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Planar and Three-Dimensional Printing of Conductive Inks

Printed electronics rely on low-cost, large-area fabrication routes to create flexible or multidimensional electronic, optoelectronic, and biomedical ...

University of Illinois at Urbana-Champaign

Interaktionen zwischen Aktin, ein anionisches Polyelectrolyte und Lysozym, ein kationisches kugelf&ouml;rmige Protein sind mit einer Kombination von Synchrotron Small-Angle R&ouml;ntgenstreuung und Molekulardynamik-Simulationen untersucht worden. Lysozym &uuml;berbr&uuml;ckt zun&auml;chst Paare von Aktin-Filamenten, die in hexagonal koordinierte Einspaltig komplexe bestehend aus Aktin, zusammengehalten von Position eindimensionale schlie&szlig;en-verpackt Arrays von Lysozym Macroions entspannen. Diese komplexe finden sich auch in Gegenwart von erheblichen Konzentrationen von monovalenten Salz, stabil zu sein, die quantitativ von einer Umverteilung des Salzes zwischen der verk&uuml;rzte und die w&auml;ssrigen Phasen erl&auml;utert wird.

Struktur und Stabilit&auml;t der monomolekularen Aktin-Lysozym-komplexen in Salzwasser.

Le interazioni tra actina, un polielettrolita anionico e il lisozima, una proteina globulare cationica, sono state esaminate usando una combinazione di dispersione small-angle x-ray sincrotrone e simulazioni di dinamica molecolare. Lisozima ponti inizialmente coppie di filamenti di actina, che rilassarsi nella grotta coordinati complessi colonnare costituiti da actina tenuto insieme da matrici unidimensionali incommensurabili ermetica di lisozima macroions. Questi complessi si trovano ad per essere stabile anche in presenza di significative concentrazioni di sale monovalente, che quantitativamente &egrave; spiegato da una ridistribuzione del sale tra il condensato e le fasi acquose.

Struttura e stabilit&agrave; dei complessi actina-lisozima autoassemblano in acqua salata.

&#x653E;&#x5C04;&#x5149; x &#x7DDA;&#x5C0F;&#x89D2;&#x6563;&#x4E71;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;,&#x3001;&#x30A2;&#x30CB;&#x30AA;&#x30F3;&#x6027;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x96FB;&#x89E3;&#x8CEA;&#x3068;&#x30EA;&#x30BE;&#x30C1;&#x30FC;&#x30E0;, &#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x6027;&#x7403;&#x72B6;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30BE;&#x30C1;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5F53;&#x521D;&#x30DA;&#x30A2;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x958B;&#x50AC;&#x975E;&#x6574;&#x5408;&#x4E00;&#x6B21;&#x5143;&#x5BC6;&#x5145;&#x586B;&#x914D;&#x5217;&#x30EA;&#x30BE;&#x30C1;&#x30FC;&#x30E0; macroions &#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x516D;&#x89D2;&#x5354;&#x8ABF;&#x67F1;&#x72B6;&#x932F;&#x4F53;&#x306B;&#x30EA;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6A4B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x3001;&#x51DD;&#x7E2E;&#x3068;&#x6C34;&#x69D8;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5869;&#x306E;&#x518D;&#x5206;&#x914D;&#x304B;&#x3089;&#x8AAC;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x308B; 1 &#x4FA1;&#x306E;&#x5869;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3082;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x81EA;&#x5DF1;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30EA;&#x30BE;&#x30C1;&#x30FC;&#x30E0;&#x932F;&#x4F53;&#x5869;&#x8F9B;&#x3044;&#x6C34;&#x3067;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;

