092;&#x671B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;Esc&#xFF09; ECs &#x5358;&#x5C64;&#x57F9;&#x990A;&#x80DA;&#x69D8;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x4F53;&#x5916;&#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3068;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;esc &#x30AD;&#x30FC;&#x6D3E;&#x751F;&#x5897;&#x6B96;&#x306E; ECs &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306A;&#x3057;&#x306E;&#x540C;&#x7A2E;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x306A;&#x4F5C;&#x696D;&#x3067;&#x3059;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3068;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x6D44;&#x5316;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5A92;&#x4F53;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x725B;&#x80CE;&#x5150;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x725B;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3068;&#x8840;&#x6E05;&#x306E;&#x30D0;&#x30C3;&#x30C1;&#x306B;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x8AB2;&#x984C;&#x3092;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;ECs &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8A66;&#x85AC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x304B;&#x3089;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; (mESCs) &#x3092;&#x5C0E;&#x51FA;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5A92;&#x4F53;&#x306E;&#x88FD;&#x5264;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x63A2;&#x691C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;2 &#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5A92;&#x4F53;&#x88FD;&#x5264;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6D3E;&#x751F;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.Esc &#x30AD;&#x30FC;&#x6D3E;&#x751F; ECs &#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3059; (1) &#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DF;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x30E0;&#x88FD;&#x5264;&#x304C; ECs &#x524D;&#x8840;&#x6E05;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x88FD;&#x5264;&#x3067;&#x3001;&#xFF08;2&#xFF09; &#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x4E00;&#x5869;&#x57FA;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x306A;&#x3044;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;-IV&#x3001;&#x3067;&#x3059;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DF;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x30E0;&#x88FD;&#x5264;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; EC &#x8A98;&#x5C0E;&#x7528;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x57FA;&#x677F;&#x3001;(3) &#x306A;&#x3057;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; Notch &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E; ESC ECs &#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x9759;&#x8108;&#x306E; ECs&#x3001;&#x3084; (4) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E2D;&#x578B;&#x306E;&#x88FD;&#x5264;&#x306B;&#x767A;&#x5C55;&#x3001;&#x5897;&#x6B96; ECs &#x304B;&#x3089; Esc &#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x9078;&#x629E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x4E0D;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;ECs &#x306E;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306A;&#x7D14;&#x5EA6;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x304B;&#x3002;

&#x5316;&#x5B66;&#x57F9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC;, &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC7AC;&#xC0DD;, &#xD608;&#xAD00; &#xC774;&#xC2DD; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB4F1;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (ECs)&#xB294; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xBC0F; prevascularized &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xC774;&#xC2DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (ESCs) &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791;&#xACFC; immortalization embryoid &#xC2DC;&#xCCB4;, &#xB2E8;&#xCE35; &#xBB38;&#xD654;&#xAD8C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; Ecs&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xB3C4; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791; &#xC5C6;&#xC774; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; ESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Ecs&#xC758; &#xB3D9;&#xC885;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xBB38;&#xD654;&#xB97C; &#xC5BB;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xC0AC;&#xC5C5; &#xC774;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC885;&#xC885; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xC815;&#xD654; &#xAE30;&#xC220;&#xACFC; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC758; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC911;&#xAC04; &#xD3EC;&#xD568; &#xD0DC;&#xC544; &#xC1A1;&#xC544;&#xC9C0; &#xC18C; &#xD608; &#xCCAD; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xD608; &#xCCAD;&#xC758; &#xC77C;&#xAD04; &#xBC30;&#xCE58; &#xBCC0;&#xD615;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xB2A5;&#xB825; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00;&#xC801;&#xC778; &#xACFC;&#xC81C;&#xB97C; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; murine &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (mESCs)&#xB9CC; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC2DC; &#xC57D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; Ecs&#xB97C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC911;&#xAC04; &#xC81C;&#xD615; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xD0D0;&#xD5D8;. &#xC120;&#xBB3C;&#xC774; &#xD568;&#xAED8; &#xC140; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD655;&#xC0B0; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; 2 &#xB2E4;&#xB978; &#xC911;&#xAC04; &#xC81C;&#xD615;. ESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Ecs&#xC758; &#xD45C;&#xC2DC; (1) &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC911;&#xAC04; &#xC81C;&#xD615; &#xC815;&#xC758;&#xC0C1; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; Ecs&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC774;&#xC804; &#xD608; &#xCCAD;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xACF5;&#xC2DD; (2) fibronectin, &#xC0DD;&#xC131; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD558;&#xC9C0; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC720;&#xD615;-IV, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC911;&#xAC04; &#xC81C;&#xD615;&#xC5D0; EC &#xC720;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xAE30;&#xD310;, (3) &#xB178;&#xCE58; &#xC2E0;&#xD638; &#xCD94;&#xAC00; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC5C6;&#xC774; ESC ECs ECs, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; (4) &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC911;&#xAC04; &#xC81C;&#xD615;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC815; &#xB9E5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC8FC;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xC120;&#xD0DD; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; ESCs &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; Ecs&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC544;&#xB3C4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; Ecs&#xC758; &#xCD5C;&#xC885; &#xC21C;&#xB3C4; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC758; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;.

