Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

Hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) are two surface proteins of influenza viruses which are known to play important roles in the viral life cycle ...

Health Canada

&#x916E;&#x5EB7;&#x5511;&#x662F;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8BA2;&#x660E;&#x7684;&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x836F;&#x7269;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6297;&#x764C;&#x7597;&#x6CD5;&#x5728;&#x4E34;&#x5E8A;&#x548C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x524D;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E25;&#x91CD;&#x809D;&#x53D7;&#x4F24;&#x8981;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x916E;&#x5EB7;&#x5511;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x7ECF;&#x5E38;&#x76D1;&#x89C6;&#x5176;&#x809D;&#x810F;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x60A3;&#x8005;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x5173;&#x4E8E;&#x916E;&#x5EB7;&#x5511;&#x81F4;&#x809D;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x95EE;&#x9898;&#x4ECD;&#x7136;&#x6CA1;&#x6709;&#x7B54;&#x6848;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x916E;&#x5EB7;&#x5511; (1) &#x6CA1;&#x6709;&#x6539;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; p450 &#x6C27;&#x5316;&#x8868;&#x8FBE;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4E00;&#x7EA7;&#xFF1F;&#xFF0C;(2) &#x54EA;&#x4E9B;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x8D1F;&#x8D23;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x8BF1;&#x53D1;&#x916E;&#x5EB7;&#x5511;&#xFF1F;&#xFF0C;&#x548C;&#x4E3B;&#x8981;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269;&#x7684;&#x916E;&#x5EB7;&#x5511;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x75C5;&#x7406;&#x751F;&#x7406;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325; (3) &#x4EC0;&#x4E48;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF1F;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x88AB;&#x53D7;&#x96C7;&#x6765;&#x8C03;&#x67E5;&#x540E;&#x94C5;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x5242;&#x91CF;&#x916E;&#x5EB7;&#x5511;&#x7684;&#x809D;&#x810F;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x809D;&#x810F;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528; toxicogenomic &#x82AF;&#x7247;&#x5E73;&#x53F0;&#xFF0C;&#x7531;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684; cDNA &#x63A2;&#x9488;&#x4ECE;&#x809D;&#x810F;&#x906D;&#x53D7;&#x5404;&#x79CD; hepatoxicants &#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; hepatoxicants &#x5206;&#x4E3A;&#x4E94;&#x4E2A;&#x8D28;&#x91CF;&#x629B;&#x5C04;&#x7269;&#x7684;&#x6BD2;&#x7406;&#x5B66;&#x7C7B;&#x522B;&#xFF1A; &#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x3001; &#x82B3;&#x57FA;&#x70C3;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x3001; &#x5171;&#x9762;&#x7684;&#x591A;&#x6C2F;&#x8054;&#x82EF;&#x3001; &#x708E;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x7F3A;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5242;&#x3002;9 &#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x9176;&#x53C2;&#x4E0E;&#x9636;&#x6BB5;&#x6211;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x9636;&#x6BB5;&#x9176; (&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD; S-&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;) &#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x88AB;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684; 2364&#x5E74;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x57FA;&#x56E0;&#x8840;&#x6E05;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x86CB;&#x767D; (SAA1/2&#xFF09; &#x548C;&#x94C1;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5206;&#x6790;&#x53D1;&#x73B0; SAA &#x548C;&#x94C1;&#x4E0E;&#x916E;&#x5EB7;&#x5511;&#x3001; &#x4E00;&#x822C;&#x6BD2;&#x6027;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5E7F;&#x4E49;&#x4EE3;&#x7406;&#x9879;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x6BD2;&#x7269;&#x6240;&#x81F4;&#x809D;&#x635F;&#x4F24;&#x8FDB;&#x884C;&#x6709;&#x76CA;&#x7684;&#x63A2;&#x8BA8;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6240;&#x793A;&#x521D;&#x7EA7;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269;&#x916E;&#x5EB7;&#x5511; (&#x5FB7;-N-&#x4E59;&#x9170;&#x57FA;&#x916E;&#x5EB7;&#x5511;) &#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x8D1F;&#x8D23;&#x809D;&#x810F;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x4E0B;&#x8C03;&#x7684; SAA &#x548C;&#x94C1;&#x3002;

&#x916E;&#x5EB7;&#x5511;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x5242;&#x91CF;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x7684;&#x809D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Ketoconazole is a widely prescribed antifungal drug, which has also been investigated as an anticancer therapy in both clinical and pre-clinical settings. However, severe hepatic injuries were reported to be associated with the use of ketoconazole, even in patients routinely monitored for their liver functions. Several questions concerning ketoconazole-induced hepatic injury remain unanswered, including (1) does ketoconazole alter cytochrome P450 expression at the transcriptional level?, (2) what types of gene products responsible for cytotoxicity are induced by ketoconazole?, and (3) what role do the major metabolites of ketoconazole play in this pathophysiologic process? A mouse model was employed to investigate hepatic gene expression following hepatotoxic doses of ketoconazole. Hepatic gene expression was analyzed using a toxicogenomic microarray platform, which is comprised of cDNA probes generated from livers exposed to various hepatoxicants. These hepatoxicants fall into five well-studied toxicological categories: peroxisome proliferators, aryl hydrocarbon receptor agonists, noncoplanar polychlorinated biphenyls, inflammatory agents, and hypoxia-inducing agents. Nine genes encoding enzymes involved in Phase I metabolism and one Phase II enzyme (glutathione S-transferase) were found to be upregulated. Serum amyloid A (SAA1/2) and hepcidin were the only genes that were downregulated among the 2364 genes assessed. In vitro cytotoxicity and transcription analyses revealed that SAA and hepcidin are associated with the general toxicity of ketoconazole, and might be usefully explored as generalized surrogate markers of xenobiotic-induced hepatic injury. Finally, it was shown that the primary metabolite of ketoconazole (de-N-acetyl ketoconazole) is largely responsible for the hepatoxicity and the downregulation of SAA and hepcidin.

Cytotoxic doses of ketoconazole affect expression of a subset of hepatic genes.

