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Adhesion Frequency Assay for <em>In Situ</em> Kinetics Analysis of Cross-Junctional Molecular Interactions at the Cell-Cell Interface

The micropipette adhesion assay was developed in 1998 to measure two-dimensional (2D) receptor-ligand binding kinetics1. The assay uses a human red blood ...

Georgia Institute of Technology 

L-selectin requires a threshold shear to enable leukocytes to tether to and roll on vascular surfaces. Transport mechanisms govern flow-enhanced tethering, whereas force governs flow-enhanced rolling by prolonging the lifetimes of L-selectin-ligand complexes (catch bonds). Using selectin crystal structures, molecular dynamics simulations, site-directed mutagenesis, single-molecule force and kinetics experiments, Monte Carlo modeling, and flow chamber adhesion studies, we show that eliminating a hydrogen bond to increase the flexibility of an interdomain hinge in L-selectin reduced the shear threshold for adhesion via two mechanisms. One affects the on-rate by increasing tethering through greater rotational diffusion. The other affects the off-rate by strengthening rolling through augmented catch bonds with longer lifetimes at smaller forces. By forcing open the hinge angle, ligand may slide across its interface with L-selectin to promote rebinding, thereby providing a mechanism for catch bonds. Thus, allosteric changes remote from the ligand-binding interface regulate both bond formation and dissociation.

Flow-enhanced adhesion regulated by a selectin interdomain hinge.

L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x8981;&#x6C42;&#x9608;&#x503C;&#x526A;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6302;&#x4E0A;&#x5E76;&#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x8868;&#x9762;&#x56DE;&#x6EDA;&#x3002;&#x4F20;&#x8F93;&#x673A;&#x5236;&#x63A7;&#x5236;&#x6D41;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E2D;&#x7EE7;&#xFF0C;&#x800C;&#x6B66;&#x529B;&#x63A7;&#x5236;&#x6D41;&#x589E;&#x5F3A;&#x6EDA;&#x52A8;&#x901A;&#x8FC7;&#x5EF6;&#x957F;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x7684; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x914D;&#x4F53;&#x590D;&#x5408;&#x7269; &#xFF08;catch &#x503A;&#x5238;)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3001; &#x5206;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6A21;&#x62DF;&#x3001; &#x5B9A;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x3001; &#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x548C;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x3001; &#x8499;&#x7279;&#x5361;&#x7F57;&#x6A21;&#x62DF;&#x548C;&#x6D41;&#x5206;&#x5EAD;&#x7C98;&#x9644;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x6D88;&#x9664;&#x6C22;&#x952E;&#x6765;&#x589E;&#x52A0; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x5728;&#x57DF;&#x95F4;&#x94F0;&#x94FE;&#x7684;&#x7075;&#x6D3B;&#x6027;&#x964D;&#x4F4E;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E24;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x526A;&#x9608;&#x503C;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x901A;&#x8FC7;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x8F6C;&#x52A8;&#x6269;&#x6563;&#x5F71;&#x54CD;&#x7387;&#x4E0A;&#x3002;&#x5176;&#x4ED6;&#x5F71;&#x54CD;&#x5173;&#x95ED;&#x7387;&#x901A;&#x8FC7;&#x52A0;&#x5F3A;&#x6EDA;&#x52A8;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x6E14;&#x503A;&#x5238;&#x4E0E;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x90E8;&#x961F;&#x5728;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5F3A;&#x5236;&#x6253;&#x5F00;&#x8F6C;&#x8F74;&#x89D2;&#x5EA6;&#x6765;&#x770B;&#xFF0C;&#x914D;&#x4F53;&#x53EF;&#x80FD;&#x6ED1;&#x8FC7;&#x5176;&#x63A5;&#x53E3;&#x4E0E; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x91CD;&#x65B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A; catch &#x503A;&#x5238;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x914D;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x754C;&#x9762;&#x8FDC;&#x7A0B;&#x53D8;&#x6784;&#x53D8;&#x5316;&#x8C03;&#x8282;&#x503A;&#x5238;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5206;&#x89E3;&#x3002;

&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x7684;&#x57DF;&#x95F4;&#x94F0;&#x94FE;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x6D41;&#x91CF;&#x589E;&#x5F3A;&#x9644;&#x7740;&#x529B;&#x3002;

L-s&#xE9;lectine n&#xE9;cessite un cisaillement seuil pour permettre aux leucocytes et d&#x26;#39;attache pour rouler sur des surfaces vasculaires. Les m&#xE9;canismes de transport r&#xE9;gissent flux renforc&#xE9; attache, tandis que la force r&#xE9;git flux renforc&#xE9; de roulement en prolongeant la dur&#xE9;e de vie de L-s&#xE9;lectine-ligand (capture obligations). Utilisation de structures cristallines s&#xE9;lectine, simulations de dynamique mol&#xE9;culaire, de mutagen&#xE8;se dirig&#xE9;e, des exp&#xE9;riences seule mol&#xE9;cule de force et de la cin&#xE9;tique, de Monte-Carlo de mod&#xE9;lisation et des &#xE9;tudes de flux de chambre d&#x26;#39;adh&#xE9;rence, nous montrons que l&#x26;#39;&#xE9;limination une liaison hydrog&#xE8;ne pour augmenter la flexibilit&#xE9; d&#x26;#39;une charni&#xE8;re interdomaine &#xE0; L- s&#xE9;lectine a r&#xE9;duit le seuil de cisaillement pour l&#x26;#39;adh&#xE9;sion par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de deux m&#xE9;canismes. Un affecte le taux de sur-tethering en augmentant gr&#xE2;ce &#xE0; la diffusion de rotation sup&#xE9;rieure. L&#x26;#39;autre affecte le hors-taux de roulement par le renforcement par le biais augment&#xE9;e attraper des liens avec des dur&#xE9;es de vie &#xE0; des forces plus petites. En for&#xE7;ant l&#x26;#39;angle ouvert charni&#xE8;re, ligand peut glisser &#xE0; travers son interface avec la L-s&#xE9;lectine &#xE0; promouvoir reconsolidation, fournissant ainsi un m&#xE9;canisme pour les obligations de capture. Ainsi, les changements allost&#xE9;riques &#xE0; distance depuis l&#x26;#39;interface de liaison de ligand r&#xE9;guler la formation de liaisons &#xE0; la fois et de dissociation.

&#xC0; flux renforc&#xE9; adh&#xE9;sion r&#xE9;glement&#xE9;e par une charni&#xE8;re Interdomain S&#xE9;lectine

L-selectin erfordert eine Schwelle Scherung Leukozyten zu begrenzen und Rollen auf vaskul&auml;re Fl&auml;chen aktivieren. Transportmechanismen Regeln Str&ouml;mung verbesserten Anbindehaltung, wohingegen Kraft Informationsfluss verbessert regelt indem Sie verl&auml;ngern die Lebensdauer der L-selectin-Ligand-komplexen (fangen Anleihen) Rollen. Anhand Selektine Kristallstrukturen, Molekulardynamik-Simulationen, Site-verwiesene Mutagenese Einzelmolek&uuml;l-Kraft und Kinetik-Experimente, Monte-Carlo-Modellierung und Flow Kammer Adh&auml;sion Studien zeigen wir die Beseitigung einer Wasserstoff-Anleihe um die Flexibilit&auml;t ein dom&auml;nen&uuml;bergreifendes Scharnier in L-selectin erh&ouml;hen die Scherung-Schwelle f&uuml;r Adh&auml;sion &uuml;ber zwei Mechanismen reduziert. Einer betrifft die Rate durch die Erh&ouml;hung der Anbindehaltung durch gr&ouml;&szlig;ere rotatorischen Diffusion. Das andere betrifft die Weg-Rate durch St&auml;rkung der Walzen durch augmented Fang Anleihen mit l&auml;ngeren Lebensdauer bei kleineren Kr&auml;fte. Durch offene erzwingen kann den Winkel Scharnier Ligand &uuml;ber seine Schnittstelle mit L-selectin zur F&ouml;rderung der Neubindung, wodurch einen Mechanismus zum Fang Anleihen schieben. So Regeln entfernten von der Ligand-Bindung-Schnittstelle allosterische &Auml;nderungen Bond Bildung und Dissoziation.

Fluss-verbesserte Adh&auml;sion durch ein Selektine dom&auml;nen&uuml;bergreifendes Scharnier geregelt.

L-selectina richiede un taglio di soglia per attivare i leucociti a legare a e rullo su superfici vascolari. Meccanismi di trasporto governano flusso-enhanced tethering, considerando che la forza governa il flusso-enhanced rolling prolungando la durata dei complessi di L-selectina-ligando (catch obbligazioni). Utilizzando selectin strutture cristalline, simulazioni di dinamica molecolare, mutagenesi luogo-diretta, forza singola molecola ed esperimenti di cinetica, modellazione Montecarlo e studi di flusso Camera adesione, mostriamo che eliminando un legame a idrogeno per aumentare la flessibilit&agrave; di una cerniera tra domini in L-selectina ridotta la soglia di taglio per adesione attraverso due meccanismi. Uno colpisce il tasso su aumentando il tethering attraverso una maggiore diffusione rotazionale. L&#39;altro colpisce il off-rate rafforzando la laminazione attraverso catture aumentata obbligazioni con durata pi&ugrave; lunga a forze pi&ugrave; piccole. Forzando l&#39;apertura dell&#39;angolo a cerniera, ligando pu&ograve; scivolare attraverso la sua interfaccia con L-selectina per promuovere la riassociazione, fornendo in tal modo un meccanismo per cattura obbligazioni. Cos&igrave;, cambiamenti allosteric remoti dall&#39;interfaccia ligand-legantesi regolano formazione di legami e la dissociazione.

Adesione migliorato flusso regolato da una cerniera selectin interdominio.

L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x306E;&#x305B;&#x3093;&#x65AD;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#xFF08;&#x50B5;&#x5238;&#x3092;&#x30AD;&#x30E3;&#x30C3;&#x30C1;&#xFF09;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x5EF6;&#x9577;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x529B;&#x306E;&#x652F;&#x914D;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x304C;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x6D41;&#x308C;&#x304C;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C6;&#x30B6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x6CD5;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x3068;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AB;&#x30EB;&#x30ED;&#xB7;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x30D2;&#x30F3;&#x30B8;&#x306E;&#x67D4;&#x8EDF;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x63A5;&#x7740;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x305B;&#x3093;&#x65AD;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x3064;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x56DE;&#x8EE2;&#x62E1;&#x6563;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30C6;&#x30B6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E0A;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x529B;&#x3067;&#x9577;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x30AD;&#x30E3;&#x30C3;&#x30C1;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30AA;&#x30D5;&#x7387;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30F3;&#x30B8;&#x306E;&#x89D2;&#x5EA6;&#x3092;&#x958B;&#x3044;&#x3066;&#x5F37;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30AD;&#x30E3;&#x30C3;&#x30C1;&#x50B5;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A2;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x89E3;&#x96E2;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x30D2;&#x30F3;&#x30B8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x304C;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x63A5;&#x7740;

L selectin &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xC804;&#xB2E8; &#xBC27;&#xC904;&#xC744; &#xD608;&#xAD00; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD798; &#xAD00;&#xB9AC; L selectin &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xC9C0; (&#xC7A1;&#xC744; &#xCC44;&#xAD8C;)&#xC758; &#xC218;&#xBA85;&#xC744; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xD558; &#xC5EC; &#xC555; &#xC5F0; &#xD750;&#xB984; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC804;&#xC1A1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; tethering &#xD750;&#xB984; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Selectin &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xAD6C;&#xC870;, &#xBD84;&#xC790; &#xC5ED;&#xD559; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158;, &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC9C0;&#xC2DC; &#xB41C; mutagenesis, &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xD798;&#xACFC; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xC2E4;&#xD5D8;, &#xBAAC;&#xD14C; &#xCE74;&#xB97C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xD750;&#xB984; &#xCC54;&#xBC84; &#xC811;&#xCC29; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC811;&#xCC29; &#xC804;&#xB2E8; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xAC10;&#xC18C; L selectin&#xC5D0; &#xC6B0;&#xC120; &#xD78C;&#xC9C0;&#xC758; &#xC720;&#xC5F0;&#xC131;&#xC744; &#xB192;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xD070; &#xD68C;&#xC804; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; tethering &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC791;&#xC740; &#xC138;&#xB825;&#xC5D0; &#xB354; &#xAE34; &#xC218;&#xBA85; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC99D;&#xAC15;&#xB41C; &#xCE90;&#xCE58; &#xC720;&#xB300;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC555; &#xC5F0;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xC624;&#xD504; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC624;&#xD508; &#xAC15;&#xC694; &#xD558; &#xC5EC; &#xD78C;&#xC9C0; &#xAC01;&#xB3C4; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB4DC; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xCE90;&#xCE58; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD64D;&#xBCF4; L selectin&#xC640; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, allosteric &#xBCC0;&#xD654; ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xACA9; &#xC870;&#xC808; &#xC720;&#xB300; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xBD84;&#xB9AC;.

&#xD750;&#xB984; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC811;&#xCC29; selectin &#xC6B0;&#xC120; &#xD78C;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C;.

L-selectina requiere una cizalla umbral para permitir a los leucocitos y de sujeci&#xF3;n para rodar sobre las superficies vasculares. Los mecanismos de transporte regular de flujo mayor anclaje, mientras que administra la fuerza del flujo de rodadura mejorada prolongando la vida &#xFA;til de la L-selectina-ligando complejos (captura bonos). Uso de las estructuras de selectina de cristal, las simulaciones de din&#xE1;mica molecular, la mutag&#xE9;nesis dirigida al sitio, los experimentos de una sola mol&#xE9;cula de la fuerza y &#x200B;&#x200B;la cin&#xE9;tica, el modelado de Monte Carlo, y los estudios de flujo de la c&#xE1;mara de adhesi&#xF3;n, nos muestran que la eliminaci&#xF3;n de un enlace de hidr&#xF3;geno para aumentar la flexibilidad de una articulaci&#xF3;n entre dominios en la L- selectina reduce el umbral de corte para la adhesi&#xF3;n a trav&#xE9;s de dos mecanismos. Una afecta a la tasa on-mediante el aumento de la inmovilizaci&#xF3;n mediante una mayor difusi&#xF3;n rotacional. El otro afecta a la tasa de descuento-a trav&#xE9;s del fortalecimiento de rodadura a trav&#xE9;s de la captura aumentada bonos con duraciones m&#xE1;s largas de fuerzas m&#xE1;s peque&#xF1;as. Al obligar a abrir el &#xE1;ngulo de la bisagra, ligando puede deslizarse a trav&#xE9;s de su interfaz con la L-selectina para promover la revinculaci&#xF3;n, proporcionando as&#xED; un mecanismo de bonos de captura. As&#xED;, los cambios alost&#xE9;ricos alejadas de la interfaz de uni&#xF3;n al ligando regular tanto la formaci&#xF3;n del enlace y la disociaci&#xF3;n.

Flujo de mayor adhesi&#xF3;n regulado por una bisagra Interdomain Selectina

&#x6D41;&#x589E;&#x5F3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x662F;&#x8FDD;&#x53CD;&#x5E38;&#x7406;&#x7684;&#x73B0;&#x8C61;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x51FA;&#x73B0;&#x8FC7;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x521D;&#x59CB;&#x6043;&#x4E8E;&#x8840;&#x7BA1;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E76;&#x901A;&#x8FC7;&#x52A0;&#x5F3A;&#x5176;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x6EDA;&#x52A8;&#x4E92;&#x52A8;&#x6D41;&#x8865;&#x5145;&#x4E86; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x9644;&#x7740;&#x529B;&#x3002;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x6216;&#x6EDA;&#x52A8;&#x90FD;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D7;&#x5230;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x6216;&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x914D;&#x4F53;&#x503A;&#x5238;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x5C55;&#x793A;&#x4E86;&#x6D41;&#x589E;&#x5F3A; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;-&#x8F74;&#x627F;&#x5FAE;&#x7403;&#x7684;&#x8F67;&#x5236;&#x6216;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE; P-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x914D;&#x4F53;-1 &#x4E0A;&#x7684;&#x5F3A;&#x5236;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x503A;&#x5238;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6D41;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x589E;&#x52A0;&#x503A;&#x5238;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x8FD0;&#x8F93;&#x673A;&#x5236;&#x6043;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5FAE;&#x7403;&#x6216;&#x5230; P-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x914D;&#x4F53;-1 &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF1A; &#x6ED1;&#x52A8;&#x7403;&#x5E95;&#x90E8;&#x7684;&#x4E0A;&#x8868;&#x9762;&#x3001; &#x5E03;&#x6717;&#x8FD0;&#x52A8;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x6269;&#x6563;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x6F84;&#x6E05;&#x6D41;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x901A;&#x8FC7; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x4EA4;&#x901A;&#x63A7;&#x5236;&#x6D41;&#x589E;&#x5F3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x5728;&#x9608;&#x503C;&#x526A;&#x7684;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x3002;

Flow-enhanced cell adhesion is a counterintuitive phenomenon that has been observed in several biological systems. Flow augments L-selectin-dependent adhesion by increasing the initial tethering of leukocytes to vascular surfaces and by strengthening their subsequent rolling interactions. Tethering or rolling might be influenced by physical factors that affect the formation or dissociation of selectin-ligand bonds. We recently demonstrated that flow enhanced rolling of L-selectin-bearing microspheres or neutrophils on P-selectin glycoprotein ligand-1 by force decreased bond dissociation. Here, we show that flow augmented tethering of these microspheres or cells to P-selectin glycoprotein ligand-1 by three transport mechanisms that increased bond formation: sliding of the sphere bottom on the surface, Brownian motion, and molecular diffusion. These results elucidate the mechanisms for flow-enhanced tethering through L-selectin.