Las c&eacute;lulas endoteliales (ECs) se desean para su potencial terap&eacute;utico en una variedad de &aacute;reas, incluyendo la terapia g&eacute;nica, regeneraci&oacute;n cardiaca, desarrollo de injertos vasculares tejido-dirigida y trasplantes de tejido prevascularized. Las c&eacute;lulas madre embrionarias pluripotenciales (CES) puede inducirse a diferenciar en ECs in vitro usando embryoid cuerpos, culturas de monocapa, o inmortalizaci&oacute;n y manipulaci&oacute;n gen&eacute;tica. Sin embargo, la obtenci&oacute;n de culturas homog&eacute;neas de proliferaci&oacute;n ECs derivados ESC sin manipulaci&oacute;n gen&eacute;tica es una tarea dif&iacute;cil y a menudo requiere optimizaci&oacute;n de protocolos y t&eacute;cnicas de depuraci&oacute;n rigurosa. Por otra parte, los m&eacute;todos actuales de diferenciaci&oacute;n que utilizan becerro fetal que contiene medio o componentes de suero bovino presentan retos adicionales debido a nuestra limitada capacidad para controlar las se&ntilde;ales de diferenciaci&oacute;n y variaciones de lote a lote de suero. Hemos explorado el desarrollo de nuevas formulaciones de medianas para derivar ECs de murinas embrionarias c&eacute;lulas madre (troncales) utilizando solamente reactivos qu&iacute;micamente definidos. Presentamos 2 diferentes formulaciones medianas junto con la metodolog&iacute;a detallada, incluyendo la optimizaci&oacute;n de sustratos de derivados de matriz extracelulares sabido para desempe&ntilde;ar un papel en el accesorio de celular y proliferaci&oacute;n as&iacute; como diferenciaci&oacute;n celular. Caracterizaci&oacute;n de las ECs ESC derivados indican que formulaciones medianas (1) qu&iacute;micamente definidas reproducible generan superior ECs en comparaci&oacute;n con anteriores formulaciones que contienen suero, (2) fibronectina, y no col&aacute;geno tipo IV, es el substrato &oacute;ptimo para la inducci&oacute;n de la CE en nuestras formulaciones medianas qu&iacute;micamente definidos, (3) sin activaci&oacute;n adicional de se&ntilde;alizaci&oacute;n Notch, ESC-ECs desarrollan predominante en ECs venoso y (4) usando estas formulaciones medianas, un segundo paso de selecci&oacute;n rigurosa no debe generar proliferaci&oacute;n ECs de CES, pero mejoran la pureza final de las ECs.

C&eacute;lulas endoteliales de c&eacute;lulas madre embrionarias en un medio qu&iacute;micamente definido.