&#x7528;&#x540C;&#x6B65;&#x8F90;&#x5C04; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x5C0F;&#x89D2;&#x6563;&#x5C04;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6A21;&#x62DF;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x7535;&#x89E3;&#x8D28;&#x548C;&#x6EB6;&#x83CC;&#x9176;&#x3001; &#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x7403;&#x72B6;&#x86CB;&#x767D;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6EB6;&#x83CC;&#x9176;&#x6700;&#x521D;&#x6865;&#x6881;&#x6210;&#x5BF9;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#xFF0C;&#x653E;&#x5BBD;&#x5230; hexagonally &#x534F;&#x8C03;&#x7EB5;&#x680F;&#x5F0F;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x6EB6;&#x83CC;&#x9176; macroions &#x4E0D;&#x76F8;&#x79F0;&#x7684;&#x4E00;&#x7EF4;&#x5BC6;&#x6570;&#x7EC4;&#x7531;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x88AB;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E3A;&#x7A33;&#x5B9A;&#x5373;&#x4F7F;&#x5B58;&#x5728;&#x76F8;&#x5F53;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x5355;&#x4EF7;&#x76D0;&#xFF0C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x89E3;&#x91CA;&#x4ECE;&#x76D0;&#x51DD;&#x805A;&#x548C;&#x6C34;&#x9636;&#x6BB5;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x5206;&#x914D;&#x3002;

&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x81EA;&#x7EC4;&#x88C5;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x6EB6;&#x83CC;&#x9176;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x5728;&#x54B8;&#x6C34;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;

Interactions between actin, an anionic polyelectrolyte, and lysozyme, a cationic globular protein, have been examined using a combination of synchrotron small-angle x-ray scattering and molecular dynamics simulations. Lysozyme initially bridges pairs of actin filaments, which relax into hexagonally coordinated columnar complexes comprised of actin held together by incommensurate one-dimensional close-packed arrays of lysozyme macroions. These complexes are found to be stable even in the presence of significant concentrations of monovalent salt, which is quantitatively explained from a redistribution of salt between the condensed and the aqueous phases.

Structure and stability of self-assembled actin-lysozyme complexes in salty water.

Interactions entre l&#39;actine, un poly&eacute;lectrolyte anionique et lysozyme, une prot&eacute;ine globulaire cationique, ont &eacute;t&eacute; examin&eacute;es en utilisant une combinaison de la diffusion de petits angles des rayons x de synchrotron et simulations de dynamique mol&eacute;culaire. Lysozyme bridges initialement paires de filaments d&#39;actine, qui d&eacute;tendent dans des complexes colonnaires hexagonal coordonn&eacute;s compos&eacute;s d&#39;actine maintenus ensemble par les tableaux unidimensionnels de compacte d&#39;incommensurables de lysozyme macro-ions. Ces complexes sont av&eacute;r&eacute;s stable m&ecirc;me en pr&eacute;sence de concentrations importantes de sel monovalent, qui est expliqu&eacute; quantitativement d&#39;une redistribution du sel entre le condens&eacute; et les phases aqueuses.

Structure et stabilit&eacute; des complexes actine-lysozyme auto-assembl&eacute;s dans l&#39;eau sal&eacute;e.

&#xB9D0;&#xB77C;, &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xC804;&#xD574;&#xC9C8; &#xBC0F; lysozyme, &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xAD6C;&#xD615; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; synchrotron &#xC791;&#xC740; &#xAC01;&#xB3C4; x-&#xC120; &#xC0B0;&#xB780; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xB3D9;&#xC5ED;&#xD559; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Lysozyme &#xCC98;&#xC74C; &#xB9D0;&#xB77C; lysozyme macroions&#xC758; &#xAC78;&#xB9DE;&#xC9C0; 1 &#xCC28;&#xC6D0; &#xB2EB;&#xAE30;&#xB97C; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD568;&#xAED8; &#xAC1C;&#xCD5C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C4; hexagonally &#xC870;&#xC815;&#xB41C; &#xC5F4; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xAE34;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC758; &#xC30D; &#xB2E4;&#xB9AC;. &#xC774; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xB294; &#xC555;&#xCD95; &#xB41C; &#xC218;&#xC131; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC774; &#xC18C;&#xAE08;&#xC758; &#xC7AC;&#xBC30;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xC591;&#xC801; &#xC5EC;&#xB7EC;&#xCC28;&#xB840; &#xC18C;&#xAE08;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC874;&#xC7AC;&#xB3C4; &#xC548;&#xC815; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xC870;&#xB9BD;&#xB41C; &#xB9D0;&#xB77C; lysozyme &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC9E0; &#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;.

