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In questo articolo

  • Riepilogo
  • Abstract
  • Protocollo
  • Discussione
  • Riconoscimenti
  • Materiali
  • Riferimenti
  • Ristampe e Autorizzazioni

Riepilogo

Descriviamo la dissezione lordo dello stomaco del aragosta americana ( Homarus americanus).

Abstract

Lo stomaco della aragosta americana (

Protocollo

  1. Prima della dissezione l'aragosta deve essere sepolto nel ghiaccio per 30 minuti per anestetizzare l'animale.
  2. Il sesso del aragosta può essere determinato osservando la forma della swimmeret prima. I maschi hanno swimmerets boney e femmine hanno swimmerets pennuto.
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  3. Isolare il cefalotorace.
    1. Utilizzare un movimento rotatorio per strappare gli artigli anteriori.
    2. Rimuovere l'addome (parte posteriore) utilizzando le forbici grandi per fare un taglio profondo tra il cefalotorace e l'addome. Questo riduce i tratti in fibra gigante controllo della risposta coda flip. Quindi procedere a tagliare l'addome.
    3. Rimuovere il antenne da taglio via con le forbici, e sviti le gambe e il maxillipeds terzo.
  4. Togliere il carapace di tutto lo stomaco, (cioè la regione della testa tra il solco cervicale e la tribuna).
    1. A partire dal bordo laterale della Rongeurs utilizzare questa sezione e spatola per rimuovere con attenzione la corazza dura, lasciando l'ipoderma rossastro sottostante intatto. La spatola è utile per separare gli strati in modo che il carapace può essere rotto con il Rongeurs.
    2. Andando verso gli occhi si trovano bilaterali piastre leggermente calcificate ovale piccolo (IIIa ossicini). Il più vicino possibile a questi ossicini, con attenzione staccare il muscolo dal ossicini utilizzando le forbicine.
    3. Utilizzando una spatola e Rongeurs rimuovere dal carapace tra gli occhi e la porzione caudale (circa 1 centimetro) del rostro.
  5. Staccare il volto (regione, tra cui gli occhi, e tribuna).
    1. Utilizzando piccole forbici un taglio orizzontale attraverso il tessuto più rostrale esposto in tribuna per staccarlo dal esoscheletro. Quindi utilizzare bordo di forbici e / o spatola a rotolare con attenzione tessuto caudalmente, appena passato il livello degli ossicini IIIa.
    2. A partire dorsalmente, usare forbicine per staccare il tessuto residuo dal esoscheletro viso. Tagliati il ​​più vicino al carapace duro possibile, fermandosi quando si arriva vicino al centro e l'attaccamento della bocca.
    3. Dal punto di vista ventrale le mandibole devono essere facilmente visibili. Staccare maxillipeds rimanenti.
    4. Individuare labbro morbido sotto le mandibole.
    5. Fare dei tagli laterali per staccare il volto mantenendo il labbro attaccato allo stomaco. (C'è un po 'curvo parte bluastro della bocca esterna che può essere usato come guida.)
  6. Staccare e togliere lo stomaco.
    1. Tenere l'aragosta nel palmo della tua mano, lato ventrale e in modo che l'estremità anteriore è verso il gomito.
    2. Collegare un hemostat al labbro e lasciare che la gravità tirare la hemostat e labbro verso il basso e lontano dalla parete ventrale del corpo.
    3. Utilizzando piccole forbici tagliare mandibole.
    4. Individuare il lato dorsale della parete del corpo ventrale, che forma un duro "scaffale" ventrale al labbro e nello stomaco. Tagliato appena sotto il "scaffale", molto vicino alla parete del corpo, su tutta la linea mediana medio-laterale. Tutta la parte ventrale dello stomaco dovrebbe essere staccato dalla parete del corpo.
    5. Girare l'aragosta in modo che il lato dorsale è alto. Tagliare lungo il bordo rostrale del solco cervicale, dove era stato rimosso il carapace, e tira dolcemente la pancia fuori.
    6. Staccare ogni intestino in più che rimangono attaccati allo stomaco.
  7. Aperto lo stomaco e prepararlo per il pinning.
    1. Tenere lo stomaco nel palmo della vostra mano con l'ipoderma rivolto verso il basso. Il hemostat deve essere ancora attaccato al labbro e dovrebbe essere compreso tra le dita.
    2. Usare le forbici piccola per poter essere superficiale antero-posteriore tagliato dalla apertura della bocca (sotto il labbro) verso il basso attraverso il lato ventrale del piloro.
    3. Per aprire ulteriormente lo stomaco, fare due tagli laterali lungo la ossicini che attraversa il centro dello stomaco.
    4. Salina fredda può essere versato nello stomaco per migliorare la visibilità ed espellere il contenuto dello stomaco.
    5. Al fine di consentire la preparazione di laici piatto nel piatto dissezione utilizzare le forbicine per tagliare le tre denti gastrico.
  8. Pin lo stomaco giù nel piatto dissezione.
    1. Posto lo stomaco, ipoderma rivolta verso l'alto, in una soluzione salina piatto dissezione.
    2. Luogo perni insetti al labbro e ai quattro angoli creati quando lo stomaco è stato aperto. Per gli angoli anteriori perni luogo alto e vicino al bordo, per non disturbare gangli commissurali o inferiore nervi esofageo. Per i perni posteriori posto angoli leggermente alto per non disturbare il muscolo pilorico dilatatore.