Le k&#xE9;toconazole est un m&#xE9;dicament antifongique largement prescrit, qui a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9; comme th&#xE9;rapie anticanc&#xE9;reuse dans les param&#xE8;tres cliniques et pr&#xE9;-clinique. Cependant, les blessures h&#xE9;patiques s&#xE9;v&#xE8;res ont &#xE9;t&#xE9; signal&#xE9;s &#xE0; &#xEA;tre associ&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;utilisation du k&#xE9;toconazole, m&#xEA;me chez les patients r&#xE9;guli&#xE8;rement suivis pour leurs fonctions h&#xE9;patiques. Plusieurs questions relatives &#xE0; une atteinte h&#xE9;patique induite par le k&#xE9;toconazole-restent en suspens, y compris (1) ne modifie k&#xE9;toconazole cytochrome P450 expression au niveau transcriptionnel?, (2) quels types de produits de g&#xE8;nes responsables de la cytotoxicit&#xE9; induite par le k&#xE9;toconazole sont?, Et (3) quel est le r&#xF4;le faire les principaux m&#xE9;tabolites de jeu k&#xE9;toconazole dans ce processus physiopathologique? Un mod&#xE8;le de souris a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour &#xE9;tudier l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes h&#xE9;patiques apr&#xE8;s administration de doses h&#xE9;patotoxiques de k&#xE9;toconazole. L&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne h&#xE9;patique est analys&#xE9; en utilisant une plate-forme micror&#xE9;seau toxicog&#xE9;nomique, qui est constitu&#xE9; de sondes d&#x26;#39;ADNc provenant des foies expos&#xE9;s &#xE0; h&#xE9;patotoxiques diff&#xE9;rents. Ces h&#xE9;patotoxiques se r&#xE9;partissent en cinq cat&#xE9;gories bien &#xE9;tudi&#xE9;s toxicologiques: prolif&#xE9;rateurs de peroxysomes, aryle agonistes des r&#xE9;cepteurs des hydrocarbures, non coplanaires des biph&#xE9;nyles polychlor&#xE9;s, des agents inflammatoires, et l&#x26;#39;hypoxie induisant des agents. Neuf g&#xE8;nes codant pour des enzymes impliqu&#xE9;es dans la phase I du m&#xE9;tabolisme et une &#xE9;tude de phase II enzyme (la glutathion S-transf&#xE9;rase) ont &#xE9;t&#xE9; jug&#xE9;s r&#xE9;gul&#xE9;s &#xE0; la hausse. S&#xE9;rum amylo&#xEF;de A (SAA1 / 2) et l&#x26;#39;hepcidine ont &#xE9;t&#xE9; les seuls g&#xE8;nes qui &#xE9;taient r&#xE9;gul&#xE9;s &#xE0; la baisse parmi les 2364 g&#xE8;nes &#xE9;valu&#xE9;s. En cytotoxicit&#xE9; in vitro et des analyses de transcription a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que la SAA et l&#x26;#39;hepcidine sont associ&#xE9;es &#xE0; la toxicit&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;rale du k&#xE9;toconazole, et pourrait &#xEA;tre utilement explor&#xE9;e comme g&#xE9;n&#xE9;ralis&#xE9;es des marqueurs de substitution de l&#xE9;sion h&#xE9;patique induite par des x&#xE9;nobiotiques. Enfin, il a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; que le m&#xE9;tabolite principal de k&#xE9;toconazole (d&#xE9;-N-ac&#xE9;tyl k&#xE9;toconazole) est largement responsable de l&#x26;#39;h&#xE9;patotoxicit&#xE9; et la r&#xE9;gulation &#xE0; la baisse de la SAA et l&#x26;#39;hepcidine.

Des doses cytotoxiques de k&#xE9;toconazole affectent l&#x26;#39;expression d&#x26;#39;un sous-ensemble de g&#xE8;nes h&#xE9;patiques

Ketoconazol ist ein h&auml;ufig verschriebenen antimykotischen Medikament, das auch als ein Anti-Krebs-Therapie in klinischen und vorklinischen erforscht hat. Jedoch wurden schwere Lebersch&auml;digungen berichtet, verbunden mit dem Einsatz von Ketoconazol, selbst bei Patienten, die regelm&auml;&szlig;ig f&uuml;r ihre Leberfunktion &uuml;berwacht werden. Mehrere Fragen zu Ketoconazol-induzierte hepatische Verletzungen bleiben unbeantwortet, einschlie&szlig;lich (1) bedeutet Ketoconazol alter Cytochrom P450-Ausdruck auf die transkriptionelle Ebene?, (2) welche Arten von Genprodukten, die verantwortlich f&uuml;r die Zytotoxizit&auml;t von Ketoconazol umweltbedingt sind?, und (3) welche Rolle spielen die wichtigsten Metaboliten von Ketoconazol schmerztherapeutisch dabei? Einem Mausmodell wurde eingesetzt, um die hepatische Genexpression nach hepatotoxische Dosen von Ketoconazol untersuchen. Hepatische Genexpression wurde mit eine toxikogenomische-Microarray-Plattform, die aus DNA-Sonden generiert aus Leber, verschiedenen Hepatoxicants ausgesetzt besteht analysiert. Diese Hepatoxicants lassen sich in f&uuml;nf gut erforscht toxikologischen Kategorien: Peroxisom Atomm&auml;chte, Aryl-Hydrocarbon-Rezeptor-Agonisten noncoplanar polychlorierte Biphenyle, entz&uuml;ndliche Agenten und Hypoxie-induzierende Agenten. Neun Gene Kodierung Enzyme beteiligt Phase I Metabolismus und eine Phase-II-Enzym (Glutathion S-Transferase) wurden gefunden, um herraufreguliert zu werden. Serum-Amyloid A (SAA1/2) und Hepcidin waren die einzige Gene, die Downregulated unter den 2364 Genen beurteilt wurden. In-vitro-Zytotoxizit&auml;t und Transkription-Analysen ergaben, dass SAA Hepcidin verkn&uuml;pft mit der allgemeinen Toxizit&auml;t von Ketoconazol sind und sinnvollerweise als generalisierte Surrogat-Marker Xenobiotikum-induzierte hepatische Verletzungsgefahr erkundet werden k&ouml;nnte. Schlie&szlig;lich konnte gezeigt werden, dass der prim&auml;re Metabolit von Ketoconazol (de-N-Acetyl-Ketoconazol) weitgehend verantwortlich f&uuml;r die Hepatoxicity und die Heraufregulation des SAA und Hepcidin ist.

Zytotoxische Dosen von Ketoconazol beeinflussen Ausdruck einer Teilmenge der Leber Gene.

Ketoconazolo &egrave; un farmaco antifungino ampiamente prescritto, che &egrave; stato studiato anche come terapia antitumorale in contesti clinici e preclinici. Tuttavia, gravi lesioni epatiche sono stati segnalati per essere associati con l&#39;uso di ketoconazolo, anche in pazienti monitorati regolarmente per le funzioni del fegato. Alcune domande riguardanti la lesione epatica indotta da ketoconazolo rimangono senza risposta, inclusi ketoconazolo (1) fa alterare l&#39;espressione del citocromo P450 a livello trascrizionale?, (2) quali tipi di prodotti del gene responsabile della citotossicit&agrave; sono indotte da ketoconazolo?, e (3) ci&ograve; che i principali metaboliti di ketoconazolo ruolo in questo processo patofisiologici? Un modello del mouse &egrave; stato impiegato per indagare l&#39;espressione di gene epatico seguito epatotossici dosi di ketoconazolo. Espressione genica epatica &egrave; stato analizzato utilizzando una piattaforma microarray toxicogenomic, che &egrave; composto da sonde cDNA generate dai fegati esposti a vari hepatoxicants. Questi hepatoxicants si dividono in cinque categorie tossicologiche ben studiate: proliferatori dei perossisomi, agonisti del recettore di Aril idrocarburi, noncoplanar i bifenili policlorurati, agenti infiammatori e agenti che inducono ipossia. Nove geni che codificano enzimi coinvolti nella fase I metabolismo e un enzima di fase II (glutatione S-transferasi) sono stati trovati per essere sovraregolato. Siero amiloide (SAA1/2) ed epcidina erano soli geni che erano downregolata tra i 2364 geni valutati. Analisi di citotossicit&agrave; e trascrizione in vitro hanno rivelato che SAA epcidina sono associati con la tossicit&agrave; generale del ketoconazolo e potrebbe essere utilmente esplorato come marker surrogato generalizzata della lesione epatica indotta da xenobiotici. Infine, &egrave; stato dimostrato che il metabolita primario del ketoconazolo (de-N-acetil Ketoconazolo) &egrave; in gran parte responsabile per l&#39;epatotossicit&agrave; e la downregulation della SAA e di epcidina.

Citotossici dosi di ketoconazolo possono influenzare l&#39;espressione di un sottoinsieme dei geni epatiche.