Transport governs flow-enhanced cell tethering through L-selectin at threshold shear.

L&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire &#xE0; flux renforc&#xE9; est un ph&#xE9;nom&#xE8;ne paradoxal qui a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9; dans plusieurs syst&#xE8;mes biologiques. Augmente de d&#xE9;bit L-s&#xE9;lectine-d&#xE9;pendante d&#x26;#39;adh&#xE9;rence en augmentant le tethering initiale de leucocytes aux surfaces vasculaires et en renfor&#xE7;ant leurs interactions ult&#xE9;rieures de laminage. Tethering ou roulant pourrait &#xEA;tre influenc&#xE9;e par des facteurs physiques qui influent sur la formation ou la dissociation de la s&#xE9;lectine-ligand obligations. On a r&#xE9;cemment montr&#xE9; que d&#xE9;bit am&#xE9;lior&#xE9; laminage de la L-s&#xE9;lectine-palier microsph&#xE8;res ou des neutrophiles sur la P-s&#xE9;lectine glycoprot&#xE9;ine ligand-1 par la force diminue dissociation de la liaison. Ici, nous montrons que l&#x26;#39;&#xE9;coulement accru d&#x26;#39;attacher ces microsph&#xE8;res ou des cellules de la P-s&#xE9;lectine glycoprot&#xE9;ine ligand-1 par trois m&#xE9;canismes de transport qui ont augment&#xE9; la formation de liaisons: glissement de la partie inf&#xE9;rieure sph&#xE8;re sur la surface, le mouvement brownien, et la diffusion mol&#xE9;culaire. Ces r&#xE9;sultats &#xE9;lucider les m&#xE9;canismes de flux renforc&#xE9; attache &#xE0; L-s&#xE9;lectine.

R&#xE9;git transport Tethering cellule &#xE0; flux renforc&#xE9; Gr&#xE2;ce &#xE0; la L-s&#xE9;lectine &#xE0; cisaillement seuil

Fluss-verbesserte Zelladh&auml;sion ist ein eing&auml;ngig Ph&auml;nomen, das in verschiedenen biologischen Systemen beobachtet worden ist. Str&ouml;mung erweitert L-selectin-abh&auml;ngige Adh&auml;sion durch Erh&ouml;hung der anf&auml;nglichen Anbindehaltung von Leukozyten auf vaskul&auml;re Oberfl&auml;chen und durch St&auml;rkung ihrer nachfolgenden rollenden Interaktionen. Anbindehaltung oder Rollen kann durch physikalische Faktoren beeinflusst werden, die die Bildung oder die Dissoziation von selectin Ligand Anleihen beeinflussen. Wir vor kurzem gezeigt, dass Str&ouml;mung verbessert L-selectin-Lager-Mikrosph&auml;ren selbstgedrehte oder Neutrophilen auf P-selectin Glykoprotein Ligand-1 durch verminderte Bond Dissoziation zwingen. Hier zeigen wir, dass die Str&ouml;mung erg&auml;nzt dieser Mikrosph&auml;ren oder Zellen zu P-selectin Glykoprotein Ligand-1 durch drei Transportmechanismen, die Bond-Bildung erh&ouml;ht Anbindehaltung: Gleiten der unteren Kugel auf der Oberfl&auml;che, die Brownsche Bewegung und die molekulare Diffusion. Diese Ergebnisse verdeutlichen die Mechanismen f&uuml;r verbesserten Informationsfluss durch L-selectin tethering.

Verkehr regelt Str&ouml;mung verbesserten Zelle Anbindehaltung durch L-selectin auf Schwelle Scherung.

Adesione delle cellule di flusso-enhanced &egrave; un fenomeno controintuitivo che &egrave; stato osservato in vari sistemi biologici. Flusso aumenta l&#39;adesione L-selectina-dipendente aumentando il tethering iniziale dei leucociti alle superfici vascolari e rafforzando la loro successive laminazione interazioni. Tethering o rolling potrebbe essere influenzato da fattori fisici che influenzano la formazione o la dissociazione delle obbligazioni selectina-ligando. Abbiamo recentemente dimostrato che flusso migliorato arrotolare le microsfere di L-selectina-cuscinetto o neutrofili su P-Selectina glicoproteina legante-1 da forza di dissociazione di legame &egrave; diminuito. Qui, ci mostra che il flusso aumentata tethering di queste microsfere o cellule ad ligando-1 glicoproteina P-Selectina dai tre meccanismi di trasporto che aumenta la formazione di legami: scivolamento della parte inferiore della sfera sulla superficie, il moto browniano e diffusione molecolare. Questi risultati delucidare i meccanismi di flusso-enhanced tethering attraverso L-selectina.

Trasporto governa il flusso-enhanced cell tethering attraverso L-selectina al taglio di soglia.

&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x76F4;&#x611F;&#x7684;&#x306A;&#x73FE;&#x8C61;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x8840;&#x7BA1;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x30C6;&#x30B6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x63A5;&#x7740;&#x3002;&#x7E4B;&#x7559;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x89E3;&#x96E2;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x529B;&#x3067;P-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;-1&#x306B;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D9;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A2;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x5727;&#x5EF6;&#x9AD8;&#x3081;&#x305D;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x7D50;&#x5408;&#x89E3;&#x96E2;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x3001;&#x30D6;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x62E1;&#x6563;&#x306B;&#x7403;&#x4F53;&#x306E;&#x5E95;&#x306E;&#x6ED1;&#x308A;&#xFF1A;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x304C;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;3&#x3064;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#xB7;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;P-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;-1&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A2;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30C6;&#x30B6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5897;&#x5927;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6D41;&#x308C;&#x304C;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C6;&#x30B6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x306E;&#x305B;&#x3093;&#x65AD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30C6;&#x30B6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;

&#xD750;&#xB984; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29;&#xC740; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC5B4; &#xAE0B; &#xD604;&#xC0C1;&#xC774; &#xB2E4;. &#xD750;&#xB984; &#xAD00; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; tethering &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xB864;&#xB9C1; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; L selectin &#xC885;&#xC18D; &#xC811;&#xCC29;&#xC744; &#xC99D;&#xB300; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Tethering &#xB610;&#xB294; &#xC555; &#xC5F0; &#xD615;&#xC131; &#xB610;&#xB294; selectin &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xB294; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC744; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; &#xD750;&#xB984; &#xAC15;&#xD654; L selectin &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; microspheres&#xC758; &#xC555; &#xC5F0; &#xB610;&#xB294; P selectin &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;-1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C; &#xAC10;&#xC18C; &#xBCF8;&#xB4DC; &#xBD84;&#xB9AC; &#xAC15;&#xC81C;&#xB85C; &#xC2DC;&#xC5F0;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD750;&#xB984; &#xC720;&#xB300; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; microspheres &#xB610;&#xB294; P selectin &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;-1 &#xC140;&#xC758; tethering &#xC99D;&#xAC15; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;: &#xD45C;&#xBA74;, &#xBE0C;&#xB77C;&#xC6B4; &#xC6B4;&#xB3D9;, &#xBD84;&#xC790; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC601;&#xC5ED; &#xC544;&#xB798;&#xCABD;&#xC758; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB529;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xBA85;&#xB8CC; L selectin &#xD1B5;&#xD574; tethering &#xD750;&#xB984; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;.

&#xC804;&#xC1A1; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD750;&#xB984; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC140;&#xC740; L selectin &#xD1B5;&#xD574; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xC804;&#xB2E8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC27;&#xC904;&#xB85C; &#xB9E4;&#xAE30;.

Flujo mejorada adhesi&#xF3;n celular es un fen&#xF3;meno contradictorio que se ha observado en varios sistemas biol&#xF3;gicos. Aumenta flujo de la L-selectina dependiente de la adhesi&#xF3;n mediante el aumento de la inmovilizaci&#xF3;n inicial de los leucocitos a las superficies vasculares y el fortalecimiento de las interacciones posteriores de laminaci&#xF3;n. La inmovilizaci&#xF3;n y el balanceo puede estar influenciada por factores f&#xED;sicos que afectan a la formaci&#xF3;n o la disociaci&#xF3;n de la selectina-ligando bonos. Recientemente hemos demostrado que el flujo mejorado de rodadura de la L-selectina de soporte de microesferas o neutr&#xF3;filos en la P-selectina ligando glicoprote&#xED;na-1 por disminuci&#xF3;n de la fuerza de disociaci&#xF3;n de enlace. En este sentido, muestran que el flujo aument&#xF3; la inmovilizaci&#xF3;n de estas microesferas o las c&#xE9;lulas de la glicoprote&#xED;na P-selectina ligando-1 por tres mecanismos de transporte que el aumento de la formaci&#xF3;n del enlace: el deslizamiento de la parte inferior en la superficie de la esfera, el movimiento browniano y la difusi&#xF3;n molecular. Estos resultados dilucidar los mecanismos para el flujo potenciado por la inmovilizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de la L-selectina.

Gobierna de transporte de flujo mejorado de la c&#xE9;lula Tethering A trav&#xE9;s de la L-selectina en el umbral de corte

&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x529B;&#x5B66;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x90E8;&#x961F;&#x5C55;&#x5F00;&#x86CB;&#x767D;&#x57DF;&#x6216;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;-&#x914D;&#x4F53;&#x503A;&#x5238;&#xFF0C;&#x662F;&#x672C;&#x8D28;&#x4E0A;&#x662F;&#x968F;&#x673A;&#x7684;&#x4ECE;&#x800C;&#x9700;&#x8981;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8FDB;&#x884C;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6309;&#x987A;&#x5E8F;&#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x901A;&#x5E38;&#x7528;&#x6765;&#x83B7;&#x53D6;&#x6570;&#x636E;&#x96C6;&#x6210;&#x3001; &#x5206;&#x5E03;&#x5F0F;&#x9690;&#x5F0F;&#x5730;&#x5047;&#x8BBE;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5E8F;&#x5217;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x548C;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C; &#xFF08;&#x5E8F;&#x5217;&#x77E9;) &#x968F;&#x673A;&#x53D8;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5373;&#xFF0C;&#x4F2F;&#x52AA;&#x5229;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x751F;&#x6210;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x968F;&#x673A;&#x7ED3;&#x679C;&#x5FAE;&#x5438;&#x7BA1;&#x7C98;&#x9644;&#x9891;&#x7387;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x8FD9;&#x9879;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF1A; &#x7C98;&#x9644;&#x548C;&#x65E0;&#x7C98;&#x8FDE;&#x3002;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7C98;&#x9644;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x8FDD;&#x53CD;&#x5E8F;&#x5217;&#x77E9;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x6839;&#x636E;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;-&#x914D;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x63AA;&#x65BD;&#x5305;&#x62EC;&#x9A6C;&#x6C0F;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E0E;&#x9633;&#x6027; (T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x590D;&#x6742;&#x4E3B;&#x8981;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x76F8;&#x5BB9;&#x6027;&#x6297;&#x539F;&#x80BD;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF09; &#x6216; &#xFF08;C &#x7C98;&#x9644;&#x540C;&#x578B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF09; &#x8D1F;&#x53CD;&#x9988;&#xFF0C;&#x51E1;&#x7C98;&#x9644;&#x5728;&#x4E0B;&#x4E00;&#x6B21;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E2D;&#x7684;&#x6982;&#x7387;&#x662F;&#x589E;&#x52A0;&#x6216;&#x5206;&#x522B;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x7C98;&#x8FDE;&#x7684;&#x7ACB;&#x5373;&#x8FC7;&#x53BB;&#x7684;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x89E3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012;&#x3002;&#x80FD;&#x591F;&quot;&#x8BB0;&#x4F4F;&quot;&#x524D;&#x9762;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x53EF;&#x80FD;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7C98;&#x8FDE;&#x548C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x53D7;&#x4F53;&#x914D;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x4E2D;&#x7684;&#x5185;&#x5B58;&#x3002;

Single-molecule biomechanical measurements, such as the force to unfold a protein domain or the lifetime of a receptor-ligand bond, are inherently stochastic, thereby requiring a large number of data for statistical analysis. Sequentially repeated tests are generally used to obtain a data ensemble, implicitly assuming that the test sequence consists of independent and identically distributed (i.i.d.) random variables, i.e., a Bernoulli sequence. We tested this assumption by using data from the micropipette adhesion frequency assay that generates sequences of two random outcomes: adhesion and no adhesion. Analysis of distributions of consecutive adhesion events revealed violation of the i.i.d. assumption, depending on the receptor-ligand systems studied. These include Markov sequences with positive (T cell receptor interacting with antigen peptide bound to a major histocompatibility complex) or negative (homotypic interaction between C-cadherins) feedbacks, where adhesion probability in the next test was increased or decreased, respectively, by adhesion in the immediate past test. These molecular interactions mediate cell adhesion and cell signaling. The ability to "remember" the previous adhesion event may represent a mechanism by which the cell regulates adhesion and signaling.

Memory in receptor-ligand-mediated cell adhesion.

Une seule mol&#xE9;cule mesures biom&#xE9;caniques, tels que la force de d&#xE9;plier un domaine prot&#xE9;ique ou la dur&#xE9;e de vie d&#x26;#39;une liaison r&#xE9;cepteur-ligand, sont intrins&#xE8;quement stochastique, ce qui n&#xE9;cessite un grand nombre de donn&#xE9;es pour une analyse statistique. Tests de fa&#xE7;on s&#xE9;quentielle r&#xE9;p&#xE9;t&#xE9;es sont g&#xE9;n&#xE9;ralement utilis&#xE9;es pour obtenir un ensemble de donn&#xE9;es, en supposant implicitement que la s&#xE9;quence de test se compose d&#x26;#39;une profession ind&#xE9;pendante et identiquement distribu&#xE9;es (iid) des variables al&#xE9;atoires, c&#x26;#39;est &#xE0; dire, une s&#xE9;quence de Bernoulli. Nous avons test&#xE9; cette hypoth&#xE8;se en utilisant les donn&#xE9;es de l&#x26;#39;essai d&#x26;#39;adh&#xE9;rence micropipette fr&#xE9;quence qui g&#xE9;n&#xE8;re des s&#xE9;quences de deux r&#xE9;sultats al&#xE9;atoires: adh&#xE9;sion et aucune adh&#xE9;rence. L&#x26;#39;analyse des distributions des &#xE9;v&#xE9;nements d&#x26;#39;adh&#xE9;rence cons&#xE9;cutives r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; violation de l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se iid, selon les syst&#xE8;mes r&#xE9;cepteur-ligand &#xE9;tudi&#xE9;s. Il s&#x26;#39;agit notamment des s&#xE9;quences de Markov avec positif (r&#xE9;cepteur des cellules T interagissant avec le peptide antig&#xE8;ne li&#xE9; &#xE0; un complexe majeur d&#x26;#39;histocompatibilit&#xE9;) ou n&#xE9;gative (l&#x26;#39;interaction homotypique entre C-cadh&#xE9;rines) r&#xE9;troactions, o&#xF9; la probabilit&#xE9; d&#x26;#39;adh&#xE9;rence dans le prochain test a &#xE9;t&#xE9; augment&#xE9; ou diminu&#xE9;, respectivement, par l&#x26;#39;adh&#xE9;sion &#xE0; le test sortant. Ces interactions mol&#xE9;culaires m&#xE9;diation adh&#xE9;sion cellulaire et la signalisation cellulaire. La capacit&#xE9; de &#xAB;se souvenir&#xBB;, l&#x26;#39;&#xE9;v&#xE9;nement d&#x26;#39;adh&#xE9;sion pr&#xE9;c&#xE9;dente peut repr&#xE9;senter un m&#xE9;canisme par lequel la cellule r&#xE9;gule l&#x26;#39;adh&#xE9;rence et de signalisation.