Discussione

Nel nostro laboratorio di dissezione dello stomaco aragosta viene fatto per accedere al sistema stomatogastric nervoso, una rete che controlla le contrazioni ritmiche dello stomaco. L'anatomia dello stomaco aragosta è stata ben descritta in precedenza 5-7, e si consiglia di familiarizzare con la sua anatomia. In questo modo si riduce il rischio di danneggiare i nervi delicati e muscolare.

Al termine della dissezione stomaco, varie parti del STNS possono essere ulteriormente s...

Riconoscimenti

Vogliamo ringraziare il nostro consulente, il dottor Eve Marder. Questa ricerca è stata finanziata dal National Institute of concede Salute NS17813 a Eve Marder e NS059255 di AE T.

Materiali

NameCompanyCatalog NumberComments
Homarus americanusCommercial LobsterCan be purchased from any lobster supplier, We specifically request chicken” lobsters.
Black Sylgard 170Dow Corning170
Preparation DishFisher Scientific08-807Fill 2" with Black Sylgard 170.
Fine ScissorsFine Science Tools14090-09
Insect Pins size 6Fine Science Tools26000-65
Mayo ScissorsThis is a common product offered by many suppliers of dissecting tools.
Micro-SpatulaWARD’s Natural Science15 V 4313This is a very common product offered by many suppliers of lab tools.
RongeursFine Science Tools16000-14
Plastic hemostatThis is a common product offered by many suppliers of dissecting or jewelry making tools.

Riferimenti

  1. Marder, E., Bucher, D. Central pattern generators and the control of rhythmic movements. Curr. Biol. 11, R986-R996 (2001).
  2. Nusbaum, M. P., Beenhakker, M. P. A small-systems approach to motor pattern generation. Nature. 417, 343-350 (2002).
  3. Clemens, S., Massabuau, J. C., Legeay, A., Meyrand, P., Simmers, J. In vivo modulation of interacting central pattern generators in lobster stomatogastric ganglion: influence of feeding and partial pressure of oxygen. J. Neurosci. 18, 2788-2799 (1998).
  4. Tobin, A. E., Bierman, H. S. Homarus americanus stomatogastric nervous system dissection. J Vis Exp. 27, (2009).
  5. Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268, 161-220 (1974).
  6. Herrick, F. H. Natural history of the American Lobster. U.S. Bur. Fish. , 219-252 (1909).
  7. Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).

Ristampe e Autorizzazioni

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