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Whole Mount <em>in Situ</em> Hybridization of E8.5 to E11.5 Mouse Embryos

Whole mount in situ hybridization is a very informative approach for defining gene expression patterns in embryos. The in situ hybridization procedures ...

University of Georgia

GATA3&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x53CC;&#x950C;&#x6307;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E0E;&#x611F;&#x97F3;&#x795E;&#x7ECF;&#x6027;&#x8033;&#x804B;&#x548C;&#x80BE;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E0D;&#x826F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x529F;&#x80FD;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x75C7;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x5728;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; + /-&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0E;&#x4F4E;&#x9499;&#x548C;&#x7EF4;&#x751F;&#x7D20; D &#x7684;&#x996E;&#x98DF;&#x4EE5;&#x63ED;&#x9732;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4EFB;&#x4F55;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x6027; Gata3 GATA3 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x5BFC;&#x81F4;&#x9AD8;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x4E3A; + /-&#x5C0F;&#x9F20;&#x76F8;&#x6BD4; Gata3 Gata3 + + &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5176;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; littermates&#xFF0C;+ /-&#x5C0F;&#x9F20; Gata3 &#x4E86;&#x9499;&#x548C;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x7D20; (PTH) &#x548C;&#x51CF;&#x5C11; Ki-67 &#x6269;&#x6563;&#x7387;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x7684;&#x8840;&#x6D46;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8F83;&#x4F4E;&#x3002;&#x5728; E11.5&#xFF0C;Gata3 + /-&#x80DA;&#x80CE;&#x4E0E;&#x66F4;&#x5C11;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x5931;&#x8E2A; 2 (Gcm2) &#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; GCMB &#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E86;&#x5C0F;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x80F8;&#x817A;&#x539F;&#x57FA;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;E11.5 Gata3/&#x80DA;&#x80CE;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x6CA1;&#x6709; Gcm2 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x7531; E12.5 &#x5728;&#x7B2C;&#x4E09;&#x548C;&#x7B2C;&#x56DB;&#x6B21;&#x54BD;&#x7684;&#x90AE;&#x888B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x80F8;&#x817A;&#x539F;&#x57FA;&#x6709;&#x4E25;&#x91CD;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x7535;&#x6CF3;&#x8FC1;&#x79FB;&#x8F6C;&#x53D8;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x62A5;&#x9053;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6C89;&#x6DC0;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E; GATA3 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5177;&#x4F53;&#x5230;&#x5185; GCMB &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x529F;&#x80FD;&#x53CC;&#x53CD;&#x4E32;&#x6BCD;&#x9898;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;GATA3 &#x662F;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; GCM2/B&#x3001; &#x8F6C;&#x5F55;&#x68AF;&#x7EA7;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

Gata3 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x53D1;&#x5C55;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x7532;&#x72B6;&#x65C1;&#x817A;&#x7279;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Gcm2 &#x65F6;&#x5F02;&#x5E38;&#x539F;&#x56E0;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x3002;

Heterozygous mutations of GATA3, which encodes a dual zinc-finger transcription factor, cause hypoparathyroidism with sensorineural deafness and renal dysplasia. Here, we have investigated the role of GATA3 in parathyroid function by challenging Gata3+/- mice with a diet low in calcium and vitamin D so as to expose any defects in parathyroid function. This led to a higher mortality among Gata3+/- mice compared with Gata3+/+ mice. Compared with their wild-type littermates, Gata3+/- mice had lower plasma concentrations of calcium and parathyroid hormone (PTH) and smaller parathyroid glands with a reduced Ki-67 proliferation rate. At E11.5, Gata3+/- embryos had smaller parathyroid-thymus primordia with fewer cells expressing the parathyroid-specific gene glial cells missing 2 (Gcm2), the homolog of human GCMB. In contrast, E11.5 Gata3-/- embryos had no Gcm2 expression and by E12.5 had gross defects in the third and fourth pharyngeal pouches, including absent parathyroid-thymus primordia. Electrophoretic mobility shift, luciferase reporter, and chromatin immunoprecipitation assays showed that GATA3 binds specifically to a functional double-GATA motif within the GCMB promoter. Thus, GATA3 is critical for the differentiation and survival of parathyroid progenitor cells and, with GCM2/B, forms part of a transcriptional cascade in parathyroid development and function.