M&#xE9;moire dans l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire r&#xE9;cepteur-ligand &#xE0; m&#xE9;diation

Einzelmolek&uuml;l-biomechanische Messungen, wie die Kraft einer Proteindom&auml;ne oder die Lebensdauer einer Rezeptor-Ligand-Anleihe zu entfalten sind inh&auml;rent stochastische, damit eine gro&szlig;e Anzahl von Daten f&uuml;r statistische Analysen erfordern. Sequenziell wiederholte Tests sind im Allgemeinen verwendet, um eine Daten-Ensemble zu erhalten, implizit davon aus, dass die Pr&uuml;ffolge besteht aus unabh&auml;ngigen und identisch verteilten Zufallsvariablen (i.i.d.), d. h. eine Bernoulli-Sequenz. Wir testeten diese Annahme mit Daten aus der Mikropipette Adh&auml;sion-Frequenz-Assay, die Sequenzen von zwei zuf&auml;llige Ergebnisse generiert: Haftung und keine Haftung. Analyse der Verteilungen von aufeinander folgenden Adh&auml;sion Veranstaltungen ergab Versto&szlig; gegen die Annahme des i.i.d. anhand der Rezeptor-Ligand-Systeme studiert. Dazu geh&ouml;ren Markov-Sequenzen mit positiven (T-Zell-Rezeptor Interaktion mit Antigen-Peptid gebunden zu einem Haupthistokompatibilit&auml;tskomplex) oder negativen (homotypischen Interaktion zwischen C-Cadherine) Feedbacks, wo Adh&auml;sion Wahrscheinlichkeit in den n&auml;chsten Test erh&ouml;ht oder verringert, beziehungsweise durch Adh&auml;sion in der unmittelbaren Vergangenheit Test war. Diese molekularen Interaktionen vermitteln Zelladh&auml;sion und Zelle signalisieren. Die F&auml;higkeit zu &quot;erinnern&quot;, der Vorveranstaltung Adh&auml;sion m&ouml;glicherweise einen Mechanismus dar, mit dem die Zelle Adh&auml;sion und Signaltechnik regelt.

Speicher im Rezeptor-Ligand-vermittelter Zelladh&auml;sion.

Misurazioni biomeccaniche singola molecola, come la forza di spiegare un dominio della proteina o la durata di un legame recettore-ligando, sono intrinsecamente stocastiche, che quindi richiedono un gran numero di dati per l&#39;analisi statistica. Prove ripetute in sequenza sono generalmente utilizzati per ottenere un insieme di dati, assumendo implicitamente che la sequenza di prova &egrave; costituito da indipendenti e identicamente distribuite (i.i.d.) variabili casuali, cio&egrave; una sequenza di Bernoulli. Abbiamo testato questa ipotesi utilizzando i dati di analisi di frequenza l&#39;aderenza della micropipetta che genera sequenze di due risultati casuali: adesione e non adesione. Analisi delle distribuzioni di eventi consecutivi adesione rivelato violazione dell&#39;assunzione i.i.d., a seconda del recettore-ligando sistemi studiato. Questi includono sequenze di Markov con positivo (T cell receptor interagisce con l&#39;antigene peptide associato a un complesso di istocompatibilit&agrave;) o risposte negative (homotypic interazione tra C-caderine), la cui probabilit&agrave; di adesione nel prossimo test era aumentato o diminuito, rispettivamente, di adesione nell&#39;immediato past test. Queste interazioni molecolari mediano l&#39;adesione cellulare e segnalazione delle cellule. La capacit&agrave; di &quot;ricordare&quot; l&#39;evento precedente adesione pu&ograve; rappresentare un meccanismo mediante il quale la cellula regola adesione e segnalazione.

Memoria nell&#39;adesione cellulare mediata da recettore-ligando.

&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; - &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x5C55;&#x958B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x529B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x5B66;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D71;&#x8A08;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x78BA;&#x7387;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9023;&#x7D9A;&#x3057;&#x3066;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x6697;&#x9ED9;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x306B;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x540C;&#x4E00;&#x5206;&#x5E03;&#xFF08;iid&#xFF09;&#x306E;&#x78BA;&#x7387;&#x5909;&#x6570;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x30D9;&#x30EB;&#x30CC;&#x30FC;&#x30A4;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x63A5;&#x7740;&#x3068;&#x63A5;&#x7740;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#xFF1A;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2&#x3064;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x63A5;&#x7740;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9023;&#x7D9A;&#x3057;&#x305F;&#x63A5;&#x7740;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x7814;&#x7A76;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; - &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x3001;IID&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x306E;&#x9055;&#x53CD;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#xFF08;&#x4E3B;&#x8981;&#x7D44;&#x7E54;&#x9069;&#x5408;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x6297;&#x539F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8CA0;&#x306E;&#x5024;&#x30DE;&#x30EB;&#x30B3;&#x30D5;&#x7CFB;&#x5217;&#xFF08;C-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x540C;&#x578B;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF09;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;&#x8A66;&#x9A13;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x63A5;&#x7740;&#x78BA;&#x7387;&#x3067;&#x63A5;&#x7740;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x5373;&#x6642;&#x306E;&#x904E;&#x53BB;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092; &#x26;quot;&#x8A18;&#x61B6;&#x26;quot;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x63A5;&#x7740;&#x3068;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;

&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB610;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ligand &#xBCF8;&#xB4DC;&#xC758; &#xD3C9;&#xC0DD;&#xC744; &#xD3BC;&#xCCD0; &#xD798; &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; biomechanical &#xCE21;&#xC815;&#xC740; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xB960;&#xC801; &#xD1B5;&#xACC4; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368;. &#xC21C;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC18;&#xBCF5;&#xB41C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC559;&#xC0C1;&#xBE14;&#xC744; &#xC5BB;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9;, (i.i.d.) &#xB79C;&#xB364; &#xBCC0;&#xC218;, &#xC989;, &#xBCA0;&#xB974;&#xB204;&#xC774; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC30;&#xD3EC; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4; &#xC554;&#xC2DC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC00;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; micropipette &#xC811;&#xCC29; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAC00;&#xC815; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;: &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; &#xC811;&#xCC29; &#xB825; &#xC5C6;&#xC74C;. &#xC5F0;&#xC18D; &#xC811;&#xCC29; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBD84;&#xBC30;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; i.i.d. &#xAC00;&#xC815; &#xACF5;&#xBD80; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ligand &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC704;&#xBC18;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; (&#xC8FC;&#xC694; &#xC870;&#xC9C1; &#xC801;&#xD569;&#xC131; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;) &#xB610;&#xB294; &#xC74C;&#xC218; (C cadherins &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; homotypic) &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31;, &#xB2E4;&#xC74C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC811;&#xCC29; &#xD655;&#xB960;&#xC744; &#xB298;&#xB9AC;&#xAC70;&#xB098; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xC9C1;&#xC804;&#xC5D0; &#xC811;&#xCC29; &#xD558; &#xC5EC;, &#xAC01;&#xAC01; &#xAC10;&#xC18C; &#xC5B4;&#xB514; &#xB9C8;&#xB974;&#xCF54;&#xD504; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xC911;&#xC7AC;. &quot;&quot; &#xC774;&#xC804; &#xC811;&#xCC29; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAE30;&#xC5B5; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825; &#xC788;&#xB294; &#xC140; &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xC870;&#xC808; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ligand &#xC911;&#xC7AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29;&#xC5D0; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC;.

Mol&#xE9;cula de un solo mediciones biomec&#xE1;nicas, tales como la fuerza para desplegar un dominio de la prote&#xED;na o el tiempo de vida de un enlace receptor-ligando, son inherentemente estoc&#xE1;stica, requiriendo as&#xED; un gran n&#xFA;mero de datos para el an&#xE1;lisis estad&#xED;stico. Secuencialmente pruebas repetidas se utilizan generalmente para obtener un conjunto de datos, suponiendo impl&#xED;citamente que la secuencia de prueba se compone de independientes e id&#xE9;nticamente distribuidas (iid) variables aleatorias, es decir, una secuencia de Bernoulli. Pusimos a prueba esta hip&#xF3;tesis mediante el uso de los datos de la frecuencia de ensayo de adherencia micropipeta que genera secuencias de dos resultados aleatorios de adherencia y adherencia no. An&#xE1;lisis de las distribuciones de los eventos de adhesi&#xF3;n consecutivos revel&#xF3; violaci&#xF3;n de la hip&#xF3;tesis IID, dependiendo de los sistemas de receptor-ligando estudiados. Estas incluyen las secuencias de Markov con positivo (receptor de c&#xE9;lulas T interactuando con el p&#xE9;ptido ant&#xED;geno unido a un complejo principal de histocompatibilidad) o negativo (interacci&#xF3;n homotipica entre C-cadherinas) retrocontactos, donde la probabilidad de adhesi&#xF3;n en la siguiente prueba fue aumentado o disminuido, respectivamente, por adhesi&#xF3;n en la prueba pasado inmediato. Estas interacciones moleculares median la adhesi&#xF3;n celular y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular. La capacidad de &#x26;quot;recordar&#x26;quot; el caso de la adhesi&#xF3;n anterior puede representar un mecanismo por el cual la c&#xE9;lula regula la adhesi&#xF3;n y se&#xF1;alizaci&#xF3;n.

Memoria en la adhesi&#xF3;n celular del receptor-ligando mediada

&#xD2B9;&#xC815; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ligand &#xCC44;&#xAD8C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xC911;&#xC7AC;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD750;&#xB984;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00; dislodging &#xC720;&#xCCB4; &#xC804;&#xB2E8; &#xC138;&#xB825;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xB825; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xCE21;&#xBA74;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC140; &#xD750;&#xB984; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC811;&#xCC29; &#xB825;: &#xD750;&#xB984; &#xACE0;&#xC815; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD750;&#xB974;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; tethering &#xC99D;&#xB300;, &#xC18D;&#xB3C4;&#xAC00; &#xB290;&#xB824; &#xACE0; &#xC140;, &#xC555; &#xC5F0;&#xC758; &#xADDC;&#xCE59; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; rollingly &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD604;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC720;&#xB300; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC804;&#xC1A1; &#xC885;&#xC18D; &#xAC00;&#xC18D;&#xACFC; &#xBCF8;&#xB4DC; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC758; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC18D;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;: &#xD45C;&#xBA74;, &#xC140;, &#xBE0C;&#xB77C;&#xC6B4; &#xBAA8;&#xC158; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD68C;&#xC804; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC140; &#xC544;&#xB798;&#xCABD;&#xC758; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB529;. &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xCE90;&#xCE58; &#xCC44;&#xAD8C; &#xC5B4;&#xB514; &#xD798;&#xC744; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ligand &#xCC44;&#xAD8C; &#xC218;&#xBA85; &#xB2E8;&#xCD95; &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC2DC;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC5B4; &#xAE0B; &#xB3D9;&#xC791;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCC28;&#xC6D0; &#xBD84;&#xC11D;&#xACFC; mutational &#xBD84;&#xC11D; &#xD750;&#xB984; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC811;&#xCC29; &#xC911;&#xC7AC; L selectin ligand &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC704;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xAC8C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xC694;&#xC57D;.

&#xD750;&#xB984; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x662F;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x914D;&#x4F53;&#x503A;&#x5238;&#x3002;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x6D41;&#x91CF;&#x6709;&#x6240;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x6D88;&#x706D;&#x6D41;&#x4F53;&#x526A;&#x529B;&#x3002;&#x6D41;&#x589E;&#x5F3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5305;&#x62EC;&#x51E0;&#x4E2A;&#x65B9;&#x9762;&#xFF1A; &#x6D41;&#x8865;&#x5145;&#x4E86;&#x521D;&#x59CB;&#x6043;&#x6D41;&#x52A8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5411;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x3001; &#x51CF;&#x6162;&#x901F;&#x5EA6;&#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x89C4;&#x5F8B;&#x7684;&#x8F67;&#x5236;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x52A0; rollingly &#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6709;&#x8DA3;&#x73B0;&#x8C61;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x80FD;&#x5305;&#x62EC;&#x503A;&#x5238;&#x5F62;&#x6210;&#x4F9D;&#x8D56;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x52A0;&#x901F;&#x548C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6B66;&#x529B;&#x7684;&#x51CF;&#x901F;&#x7684;&#x503A;&#x5238;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x524D;&#x8005;&#x5305;&#x62EC;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4EA4;&#x901A;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF1A; &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5E95;&#x90E8;&#x7684;&#x6ED1;&#x52A8;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x770B;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5E03;&#x6717;&#x8FD0;&#x52A8;&#x548C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x8F6C;&#x52A8;&#x6269;&#x6563;&#x3002;&#x540E;&#x8005;&#x6D89;&#x53CA;&#x8C03;&#x7528; catch &#x503A;&#x5238;&#x5730;&#x65B9;&#x90E8;&#x961F;&#x5EF6;&#x957F;&#x800C;&#x7F29;&#x77ED;&#x4E86;&#x53D7;&#x4F53;-&#x914D;&#x4F53;&#x503A;&#x5238;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x6700;&#x8FD1;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x8FDD;&#x53CD;&#x76F4;&#x89C9;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x603B;&#x7ED3;&#x4E00;&#x4E0B;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x5E03;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E09;&#x7EF4;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x6765;&#x9610;&#x660E;&#x6D41;&#x589E;&#x5F3A;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x4ECB;&#x5BFC; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x914D;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4E0A;&#x8FF0;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x6D41;&#x589E;&#x5F3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Cell adhesion is mediated by specific receptor-ligand bonds. In several biological systems, increasing flow has been observed to enhance cell adhesion despite the increasing dislodging fluid shear forces. Flow-enhanced cell adhesion includes several aspects: flow augments the initial tethering of flowing cells to a stationary surface, slows the velocity and increases the regularity of rolling cells, and increases the number of rollingly adherent cells. Mechanisms for this intriguing phenomenon may include transport-dependent acceleration of bond formation and force-dependent deceleration of bond dissociation. The former includes three distinct transport modes: sliding of cell bottom on the surface, Brownian motion of the cell, and rotational diffusion of the interacting molecules. The latter involves a recently demonstrated counterintuitive behavior called catch bonds where force prolongs rather than shortens the lifetimes of receptor-ligand bonds. In this article, we summarize our recently published data that used dimensional analysis and mutational analysis to elucidate the above mechanisms for flow-enhanced leukocyte adhesion mediated by L-selectin-ligand interactions.

Mechanisms for flow-enhanced cell adhesion.

L&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire est m&#xE9;di&#xE9;e par sp&#xE9;cifiques r&#xE9;cepteur-ligand obligations. Dans plusieurs syst&#xE8;mes biologiques, les flux de plus en plus a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e pour am&#xE9;liorer l&#x26;#39;adh&#xE9;rence cellulaire, malgr&#xE9; les forces de cisaillement croissantes d&#xE9;loger des fluides. D&#xE9;bit am&#xE9;lior&#xE9; par l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire comprend plusieurs aspects: contribue, attacher les flux initial de cellules s&#x26;#39;&#xE9;coulant sur une surface fixe, ralentit la vitesse et augmente la r&#xE9;gularit&#xE9; de cellules de roulement, et augmente le nombre de cellules adh&#xE9;rentes en roulement. Les m&#xE9;canismes de ce ph&#xE9;nom&#xE8;ne intriguant peut inclure le transport d&#xE9;pendant de l&#x26;#39;acc&#xE9;l&#xE9;ration de la formation de la liaison et la force d&#xE9;pendant de la d&#xE9;c&#xE9;l&#xE9;ration de la dissociation de la liaison. Le premier comprend trois modes de transport distincts: glissement de fond de la cellule sur la surface, le mouvement brownien de la cellule, et la diffusion de rotation des mol&#xE9;cules qui interagissent. Celle-ci implique un comportement contre-intuitif appel&#xE9; r&#xE9;cemment d&#xE9;montr&#xE9; rattraper obligations en cas de force prolonge plut&#xF4;t que raccourcit les dur&#xE9;es de vie de r&#xE9;cepteur-ligand obligations. Dans cet article, nous r&#xE9;sumons nos donn&#xE9;es r&#xE9;cemment publi&#xE9;es qui ont utilis&#xE9; l&#x26;#39;analyse dimensionnelle et analyse mutationnelle d&#x26;#39;&#xE9;lucider les m&#xE9;canismes ci-dessus pour flux renforc&#xE9; l&#x26;#39;adh&#xE9;sion des leucocytes m&#xE9;di&#xE9;e par la L-s&#xE9;lectine-ligand interactions.

Les m&#xE9;canismes de flux renforc&#xE9; Cell Adhesion

Zelladh&auml;sion ist durch bestimmte Rezeptor-Ligand-Bindungen vermittelt. In verschiedenen biologischen Systemen hat Wasserdurchfluss beobachtet worden, um die Zelladh&auml;sion trotz der zunehmenden Vertreibung fl&uuml;ssig Scherkr&auml;fte zu verbessern. Fluss-verbesserte Zelladh&auml;sion umfasst mehrere Aspekte: Str&ouml;mung erweitert die anf&auml;ngliche Anbindehaltung von flie&szlig;enden Zellen zu einer station&auml;ren Oberfl&auml;che, verlangsamt die Geschwindigkeit erh&ouml;ht die Regelm&auml;&szlig;igkeit des rollenden Zellen und erh&ouml;ht die Anzahl der rollierend adh&auml;rente Zellen. Mechanismen f&uuml;r dieses faszinierende Ph&auml;nomen k&ouml;nnen Transport-abh&auml;ngige Bond-Formation und Kraft-abh&auml;ngige-Auslauf des Bond-Dissoziation enthalten. Erstere enth&auml;lt drei unterschiedliche Verkehrstr&auml;ger: Gleiten der Zelle unten auf der Oberfl&auml;che, Brownsche Bewegung der Zelle und rotatorischen Diffusion der interagierende Molek&uuml;le. Dieser umfasst ein vor kurzem demonstriert eing&auml;ngig Verhalten genannt Fang Anleihen, wo Kraft verl&auml;ngert anstatt verk&uuml;rzt die Lebensdauer der Rezeptor-Ligand-Bindungen. In diesem Artikel fassen wir unsere k&uuml;rzlich ver&ouml;ffentlichten Daten, die Dimensionsanalyse und teilhabende Analyse verwendet, um die oben genannten Mechanismen f&uuml;r die Str&ouml;mung erh&ouml;hter Leukozyten Adh&auml;sion vermittelt durch L-selectin-Ligand-Interaktionen zu erhellen.

