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Visualizing Dengue Virus through Alexa Fluor Labeling

The early events in the interaction between virus and cell can have profound influence on the outcome of infection. Determining the factors 
that ...

DUKE-NUS Graduate Medical School

Se realiz&#xF3; un estudio para determinar la presencia de inhibici&#xF3;n de la hemaglutinaci&#xF3;n (IH) y neutralizaci&#xF3;n de los anticuerpos contra el virus de la encefalitis japonesa (JEV) en los cerdos salvajes en una isla en alta mar en Singapur. Tomaron muestras de sangre de 28 cerdos salvajes en la isla. Todos los sueros probados con la prueba de HI y las pruebas de neutralizaci&#xF3;n por reducci&#xF3;n de placas resultaron ser positivos para anticuerpos contra JEV. Nuestros resultados indican que los cerdos salvajes han sido infectados con el ECE en la isla en alta mar y no hay transmisi&#xF3;n de JEV.

La presencia de inhibici&#xF3;n de hemaglutinaci&#xF3;n y anticuerpos de neutralizaci&#xF3;n de virus de encefalitis japonesa en los cerdos salvajes en un Offshore Island en Singapur

&#x8FDB;&#x884C;&#x4E00;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x8840;&#x51DD;&#x6291;&#x5236; (HI) &#x548C;&#x65B0;&#x52A0;&#x5761;&#x79BB;&#x5CB8;&#x5C9B;&#x4E0A;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x732A;&#x4E59;&#x578B;&#x8111;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x4E59;&#x8111;) &#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x4ECE; 28 &#x91CE;&#x732A;&#x5C9B;&#x4E0A;&#x6536;&#x96C6;&#x4E86;&#x8840;&#x6DB2;&#x6837;&#x672C;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x8840;&#x6E05;&#x90FD;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x559C;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x83CC;&#x6591;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E2D;&#x548C;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x53D1;&#x73B0;&#x8111;&#x708E;&#x6297;&#x4F53;&#x4E3A;&#x9633;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x91CE;&#x751F;&#x732A;&#x53EA;&#x611F;&#x67D3;&#x4E59;&#x8111;&#x79BB;&#x5CB8;&#x5C9B;&#x4E0A;&#x6709;&#x8111;&#x708E;&#x4F20;&#x67D3;&#x3002;

&#x5728;&#x65B0;&#x52A0;&#x5761;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x79BB;&#x5CB8;&#x5C9B;&#x4E0A;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x732A;&#x4E59;&#x578B;&#x8111;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8840;&#x51DD;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

A study was conducted to determine the presence of hemagglutination inhibition (HI) and neutralization antibodies against Japanese encephalitis virus (JEV) in wild pigs on an offshore island in Singapore. Blood samples were collected from 28 wild pigs on the island. All the sera tested with HI assay and plaque reduction neutralization tests were found to be positive for antibodies against JEV. Our results indicate that the wild pigs have been infected with JEV on the offshore island and there is JEV transmission.

Presence of hemagglutination inhibition and neutralization antibodies to Japanese encephalitis virus in wild pigs on an offshore island in Singapore.

Une &#xE9;tude a &#xE9;t&#xE9; men&#xE9;e afin de d&#xE9;terminer la pr&#xE9;sence d&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;h&#xE9;magglutination (HI) et des anticorps contre le virus de neutralisation contre l&#x26;#39;enc&#xE9;phalite japonaise (JEV) chez les porcs sauvages sur une &#xEE;le au large des c&#xF4;tes de Singapour. Des &#xE9;chantillons de sang ont &#xE9;t&#xE9; collect&#xE9;es &#xE0; partir de 28 porcs sauvages sur l&#x26;#39;&#xEE;le. Tous les s&#xE9;rums test&#xE9;s avec inhibition de l&#x26;#39;h&#xE9;magglutination et les tests de neutralisation par r&#xE9;duction des plages ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s positifs pour les anticorps dirig&#xE9;s contre le VEJ. Nos r&#xE9;sultats indiquent que les porcs sauvages ont &#xE9;t&#xE9; infect&#xE9;s par le JEV sur l&#x26;#39;&#xEE;le au large des c&#xF4;tes et il ya de transmission JEV.

Pr&#xE9;sence de l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;h&#xE9;magglutination et de neutralisation d&#x26;#39;anticorps virus de l&#x26;#39;enc&#xE9;phalite japonaise chez les porcs sauvages sur une &#xEE;le en mer &#xE0; Singapour

Anwesenheit von H&#xE4;magglutinationshemmungs und Neutralisierung von Antik&#xF6;rpern gegen Japanische Enzephalitis-Virus bei frei lebenden Wildschweinen auf einer vorgelagerten Insel in Singapur.

Uno studio &egrave; stato condotto per determinare la presenza di inibizione emoagglutinazione (HI) e anticorpi degli neutralizzazione contro il virus giapponese di encefalite (JEV) nei suini selvatici su un&#39;isola al largo di Singapore. Campioni di sangue sono stati raccolti da 28 maiali selvaggi dell&#39;isola. Tutti i sieri testati con test HI e test di neutralizzazione riduzione placca sono stati trovati per essere positivi per gli anticorpi contro JEV. I nostri risultati indicano che i maiali selvaggi sono stati infettati con JEV sull&#39;isola al largo e non c&#39;&egrave; trasmissione JEV.

Presenza di emoagglutinazione inibizione e neutralizzazione anticorpi al virus di encefalite giapponese in maiali selvaggi su un&#39;isola al largo di Singapore.

&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6C96;&#x5408;&#x306E;&#x5CF6;&#x306B;&#x91CE;&#x751F;&#x306E;&#x30D6;&#x30BF;&#x306E;&#x65E5;&#x672C;&#x8133;&#x708E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x51DD;&#x96C6;&#x6291;&#x5236;&#xFF08;HI&#xFF09;&#x3001;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#xFF08;JEV&#xFF09;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5CF6;&#x306E;28&#x91CE;&#x751F;&#x306E;&#x30D6;&#x30BF;&#x304B;&#x3089;&#x200B;&#x200B;&#x63A1;&#x53D6;&#x3057;&#x305F;&#x3002; HI&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x6E1B;&#x5C11;&#x4E2D;&#x548C;&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x306F;&#x3001;JEV&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x967D;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x306E;&#x8C5A;&#x304C;&#x6C96;&#x5408;&#x306E;&#x5CF6;&#x306B;JEV&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;JEV&#x306E;&#x9001;&#x4FE1;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30F3;&#x30AC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30AA;&#x30D5;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A2;&#x5CF6;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x306E;&#x8C5A;&#x306E;&#x65E5;&#x672C;&#x8133;&#x708E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x51DD;&#x96C6;&#x6291;&#x5236;&#x3068;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;

Hemagglutination &#xC5B5;&#xC81C; (&#xD558;&#xC774;)&#xC640; &#xC2F1;&#xAC00;&#xD3EC;&#xB974;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xC678; &#xC12C;&#xC5D0; &#xC57C;&#xC0DD; &#xB3FC;&#xC9C0;&#xC758; &#xC77C;&#xBCF8; &#xB1CC;&#xC5FC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (JEV)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xD654; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD608;&#xC561; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC740; &#xC12C;&#xC5D0; 28 &#xC57C;&#xC0DD; &#xB3FC;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xB77C;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558; &#xACE0; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC911;&#xD654; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; JEV&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAC83;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD574;&#xC678; &#xC12C; JEV&#xC640; &#xC57C;&#xC0DD; &#xB3FC;&#xC9C0;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; JEV &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2F1;&#xAC00;&#xD3EC;&#xB974;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD574;&#xC678; &#xC12C;&#xC5D0; &#xC57C;&#xC0DD; &#xB3FC;&#xC9C0;&#xC758; &#xC77C;&#xBCF8; &#xB1CC;&#xC5FC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; hemagglutination &#xC800;&#xD574; &#xBC0F; &#xC911;&#xD654; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;.

&#x4E25;&#x91CD;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7; &#xFF08;Sars&#xFF09; &#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5305;&#x542B;&#x51E0;&#x4E2A;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x5F00;&#x653E;&#x9605;&#x8BFB;&#x6846;&#x67B6; &#xFF08;ORFs&#xFF09;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x90FD;&#x662F;&#x590D;&#x5236;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0; 1a/1b &#x548C;&#x56DB;&#x4E2A;&#x7ED3;&#x6784;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x6838;&#x8863;&#x58F3; (N)&#x3001; &#x7A57; (S)&#x3001; &#x819C; (M) &#x548C; (E)&#xFF0C;&#x4FE1;&#x5C01;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x9884;&#x8BA1;&#x5C06;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7EC4;&#x57FA;&#x56E0;&#x8FD8;&#x5305;&#x542B;&#x4E5D;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x4ECE; 39 &#x5230; 274 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x6F5C;&#x5728; ORFs&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x662F;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x7F8A;&#x53E3;&#x75AE;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x6700;&#x957F;&#x7684; subgenomic RNA&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D; (&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x79F0;&#x4E3A; U274) 274 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7EC4;&#x6210;&#x548C;&#x5305;&#x542B;&#x4E09;&#x4E2A;&#x63A8;&#x5B9A;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6297;&#x4F53; U274 C &#x603B;&#x7AD9;&#x5177;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; U274 SARS &#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3; Vero E6 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x5168;&#x957F;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6;&#x52A0;&#x5DE5;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x4E5F;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x95F4;&#x63A5;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;U274 &#x88AB;&#x5C40;&#x90E8;&#x5411;&#x6838;&#x5468;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x8F6C;&#x67D3;&#x548C;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6807;&#x8BB0; myc N &#x603B;&#x7AD9;&#x8BC1;&#x5B9E; U274&#x3001; &#x62D3;&#x6251;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684; U274 &#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;U274&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B; Yxxphi &#x548C; diacidic &#x7684;&#x56FE;&#x6848;&#xFF0C;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF;&#x5220;&#x9664;&#x53D6;&#x6D88;&#x5176;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;U274 &#x8868;&#x793A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5438;&#x6536;&#x57F9;&#x517B;&#x57FA;&#x4ECE;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;Coimmunoprecipitation &#x5B9E;&#x9A8C;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E; U274 &#x53EF;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x5177;&#x4F53;&#x4E0E; M&#x3001; E &#x548C; S &#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; U122&#xFF0C;&#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x975E;&#x5178;&#x578B;&#x80BA;&#x708E;&#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x4E25;&#x91CD;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;U274&#xFF0C;&#x8FD0;&#x9001;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x548C;&#x7ECF;&#x5386;&#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) genome contains open reading frames (ORFs) that encode for several genes that are homologous to proteins found in all known coronaviruses. These are the replicase gene 1a/1b and the four structural proteins, nucleocapsid (N), spike (S), membrane (M), and envelope (E), and these proteins are expected to be essential for the replication of the virus. In addition, this genome also contains nine other potential ORFs varying in length from 39 to 274 amino acids. The largest among these is the first ORF of the second longest subgenomic RNA, and this protein (termed U274 in the present study) consists of 274 amino acids and contains three putative transmembrane domains. Using antibody specific for the C terminus of U274, we show U274 to be expressed in SARS-CoV-infected Vero E6 cells and, in addition to the full-length protein, two other processed forms were also detected. By indirect immunofluorescence, U274 was localized to the perinuclear region, as well as to the plasma membrane, in both transfected and infected cells. Using an N terminus myc-tagged U274, the topology of U274 and its expression on the cell surface were confirmed. Deletion of a cytoplasmic domain of U274, which contains Yxxphi and diacidic motifs, abolished its transport to the cell surface. In addition, U274 expressed on the cell surface can internalize antibodies from the culture medium into the cells. Coimmunoprecipitation experiments also showed that U274 could interact specifically with the M, E, and S structural proteins, as well as with U122, another protein that is unique to SARS-CoV.

A novel severe acute respiratory syndrome coronavirus protein, U274, is transported to the cell surface and undergoes endocytosis.