Interacciones entre un polielectrolito y lisozima, actina, una prote&iacute;na globular cati&oacute;nica, han sido examinadas usando una combinaci&oacute;n de dispersi&oacute;n de rayos-x de &aacute;ngulo peque&ntilde;o de sincrotr&oacute;n y simulaciones de din&aacute;mica molecular. Lisozima inicialmente puentes pares de filamentos de actina, que relajan en complejos columnares hexagonally coordinados conformados por inconmensurable matrices unidimensionales close-packed de lisozima macroions de actina. Estos complejos se encuentran para ser estable incluso en presencia de concentraciones significativas de sal monovalente, que cuantitativamente se explica de una redistribuci&oacute;n de la sal entre la condensada y la fase acuosa.

Estructura y estabilidad de complejos actina-lisozima autoensambladas en agua salada.

&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x63CF;&#x8FF0;&#x975E;&#x9176;&#x3001; &#x7B49;&#x6E29;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x578B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x57FA;&#x4E8E;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x73B0;&#x5728;&#x5B8C;&#x5168;&#x5339;&#x914D; &#xFF08;PM&#xFF09; &#x7684;&#x53BB;&#x6DF7;&#x5408;&#x5316;&#x548C;&#x5355;&#x57FA;&#x5730;&#x4E0D;&#x5339;&#x914D; (MM) &#x5728;&#x78B1;&#x6027;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684; DNA &#x53CC;&#x5DE5;&#x3002;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x7F16;&#x7801;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x9897;&#x7C92;&#x7EB3;&#x5165;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; (ASO) &#x63A2;&#x9488;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x533A;&#x57DF;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7684;&#x505C;&#x6D41;&#x523B;&#x634F;&#x9020;&#x7684;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7C92;&#x5B50;&#x5305;&#x542B;&#x5355;&#x4E2A;&#x57FA;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x9EBB;&#x751F;&#x592A;&#x90CE;&#x63A2;&#x9488;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7C92;&#x5B50;&#x80FD;&#x591F;&#x540C;&#x65F6;&#x63A2;&#x6D4B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x76EE;&#x6807;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x9000;&#x706B;&#x5230;&#x7C92;&#x5B50;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x533A;&#x57DF;&#x548C;&#x53CC;&#x9762;&#x6253;&#x5370;&#x5668;&#x53BB;&#x6DF7;&#x5408;&#x5316;&#x7387;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528; ph &#x503C;&#x9636;&#x8DC3;&#x51FD;&#x6570;&#x6216;&#x989E; pH &#x68AF;&#x5EA6;&#x78B1;&#x6027;&#x523A;&#x6FC0;&#x5B9E;&#x73B0;&#x4E86;&#x53CC;&#x5DE5;&#x53BB;&#x6DF7;&#x5408;&#x5316;&#x3002;&#x5355;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#x63A2;&#x9488;&#x5E8F;&#x5217;&#x88AB;&#x4F7F;&#x7528;&#x65F6;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x53CC;&#x9762;&#x53BB;&#x6DF7;&#x5408;&#x5316;&#x7387;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5B8C;&#x7F8E;&#x5339;&#x914D;&#x53CC;&#x5DE5;&#x53BB;&#x6DF7;&#x5408;&#x5316;&#x7387;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x53D7;&#x5230;&#x6B67;&#x89C6;&#x3002;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x63A2;&#x9488;&#x5E8F;&#x5217;&#x88AB;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x66F4;&#x9AD8;&#x8981;&#x6C42;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7387;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E88;&#x4EE5;&#x533A;&#x5206;&#x63A2;&#x5934; dehybridizations &#x4ECE;&#x4E24;&#x53CC;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x5DE5;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5173;&#x4E8E;&#x533A;&#x5206;&#x5728;&#x9AD8;&#x786E;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x53BB;&#x6DF7;&#x5408;&#x5316;&#x5B8C;&#x7F8E;&#x5339;&#x914D;&#x53CC;&#x5DE5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x78B1;&#x6027;&#x53BB;&#x6DF7;&#x5408;&#x5316;&#x80FD;&#x591F;&#x6B63;&#x786E;&#x533A;&#x522B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5B8C;&#x7F8E;&#x5339;&#x914D;&#x548C;&#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x5355;&#x4E2A;&#x57FA;&#x53CC;&#x5DE5;&#x56DB;&#x5957;&#x7684;&#x70ED;&#x529B;&#x5B66;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x7B49;&#x7EA7;&#x5C42;&#x6B21;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BC1;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7387;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x90FD;&#x5F3A;&#x70C8;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6E29;&#x5EA6;&#x548C;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E86;&#x5982;&#x4F55;&#x901A;&#x8FC7;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x68AF;&#x5EA6; ph &#x503C;&#x5B57;&#x6BB5;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF0C;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x76CA;&#x7684;&#x8865;&#x507F;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x56FE;&#x5F62;&#x5316;&#x7684;&#x78B1;&#x6027;&#x53BB;&#x6DF7;&#x5408;&#x5316;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x578B;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x3002;