Gata3-deficient mice develop parathyroid abnormalities due to dysregulation of the parathyroid-specific transcription factor Gcm2.

Une mutation h&#xE9;t&#xE9;rozygote du GATA3, qui code pour un facteur de transcription &#xE0; doigt de zinc double, provoquer une hypoparathyro&#xEF;die avec une surdit&#xE9; neurosensorielle et une dysplasie r&#xE9;nale. Ici, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; le r&#xF4;le de la fonction parathyro&#xEF;dienne dans GATA3 en remettant en cause GATA3 + / - souris avec un r&#xE9;gime alimentaire faible en calcium et en vitamine D de mani&#xE8;re &#xE0; exposer tous les d&#xE9;fauts de la fonction parathyro&#xEF;dienne. Cela a conduit &#xE0; une mortalit&#xE9; plus &#xE9;lev&#xE9;e parmi les GATA3 + / - souris par rapport &#xE0; GATA3 souris + / +. Par rapport &#xE0; leurs s&#x153;urs de type sauvage, les GATA3 + / - souris pr&#xE9;sentaient des concentrations plasmatiques de calcium et l&#x26;#39;hormone parathyro&#xEF;de (PTH) et des glandes parathyro&#xEF;des plus petites avec un r&#xE9;duit Ki-67 taux de prolif&#xE9;ration. &#xC0; E11.5, GATA3 + / - embryons avaient plus petite parathyro&#xEF;dienne-thymus primordia avec moins de cellules exprimant les g&#xE8;nes des cellules gliales parathyro&#xEF;dienne sp&#xE9;cifiques manquantes 2 (gcm2), l&#x26;#39;homologue de GCMB humaine. En revanche, E11.5 GATA3-/ - embryons n&#x26;#39;avaient aucune expression gcm2 et par E12.5 pr&#xE9;sentaient des d&#xE9;fauts graves dans les troisi&#xE8;me et quatri&#xE8;me poches pharyng&#xE9;es, y compris les absents parathyro&#xEF;dienne-thymus primordia. D&#xE9;calage de mobilit&#xE9; &#xE9;lectrophor&#xE9;tique, rapporteur de la lucif&#xE9;rase, et des essais ont montr&#xE9; que immunopr&#xE9;cipitation de la chromatine GATA3 se lie sp&#xE9;cifiquement &#xE0; une fonctionnelle double-GATA motif au sein du promoteur GCMB. Ainsi, GATA3 est essentielle pour la diff&#xE9;renciation et la survie des cellules prog&#xE9;nitrices parathyro&#xEF;des et, avec GCM2 / B, s&#x26;#39;inscrit dans le cadre d&#x26;#39;une cascade de transcription dans le d&#xE9;veloppement de la parathyro&#xEF;de et la fonction.

GATA3 souris d&#xE9;ficientes d&#xE9;veloppent des anomalies parathyro&#xEF;diennes raison de dysr&#xE9;gulation de la gcm2 parathyro&#xEF;dienne sp&#xE9;cifique Transcription Factor