&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x524D;&#x81E8;&#x5E8A;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x6297;&#x764C;&#x6CBB;&#x7642;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x5E83;&#x304F;&#x51E6;&#x65B9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6297;&#x771F;&#x83CC;&#x85AC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x809D;&#x969C;&#x5BB3;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x65E5;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x809D;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x809D;&#x969C;&#x5BB3;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7591;&#x554F;&#x304C;&#x672A;&#x89E3;&#x6C7A;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3001;&#xFF08;1&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x30C1;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;P450&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5909;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x304B;&#xFF1F;&#x3001;&#xFF08;2&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306F;&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#xFF1F;&#x3001;&#xFF08;3&#xFF09;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x614B;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x5287;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x304B;&#xFF1F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x809D;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x6295;&#x4E0E;&#x5F8C;&#x306B;&#x809D;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7528;&#x3044;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;hepatoxicants&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x809D;&#x81D3;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;cDNA&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B3;&#x30B2;&#x30CE;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x89E3;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5897;&#x6B96;&#x5264;&#x3001;&#x30A2;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EB;&#x70AD;&#x5316;&#x6C34;&#x7D20;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x540C;&#x4E00;&#x5E73;&#x9762;&#x4E0A;&#x306B;&#x306A;&#x3044;&#x30DD;&#x30EA;&#x5869;&#x5316;&#x30D3;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x3001;&#x708E;&#x75C7;&#x5264;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x5264;&#xFF1A;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;hepatoxicants&#x306F;&#x3001;5&#x3064;&#x306E;&#x3088;&#x304F;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B4;&#x30EA;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;I&#x4EE3;&#x8B1D;&#x304A;&#x3088;&#x3073;1&#x306E;&#x7B2C;II&#x76F8;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;S-&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF09;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30CA;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x4E0A;&#x65B9;&#x5236;&#x5FA1;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x6E05;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;A&#xFF08;SAA1 / 2&#xFF09;&#x3068;&#x30D8;&#x30D7;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x8A55;&#x4FA1;2364&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x307F;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;SAA&#x3068;&#x30D8;&#x30D7;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x306F;&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x6BD2;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x6709;&#x7528;&#x751F;&#x4F53;&#x7570;&#x7269;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x809D;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x4EE3;&#x7406;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;&#x8131;N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF09;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7269;&#x306F;&#x809D;&#x6BD2;&#x6027;&#x3068;SAA&#x3068;&#x30D8;&#x30D7;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x30B1;&#x30C8;&#x30B3;&#x30CA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x7528;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x809D;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;

Ketoconazole &#xC784;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xD55C;&#xAD6D;&#xB0B4; &#xC124;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD56D; &#xC554; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB85C; &#xC11C;&#xB3C4; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xCC98;&#xBC29;&#xB41C; &#xD56D;&#xC9C4;&#xADE0; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC2EC;&#xD55C; &#xAC04;&#xC7A5; &#xBD80;&#xC0C1; ketoconazole, &#xD658;&#xC790;&#xB294; &#xC815;&#xAE30;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB420; &#xBCF4;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC04;&#xC7A5; &#xBD80;&#xC0C1; ketoconazole &#xC720;&#xB3C4; &#xAD00;&#xD55C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB2F5;&#xC774; &#xB0A8;&#xC544;, &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; P450 &#xC2DD; transcriptional &#xC218;&#xC900; &#xBCC0;&#xACBD; (1) &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; ketoconazole &#xB4F1;?, (2) &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488; ketoconazole&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4;?, ketoconazole&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C; pathophysiologic &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB180;&#xC774; &#xD560; &#xD558; (3) &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC5ED;&#xD560;? &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; ketoconazole hepatotoxic &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xACE0;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC04;&#xC7A5; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xAC04; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; hepatoxicants&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; cDNA &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; toxicogenomic microarray &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; hepatoxicants 5 &#xC774;&#xC57C;&#xAE30;&#xB3C4; &#xB3C5;&#xC131; &#xD559;&#xC801; &#xBC94;&#xC8FC;&#xB85C;&#xC744;: peroxisome proliferators, aryl &#xD0C4; &#xD654; &#xC218;&#xC18C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; agonists, noncoplanar &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC5FC;&#xD654; &#xBE44;&#xD398;&#xB2D0;, &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; hypoxia &#xC720;&#xBC1C;. &#xB2E8;&#xACC4; &#xB098; &#xB300;&#xC0AC; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD558;&#xB294; 9 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4; II &#xD6A8;&#xC18C; (glutathione S-&#xC804;&#xC774;) upregulated &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD608; &#xCCAD; &#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; (SAA1/2)&#xC640; hepcidin &#xD3C9;&#xAC00; 2364 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; downregulated &#xD588;&#xB2E4; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCCB4; &#xC678; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131; &#xBC0F; &#xC804;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; SAA&#xC640; hepcidin ketoconazole, &#xC77C;&#xBC18; &#xB3C5;&#xC131; &#xC5F0;&#xAD00; &#xBC0F; &#xAC04;&#xC7A5; &#xBD80;&#xC0C1; xenobiotic &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xD654; &#xB41C; &#xB300;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB85C; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558; &#xAC8C; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xB420; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xADF8;&#xAC83; ketoconazole (&#xB370;-N-acetyl ketoconazole)&#xC758; 1 &#xCC28; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C;&#xB294; hepatoxicity &#xBC0F; &#xB0A8;&#xC544;&#xD504;&#xB9AC;&#xCE74;&#xC640; hepcidin downregulation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;.

Ketoconazole cytotoxic &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBD80;&#xBD84; &#xC9D1;&#xD569;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El ketoconazol es un f&#xE1;rmaco ampliamente prescrito antif&#xFA;ngico, que tambi&#xE9;n ha sido investigado como un tratamiento contra el c&#xE1;ncer en entornos cl&#xED;nicos y precl&#xED;nicos. Sin embargo, las lesiones hep&#xE1;ticas graves se inform&#xF3; que se asocia con el uso de ketoconazol, incluso en pacientes controla habitualmente para sus funciones hep&#xE1;ticas. Varias de las preguntas relativas a ketoconazol da&#xF1;o hep&#xE1;tico inducido siguen sin respuesta, incluyendo (1) se ketoconazol alterar la expresi&#xF3;n del citocromo P450 en el nivel de la transcripci&#xF3;n?, (2) qu&#xE9; tipos de productos de los genes responsables de la citotoxicidad inducida por el ketoconazol son?, Y (3) cu&#xE1;l es el papel ver los principales metabolitos de juego ketoconazol en este proceso fisiopatol&#xF3;gico? Un modelo de rat&#xF3;n fue empleado para investigar la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica hep&#xE1;tica despu&#xE9;s de dosis hepatot&#xF3;xicas de ketoconazol. La expresi&#xF3;n g&#xE9;nica intrahep&#xE1;tica se analiz&#xF3; utilizando una plataforma de microarrays toxicogen&#xF3;micos, que est&#xE1; compuesto de sondas de cDNA generados a partir de h&#xED;gados expuestos a hepatoxicants diferentes. Estos hepatoxicants se dividen en cinco categor&#xED;as bien estudiados toxicol&#xF3;gicos: proliferadores de peroxisomas, los agonistas del receptor de aril hidrocarburos, bifenilos policlorados coplanares, agentes inflamatorios y agentes inductores de la hipoxia. Nueve genes que codifican enzimas que participan en la Fase I del metabolismo y de una fase II de la enzima (glutati&#xF3;n S-transferasa) se encontraron upregulated. Amiloide A s&#xE9;rico (SAA1 / 2) y la hepcidina fueron los &#xFA;nicos genes que eran regulados a la baja entre los 2364 genes evaluados. En citotoxicidad in vitro de transcripci&#xF3;n y an&#xE1;lisis revel&#xF3; que la AEA y la hepcidina est&#xE1;n asociados con la toxicidad general de ketoconazol, y que podr&#xED;a ser &#xFA;til explorar como generalizadas marcadores de da&#xF1;o hep&#xE1;tico inducido por xenobi&#xF3;ticos. Por &#xFA;ltimo, se ha demostrado que el metabolito principal de ketoconazol (de-N-acetil ketoconazol) es en gran parte responsable de la hepatotoxicidad y la regulaci&#xF3;n a la baja de la AEA y la hepcidina.