&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (ESC) &#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (EC) &#x8981;&#x6C42;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x9274;&#x5B9A;&#x4E4B;&#x524D;&#x5B83;&#x4EEC;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x4EE5;&#x52A0;&#x5F3A;&#x5176;&#x690D;&#x5165;&#x548C;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x7D22; ESC &#x6E90;&#x6027; EC (ESC-EC)&#xFF0C;&#x5176;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E; (NO)&#xFF0C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x6E17;&#x900F;&#x3001; &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE;&#x8868;&#x9762;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x708E;&#x75C7;&#x523A;&#x6FC0;&#x54CD;&#x5E94;&#x62DB;&#x8058;&#x3001; &#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x65B0;&#x8840;&#x7BA1;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x3001; &#x653E;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5360;&#x7528;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x7B49;&#x51E0;&#x4E2A;&#x751F;&#x7406;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86; ESC-EC &#x957F;&#x671F;&#x4E0D;&#x5728;&#x526A;&#x5E94;&#x529B;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x548C;&#x4E0B;&#x8C03;&#x4E0D;&#x5728;&#x708E;&#x75C7;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x6FC0;&#x6D3B;&#x54CD;&#x5E94;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;ESC-EC &#x529F;&#x80FD;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E86;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109; ECs&#x3002;ESC-EC &#x5C55;&#x54C1;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x5DEE;&#x522B;&#x4ECD;&#x7136;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;ESC-EC &#x4EA7;&#x751F;&#x8F83;&#x5C11; NO &#x5BF9;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#xFF0C;&#x4F46;&#x76F8;&#x540C;&#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x65E0;&#x5982;&#x679C;&#x91CF;&#x5316;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9886;&#x57DF;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x589E;&#x52A0;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x53D1;&#x82BD;&#xFF0C;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x62B5;&#x6297;&#x708E;&#x75C7;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4E3A;&#x7279;&#x70B9;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC; ESC-EC subphenotype &#x548C;&#x9075;&#x5B88;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x8F83;&#x5927;&#x7684;&#x53C2;&#x5C55;&#x9759;&#x8109;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0A;&#x7684;&#x9759;&#x8109;&#x548C;&#x52A8;&#x8109;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x5047;&#x8BF4;&#x53D1;&#x5C55;&#x9ED8;&#x8BA4;&#x8DEF;&#x5F84;&#x662F;&#x671D;&#x7740;&#x9759;&#x8109; EC &#x548C;&#x5B8C;&#x5584;&#x5BF9;&#x52A8;&#x8109; EC &#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x4FDD;&#x6301;&#x5747;&#x5300;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;

&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;

Endothelial cells (EC) derived from embryonic stem cells (ESC) require additional functional characterization before they are used as a cell therapy in order to enhance their potential for engraftment and proliferation. We explore several physiologically relevant functions of ESC-derived EC (ESC-EC), such as its capacity to produce nitric oxide (NO), regulate permeability, activate and express surface molecules for the recruitment of leukocytes in response to inflammatory stimuli, migrate and grow new blood vessels, lay down extracellular matrix, and take up low-density lipoproteins. We also examined the ESC-EC ability to upregulate NO in response to shear stress and downregulate NO in response to pro-inflammatory TNF-Î± activation. Functional responses of ESC-EC were compared with those of cultured mouse aortic ECs. The ESC-EC exhibit most aspects of functional endothelium, but interesting differences remain. The ESC-EC produced less NO on a per cell basis, but the same amount of NO if quantified based on the area of endothelial tissue. They also exhibit increased angiogenic sprouting and are more resistant to inflammatory signals. We further characterized the subphenotype of our ESC-EC and observed both venous and arterial markers on individual cells with a larger percentage of the cells exhibiting a venous phenotype. These data support the hypothesis that the developmental default pathway is toward a venous EC, and that refinement of methods for differentiation towards arterial EC is required to maintain a homogeneous population.

Functional characterization of embryonic stem cell-derived endothelial cells.

Les cellules endoth&eacute;liales (EC), d&eacute;riv&eacute;s de cellules souches embryonnaires (CSE) n&eacute;cessitent caract&eacute;risation fonctionnelle suppl&eacute;mentaire avant d&#39;&ecirc;tre utilis&eacute;es comme une th&eacute;rapie cellulaire afin d&#39;accro&icirc;tre leur potentiel de prise de greffe et de prolif&eacute;ration. Nous explorons plusieurs fonctions physiologiquement pertinentes de d&eacute;riv&eacute;s ESC EC (ESC-EC), telles que sa capacit&eacute; &agrave; ne produire de l&#39;oxyde nitrique (), r&eacute;glementer la perm&eacute;abilit&eacute;, activer et expriment des mol&eacute;cules de surface pour le recrutement des leucocytes en r&eacute;ponse &agrave; des stimuli inflammatoires, migrer et se d&eacute;velopper de nouveaux vaisseaux sanguins, fixent la matrice extracellulaire et relever les lipoprot&eacute;ines de basse densit&eacute;. Nous avons &eacute;galement examin&eacute; la possibilit&eacute; de ESC-EC de r&eacute;guler positivement n&#39;en r&eacute;ponse &agrave; la contrainte de cisaillement et att&eacute;nuent n&#39;en r&eacute;ponse &agrave; l&#39;activation de TNF-&alpha; pro-inflammatoires. R&eacute;ponses fonctionnelles de l&#39;ESC-EC ont &eacute;t&eacute; compar&eacute;s avec ceux de souris cultiv&eacute;e ECs aortiques. L&#39;ESC-EC pr&eacute;sentent la plupart des aspects de l&#39;endoth&eacute;lium fonctionnel, mais demeurent des diff&eacute;rences int&eacute;ressantes. L&#39;ESC-ce produite moins non sur une base par cellule, mais la m&ecirc;me quantit&eacute; de non si quantifi&eacute; bas&eacute;e sur la surface du tissu endoth&eacute;lial. Ils &eacute;galement pi&egrave;ce angiog&eacute;nique accrue de germination et r&eacute;sistent mieux aux signaux inflammatoires. Nous plus caract&eacute;ris&eacute; la subphenotype de nos ESC-EC et observ&eacute; des marqueurs sur des cellules individuelles, avec un pourcentage plus &eacute;lev&eacute; des cellules pr&eacute;sentant un ph&eacute;notype veineux art&eacute;riels et veineuses. Ces donn&eacute;es supportent l&#39;hypoth&egrave;se que la voie de d&eacute;veloppement par d&eacute;faut est vers un ce veineuses, et que le raffinement des m&eacute;thodes de diff&eacute;renciation vers EC art&eacute;riel est requis pour maintenir une population homog&egrave;ne.