Le s&#xE9;v&#xE8;re coronavirus du syndrome respiratoire aigu s&#xE9;v&#xE8;re (SRAS-CoV) g&#xE9;nome contient des cadres ouverts de lecture (ORF) qui codent pour plusieurs g&#xE8;nes qui sont homologues &#xE0; des prot&#xE9;ines trouv&#xE9;es dans tous les coronavirus connus. Ce sont le g&#xE8;ne de r&#xE9;plicase 1a/1b et les quatre prot&#xE9;ines structurales, la nucl&#xE9;ocapside (N), de spicule (S), membrane (M), et l&#x26;#39;enveloppe (E), et ces prot&#xE9;ines sont cens&#xE9;s &#xEA;tre essentielle &#xE0; la r&#xE9;plication du virus. En outre, ce g&#xE9;nome contient &#xE9;galement neuf autres ORFs potentiels dont la longueur varie de 39 &#xE0; 274 acides amin&#xE9;s. Le plus grand d&#x26;#39;entre eux est le premier ORF de l&#x26;#39;ARN sous-g&#xE9;nomiques deuxi&#xE8;me plus longue, et cette prot&#xE9;ine (appel&#xE9;e U274 dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude) se compose de 274 acides amin&#xE9;s et contient trois domaines transmembranaires putatifs. En utilisant des anticorps sp&#xE9;cifiques pour le C-terminale de U274, U274, nous montrons &#xE0; &#xEA;tre exprim&#xE9;s en CoV-SRAS-infect&#xE9;s cellules Vero E6 et, en plus de la prot&#xE9;ine de pleine longueur, deux autres formes trait&#xE9;es ont &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s. Par immunofluorescence indirecte, U274 a &#xE9;t&#xE9; localis&#xE9;e dans la r&#xE9;gion p&#xE9;rinucl&#xE9;aire, ainsi que de la membrane plasmique, dans des cellules transfect&#xE9;es et la fois infect&#xE9;e. L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;un terminal N-myc marqu&#xE9; U274, U274 de la topologie et son expression &#xE0; la surface cellulaire ont &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9;s. Suppression d&#x26;#39;un domaine cytoplasmique de U274, qui contient des motifs Yxxphi et diacide, a aboli son transport vers la surface cellulaire. En outre, U274 exprim&#xE9; sur la surface de la cellule peuvent internaliser les anticorps &#xE0; partir du milieu de culture dans les cellules. Exp&#xE9;riences ont &#xE9;galement montr&#xE9; que co-immunopr&#xE9;cipitation U274 peuvent-ils interagir sp&#xE9;cifiquement avec les prot&#xE9;ines M, E, S et structurelles, ainsi que les U122, une autre prot&#xE9;ine qui est unique au SRAS-CoV.

A Novel s&#xE9;v&#xE8;re aigu&#xEB; des prot&#xE9;ines du coronavirus syndrome respiratoire, U274, est transport&#xE9; &#xE0; la surface cellulaire et subir une endocytose

Eine neuartige schwere akute respiratorische Syndrom Coronavirus Protein, U274, wird an die Zelloberfl&#xE4;che transportiert und Endocytose durchl&#xE4;uft.

Il genoma del coronavirus (SARS-CoV) sindrome respiratoria acuta grave contiene open reading frame (ORF) che codificano per diversi geni che sono omologhi di proteine che si trovano in tutti i coronavirus conosciuto. Queste sono le replicasi gene 1a/1b e quattro proteine strutturali, nucleocapside (N), spike (S), membrana (M) e busta (E) e queste proteine dovrebbero essere essenziali per la replicazione del virus. Inoltre, questo genoma contiene anche nove altri potenziali ORFs variano in lunghezza da 39 a 274 aminoacidi. Il pi&ugrave; grande tra questi &egrave; il primo ORF della seconda pi&ugrave; lunga subgenomic RNA e questa proteina (chiamato U274 nel presente studio) &egrave; costituito da 274 amminoacidi e contiene tre domini putativi transmembrana. Utilizzando anticorpi specifici per il C-terminale di U274, ci mostrano U274 essere espresso nelle cellule infettate SARS-CoV Vero E6 e, oltre la proteina full-length, sono state individuate anche due altre forme elaborate. Con l&#39;immunofluorescenza indiretta, U274 era localizzata nella regione perinucleare, cos&igrave; come per la membrana del plasma, in celle transfected e infettate. Utilizzando un capolinea N myc-tagged U274, la topologia di U274 e la sua espressione sulla superficie cellulare sono stati confermati. Eliminazione di un dominio citoplasmico di U274, che contiene motivi Yxxphi e diacidic, abolito il trasporto alla superficie delle cellule. Inoltre, U274 espresso sulla superficie delle cellule pu&ograve; interiorizzare gli anticorpi da terreno di coltura le cellule. Coimmunoprecipitation esperimenti hanno mostrato inoltre che U274 potrebbe interagire in particolare con le proteine strutturali E M e S, nonch&eacute; con U122, un&#39;altra proteina che &egrave; unica per SARS-CoV.

Una proteina di sindrome respiratoria acuta grave romanzo coronavirus, U274, viene trasportata alla superficie delle cellule e subisce endocitosi.

&#x91CD;&#x75C7;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x5668;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;SARS-CoV&#xFF09;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x76F8;&#x540C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;ORF&#xFF09;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;1A/1B&#x3068;4&#x3064;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#xFF08;N&#xFF09;&#x3001;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;&#xFF08;S&#xFF09;&#x3001;&#x819C;&#xFF08;M&#xFF09;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#xFF08;E&#xFF09;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x671F;&#x5F85;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x306F;&#x3001;39&#x304B;&#x3089;274&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306F;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x4ED6;&#x306E;9&#x3064;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;ORF&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x306F;&#x4E8C;&#x756A;&#x76EE;&#x306B;&#x9577;&#x3044;&#x30B5;&#x30D6;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;RNA&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;ORF&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;U274&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#xFF09;274&#x500B;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; U274&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;SARS-CoV&#x306E;&#x611F;&#x67D3;Vero E6&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x5168;&#x9577;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x5F62;&#x614B;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;U274&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x9593;&#x63A5;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;U274&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6838;&#x5468;&#x8FBA;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002; N&#x672B;&#x7AEF;&#x306B;myc&#x30BF;&#x30B0;U274&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;U274&#x306E;&#x30C8;&#x30DD;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; Yxxphi&#x3068;diacidic&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x542B;&#x3080;U274&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3078;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;U274&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x5185;&#x9762;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;U274&#x306F;&#x3001;M&#x3001;E&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;S&#x69CB;&#x9020;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;U122&#x3068;&#x3001;SARS-CoV&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x610F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5225;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5C0F;&#x8AAC;&#x91CD;&#x75C7;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x5668;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;U274&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x8F38;&#x9001;&#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

&#xC911;&#xC99D; &#xAE09;&#xC131; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xCF54;&#xB85C;&#xB098; (SARS CoV) &#xAC8C;&#xB188; &#xB3D9;&#xC885; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; coronaviruses&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD558;&#xB294; &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784; (ORFs) &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB4E4;&#xC740; replicase &#xC720;&#xC804;&#xC790; 1a/1b&#xC640; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, nucleocapsid (N), &#xC2A4;&#xD30C;&#xC774;&#xD06C; (S), &#xB9C9; (M) &#xBC0F; &#xBD09;&#xD22C; (E) &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC608;&#xC0C1; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;,&#xC774; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; 9 &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; ORFs 274 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; 39&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE38;&#xC774;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD070; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; ORF&#xB294; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAE34; subgenomic RNA &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; U274 &#xB418; &#xB098;)&#xC774; 274 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xACE0; &#xC138; &#xC0C1; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; u274&#xC758; C &#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC778; &#xC6B0;&#xB9AC; U274 Vero E6 CoV SARS &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC; &#xACE0;, &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xB450; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xB3C4; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC04;&#xC811; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; U274 perinuclear &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC758; transfected &#xBC0F; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB294;. Myc &#xD0DC;&#xADF8; N &#xC885;&#xC810;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; U274, U274 &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xB294; &#xC2DD;&#xC758; &#xD1A0;&#xD3F4;&#xB85C;&#xC9C0; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; U274 Yxxphi &#xBC0F; diacidic &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC804;&#xC1A1; &#xD3D0;&#xC9C0;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; U274 &#xBB38;&#xD654; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; internalize &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. Coimmunoprecipitation &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB610;&#xD55C; U274 U122, SARS Cov&#xC5D0; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; M, E, &#xBC0F; S &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;.

&#xC18C;&#xC124; &#xC911;&#xC99D; &#xAE09;&#xC131; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xCF54;&#xB85C;&#xB098; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; U274, &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC1A1; &#xD558; &#xACE0; endocytosis &#xACAA; &#xC2B5;.

La grave coronavirus del s&#xED;ndrome respiratorio agudo severo (SARS-CoV) genoma contiene marcos de lectura abierta (ORFs) que codifican para varios genes que son hom&#xF3;logos a las prote&#xED;nas encontradas en todos los coronavirus conocidos. Estos son el gen de la replicasa 1a/1b y las cuatro prote&#xED;nas estructurales, nucleoc&#xE1;psida (N), espiga (S), la membrana (M) y envoltura (E), y estas prote&#xED;nas se espera que sea esencial para la replicaci&#xF3;n del virus. Adem&#xE1;s, este genoma tambi&#xE9;n contiene nueve ORFs otros potenciales que var&#xED;an en longitud desde 39 a 274 amino&#xE1;cidos. El mayor de ellos es el primero de los ORF ARN subgen&#xF3;mico segundo m&#xE1;s largo, y esta prote&#xED;na (llamada U274 en el presente estudio) consta de 274 amino&#xE1;cidos y contiene tres dominios transmembrana putativos. Usando anticuerpo espec&#xED;fico para el extremo C terminal de U274, U274 mostramos que se expresa en el SARS-CoV infectado c&#xE9;lulas Vero E6 y, adem&#xE1;s de la prote&#xED;na de longitud completa, otras dos formas procesadas se detectaron tambi&#xE9;n. Por inmunofluorescencia indirecta, U274 se localiz&#xF3; en la regi&#xF3;n perinuclear, as&#xED; como a la membrana plasm&#xE1;tica, en las c&#xE9;lulas transfectadas y tanto infectado. Usando un extremo N-myc etiquetados U274, la topolog&#xED;a de U274 y su expresi&#xF3;n en la superficie celular se confirmaron. Supresi&#xF3;n de un dominio citopl&#xE1;smico de U274, que contiene motivos Yxxphi y di&#xE1;cido, aboli&#xF3; su transporte a la superficie celular. Adem&#xE1;s, U274 expresa en la superficie celular puede internalizar anticuerpos del medio de cultivo en las c&#xE9;lulas. Coimmunoprecipitation experimentos tambi&#xE9;n mostraron que U274 puede interactuar espec&#xED;ficamente con las prote&#xED;nas M, E, S y estructurales, as&#xED; como con U122, otra prote&#xED;na que es &#xFA;nico para el SARS-CoV.