Mechanismen zur Fluss-verbesserte Zelladh&auml;sion.

Adesione cellulare &egrave; mediata dal recettore-ligando specifico obbligazioni. Nei sistemi biologici diversi, aumentando il flusso &egrave; stato osservato per aumentare l&#39;adesione delle cellule nonostante le forze di taglio fluido dislodging crescente. Adesione delle cellule di flusso-enhanced comprende diversi aspetti: flusso aumenta il tethering iniziale delle cellule che scorre su una superficie fissa, rallenta la velocit&agrave; e aumenta la regolarit&agrave; di rotolamento le cellule e aumenta il numero di celle rollingly aderenti. Meccanismi per questo fenomeno intrigante possono includere trasporto-dipendente accelerazione della formazione di legami e dipendente dalla forza di decelerazione di dissociazione di legame. L&#39;ex include tre modi distinti: scorrevole di fondo di cellule sulla superficie, il moto browniano della cella e diffusione rotazionale delle molecole interagenti. Quest&#39;ultimo comporta un comportamento recentemente dimostrato controintuitivo chiamato catch obbligazioni dove forza prolunga piuttosto che accorcia la durata delle obbligazioni del recettore-ligando. In questo articolo riassumiamo i nostri dati recentemente pubblicati che utilizzate analisi dimensionale e analisi mutazionale per delucidare i meccanismi sopra per adesione leucocitaria migliorato flusso mediata da interazioni di L-selectina-ligando.

Meccanismi di adesione delle cellule di flusso-enhanced.

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La adhesi&#xF3;n celular es mediada por receptor-ligando espec&#xED;ficas enlaces. En varios sistemas biol&#xF3;gicos, incrementando el flujo ha sido observado para mejorar la adhesi&#xF3;n celular a pesar de las fuerzas de dislocaci&#xF3;n crecientes de cizallamiento de fluidos. Flujo mejorada adhesi&#xF3;n celular incluye varios aspectos: aumenta el flujo de inmovilizaci&#xF3;n inicial de las c&#xE9;lulas que fluyen a una superficie estacionaria, ralentiza la velocidad y aumenta la regularidad de las c&#xE9;lulas de rodadura, y aumenta el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas adherentes rodadura. Los mecanismos de este intrigante fen&#xF3;meno puede incluir el transporte dependiente de la aceleraci&#xF3;n de la formaci&#xF3;n de enlaces y de la fuerza dependiente de la desaceleraci&#xF3;n de la disociaci&#xF3;n de enlace. El primero incluye tres modos de transporte distintos: correderas de fondo de la celda en la superficie, el movimiento browniano de la c&#xE9;lula, y la difusi&#xF3;n de rotaci&#xF3;n de las mol&#xE9;culas que interaccionan. Esto &#xFA;ltimo implica un comportamiento contrario a la intuici&#xF3;n ha demostrado recientemente llam&#xF3; alcanzar a Bonds en caso de fuerza prolonga m&#xE1;s que acorta los tiempos de vida de los bonos ligando-receptor. En este art&#xED;culo se resumen los datos recientemente publicados que utilizaron el an&#xE1;lisis dimensional y an&#xE1;lisis mutacional de dilucidar los mecanismos antes mencionados para el flujo potenciado por la adhesi&#xF3;n de leucocitos mediada por las interacciones ligando-L-selectina.

Los mecanismos para el flujo de adhesi&#xF3;n celular mejorada

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The immunological synapse is a stable intercellular structure that specializes in substance and signal transfer from one immune cell to another. Its formation is regulated in part by the diffusion of adhesion and signaling molecules into, and their binding of countermolecules in the contact area. The stability of immunological synapses allows receptor-ligand interactions to approximate chemical equilibrium despite other dynamic aspects. We have developed a mathematical model that describes the coupled reaction-diffusion process in an established immunological synapse. In this study, we extend a previously described contact area fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) experiment to test the validity of the model. The receptor binding activity and lateral mobility of fluorescently labeled, lipid-anchored ligands in the bilayer resulted in their accumulation, as revealed by a much higher fluorescence intensity inside the contact area than outside. After complete photobleaching of the synapse, fluorescence recovery requires ligands to dissociate and rebind, and to diffuse in and out of the contact area. Such a FRAP time course consequently provides information on reaction and diffusion, which can be extracted by fitting the model solution to the data. Surprisingly, reverse rates in the two-dimensional contact area were at least 100-fold slower than in three-dimensional solution. As previously reported in immunological synapses, a significant nonrecoverable fraction of fluorescence was observed with one of two systems studied, suggesting some ligands either dissociated or diffused much more slowly compared with other ligands in the same synapse. The combined theory and experiment thus provides a new method for in situ measurements of kinetic rates, diffusion coefficients, and nonrecoverable fractions of interacting molecules in immunological synapses and other stable cell-bilayer junctions.

Measuring diffusion and binding kinetics by contact area FRAP.

La synapse immunologique est une structure stable intercellulaire qui est sp&#xE9;cialis&#xE9; dans la substance de transfert de signal et d&#x26;#39;une cellule immunitaire &#xE0; l&#x26;#39;autre. Sa formation est r&#xE9;gul&#xE9;e en partie par la diffusion de l&#x26;#39;adh&#xE9;rence et des mol&#xE9;cules de signalisation dans, et leur liaison de countermolecules dans la zone de contact. La stabilit&#xE9; de synapses immunologiques permet interactions r&#xE9;cepteur-ligand &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;quilibre chimique approch&#xE9;e malgr&#xE9; autres aspects dynamiques. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un mod&#xE8;le math&#xE9;matique qui d&#xE9;crit le syst&#xE8;me coupl&#xE9; de r&#xE9;action-diffusion dans un processus de synapse immunologique &#xE9;tablie. Dans cette &#xE9;tude, nous &#xE9;tendons une reprise de contact d&#xE9;crit pr&#xE9;c&#xE9;demment zone de fluorescence apr&#xE8;s photoblanchiment (FRAP) exp&#xE9;rience pour tester la validit&#xE9; du mod&#xE8;le. L&#x26;#39;activit&#xE9; de liaison au r&#xE9;cepteur et de la mobilit&#xE9; lat&#xE9;rale de marqu&#xE9; par fluorescence, des lipides ancr&#xE9;es ligands dans la bicouche abouti &#xE0; leur accumulation, comme l&#x26;#39;a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; par une intensit&#xE9; beaucoup plus &#xE9;lev&#xE9;e de fluorescence dans la zone de contact qu&#x26;#39;&#xE0; l&#x26;#39;ext&#xE9;rieur. Apr&#xE8;s photoblanchiment compl&#xE8;te de la synapse, recouvrement de fluorescence n&#xE9;cessite ligands pour dissocier et relier, et &#xE0; diffuser dans et hors de la zone de contact. Une telle &#xE9;volution dans le temps FRAP fournit donc des informations sur la r&#xE9;action et la diffusion, qui peut &#xEA;tre extrait en ajustant le mod&#xE8;le de solution pour les donn&#xE9;es. &#xC9;tonnamment, les taux inverse dans la zone de contact &#xE0; deux dimensions &#xE9;taient au moins 100 fois plus lente que dans les trois dimensions solution. Comme indiqu&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment dans les synapses immunologiques, une fraction significative de la fluorescence non r&#xE9;cup&#xE9;rable a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e avec l&#x26;#39;un des deux syst&#xE8;mes &#xE9;tudi&#xE9;s, sugg&#xE9;rant certains ligands soit dissoci&#xE9;es ou diffuse beaucoup plus lentement par rapport &#xE0; d&#x26;#39;autres ligands dans la synapse m&#xEA;me. La th&#xE9;orie et l&#x26;#39;exp&#xE9;rience combin&#xE9;e fournit ainsi une nouvelle m&#xE9;thode pour la mesure in situ des taux cin&#xE9;tiques, les coefficients de diffusion, et les fractions non r&#xE9;cup&#xE9;rables de mol&#xE9;cules interagissant entre elles au niveau des synapses immunologiques et autres stables de cellules bicouches jonctions.

Mesure cin&#xE9;tique de diffusion et de liaison par FRAP Surface de contact

Der immunologische Synapse ist eine stabile interzellul&auml;re Struktur, die im wesentlichen spezialisiert und Transfer von einer immun Zelle in einen anderen zu signalisieren. Seine Entstehung ist teilweise durch die Verbreitung der Adh&auml;sion und signalisieren der Molek&uuml;le in und ihre Bindung des Countermolecules in der Kontaktfl&auml;che geregelt. Die Stabilit&auml;t der immunologische Synapsen kann Rezeptor-Ligand-Interaktionen zur Angleichung von chemischen Gleichgewichts trotz andere dynamische Aspekte. Wir haben ein mathematisches Modell entwickelt, das den gekoppelten Reaktion-Diffusion-Prozess in einem etablierten immunologische Synapse beschreibt. In dieser Studie haben wir eine zuvor beschriebenen Kontaktfl&auml;che Fluoreszenz Erholung nach Photobleaching (FRAP) Experiment um die G&uuml;ltigkeit des Modells testen erweitern. Der Rezeptor-Aktivit&auml;t und die seitliche Beweglichkeit der Leuchtstoff beschriftet, Lipid-verankert Liganden in der Bilayer f&uuml;hrte zu einer Anh&auml;ufung, wie durch eine viel h&ouml;here Fluoreszenz-Intensit&auml;t in der Kontaktfl&auml;che als au&szlig;erhalb aufgedeckt. Nach der vollst&auml;ndigen Photobleichung von der Synapse erfordert Fluoreszenz Wiederherstellung Liganden zu distanzieren und binden und ein-und die Kontaktfl&auml;che zu verbreiten. Solch ein FRAP-Zeit-Kurs informiert daher &uuml;ber Reaktion und Diffusion, die durch den Einbau der Modell-L&ouml;sung f&uuml;r die Daten extrahiert werden k&ouml;nnen. &Uuml;berrascht waren die umgekehrte Preise in die zweidimensionale Fl&auml;che mindestens 100-fold langsamer als in dreidimensionale L&ouml;sung. Wie bereits berichtet in immunologische Synapsen wurde ein betr&auml;chtlicher Anteil der nicht korrigierbare Fluoreszenz beobachtet, mit einem der beiden Systeme studiert, einige Liganden entweder getrennt oder verbreitet viel langsamer im Vergleich zu anderen Liganden in der gleichen Synapse. Die kombinierte Theorie und Experiment so bietet eine neue Methode zur in-situ Messungen der kinetischen Preise, Diffusionskoeffizienten und nicht korrigierbare Br&uuml;che interagierende Molek&uuml;le in immunologische Synapsen und andere stabile Zelle-Bilayer-Kreuzungen.

Messung der Diffusion und verbindliche Kinetik von Kontaktfl&auml;che FRAP.

La sinapsi immunologica &egrave; una stabile struttura intercellulare che si specializza nella sostanza e trasferimento del segnale da una cellula immunitaria ad un altro. La sua formazione &egrave; regolata in parte la diffusione di adesione e la segnalazione di molecole in e loro associazione di countermolecules nell&#39;area di contatto. La stabilit&agrave; della sinapsi immunologiche permette interazioni del ricevitore-ligand approssimare l&#39;equilibrio chimico nonostante altri aspetti dinamici. Abbiamo sviluppato un modello matematico che descrive il processo di reazione-diffusione accoppiato in un stabilito sinapsi immunologica. In questo studio, abbiamo estendere un recupero della fluorescenza descritti in precedenza l&#39;area di contatto dopo photobleaching (FRAP) esperimento per testare la validit&agrave; del modello. L&#39;attivit&agrave; di legame con recettore e mobilit&agrave; laterale di fluorescente etichettato, ancorate a lipidi ligandi nel doppio strato ha portato nel loro accumulo, come rivelato da un molto pi&ugrave; alta intensit&agrave; di fluorescenza dentro l&#39;area di contatto rispetto all&#39;esterno. Dopo completa photobleaching della sinapsi, recupero di fluorescenza richiede ligandi a dissociare e riassociare e diffondere dentro e fuori l&#39;area di contatto. Un tal corso di tempo FRAP conseguenza fornisce informazioni sulla reazione e diffusione, che pu&ograve; essere estratta dal raccordo la soluzione del modello ai dati. Sorprendentemente, i tassi inverso nell&#39;area di contatto bidimensionale erano almeno 100 volte pi&ugrave; lenti nella soluzione tridimensionale. Come precedentemente riportati nella sinapsi immunologiche, &egrave; stata osservata una significativa frazione irreversibile di fluorescenza con uno dei due sistemi studiati, suggerendo alcuni ligandi o dissociano o diffusa molto pi&ugrave; lentamente rispetto ad altri leganti nella stessa sinapsi. Il combinato teoria ed esperimento cos&igrave; fornisce un nuovo metodo per misure in situ di tariffe cinetici, coefficienti di diffusione e le frazioni non recuperabili delle molecole interagenti in sinapsi immunologiche e altre giunzioni cellula-doppio strato stabile.

Misurare la diffusione e associazione cinetica dall&#39;area di contatto FRAP.

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- &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3067;&#x7D50;&#x5408;&#x53CD;&#x5FDC;&#x62E1;&#x6563;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x6570;&#x5B66;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x59A5;&#x5F53;&#x6027;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#xFF08;FRAP&#xFF09;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x9000;&#x8272;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x524D;&#x8FF0;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x7A4D;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A2A;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x5916;&#x5074;&#x3088;&#x308A;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x7A4D;&#x5185;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x86CD;&#x5149;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x578B;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x9000;&#x8272;&#x5F8C;&#x86CD;&#x5149;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x304C;&#x89E3;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x7A4D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x3067;&#x3001;&#x62E1;&#x6563;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;FRAP&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7D4C;&#x904E;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x62BD;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3068;&#x62E1;&#x6563;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x4E8C;&#x6B21;&#x5143;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x7A4D;&#x306E;&#x9006;&#x7387;&#x306F;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x306E;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;100&#x500D;&#x9045;&#x304F;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x56DE;&#x5FA9;&#x4E0D;&#x80FD;&#x306A;&#x5272;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5185;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x3086;&#x3063;&#x304F;&#x308A;&#x3068;&#x89E3;&#x96E2;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x62E1;&#x6563;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x7814;&#x7A76;2&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x7406;&#x8AD6;&#x3068;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x904B;&#x52D5;&#x7387;&#x3001;&#x62E1;&#x6563;&#x4FC2;&#x6570;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3084;&#x4ED6;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30BB;&#x30EB;&#x4E8C;&#x91CD;&#x63A5;&#x5408;&#x3067;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x4E0D;&#x80FD;&#x306A;&#x5206;&#x753B;&#x306E;in situ&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x7A4D;FRAP&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x62E1;&#x6563;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;

&#xBA74;&#xC5ED;&#xD559; &#xB0C5;&#xC740; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xC804;&#xBB38; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xC870; &#xBC0F; &#xC804;&#xC1A1; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638;. &#xD615;&#xC131;&#xC740; &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0;, &#xBCF4;&#xAE09; &#xBC0F; &#xC811;&#xCD09; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; countermolecules&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED;&#xD559; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xB2E4;&#xB978; &#xB3D9;&#xC801; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xD654;&#xD559; &#xD3C9;&#xD615;&#xC5D0; &#xADFC;&#xC811; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ligand &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC124;&#xB9BD;&#xB41C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB0C5;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xBC18;&#xC751; &#xD655;&#xC0B0; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xD559;&#xC801; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; photobleaching (FRAP) &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD6C4; &#xC55E;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85;&#xD55C; &#xC811;&#xCD09; &#xC601;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD655;&#xC7A5;. &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC;&#xC758; &#xC218;&#xD3C9;&#xC801; &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xBD84;&#xB958;, &#xC678;&#xBD80; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC811;&#xCD09; &#xC601;&#xC5ED; &#xC548;&#xC5D0; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB192;&#xC740; &#xD615;&#xAD11; &#xAC15;&#xB3C4; &#xBC1D;&#xD600; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xACE0;&#xC815; ligands&#xB294; bilayer&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;. &#xB0C5;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; photobleaching &#xD6C4; &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xAD6C; ligands&#xB97C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0;, &#xD558; &#xACE0; &#xD574;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; FRAP &#xC2DC;&#xAC04; &#xCF54;&#xC2A4; &#xBC18;&#xC751; &#xBC0F; &#xD53C;&#xD305; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBAA8;&#xB378; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD94;&#xCD9C; &#xC218; &#xBCF4;&#xAE09;&#xC5D0; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC811;&#xCD09; &#xBA74;&#xC801;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC18D;&#xB3C4; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xC57D; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB290;&#xB9B0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB0C5;&#xC73C;&#xB85C; &#xD615;&#xAD11;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xBD88;&#xAC00;&#xB2A5; &#xC77C;&#xBD80; &#xC77C;&#xBD80; ligands &#xD574;&#xB9AC; &#xB610;&#xB294; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; ligands&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xB290;&#xB9AC;&#xAC8C; &#xD655;&#xC0B0; &#xD558;&#xC790;, &#xB450; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC911; &#xD558;&#xB098; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xD569; &#xC774;&#xB860;&#xACFC; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC18D;&#xB3C4;, &#xD655;&#xC0B0; &#xACC4;&#xC218;, &#xBC0F; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBD84;&#xC790; &#xBA74;&#xC5ED;&#xD559; &#xB0C5;&#xACFC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC140; bilayer &#xC811;&#xD569;&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBD84;&#xC218;&#xC758; &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xBCF4;&#xAE09; &#xBC0F; FRAP &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xC601;&#xC5ED;&#xBCC4;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC18D;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815;.