Caract&eacute;risation fonctionnelle des cellules endoth&eacute;liales &agrave; d&eacute;riv&eacute;es de cellules souches embryonnaires.

Endotheliale Zellen (EG) aus embryonalen Stammzellen (ESC) erfordern zus&auml;tzliche Funktionelle Charakterisierung, bevor sie als eine Zelltherapie verwendet werden, um ihr Potenzial f&uuml;r die Verteilung und Verbreitung zu f&ouml;rdern. Wir erforschen verschiedene physiologisch relevante Funktionen der ESC-abgeleitete EG (ESC-EG), z. B. seine Kapazit&auml;t produzieren Stickstoffmonoxid (NO), Durchl&auml;ssigkeit zu regulieren, aktivieren und schnelles Oberfl&auml;che Molek&uuml;le f&uuml;r die Rekrutierung von Leukozyten in Reaktion auf entz&uuml;ndliche Reize, migrieren und wachsen neuer Blutgef&auml;&szlig;e, festsetzen der extrazellul&auml;ren Matrix, und Low-Density-Lipoproteine aufgreifen. Wir untersuchen auch die ESC-EG-F&auml;higkeit, Upregulate nicht als Reaktion auf die Schubspannung und gulieren nicht als Reaktion auf die Pro-inflammatorische TNF-&alpha;-Aktivierung. Funktionale Antworten der ESC-EG wurden verglichen mit denen der kultivierten Maus Aorten ECs. Die ESC-EG weisen die meisten Aspekte der funktionalen Endothel, aber interessante Unterschiede bleiben. Die ESC-EG produziert weniger Nr. auf einer Basis pro Zelle, aber die gleiche Menge an Nein Wenn quantifiziert basierend auf dem Gebiet der endothelial Gewebe. Sie auch zeigen erh&ouml;hte angiogenen sprie&szlig;en und sind widerstandsf&auml;higer gegen entz&uuml;ndliche Signale. Wir weiter charakterisiert die HAIRAN unsere ESC-EG und beobachtet sowohl ven&ouml;sen und arteriellen Marker auf einzelne Zellen mit einem gr&ouml;&szlig;eren Anteil der Zellen mit einen ven&ouml;sen Ph&auml;notyp. Diese Daten unterst&uuml;tzen die Hypothese, dass die entwicklungspolitischen Standard Pathway in Richtung eine ven&ouml;se EG ist und Verfeinerung der Methoden zur Differenzierung gegen&uuml;ber arteriellen EG erforderlich, um eine homogene Bev&ouml;lkerung zu halten ist.

Funktionelle Charakterisierung der embryonalen Stammzellen Cell-derived Endothelzellen.