Una novela S&#xED;ndrome Respiratorio Agudo Severo prote&#xED;na Coronavirus, U274, se transporta a la superficie celular y se somete a la endocitosis

&#x4E25;&#x91CD;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7; &#xFF08;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#xFF09; &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x4F20;&#x67D3;&#x75C5;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x65B0;&#x53D1;&#x73B0;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2; (Sars)&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x5B58;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E25;&#x91CD;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x5C0F;&#x7EC4;&#x5546;&#x4E1A;&#x4E0A;&#x53EF;&#x7528;&#x7684;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x662F;&#x5426;&#x5177;&#x6709;&#x4F53;&#x5916;&#x6297; SARS &#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x5206;&#x6570;&#x4E3A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6240;&#x81F4;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x53D8;&#x5F71;&#x54CD;&#x5BF9;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x7B5B;&#x9009;&#x5316;&#x9A8C;&#x4E86;&#x3002;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86; 19 &#x4E34;&#x5E8A;&#x4E0A;&#x6838;&#x51C6;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x4ECE;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x7C7B;&#xFF1A; &#x7C7B;&#x6838;&#x82F7;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x3001; &#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3001; &#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x4E9A;&#x578B;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x3001; b-1b&#x3001; a n1&#x3001; n3&#xFF0C;&#x4E00;&#x4EBA;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x5F55;&#x5F97;&#x5F7B;&#x5E95;&#x6291;&#x5236;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x53D8;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301;&#x6838;&#x51C6;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E25;&#x91CD;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;

&#x6291;&#x5236; SARS &#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5916;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6279;&#x51C6;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x3002;

Severe acute respiratory syndrome (SARS) is an infectious disease caused by a newly identified human coronavirus (SARS-CoV). Currently, no effective drug exists to treat SARS-CoV infection. In this study, we investigated whether a panel of commercially available antiviral drugs exhibit in vitro anti-SARS-CoV activity. A drug-screening assay that scores for virus-induced cytopathic effects on cultured cells was used. Tested were 19 clinically approved compounds from several major antiviral pharmacologic classes: nucleoside analogs, interferons, protease inhibitors, reverse transcriptase inhibitors, and neuraminidase inhibitors. Complete inhibition of cytopathic effects of SARS-CoV in culture was observed for interferon subtypes, b-1b, a-n1, a-n3, and human leukocyte interferon a. These findings support clinical testing of approved interferons for the treatment of SARS.

Inhibition of SARS coronavirus infection in vitro with clinically approved antiviral drugs.

Syndrome respiratoire aigu s&#xE9;v&#xE8;re (SRAS) est une maladie infectieuse caus&#xE9;e par un coronavirus nouvellement identifi&#xE9; humaine (SRAS-CoV). Actuellement, aucun m&#xE9;dicament efficace n&#x26;#39;existe pour traiter l&#x26;#39;infection SRAS-CoV. Dans cette &#xE9;tude, nous avons cherch&#xE9; &#xE0; savoir si un panel de m&#xE9;dicaments antiviraux disponibles dans le commerce pr&#xE9;sentent in vitro anti-SRAS-CoV activit&#xE9;. Un test de d&#xE9;pistage de drogue que les scores pour viro-induits des effets cytopathiques sur cellules en culture a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;. Test&#xE9; cliniquement &#xE9;taient 19 compos&#xE9;s approuv&#xE9;s provenant de plusieurs grandes classes pharmacologiques antiviraux: analogues nucl&#xE9;osidiques, les interf&#xE9;rons, les inhibiteurs de prot&#xE9;ase, les inhibiteurs de la transcriptase inverse, inhibiteurs de la neuraminidase et. Une inhibition compl&#xE8;te des effets cytopathiques du SRAS-CoV en culture a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e pour les sous-types d&#x26;#39;interf&#xE9;ron, b-1b, un n1-, un n3-, et l&#x26;#39;interf&#xE9;ron humain leucocytaire a. Ces r&#xE9;sultats confirment les essais cliniques des interf&#xE9;rons approuv&#xE9;s pour le traitement du SRAS.

L&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;infection par le coronavirus du SRAS in vitro avec cliniquement approuv&#xE9;s m&#xE9;dicaments antiviraux

Die Hemmung der SARS-Coronavirus-Infektion in vitro mit klinisch zugelassenen antiviralen Medikamenten.

Sindrome respiratoria acuta grave (SARS) &egrave; una malattia infettiva causata da un coronavirus umano recentemente identificato (SARS-CoV). Attualmente, non esiste nessun farmaco efficace per trattare l&#39;infezione da SARS-CoV. In questo studio, abbiamo valutato se un pannello di farmaci antivirali disponibili in commercio presentano attivit&agrave; anti-SARS-CoV in vitro. &Egrave; stato utilizzato un dosaggio di farmaco-screening che Spartiti per effetti citopatici virus-indotta su cellule in coltura. Sono stati analizzati 19 clinicamente composti da diverse grandi classi farmacologiche antivirale: analoghi nucleosidici, interferoni, inibitori della proteasi, inibitori della trascrittasi inversa e inibitori della neuraminidasi. Completa inibizione degli effetti citopatici della SARS-CoV nella cultura &egrave; stata osservata per sottotipi di interferone, b-1b, un n1 a n3 e interferone leucocitario umano una. Questi risultati supportano i test clinici di interferoni approvati per il trattamento della SARS.

Inibizione dell&#39;infezione da coronavirus SARS in vitro con clinicamente approvato farmaci antivirali.

&#x91CD;&#x75C7;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x5668;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;SARS&#xFF09;&#x304C;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;SARS-CoV&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x6709;&#x52B9;&#x306A;&#x85AC;&#x5264;&#x306F;&#x3001;SARS-CoV&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5E02;&#x8CA9;&#x306E;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x85AC;&#x306E;&#x30D1;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x6297;SARS-CoV&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x793A;&#x3059;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x4E0A;&#x3067;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5909;&#x6027;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x30B9;&#x30B3;&#x30A2;&#x304C;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x85AC;&#x5264;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3002;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30B7;&#x30C9;&#x985E;&#x4F3C;&#x4F53;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3001;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x9175;&#x7D20;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#xFF1A;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;19&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x627F;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;SARS-CoV&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5909;&#x6027;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3001;B-1B&#x3001;-N1-N3&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D2;&#x30C8;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;SARS&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x85AC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x627F;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x627F;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x85AC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;in vitro&#x3067;SARS&#x30B3;&#x30ED;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x6291;&#x5236;

&#xC911;&#xC99D; &#xAE09;&#xC131; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (SARS) &#xC0C8;&#xB85C; &#xD655;&#xC778;&#xB41C; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCF54;&#xB85C;&#xB098; (SARS CoV)&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;, &#xC544;&#xB2C8; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xB9C8;&#xC57D; SARS CoV &#xAC10;&#xC5FC; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC874;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0C1;&#xC5C5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC57D;&#xC758; &#xD328;&#xB110; &#xC804;&#xC2DC; &#xCCB4; &#xC678; &#xC548;&#xD2F0; SARS CoV &#xD65C;&#xB3D9; &#xC5EC;&#xBD80; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC57D;&#xBB3C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xACBD;&#xC791;&#xB41C; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; cytopathic &#xD6A8;&#xACFC; &#xC720;&#xBC1C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC810;&#xC218;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC8FC;&#xC694; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; pharmacologic &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; 19 &#xC784;&#xC0C1; &#xC2B9;&#xC778; &#xB41C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;: &#xB274; &#xD074;&#xB808; &#xC624; &#xC2DC;&#xB4DC; &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4;, interferons, protease &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xBC0F; &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;. &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; SARS CoV cytopathic &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xD558;&#xC704;, b-1b,-n1, n3, a &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;&#xC744;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; SARS &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2B9;&#xC778; &#xB41C; interferons&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5B5;&#xC81C;&#xC640; &#xCCB4; &#xC678; &#xC0AC;&#xC2A4; &#xCF54;&#xB85C;&#xB098; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC744; &#xC2B9;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;.

S&#xED;ndrome respiratorio agudo severo (SARS) es una enfermedad infecciosa causada por un coronavirus humana reci&#xE9;n identificada (SARS-CoV). En la actualidad, no existe medicamento efectivo para tratar la infecci&#xF3;n por SARS-CoV. En este estudio, se investig&#xF3; si un grupo de medicamentos antivirales disponibles en el mercado presentan in vitro contra el SARS-CoV actividad. Un ensayo de cribado de drogas que las puntuaciones para inducidas por virus efectos citop&#xE1;ticos sobre las c&#xE9;lulas cultivadas se utiliz&#xF3;. Probado de los 19 compuestos cl&#xED;nicamente aprobados de varias clases principales antivirales: farmacol&#xF3;gicos an&#xE1;logos de los nucle&#xF3;sidos, los interferones, inhibidores de la proteasa, inhibidores de la transcriptasa inversa y los inhibidores de la neuraminidasa. La inhibici&#xF3;n completa de los efectos citop&#xE1;ticos del SARS-CoV en cultivo se observ&#xF3; para los subtipos de interferon b-1b, una n1, una n3-, y de interfer&#xF3;n leucocitario humano uno. Estos hallazgos apoyan las pruebas cl&#xED;nicas de los interferones aprobados para el tratamiento del SARS.

La inhibici&#xF3;n de la infecci&#xF3;n por coronavirus del SRAS en In Vitro con los medicamentos antivirales aprobados cl&#xED;nicamente

Japanese encephalitis virus (JEV) transmission in Singapore appeared to have ceased after pig farming in Singapore was phased out from the early 1980s. However, the recent detection of neutralizing antibodies to JEV in a population of wild boars in an offshore island, as well as the notification of two human cases of JE in Singapore in 2001, prompted us to reconsider the presence and hence the public health threat of JEV in Singapore. We report here a serological study of animals, birds and humans for neutralizing antibodies to JEV. The results indicate that JEV may still be actively transmitted in the peripheral part of the Singapore island and that regular serological surveys of farm animals and birds, such as chickens, may be useful to further elucidate the activity of JEV in Singapore.

Seroepidemiology of neutralizing antibodies to Japanese encephalitis virus in Singapore: continued transmission despite abolishment of pig farming?

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Virus de l&#x26;#39;enc&#xE9;phalite japonaise (JEV) de transmission &#xE0; Singapour semblait avoir cess&#xE9; apr&#xE8;s l&#x26;#39;&#xE9;levage de porcs &#xE0; Singapour a &#xE9;t&#xE9; supprim&#xE9;e &#xE0; partir des ann&#xE9;es 1980. Cependant, la d&#xE9;tection r&#xE9;cente d&#x26;#39;anticorps neutralisants dirig&#xE9;s JEV dans une population de sangliers dans une &#xEE;le au large des c&#xF4;tes, ainsi que la notification de deux cas humains d&#x26;#39;enc&#xE9;phalite japonaise &#xE0; Singapour en 2001, nous a incit&#xE9; &#xE0; reconsid&#xE9;rer la pr&#xE9;sence et donc la menace de sant&#xE9; publique de JEV &#xE0; Singapour. Nous rapportons ici une &#xE9;tude s&#xE9;rologique des animaux, des oiseaux et les humains pour les anticorps neutralisants &#xE0; JEV. Les r&#xE9;sultats indiquent que le JEV peuvent encore &#xEA;tre activement transmis dans la partie p&#xE9;riph&#xE9;rique de l&#x26;#39;&#xEE;le de Singapour et que des &#xE9;tudes r&#xE9;guli&#xE8;res s&#xE9;rologiques des animaux d&#x26;#39;&#xE9;levage et les oiseaux, comme les poulets, peut &#xEA;tre utile pour &#xE9;lucider davantage l&#x26;#39;activit&#xE9; de JEV &#xE0; Singapour.

S&#xE9;ro&#xE9;pid&#xE9;miologie d&#x26;#39;anticorps neutralisant le virus enc&#xE9;phalite japonaise &#xE0; Singapour: poursuite de la transmission Malgr&#xE9; Abolition de l&#x26;#39;&#xE9;levage porcin?

Seroepidemiologie von neutralisierenden Antik&#xF6;rpern gegen Japanische Enzephalitis-Virus in Singapur: fortgesetzte &#xDC;bertragung trotz Abschaffung der Schweinehaltung?

Trasmissione del virus (JEV) encefalite giapponese a Singapore sembrava avere cessato dopo la suinicoltura a Singapore &egrave; stato gradualmente dai primi anni ottanta. Tuttavia, il recente rilevamento di neutralizzare gli anticorpi a JEV in una popolazione di cinghiali in un&#39;isola al largo, cos&igrave; come la notifica di due casi umani di JE a Singapore nel 2001, ci ha spinti a riconsiderare la presenza e quindi la minaccia di salute pubblica di JEV a Singapore. Riportiamo qui uno studio sierologico di animali, uccelli ed esseri umani per neutralizzare anticorpi JEV. I risultati indicano che JEV ancora possono essere trasmessi attivamente nella parte periferica dell&#39;isola di Singapore e che regolari indagini sierologiche di animali da fattoria e uccelli, come polli, possono essere utile per chiarire ulteriormente l&#39;attivit&agrave; di JEV a Singapore.