La sinapsis inmunol&#xF3;gica sea una estructura estable intercelular que se especializa en la sustancia y la transferencia de la se&#xF1;al de una c&#xE9;lula inmunol&#xF3;gica a otra. Su formaci&#xF3;n se regula en parte por la difusi&#xF3;n de la adhesi&#xF3;n y mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en, y su uni&#xF3;n de countermolecules en el &#xE1;rea de contacto. La estabilidad de las sinapsis inmunol&#xF3;gicas permite interacciones ligando-receptor a pesar de equilibrio qu&#xED;mico aproximado otros aspectos din&#xE1;micos. Hemos desarrollado un modelo matem&#xE1;tico que describe el sistema acoplado de reacci&#xF3;n-difusi&#xF3;n en un proceso de sinapsis inmunol&#xF3;gica establecido. En este estudio, se ampl&#xED;a una zona de contacto se ha descrito anteriormente la recuperaci&#xF3;n despu&#xE9;s de fluorescencia photobleaching (FRAP) experimento para probar la validez del modelo. La actividad de uni&#xF3;n al receptor y la movilidad lateral de la etiqueta fluorescente, los l&#xED;pidos anclados ligandos en la bicapa dio lugar a su acumulaci&#xF3;n, seg&#xFA;n lo revelado por una mayor intensidad de fluorescencia en el interior del &#xE1;rea de contacto que en el exterior. Despu&#xE9;s fotoblanqueo completo de la sinapsis, la recuperaci&#xF3;n de fluorescencia requiere ligandos para disociar y volver a enlazar, y para difundir dentro y fuera de la zona de contacto. Tal un curso de tiempo FRAP en consecuencia, proporciona informaci&#xF3;n sobre la reacci&#xF3;n y difusi&#xF3;n, que puede ser extra&#xED;do mediante el ajuste de la soluci&#xF3;n del modelo a los datos. Sorprendentemente, las tasas de ida y en el &#xE1;rea de contacto de dos dimensiones eran por lo menos 100 veces m&#xE1;s lento que en tres dimensiones soluci&#xF3;n. Como ya se ha informado en las sinapsis inmunol&#xF3;gicas, una fracci&#xF3;n significativa no recuperable de fluorescencia se observ&#xF3; con uno de los dos sistemas estudiados, sugiriendo algunos ligandos ya sea disociadas o difusa mucho m&#xE1;s lentamente en comparaci&#xF3;n con otros ligandos en la sinapsis mismo. La teor&#xED;a y experimento combinado proporciona as&#xED; un nuevo m&#xE9;todo para mediciones in situ de las tasas de cin&#xE9;ticas, coeficientes de difusi&#xF3;n, y las fracciones no recuperables de interactuar mol&#xE9;culas en las sinapsis inmunol&#xF3;gicas y otras uniones estables bicapa celular.

Medici&#xF3;n de la cin&#xE9;tica de difusi&#xF3;n y las consolidaciones, por FRAP Contacto &#xC1;rea

&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x901F;&#x7387;&#x548C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;-&#x914D;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#x662F;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53C2;&#x6570;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x5206;&#x5B50; &#xFF08;&#x5373;&#x4E09;&#x4E2A; dimensionial &#x53C2;&#x6570;&#xFF09; &#x7684;&#x6D41;&#x4F53;&#x76F8;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E0D;&#x4E00;&#x5B9A;&#x4E0E;&#x540C;&#x884C;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x65F6;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4F19;&#x4F34;&#x53CC;&#x65B9;&#x5206;&#x522B;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x5230;&#x4E24;&#x4E2A; apposing &#x66F2;&#x9762; &#xFF08;&#x5373;&#x4E8C;&#x7EF4; (2D) &#x53C2;&#x6570;&#xFF09; &#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x7684; 2D &#x4EB2;&#x7F18;&#x5173;&#x7CFB;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0D;&#x540C;&#x6570;&#x91CF;&#x7EA7;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x540E;&#x5149;&#x6F02;&#x767D;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4EE5;&#x524D;&#x7528;&#x4E8E;&#x6F14;&#x793A;&#x7684;&#x80F6;&#x7C98;&#x5728;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x79EF;&#x52A8;&#x6001;&#x8367;&#x5149;&#x6062;&#x590D;&#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x53CD;&#x5E94;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x540E;&#x5149;&#x6F02;&#x767D;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4F7F;&#x73B0;&#x573A;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684; 2D &#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x901F;&#x7387;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8FDF;&#x949D;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#xFF0C;&#x5728;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x79EF;&#xFF0C;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x79EF;&#x8367;&#x5149;&#x6062;&#x590D;&#x5230;&#x5E94;&#x7528;&#x6570;&#x5B66;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6570;&#x5B66;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x5728;&#x8FD9;&#x7BC7;&#x6587;&#x7AE0;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5C06;&#x914D;&#x5957;&#x7684;&#x6587;&#x7AE0;&#x4E2D;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x53CA;&#x5176;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x3002;

&#x63A5;&#x89E6;&#x533A;&#x57DF;&#x8131;&#x8272;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x5206;&#x6790;&#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

Kinetic rates and binding affinity of receptor-ligand interactions are important determinants of cell adhesion. Measurements of these parameters in fluid phase using soluble molecules (i.e., three-dimensionial parameters) do not necessarily correlate with their counterparts measured when both binding partners are respectively anchored to two apposing surfaces (i.e., two-dimensional (2D) parameters). Moreover, 2D affinities measured by different methods can differ by orders of magnitude. Here we describe a coupled diffusion-reaction model for the fluorescence recovery after photobleaching experiment previously used to demonstrate the dynamics of adhesive bonds in the contact area. Applying the mathematical model to the contact area fluorescence recovery after photobleaching experiment enables in situ measurements of 2D kinetic rates of the adhesion molecules and their retarded diffusion in a stable contact area. The mathematical properties of the model are characterized in this article and its experimental validation will be presented in the companion article.

A coupled diffusion-kinetics model for analysis of contact-area FRAP experiment.

Taux cin&#xE9;tiques et d&#x26;#39;affinit&#xE9; de liaison de r&#xE9;cepteur-ligand interactions sont des d&#xE9;terminants importants de l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire. Les mesures de ces param&#xE8;tres dans la phase liquide en utilisant des mol&#xE9;cules solubles (c.-&#xE0;-trois dimensionial param&#xE8;tres) ne sont pas n&#xE9;cessairement en corr&#xE9;lation avec leurs homologues mesur&#xE9;es lorsque les deux partenaires de liaison sont respectivement ancr&#xE9;es &#xE0; deux surfaces (c.-&#xE0;-apposants, les param&#xE8;tres &#xE0; deux dimensions (2D)). Par ailleurs, les affinit&#xE9;s 2D mesur&#xE9;es par des m&#xE9;thodes diff&#xE9;rentes peuvent diff&#xE9;rer de plusieurs ordres de grandeur. Nous d&#xE9;crivons ici un coupl&#xE9; diffusion-r&#xE9;action mod&#xE8;le pour le recouvrement de fluorescence apr&#xE8;s photoblanchiment exp&#xE9;rience pr&#xE9;c&#xE9;demment utilis&#xE9; pour d&#xE9;montrer la dynamique de collages dans la zone de contact. L&#x26;#39;application du mod&#xE8;le math&#xE9;matique pour la r&#xE9;cup&#xE9;ration de fluorescence apr&#xE8;s photoblanchiment zone de contact exp&#xE9;rience permet des mesures in situ de 2D taux cin&#xE9;tiques des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;adh&#xE9;sion et de leur diffusion retard&#xE9;e dans une zone de contact stable. Les propri&#xE9;t&#xE9;s math&#xE9;matiques du mod&#xE8;le sont caract&#xE9;ris&#xE9;s dans cet article et sa validation exp&#xE9;rimentale sera pr&#xE9;sent&#xE9;e dans l&#x26;#39;article compagnon.

Un Coupl&#xE9; diffusion cin&#xE9;tique du mod&#xE8;le pour l&#x26;#39;analyse de l&#x26;#39;exp&#xE9;rience FRAP Contactez-zone

Kinetische Preise und verbindliche Affinit&auml;t von Rezeptor-Ligand-Interaktionen sind wichtige Determinanten der Zelladh&auml;sion. Messungen dieser Parameter in der fl&uuml;ssigen Phase mit l&ouml;sliche Molek&uuml;le (d. h. drei-dimensionial Parameter) nicht unbedingt korrelieren mit ihren Gegenst&uuml;cken gemessen, wenn beide Partner Bindung bzw. mit zwei apposing Fl&auml;chen (d. h. zweidimensionale (2D) Parameter) verankert sind. Dar&uuml;ber hinaus k&ouml;nnen 2D Affinit&auml;ten mit verschiedenen Methoden gemessen um Gr&ouml;&szlig;enordnungen unterscheiden. Hier beschreiben wir ein gekoppelten Verbreitung-Reaktions-Modell f&uuml;r die Fluoreszenz-Erholung nach Photobleaching Experiment vorher verwendet, um die Dynamik der Verklebungen in der Kontaktfl&auml;che zu demonstrieren. Die Anwendung des mathematischen Modells auf die Kontaktfl&auml;che Fluoreszenz Erholung nach Photobleaching Experiment in-situ Messungen der 2D kinetische Bewertungen der Adh&auml;sionsmolek&uuml;le und deren zur&uuml;ckgebliebene Verbreitung in eine stabile Kontaktfl&auml;che erm&ouml;glicht. Die mathematischen Eigenschaften des Modells sind in diesem Artikel gekennzeichnet und seine experimentelle Validierung im Begleiter-Artikel vorgestellt werden.

Eine gekoppelte Verbreitung-Kinetik-Modell zur Analyse von Kontakt-Bereich FRAP Experiment.

Tariffe cinetici e affinit&agrave; di legame di interazioni recettore-ligando sono importanti fattori determinanti di adesione delle cellule. Le misurazioni di questi parametri in fase fluida utilizzando molecole solubili (cio&egrave;, dimensionial tre parametri) non necessariamente correlare con i loro omologhi misurate quando entrambi i partner associazione rispettivamente sono ancorati a due superfici apposing (i cio&egrave;, bidimensionale (2D) parametri). Inoltre, affinit&agrave; 2D misurata da diversi metodi possono differire da ordini di grandezza. Descriviamo qui un modello di reazione-diffusione accoppiato per il recupero della fluorescenza dopo esperimento photobleaching precedentemente utilizzato per dimostrare la dinamica di adesivi nell&#39;area di contatto. Applicando il modello matematico per il recupero di area di contatto fluorescenza dopo photobleaching esperimento consente misure in situ di 2D tariffe cinetiche delle molecole di adesione e la loro diffusione ritardati in un&#39;area di contatto stabile. Le propriet&agrave; matematiche del modello sono caratterizzate in questo articolo e relativa validazione sperimentale sar&agrave; presentati nell&#39;articolo della compagna.

Un modello di diffusione-cinetica accoppiato per l&#39;analisi dell&#39;esperimento di contatto-zona FRAP.

&#x904B;&#x52D5;&#x901F;&#x5EA6;&#x3068;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; - &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#xFF08;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x4E09;dimensionial&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6DB2;&#x76F8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x5FC5;&#x305A;&#x3057;&#x3082;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;2 apposing&#x9762;&#xFF08;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;2&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;2D&#xFF09;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#xFF09;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;2D&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306F;&#x6841;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x7A4D;&#x3067;&#x63A5;&#x7740;&#x5264;&#x306E;&#x52D5;&#x614B;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x9000;&#x8272;&#x5F8C;&#x86CD;&#x5149;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x62E1;&#x6563;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x5149;&#x9000;&#x8272;&#x5F8C;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x7A4D;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306B;&#x6570;&#x5B66;&#x7684;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x7A4D;&#x3067;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x62E1;&#x6563;&#x306E;2&#x6B21;&#x5143;&#x904B;&#x52D5;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x73FE;&#x5834;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306B;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x6570;&#x5B66;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x8A18;&#x4E8B;&#x3067;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x691C;&#x8A3C;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30CB;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x8A18;&#x4E8B;&#x3067;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x63A5;&#x89E6;&#x9762;&#x7A4D;FRAP&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x62E1;&#x6563;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;

&#xC6B4;&#xB3D9; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ligand &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778;. &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xBD84;&#xC790; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, 3-dimensionial &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC561;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC911; &#xCE21;&#xC815; &#xBC18;&#xB4DC;&#xC2DC; &#xCE21;&#xC815; &#xB450; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; apposing &#xD45C;&#xBA74; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, 2 &#xCC28;&#xC6D0; (2D) &#xB9E4;&#xAC1C;)&#xB97C; &#xACE0;&#xC815; &#xD558;&#xBA74; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB300;&#xC751; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB2E4;&#xB978; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; 2D affinities &#xC9C4;&#xB3C4; &#xBA85;&#xB839;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E4;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC811;&#xCC29;&#xC81C; &#xCC44;&#xAD8C; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; photobleaching &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD6C4; &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xD655;&#xC0B0;-&#xBC18;&#xC751; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Photobleaching &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790; &#xBC0F; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xCD09; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC800; &#xB2A5; &#xC544; &#xBCF4;&#xAE09;&#xC758; 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815; &#xD55C; &#xD6C4; &#xC811;&#xCD09; &#xC601;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC218;&#xD559;&#xC801; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC801;&#xC6A9;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC218;&#xD559;&#xC801; &#xC18D;&#xC131; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB3C4;&#xC6B0;&#xBBF8; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC811;&#xCD09; &#xC601;&#xC5ED; FRAP &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xBCF4;&#xAE09; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBAA8;&#xB378;.

Las tasas de cin&#xE9;tica y la afinidad de uni&#xF3;n de las interacciones ligando-receptor son importantes determinantes de la adhesi&#xF3;n celular. Las mediciones de estos par&#xE1;metros en fase l&#xED;quida utilizando mol&#xE9;culas solubles (es decir, tres dimensionial par&#xE1;metros) no se correlacionan necesariamente con sus hom&#xF3;logos de medici&#xF3;n cuando ambas parejas de uni&#xF3;n son, respectivamente, anclado a dos superficies apposing (es decir, los par&#xE1;metros de dos dimensiones (2D)). Adem&#xE1;s, las afinidades 2D medidos por diferentes m&#xE9;todos pueden diferir en varios &#xF3;rdenes de magnitud. Aqu&#xED; se describe una junto difusi&#xF3;n-reacci&#xF3;n modelo para la recuperaci&#xF3;n despu&#xE9;s de fluorescencia photobleaching experimento utilizado anteriormente para demostrar la din&#xE1;mica de las uniones adhesivas en el &#xE1;rea de contacto. Aplicando el modelo matem&#xE1;tico para la recuperaci&#xF3;n de contacto de fluorescencia &#xE1;rea despu&#xE9;s de photobleaching experimentos permite realizar mediciones in situ de las tasas de 2D cin&#xE9;ticas de las mol&#xE9;culas de adhesi&#xF3;n y su difusi&#xF3;n retardada en una zona de contacto estable. Las propiedades matem&#xE1;ticas del modelo se caracteriza en este art&#xED;culo y su validaci&#xF3;n experimental se presentar&#xE1; en el art&#xED;culo que acompa&#xF1;a.