Le cellule endoteliali (CE) derivate da cellule staminali embrionali (ESC) richiedono ulteriore caratterizzazione funzionale prima che vengano utilizzate come terapia cellulare al fine di migliorare il loro potenziale di attecchimento e proliferazione. Esploriamo diversi fisiologicamente rilevanti funzioni di ESC-derivato CE (ESC-CE), come la sua capacit&agrave; di non produrre ossido nitrico (), regolano la permeabilit&agrave;, attivare ed esprimere molecole di superficie per il reclutamento dei leucociti in risposta a stimoli infiammatori, migrare e crescere nuovi vasi sanguigni, lay down matrice extracellulare e prendere le lipoproteine a bassa densit&agrave;. Abbiamo anche esaminato la capacit&agrave; di ESC-CE di potenziamento non in risposta alle sollecitazioni di taglio e downregulate non in risposta all&#39;attivazione di pro-infiammatorie TNF-&alpha;. Risposte funzionali di ESC-CE sono state confrontate con quelli del mouse colto ECs aortica. ESC-CE presentano molti aspetti dell&#39;endotelio funzionale, ma rimangono interessanti differenze. ESC-CE prodotto meno NO in base al cellulare, ma la stessa quantit&agrave; di NO se quantificati basato sull&#39;area di tessuto endoteliale. Essi inoltre mostrano maggiore angiogenico che spuntano e sono pi&ugrave; resistenti ai segnali infiammatori. Abbiamo ulteriormente caratterizzato il sottotipo della nostra ESC-CE e osservato sia venosi che arteriosi marcatori su singole celle con una percentuale maggiore di cellule esibendo un fenotipo venoso. Questi dati supportano l&#39;ipotesi che il percorso di sviluppo predefinito &egrave; verso una venosa CE, e che raffinatezza dei metodi per la differenziazione verso arteriosa CE &egrave; necessaria per mantenere una popolazione omogenea.

Caratterizzazione funzionale delle cellule endoteliali derivati da cellule staminali embrionali.

&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x7642;&#x6CD5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x7740;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; (ESC) &#x7531;&#x6765;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (EC) &#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x8A55;&#x4FA1;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Esc &#x30AD;&#x30FC;&#x6D3E;&#x751F; EC (esc &#x30AD;&#x30FC;-EC)&#x3001;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20; (NO) &#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3001;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3057;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x6A2A;&#x305F;&#x308F;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x53D6;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x63A2;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F; ESC EC &#x80FD;&#x529B;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x305B;&#x3093;&#x65AD;&#x5FDC;&#x529B;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5; &#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30D7;&#x30ED;&#x708E;&#x75C7;&#x6027; TNF-&alpha; &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x3044;&#x3044;&#x3048;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;Esc &#x30AD;&#x30FC;-EC &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x57F9;&#x990A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x5927;&#x52D5;&#x8108; ECs&#x3002;ESC EC &#x5C55;&#x793A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x5C40;&#x9762;&#x304C;&#x307E;&#x307E;&#x306B;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x9055;&#x3044;&#x3002;ESC EC &#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x306A;&#x3044;&#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x751F;&#x7523;&#x304C;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x91CF;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306A;&#x3057;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x5897;&#x52A0;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x840C;&#x82BD;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x708E;&#x75C7;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8010;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E; ESC EC &#x306E; subphenotype &#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3057;&#x3001;&#x9759;&#x8108;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x52D5;&#x8108;&#x9759;&#x8108;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x306E;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30BB;&#x30EB; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x767A;&#x9054;&#x30C7;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30C8;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x9759;&#x8108;&#x306E; EC &#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x3042;&#x308A;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x52D5;&#x8108; EC &#x3078;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6D17;&#x7DF4;&#x304C;&#x540C;&#x8CEA;&#x306A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x652F;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3002;

&#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (EC) &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (ESC)&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; engraftment &#xBC0F; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; ESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; EC (EC ESC), &#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C; (NO)&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0;, &#xD22C;&#xACFC;&#xC728;&#xC744; &#xC870;&#xC808;, &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xD45C;&#xBA74; &#xBD84;&#xC790; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C;&#xC758; &#xCC44;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD608;&#xAD00; &#xC131;&#xC7A5;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;, &#xB204;&#xC6CC; &#xBC0F; &#xC800;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xCC28;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xC6A9;&#xB7C9; &#xB4F1;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC21C;&#xC218; &#xAD00;&#xB828; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; ESC EC &#xB2A5;&#xB825;&#xC744;&#xC744; &#xC804;&#xB2E8; &#xC751;&#xB825;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xB354; upregulate &#xD558; &#xACE0; downregulate &#xD504;&#xB85C;-&#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; TNF-&alpha; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xB354; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. ESC-EC&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2F5;&#xBCC0; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xB41C; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; ECs. ESC-EC &#xAE30;&#xB2A5; &#xD53C; &#xB0B4; &#xB9C9;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xCE21;&#xBA74;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. ESC-EC &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB2F9; &#xC140; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xB35C; &#xC544;&#xB2C8; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC19;&#xC740; &#xC591;&#xC758; NO &#xACC4;&#xB7C9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; angiogenic &#xB3CB; &#xC544; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB354; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; ESC EC&#xC758; subphenotype&#xB97C; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xD558; &#xACE0; &#xC815; &#xB9E5;&#xACFC; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xC815; &#xB9E5; &#xD615;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xD070; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DD; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xAC00;&#xC124; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD1B5;&#xB85C;&#xAC00; &#xC815; &#xB9E5; EC &#xD5A5;&#xD574; &#xACE0; &#xB3D9;&#xB9E5; EC &#xD5A5;&#xD574; &#xCC28;&#xBCC4; &#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xD654;&#xC5D0; &#xADE0;&#xC9C8; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