Seroepidemiology di neutralizzare gli anticorpi del virus di encefalite giapponese a Singapore: ha continuato la trasmissione nonostante il abolishment di allevamento suini?

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&#xC2F1;&#xAC00;&#xD3EC;&#xB974;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBCF8; &#xB1CC;&#xC5FC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC911;&#xD654;&#xC758; Seroepidemiology: &#xC804;&#xC1A1; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xB18D;&#xC5C5;&#xC758; &#xD3D0;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xACC4;&#xC18D;?

El virus de la encefalitis japonesa (JEV) la transmisi&#xF3;n en Singapur parec&#xED;a haber cesado despu&#xE9;s de la cr&#xED;a de cerdos en Singapur fue eliminado de la d&#xE9;cada de 1980. Sin embargo, la reciente detecci&#xF3;n de anticuerpos neutralizadores de la ECE en una poblaci&#xF3;n de jabal&#xED;es en una isla en alta mar, as&#xED; como la notificaci&#xF3;n de dos casos humanos de la JE en Singapur en 2001, nos llev&#xF3; a reconsiderar la presencia y por lo tanto, la amenaza de salud p&#xFA;blica de JEV en Singapur. Presentamos aqu&#xED; un estudio serol&#xF3;gico de los animales, aves y humanos para anticuerpos neutralizantes de JEV. Los resultados indican que todav&#xED;a puede ser JEV transmisi&#xF3;n activa en la parte perif&#xE9;rica de la isla de Singapur y que las encuestas peri&#xF3;dicas serol&#xF3;gicos de los animales de granja y aves, como pollos, puede ser &#xFA;til para esclarecer a&#xFA;n m&#xE1;s la actividad de la ECE en Singapur.

Seroepidemiolog&#xED;a de la neutralizaci&#xF3;n de anticuerpos del virus de la encefalitis japonesa en Singapur: Transmisi&#xF3;n continua pesar de la Abolici&#xF3;n de la ganader&#xED;a porcina?

&#x75C5;&#x6BD2;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x9488;&#x5BF9;&#x6765;&#x81EA;&#x75C5;&#x6BD2; RNA &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5DE5;&#x5177;&#x68C0;&#x6D4B;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x65F6;&#x4E00;&#x6B65;&#x6CD5;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94; (RT-PCR) &#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x68C0;&#x6D4B;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x4E2A;&#x6848;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3002;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x68C0;&#x6D4B;&#x9996;&#x6B21;&#x91C7;&#x7528;&#x7C7B;&#x7EFF;&#x5C9B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4EE5;&#x5177;&#x6709;&#x6210;&#x672C;&#x6548;&#x76CA;&#x7B5B;&#x67E5;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x67D3;&#x6599;&#x3002;Pcr &#x65B9;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x9650;&#x662F; 10ml PFU (&#x6D4B;&#x5B9A;&#x6BCF; 0.01 &#x7B49;&#x6548; PFU&#xFF09; &#x4E3A;&#x6240;&#x6709;&#x56DB;&#x79CD;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A; RT-pcr &#x662F;&#x53CC;&#x9762;&#x8367;&#x5149;&#x63A2;&#x9488;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5B9E;&#x65F6; RT-PCR &#x5206;&#x578B;&#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6837;&#x672C;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x63A2;&#x9488;&#x7684; RT-PCR &#x683C;&#x5F0F;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x9608;&#x503C;&#x662F; 0.1 PFU &#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x767B;&#x9769;&#x70ED; 2&#x3001; &#x767B;&#x9769;&#x70ED;-1 &#x548C; 1 PFU &#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;-3 &#x548C; 0.01 PFU &#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x767B;&#x9769;&#x70ED; 4&#x3002;&#x7B2C;&#x4E09;&#x662F;&#x68C0;&#x6D4B;&#x56DB;&#x79CD;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x7684;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5355;&#x4E2A;&#x5C01;&#x95ED;&#x7BA1;&#x5185;&#x5177;&#x6709;&#x53EF;&#x6BD4;&#x6027;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x7684; fourplex &#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x4E0E;&#x5F53;&#x5730;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6837;&#x672C;&#x4ECE; 2004 &#x5E74;&#x5230; 2006 &#x5E74;&#x5316;&#x9A8C;&#x663E;&#x793A; 88%&#x75C5;&#x6BD2;&#x5206;&#x79BB;&#x4E0E; RT-PCR &#x5BF9;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6B63;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x53CA;&#x5176;&#x4E0E;&#x8840;&#x6E05;&#x968F;&#x540E;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D; 100%&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x3002;Serotyping &#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x6765;&#x81EA;&#x53CC;&#x5DE5;&#x548C; fourplex &#x68C0;&#x6D4B;&#x5B8C;&#x5168;&#x540C;&#x610F;&#x76F8;&#x4E92;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4E0E;&#x4ECE;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x7ECF;&#x6D4E;&#x9AD8;&#x6548;&#x7684;&#x5B9E;&#x65F6;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94; (RT-PCR) &#x5230;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E0A;&#x7684;&#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8DDF;&#x5FEB;&#x901F;&#x5355;&#x7BA1;&#x591A;&#x91CD; RT-PCR &#x68C0;&#x6D4B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x5206;&#x578B;&#x3002;

Virus detection methodology provides detection of dengue virus in the early phase of the disease. PCR, targeting cDNA derived from viral RNA, has been used as a laboratory-based molecular tool for the detection of Dengue virus. We report the development and use of three real-time one-step reverse transcriptase PCR (RT-PCR) assays to detect dengue cases and serotype the virus involved. The first RT-PCR assay uses SYBR green I as the reporting dye for the purpose of cost-effective screening for dengue virus. The detection limit of the SYBR green I assay was 10 PFU/ml (0.01 equivalent PFU per assay) for all four dengue virus serotypes. The second RT-PCR assay is a duplex fluorogenic probe-based real-time RT-PCR for serotyping clinical samples for dengue viruses. The detection threshold of the probe-based RT-PCR format was 0.1 PFU for serotypes Dengue-1 and Dengue-2, 1 PFU for serotype Dengue-3, and 0.01 PFU for serotype Dengue-4. The third is a fourplex assay that detects any of the four serotypes in a single closed tube with comparable sensitivity. Validation of the assays with local clinical samples collected from 2004 to 2006 revealed that there was an 88% positive correlation between virus isolation and RT-PCR with regard to dengue virus detection and a 100% correlation with seroconversion in subsequent samples. The serotyping results derived from duplex and fourplex assays agree fully with each other and with that derived from immunofluorescence assays.

Cost-effective real-time reverse transcriptase PCR (RT-PCR) to screen for Dengue virus followed by rapid single-tube multiplex RT-PCR for serotyping of the virus.

Une m&#xE9;thode de d&#xE9;tection du virus permet la d&#xE9;tection du virus de la dengue dans la phase pr&#xE9;coce de la maladie. PCR, ciblage ADNc d&#xE9;riv&#xE9; de l&#x26;#39;ARN viral, a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; comme outil de laboratoire &#xE0; base mol&#xE9;culaire pour la d&#xE9;tection du virus de la dengue. Nous rapportons le d&#xE9;veloppement et l&#x26;#39;utilisation de trois en temps r&#xE9;el en une seule &#xE9;tape de la transcriptase inverse PCR (RT-PCR) pour d&#xE9;tecter les cas de dengue et de s&#xE9;rotype du virus en cause. Le premier RT-PCR SYBR Green I utilise comme colorant de rapports dans le but de rentable pr&#xE9;alable pour le virus de la dengue. La limite de d&#xE9;tection du test SYBR Green I &#xE9;tait de 10 UFP / ml (0,01 UFP &#xE9;quivalent par dosage) pour tous les quatre s&#xE9;rotypes du virus de la dengue. La seconde RT-PCR est un duplex sonde fluorog&#xE9;nique-temps r&#xE9;el bas&#xE9; sur RT-PCR pour le s&#xE9;rotypage des &#xE9;chantillons cliniques pour virus de la dengue. Le seuil de d&#xE9;tection de la sonde &#xE0; base de RT-PCR en format &#xE9;tait de 0,1 UFP pour les s&#xE9;rotypes 1 et Dengue-dengue-2, 1 PFU pour le s&#xE9;rotype Dengue-3, et 0,01 pour le s&#xE9;rotype Dengue UFP-4. Le troisi&#xE8;me est un test qui d&#xE9;tecte toute quadruplex des quatre s&#xE9;rotypes dans un seul tube ferm&#xE9; avec une sensibilit&#xE9; comparable. Validation des tests avec des &#xE9;chantillons cliniques pr&#xE9;lev&#xE9;s locales de 2004 &#xE0; 2006 a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; qu&#x26;#39;il y avait une corr&#xE9;lation positive entre 88% et l&#x26;#39;isolement du virus par RT-PCR en ce qui concerne la d&#xE9;tection du virus de la dengue et une corr&#xE9;lation de 100% &#xE0; la s&#xE9;roconversion dans les &#xE9;chantillons subs&#xE9;quents. Les r&#xE9;sultats issus de tests de s&#xE9;rotypage duplex et quadruplex suis enti&#xE8;rement d&#x26;#39;accord les uns avec les autres et avec ceux provenant d&#x26;#39;immunofluorescence.

Rapport co&#xFB;t-efficacit&#xE9; en temps r&#xE9;el RT-PCR (RT-PCR) &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;cran pour le virus de la dengue Suivi par Rapid Single-tube de Multiplex RT-PCR pour le s&#xE9;rotypage des virus

Virus Erkennung Methodik erm&ouml;glicht die Erkennung des Denguevirus in der fr&uuml;hen Phase der Erkrankung. PCR, Zielgruppenadressierung cDNA von viraler RNA abgeleitet wurde als Labor-basierte Molekulare Werkzeug zur Erkennung von Dengue-Virus verwendet. Wir berichten &uuml;ber die Entwicklung und Nutzung von drei Echtzeit einstufigen R&uuml;cktranscriptase PCR (RT-PCR) Assays erkennen Dengue-F&auml;lle und Serotyp des Virus beteiligt. Die ersten RT-PCR-Assay verwendet SYBR green I als der Berichterstattung Farbstoff zum Zwecke der kosteng&uuml;nstige Screening f&uuml;r Dengue-Virus. Die Nachweisgrenze der SYBR Green ich Brutversuch wurde 10 PFU/ml (0,01 gleichwertige PFU pro Assay) f&uuml;r alle vier Dengue-Virus-Serotypen. Der zweite RT-PCR-Assay ist ein duplex Fluorogenic testbasierte Real-Time RT-PCR f&uuml;r Serotypisierung klinische Proben f&uuml;r Dengue-Viren. Die Nachweisgrenze der testbasierten RT-PCR Format war 0.1 PFU f&uuml;r Serotypen Dengue-1 und Dengue-Fieber-2, 1 PFU f&uuml;r Serotyp Dengue-3 und 0,01 PFU f&uuml;r Serotyp Dengue-4. Die dritte ist ein Fourplex-Assay, der jeder der vier Serotypen, in einem einzigen geschlossenen Rohr mit vergleichbaren Empfindlichkeit erkennt. Validierung der Tests mit lokalen klinischen Proben gesammelt von 2004 bis 2006 ergab, dass es eine 88 % positive Korrelation zwischen Virusisolierung und RT-PCR in Bezug auf Dengue-Virus-Erkennung und eine 100 %-Korrelation mit Serokonversion in nachfolgenden Proben. Die serotyping Ergebnisse aus Duplex und Fourplex Proben Stimme voll und ganz mit einander und mit dem Immunofluoreszenz Proben abgeleitet.

Kosteng&uuml;nstige Echtzeit R&uuml;cktranscriptase folgten schnelle Einzel-Rohr multiplex RT-PCR f&uuml;r Serotypisierung des Virus PCR (RT-PCR) zum Bildschirm f&uuml;r Dengue-Virus.