This work describes a nonenzymatic, isothermal genotyping method based on the kinetic differences exhibited in the dehybridization of perfectly matched (PM) and single-base mismatched (MM) DNA duplexes in an alkaline solution. Multifunctional encoded hydrogel particles incorporating allele-specific oligonucleotide (ASO) probes in two distinct regions were fabricated by using microfluidic-based stop-flow lithography. Each particle contained two distinct ASO probe sequences differing at a single base position, and thus each particle was capable of simultaneously probing two distinct target alleles. Fluorescently labeled target alleles were annealed to both probe regions of a particle, and the rate of duplex dehybridization was monitored by using fluorescence microscopy. Duplex dehybridization was achieved through an alkaline stimulus using either a pH step function or a temporal pH gradient. When a single target probe sequence was used, the rate of mismatch duplex dehybridization could be discriminated from the rate of perfect match duplex dehybridization. In a more demanding application in which two distinct probe sequences were used, we found that the rate profiles provided a means to discriminate probe dehybridizations from both of the two mismatched duplexes as well as to distinguish at high certainty the dehybridization of the two perfectly matched duplexes. These results demonstrate an ability of alkaline dehybridization to correctly discriminate the rank hierarchy of thermodynamic stability among four sets of perfect match and single-base mismatch duplexes. We further demonstrate that these rate profiles are strongly temperature dependent and illustrate how the sensitivity can be compensated beneficially by the use of an actuating gradient pH field.

Genotyping by alkaline dehybridization using graphically encoded particles.