Las c&eacute;lulas endoteliales (CE) derivadas de las c&eacute;lulas madre embrionarias (ESC) requieren caracterizaci&oacute;n funcional adicional antes de que se utilizan como terapia celular para mejorar su potencial de engraftment y proliferaci&oacute;n. Exploramos varias funciones fisiol&oacute;gicamente relevantes de CE derivados de ESC (ESC-CE), como su capacidad para no producir &oacute;xido n&iacute;trico (), regular la permeabilidad, activar y expresar mol&eacute;culas superficiales para el reclutamiento de leucocitos en respuesta a est&iacute;mulos inflamatorios, migrar y crecen nuevos vasos sangu&iacute;neos, establecer la matriz extracelular y toman de lipoprote&iacute;nas de baja densidad. Tambi&eacute;n examinamos la capacidad ESC-CE alza NO en respuesta a la tensi&oacute;n de esquileo y regular a la baja NO en respuesta a la activaci&oacute;n de proinflamatoria TNF-&alpha;. Las respuestas funcionales de ESC-EC fueron comparadas con los del rat&oacute;n cultivado ECs a&oacute;rticas. La ESC-CE exhiben muchos aspectos del endotelio funcional, pero persisten diferencias interesantes. El ESC-EC hab&iacute;a producido menos NO sobre una base por celular, pero la misma cantidad de NO Si cuantificado basado en el &aacute;rea de tejido endotelial. Tambi&eacute;n exhiben angiog&eacute;nicos mayor brotaci&oacute;n y son m&aacute;s resistentes a las se&ntilde;ales inflamatorias. Que m&aacute;s caracteriza la subphenotype de nuestra ESC-EC y hab&iacute;a observado marcadores tanto venosos y arteriales en c&eacute;lulas individuales con un mayor porcentaje de las c&eacute;lulas, exhibiendo un fenotipo venoso. Estos datos apoyan la hip&oacute;tesis de que la v&iacute;a del desarrollo predeterminado es hacia un CE venosa, y que el refinamiento de m&eacute;todos para la diferenciaci&oacute;n hacia CE arterial es requerido para mantener una poblaci&oacute;n homog&eacute;nea.

Caracterizaci&oacute;n funcional de las c&eacute;lulas endoteliales derivadas de c&eacute;lulas madre embrionarias.

&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6210;&#x957F;&#x548C;&#x4F20;&#x64AD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x63A5;&#x89E6;&#x6291;&#x5236;&#x819C;&#x7684;&#x5E73;&#x677F;&#x57F9;&#x517B;&#x76BF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (ESC) &#x662F;&#x503E;&#x5411;&#x4E8E;&#x901A;&#x8FC7;&#x81EA;&#x6211;&#x5B66;&#x4E60;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5BC6;&#x5BC6;&#x9EBB;&#x9EBB;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;Esc &#x952E;&#x4E5F;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x5F62;&#x6210; 3D &#x7EC6;&#x80DE;&#x805A;&#x5408;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x80DA;&#x4F53; (EB)&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x6A21;&#x4EFF;&#x7684;&#x65F6;&#x7A7A;&#x53D1;&#x5C55;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;ESC aggregatation&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&quot;&#x6563;&#x5E03;&quot;&#x5173;&#x4E8E;&#x660E;&#x80F6;&#x6D82;&#x5C42;&#x6216;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE; (MEF) &#x7684;&#x7406;&#x7531;-&#x5305;&#x83DC;&#x3001; &#x5BA1;&#x67E5;&#x901A;&#x8FC7; ESC &#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x548C; ESC &#x7C98;&#x5408;&#x529B;&#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x91CF;&#x5316;&#x3002;&#x5EFA;&#x6A21;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5341;&#x4E8C;&#x9762;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x4E2A; ESC&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x6BCF;&#x4E2A; ESC esc &#x952E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x529B;&#xFF0C;&#x65E0;&#x6CD5; 9.1 &times; 10 (5) pN&#xFF0C;&#x800C; ESC MEF &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x529B;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x662F; 7.9 &times; 10 (4) &#x8981;&#x5C0F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6570;&#x91CF;&#x7EA7; pN&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x663E;&#x793A; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x662F; ESC esc &#x952E;&#x7C98;&#x8FDE;&#x7684;&#x652F;&#x914D;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x963B;&#x6B62; E-&#x9499;&#x5BFC;&#x81F4;&#x96C6;&#x843D;&#x5F62;&#x6210;&#x5927;&#x4E3A;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6570;&#x5B66;&#x63CF;&#x8FF0; ESC &#x6765;&#x7EC4;&#x88C5;&#x6210; ESC esc &#x952E;&#x805A;&#x5408;&#x548C; 3D &#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x660E;&#x80F6;&#x6216;&#x6D82; MEF &#x7684;&#x83DC;&#x80B4;&#x4E0A;, &#x4F20;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E; ESC &#x7684; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9996;&#x9009;&#x9879;&#x3002;