Las dosis citot&#xF3;xicas de ketoconazol afecta a la expresi&#xF3;n de un subconjunto de los genes hep&#xE1;ticos

La sindrome respiratoria acuta grave (SARS) &egrave; una malattia contagiosa che ha ucciso centinaia e ammalare migliaia di persone in tutto il mondo tra il novembre 2002 e luglio 2003. La proteina del nucleocapside (N) del coronavirus responsabile di questa malattia gioca un ruolo critico nell&#39;assemblaggio virale e la maturazione ed &egrave; di particolare interesse a causa del suo potenziale come candidato target o vaccino antivirale. Ripiegamento della proteina SARS N durante la produzione e purificazione, hanno mostrato la presenza di due bande di proteina supplementare da SDS-PAGE. Spettroscopia di massa (MALDI, software e LC/MS) ha confermato che le bande sono proteolitici prodotti di N-proteina e i siti di clivaggio sono quattro motivi SR nei ricchi di serina-arginina regione-siti non suggestivi di qualsiasi nota proteasi. Inoltre, risultati delle prove successive di contaminanti protease(s) erano negativi: scissione sembra essere dovuto instabilit&agrave; inerente e/o autolisi. L&#39;importanza della proteolisi N-proteina a ciclo di vita virale e quindi di indicazioni di trattamento possibili sono discussi.

Coronavirus SARS: insolito labilit&agrave; della proteina nucleocapsidica.

&#x4E25;&#x91CD;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7; &#xFF08;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#xFF09; &#x662F;&#x4EBA;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x4F20;&#x67D3;&#x75C5;&#xFF0C;&#x6740;&#x5BB3;&#x4E86;&#x6570;&#x767E;&#x540D;&#x5E76;&#x7206;&#x51FA;&#x6210;&#x5343;&#x4E0A;&#x4E07;&#x7684; 2002 &#x5E74; 11 &#x6708;&#x81F3; 2003 &#x5E74; 7 &#x6708;&#x4E16;&#x754C;&#x5404;&#x5730;&#x3002;&#x8D1F;&#x8D23;&#x8FD9;&#x4E00;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x6838;&#x8863;&#x58F3; (N) &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x75C5;&#x6BD2;&#x88C5;&#x914D;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7279;&#x522B;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5176;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x6216;&#x75AB;&#x82D7;&#x5019;&#x9009;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x5728;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7; N &#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x6027;&#x663E;&#x793A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6761;&#x5E26;&#x7684;&#x51DD;&#x80F6;&#x7535;&#x6CF3;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x8D28;&#x8C31; (&#x9A6C;&#x5C14;&#x8FEA;&#x3001; &#x82AF;&#x7247;&#x548C; LC/MS) &#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E50;&#x961F;&#x662F; N &#x86CB;&#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x4EA7;&#x7269;&#xFF0C;&#x5288;&#x88C2;&#x7AD9;&#x70B9;&#x662F;&#x56DB;&#x4E2A; SR &#x56FE;&#x6848;&#x4E2D;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x5BCC;&#x533A;-&#x7AD9;&#x70B9;&#x4E0D;&#x6697;&#x793A;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x6C61;&#x67D3; protease(s) &#x540E;&#x6765;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x5747;&#x4E3A;&#x9634;&#x6027;&#xFF1A; &#x5288;&#x88C2;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; &#x81EA;&#x6EB6;&#x3002;N &#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x751F;&#x547D;&#x5468;&#x671F;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x5411;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x8FDB;&#x884C;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x3002;

SARS &#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF1A; &#x4E0D;&#x5BFB;&#x5E38;&#x4E0D;&#x6838;&#x8863;&#x58F3;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

The severe acute respiratory syndrome (SARS) is a contagious disease that killed hundreds and sickened thousands of people worldwide between November 2002 and July 2003. The nucleocapsid (N) protein of the coronavirus responsible for this disease plays a critical role in viral assembly and maturation and is of particular interest because of its potential as an antiviral target or vaccine candidate. Refolding of SARS N-protein during production and purification showed the presence of two additional protein bands by SDS-PAGE. Mass spectroscopy (MALDI, SELDI, and LC/MS) confirmed that the bands are proteolytic products of N-protein and the cleavage sites are four SR motifs in the serine-arginine-rich region-sites not suggestive of any known protease. Furthermore, results of subsequent testing for contaminating protease(s) were negative: cleavage appears to be due to inherent instability and/or autolysis. The importance of N-protein proteolysis to viral life cycle and thus to possible treatment directions are discussed.

SARS coronavirus: unusual lability of the nucleocapsid protein.

Le syndrome respiratoire aigu s&#xE9;v&#xE8;re (SRAS) est une maladie contagieuse qui a tu&#xE9; des centaines et des milliers de personnes dans le monde &#xE9;c&#x153;ur&#xE9; entre Novembre 2002 et Juillet 2003. La nucl&#xE9;ocapside (N) des prot&#xE9;ines du coronavirus responsable de cette maladie joue un r&#xF4;le essentiel dans l&#x26;#39;assemblage viral et la maturation et est d&#x26;#39;un int&#xE9;r&#xEA;t particulier en raison de son potentiel en tant que cible antivirale ou d&#x26;#39;un candidat vaccin. Repliement du SRAS N-prot&#xE9;ine au cours de la production et la purification ont montr&#xE9; la pr&#xE9;sence de deux bandes de prot&#xE9;ines suppl&#xE9;mentaires par SDS-PAGE. La spectroscopie de masse (MALDI, SELDI, et LC / MS) a confirm&#xE9; que les bandes sont des produits prot&#xE9;olytiques de N-prot&#xE9;ine et les sites de clivage sont quatre motifs SR dans la s&#xE9;rine-arginine r&#xE9;gion riche en sites n&#x26;#39;indiquent pas de toute la prot&#xE9;ase connue. En outre, les r&#xE9;sultats des tests ult&#xE9;rieurs de contamination prot&#xE9;ase (s) se sont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9;s n&#xE9;gatifs: le clivage semble &#xEA;tre due &#xE0; l&#x26;#39;instabilit&#xE9; inh&#xE9;rente et / ou autolyse. L&#x26;#39;importance de la prot&#xE9;ine N prot&#xE9;olyse au cycle de vie virale et donc de directions possibles de traitement sont discut&#xE9;s.

Le coronavirus du SRAS: Labilit&#xE9; inhabituelle de la prot&#xE9;ine de nucl&#xE9;ocapside

Das schwere akute respiratorische Syndrom (SARS) ist eine ansteckende Krankheit, die get&ouml;tet, Hunderte und Tausende von Menschen weltweit von November 2002 bis Juli 2003 angewidert. Das Protein Nukleokapsid-(N) das Coronavirus verantwortlich f&uuml;r diese Krankheit spielt eine wichtige Rolle in der viralen Montage- und Reifung und ist von besonderem Interesse aufgrund seiner F&auml;higkeit als eine antivirale Ziel oder Impfstoff-Kandidat. R&uuml;ckfaltung von SARS-N-Protein w&auml;hrend der Produktion und Reinigung, zeigte die Anwesenheit von zwei zus&auml;tzliche Protein-Bands durch SDS-PAGE. Massenspektroskopie (MALDI, SELDI und LC/MS) best&auml;tigt, dass die Bands proteolytische Produkte des N-Proteins sind und die Spaltung-Standorte vier SR-Motive in der Serin-Arginin-Reich-St&auml;tten Region keine bekannten Protease andeutend sind. Dar&uuml;ber hinaus die Ergebnisse f&uuml;r den anschlie&szlig;enden Test f&uuml;r Protease(s) verunreinigen negativ waren: Spaltung scheint inh&auml;rente Instabilit&auml;t und/oder Autolyse zur&uuml;ckzuf&uuml;hren. Die Bedeutung der N-Protein Proteolyse viralen Lebenszyklus und damit m&ouml;gliche Behandlung Richtungen werden diskutiert.

SARS-Coronavirus: ungew&ouml;hnliche Labilit&auml;t des Nukleokapsid-Proteins.