Un acoplado de difusi&#xF3;n de la cin&#xE9;tica de Modelo para el an&#xE1;lisis del experimento FRAP zona de contacto

&#x8868;&#x9762;&#x951A;&#x5B9A;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x914D;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x89E3;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x73AF;&#x5883;&#x901A;&#x4FE1;&#x3002;&#x8DE8;&#x4E24;&#x4E2A; apposing &#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x5206;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53D7;&#x4E8C;&#x7EF4; (2D) &#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#xFF0C;&#x5373;&#x4ECE;&#x7269;&#x7406;&#x4E0A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x66F4;&#x52A0;&#x8D34;&#x5207;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x4E0E;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x6D41;&#x76F8;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5206;&#x5B50;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x6D4B;&#x91CF; 2D &#x7ED1;&#x5B9A;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF1A; &#x7C98;&#x9644;&#x9891;&#x7387;&#x68C0;&#x6D4B;&#x53CA;&#x70ED;&#x6DA8;&#x843D;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x524D;&#x8005;&#x63AA;&#x65BD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x63A5;&#x89E6;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x9891;&#x7387;&#x548C;&#x63D0;&#x53D6;&#x90E8;&#x961F;&#x514D;&#x8D39; 2D &#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x975E;&#x7EBF;&#x6027;&#x62DF;&#x5408;&#x6982;&#x7387;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x3002;&#x540E;&#x8005;&#x901A;&#x8FC7;&#x76D1;&#x6D4B;&#x51CF;&#x5C11;/&#x6062;&#x590D;&#x70ED;&#x6CE2;&#x52A8;&#x7684;&#x529B;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x503A;&#x5238;&#x5F62;&#x6210;/&#x89E3;&#x79BB;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x673A;&#x68B0;&#x5730;&#x6839;&#x636E;&#x548C;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x662F;&#x5355;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9700;&#x8981;&#x8D85;&#x7075;&#x654F;&#x529B;&#x6280;&#x672F;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3002;&#x63D0;&#x4EA4;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x529B;&#x63A2;&#x9488;&#x3001; &#x8868;&#x5F81;&#x3002;

&#x6D4B;&#x91CF;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;-&#x914D;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#xFF1A; &#x4ECE;&#x70ED;&#x6DA8;&#x843D;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7C98;&#x9644;&#x9891;&#x7387;&#x3002;

Interactions between surface-anchored receptors and ligands mediate cell-cell and cell-environment communications in many biological processes. Molecular interactions across two apposing cell membrane are governed by two-dimensional (2D) kinetics, which are physically distinct from and biologically more relevant than three-dimensional (3D) kinetics with at least one interacting molecular species in the fluid phase. Here we review two assays for measuring 2D binding kinetics: the adhesion frequency assay and the thermal fluctuation assay. The former measures the binding frequency as a function of contact duration and extracts the force-free 2D kinetics parameters by nonlinearly fitting the data with a probabilistic model. The latter detects bond formation/dissociation by monitoring the reduction/resumption of thermal fluctuations of a force sensor. Both assays are mechanically based and operate at the level of mostly single molecular interaction, which requires ultrasensitive force techniques. Characterization of one such technique, the biomembrane force probe, is presented.

Measuring Receptor-Ligand Binding Kinetics on Cell Surfaces: From Adhesion Frequency to Thermal Fluctuation Methods.

Les interactions entre la surface ancr&#xE9;es r&#xE9;cepteurs et des ligands dans les interactions cellule-cellule et cellule-environnement des communications dans de nombreux processus biologiques. Interactions mol&#xE9;culaires entre deux membrane cellulaire rev&#xEA;tue sont r&#xE9;gies par la cin&#xE9;tique bidimensionnelles (2D), qui sont physiquement distinctes et biologiquement plus importante que la cin&#xE9;tique tridimensionnelles (3D) avec au moins un interagissant esp&#xE8;ces mol&#xE9;culaires en phase liquide. Ici nous passons en revue deux essais pour mesurer la cin&#xE9;tique de liaison 2D: le dosage de fr&#xE9;quence d&#x26;#39;adh&#xE9;rence et le dosage des fluctuations thermiques. Les mesures anciennes la fr&#xE9;quence de liaison en fonction de la dur&#xE9;e de contact et extrait les forces libres cin&#xE9;tique 2D non lin&#xE9;aire par les param&#xE8;tres ajustant les donn&#xE9;es avec un mod&#xE8;le probabiliste. Celui-ci d&#xE9;tecte la formation de liaisons / dissociation en surveillant la r&#xE9;duction / reprise de fluctuations thermiques d&#x26;#39;un capteur de force. Les deux tests sont m&#xE9;caniquement sur la base et d&#x26;#39;exploiter au niveau de l&#x26;#39;interaction mol&#xE9;culaire essentiellement unique, qui n&#xE9;cessite des techniques de force ultrasensibles. Caract&#xE9;risation d&#x26;#39;une technique telle, la sonde de force biomembrane, est pr&#xE9;sent&#xE9;.

Mesure r&#xE9;cepteur-ligand cin&#xE9;tique de liaison sur les surfaces cellulaires: de la fr&#xE9;quence d&#x26;#39;adh&#xE9;rence aux m&#xE9;thodes fluctuation thermique

Interaktionen zwischen Oberfl&auml;che verankerten Rezeptoren und Liganden vermitteln Zell-Zell und Cell-Umwelt Kommunikation in vielen biologischen Prozessen. Molekulare Wechselwirkungen zwischen zwei apposing Zellmembran unterliegen dem zweidimensionale (2D) Kinetik, die physisch und biologisch relevanter als dreidimensionale (3D) Kinetik mit mindestens einem molekularen Spezies in der fl&uuml;ssigen Phase Interaktion sind. Hier &uuml;berpr&uuml;fen wir zwei Proben f&uuml;r die Messung von 2D verbindliche Kinetik: die Adh&auml;sion-Frequenz-Assay und der thermischen Schwankungen-Assay. Erstere misst die Bindung-Frequenz als Funktion der Kontakt Dauer und extrahiert die Kraft-freien 2D Kinetik-Parameter durch Verwandlung die Daten mit einem probabilistischen Modell passend. Letzteres erkennt Bond Bildung/Dissoziation durch &Uuml;berwachung der Reduzierung/Wiederaufnahme der thermischen Schwankungen eines Kraft-Sensors. Beide Assays basieren mechanisch und wirken auf der Ebene vor allem einzelne Molekulare Wechselwirkungen, die ULTRASENSIBLE Kraft Techniken erfordert. Charakterisierung der eine solche Technik, die Biomembrane Kraft Sonde, wird vorgestellt.

Mess-Rezeptor-Ligand-Bindung-Kinetik auf Zelle Oberfl&auml;chen: von Adh&auml;sion Frequenz auf thermische Fluktuation-Methoden.

Interazioni tra superficie ancorate recettori e ligandi mediano comunicazione cellula-cellula e cellula-ambiente in molti processi biologici. Interazioni molecolari attraverso due apposite membrane cellulari sono governate dalla cinetica bidimensionale (2D), che sono fisicamente distinti da e biologicamente pi&ugrave; rilevanti che la cinetica di tridimensionale (3D) con almeno una interazione molecolare specie nella fase fluida. Qui esaminiamo due dosaggi per la misurazione della cinetica di associazione 2D: l&#39;adesione frequenza test e il test di fluttuazione termica. L&#39;ex misura la frequenza di associazione in funzione della durata contatto ed estrae i parametri di forza-libero 2D cinetica nonlinearly inserendo i dati con un modello probabilistico. Quest&#39;ultimo rileva legame formazione/dissociazione monitorando la ripresa/riduzione delle fluttuazioni termiche di un sensore di forza. Entrambe le analisi sono basate meccanicamente e operano a livello di principalmente singola interazione molecolare, che richiede tecniche di forza ultrasensibile. Caratterizzazione di una tale tecnica, la sonda di forza biomembrane, &egrave; presentato.

Del ricevitore-Ligand Binding cinetica sulle superfici della cella di misura: da frequenza di aderenza ai metodi fluttuazione termica.

&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE; - &#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE; - &#x74B0;&#x5883;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3002; 2 apposing&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3092;&#x901A;&#x904E;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3068;&#x6D41;&#x4F53;&#x76F8;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;1&#x3064;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7A2E;&#x3068;3&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;3D&#xFF09;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x3088;&#x308A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;2&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;2D&#xFF09;&#x52D5;&#x614B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x652F;&#x914D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x71B1;&#x63FA;&#x3089;&#x304E;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#xFF1A;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2D&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x524D;&#x8005;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x5BFE;&#x7B56;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x7DDA;&#x5F62;&#x78BA;&#x7387;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x3063;&#x3066;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x529B;&#x7121;&#x6B21;&#x5143;&#x52D5;&#x614B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F8C;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x529B;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x306E;&#x71B1;&#x63FA;&#x3089;&#x304E;&#x306E;&#x4F4E;&#x6E1B;/&#x518D;&#x958B;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;/&#x89E3;&#x96E2;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x8D85;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x529B;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x819C;&#x529B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306F;&#x3001;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x63A5;&#x7740;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x71B1;&#x63FA;&#x3089;&#x304E;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3078;&#xFF1A;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; - &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;

&#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC815; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; ligands &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9CE;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xBC0F; &#xC140; &#xD658;&#xACBD; &#xD1B5;&#xC2E0; &#xC911;&#xC7AC;. &#xBD84;&#xC790; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB450; apposing &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xB418;&#xBA70; &#xBD84;&#xC790; &#xC885; &#xC561;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xD558;&#xB098; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xAD00;&#xB828; &#xC788;&#xB294; 2 &#xCC28;&#xC6D0; (2D) &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860;, &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC728; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; 2D &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xAC80;&#xD1A0;: &#xC811;&#xCC29; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC0F; &#xC5F4; &#xBCC0;&#xB3D9; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;. &#xC804; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xAE30;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xB418; &#xD655;&#xB960; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xB9DE;&#xCD94;&#xC5B4; &#xD798; &#xC5C6;&#xB294; 2D &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6C4;&#xC790;&#xB294; &#xD798; &#xC13C;&#xC11C;&#xC758; &#xC5F4; &#xBCC0;&#xB3D9; &#xAC10;&#xC18C;/&#xC7AC;&#xAC1C;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xB300; &#xD615;&#xC131;/&#xBD84;&#xB9AC; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB530;&#xB77C; &#xD558; &#xACE0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xC0C1;&#xD638;, &#x78C1; &#xD3EC;&#xC2A4; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9;. &#xAC19;&#xC740; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xAE30;&#xBC95;, biomembrane &#xD3EC;&#xC2A4; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xD2B9;&#xC131; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; Ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xCE21;&#xC815;: &#xC5F4; &#xBCC0;&#xB3D9; &#xBC29;&#xBC95; &#xC811;&#xCC29; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C;.

Las interacciones entre la superficie ancladas-receptores y ligandos mediar c&#xE9;lula-c&#xE9;lula y c&#xE9;lula-ambiente comunicaciones en muchos procesos biol&#xF3;gicos. Las interacciones moleculares a trav&#xE9;s de dos membrana celular apposing se rige por la cin&#xE9;tica de dos dimensiones (2D), que son f&#xED;sicamente distintas y biol&#xF3;gicamente m&#xE1;s relevante que la cin&#xE9;tica tridimensionales (3D) con al menos una interacci&#xF3;n especies moleculares en la fase fluida. Aqu&#xED; hacemos una revisi&#xF3;n de dos ensayos para medir la cin&#xE9;tica de uni&#xF3;n en 2D: el ensayo de la frecuencia de la adhesi&#xF3;n y el ensayo de fluctuaci&#xF3;n t&#xE9;rmica. El primero mide la frecuencia de enlace en funci&#xF3;n de la duraci&#xF3;n del contacto y extrae los libres de la fuerza cin&#xE9;tica no lineal 2D par&#xE1;metros por ajustar los datos con un modelo probabil&#xED;stico. Este &#xFA;ltimo detecta la formaci&#xF3;n de enlaces / disociaci&#xF3;n mediante el control de la reducci&#xF3;n / reanudaci&#xF3;n de las fluctuaciones t&#xE9;rmicas de un sensor de fuerza. Ambos ensayos se basan mec&#xE1;nicamente y operar en el nivel de interacci&#xF3;n molecular principalmente &#xFA;nico, que requiere t&#xE9;cnicas ultrasensibles de fuerza. Caracterizaci&#xF3;n de una de tales t&#xE9;cnicas, la sonda fuerza biomembrana, se presenta.

Medici&#xF3;n de receptor-ligando cin&#xE9;tica de uni&#xF3;n en la superficie celular: Frecuencia de adherencia a los m&#xE9;todos fluctuaci&#xF3;n t&#xE9;rmica

T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53; (TCR) &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x80BD;&#x4E3B;&#x8981;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x76F8;&#x5BB9;&#x6027;&#x590D;&#x5408;&#x7269; &#xFF08;&#x62B5;&#x62BC;&#xFF09; &#x7528;&#x4EE5;&#x9274;&#x522B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x4ECE;&#x81EA;&#x6211;&#x6297;&#x539F;&#x548C;&#x89E6;&#x53D1;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x9700;&#x8981; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x6297;&#x539F;&#x9012;&#x5448;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E3A;&#x8DE8;&#x7F1D;&#x9699;&#x8FDE;&#x63A5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x951A;&#x5B9A;&#x7684; TCR &#x53CA;&#x62B5;&#x62BC;&#x662F;&#x4E8C;&#x7EF4; (2D) &#x819C;&#x7684; apposing &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x8EAB;&#x4F53;&#x63A5;&#x89E6;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5176; 2D &#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#xFF0C;TCR &#x62B5;&#x62BC;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x53EA;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x4E0E; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E24;&#x4E2A;&#x673A;&#x68B0;&#x68C0;&#x6D4B;&#x663E;&#x793A; TCR &#x548C;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x4E0A;&#x7387;&#x5176;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x62B5;&#x62BC;&#x4E4B;&#x95F4;&#x9AD8; 2D &#x4EB2;&#x7F18;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x4E0E; 3D &#x7684;&#x540C;&#x884C;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;2D &#x7684;&#x4EB2;&#x7F18;&#x5173;&#x7CFB;&#x548C;&#x62B5;&#x62BC;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x9762;&#x677F; TCR &#x7387;&#x4E0A;&#x62E5;&#x6709;&#x8FDC;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x8303;&#x56F4;&#x76F8;&#x5339;&#x914D;&#xFF0C;&#x5176;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684; 3D &#x9854;&#x662F;&#x5173;&#x95ED;-&#x901F;&#x7387;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x62B5;&#x62BC;&#x6E38;&#x79BB;&#x901F;&#x5EA6;&#x6700;&#x6162;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;2D &#x5173;&#x95ED;&#x7387;&#x90FD;&#x8FBE; 8,300-fold &#x901F;&#x5EA6;&#x66F4;&#x5FEB;&#xFF0C;&#x907F;&#x514D;&#x8BEF;&#x5165;&#x6B67;&#x9014;&#x901F;&#x5EA6;&#x6700;&#x5FEB;&#x7684;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x62B5;&#x62BC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684; 2D &#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5FEB;&#x901F;&#x6297;&#x539F;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E32;&#x884C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7531;&#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB;&#x5927;&#x81EA;&#x6211;&#x62B5;&#x62BC;&#x80CC;&#x666F;&#x4E2D;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242; pMHCs &#x7684;&#x91C7;&#x6837;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x73AF;&#x5883;&#x653E;&#x5927;&#x4E86;&#x5185;&#x5728;&#x7684; TCR &#x62B5;&#x62BC;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x4EB2;&#x7F18;&#x5173;&#x7CFB;&#x548C;&#x786E;&#x5B9A; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x53CD;&#x5E94;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;

&#x4E8C;&#x7EF4; TCR &#x548C;&#x62B5;&#x62BC;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x786E;&#x5B9A; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

The T-cell receptor (TCR) interacts with peptide-major histocompatibility complexes (pMHC) to discriminate pathogens from self-antigens and trigger adaptive immune responses. Direct physical contact is required between the T cell and the antigen-presenting cell for cross-junctional binding where the TCR and pMHC are anchored on two-dimensional (2D) membranes of the apposing cells. Despite their 2D nature, TCR-pMHC binding kinetics have only been analysed three-dimensionally (3D) with a varying degree of correlation with the T-cell responsiveness. Here we use two mechanical assays to show high 2D affinities between a TCR and its antigenic pMHC driven by rapid on-rates. Compared to their 3D counterparts, 2D affinities and on-rates of the TCR for a panel of pMHC ligands possess far broader dynamic ranges that match that of their corresponding T-cell responses. The best 3D predictor of response is the off-rate, with agonist pMHC dissociating the slowest. In contrast, 2D off-rates are up to 8,300-fold faster, with the agonist pMHC dissociating the fastest. Our 2D data suggest rapid antigen sampling by T cells and serial engagement of a few agonist pMHCs by TCRs in a large self pMHC background. Thus, the cellular environment amplifies the intrinsic TCR-pMHC binding to generate broad affinities and rapid kinetics that determine T-cell responsiveness.

The kinetics of two-dimensional TCR and pMHC interactions determine T-cell responsiveness.

Le r&#xE9;cepteur des cellules T (TCR) interagit avec les complexes d&#x26;#39;histocompatibilit&#xE9; peptide-Major (pMHC) pour discriminer les agents pathog&#xE8;nes &#xE0; partir des auto-antig&#xE8;nes et d&#xE9;clencher des r&#xE9;ponses immunitaires adaptatives. Un contact physique direct est n&#xE9;cessaire entre la cellule T et la cellule pr&#xE9;sentatrice d&#x26;#39;antig&#xE8;ne pour le contre-jonctionnel contraignante lorsque le TCR et pMHC sont ancr&#xE9;s sur deux dimensions (2D) des membranes des cellules apposants. Malgr&#xE9; leur nature 2D, TCR-PMHC cin&#xE9;tique de liaison ont seulement &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;s en trois dimensions (3D) avec un degr&#xE9; variable de corr&#xE9;lation avec la r&#xE9;activit&#xE9; des cellules T. Ici, nous utilisons deux tests m&#xE9;caniques pour montrer &#xE9;lev&#xE9;s affinit&#xE9;s entre un TCR 2D et son pMHC antig&#xE9;nique rapide entra&#xEE;n&#xE9;e par le taux d&#x26;#39;. Comparativement &#xE0; leurs homologues 3D, 2D et affinit&#xE9;s sur les taux de la TCR pour un panel de ligands PMHC poss&#xE8;dent beaucoup plus larges plages dynamiques qui correspondent &#xE0; celle de leurs correspondants r&#xE9;ponses des cellules T. Le meilleur facteur pr&#xE9;dictif de la r&#xE9;ponse en 3D est le hors-taux, avec pMHC agoniste dissocier le plus lent. En revanche, en 2D hors-taux sont en hausse &#xE0; 8300 fois plus rapide, avec le pMHC agoniste dissocier le plus rapide. Nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent 2D &#xE9;chantillonnage rapide des antig&#xE8;nes par les cellules T et l&#x26;#39;engagement de s&#xE9;rie d&#x26;#39;un pMHCs agonistes peu par TCR dans un fond de soi pMHC grande. Ainsi, l&#x26;#39;environnement cellulaire amplifie la valeur intrins&#xE8;que TCR-pMHC contraignant pour g&#xE9;n&#xE9;rer des affinit&#xE9;s g&#xE9;n&#xE9;rales et de la cin&#xE9;tique rapide qui d&#xE9;terminent la r&#xE9;activit&#xE9; des cellules T.