Metodologia di rilevamento virus consente il rilevamento del virus dengue nella fase precoce della malattia. PCR, targeting cDNA derivato da RNA virale, &egrave; stato usato come un attrezzo molecolare basata sul laboratorio per il rilevamento di virus della Dengue. Riportiamo lo sviluppo e l&#39;uso di tre One-Step in tempo reale reverse transcriptase PCR (RT-PCR) saggi per rilevare casi di dengue e sierotipo del virus coinvolto. Il primo RT-PCR assay utilizza SYBR green I come la tintura di segnalazione ai fini di screening conveniente per virus della dengue. Il limite di rilevamento del verde SYBR dosaggio era PFU 10ml (0,01 PFU equivalenti per test) per tutti i quattro sierotipi di virus dengue. La seconda analisi di RT-PCR &egrave; un duplex fluorogenic basate sull&#39;analisi real-time RT-PCR per la sierotipizzazione di campioni clinici per virus dengue. La soglia di rilevamento del formato basate sull&#39;analisi di RT-PCR &egrave; stata PFU 0.1 per sierotipi 1 Dengue e Dengue-2, 1 PFU per sierotipo Dengue-3 e 0,01 PFU per sierotipo Dengue-4. Il terzo &egrave; un dosaggio fourplex che rileva uno qualsiasi dei quattro sierotipi in un unico tubo chiuso con sensibilit&agrave; paragonabile. Convalida dei saggi con locali campioni clinici raccolti dal 2004 al 2006 ha rivelato che c&#39;era una 88% di correlazione positiva tra l&#39;isolamento del virus e RT-PCR per quanto riguarda la rilevazione dei virus dengue e una correlazione del 100% con sieroconversione in campioni successivi. I risultati serotyping derivano da duplex e dosaggi fourplex pienamente d&#39;accordo con gli altri e con quello derivato da saggi di immunofluorescenza.

Conveniente in tempo reale il transcriptase PCR (RT-PCR) per schermo per virus della Dengue seguita da rapido tubo singolo multiplex RT-PCR per la sierotipizzazione del virus.

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x691C;&#x51FA;&#x624B;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PCR&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;RNA&#x7531;&#x6765;&#x306E;cDNA&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x60A3;&#x8005;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3059;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x306B;&#x306F;3&#x3064;&#x306E;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30EF;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x9175;&#x7D20;PCR&#xFF08;RT-PCR&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x5229;&#x7528;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E;RT-PCR&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8CBB;&#x7528;&#x5BFE;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x308B;&#x8272;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;SYBR&#x30B0;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;I&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SYBR Green I&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x9650;&#x754C;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;4&#x3064;&#x306E;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x306F;10 PFU / ml&#x306E;&#xFF08;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x5F53;&#x305F;&#x308A;0.01&#x306B;&#x76F8;&#x5F53;PFU&#xFF09;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;RT-PCR&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x6599;&#x3092;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x86CD;&#x5149;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;RT-PCR&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;RT-PCR&#x5F62;&#x5F0F;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;-1&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;-2&#x3001;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;-3 1 PFU&#x3001;&#x53CA;&#x3073;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;-4&#x306F;0.01 PFU PFU&#x306F;0.1&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E09;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x7B49;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x9589;&#x3058;&#x305F;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x3067;4&#x3064;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;4&#x4E16;&#x5E2F;&#x96C6;&#x5408;&#x4F4F;&#x5B85;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; 2004&#x5E74;&#x304B;&#x3089;2006&#x5E74;&#x304B;&#x3089;&#x53CE;&#x96C6;&#x3057;&#x305F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x30BB;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;100&#xFF05;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5206;&#x96E2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;RT-PCR&#x306E;&#x9593;&#x306B;88&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x6B63;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;4&#x4E16;&#x5E2F;&#x96C6;&#x5408;&#x4F4F;&#x5B85;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x5225;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x53CA;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x540C;&#x610F;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CBB;&#x7528;&#x5BFE;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;PCR&#xFF08;RT-PCR&#xFF09;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;RT-PCR&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;

&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD0D0;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PCR, &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; RNA&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Cdna&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC790; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xC0AC;&#xB840;&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; serotype 3 &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; 1 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; PCR (RT-PCR) &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; RT-PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; SYBR &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xC6A9; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC2EC;&#xC0AC;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xB85C; &#xB09C;&#xC744; &#xADF8;&#xB9B0;. &#xB0B4;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; SYBR &#xADF8;&#xB9B0;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; 10 PFU/ml (&#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2F9; 0.01&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; PFU) &#xBAA8;&#xB4E0; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; serotypes&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; RT-PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xC911; fluorogenic &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; RT-PCR &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC784;&#xC0C1; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC744; serotyping&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. RT-PCR &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xAE30;&#xBC18; &#xD3EC;&#xB9F7;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; 0.1 PFU &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; 1&#xC640; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; 2, serotype &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; 3&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 1 PFU &#xBC0F; serotype &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; 4&#xC5D0; 0.01 PFU serotypes&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC138; &#xBC88;&#xC9F8;&#xB294;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xBA74; 4 &#xAC1C;&#xC758; serotypes &#xB2E8;&#xC77C; &#xB2EB;&#xD78C;&#xB41C; &#xD29C;&#xBE0C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC640; fourplex &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;. 2006 2004&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1;&#xD55C; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC784;&#xC0C1; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; RT-PCR &#xC0AC;&#xC774; 88% &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xC73C;&#xB85C; 100% &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; serotyping &#xACB0;&#xACFC; &#xBC0F; fourplex &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC11C;&#xB85C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;&#xC640; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xB3D9;&#xC758; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xBE44;&#xC6A9; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0; PCR (RT-PCR) &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; serotyping&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD29C;&#xBE0C; &#xB2E4;&#xC911; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB530;&#xB77C;.

La metodolog&#xED;a de detecci&#xF3;n de virus proporciona la detecci&#xF3;n del virus del dengue en la fase temprana de la enfermedad. PCR, la orientaci&#xF3;n de ADNc derivado de ARN viral, se ha utilizado como una herramienta molecular basada en el laboratorio para la detecci&#xF3;n del virus del dengue. Se presenta el desarrollo y uso de tres en tiempo real de un solo paso de PCR de la transcriptasa inversa (RT-PCR) para detectar los casos de dengue y el serotipo del virus involucrado. El primer ensayo RT-PCR utiliza SYBR Green I como el tinte de informes con el fin de costo-efectiva para la detecci&#xF3;n del virus del dengue. El l&#xED;mite de detecci&#xF3;n del ensayo SYBR Green I fue de 10 UFC / ml (0,01 UFP equivalentes por ensayo) para los cuatro serotipos del virus del dengue. El segundo ensayo RT-PCR es un d&#xFA;plex fluorog&#xE9;nico basada en sondeos en tiempo real RT-PCR para serotipificaci&#xF3;n muestras cl&#xED;nicas de los virus del dengue. El umbral de detecci&#xF3;n de la sonda basada en RT-PCR en formato fue de 0,1 UFP de serotipos de dengue 1 y dengue-2, una para el serotipo del dengue PFU-3, y de 0,01 para el serotipo del dengue PFU-4. El tercero es un ensayo cu&#xE1;driplex que detecta cualquiera de los cuatro serotipos en un solo tubo cerrado con una sensibilidad comparable. La validaci&#xF3;n de los ensayos con muestras cl&#xED;nicas locales recogidos desde 2004 hasta 2006 revel&#xF3; que hab&#xED;a una correlaci&#xF3;n positiva entre el 88% de aislamiento del virus y RT-PCR con respecto a la detecci&#xF3;n del virus del dengue y un 100% de correlaci&#xF3;n con la seroconversi&#xF3;n en muestras posteriores. Los resultados serotipificaci&#xF3;n derivados de los ensayos de d&#xFA;plex y cu&#xE1;driplex totalmente de acuerdo con ellos y con los procedentes de los ensayos de inmunofluorescencia.

Rentable en tiempo real PCR transcriptasa inversa (RT-PCR) para detectar el virus del dengue seguido de un solo tubo de r&#xE1;pido Multiplex RT-PCR para serotipificaci&#xF3;n del virus de la

&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x662F;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x65B0;&#x5174;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#xFF0C;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x9884;&#x9632;&#x6027;&#x75AB;&#x82D7;&#x6216;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x7528;&#x5728;&#x51FA;&#x5E2D;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4E16;&#x754C;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x4E09;&#x5206;&#x4E4B;&#x4E00;&#x751F;&#x6D3B;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x98CE;&#x9669;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x548C;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;DENV&#xFF09; &#x5185;&#x7206;&#x53D1;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5229;&#x7528;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6570;&#x636E;&#x4ECE;&#x6DF1;&#x5165;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x5927;&#x7206;&#x53D1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x90FD;&#x80FD;&#x591F;&#x63CF;&#x8FF0;&#x552F;&#x4E00;&#x8FDB;&#x884C;&#x7CBE;&#x7EC6;&#x7F29;&#x653E;&#x7684;&#x65F6;&#x7A7A;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387; DENV &#x5206;&#x5B50;&#x6D41;&#x884C;&#x75C5;&#x5B66;&#x3002;&#x4E24;&#x79CD;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; DENV (DENV-1 &#x548C; DENV-3) &#x548C;&#x591A;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#xFF0C;&#x5728;&#x6700;&#x521D;&#x7684;&#x7206;&#x53D1;&#x9636;&#x6BB5;&#x53D1;&#x751F;&#x5728; 2005 &#x5E74;&#x671F;&#x95F4;&#x5728;&#x65B0;&#x52A0;&#x5761;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x6D41;&#x884C;&#x7684;&#x8513;&#x5EF6;&#x540C;&#x65F6;&#x4E0E;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6D41;&#x884C;&#x75C5;&#x5B66;&#x548C;&#x8FDB;&#x5316;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;DENV-1 &#x548C; DENV-3 &#x4E0D;&#x540C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8840;&#x75C7;&#x548C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6210;&#x679C;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x8BC1;&#x636E;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x6027;&#x8FDB;&#x5316;&#x4E4B;&#x524D;&#x3001; &#x671F;&#x95F4;&#x6216;&#x4E4B;&#x540E;&#x7206;&#x53D1;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x751F;&#x6001;&#x6216;&#x514D;&#x75AB;&#x800C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x56E0;&#x7D20;&#x75AB;&#x60C5;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6D41;&#x884C;&#x75C5;&#x5B66;&#x5728;&#x57CE;&#x5E02;&#x65B0;&#x52A0;&#x5761;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x75AB;&#x60C5;&#x3002;

Dengue is one of the most important emerging diseases of humans, with no preventative vaccines or antiviral cures available at present. Although one-third of the world's population live at risk of infection, little is known about the pattern and dynamics of dengue virus (DENV) within outbreak situations. By exploiting genomic data from an intensively studied major outbreak, we are able to describe the molecular epidemiology of DENV at a uniquely fine-scaled temporal and spatial resolution. Two DENV serotypes (DENV-1 and DENV-3), and multiple component genotypes, spread concurrently and with similar epidemiological and evolutionary profiles during the initial outbreak phase of a major dengue epidemic that took place in Singapore during 2005. Although DENV-1 and DENV-3 differed in viremia and clinical outcome, there was no evidence for adaptive evolution before, during, or after the outbreak, indicating that ecological or immunological rather than virological factors were the key determinants of epidemic dynamics.

Genomic epidemiology of a dengue virus epidemic in urban Singapore.