Ce travail d&#xE9;crit un non enzymatique, la m&#xE9;thode de g&#xE9;notypage isotherme sur la base des diff&#xE9;rences cin&#xE9;tiques expos&#xE9;es dans le d&#xE9;shybridation parfaitement adapt&#xE9; (PM) et une seule base ne correspondent pas duplex d&#x26;#39;ADN (MM) dans une solution alcaline. Multifonctionnels comportant des particules d&#x26;#39;hydrogel cod&#xE9;es oligonucl&#xE9;otidiques sp&#xE9;cifiques d&#x26;#39;all&#xE8;les (ASO) sondes dans deux r&#xE9;gions distinctes ont &#xE9;t&#xE9; fabriqu&#xE9;es en utilisant microfluidique &#xE0; base d&#x26;#39;arr&#xEA;t d&#x26;#39;&#xE9;coulement de lithographie. Chaque particule contient deux distinctes ASO s&#xE9;quences sondes diff&#xE9;rentes &#xE0; une position de base unique, et donc chaque particule est capable de sonder simultan&#xE9;ment deux all&#xE8;les cibles distinctes. All&#xE8;les marqu&#xE9;s par fluorescence cibles ont &#xE9;t&#xE9; recuites &#xE0; deux r&#xE9;gions de sonde d&#x26;#39;une particule, et le taux de d&#xE9;shybridation duplex a &#xE9;t&#xE9; surveill&#xE9;e en utilisant la microscopie par fluorescence. D&#xE9;shybridation Duplex a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9; gr&#xE2;ce &#xE0; un stimulus alcaline en utilisant soit une fonction &#xE9;tape pH ou un gradient de pH temporelle. Quand une s&#xE9;quence cible unique sonde a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e, le taux de d&#xE9;shybridation duplex inad&#xE9;quation pourrait &#xEA;tre discrimin&#xE9; par rapport au taux de d&#xE9;shybridation match de duplex parfait. Dans une application plus exigeante dans laquelle deux s&#xE9;quences sondes distinctes ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;es, nous avons constat&#xE9; que les profils de vitesse a fourni un moyen de discriminer dehybridizations sonde &#xE0; la fois des deux duplex m&#xE9;sappari&#xE9;s ainsi que de faire la distinction au niveau &#xE9;lev&#xE9; de certitude l&#x26;#39;d&#xE9;shybridation des deux duplexes parfaitement appari&#xE9;s . Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent une capacit&#xE9; de d&#xE9;shybridation alcaline correctement discriminer la hi&#xE9;rarchie rang de stabilit&#xE9; thermodynamique entre les quatre ensembles de match parfait et duplex mismatch une seule base. Nous avons en outre d&#xE9;montrer que ces profils de vitesse sont fortement d&#xE9;pendante de la temp&#xE9;rature et d&#x26;#39;illustrer la fa&#xE7;on dont la sensibilit&#xE9; peut &#xEA;tre compens&#xE9;e par le b&#xE9;n&#xE9;ficiaire utilisation d&#x26;#39;un champ gradient de pH d&#x26;#39;actionnement.

G&#xE9;notypage par d&#xE9;shybridation alcalin &#xE0; l&#x26;#39;aide de particules Graphiquement encodage

Diese Arbeit beschreibt ein Nonenzymatic, Isotherme Genotypisierung-Methode, basierend auf die kinetischen Unterschiede in der Dehybridization von perfekt aufeinander abgestimmten (PM) ausgestellten und Einzel-Base falsch zugeordnet wurden (MM) DNA Duplex in eine alkalische L&ouml;sung. Multifunktionale codierten Hydrogel Teilchen Einbeziehung Allel-spezifische Oligonukleotid (ASO) in zwei unterschiedlichen Regionen Sonden wurden mithilfe der Microfluidic-basierte Stop-Flow Lithographie hergestellt. Jedes Teilchen enthalten zwei unterschiedliche ASO Sonde Sequenzen unterschiedlicher auf eine einheitliche Basis Position war, und damit jedes Teilchen gleichzeitig zwei unterschiedliche Ziel-Allele Sondierung der Lage. Leuchtstoff beschriftetem Ziel Allele wurden f&uuml;r beide Regionen Sonde eines Teilchens gegl&uuml;ht, und die Rate der duplex Dehybridization wurde mithilfe von Fluoreszenzmikroskopie &uuml;berwacht. Duplex Dehybridization wurde durch einen alkalischen Reiz mit einer pH-Wert-Step-Funktion oder einen Farbverlauf zeitliche pH-Wert erreicht. Wenn eine einzelnes Ziel-Sonde-Sequenz verwendet wurde, konnte die Rate der Nicht&uuml;bereinstimmung duplex Dehybridization von der Rate der Traumpartner duplex Dehybridization diskriminiert werden. In eine anspruchsvollere Anwendung, in der zwei unterschiedliche Sonde Sequenzen verwendet wurden, fanden wir, dass die Tarif-Profile, Mittel zur Sonde Dehybridizations von beiden die zwei nicht &uuml;bereinstimmende Duplices sowie sofern, bei hoher Sicherheit unterscheiden die Dehybridization der beiden perfekt zu diskriminieren Duplices abgestimmt. Diese Ergebnisse zeigen eine F&auml;higkeit der alkalischen Dehybridization, die Rang Hierarchie der thermodynamischen Stabilit&auml;t unter den vier S&auml;tze von Traumpartner und Einzel-Base Missverh&auml;ltnis Duplices richtig zu unterscheiden. Weiter zeigen wir, dass diese Tarif-profile stark temperaturabh&auml;ngig sind und veranschaulichen, wie die Empfindlichkeit durch die Verwendung eines Stellantrieb gradient pH-Wert-Feldes nutzbringend kompensiert werden kann.