La cin&#xE9;tique de deux dimensions TCR et interactions PMHC D&#xE9;terminer la r&#xE9;activit&#xE9; des cellules T

Der T-Zell-Rezeptor (TCR) interagiert mit Peptid-Major Histocompatibility-komplexe (pMHC) zu diskriminieren Krankheitserreger aus selbst-Antigenen und adaptive Immunantworten ausl&ouml;sen. Direkter physischer Kontakt muss zwischen der T-Zelle und die Antigen-pr&auml;sentierenden Zelle f&uuml;r Kreuz-junktionale Bindung, wo die TCR und pMHC auf zweidimensionale (2D) Membranen der apposing Zellen verankert sind. Trotz ihrer 2D Beschaffenheit TCR-pMHC Bindung Kinetik nur wurden analysiert dreidimensional (3D) mit unterschiedlichem Ausma&szlig; der Korrelation mit der T-Zell-Reaktionsf&auml;higkeit. Hier verwenden wir zwei mechanische Tests zeigen hohe 2D Affinit&auml;ten zwischen einem TCR und seine Antigene pMHC von rapid auf-Preise getrieben. Im Vergleich zu ihren Gegenst&uuml;cken 3D, besitzen 2D Affinit&auml;ten und auf Raten von TCR f&uuml;r ein Panel pMHC Liganden weit umfangreicheren dynamische Bereichen, die mit ihren entsprechenden T-Zell-Antworten &uuml;berein. Die beste 3D Pr&auml;diktor der Antwort ist die Weg-Rate, mit Agonist pMHC man die langsamste distanziert. Im Gegensatz dazu sind 2D aus-Preise bis zu 8,300-fold schneller, mit der Agonist-pMHC man die schnellste distanziert. Unsere 2D Daten legen nahe, schnelle Antigen Probenahme von T-Zellen und serielle Engagement von ein paar Agonist-pMHCs von TCRs in einem gro&szlig;en selbst pMHC-Hintergrund. Somit verst&auml;rkt die zellul&auml;re Umgebung die systeminterne TCR-pMHC-Bindung zum Generieren von breiten Affinit&auml;ten und schnelle Kinetik, die T-Zell-Reaktion zu bestimmen.

Die Kinetik der zweidimensionalen TCR und pMHC Wechselwirkungen bestimmen T-Zell-Reaktionsf&auml;higkeit.

Il recettore delle cellule T (TCR) interagisce con complessi peptide-maggiore di istocompatibilit&agrave; (pMHC) per discriminare gli agenti patogeni da auto-antigeni e scatenare risposte immunitarie. Il contatto fisico diretto &egrave; necessario tra la cellula T e la cellula presentanti l&#39;antigene per l&#39;associazione cross-giunzionale dove il TCR e pMHC sono ancorati su bidimensionale (2D) membrane delle cellule apposing. Nonostante la loro natura 2D, cinetica di legame del TCR-pMHC sono solo stati analizzati tridimensionale (3D) con un grado variabile di correlazione con la capacit&agrave; di risposta delle cellule T. Qui usiamo due dosaggi meccanici per mostrare ad alta affinit&agrave; 2D tra un TCR e sua pMHC antigenica guidato dal rapidi sulle tariffe. Rispetto ai loro omologhi 3D, 2D affinit&agrave; e sulle tariffe del TCR per un pannello di ligandi pMHC possiedono gamme dinamiche molto pi&ugrave; ampie che corrispondano a quello delle loro corrispondenti risposte delle cellule T. Il miglior predittore 3D della risposta &egrave; l&#39;off-rate, con pMHC agonista dissociando il pi&ugrave; lento. Al contrario, 2D off tariffe sono fino a 8,300-fold pi&ugrave; veloce, con l&#39;agonista pMHC dissociando il pi&ugrave; veloce. I nostri dati 2D suggeriscono campionamento rapida dell&#39;antigene delle cellule T e seriale impegno di pochi pMHCs agonista da TCRs in uno sfondo di grandi pMHC auto. Cos&igrave;, l&#39;ambiente cellulare amplifica il legame intrinseco TCR-pMHC per generare grandi affinit&agrave; e rapida cinetica che determinano la reattivit&agrave; delle cellule T.

La cinetica del TCR bidimensionale e interazioni pMHC determinare la reattivit&agrave; delle cellule T.

T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x6297;&#x539F;&#x3068;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304B;&#x3089;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x4E3B;&#x8981;&#x7D44;&#x7E54;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#xFF08;pMHC&#xFF09;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76F4;&#x63A5;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x63A5;&#x89E6;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;TCR&#x3068;pMHC&#x304C;apposing&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;2&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;2D&#xFF09;&#x819C;&#x4E0A;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;2&#x6B21;&#x5143;&#x7684;&#x306A;&#x6027;&#x8CEA;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;TCR-pMHC&#x7D50;&#x5408;&#x901F;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3067;&#xFF08;3D&#xFF09;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x89E3;&#x6790;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;TCR&#x3068;&#x3001;&#x7387;&#x306B;&#x6025;&#x901F;&#x3067;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x6297;&#x539F;pMHC&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x9AD8;&#x6B21;&#x5143;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;2&#x3064;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5E83;&#x3044;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x3066;3D&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3001;2D&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3068;pMHC&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x30D1;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;TCR&#x306E;&#x30AA;&#x30F3;&#x7387;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;3D&#x4E88;&#x6E2C;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x9045;&#x3044;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;pMHC&#x3068;&#x3001;&#x30AA;&#x30D5;&#x7387;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;2D&#x30AA;&#x30D5;&#x7387;&#x306F;&#x6700;&#x901F;&#x3092;&#x89E3;&#x96E2;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;pMHC&#x3068;&#x3001;8300&#x500D;&#x306E;&#x9AD8;&#x901F;&#x5316;&#x306B;&#x4EFB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;2D&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x81EA;&#x5DF1;pMHC&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#x306B;&#x3059;&#x308B;TCR&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;pMHCs&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x4FC2;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8FC5;&#x901F;&#x6297;&#x539F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3068;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x53CD;&#x5FDC;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;TCR-pMHC&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x5897;&#x5E45;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E8C;&#x6B21;&#x5143;TCR&#x3068;PMHC&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;

&#xC790;&#xAE30; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xB97C; &#xCC28;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC801;&#xC751;&#xD615; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xBC29; &#xC544; &#xC1E0;&#xB97C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;-&#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1; &#xC801;&#xD569;&#xC131; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C; (pMHC)&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR). &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xCCB4; &#xC811;&#xCD09;&#xC740; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04; &#xC811;&#xD569; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; TCR &#xBC0F; pMHC apposing &#xC140;&#xC758; 2 &#xCC28;&#xC6D0; (2D) &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC815; &#xAC04;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 2D &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC131;&#xACA9;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; TCR pMHC &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860;&#xB9CC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD84;&#xC11D; 3 &#xCC28;&#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD559;&#xC704; (3D). &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; TCR&#xACFC; &#xBE60;&#xB978; &#xC18D;&#xB3C4; &#xD798;&#xC785;&#xC5B4; &#xADF8; &#xD56D; &#xC6D0; pMHC &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB192;&#xC740; 2D &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xB450; &#xAE30;&#xACC4; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; 3D &#xB300;&#xC751;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 2D &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC131; &#xBC0F; pMHC ligands&#xC758; &#xD328;&#xB110;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; TCR&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD574;&#xB2F9; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xB113;&#xC740; &#xB3D9;&#xC801; &#xBC94;&#xC704; &#xBCF4;&#xC720;. &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; 3D &#xC608;&#xC5B8;&#xC790;&#xB294; &#xC624;&#xD504;-&#xC18D;&#xB3C4;, &#xAC00;&#xC7A5; &#xB290;&#xB9B0; dissociating &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; Pmhc&#xC640; &#xD568;&#xAED8;. &#xBC18;&#xBA74;, 2D &#xC624;&#xD504; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC00;&#xC7A5; &#xBE60;&#xB978; dissociating &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; pMHC &#xCD5C;&#xB300; 8,300-fold &#xBE60;&#xB978;. 2D &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD070; &#xC790;&#xAE30; pMHC &#xBC31;&#xADF8;&#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xB85C; TCRs &#xC5EC; &#xBA87; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; Pmhcs&#xC758; &#xC9C1;&#xB82C; &#xC57D;&#xD63C; &#xBC0F; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC0D8;&#xD50C;&#xB9C1; &#xC81C;&#xC548;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC138;&#xD3EC; &#xD658;&#xACBD; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xBE60;&#xB978; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; TCR pMHC &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC99D;&#xD3ED;.

2 &#xCC28;&#xC6D0; TCR &#xBC0F; pMHC &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El receptor de c&#xE9;lulas T (TCR) interact&#xFA;a con los complejos de histocompatibilidad mayor (p&#xE9;ptido pMHC) para discriminar los pat&#xF3;genos de auto-ant&#xED;genos y desencadenar la respuesta inmune adaptativa. Contacto f&#xED;sico directo se requiere entre la c&#xE9;lula T y la c&#xE9;lula presentadora de ant&#xED;geno para la cruzada de uni&#xF3;n de uni&#xF3;n donde el TCR y pMHC est&#xE1;n anclados en dos dimensiones (2D) las membranas de las c&#xE9;lulas apposing. A pesar de su naturaleza 2D, TCR-pMHC cin&#xE9;tica de uni&#xF3;n s&#xF3;lo se han analizado en tres dimensiones (3D) con un grado variable de correlaci&#xF3;n con la capacidad de respuesta de c&#xE9;lulas T. Aqu&#xED; usamos dos ensayos mec&#xE1;nicos para mostrar en 2D de alta afinidad entre el TCR y su pMHC antig&#xE9;nica impulsado por la r&#xE1;pida de las tasas. En comparaci&#xF3;n con sus contrapartes en 3D, 2D y afinidades en las tarifas del TCR para un grupo de ligandos pMHC poseen mucho m&#xE1;s amplios rangos din&#xE1;micos que responden a la de sus correspondientes respuestas de c&#xE9;lulas T. El mejor predictor de la respuesta en 3D es la tasa de descuento-, con pMHC agonista de disociar el m&#xE1;s lento. En contraste, las tasas de descuento en 2D son hasta 8.300 veces m&#xE1;s r&#xE1;pido, con el agonista pMHC disociar el m&#xE1;s r&#xE1;pido. Nuestros datos sugieren 2D muestreo r&#xE1;pido ant&#xED;geno por las c&#xE9;lulas T y la participaci&#xF3;n de serie de unos pocos pMHCs agonistas de TCR en un fondo auto pMHC grande. As&#xED;, el entorno celular amplifica la intr&#xED;nseca TCR-pMHC vinculante para generar afinidades amplios y cin&#xE9;tica r&#xE1;pida que determinan la capacidad de respuesta de c&#xE9;lulas T.

Cin&#xE9;tica de las dos dimensiones e interacciones TCR pMHC Determinar las c&#xE9;lulas T de respuesta

&#x53D7;&#x4F53;&#x914D;&#x4F53;&#x89E3;&#x79BB;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x5F53;&#x524D;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5047;&#x5B9A;&#x5173;&#x95ED;&#x7387;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x529B;&#x800C;&#x4E0D;&#x4ECE;&#x5176;&#x4E8B;&#x5148;&#x7684;&#x5386;&#x53F2;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E8B;&#x5148;&#x5047;&#x8BBE;&#x662F;&#x9884;&#x6D4B;&#x4ECE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7ED9;&#x5B9A;&#x7684;&#x521D;&#x59CB;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x65B9;&#x7A0B;&#x7684;&#x89E3;&#x79BB;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5931;&#x6548;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D89;&#x53CA;&#x7D20;&#x548C;&#xFF0C;&#x8C03;&#x548C;&#x4E86;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x8F67;&#x708E;&#x75C7;&#x53CA;&#x5176;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x5355;&#x4E00;&#x503A;&#x5238;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x90E8;&#x961F;&#x5386;&#x53F2;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x503A;&#x5238; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x548C; P-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x914D;&#x4F53;-1 &#xFF08;PSGL-1&#xFF09; &#x52A0;&#x8F7D;&#x65F6;&#x4E0D;&#x65AD;&#x4FDD;&#x6301;&#x90E8;&#x961F;&#x4E0D;&#x65AD;&#x722C;&#x5761;&#x901F;&#x7387;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x4E3E;&#x6B62;&#x5982;&#x540C; catch &#x6ED1;&#x503A;&#x5238;&#x8F6C;&#x6362;&#x4EE5; slip-only &#x503A;&#x5238;&#x5229;&#x7387;&#x9AD8;&#x531D;&#x9053;&#x531D;&#x9053;&#x4F4E;&#x5229;&#x7387;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x548C; 6-&#x78FA;-&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x5316;&#x8DEF;&#x6613;&#x65AF; X &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7EBD;&#x5E26;&#x662F;&#x4E0D;&#x900F;&#x6C34;&#x7684;&#x5761;&#x9053;&#x7387;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6B64;&#x7279;&#x5B9A;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x90E8;&#x961F;&#x5386;&#x53F2;&#x6548;&#x5E94;&#x76F8;&#x4F3C; (L selectinA108H) L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x9884;&#x8BA1;&#x8054;&#x7CFB;&#x524D;&#x8005;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x540E;&#x8005;&#x7684;&#x914D;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x9AD8;&#x531D;&#x9053;&#x7387;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F15;&#x8D77;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x6027;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5728; L-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20; A108H &#x66FF;&#x4EE3;&#x6D88;&#x9664;&#x5761;&#x9053; PSGL 1 &#x4ECE;&#x5176;&#x5206;&#x89E3;&#x7387;&#x4F5C;&#x51FA;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x9006;&#x7A81;&#x53D8; H108A P-&#x9009;&#x62E9;&#x7D20;&#x5728;&#x540E;&#x5929;&#x531D;&#x9053;&#x7387;&#x54CD;&#x5E94;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x5F88;&#x597D;&#x7684;&#x6269;&#x5C55;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5305;&#x62EC;&#x9644;&#x52A0;&#x529B;&#x5386;&#x53F2;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#xFF0C;&#x4E0E; Ala 108 &#x5728;&#x6B64;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x65B9;&#x9762;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6E14;&#x83B7;&#x7269;&#x6ED1;&#x503A;&#x5238;&#x7684;&#x6ED1;&#x52A8;&#x91CD;&#x65B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6A21;&#x578B;&#x89E3;&#x91CA;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x547C;&#x5401;&#x5EFA;&#x6A21;&#x673A;&#x68B0;&#x8C03;&#x8282;&#x53D7;&#x4F53;-&#x914D;&#x4F53;&#x503A;&#x5238;&#x5206;&#x79BB;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x53E3;&#x888B;&#x548C;&#x504F;&#x8FDC;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x8303;&#x5F0F;&#x8F6C;&#x53D8;&#x3002;

Catch &#x503A;&#x5238;&#x6240;&#x7387;&#x90E8;&#x961F;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;

The current paradigm for receptor-ligand dissociation kinetics assumes off-rates as functions of instantaneous force without impact from its prior history. This a priori assumption is the foundation for predicting dissociation from a given initial state using kinetic equations. Here we have invalidated this assumption by demonstrating the impact of force history with single-bond kinetic experiments involving selectins and their ligands that mediate leukocyte tethering and rolling on vascular surfaces during inflammation. Dissociation of bonds between L-selectin and P-selectin glycoprotein ligand-1 (PSGL-1) loaded at a constant ramp rate to a constant hold force behaved as catch-slip bonds at low ramp rates that transformed to slip-only bonds at high ramp rates. Strikingly, bonds between L-selectin and 6-sulfo-sialyl Lewis X were impervious to ramp rate changes. This ligand-specific force history effect resembled the effect of a point mutation at the L-selectin surface (L-selectinA108H) predicted to contact the former but not the latter ligand, suggesting that the high ramp rate induced similar structural changes as the mutation. Although the A108H substitution in L-selectin eliminated the ramp rate responsiveness of its dissociation from PSGL-1, the inverse mutation H108A in P-selectin acquired the ramp rate responsiveness. Our data are well explained by the sliding-rebinding model for catch-slip bonds extended to incorporate the additional force history dependence, with Ala-108 playing a pivotal role in this structural mechanism. These results call for a paradigm shift in modeling the mechanical regulation of receptor-ligand bond dissociation, which includes conformational coupling between binding pocket and remote regions of the interacting molecules.