La dengue est une des maladies les plus importants qui se profilent des &#xEA;tres humains, sans les vaccins pr&#xE9;ventifs ou des rem&#xE8;des antiviraux disponibles &#xE0; l&#x26;#39;heure actuelle. Bien que d&#x26;#39;un tiers de la population mondiale vit &#xE0; risque d&#x26;#39;infection, on conna&#xEE;t peu la structure et la dynamique des virus de la dengue (DENV) au sein de situations &#xE9;pid&#xE9;miques. En exploitant les donn&#xE9;es g&#xE9;nomiques &#xE0; partir d&#x26;#39;une &#xE9;pid&#xE9;mie majeure intensivement &#xE9;tudi&#xE9;s, nous sommes en mesure de d&#xE9;crire l&#x26;#39;&#xE9;pid&#xE9;miologie mol&#xE9;culaire de DENV &#xE0; une r&#xE9;solution unique fine &#xE9;chelle spatiale et temporelle. Deux s&#xE9;rotypes DENV (DENV-1 et DENV-3), et les g&#xE9;notypes de composants multiples, r&#xE9;parties en m&#xEA;me temps et avec les m&#xEA;mes profils &#xE9;pid&#xE9;miologiques et &#xE9;volutifs au cours de la phase de flamb&#xE9;e initiale d&#x26;#39;une &#xE9;pid&#xE9;mie majeure de dengue qui a eu lieu &#xE0; Singapour en 2005. Bien que DENV-1 et DENV-3 diff&#xE8;re de la vir&#xE9;mie et les r&#xE9;sultats cliniques, il n&#x26;#39;y avait aucune preuve de l&#x26;#39;&#xE9;volution adaptative, avant, pendant, ou apr&#xE8;s l&#x26;#39;&#xE9;closion, ce qui indique que les facteurs &#xE9;cologiques ou immunologique plut&#xF4;t que virologique ont &#xE9;t&#xE9; les principaux d&#xE9;terminants de la dynamique de l&#x26;#39;&#xE9;pid&#xE9;mie.

&#xC9;pid&#xE9;miologie g&#xE9;nomique d&#x26;#39;une &#xE9;pid&#xE9;mie de virus de la Dengue en milieu urbain &#xE0; Singapour

Dengue geh&ouml;rt zu den wichtigsten aufstrebenden Krankheiten des Menschen, mit keine vorbeugende Impfstoffe oder abrufbar unter antivirale Kuren zu pr&auml;sentieren. Obwohl ein Drittel der Weltbev&ouml;lkerung leben in Gefahr der Infektion, ist wenig &uuml;ber die Muster und die Dynamik des Dengue-Virus (DENV) innerhalb der Ausbruch Situationen bekannt. Durch die Ausnutzung von genomischer Daten aus gro&szlig;en Ausbruchs intensiv studiert, k&ouml;nnen wir die Molekulare Epidemiologie der DENV bei zeitlicher und r&auml;umlicher Aufl&ouml;sung eindeutig fein skalierte beschreiben. Zwei DENV-Serotypen (DENV-1 und DENV-3) und mehrere Komponente Genotypen, setzte gleichzeitig und mit &auml;hnlichen Profilen f&uuml;r epidemiologische und evolution&auml;re w&auml;hrend der Phase der ersten Ausbruch einer gro&szlig;en Dengue-Epidemie, die im Jahr 2005 in Singapur stattfand. Obwohl DENV-1 und DENV-3 Vir&auml;mie und klinischen Ergebnis Einzelpunkten, gab vor, w&auml;hrend oder nach dem Ausbruch, der darauf hinweist, dass &ouml;kologische oder immunologische anstatt virologische Faktoren die wichtigsten Determinanten der Epidemie Dynamik wurden keine Beweise f&uuml;r die adaptive Evolution.

Genomische Epidemiologie einer Dengue-Virus-Epidemie in st&auml;dtischen Singapur.

Dengue &egrave; una delle pi&ugrave; importanti malattie emergenti degli esseri umani, con nessuna preventivi vaccini o cure antivirali disponibili a presentano. Anche se un terzo della popolazione mondiale vive a rischio di infezione, poco si sa circa il modello e le dinamiche del virus dengue (DENV) all&#39;interno di situazioni di scoppio. Sfruttando i dati genomici da un&#39;epidemia di intensamente studiato, siamo in grado di descrivere l&#39;epidemiologia molecolare di DENV a una risoluzione spaziale e temporale in modo univoco in scala di ammenda. Due sierotipi DENV (DENV-1 e DENV-3) e pi&ugrave; componente genotipi, diffondere simultaneamente e con profili epidemiologici ed evolutivi simili durante la fase iniziale scoppio di un&#39;epidemia di dengue principali che ha avvenuto a Singapore nel corso del 2005. Sebbene DENV-1 e 3 DENV differivano viremia ed esito clinico, esistevano prove per evoluzione adattativa prima, durante o dopo lo scoppio, che indica che fattori ecologici o immunologici piuttosto che virologiche erano i determinanti delle dinamiche epidemiche.

Epidemiologia genomica di un&#39;epidemia di virus dengue in Singapore urbano.

&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x5165;&#x624B;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x4E88;&#x9632;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3084;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x3067;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x65B0;&#x8208;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x4E16;&#x754C;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;3&#x5206;&#x306E;1&#x304C;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x306B;&#x4F4F;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30D6;&#x30EC;&#x30A4;&#x30AF;&#x306E;&#x72B6;&#x6CC1;&#x5185;&#x3067;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;DENV&#xFF09;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3068;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x96C6;&#x4E2D;&#x7684;&#x306B;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x767A;&#x751F;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#xB7;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;&#x306E;DENV&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x75AB;&#x5B66;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E8C;DENV&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#xFF08;DENV-1&#x3068;DENV-3&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x306F;&#x3001;2005&#x5E74;&#x306B;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x958B;&#x50AC;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x306E;&#x6D41;&#x884C;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5E83;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002; DENV-1&#x3068;DENV-3&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8840;&#x75C7;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8EE2;&#x5E30;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x9069;&#x5FDC;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x751F;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x8981;&#x56E0;&#x304C;&#x6D41;&#x884C;&#x52D5;&#x614B;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x4E2D;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x524D;&#x306B;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x90FD;&#x5E02;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6D41;&#x884C;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x75AB;&#x5B66;

&#xB385;&#xAE30;&#xC5F4;&#xC740; &#xC608;&#xBC29; &#xBC31;&#xC2E0; &#xC5C6;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD765; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC911; &#xB610;&#xB294; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC120;&#xBB3C;. &#xBE44;&#xB85D; &#xC138;&#xACC4; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; 3 &#xBD84;&#xC758; 1&#xC758; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC704;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC0B4;&#xACE0;, &#xC791;&#xC740; &#xD328;&#xD134; &#xBC0F; &#xB3CC;&#xBC1C; &#xC0C1;&#xD669; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (DENV)&#xC758; &#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC9D1;&#xC911;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACF5;&#xBD80; &#xC8FC;&#xC694; &#xBC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC8C;&#xB188; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xC774;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACE0;&#xC720; &#xD558; &#xAC8C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC870;&#xC815; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xBC0F; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; DENV&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC5ED;&#xD559;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; DENV serotypes (DENV-1&#xACFC; DENV-3), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; genotypes 2005 &#xB144; &#xC2F1;&#xAC00;&#xD3EC;&#xB974;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F4;&#xB9B0; &#xC8FC;&#xC694; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xC804;&#xC5FC;&#xBCD1;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD559; &#xBC0F; &#xC9C4;&#xD654; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xD655;&#xC0B0;. DENV 1, DENV 3 &#xCC28;&#xC774; &#xB2C8;&#xC640; &#xC784;&#xC0C1; &#xACB0;&#xACFC;, &#xBE44;&#xB85D; &#xB3D9;&#xC548; &#xB610;&#xB294; &#xC0DD;&#xD0DC; &#xB610;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBCF4;&#xB2E4; virological &#xC694;&#xC778; &#xC804;&#xC5FC;&#xBCD1; &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xBC1C;&#xBC1C; &#xD6C4; &#xC801;&#xC751; &#xC9C4;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xB3C4;&#xC2DC; &#xC2F1;&#xAC00;&#xD3EC;&#xB974;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xC5ED;&#xD559;.

El dengue es una de las enfermedades emergentes m&#xE1;s importantes de los seres humanos, sin vacunas preventivas o curas antivirales disponibles en la actualidad. Aunque parte de la poblaci&#xF3;n mundial vive en riesgo de infecci&#xF3;n por una tercera parte, se sabe poco sobre la estructura y la din&#xE1;mica del virus del dengue (DENV) en situaciones de brote. Mediante la explotaci&#xF3;n de los datos gen&#xF3;micos de un brote estudiado intensamente importante, que son capaces de describir la epidemiolog&#xED;a molecular de DENV en una resoluci&#xF3;n &#xFA;nica fina escala temporal y espacial. Dos serotipos de DENV (DENV-1 y DENV-3), y los genotipos de varios componentes, repartidos al mismo tiempo y con similares perfiles epidemiol&#xF3;gicos y evolutivos durante la fase de brote inicial de una gran epidemia que tuvo lugar en Singapur en 2005. A pesar de DENV-1 y DENV-3 difer&#xED;a de la viremia y el resultado cl&#xED;nico, no hubo evidencia de la evoluci&#xF3;n de adaptaci&#xF3;n antes, durante o despu&#xE9;s del brote, lo que indica que los factores ecol&#xF3;gicos o inmunol&#xF3;gico en lugar de virol&#xF3;gico fueron los principales determinantes de la din&#xE1;mica de la epidemia.

Epidemiolog&#xED;a Gen&#xF3;mica de una epidemia del virus del dengue en Singapur Urbano

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Alexa &#x6C1F;&#x67D3;&#x6599;&#x6807;&#x7B7E;&#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7B80;&#x5355;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Dengue virus causes frequent and cyclical epidemics throughout the tropics, resulting in significant morbidity and mortality rates. There is neither a specific antiviral treatment nor a vaccine to prevent epidemic transmission. The lack of a detailed understanding of the pathogenesis of the disease complicates these efforts. The development of methods to probe the interaction between the virus and host cells would thus be useful. Direct fluorescence labelling of virus would facilitate the visualization of the early events in virus-cell interaction. This report describes a simple method of labelling of dengue virus with Alexa Fluor succinimidyl ester dye dissolved directly in the sodium bicarbonate buffer that yielded highly viable virus after labelling. Alexa Fluor dyes have superior photostability and are less pH-sensitive than the common dyes, such as fluorescein and rhodamine, making them ideal for studies on cellular uptake and endosomal transport of the virus. The conjugation of Alexa Fluor dye did not affect the recognition of labelled dengue virus by virus-specific antibody and its putative receptors in host cells. This method could have useful applications in virological studies.

A simple method for Alexa Fluor dye labelling of dengue virus.

Virus de la dengue provoque de fr&#xE9;quentes &#xE9;pid&#xE9;mies et cyclique &#xE0; travers les tropiques, ce qui entra&#xEE;ne une morbidit&#xE9; significative et les taux de mortalit&#xE9;. Il n&#x26;#39;est ni un traitement antiviral sp&#xE9;cifique ni vaccin pour pr&#xE9;venir la transmission &#xE9;pid&#xE9;mique. L&#x26;#39;absence d&#x26;#39;une compr&#xE9;hension d&#xE9;taill&#xE9;e de la pathogen&#xE8;se de la maladie complique ces efforts. Le d&#xE9;veloppement de m&#xE9;thodes pour sonder l&#x26;#39;interaction entre les cellules de virus et l&#x26;#39;h&#xF4;te serait donc utile. Direct marquage fluorescent du virus serait de faciliter la visualisation des &#xE9;v&#xE9;nements pr&#xE9;coces de l&#x26;#39;interaction virus-cellule. Ce rapport d&#xE9;crit une m&#xE9;thode simple de l&#x26;#39;&#xE9;tiquetage des virus de la dengue avec Alexa Fluor succinimidyle colorant ester dissous directement dans le tampon de bicarbonate de sodium qui a rapport&#xE9; le virus hautement viable apr&#xE8;s l&#x26;#39;&#xE9;tiquetage. Alexa Fluor colorants ont photostabilit&#xE9; sup&#xE9;rieure et sont moins sensibles au pH que les colorants communs, tels que la fluoresc&#xE9;ine et la rhodamine, ce qui les rend id&#xE9;al pour les &#xE9;tudes sur l&#x26;#39;absorption cellulaire et le transport endosomal du virus. La conjugaison de Alexa Fluor colorant n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;incidence sur la reconnaissance des virus de la dengue marqu&#xE9;e par le virus de l&#x26;#39;anticorps sp&#xE9;cifique et de ses r&#xE9;cepteurs putatifs dans des cellules h&#xF4;tes. Cette m&#xE9;thode pourrait avoir des applications utiles dans les &#xE9;tudes virologiques.