&#x91CD;&#x75C7;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x5668;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;SARS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;2002&#x5E74;11&#x6708;2003&#x5E74;7&#x6708;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x4E16;&#x754C;&#x4E2D;&#x3067;&#x4F55;&#x767E;&#x4EBA;&#x3082;&#x306E;&#x4EBA;&#x3005;&#x3068;&#x75C5;&#x6C17;&#x306B;&#x4F55;&#x5343;&#x4EBA;&#x3082;&#x304C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3057;&#x305F;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#xFF08;N&#xFF09;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6210;&#x719F;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x95A2;&#x5FC3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x5019;&#x88DC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x751F;&#x7523;&#x53CA;&#x3073;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x9593;&#x306B;SARS N-&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;SDS-PAGE&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;2&#x3064;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#xFF08;MALDI&#x3001;SELDI&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;LC / MS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x516C;&#x77E5;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; - &#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; - &#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x9818;&#x57DF;&#x3001;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;N-&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x5207;&#x65AD;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x88FD;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;4&#x3064;&#x306E;SR&#x306E;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;s&#xFF09;&#x3092;&#x6C5A;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x9670;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5207;&#x65AD;&#x306F;&#x3001;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x81EA;&#x5DF1;&#x6D88;&#x5316;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D5;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;N-&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x304C;&#x8AAC;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SARS&#x30B3;&#x30ED;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF1A;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;

&#xC911;&#xC99D; &#xAE09;&#xC131; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (SARS) &#xC218;&#xBC31;&#xBA85;&#xC744; &#xC0B4;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xAD6C;&#xC5ED; &#xC9C8; &#xB0AC;&#xB2E4;&#xB294; 2002 &#xB144; 11 &#xC6D4; 7 &#xC6D4; 2003 &#xB144; &#xC0AC;&#xC774; &#xC804;&#xC138;&#xACC4; &#xC0AC;&#xB78C;&#xB4E4;&#xC758; &#xC218;&#xCC9C; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC774;&#xB2E4;. &#xCF54;&#xB85C;&#xB098;&#xAC00;&#xC774; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC758; nucleocapsid (N) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC870;&#xB9BD;&#xACFC; &#xC131;&#xC219;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB300;&#xC0C1; &#xB610;&#xB294; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC790;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xBCC4; &#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC758; &#xC774;&#xB2E4;. SARS N &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC815;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; refolding SDS &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xCD94;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC34;&#xB4DC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559; (MALDI, SELDI, &#xBC0F; LC/MS) &#xBC34;&#xB4DC;&#xB294; N-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC81C;&#xD488;&#xC744; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; 4 &#xAC1C;&#xC758; SR &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC5ED;-&#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD558;&#xC9C0; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC554;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, protease(s)&#xB97C; &#xC624;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6C4;&#xC18D; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xAC00; &#xC74C;&#xC218;: &#xBD84;&#xC5F4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB0B4;&#xC7AC; &#xB41C; &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xBC0F; autolysis &#xAC83; &#xC778; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4;. N-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0AC;&#xC2A4; &#xCF54;&#xB85C;&#xB098; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;: nucleocapsid &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; lability.

El s&#xED;ndrome respiratorio agudo severo (SRAS) es una enfermedad contagiosa que mat&#xF3; a cientos y miles enfermaron de personas en todo el mundo entre noviembre de 2002 y julio de 2003. La nucleoc&#xE1;pside (N) de prote&#xED;nas del coronavirus causante de esta enfermedad juega un papel cr&#xED;tico en el ensamblaje viral y la maduraci&#xF3;n y es de particular inter&#xE9;s debido a su potencial como un objetivo antiviral o vacuna. Replegado de SRAS N-prote&#xED;na durante la producci&#xF3;n y purificaci&#xF3;n mostr&#xF3; la presencia de dos bandas de prote&#xED;nas adicionales por SDS-PAGE. Espectroscopia de masas (MALDI, SELDI, y LC / MS) confirm&#xF3; que las bandas son productos proteol&#xED;ticos de la N-prote&#xED;na y los sitios de corte son cuatro motivos SR en la serina-arginina-rica regi&#xF3;n no-sitios sugestivos de toda la proteasa conocidos. Adem&#xE1;s, los resultados de las pruebas posteriores de contaminar la proteasa (s) fueron negativos: escisi&#xF3;n parece ser debido a la inestabilidad inherente y / o autolisis. La importancia de la prote&#xF3;lisis de N-prote&#xED;na para el ciclo de vida viral y por lo tanto a las direcciones posibles de tratamiento se discuten.

El coronavirus del SRAS: labilidad inusual de la prote&#xED;na de la nucleoc&#xE1;pside

&#x878D;&#x5408;&#x80BD;&#x7684;&#x6D41;&#x611F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8840;&#x51DD;&#x7D20; (HA) &#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8FDB;&#x5165;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x5F97;&#x5230;&#x666E;&#x904D;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#x6240;&#x6709;&#x7532;&#x578B;&#x548C;&#x4E59;&#x578B;&#x6D41;&#x611F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#x7684; HAs&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x662F;&#x5177;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x65B0;&#x75AB;&#x82D7;&#x7814;&#x5236;&#x548C;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x6D41;&#x611F;&#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x6548;&#x4EF7;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x878D;&#x5408;&#x591A;&#x80BD;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x662F;&#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5B83;&#x65E0;&#x6CD5;&#x7528;&#x4E8E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6297;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x91CC;&#x9762;&#x9690;&#x85CF;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x63D2;&#x69FD;&#x6C61;&#x70B9;&#x8BAE;&#x5B9A;&#x4E66; &#x300B; &#x4EAE;&#x70B9;&#x9884;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;&#x6837;&#x54C1;&#x4E0E;&#x9002;&#x5F53;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x53D8;&#x6027;&#x5242;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6700;&#x5927;&#x9650;&#x5EA6;&#x5730;&#x516C;&#x5F00;&#x878D;&#x5408;&#x80BD;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x770B;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F;&#x4F7F;&#x7528;&#x901A;&#x7528;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x9776;&#x5411;&#x878D;&#x5408;&#x80BD;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x53EF;&#x9760;&#x3001; &#x5EC9;&#x4EF7;&#x548C;&#x6613;&#x4E8E;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;&#x6574;&#x4E2A;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x53EA;&#x6709; 5 h &#x5E76;&#x53EF;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x6D41;&#x611F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5DF2;&#x4F7F;&#x7528;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x9776;&#x5411;&#x878D;&#x5408;&#x80BD;&#x3002;

&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x666E;&#x904D;&#x6297;&#x4F53;&#x9776;&#x5411;&#x878D;&#x5408;&#x80BD;&#x7684;&#x6D41;&#x611F; A &#x75C5;&#x6BD2; hemagglutinins &#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x63D2;&#x69FD;&#x6C61;&#x70B9;&#x3002;

The fusion peptide of influenza virus hemagglutinin (HA) has a critical role in mediating the entry of the virus into the cells and is also the only universally conserved sequence in the HAs of all strains of influenza A and influenza B viruses. Therefore, it could be an attractive target for new vaccine development and a potency marker for existing influenza vaccines. The fusion peptide epitope is hidden inside the HA proteins, making it inaccessible for quantitative antibody binding. Our simple slot blot protocol highlights pre-treatment of HA samples with moderate concentrations of denaturant to maximally expose the fusion peptide on the protein surface, followed by detection using universal antibodies targeting the fusion peptide. The method is highly reliable, inexpensive and easy to follow. The entire procedure takes only 5 h and can be applied to the quantitative determination of virtually all influenza viral HAs using a single antibody targeting the fusion peptide.

A simple slot blot for the detection of virtually all subtypes of the influenza A viral hemagglutinins using universal antibodies targeting the fusion peptide.