Heterozygote Mutationen des GATA3, das einen dual Zinkfinger-Transkriptionsfaktor codiert, verursachen Hypoparathyreoidismus mit Schallempfindungs-Schwerh&ouml;rigkeit und Nierendysplasie. Hier haben wir untersucht, die Rolle der GATA3 in Nebenschilddr&uuml;se Funktion von anspruchsvollen Gata3 +/-M&auml;use mit einer Ern&auml;hrung, die arm an Calcium und Vitamin D um M&auml;ngel in der Nebenschilddr&uuml;se Funktion verf&uuml;gbar zu machen. Dies f&uuml;hrte zu einer h&ouml;heren Mortalit&auml;t unter Gata3 +/-M&auml;use gegen&uuml;ber Gata3 + / + M&auml;use. Verglichen mit ihren Wildtyp-Wurfgeschwister, hatte Gata3 +/-M&auml;use niedriger Plasmaspiegel von Calcium und Parathormon (PTH) und kleinere Nebenschilddr&uuml;sen mit einem erm&auml;&szlig;igten Ki-67-Verbreitung. E11.5 hatte Gata3 +/-Embryonen kleiner Parathyroid-Thymus Primordia mit weniger Zellen die Nebenschilddr&uuml;se-spezifische gen-Gliazellen fehlen 2 (Gcm2), der homologe des menschlichen GCMB zum Ausdruck zu bringen. Im Gegensatz dazu E11.5 Gata3-/-Embryonen hatte keine Gcm2 Ausdruck und E12.5 hatte grobe M&auml;ngel in der dritten und vierten pharyngis Beutel, einschlie&szlig;lich der abwesenden Parathyroid-Thymus Primordia. Elektrophoretische Mobilit&auml;t UMSCHALT, Luciferase Reporter und Chromatin Immunopr&auml;zipitation Proben zeigten, dass GATA3 speziell auf eine funktionelle Doppel-GATA-Motiv innerhalb des Projekttr&auml;gers GCMB bindet. So ist die GATA3 f&uuml;r die Differenzierung und &Uuml;berleben der Nebenschilddr&uuml;se Vorl&auml;uferzellen und GCM2/b, ist Teil einer transcriptional Kaskade in Nebenschilddr&uuml;se Entwicklung und Funktion.

Gata3-defizienten M&auml;usen entwickeln Nebenschilddr&uuml;se Anomalien aufgrund Dysregulation des Parathyroid-spezifischen Transkriptionsfaktors Gcm2.

Mutazioni eterozigoti di GATA3, che codifica per un fattore di trascrizione zinc-finger dual, provocano ipoparatiroidismo con sordit&agrave; neurosensoriale e displasia renale. Qui, abbiamo studiato il ruolo di GATA3 in funzione delle paratiroidi da impegnativi Gata3 + topi con una dieta a basso contenuto di calcio e vitamina D in modo da esporre eventuali difetti nella funzione delle paratiroidi. Ci&ograve; ha condotto ad una maggiore mortalit&agrave; tra Gata3 + topi confrontato con Gata3 + + topi. Rispetto ai loro littermates wild-type, Gata3 + topi aveva bassa concentrazione plasmatica di calcio e paratormone (PTH) e piccole ghiandole paratiroidi, con un ridotto tasso di proliferazione Ki-67. A E11.5, Gata3 + embrioni avevano minori paratiroidi-Timo primordia con poche cellule che esprimono le cellule gliali paratiroideo specifico gene mancante 2 (Gcm2), l&#39;omologo della GCMB umana. Al contrario, E11.5 Gata3-/-embrioni non avevano alcuna espressione Gcm2 e da E12.5 aveva difetti lordi in buste per terzi e quarto faringe, compresi assenti paratiroidi-Timo primordia. Spostamento di mobilit&agrave; elettroforetica, reporter luciferasi e dosaggi di immunoprecipitazione della cromatina ha mostrati che GATA3 lega specificamente a un motivo funzionale double-GATA entro il promotore GCMB. Cos&igrave;, GATA3 &egrave; fondamentale per la differenziazione e la sopravvivenza delle cellule progenitrici delle paratiroidi e, con GCM2/B, fa parte di una cascata di transcriptional nello sviluppo delle paratiroidi e funzione.

Gata3-deficient mice sviluppano anomalie delle paratiroidi a causa della disregolazione del paratiroide-specifico fattore di trascrizione Gcm2.