Genotypisierung von alkalische Dehybridization mit grafisch kodierten Teilchen.

Questo lavoro descrive un nonenzymatic, metodo isotermico genotipizzazione basato sulle differenze cinetiche ha esposte nel dehybridization di perfettamente abbinati (PM) e singolo-base mismatched (MM) duplex di DNA in una soluzione alcalina. Multifunzionale hydrogel codificato particelle che incorporano allele-specific oligonucleotide (ASO) sonde in due regioni distinte furono fabbricati utilizzando basati su microfluidica litografia stop-flow. Ogni particella conteneva due distinte ASO sonda sequenze diverse in una singola posizione base, e cos&igrave; ogni particella era capace di sondare contemporaneamente due alleli distinti target. Gli alleli fluorescente contrassegnati dell&#39;obiettivo sono stati ricotto per entrambe le regioni sonda di una particella, e il tasso di dehybridization duplex &egrave; stato monitorato mediante microscopia di fluorescenza. Dehybridization duplex &egrave; stato raggiunto attraverso uno stimolo alcalino utilizzando una funzione di passaggio di pH o un gradiente di pH temporale. Quando &egrave; stata utilizzata una sequenza sonda singola destinazione, il tasso di dehybridization duplex mismatch potrebbe essere discriminato dal tasso di corrispondenza perfetta dehybridization duplex. In un&#39;applicazione pi&ugrave; esigente in cui sono stati utilizzati due sequenze distinte sonda, abbiamo trovato che i profili di velocit&agrave; fornito un mezzo per discriminare la sonda dehybridizations da entrambi i due duplex non corrispondenti pure quanto a distinguere a elevata certezza la dehybridization dei due perfettamente abbinati duplex. Questi risultati dimostrano una capacit&agrave; di dehybridization alcalina di discriminare correttamente la gerarchia di rango di stabilit&agrave; termodinamica tra quattro set di perfetta corrispondenza e duplex mismatch singolo-base. Noi dimostrare ulteriormente che questi profili di tasso sono fortemente dipendente dalla temperatura e illustrano come la sensibilit&agrave; pu&ograve; essere compensata in modo benefico tramite l&#39;uso di un campo gradiente pH azionamento.

Genotipizzazione di dehybridization alcalino utilizzando graficamente con codifica particelle.