Le peptide de fusion de virus de la grippe h&#xE9;magglutinine (HA) a un r&#xF4;le crucial dans la m&#xE9;diation de l&#x26;#39;entr&#xE9;e du virus dans les cellules et est &#xE9;galement la seule s&#xE9;quence universellement conserv&#xE9;e dans les HA de toutes les souches de virus grippaux A et B de la grippe. Par cons&#xE9;quent, il pourrait &#xEA;tre une cible int&#xE9;ressante pour le d&#xE9;veloppement de nouveaux vaccins et un marqueur d&#x26;#39;activit&#xE9; pour les vaccins antigrippaux actuels. L&#x26;#39;&#xE9;pitope peptide de fusion est cach&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur des prot&#xE9;ines HA, le rendant inaccessible pour les anticorps quantitative contraignant. Le protocole simple transfert fente met pr&#xE9;-traitement d&#x26;#39;&#xE9;chantillons avec des concentrations HA mod&#xE9;r&#xE9;es de d&#xE9;naturant &#xE0; exposer au maximum le peptide de fusion sur la surface de la prot&#xE9;ine, suivie de la d&#xE9;tection en utilisant des anticorps de ciblage universels du peptide de fusion. La m&#xE9;thode est tr&#xE8;s fiable, peu co&#xFB;teux et facile &#xE0; suivre. La proc&#xE9;dure ne prend que 5 h et peut &#xEA;tre appliqu&#xE9; &#xE0; la d&#xE9;termination quantitative de la quasi-totalit&#xE9; de la grippe virale a l&#x26;#39;aide d&#x26;#39;un anticorps simple ciblage du peptide de fusion.

Un Slot Blot simple pour la d&#xE9;tection de pratiquement tous les sous-types de la grippe A h&#xE9;magglutinines virales aide d&#x26;#39;anticorps universelles ciblant le peptide de fusion

Das Fusion-Peptid des Grippe-Virus H&auml;magglutinin (HA) hat eine entscheidende Rolle bei der Vermittlung von den Eintritt des Virus in die Zellen und ist auch der einzige universell konservierten Sequenz in den HAs alle St&auml;mme von Influenza-A- und Influenza-B-Viren. Daher k&ouml;nnte es ein attraktives Ziel f&uuml;r neue Entwicklung von Impfstoffen und Potenz Marker f&uuml;r vorhandene Influenza-Impfstoffe. Die Fusion-Peptid-Epitop verbirgt sich im Inneren der HA-Proteine, wodurch es unzug&auml;nglich f&uuml;r quantitative Antik&ouml;rper-Bindung. Unsere einfache Steckplatz Fleck Protokoll H&ouml;hepunkte Vorbehandlung der HA Proben mit m&auml;&szlig;iger Konzentration der Verg&auml;llungsmittel, das Fusion-Peptid auf der Oberfl&auml;che Protein maximal verf&uuml;gbar zu machen gefolgt von Erkennung mit universal Antik&ouml;rper, die gezielt des Fusion-Peptids. Die Methode ist sehr zuverl&auml;ssig, kosteng&uuml;nstig und leicht zu folgen. Die gesamte Prozedur dauert nur 5 h und kann angewendet werden, um die quantitative Bestimmung der viralen praktisch alle Grippe hat, mit einen einzigen Antik&ouml;rper, der auf das Fusion-Peptid.

Eine einfache Steckplatz Fleck zum Nachweis von nahezu alle Untertypen von der Grippe A viral Hemagglutinins mit universal Antik&ouml;rper, die gezielt des Fusion-Peptids.

Il peptide di fusione di emoagglutinina di virus influenzale (HA) &egrave; anche la sequenza universalmente conservata sola in ha tutti i ceppi di influenza A e influenza B virus e ha un ruolo critico nel mediare l&#39;entrata del virus nelle cellule. Pertanto, potrebbe essere una destinazione attraente per lo sviluppo di nuovi vaccini e un indicatore di potenza attuali vaccini antinfluenzali. La fusione del peptide epitopo &egrave; nascosta all&#39;interno delle proteine HA, rendendolo inaccessibile per l&#39;associazione quantitativa dell&#39;anticorpo. Il nostro semplice slot blot protocollo evidenzia pretrattamento dei campioni HA con moderate concentrazione di denaturante per esporre al massimo il peptide di fusione sulla superficie della proteina, seguita da rilevamento utilizzando anticorpi universali targeting del peptide di fusione. Il metodo &egrave; altamente affidabile, poco costoso e facile da seguire. L&#39;intera procedura richiede solo 5 h e pu&ograve; essere applicata per il quantitativo determinazione di praticamente tutte le influenza virale ha utilizzando un singolo anticorpo targeting del peptide di fusione.

Una macchia di semplice slot per il rilevamento di praticamente tutti i sottotipi delle emoagglutinine del virale dell&#39;influenza A usando gli anticorpi universali targeting del peptide di fusione.

&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30D8;&#x30DE;&#x30B0;&#x30EB;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#xFF08;HA&#xFF09;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;B&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x682A;&#x306E;HA&#x306B;&#x3082;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3084;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x878D;&#x5408;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;HA&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x306B;&#x96A0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x30B9;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x5927;&#x9650;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3001;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x3001;&#x516C;&#x958B;&#x3059;&#x308B;&#x5909;&#x6027;&#x5264;&#x306E;&#x9069;&#x5EA6;&#x306A;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;HA&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x5B89;&#x4FA1;&#x306A;&#x3068;&#x30D5;&#x30A9;&#x30ED;&#x30FC;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306F;&#x7C21;&#x5358;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306F;&#x3001;5&#x6642;&#x9593;&#x304C;&#x304B;&#x304B;&#x308A;&#x3001;&#x4E8B;&#x5B9F;&#x4E0A;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x304C;&#x878D;&#x5408;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x306E;&#x4E8B;&#x5B9F;&#x4E0A;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E6;&#x30CB;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B5;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x682A;&#x306E;HA&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306A;&#x30B9;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;

&#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC870;&#xB958; (HA)&#xC758; &#xC735;&#xD569; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC785;&#xC7A5;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC774; &#xACE0; &#xB3C5;&#xAC10; &#xBC0F; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; B &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBCC0;&#xC885; Has&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC774;&#xAE30;&#xB3C4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC31;&#xC2E0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xAE30;&#xC874; &#xB3C5;&#xAC10; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xB2A5; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD4E8;&#xC804; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; epitope &#xC591;&#xC801; &#xD56D; &#xCCB4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC811;&#xADFC; &#xD558;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; HA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC548;&#xC5D0; &#xC228;&#xACA8;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xC2AC;&#xB86F; &#xC624; &#xC810; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xD558;&#xC774;&#xB77C;&#xC774;&#xD2B8; &#xC804;&#xCC98;&#xB9AC; &#xD558; &#xC0D8;&#xD50C; maximally &#xB178;&#xCD9C; &#xC735;&#xD569; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; denaturant&#xC758; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC640; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xD4E8;&#xC804; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xBC94;&#xC6A9; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xC131; &#xC788;&#xB294; &#xC800;&#xB834; &#xD558; &#xACE0; &#xC27D;&#xAC8C; &#xB530;&#xB77C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xCCB4; &#xC808;&#xCC28; 5 h&#xB9CC; &#xAC78;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC591;&#xC801;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xACB0;&#xC815;&#xC740; &#xD4E8;&#xC804; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;.

&#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; A &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; hemagglutinins &#xC735;&#xD569; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xBC94;&#xC6A9; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD558;&#xC704;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xC2AC;&#xB86F; &#xC624; &#xC810;.