&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AF;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;GATA3&#x306E;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x96E3;&#x8074;&#x3001;&#x814E;&#x7570;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x75C7;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x9732;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x30D3;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;D&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x98DF;&#x4E8B;&#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; - &#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;GATA3 + /&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x3057;&#x3001;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;GATA3&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; GATA3 + / +&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; - &#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;GATA3 + /&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x9AD8;&#x3044;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x540C;&#x8179;&#x5B50;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;GATA3 + /  - &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;Ki-67&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x7387;&#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;PTH&#xFF09;&#x3068;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002; E11.5&#x3001;GATA3&#x3067;+ /  - &#x306E;&#x80DA;&#x306F;&#x3001;2&#xFF08;Gcm2&#xFF09;&#x304C;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;GCMB&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5C0F;&#x578B;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x3001;&#x80F8;&#x817A;&#x539F;&#x57FA;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;E11.5 GATA3-/  - &#x80DA;&#x306F;Gcm2&#x8868;&#x73FE;&#x304C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3068;E12.5&#x3067;&#x306A;&#x3044;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x3001;&#x80F8;&#x817A;&#x539F;&#x57FA;&#x3092;&#x542B;&#x3080;3&#x756A;&#x76EE;&#x3068;4&#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x54BD;&#x982D;&#x888B;&#x3067;&#x7DCF;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3001;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;GATA3&#x304C;GCMB&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5185;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB;GATA&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;GATA3&#x304C;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3001;GCM2 / B&#x3067;&#x3001;&#x526F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

GATA3&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;Gcm2&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7532;&#x72B6;&#x817A;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x958B;&#x767A;

GATA3 &#xB4C0;&#xC5BC; &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xC804;&#xC0AC; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; heterozygous &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAC10;&#xAC01; &#xCCAD;&#xAC01; &#xC7A5;&#xC560; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xBC1C;&#xC721; &#xC774;&#xC0C1; hypoparathyroidism&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; parathyroid &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418;&#xBBC0;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4;&#xD2B8; &#xCE7C;&#xC298; &#xBC0F; &#xBE44;&#xD0C0;&#xBBFC; D&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; + &#xB3C4;&#xC804; gata3&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; parathyroid &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; gata3&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; gata3&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC950; + Gata3 &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; + + &#xC950;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; littermates&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50;&#xD574;, &#xC950; + Gata3 &#xCE7C;&#xC298; &#xBC0F; &#xBD80; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; (PTH)&#xC640; &#xAC10;&#xC18C; &#xAE30;-67 &#xD655;&#xC0B0; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC640; &#xC791;&#xC740; &#xBD80; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. E11.5, &#xBC30;&#xC544; + Gata3 &#xC791;&#xC740; &#xBD80; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120;-thymus primordia &#xC801;&#xC740; &#xC140; 2 (Gcm2) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; GCMB &#xCCB4; &#xB204;&#xB77D; &#xB41C; &#xBD80; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120; &#xAD00;&#xB828; &#xC9C4; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, E11.5 Gata3/&#xBC30;&#xC544; Gcm2 &#xC2DD;&#xC774; &#xC5C6;&#xB294; &#xC84C;&#xACE0; E12.5&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120;-thymus primordia &#xACB0; &#xC11D;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC138; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBC0F; &#xB124; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC778; &#xB450; &#xD30C;&#xC6B0;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xAE30;&#xB3D9;&#xC131; &#xAD50;&#xB300;, &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xAE30;&#xC790; &#xBC0F; chromatin immunoprecipitation &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBCF4;&#xC5EC; GATA3 GCMB &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB0B4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xB354;&#xBE14; GATA &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xB97C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; gata3&#xB294; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xBC0F; GCM2/b, parathyroid &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; transcriptional &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xD615;&#xC131;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; parathyroid &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Gata3 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBD80; &#xAC11; &#xC0C1;&#xC120; &#xAD00;&#xB828; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Gcm2 dysregulation parathyroid &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xAC1C;&#xBC1C;.