Regulation of catch bonds by rate of force application.

Le paradigme actuel pour le r&#xE9;cepteur-ligand cin&#xE9;tique de dissociation suppose hors-taux en fonction de la force instantan&#xE9;e sans l&#x26;#39;impact de son histoire ant&#xE9;rieure. Cette hypoth&#xE8;se a priori est le fondement pour pr&#xE9;dire la dissociation d&#x26;#39;un &#xE9;tat initial donn&#xE9; en utilisant les &#xE9;quations cin&#xE9;tiques. Ici, nous avons invalid&#xE9; cette hypoth&#xE8;se en d&#xE9;montrant l&#x26;#39;impact de l&#x26;#39;histoire vigueur avec un seul obligataires exp&#xE9;riences de cin&#xE9;tique impliquant s&#xE9;lectines et leurs ligands qui interviennent dans des leucocytes attacher et roule sur des surfaces vasculaires au cours de l&#x26;#39;inflammation. La dissociation des liens entre la L-s&#xE9;lectine et la P-s&#xE9;lectine glycoprot&#xE9;ine ligand-1 (PSGL-1) charg&#xE9; &#xE0; un taux de rampe constante &#xE0; une force de maintien constant se sont comport&#xE9;s comme attrape-glisseraient des obligations &#xE0; taux rampe basse, qui ont transform&#xE9; de glisser-seulement des liaisons &#xE0; haut Les taux de rampe. Il est frappant, les liens entre la L-s&#xE9;lectine et 6-sulfo-sialyl Lewis X &#xE9;taient imperm&#xE9;ables &#xE0; la rampe changements de taux. Cet effet sp&#xE9;cifique du ligand vigueur l&#x26;#39;histoire ressemblait &#xE0; l&#x26;#39;effet d&#x26;#39;une mutation ponctuelle au niveau de la surface de L-s&#xE9;lectine (L-selectinA108H) pr&#xE9;dit &#xE0; contacter l&#x26;#39;ancien, mais pas le ligand-ci, ce qui sugg&#xE8;re que le taux de rampe haute induite similaires changements structurels que la mutation. Bien que la substitution A108H &#xE0; L-s&#xE9;lectine &#xE9;limin&#xE9; la r&#xE9;activit&#xE9; taux de rampe de sa dissociation de PSGL-1, l&#x26;#39;H108A mutation inverse dans la P-s&#xE9;lectine acquis le taux de rampe r&#xE9;activit&#xE9;. Nos donn&#xE9;es sont bien expliqu&#xE9;s par le mod&#xE8;le coulissant reconsolidation pour la capture-d&#xE9;rapants obligations &#xE9;tendues &#xE0; incorporer la d&#xE9;pendance force suppl&#xE9;mentaire histoire, avec Ala-108 joue un r&#xF4;le pivot dans ce m&#xE9;canisme structurel. Ces r&#xE9;sultats appellent un changement de paradigme dans la mod&#xE9;lisation de la r&#xE9;gulation m&#xE9;canique de r&#xE9;cepteur-ligand dissociation de la liaison, qui comprend le couplage conformationnel entre poche de liaison et les r&#xE9;gions &#xE9;loign&#xE9;es des mol&#xE9;cules en interaction.

R&#xE8;glement des Obligations par Catch Taux d&#x26;#39;application de force

Das aktuelle Paradigma f&uuml;r Rezeptor-Ligand-Dissoziation-Kinetik &uuml;bernimmt ab-Preise als Funktionen der momentanen Kraft ohne Auswirkung von seiner vorherigen Geschichte. Dieser a priori Annahme ist die Grundlage f&uuml;r die Vorhersage von Dissoziation von einer gegebenen Ausgangszustand mit kinetische Gleichungen. Hier haben wir diese Vermutung entkr&auml;ftet, durch den Nachweis der Auswirkungen der Kraft Geschichte mit Einzelbindung kinetischen Experimenten mit Selectins und ihrer Liganden, die Leukozyten Anbindehaltung und Rollen auf vaskul&auml;re Oberfl&auml;chen w&auml;hrend der Entz&uuml;ndung zu vermitteln. Dissoziation der Bande zwischen L-selectin und P-selectin Glykoprotein Ligand-1 (PSGL-1) geladen mit einer Konstante Ramp-Rate einer konstant halten-Kraft benommen als Fang rutschfesten Anleihen zu niedrigen Rampe-Preise, die zu slip-only Preisen hohe Rampe bonds umgewandelt. Auff&auml;llig ist, wurden die Bindungen zwischen L-selectin und 6-Sulfo-Sialyl-Lewis-X unempfindlich gegen Rampe Tarif&auml;nderungen. Dieser Ligand-spezifische Kraft-Geschichte-Effekt glich die Wirkung einer Punkt-Mutation bei der L-selectin Oberfl&auml;che (L-selectinA108H) Kontakt, erstere aber nicht die letztere Ligand, was darauf hindeutet, dass die hohe Rampe-Rate &auml;hnliche strukturelle Ver&auml;nderungen als die Mutation induzierte vorhergesagt. Obwohl die A108H Substitution in L-selectin die Rampe Tarif Reaktionsf&auml;higkeit der Dissoziation von PSGL-1 beseitigt, erwarb die inverse Mutation H108A in P-selectin die Rampe Tarif Reaktionsf&auml;higkeit. Unsere Daten sind durch das Schiebe-Neubindung Modell f&uuml;r Fang rutschfesten Anleihen um erweitert die zus&auml;tzliche Kraft-Geschichte-Abh&auml;ngigkeit mit Ala-108 spielen eine Schl&uuml;sselrolle in diesem struktureller Mechanismus gut erkl&auml;rt. Diese Ergebnisse fordern einen Paradigmenwechsel bei der Modellierung der mechanischen Regulierung der Rezeptor-Ligand-Bond-Dissoziation, die Konformations&auml;nderungen Kopplung zwischen Bindung Tasche und abgelegenen Regionen der interagierende Molek&uuml;le enth&auml;lt.

Verordnung von Catch-Anleihen Aufwandmenge Kraft.

Il paradigma corrente per la cinetica di dissociazione del recettore-ligando si presuppone off-tariffe come funzioni della forza istantanea senza impatto dalla sua storia precedente. Questo a priori presupposto &egrave; il fondamento per la previsione di dissociazione da un determinato stato iniziale utilizzando le equazioni cinetiche. Qui noi abbiamo invalidato questa ipotesi dimostrando l&#39;impatto della storia di forza con singolo legame cinetici esperimenti che coinvolgono le selectine e loro ligandi che mediano del leucocita tethering e rotolamento su superfici vascolari durante l&#39;infiammazione. Dissociazione dei legami tra L-selectina e P-Selectina glicoproteina legante-1 (PSGL-1) caricato ad un tasso costante rampa per una forza costante attesa si sono comportati come catch-slip obbligazioni a tassi di rampa basso trasformano in slip-only obbligazioni a tassi elevati rampa. Sorprendentemente, legami tra L-selectina e 6-sulfo-sialil Lewis X erano insensibile a variazioni dei tassi di rampa. Questo effetto di forza specifico ligando storia somigliava l&#39;effetto di una mutazione puntiforme in superficie L-selectina (L-selectinA108H) previsto a contatto con l&#39;ex, ma non il ligando quest&#39;ultimo, suggerendo che la velocit&agrave; di rampa alta indotta da cambiamenti strutturali simili come la mutazione. Sebbene la sostituzione A108H in L-selectina eliminata la reattivit&agrave; del tasso di rampa della sua dissociazione da PSGL-1, la mutazione inversa H108A P-Selectina acquis&igrave; la reattivit&agrave; del tasso di rampa. I nostri dati sono ben spiegati dal modello di riassociazione scorrevole per catch-slip obbligazioni esteso per includere la dipendenza dalla storia forza supplementare, con Ala-108 gioca un ruolo fondamentale in questo meccanismo strutturale. Questi risultati chiamano per un cambiamento di paradigma nel modellare la regolazione meccanica di dissociazione di legame recettore-ligando, che comprende conformazionale accoppiamento tra associazione tasca e remote regioni delle molecole interagenti.

Regolamento delle obbligazioni di fermo dal tasso di applicazione della forza.

&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; - &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x89E3;&#x96E2;&#x53CD;&#x5FDC;&#x901F;&#x5EA6;&#x8AD6;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x524D;&#x306E;&#x6B74;&#x53F2;&#x304B;&#x3089;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x77AC;&#x767A;&#x529B;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30AA;&#x30D5;&#x7387;&#x3092;&#x524D;&#x63D0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5148;&#x9A13;&#x7684;&#x306A;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x65B9;&#x7A0B;&#x5F0F;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x521D;&#x671F;&#x72B6;&#x614B;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x76E4;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x708E;&#x75C7;&#x6642;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x7E4B;&#x7559;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5358;&#x7D50;&#x5408;&#x904B;&#x52D5;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3068;&#x529B;&#x306E;&#x6B74;&#x53F2;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3092;&#x7121;&#x52B9;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x529B;&#x306B;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#xB7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x6642;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3001;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;P-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;-1&#xFF08;PSGL-1&#xFF09;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x307F;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x9AD8;&#x901F;&#x3067;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4F4E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#xB7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30C3;&#x30C1;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30B9;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7;&#x50B5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6319;&#x52D5;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#xB7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;6&#x30B9;&#x30EB;&#x30DB;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x30EB;&#x30A4;&#x30B9;X&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x4E0A;&#x6607;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x6D78;&#x900F;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x529B;&#x306E;&#x5C65;&#x6B74;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x70B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF08;L-selectinA108H&#xFF09;&#x9AD8;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#xB7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x524D;&#x8005;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x9023;&#x7D61;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x305F;&#x3002; L-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;A108H&#x7F6E;&#x63DB;&#x306F;PSGL-1&#x304B;&#x3089;&#x89E3;&#x96E2;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#xB7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;P-&#x30BB;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x9006;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;H108A&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#xB7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x5341;&#x5206;&#x306B;ALA-108&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7684;&#x306A;&#x529B;&#x306E;&#x5C65;&#x6B74;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x62E1;&#x5F35;&#x30AD;&#x30E3;&#x30C3;&#x30C1;&#x30B9;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7;&#x50B5;&#x306E;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x5408;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x9060;&#x9694;&#x5730;&#x57DF;&#x9593;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; - &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x89E3;&#x96E2;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3068;&#x547C;&#x3073;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30B9;&#xB7;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30AD;&#x30E3;&#x30C3;&#x30C1;&#x793E;&#x50B5;&#x306E;&#x898F;&#x5236;

&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ligand &#xBD84;&#xB9AC; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784; &#xC774;&#xC804; &#xC5ED;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xC989;&#xAC01;&#xC801;&#xC778; &#xD798;&#xC758; &#xD568;&#xC218;&#xB85C; &#xC624;&#xD504; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC00;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC120;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC00;&#xC815; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xBC29;&#xC815;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xB41C; &#xCD08;&#xAE30; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC608;&#xCE21;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAE30;&#xCD08;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBCF8;&#xB4DC; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC2E4;&#xD5D8; selectins&#xACFC; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xBC27;&#xC904;&#xB85C; &#xB9E4; &#xACE0; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD608;&#xAD00; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC555; &#xC5F0; &#xC911;&#xC7AC; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; ligands &#xD798; &#xC5ED;&#xC0AC;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC785;&#xC99D; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368;&#xC774; &#xAC00;&#xC815; &#xBB34;&#xD6A8;&#xD654;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;. L selectin &#xBC0F; P selectin &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;-1 (PSGL-1) &#xC77C;&#xC815; &#xC7A1;&#xC544; &#xAC15;&#xC81C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xC218; &#xC9C4;&#xC785; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xB85C;&#xB4DC; &#xAC04;&#xC758; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBCC0;&#xD615; slip-only &#xB192;&#xC740; &#xB7A8;&#xD504; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC744; &#xB0AE;&#xC740; &#xC9C4;&#xC785; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; catch &#xC2AC;&#xB9BD; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC73C;&#xB85C; &#xD589;&#xB3D9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE30; &#xB9C9;&#xD788;&#xAC8C;, L selectin &#xBC0F; 6-sulfo-sialyl &#xB8E8;&#xC774;&#xC2A4; X &#xC0AC;&#xC774; &#xCC44;&#xAD8C; &#xB7A8;&#xD504; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xBA39; &#xD78C; &#xB2E4; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ligand &#xAD00;&#xB828; &#xD3EC;&#xC2A4; &#xC5ED;&#xC0AC; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC774; &#xB2EE;&#xC740; &#xC804; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294; &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;, &#xB192;&#xC740; &#xC9C4;&#xC785; &#xBE44;&#xC728; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xB85C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C; &#xC81C;&#xC548; &#xBB38;&#xC758; &#xC804;&#xB9DD; L selectin &#xD45C;&#xBA74; (L-selectinA108H)&#xC5D0; &#xC810; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;. L selectin&#xC5D0; A108H &#xB300;&#xCCB4; PSGL-1&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC758; &#xB7A8;&#xD504; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC751;&#xB2F5; &#xD0C8;&#xB77D;, &#xBE44;&#xB85D; P selectin&#xC5D0; &#xC5ED; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; H108A &#xB7A8;&#xD504; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC778;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC798; &#xCE90;&#xCE58; &#xC2AC;&#xB9BD; &#xCC44;&#xAD8C; Ala-108&#xC774; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xCD94;&#xAC00; &#xD798; &#xC5ED;&#xC0AC; &#xC758;&#xC874;&#xB3C4; &#xD1B5;&#xD569; &#xD655;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB529; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xBA85; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC8FC;&#xBA38;&#xB2C8;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC6D0;&#xACA9; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xAC04;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xACB0;&#xD569; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4;&#xC2DD; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD638;&#xCD9C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAC15;&#xC81C;&#xB85C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; catch &#xCC44;&#xAD8C; &#xADDC;&#xC815;.

El paradigma actual de la disociaci&#xF3;n del receptor-ligando la cin&#xE9;tica asume frente a las tasas en funci&#xF3;n de la fuerza instant&#xE1;nea, sin impacto de su historia previa. Esta hip&#xF3;tesis, a priori, es la base para la predicci&#xF3;n de la disociaci&#xF3;n de un estado inicial dado mediante ecuaciones cin&#xE9;ticas. Aqu&#xED; se ha invalidado esta hip&#xF3;tesis al demostrar el impacto de la historia de la fuerza con un solo enlace experimentos cin&#xE9;ticos relacionados con selectinas y sus ligandos que intervienen en los leucocitos y la inmovilizaci&#xF3;n de rodar sobre superficies vasculares durante la inflamaci&#xF3;n. La disociaci&#xF3;n de los v&#xED;nculos entre la L-selectina y P-selectina ligando glicoprote&#xED;na-1 (PSGL-1) se cargan en una rampa constante a una fuerza constante de espera se comport&#xF3; como ponerse al deslizarse bonos a tasas bajas de rampa que transformaron a caer-tan s&#xF3;lo en bonos de alta las tasas de rampa. Sorprendentemente, los lazos entre la L-selectina y 6-sulfo-sialil Lewis X eran impermeables a la rampa cambios en las tasas. Este efecto de la fuerza ligando espec&#xED;fico de la historia se asemejaba al efecto de una mutaci&#xF3;n puntual en la superficie de L-selectina (L-selectinA108H) predijo en contacto con el primero pero no el ligando este &#xFA;ltimo, lo que sugiere que la velocidad de rampa de alta inducida similares cambios estructurales como la mutaci&#xF3;n. Aunque la sustituci&#xF3;n A108H en L-selectina eliminado la capacidad de respuesta velocidad de rampa de su disociaci&#xF3;n de PSGL-1, el H108A mutaci&#xF3;n inversa en P-selectina adquirido la capacidad de respuesta tipo rampa. Nuestros datos est&#xE1;n bien explicadas por el modelo de deslizamiento de reconsolidaci&#xF3;n de los bonos de deslizamiento de captura ampliado para incorporar la fuerza de la historia de la dependencia adicional, con Ala-108 juega un papel fundamental en este mecanismo estructural. Estos resultados exigen un cambio de paradigma en la modelizaci&#xF3;n de la regulaci&#xF3;n mec&#xE1;nica de la uni&#xF3;n ligando-receptor de disociaci&#xF3;n, que incluye acoplamiento conformacional entre vinculante de bolsillo y regiones remotas de las mol&#xE9;culas que interact&#xFA;an.

Veronika I. Zarnitsyna

Biomedical Engineering Department

Georgia Institute of Technology

Adhesion Frequency Assay for In Situ Kinetics Analysis of Cross-Junctional Molecular Interactions at the Cell-Cell Interface

Veronika I. Zarnitsyna

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Georgia Institute of Technology

Adhesion Frequency Assay for In Situ Kinetics Analysis of Cross-Junctional Molecular Interactions at the Cell-Cell Interface

Biomedical Engineering Department