Une m&#xE9;thode simple pour Alexa Fluor &#xE9;tiquetage Dye des virus de la dengue

Dengue-Virus f&uuml;hrt zu h&auml;ufige und zyklische Epidemien &uuml;berall in den Tropen, was zu erheblichen Morbidit&auml;t und Mortalit&auml;t Preise. Es gibt weder eine spezifische antivirale Behandlung noch einen Impfstoff, epidemische &Uuml;bertragung zu verhindern. Der Mangel an ein tief greifendes Verst&auml;ndnis der Pathogenese der Krankheit erschwert diese Bem&uuml;hungen. Die Entwicklung von Methoden, um die Interaktion zwischen dem Virus und Host-Zellen zu untersuchen w&auml;re daher sinnvoll. Direkte Fluoreszenz Kennzeichnung des Virus w&uuml;rde die Visualisierung der fr&uuml;hen Ereignisse in Virus-Zell-Interaktion erleichtern. Dieser Bericht beschreibt eine einfache Methode der Kennzeichnung des Denguevirus mit Alexa Fluor-Succinimidyl-Ester-Farbstoff direkt in der Natrium Bicarbonat-Puffer, der sehr lebensf&auml;hige Viren nach Kennzeichnung ergab aufgel&ouml;st. Alexa Fluor Farbstoffe haben &uuml;berlegene Photostabilit&auml;t und sind weniger pH-Sensitive als die gemeinsame Farbstoffe, wie z. B. Fluoreszein und Rhodamin, macht sie ideal f&uuml;r Studien &uuml;ber Aufnahme und Endosomen Transport des Virus. Die Konjugation von Alexa Fluor Dye hatte keine Auswirkungen auf, die Anerkennung der beschriftete Dengue-Virus Virus-spezifische Antik&ouml;rper und seine vermeintlichen Rezeptoren in Wirtszellen. Diese Methode k&ouml;nnte n&uuml;tzliche Anwendungen in virologischen Untersuchungen haben.

Eine einfache Methode zur Kennzeichnung von Alexa Fluor-Farbstoff des Denguevirus.

Virus dengue provoca frequenti e cicliche epidemie in tutto dei tropici, con conseguente tassi di morbilit&agrave; e mortalit&agrave; significativi. Non c&#39;&egrave; un trattamento antivirale specifico n&eacute; un vaccino per prevenire la trasmissione epidemica. La mancanza di una dettagliata comprensione della patogenesi della malattia complica questi sforzi. Lo sviluppo di metodi per l&#39;interazione tra le cellule virus e ospite della sonda sarebbe cos&igrave; utile. Fluorescenza diretta etichettatura dei virus faciliterebbe la visualizzazione dei primi eventi in interazione virus-cellula. Questo rapporto descrive un semplice metodo di etichettatura del virus dengue con Alexa Fluor succinimidil estere colorante sciolto direttamente nel buffer di bicarbonato di sodio che ha reso il virus altamente vitale dopo l&#39;etichettatura. Tinture di Alexa Fluor sono superior fotostabilit&agrave; e &egrave; meno pH-sensibile rispetto le tinture comuni, come ad esempio la fluoresceina e rodamina, rendendoli ideali per studi sull&#39;assorbimento cellulare e trasporto endosomal del virus. La coniugazione della tintura di Alexa Fluor non influenzava il riconoscimento dei virus della dengue etichettati da anticorpi specifici per il virus e suoi putativi recettori nelle cellule ospiti. Questo metodo potrebbe avere applicazioni utili negli studi virologici.

Un metodo semplice per l&#39;etichettatura tintura di Alexa Fluor di virus della dengue.

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&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x306E;Alexa Fluor&#xAE;&#x8272;&#x7D20;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7C21;&#x5358;&#x200B;&#x200B;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;

&#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCD1; &#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC640; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC5F4; &#xB300;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xBE48;&#xBC88; &#xD558; &#xACE0; &#xC21C;&#xD658; &#xC804;&#xC5FC;&#xBCD1; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB3C4; &#xC804;&#xC5FC;&#xBCD1; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xBC31;&#xC2E0; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xC774;&#xD574;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC774;&#xC774; &#xB178;&#xB825;&#xC744; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xAC8C;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811; &#xD615;&#xAD11; &#xB77C;&#xBCA8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xB294; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; succinimidyl &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; &#xC5FC;&#xC0C9; &#xB77C;&#xBCA8; &#xD6C4; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB098;&#xC654;&#xACE0; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; &#xC911; &#xD0C4;&#xC0B0;&#xC5FC; &#xBC84;&#xD37C;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC6A9; &#xD574;&#xC640; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB77C;&#xBCA8;&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; photostability &#xACE0;&#xB294; &#xC801;&#xC740; Ph&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; fluorescein, rhodamine &#xB4F1; &#xC77C;&#xBC18; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xBC0F; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; endosomal &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;. &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC758; &#xD65C;&#xC6A9; &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC778;&#xC2DD; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140;&#xC758; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC0C1; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; virological &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB77C;&#xBCA8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;.

El virus del dengue causa epidemias frecuentes y c&#xED;clica a lo largo de los tr&#xF3;picos, dando lugar a una significativa morbilidad y mortalidad. No hay ni un tratamiento espec&#xED;fico antiv&#xED;rico ni una vacuna para prevenir la transmisi&#xF3;n epid&#xE9;mica. La falta de un conocimiento detallado de la patog&#xE9;nesis de la enfermedad complica estos esfuerzos. El desarrollo de m&#xE9;todos para investigar la interacci&#xF3;n entre las c&#xE9;lulas hu&#xE9;sped y del virus tanto, ser&#xED;a &#xFA;til. Marcaje directo de fluorescencia de virus podr&#xED;a facilitar la visualizaci&#xF3;n de los primeros acontecimientos en la interacci&#xF3;n virus-c&#xE9;lula. Este informe describe un m&#xE9;todo simple de etiquetado de los virus del dengue con Alexa Fluor succinimidil &#xE9;ster tinte disuelto directamente en el tamp&#xF3;n de bicarbonato de sodio que produjo el virus altamente viable despu&#xE9;s del marcaje. Alexa Fluor colorantes tienen fotoestabilidad superior y son menos sensible al pH de los tintes comunes, tales como fluoresce&#xED;na y rodamina, haci&#xE9;ndolos ideales para los estudios sobre la captaci&#xF3;n celular y el transporte endosomal del virus. La conjugaci&#xF3;n de Alexa Fluor colorante no afect&#xF3; el reconocimiento de virus del dengue marcado por el virus-anticuerpo espec&#xED;fico y sus receptores putativos en las c&#xE9;lulas hu&#xE9;sped. Este m&#xE9;todo podr&#xED;a tener aplicaciones &#xFA;tiles en los estudios virol&#xF3;gicos.

Un m&#xE9;todo simple para Alexa Fluor Dye Etiquetado de los virus dengue

&#x6297;&#x4F53;&#x3001; &#x767B;&#x9769;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;DENV&#xFF09; &#x4E0E;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4EA7;&#x751F;&#x514D;&#x75AB;&#x6216;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5BF9;&#x7ACB;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x6297;&#x4F53;&#x963B;&#x788D;&#x4E86;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75AB;&#x82D7;&#x7814;&#x5236;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x6297;&#x4F53;&#x62B5;&#x6D88; DENV&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x9632;&#x6B62;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9644;&#x4EF6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x6216;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x878D;&#x5408;&#x819C;&#x5C42;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426;&#x6297;&#x4F53;&#x963B;&#x6B62;&#x9644;&#x4EF6;&#x6216;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x514D;&#x75AB;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x9884;&#x8BA1;&#x5C06;&#x4F1A;&#x541E;&#x566C;&#x540E;&#x7684; Fc &gamma; &#x53D7;&#x4F53; (Fc&gamma;R)-&#x8F74;&#x627F;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x4ECE;&#x5FAA;&#x73AF;&#x4E2D;&#x6E05;&#x9664;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x90A3;&#x4E9B;&#x80FD;&#x591F;&#x963B;&#x6B62;&#x878D;&#x5408;&#x819C;&#x5C42;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x5C06;&#x80FD;&#x591F;&#x62B5;&#x6D88; DENV Fc&gamma;R &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x540E;&#x7531;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x800C;&#x5176;&#x4ED6;&#x6297;&#x4F53;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4; DENV &#x590D;&#x5236;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4ECE;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x60A3;&#x8005;&#x6062;&#x590D;&#x671F;&#x8840;&#x6E05;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5931;&#x6548;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x79CD;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x53D1;&#x751F;&#x5C3D;&#x7BA1; Fc&gamma;R &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;Fc&gamma;R &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E2D;&#x6027;&#x5916;&#x6E90; DENV &#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x6B64;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x53D1;&#x751F;&#x901A;&#x8FC7;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x805A;&#x5408;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x805A;&#x5408;&#x542F;&#x7528;&#x6297;&#x4F53;&#x4EA4;&#x8054;&#x6291;&#x5236; Fc&gamma;RIIB&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6291;&#x5236; Fc&gamma;R &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62; DENV &#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x4F53;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;

&#x7ED3;&#x624E;&#x672F; IIB Fc &gamma; &#x53D7;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;

The interaction of antibodies, dengue virus (DENV), and monocytes can result in either immunity or enhanced virus infection. These opposing outcomes of dengue antibodies have hampered dengue vaccine development. Recent studies have shown that antibodies neutralize DENV by either preventing virus attachment to cellular receptors or inhibiting viral fusion intracellularly. However, whether the antibody blocks attachment or fusion, the resulting immune complexes are expected to be phagocytosed by Fc gamma receptor (FcÎ³R)-bearing cells and cleared from circulation. This suggests that only antibodies that are able to block fusion intracellularly would be able to neutralize DENV upon FcÎ³R-mediated uptake by monocytes whereas other antibodies would have resulted in enhancement of DENV replication. Using convalescent sera from dengue patients, we observed that neutralization of the homologous serotypes occurred despite FcÎ³R-mediated uptake. However, FcÎ³R-mediated uptake appeared to be inhibited when neutralized heterologous DENV serotypes were used instead. We demonstrate that this inhibition occurred through the formation of viral aggregates by antibodies in a concentration-dependent manner. Aggregation of viruses enabled antibodies to cross-link the inhibitory FcÎ³RIIB, which is expressed at low levels but which inhibits FcÎ³R-mediated phagocytosis and hence prevents antibody-dependent enhancement of DENV infection in monocytes.

Ligation of Fc gamma receptor IIB inhibits antibody-dependent enhancement of dengue virus infection.