Mutaciones heterocigotas de GATA3, que codifica una doble zinc-finger factor de transcripci&#xF3;n, causan el hipoparatiroidismo con sordera neurosensorial y displasia renal. En este sentido, han investigado el papel de GATA3 en la funci&#xF3;n paratiroidea, desafiando GATA3 + / - ratones con una dieta baja en calcio y vitamina D a fin de exponer los defectos de la funci&#xF3;n paratiroidea. Esto llev&#xF3; a una mayor mortalidad entre GATA3 + / - ratones en comparaci&#xF3;n con GATA3 + / + ratones. En comparaci&#xF3;n con sus compa&#xF1;eros de camada de tipo salvaje, GATA3 + / - ratones ten&#xED;an menores concentraciones plasm&#xE1;ticas de calcio y la hormona paratiroidea (PTH) y m&#xE1;s peque&#xF1;as gl&#xE1;ndulas paratiroides con una reducida proliferaci&#xF3;n Ki-67 la tasa. En E11.5, GATA3 + / - embriones ten&#xED;an m&#xE1;s peque&#xF1;o timo-paratiroidea primordios con menos c&#xE9;lulas que expresan las c&#xE9;lulas de genes espec&#xED;ficos paratiroidea-gliales que faltan 2 (gcm2), el hom&#xF3;logo de GCMB humana. Por el contrario, E11.5 GATA3-/ - embriones no ten&#xED;a ninguna expresi&#xF3;n gcm2 y E12.5 ten&#xED;a graves defectos en las bolsas far&#xED;ngeas tercera y cuarta, entre ellos ausentes paratiroidea-timo primordios. Cambio de movilidad electrofor&#xE9;tica, reportero de la luciferasa, y los ensayos de inmunoprecipitaci&#xF3;n de cromatina mostr&#xF3; que GATA3 se une espec&#xED;ficamente a una funcional, doble motivo de GATA en el promotor GCMB. As&#xED;, GATA3 es cr&#xED;tico para la diferenciaci&#xF3;n y la supervivencia de las c&#xE9;lulas progenitoras paratiroides y, con GCM2 / B, forma parte de una cascada transcripcional en el desarrollo y la funci&#xF3;n paratiroidea.

GATA3 ratones con deficiencia de desarrollar alteraciones Paratiroides Debido a la desregulaci&#xF3;n de la gcm2 paratiroidea-factor de transcripci&#xF3;n espec&#xED;fico

Les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales thymiques (TEC) sont n&#xE9;cessaires pour le d&#xE9;veloppement normal des cellules T. Actuellement, un facteur de transcription, Foxn1 est connu pour &#xEA;tre n&#xE9;cessaire pour la progression de la diff&#xE9;renciation du foetus TEC. Cependant, certains aspects de la diff&#xE9;renciation du foetus TEC se produire dans Foxn1 mutants, sugg&#xE9;rant l&#x26;#39;existence d&#x26;#39;autres r&#xE9;gulateurs de la transcription de la diff&#xE9;renciation TEC. Le but de cette &#xE9;tude &#xE9;tait d&#x26;#39;identifier certains des facteurs de transcription suppl&#xE9;mentaires candidats qui peuvent &#xEA;tre impliqu&#xE9;s dans la sp&#xE9;cification et / ou la diff&#xE9;renciation des TEC au cours du d&#xE9;veloppement foetal.

Un focalis&#xE9;s dans l&#x26;#39;&#xE9;cran hybridation in situ Identifie r&#xE9;gulateurs transcriptionnels candidats du d&#xE9;veloppement des cellules &#xE9;pith&#xE9;liales thymiques et de la fonction

Thymom Epithelzellen (TECs) sind notwendig f&uuml;r die normale T-Zell-Entwicklung. Derzeit ist ein Transkriptionsfaktor Foxn1 bekannt, f&uuml;r das Fortschreiten der fetalen TEC Differenzierung erforderlich. Allerdings treten einige Aspekte der fetalen TEC Differenzierung in Foxn1-Mutanten, die Existenz von zus&auml;tzlichen transkriptionelle Regler der TEC Differenzierung vorgeschlagen. Ziel dieser Studie war es, einige der zus&auml;tzlichen Kandidaten Transkriptionsfaktoren, die in der Spezifikation beteiligt sein k&ouml;nnen oder die Differenzierung der TECs w&auml;hrend der fetalen Entwicklung zu identifizieren.

Ein fokussierte in situ-Hybridisierung-Bildschirm identifiziert Kandidat transkriptionelle Regler der Tumor Epithelialer Zellen Entwicklung und Funktion.

Le cellule epiteliali del timo (TECs) sono necessarie per lo sviluppo normale delle cellule T. Attualmente, un fattore di trascrizione, Foxn1 &egrave; conosciuto per essere necessari per la progressione della differenziazione fetale di TEC. Tuttavia, alcuni aspetti di differenziazione TEC fetale si verificano Foxn1 mutanti, suggerendo l&#39;esistenza di ulteriori regolatori trascrizionali della differenziazione TEC. L&#39;obiettivo di questo studio era di identificare alcuni dei fattori di trascrizione candidato supplementari che possono essere coinvolti nella specifica e/o differenziazione di TECs durante lo sviluppo fetale.