El p&#xE9;ptido de fusi&#xF3;n del virus de la influenza hemaglutinina (HA) tiene un papel fundamental en la mediaci&#xF3;n de la entrada del virus en las c&#xE9;lulas y es tambi&#xE9;n la &#xFA;nica secuencia universalmente conservadas en el HA de todas las cepas de los virus de influenza A y B de influenza. Por lo tanto, podr&#xED;a ser un blanco atractivo para el desarrollo de nuevas vacunas y un marcador de la potencia de las vacunas antigripales existentes. El ep&#xED;topo p&#xE9;ptido de fusi&#xF3;n se oculta dentro de las prote&#xED;nas HA, por lo que es inaccesible para los anticuerpos cuantitativa vinculante. Nuestro protocolo simple slot blot destaca el tratamiento previo de las muestras de HA con concentraciones moderadas de desnaturalizante para exponer al m&#xE1;ximo el p&#xE9;ptido de fusi&#xF3;n sobre la superficie de la prote&#xED;na, seguido por la detecci&#xF3;n utilizando anticuerpos dirigidos universales el p&#xE9;ptido de fusi&#xF3;n. El m&#xE9;todo es muy fiable, barato y f&#xE1;cil de seguir. El procedimiento completo dura s&#xF3;lo 5 h, y se puede aplicar a la determinaci&#xF3;n cuantitativa de pr&#xE1;cticamente toda la influenza viral ha usando un &#xFA;nico anticuerpo dirigido el p&#xE9;ptido de fusi&#xF3;n.

Una mancha de ranura simple para la detecci&#xF3;n de pr&#xE1;cticamente todos los subtipos de la influenza A hemaglutininas virales usando anticuerpos dirigidos a la Universal p&#xE9;ptido de fusi&#xF3;n

&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E0E;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#x4ECE;&#x6D41;&#x611F;&#x90FD;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x5728;&#x6D41;&#x611F;&#x75AB;&#x82D7;&#x4E2D;&#x7684;&#x91D1;&#x989D;&#x8FD8;&#x6CA1;&#x6709;&#x6807;&#x51C6;&#x5316;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6700;&#x597D;&#x80FD;&#x591F;&#x91CF;&#x5316;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x7B80;&#x5355;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x6D41;&#x611F; A &#x548C; B neuraminidases&#xFF0C;&#x4E00;&#x540D;&#x4EE3;&#x8868;&#x8FD1; 100%&#x4FDD;&#x62A4;&#x9176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x73B0;&#x573A;&#x9644;&#x8FD1;&#x65B0;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x666E;&#x904D;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x548C;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x663E;&#x8457;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x9488;&#x5BF9;&#x65E0;&#x4EFB;&#x4F55;&#x53D8;&#x5E94;&#x539F;&#x56CA;&#x6DB2;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x9488;&#x5BF9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4FDD;&#x5B88;&#x5E8F;&#x5217;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x6240;&#x6709; 9 &#x4E2A;&#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x6D41;&#x611F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x96C7;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6297;&#x4F53;&#x75AB;&#x82D7;&#x4ECE;&#x4F7F;&#x7528;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x79CD;&#x5B50;&#x7684;&#x516B;&#x4E2A;&#x5382;&#x5BB6;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6C34;&#x5E73;&#x9664;&#x4E86;&#x5927;&#x91CF;&#x4ECE;&#x540C;&#x4E00;&#x751F;&#x4EA7;&#x8005;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DE8;&#x5927;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x5728;&#x75AB;&#x82D7;&#x5236;&#x5242;&#x6216;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x5F88;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x591A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x8D28;&#x91CF;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x4EF7;&#x503C;&#x3002;

&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x548C;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x4E9A;&#x578B;&#x6D41;&#x611F; A &#x548C; B &#x75C5;&#x6BD2;&#x6027; neuraminidases &#x4F7F;&#x7528;&#x6297;&#x4F53;&#x9776;&#x5411;&#x7684;&#x666E;&#x904D;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Neuraminidase-induced immune responses are correlated with protection of humans and animals from influenza. However, the amounts of neuraminidase in influenza vaccines are yet to be standardized. Thus, a simple method capable of quantifying neuraminidase would be desirable. Here we identified two universally conserved sequences in all influenza A and B neuraminidases, one representing a novel finding of nearly 100% conservation near the enzymatically active site. Antibodies generated against the two highly conserved sequences bound to all nine subtypes of influenza A neuraminidase and demonstrated remarkable specificity against the viral neuraminidase sequences without any cross-reactivity with allantoic and cellular proteins. Importantly, employing these antibodies for the analyses of vaccines from eight manufacturers using the same vaccine seeds revealed marked variations of neuraminidase levels in addition to considerable differences between lots from the same producer. The reasons for the absence or low level of neuraminidase in vaccine preparations are complex and could be multi-factorial. The antibody-based assays reported here could be of practical value for better vaccine quality control.

Qualitative and quantitative analyses of virtually all subtypes of influenza A and B viral neuraminidases using antibodies targeting the universally conserved sequences.

La neuraminidase r&#xE9;ponses immunitaires induites sont en corr&#xE9;lation avec la protection des humains et les animaux de la grippe. Toutefois, les montants de la neuraminidase dans les vaccins antigrippaux ne sont pas encore normalis&#xE9;es. Ainsi, une m&#xE9;thode simple permettant de quantifier la neuraminidase serait souhaitable. Ici, nous avons identifi&#xE9; deux s&#xE9;quences universellement conserv&#xE9;es dans tous influenza A et B neuraminidases, l&#x26;#39;un repr&#xE9;sentant une nouvelle d&#xE9;couverte de pr&#xE8;s de 100% de conservation &#xE0; proximit&#xE9; du site enzymatiquement active. Anticorps g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; contre les deux s&#xE9;quences hautement conserv&#xE9;es li&#xE9;s &#xE0; des sous-types de chacun des neuf grippe A sp&#xE9;cificit&#xE9; neuraminidase et d&#xE9;montr&#xE9; remarquable contre les s&#xE9;quences virales neuraminidase sans r&#xE9;activit&#xE9; crois&#xE9;e avec des prot&#xE9;ines allanto&#xEF;de et cellulaire. Surtout, l&#x26;#39;emploi de ces anticorps pour les analyses de vaccins &#xE0; partir de huit fabricants en utilisant les graines de m&#xEA;me vaccin a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; de fortes variations des niveaux de la neuraminidase, en plus de diff&#xE9;rences consid&#xE9;rables entre les lots provenant du m&#xEA;me producteur. Les raisons de l&#x26;#39;absence ou le faible niveau de la neuraminidase dans les pr&#xE9;parations vaccinales sont complexes et pourraient &#xEA;tre multi-factorielle. Les tests &#xE0; base d&#x26;#39;anticorps pr&#xE9;sent&#xE9;s ici pourraient avoir une valeur pratique pour le contr&#xF4;le de vaccin contre la meilleure qualit&#xE9;.

Des analyses qualitatives et quantitatives de pratiquement toutes sous-types de l&#x26;#39;influenza A et B neuraminidases virales en utilisant des anticorps dirig&#xE9;s contre les s&#xE9;quences universellement conserv&#xE9;es

Neuraminidase-induzierte Immunantworten korrelieren mit dem Schutz von Menschen und Tieren an Grippe. Allerdings sind die Betr&auml;ge der Neuraminidase in Influenza-Impfstoffe noch standardisiert werden. Eine einfache Methode zur Quantifizierung der Neuraminidase f&auml;hig w&auml;re daher w&uuml;nschenswert. Hier haben wir zwei universell konservierte Sequenzen in alle Grippe A und B Neuraminidasen, neuartige Feststellung einer fast 100 % Erhaltung in der N&auml;he des enzymatisch aktiv darstellt. Antik&ouml;rper gegen die beiden hoch konservierten Sequenzen erzeugt zwangsl&auml;ufig alle neun Subtypen der Influenza eine Neuraminidase und demonstrierte bemerkenswerte Spezifit&auml;t gegen die viralen Neuraminidase-Sequenzen ohne Kreuzreaktivit&auml;t mit Allantois und zellul&auml;re Proteine. Wichtig ist, offenbart die besch&auml;ftigt diese Antik&ouml;rper f&uuml;r die Analysen von Impfstoffen aus acht Hersteller verwenden die gleichen Impfstoff-Samen markierte Variationen der Neuraminidase Ebenen neben erheblichen Unterschiede zwischen viel vom gleichen Hersteller. Die Gr&uuml;nde f&uuml;r die Abwesenheit oder niedrige Niveau der Neuraminidase Impfstoff Vorbereitungen sind komplex und multifaktorielle k&ouml;nnte. Die Antik&ouml;rper-basierte Assays berichtet hier k&ouml;nnte von praktischem Wert f&uuml;r besseren Impfstoff-Qualit&auml;tskontrolle.