&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x3067;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x305F;&#xFF08;PM&#xFF09;&#x3068;&#x5358;&#x4E00;&#x5869;&#x57FA;&#x30DF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#xFF08;MM&#xFF09;DNA&#x4E8C;&#x91CD;&#x9396;&#x306E;dehybridization&#x306B;&#x5C55;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x975E;&#x9175;&#x7D20;&#x7684;&#x3001;&#x7B49;&#x6E29;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 2&#x3064;&#x306E;&#x5225;&#x500B;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#xFF08;ASO&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3093;&#x3060;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x7C92;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30C3;&#x30D7;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5404;&#x7C92;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x5869;&#x57FA;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;ASO&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x914D;&#x5217;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5404;&#x7C92;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x6642;&#x306B;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6A19;&#x7684;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x30A2;&#x30CB;&#x30FC;&#x30EB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;dehybridization&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E8C;&#x91CD;dehybridization&#x306F;pH&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x95A2;&#x6570;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;pH&#x52FE;&#x914D;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#xB7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x3001;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;dehybridization&#x7387;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4E00;&#x81F4;&#x3059;&#x308B;&#x4E8C;&#x91CD;dehybridization&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x306B;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x914D;&#x5217;&#x304C;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x8981;&#x6C42;&#x306E;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x901F;&#x5EA6;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x78BA;&#x5B9F;&#x6027;&#x3067;2&#x3064;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x305F;&#x4E8C;&#x91CD;&#x306E;dehybridization&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;2&#x3064;&#x306E;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x9396;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306A;&#x3069;&#x304B;&#x3089;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;dehybridizations&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x5B8C;&#x74A7;&#x306B;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x3057;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x5869;&#x57FA;&#x30DF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#x306E;4&#x3064;&#x306E;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x9593;&#x306E;&#x71B1;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x968E;&#x5C64;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;dehybridization&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F37;&#x304F;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x611F;&#x5EA6;&#x304C;&#x4F5C;&#x52D5;&#x52FE;&#x914D;&#x306E;pH&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6709;&#x5229;&#x306B;&#x88DC;&#x511F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30AB;&#x30EB;&#x306B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7C92;&#x5B50;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;Dehybridization&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;

&#xC774; &#xC791;&#xC5C5;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; nonenzymatic, &#xB4F1;&#xC628;&#xC120; &#xC720;&#xC804;&#xD615; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xC77C;&#xCE58; (PM)&#xC758; dehybridization&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC2DC; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xC77C;-&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4; &#xD0A4;&#xB124;&#xD2F1; &#xCC28;&#xC774;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; (MM)&#xC774; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; DNA duplexes &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; &#xD574;&#xACB0;&#xCC45;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD2B9;&#xC815; &#xD1B5;&#xD569; &#xC785;&#xC790; oligonucleotide (&#xC544;&#xC18C;) &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xBCC4;&#xAC1C;&#xC758; &#xB450; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; hydrogel &#xC815;&#xC9C0; &#xD750;&#xB984; &#xC11D;&#xD310; &#xC778;&#xC1C4; &#xBBF8;&#xC138;-&#xAE30;&#xBC18;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC791; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC01; &#xC785;&#xC790; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC544;&#xC18C; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xAC01; &#xC785;&#xC790;&#xB294; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xB300;&#xC0C1; &#xB300;&#xB9BD;&#xC744; &#xD504;&#xB85C; &#xBE59; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; &#xB300;&#xC0C1; &#xB300;&#xB9BD; &#xD55C; &#xC785;&#xC790;&#xC758; &#xB450; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xB2E8;&#xB828; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xC911; dehybridization&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC911; dehybridization&#xB294; pH &#xB2E8;&#xACC4; &#xD568;&#xC218; &#xB610;&#xB294; &#xCE21; &#xB450; &#xC5FD; &#xC0B0;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xB300;&#xC0C1; &#xAC80;&#xC0C9; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xC77C;&#xCE58; &#xC774;&#xC911; dehybridization&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC774;&#xC911; dehybridization&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC10; &#xBCC4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC18D;&#xB3C4; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB192;&#xC740; &#xD655;&#xC2E4;&#xC131;&#xC5D0; &#xB450; dehybridization &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xB85C; &#xB450; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; duplexes&#xC758; &#xB450; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; dehybridizations &#xCC28;&#xBCC4;&#xC744; &#xC758;&#xBBF8; &#xC77C;&#xCE58; duplexes &#xC81C;&#xACF5; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC790;&#xB8CC; &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58; duplexes&#xC758; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC138;&#xD2B8; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F4;&#xC5ED;&#xD559;&#xC801; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC758; &#xACC4;&#xAE09; &#xACC4;&#xCE35;&#xC744; &#xCC28;&#xBCC4; &#xC54C; &#xCE7C;&#xB77C; &#xC778; dehybridization&#xC758; &#xB2A5;&#xB825; &#xC785;&#xC99D;. &#xB354;&#xC6B1; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC628;&#xB3C4; &#xC885;&#xC18D; &#xBC0F; actuating &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; pH &#xD544;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC10;&#xB3C4; &#xADF9;&#xB300;&#xD654; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xC804;&#xD615; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; dehybridization &#xADF8;&#xB798;&#xD53D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xC785;&#xC790;.