Uno schermo focalizzato l&#39;ibridazione in situ identifica regolatori trascrizionali candidato della funzione e lo sviluppo delle cellule epiteliali del timo.

&#x80F8;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x95F4;) &#x662F;&#x6B63;&#x5E38; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;Foxn1 &#x662F;&#x5DF2;&#x77E5;&#x6709;&#x5FC5;&#x8981;&#x4E3A;&#x80CE;&#x513F; TEC &#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x80CE;&#x513F; TEC &#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x67D0;&#x4E9B;&#x65B9;&#x9762;&#x53D1;&#x751F;&#x5728; Foxn1 &#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5B58;&#x5728;&#x989D;&#x5916;&#x7684; TEC &#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E00;&#x4E9B;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x89C4;&#x8303;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;/&#x6216;&#x80CE;&#x513F;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x95F4;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x3002;

&#x91CD;&#x70B9;&#x7A81;&#x51FA;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x5C4F;&#x5E55;&#x6807;&#x8BC6;&#x5019;&#x9009;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x80F8;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Thymic epithelial cells (TECs) are necessary for normal T cell development. Currently, one transcription factor, Foxn1 is known to be necessary for the progression of fetal TEC differentiation. However, some aspects of fetal TEC differentiation occur in Foxn1 mutants, suggesting the existence of additional transcriptional regulators of TEC differentiation. The goal of this study was to identify some of the additional candidate transcription factors that may be involved in the specification and/or differentiation of TECs during fetal development.

A focused in situ hybridization screen identifies candidate transcriptional regulators of thymic epithelial cell development and function.

&#x80F8;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;TECS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;1&#x3064;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;Foxn1&#x306F;&#x3001;&#x80CE;&#x5150;TEC&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;TEC&#x306E;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x3067;&#x306F;&#x3001;TEC&#x306E;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;Foxn1&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;&#x767A;&#x80B2;&#x4E2D;&#x306E;TECS&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x96C6;&#x675F;&#x80F8;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

Thymic &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (TECs)&#xC740; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; T &#xC138;&#xD3EC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;, &#xD55C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Foxn1 &#xD0DC;&#xC544; TEC &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xD0DC;&#xC544; TEC &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xCE21;&#xBA74; TEC &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; Foxn1 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xC0AC;&#xC591;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCD94;&#xAC00; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; &#xBC0F; &#xBD84;&#xD654; Tecs&#xC758; &#xD0DC;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xCD08;&#xC810; &#xB9DE;&#xCD98;&#xB41C; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xD654;&#xBA74; thymic &#xC0C1;&#xD53C; &#xC804;&#xC9C0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xD6C4;&#xBCF4; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C&#xE9;lulas epiteliales del timo (TEC) son necesarios para el desarrollo normal de las c&#xE9;lulas T. Actualmente, un factor de transcripci&#xF3;n, Foxn1 se sabe que es necesaria para la progresi&#xF3;n de la diferenciaci&#xF3;n del feto TCE. Sin embargo, algunos aspectos de la diferenciaci&#xF3;n del feto TCE se producen en Foxn1 mutantes, lo que sugiere la existencia de otros reguladores transcripcionales de la diferenciaci&#xF3;n del TCE. El objetivo de este estudio fue identificar algunos de los factores de transcripci&#xF3;n candidatos adicionales que pueden estar involucrados en la especificaci&#xF3;n y / o la diferenciaci&#xF3;n de TEC durante el desarrollo fetal.

Un Enfocados en la pantalla hibridaci&#xF3;n in situ Identifica reguladores transcripcionales candidatos de desarrollo del timo de la c&#xE9;lula epitelial y funci&#xF3;n

Qiaozhi Wei

Department of Genetics

University of Georgia

Whole Mount in Situ Hybridization of E8.5 to E11.5 Mouse Embryos

Qiaozhi Wei

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University of Georgia

Whole Mount in Situ Hybridization of E8.5 to E11.5 Mouse Embryos

Department of Genetics