Qualitative und Quantitative Analysen der praktisch alle Subtypen der Grippe A und B virale Neuraminidasen unter Verwendung der Antik&ouml;rper, die gezielt der universell konservierten Sequenzen.

Neuraminidasi-indotto risposte immunitarie sono correlate con la protezione degli esseri umani e gli animali dall&#39;influenza. Tuttavia, gli importi di neuraminidasi nei vaccini influenzali sono ancora di essere standardizzati. Pertanto, sarebbe auspicabile un semplice metodo in grado di quantificare la neuraminidasi. Qui abbiamo identificato due sequenze conservate universalmente in tutti l&#39;influenza A e B neuraminidases, uno che rappresenta un romanzo ritrovamento di quasi il 100% conservazione nei pressi del sito enzimaticamente attivo. Anticorpi generati contro le due sequenze altamente conservate associato a tutti i nove sottotipi dell&#39;influenza A neuraminidasi e ha dimostrato notevole specificit&agrave; contro le sequenze virali neuraminidasi senza alcuna reattivit&agrave; crociata con le proteine cellulari e allantoico. Importante, che impiegano questi anticorpi per le analisi dei vaccini da otto produttori utilizzando i semi di vaccino stesso rivelato contrassegnati variazioni dei livelli di neuraminidasi oltre a notevoli differenze tra lotti da parte del produttore stesso. Le ragioni per l&#39;assenza o il basso livello di neuraminidasi nei preparativi del vaccino sono complesse e potrebbero essere multifattoriali. La base di anticorpi dosaggi qui riportati potrebbero essere di valore pratico per il controllo di qualit&agrave; migliore vaccino.

Qualitativa e analisi quantitative di praticamente tutti i sottotipi di neuraminidases virale dell&#39;influenza A e B usando gli anticorpi targeting per le sequenze conservate universalmente.

&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x304B;&#x3089;&#x4EBA;&#x9593;&#x3084;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x5316;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x5B9A;&#x91CF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;A&#x304A;&#x3088;&#x3073;B&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x3001;&#x307B;&#x307C;100&#xFF05;&#x306E;&#x4FDD;&#x5168;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x77E5;&#x898B;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3072;&#x3068;&#x3064;&#x306E;&#x30D1;&#x30C3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x5185;&#x306B;2&#x3064;&#x306E;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x5C3F;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;9&#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;2&#x3064;&#x306E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7A2E;&#x5B50;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;8&#x306E;&#x30E1;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x751F;&#x7523;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x9593;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x88FD;&#x5264;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x7406;&#x7531;&#x306F;&#x8907;&#x96D1;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x4F53;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x7BA1;&#x7406;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B9F;&#x7528;&#x7684;&#x306A;&#x4FA1;&#x5024;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30E6;&#x30CB;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B5;&#x30EB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;A&#x304A;&#x3088;&#x3073;B&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x5206;&#x6790;

&#xC751;&#xC9D1; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC740; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xACE0; &#xB3C5;&#xAC10;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xBCF4;&#xD638;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xC751;&#xC9D1;&#xC758; &#xAE08;&#xC561;&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; &#xD45C;&#xC900;&#xD654; &#xB418;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD558;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC751;&#xC9D1; &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xBC14;&#xB78C;&#xC9C1;&#xD55C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xB450; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; A&#xC640; B neuraminidases, enzymatically &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xADFC;&#xCC98;&#xC5D0; &#xAC70;&#xC758; 100% &#xBCF4;&#xC874;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xB192;&#xC740; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC751;&#xC9D1; &#xBC0F; allantoic&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xBD84; &#xC5C6;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC751;&#xC9D1; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC99D; &#xB41C; &#xD604;&#xC800;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; 9 &#xAC1C;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xB9CE;&#xC740; &#xAC19;&#xC740; &#xD504;&#xB85C;&#xB4C0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xC810; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xC751;&#xC9D1; &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC720;&#xC0AC; &#xACF5;&#xAC1C; &#xBC31;&#xC2E0; &#xAC19;&#xC740; &#xBC31;&#xC2E0; &#xC528;&#xC557;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC81C;&#xC870; &#xD558;&#xB294; 8 &#xAC1C; &#xC5C5;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xCC44;&#xC6A9;. &#xBD80;&#xC7AC; &#xB610;&#xB294; &#xBC31;&#xC2E0; &#xC900;&#xBE44;&#xC5D0; &#xC751;&#xC9D1;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xC720;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0; multi-factorial &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD56D; &#xCCB4; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD488;&#xC9C8; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xAC00;&#xCE58; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC815;&#xC131; &#xBC0F; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; A&#xC640; B &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; neuraminidases &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD558;&#xC704;.

Neuraminidasa inducidos por la respuesta inmune se correlacionan con la protecci&#xF3;n de los humanos y los animales de la influenza. Sin embargo, las cantidades de la neuraminidasa en vacunas contra la gripe est&#xE1;n por normalizarse. As&#xED;, un m&#xE9;todo simple capaz de cuantificar la neuraminidasa ser&#xED;a deseable. Aqu&#xED; hemos identificado dos secuencias universalmente conservadas en todos los de la gripe A y B neuraminidasas, uno en representaci&#xF3;n de un nuevo hallazgo de la conservaci&#xF3;n de casi el 100% cerca del sitio enzim&#xE1;ticamente activa. Los anticuerpos generados contra las dos secuencias altamente conservadas unidos a los nueve subtipos de influenza A especificidad notable neuraminidasa y demostrado contra las secuencias virales neuraminidasa sin ninguna reactividad cruzada con las prote&#xED;nas alantoideos y celulares. Es importante destacar que el empleo de estos anticuerpos para el an&#xE1;lisis de las vacunas a partir de ocho fabricantes de vacunas con las semillas mismas revelaron marcadas variaciones de los niveles de la neuraminidasa, adem&#xE1;s de diferencias considerables entre los lotes del mismo productor. Las razones de la ausencia o bajo nivel de la neuraminidasa en preparaciones de vacunas son complejas y podr&#xED;a ser multi-factorial. Los ensayos basados &#x200B;&#x200B;en anticuerpos presentados aqu&#xED; pueden ser de valor pr&#xE1;ctico para un mejor control de calidad de las vacunas.

Los an&#xE1;lisis cualitativos y cuantitativos de pr&#xE1;cticamente todos los subtipos de influenza A y B neuraminidasa viral utilizando anticuerpos dirigidos a las secuencias universalmente conservadas

Bozena Jaentschke

Centre for Vaccine Evaluation,
Biologics and Genetic Therapies Directorate,
HPFB,
Centre for Vaccine Evaluation, Biologics and Genetic Therapies Directorate, HPFB

Health Canada

Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

Bozena Jaentschke

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Centre for Vaccine Evaluation,Biologics and Genetic Therapies Directorate,HPFB,Centre for Vaccine Evaluation, Biologics and Genetic Therapies Directorate, HPFB

Health Canada

Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

Centre for Vaccine Evaluation,
Biologics and Genetic Therapies Directorate,
HPFB,
Centre for Vaccine Evaluation, Biologics and Genetic Therapies Directorate, HPFB