L&#x26;#39;interaction des anticorps, virus de la dengue (DENV), et les monocytes peuvent se traduire soit par une immunit&#xE9; ou une infection virale accrue. Ces r&#xE9;sultats oppos&#xE9;s d&#x26;#39;anticorps contre la dengue ont entrav&#xE9; le d&#xE9;veloppement de vaccins contre la dengue. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes ont montr&#xE9; que les anticorps neutralisent le MENV soit par l&#x26;#39;attachement du virus &#xE0; des r&#xE9;cepteurs cellulaires emp&#xEA;cher ou inhiber la fusion virale intracellulaire. Toutefois, si les anticorps bloque l&#x26;#39;attachement ou la fusion, les complexes r&#xE9;sultant immunitaires sont cens&#xE9;s &#xEA;tre phagocyt&#xE9;s par Fc receptor gamma (Fc&#x3B3;R)-cellules porteuses et &#xE9;limin&#xE9; de la circulation. Ceci sugg&#xE8;re que les anticorps seuls qui sont capables de bloquer la fusion intracellulaire serait capable de neutraliser le MENV sur Fc&#x3B3;R m&#xE9;di&#xE9;e par les monocytes, tandis que l&#x26;#39;absorption d&#x26;#39;autres anticorps aurait abouti &#xE0; l&#x26;#39;am&#xE9;lioration de la r&#xE9;plication du MENV. En utilisant des s&#xE9;rums de convalescence des patients contre la dengue, nous avons observ&#xE9; que la neutralisation des s&#xE9;rotypes homologues s&#x26;#39;est produite en d&#xE9;pit Fc&#x3B3;R m&#xE9;di&#xE9;e absorption. Toutefois, Fc&#x3B3;R m&#xE9;di&#xE9;e absorption semble &#xEA;tre inhib&#xE9;e lorsque neutralis&#xE9; s&#xE9;rotypes DENV h&#xE9;t&#xE9;rologue ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s &#xE0; la place. Nous d&#xE9;montrons que cette inhibition se produit &#xE0; la formation d&#x26;#39;agr&#xE9;gats viraux par les anticorps d&#x26;#39;une mani&#xE8;re d&#xE9;pendante de la concentration. L&#x26;#39;agr&#xE9;gation des virus permis anticorps pour r&#xE9;ticuler l&#x26;#39;FcyRIIB inhibitrice, qui est exprim&#xE9;e &#xE0; faibles niveaux, mais qui inhibe Fc&#x3B3;R-phagocytose et donc emp&#xEA;che d&#xE9;pendante des anticorps am&#xE9;lioration de l&#x26;#39;infection du MENV dans les monocytes.

La ligature de r&#xE9;cepteur Fc gamma IIB Inhibe d&#xE9;pendante des anticorps Am&#xE9;lioration des maladies infectieuses virus de la dengue

Das Zusammenspiel von Antik&ouml;rpern, Dengue-Virus (DENV) und Monozyten kann entweder Immunit&auml;t oder verbesserter Virusinfektion f&uuml;hren. Diese gegens&auml;tzliche Ergebnisse Dengue-Antik&ouml;rper haben Dengue-Impfstoff-Entwicklung behindert. Neuere Studien haben gezeigt, dass Antik&ouml;rper DENV neutralisieren durch Virus Anhaftung an zellul&auml;ren Rezeptoren verhindert oder hemmt virale Verschmelzung intrazellul&auml;r. Jedoch, ob der Antik&ouml;rper Anlage oder Fusion blockiert, die resultierende Immunkomplexe werden voraussichtlich durch Fc-Gamma-Rezeptor (Fc&gamma;R) phagozytierte werden-wobei Zellen und aus dem Verkehr abgewickelt. Dies deutet darauf hin, dass nur die Antik&ouml;rper, die Verschmelzung intrazellul&auml;r blockieren k&ouml;nnen w&auml;re in der Lage, DENV auf Fc&gamma;R-vermittelte Aufnahme von Monozyten zu neutralisieren, w&auml;hrend andere Antik&ouml;rper in der Erweiterung der DENV Replikation gef&uuml;hrt h&auml;tte. Verwendung von Rekonvaleszenten Seren von Dengue-Patienten beobachteten wir, dass Neutralisierung der homologen Serotypen trotz Fc&gamma;R-vermittelte Aufnahme aufgetreten ist. Jedoch schien Fc&gamma;R-vermittelte Aufnahme gehemmt werden, wenn neutralisierte heterologe DENV-Serotypen stattdessen verwendet wurden. Wir zeigen, dass diese Hemmung durch die Bildung von viralen Aggregate durch Antik&ouml;rper Konzentration-abh&auml;ngigen Weise aufgetreten. Aggregation von Viren aktiviert Antik&ouml;rper gegen die hemmenden Fc&gamma;RIIB, sich vernetzen, die dr&uuml;ckt sich auf niedrigem Niveau, aber die Fc&gamma;R-vermittelte Phagozytose hemmt und somit verhindert Antik&ouml;rper-abh&auml;ngige Verst&auml;rkung der DENV Infektion in Monozyten.

Verbindung der Fc-Gamma-Rezeptor IIB hemmt Antik&ouml;rper-abh&auml;ngige Verst&auml;rkung der Dengue-Virus-Infektion.

Immunit&agrave; o enhanced virus infezione pu&ograve; causare l&#39;interazione di anticorpi, virus dengue (DENV) e monociti. Questi risultati opposti degli anticorpi anti-dengue hanno ostacolato lo sviluppo del vaccino dengue. Recenti studi hanno dimostrato che gli anticorpi neutralizzano DENV impedendo l&#39;attacco di virus ai recettori cellulari o inibizione virale fusione intracellularly. Tuttavia, se l&#39;anticorpo blocca attaccamento o fusion, i risultanti complessi immuni sono tenuti a essere phagocytosed dai recettori gamma Fc (Fc&gamma;R)-cuscinetto cellule e cancellata dalla circolazione. Questo suggerisce che solo gli anticorpi che sono in grado di bloccare la fusione intracellularly sarebbe in grado di neutralizzare DENV su assorbimento Fc&gamma;R-mediata dai monociti considerando che avrebbero comportato altri anticorpi nella valorizzazione della replica DENV. Utilizzando sieri convalescenti di dengue pazienti, abbiamo osservato che neutralizzazione dei sierotipi omologhi si &egrave; verificato nonostante l&#39;assorbimento di Fc&gamma;R-mediata. Tuttavia, Fc&gamma;R-mediated assorbimento sembrava essere inibito quando eterologo DENV neutralizzati sierotipi sono stati utilizzati invece. Dimostriamo che questa inibizione si verificato attraverso la formazione di aggregati virali da anticorpi in modo concentrazione-dipendente. Abilitata l&#39;opzione aggregazione dei virus anticorpi cross-link l&#39;inibitoria Fc&gamma;RIIB, che &egrave; espressa a livelli bassi ma che inibisce la fagocitosi mediata da Fc&gamma;R e quindi impedisce la valorizzazione anticorpo-dipendente dell&#39;infezione DENV nei monociti.

Legatura dei recettori Fc gamma IIB inibisce la valorizzazione anticorpo-dipendente dell&#39;infezione del virus dengue.

&#x6297;&#x4F53;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;DENV&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5358;&#x7403;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x53CD;&#x3059;&#x308B;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x9632;&#x6B62;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;DENV&#x4E2D;&#x548C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x878D;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x514D;&#x75AB;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;Fc&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;Fc&#x3B3;R&#x3068;&#xFF09;&#x6709;&#x5229;&#x5B50;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8CAA;&#x98DF;&#x3068;&#x5FAA;&#x74B0;&#x304B;&#x3089;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x6838;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x6297;&#x4F53;&#x304C;&#x4ED6;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;DENV&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x5897;&#x5F37;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x5358;&#x7403;&#x306E;Fc&#x3B3;R&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;DENV&#x4E2D;&#x548C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x671F;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Fc&#x3B3;R&#x3068;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x76F8;&#x540C;&#x8840;&#x6E05;&#x306E;&#x4E2D;&#x548C;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Fc&#x3B3;R&#x3068;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x548C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7570;&#x7A2E;&#x306E;DENV&#x8840;&#x6E05;&#x306E;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306F;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x6297;&#x4F53;&#x304C;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;Fc&#x3B3;R&#x3068;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x98DF;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x7403;&#x306B;DENV&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5897;&#x5F37;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x963B;&#x5BB3;&#x305F;Fc&#x3B3;RIIB&#x3092;&#x67B6;&#x6A4B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x306E;Fc&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;IIB&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B2;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5411;&#x4E0A;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;

&#xD56D; &#xCCB4;, &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (DENV), monocytes&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB610;&#xB294; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xBC18;&#xB300; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC31;&#xC2E0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB974;&#xBA74; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xCE68; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xC5EC; DENV&#xB97C; &#xBB34;&#xB825;&#xD654; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD56D; &#xCCB4; &#xC735;&#xD569; &#xCCA8;&#xBD80;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8;, &#xC5EC;&#xBD80; &#xACB0;&#xACFC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC608;&#xC0C1; &#xB41C;&#xB2E4; Fc &#xAC10;&#xB9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (Fc&gamma;R)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; phagocytosed-&#xC140; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1;&#xACFC; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC6CC;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCE68; &#xD4E8;&#xC804;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xB978; &#xD56D; &#xCCB4; DENV &#xBCF5;&#xC81C;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC758;&#xD574; monocytes DENV Fc&gamma;R &#xC911;&#xC7AC; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;&#xC5D0; &#xBB34;&#xB825;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xC744; &#xAC83; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD68C;&#xBCF5; &#xC138;&#xB77C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xB3D9;&#xC885; serotypes&#xC758; &#xC911;&#xD654; Fc&gamma;R &#xC911;&#xC7AC; &#xD638;&#xC751;&#xC744; &#xC5BB; &#xC5C8;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, Fc&gamma;R &#xC911;&#xC7AC; &#xAE00;&#xADC0; &#xBB34;&#xB825;&#xD654; heterologous DENV serotypes &#xB300;&#xC2E0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC800;&#xD574; &#xB420; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xC800;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xD56D; &#xCCB4; &#xAD50;&#xCC28; &#xAE08;&#xC9C0; Fc&gamma;riib&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5B4;&#xB5A4; Fc&gamma;R &#xC911;&#xC7AC; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC758;&#xC874; &#xD5A5;&#xC0C1; monocytes&#xC5D0; DENV &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xBC29;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;.

Fc &#xAC10;&#xB9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; IIB&#xC758; &#xACB0; &#xCC30; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC758;&#xC874; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

La interacci&#xF3;n de los anticuerpos, el virus del dengue (DENV), y los monocitos pueden resultar en la inmunidad o infecci&#xF3;n por el virus mejorada. Estos resultados opuestos de anticuerpos contra dengue han obstaculizado el desarrollo del dengue vacuna. Estudios recientes han demostrado que los anticuerpos neutralizan DENV por cualquiera de prevenci&#xF3;n de la fijaci&#xF3;n del virus a los receptores celulares o virales de fusi&#xF3;n inhibir intracelularmente. Sin embargo, si la uni&#xF3;n de anticuerpos bloques o de fusi&#xF3;n, los complejos inmunes resultantes se espera que sean fagocitados por el receptor de Fc gamma (Fc&#x3B3;R)-c&#xE9;lulas portadoras y borra de la circulaci&#xF3;n. Esto sugiere que los anticuerpos que son s&#xF3;lo capaces de bloquear la fusi&#xF3;n intracelularmente ser&#xED;a capaz de neutralizar DENV sobre Fc&#x3B3;R mediada por monocitos, mientras que la absorci&#xF3;n de otros anticuerpos que se han traducido en la mejora de la replicaci&#xF3;n DENV. Utilizando suero de convalecientes de pacientes con dengue, se observ&#xF3; que la neutralizaci&#xF3;n de los serotipos hom&#xF3;logos se produjo a pesar Fc&#x3B3;R mediada por absorci&#xF3;n. Sin embargo, mediada por la captaci&#xF3;n de Fc&#x3B3;R parec&#xED;a ser inhibida cuando se neutralizan los serotipos de DENV heter&#xF3;loga se utilizaron en su lugar. Se demuestra que esta inhibici&#xF3;n se produjo a trav&#xE9;s de la formaci&#xF3;n de agregados virales por los anticuerpos de una manera dependiente de la concentraci&#xF3;n. Agregaci&#xF3;n de virus activado anticuerpos para reticular la Fc&#x3B3;RIIB inhibitoria, que se expresa a niveles bajos pero que inhibe Fc&#x3B3;R mediada por fagocitosis y por lo tanto evita la mejora dependiente de anticuerpos de la infecci&#xF3;n por DENV en monocitos.

Hwee Cheng Tan

Program in Emerging Infectious Diseases

DUKE-NUS Graduate Medical School

Visualizing Dengue Virus through Alexa Fluor Labeling

Hwee Cheng Tan

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DUKE-NUS Graduate Medical School

Visualizing Dengue Virus through Alexa Fluor Labeling

Program in Emerging Infectious Diseases