Il mantenimento di Wolbachia in Cell-free medio

Riepilogo

Questo video descrive un metodo per purificare Wolbachia pipientis da una linea di cellule Anopheles gambiae e poi la coltura endosymbiont nella cella senza medium. Un test per la vitalità del batterio è dimostrata.

Abstract

In questo protocollo video, le procedure sono dimostrati a (1) purificare simbionti Wolbachia fuori delle cellule in coltura zanzare, (2) usare un test di fluorescenza per verificare la fattibilità del Wolbachia purificata e (3) mantenere la Wolbachia ora extracellulare in cell-free medio . Purificata Wolbachia rimanere vivo nella fase extracellulare, ma non replicare fino a quando re-inoculati in cellule eucariotiche. Wolbachia extracellulari purificati in questo modo rimarrà valida per almeno una settimana a temperatura ambiente, e forse più a lungo. Purificato Wolbachia sono adatti per la microiniezione, estrazione del DNA e altre applicazioni.