&#x80F6;&#x7C98;&#x5242;&#x90E8;&#x961F;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7269;&#x3002;

Most cell culture systems grow and spread as contact-inhibited monolayers on flat culture dishes, but the embryonic stem cell (ESC) is one of the cell phenotypes that prefer to self-organize as tightly packed three-dimensional (3D) colonies. ESC also readily form 3D cell aggregates, called embryoid bodies (EB) that partially mimic the spatial and temporal processes of the developing embryo. Here, the rationale for ESC aggregatation, rather than "spreading" on gelatin-coated or mouse embryonic fibroblast (MEF)-coated dishes, is examined through the quantification of the expression levels of adhesion molecules on ESC and the calculation of the adhesive forces on ESC. Modeling each ESC as a dodecahedron, the adhesive force for each ESC-ESC binding was found to be 9.1 x 10 ( 5) pN, whereas, the adhesive force for ESC-MEF binding was found to be an order of magnitude smaller at 7.9 x 10 ( 4) pN. We also show that E-cadherin is the dominating molecule in the ESC-ESC adhesion and blocking E-cadherin leads to a significant reduction in colony formation. Here, we mathematically describe the preference for ESC to self-assemble into ESC-ESC aggregates and 3D colonies, rather than to bind and spread on gelatin or MEF-coated dishes, and have shown that these interactions are predominantly due to E-cadherin expression on ESC.

Adhesive forces in embryonic stem cell cultures.

Syst&egrave;mes de cultures cellulaires plupart se d&eacute;velopper et se propager comme monocouches inhib&eacute;es par contact sur le plat de P&eacute;tri, mais les cellules souches embryonnaires (CSE) est l&#39;un des ph&eacute;notypes cellulaires qui pr&eacute;f&egrave;rent s&#39;auto-organiser comme serr&eacute;s colonies de trois dimensions (3D). ESC a &eacute;galement facilement forment des agr&eacute;gats de cellules 3D, appel&eacute;s corps embryo&iuml;des (EB) partiellement imitant les processus spatiaux et temporels de l&#39;embryon en d&eacute;veloppement. Ici, la justification de l&#39;aggregatation de l&#39;ESC, plut&ocirc;t que de &laquo; diffusion &raquo; sur enduit de g&eacute;latine ou de fibroblastes embryonnaires de souris (force exp&eacute;ditionnaire des marines)-enduit plats, est examin&eacute; par la quantification des niveaux d&#39;expression des mol&eacute;cules d&#39;adh&eacute;rence sur ESC et le calcul des forces adh&eacute;sifs sur ESC. Mod&eacute;lisation de chaque ESC comme un dod&eacute;ca&egrave;dre, la force d&#39;adh&eacute;rence pour chaque liaison ESC-ESC s&#39;est av&eacute;r&eacute;e pour &ecirc;tre 9,1 x 10 (5) pN, alors que, la force d&#39;adh&eacute;rence pour la liaison de l&#39;ESC-MEF s&#39;est av&eacute;r&eacute;e pour &ecirc;tre un ordre de grandeur plus petite &agrave; 7,9 x 10 (4) AP. Nous montrons aussi que E-cadh&eacute;rine est la mol&eacute;cule qui domine dans l&#39;adh&eacute;rence de l&#39;ESC-ESC et bloquant la E-cadh&eacute;rine conduit &agrave; une r&eacute;duction significative de la formation de colonies. Nous d&eacute;crivons ici math&eacute;matiquement la pr&eacute;f&eacute;rence pour les ESC d&#39;autoassembler en agr&eacute;gats de l&#39;ESC-ESC et colonies 3D, plut&ocirc;t que de lier et &eacute;tal&eacute;es sur la g&eacute;latine ou plats rev&ecirc;tus MEF et ont montr&eacute; que ces interactions sont principalement en raison de l&#39;expression de la E-cadh&eacute;rine sur ESC.