Este trabajo describe un m&#xE9;todo no enzim&#xE1;tica, genotipificaci&#xF3;n isot&#xE9;rmica basada en las diferencias cin&#xE9;ticas expuestas en el deshibridaci&#xF3;n de adapta perfectamente (PM) y una sola base de que no coinciden (MM) d&#xFA;plex de ADN en una soluci&#xF3;n alcalina. Multifuncionales que incorporan part&#xED;culas de hidrogel de codificaci&#xF3;n de oligonucle&#xF3;tidos espec&#xED;ficos de alelo (ASO) las sondas en dos regiones distintas fueron fabricados mediante el uso de microfluidos basada en la parada del flujo de la litograf&#xED;a. Cada part&#xED;cula conten&#xED;a dos distintas secuencias de la sonda ASO diferentes en una posici&#xF3;n de una sola base, y por lo tanto cada part&#xED;cula era capaz de simult&#xE1;neamente sondaje dos alelos diferentes diana. Marcadas fluorescentemente alelos diana fueron recocidas a ambas regiones de la sonda de una part&#xED;cula, y la tasa de deshibridaci&#xF3;n d&#xFA;plex se control&#xF3; mediante microscop&#xED;a de fluorescencia. Deshibridaci&#xF3;n d&#xFA;plex se logr&#xF3; mediante un est&#xED;mulo alcalino utilizando una funci&#xF3;n de paso de pH o un gradiente de pH temporal. Cuando una secuencia diana &#xFA;nica sonda se utiliz&#xF3;, la tasa de deshibridaci&#xF3;n desajuste d&#xFA;plex podr&#xED;a ser discriminado de la tasa de deshibridaci&#xF3;n perfecto d&#xFA;plex partido. En una aplicaci&#xF3;n m&#xE1;s exigente en la que dos secuencias de la sonda se utilizaron diferentes, hemos encontrado que los perfiles de tasa proporcionan un medio para discriminar dehybridizations sonda de ambos de los dos d&#xFA;plex no coincidentes, as&#xED; como para distinguir a la certeza de alta la deshibridaci&#xF3;n de los dos d&#xFA;plex perfectamente emparejados . Estos resultados demuestran una capacidad de deshibridaci&#xF3;n alcalina de discriminar correctamente la jerarqu&#xED;a de rango de estabilidad termodin&#xE1;mica de los cuatro juegos de partido perfecto y una sola base de d&#xFA;plex desajuste. Adem&#xE1;s, demuestran que estos perfiles de velocidad son fuertemente dependientes de la temperatura e ilustran c&#xF3;mo la sensibilidad puede ser compensada beneficiosamente mediante el uso de un campo gradiente de pH de accionamiento.

Scott C. Slimmer

Department of Materials Science and Engineering

University of Illinois at Urbana-Champaign

Planar and Three-Dimensional Printing of Conductive Inks

Scott C. Slimmer

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University of Illinois at Urbana-Champaign

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Department of Materials Science and Engineering