Adh&eacute;sifs forces embryonnaires proviennent des cultures de cellules.

Die meisten Zellkultursysteme wachsen und als Kontakt-gehemmt Monolayers flache Kultur K&uuml;che verbreitet, aber der embryonale Stammzellen (ESC) geh&ouml;rt zu der Zelle-Ph&auml;notypen, die lieber als dicht gepackten dreidimensionale (3D) Kolonien zu organisieren. ESC auch leicht bilden 3D Zelle Aggregate, genannt Embryoid K&ouml;rper (EB), die teilweise die r&auml;umliche und zeitliche Prozesse der entwickelnden Embryo zu imitieren. Hier die Gr&uuml;nde f&uuml;r ESC Aggregatation, statt &quot;Verbreitung&quot; auf Gelatine beschichtete oder Maus embryonalen Fibroblasten (MEF)-beschichtete Gerichte, wird durch die Quantifizierung der Ausdruck der Adh&auml;sionsmolek&uuml;le auf ESC und die Berechnung der Streitkr&auml;fte der Klebstoff im ESC untersucht. Modellierung jeder ESC als ein Dodekaeder, die Haftkraft f&uuml;r jede ESC-ESC-Bindung wurde festgestellt, dass 9,1 x 10 (5) pN, w&auml;hrend die Haftkraft f&uuml;r ESC-MEF-Bindung gefunden wurde, um eine Gr&ouml;&szlig;enordnung kleiner bei 7,9 x 10 (4) werden pN. Wir zeigen auch, dass E-Cadherin das dominierende Molek&uuml;l in der ESC-ESC-Adh&auml;sion ist und Blockieren von E-Cadherin zu einem erheblichen R&uuml;ckgang der Kolonie-Gr&uuml;ndung f&uuml;hrt. Hier beschreiben wir mathematisch die Vorliebe f&uuml;r ESC ESC ESC-Aggregate und 3D Kolonien, self-assemble anstatt zu binden und setzte auf Gelatine oder MEF-beschichtete Gerichte haben gezeigt, dass diese Interaktionen &uuml;berwiegend aufgrund von E-Cadherin Ausdruck auf ESC.

Selbstklebende Kr&auml;fte in embryonale Stammzellen Zellkulturen.

La maggior parte dei sistemi di coltura delle cellule di crescono e diffondersi come contatto inibito monostrati su piatti piatto cultura, ma le cellule staminali embrionali (ESC) &egrave; uno dei fenotipi di cellule che preferiscono si auto-organizzano come strettamente imballate colonie di tridimensionale (3D). ESC anche facilmente formano aggregati cellulari 3D, chiamati corpi embryoid (EB) che imitano parzialmente i processi spaziali e temporali dell&#39;embrione in via di sviluppo. Qui, la logica per aggregatation ESC, piuttosto che &quot;diffondere&quot; su gelatina-rivestito o fibroblasti embrionali del mouse (MEF)-rivestito in piatti, viene esaminato attraverso la quantificazione dei livelli di espressione delle molecole di adesione su ESC e il calcolo delle forze adesive su ESC. Modellazione ogni ESC come un dodecaedro, la forza di attrazione per ogni associazione ESC ESC &egrave; stata trovata per essere 9.1 x 10 (5) pN, considerando che la forza di attrazione per l&#39;associazione ESC-MEF &egrave; stata trovata per essere un ordine di grandezza pi&ugrave; piccoli a 7,9 x 10 (4) pN. Mostriamo anche che E-caderina &egrave; la molecola che domina nell&#39;adesione ESC ESC e bloccando la E-caderina porta ad una significativa riduzione nella formazione di Colonia. Qui, descriviamo matematicamente la preferenza per ESC per assemblarsi in aggregati ESC ESC e colonie 3D, piuttosto che per associare e diffusa su gelatina o piatti rivestiti di MEF e hanno dimostrato che queste interazioni sono principalmente a causa della espressione di E-caderina su ESC.

Kara McCloskey

School of Engineering

University of California Merced - UC Merced

Shrinky-Dink Hanging Drops: A Simple Way to Form and Culture Embryoid Bodies

Kara McCloskey

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University of California Merced - UC Merced

Shrinky-Dink Hanging Drops: A Simple Way to Form and Culture Embryoid Bodies

School of Engineering